curso de post-grado ● especializaciÓn en ciencias ● el mÉtodo cientÍfico eje de los cursos...

CURSO DE POST-GRADO

● ESPECIALIZACIÓN EN CIENCIAS● EL MÉTODO CIENTÍFICO EJE DE LOS

CURSOS● MÉTODO DE ESTUDIO Y DE APRENDER● EL RAZONAMIENTO Y LA LÓGICA● MÉTODOS DE EVALUACIÓN● NIVELACIÓN DE LA INFORMACIÓN

LAS MACROMOLÉCULA

S BIOLÓGICASBiología:

Diferentes niveles de descripción

Diferentes fenómenossuceden, deben ser descriptos,se comprendena diferentes niveles dedescripción.

¿Cual es nuestro problema a estudiar?Durante el siglo XX se comenzó a introducir el nivel atómico en la biología

¿Cual es nuestro camino y nuestra ubicaciónen los niveles anteriores?

Descripción de las moléculas involucradas en funciones biológicas; uso de la química y de la física para entender interacciones entre moléculas

¿Cual es nuestro programa?

Moléculas biológicas

• Proteínas● Ácidos nucleicos● Carbohidratos● Lípidos● Coenzimas● Hormonas

Polímeros

Membranas

Funciones de las macromoléculas

Proteínas..............

Ácidos nucleicos..

Carbohidratos.....

Lípidos.................

EnzimasReconocimiento molecularProteínas de sostén

Información genética

Acumular energía

Separar compartimentos

Conformación

Fórmula Química

F. Química

Propiedadesfisicoquímicas

NECESIDAD DE INFORMACIÓN

Proteínas● Su estructura

química está formada por la unión en cadena lineal de un conjunto de bloques.

● Cada bloque es uno de los 20 aminoácidos que se listan.

Excepciones a la cadena lineal

● El enlace de disulfuro

Propiedades de ácido-base

Quiralidad de los aminoácidos

Medir si una substancia es quiral

Representaciones de la quiralidad

Enantiómeros y diastereoisómeros

Otras representaciones

Representación RS

Proyección de Newman

VOLVEMOS A LA DISCUCIÓN GENERAL

Estrategias de investigación en bioquímica

● Estudio de una función● Detección de la función elegida (ensayo).● Búsqueda de una molécula responsable de

la función (en general de una proteína????).● Selección de una fuente (organismo y/o

tejido idóneo).• Purificación de la proteína.

Purificación de una proteína

● Solubilización (medio celular y tubo de ensayo)

● Estabilidad Solubilidad (pH, concentración salina,

– temperatura) Desnaturalización

– Actividad proteolítica.● Detección Ensayo de actividad

– E.L.I.S.A.

Solubilidad de proteínas

Cristalización de proteínas

Métodos de purificación de proteínas• Tamaño 1) Diálisis y ultracentrifugación

– 2) Electroforesis en gel– 3) Cromatografía de filtración en gel

• Polaridad 1) Cromatografía de adsorción– 2) Cromatografía en papel– 3) Cromatografía de fase reversa– 4) Cromatografía de interacción hidrofóbica

• Carga 1) Cromatografía de intercambio iónico– 2) Electroforesis– 3) Enfoque isoeléctrico

• Especificidad Cromatografía de afinidad

Cromatografía de filtración en gel

Cromatografía de intercambio iónico

Generación de un gradiente lineal de concentración

Conc.salina

Vol. Eluente