actividades prÁcticas - bteduc.com · se admite como respuesta que eso depende de la presencia de...

17
María Antonia Malajovich / Guías de actividades Biotecnología: enseñanza y divulgación http://www.bteduc.bio.br Guía 67 ACTIVIDADES PRÁCTICAS TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS Dra. MARIA ANTONIA MALAJOVICH Coordinadora de Biotecnología Instituto de Tecnología ORT de Rio de Janeiro (Brasil) Directora Científica de la ANBIO (Associação Nacional de Biossegurança, Brasil) ORGANIZACIÓN DEL TEXTO PREOCUPACIÓN POR LA SEGURIDAD Y CULTURA DE SEGURIDAD RIESGO DE ACCIDENTES RESPONSABILIDAD DEL PROFESOR SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE BIOLOGÍA AMBIENTE DEL LABORATORIO SALIDAS DE CAMPO EXPERIMENTOS CON SERES VIVOS Plantas Animales Tejidos y fluidos SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA MICROORGANISMOS PARA ACTIVIDADES PRÁCTICAS ACTIVIDADES POSIBLES EN CADA NIVEL DE ENSEÑANZA Enseñanza Infantil y Fundamental 1 Enseñanza Fundamental 2 y Media Enseñanza Media (Técnica), Terciaria, Graduación Universitaria NORMAS DE TRABAJO STANDARD ASPECTOS ESPECÍFICOS LIGADOS A LA ENSEÑANZA DE BIOTECNOLOGÍA A TRABAJAR CON PATÓGENOS, TAMBIÉN SE ENSEÑA. PASAR DE NB 1 A UN NB 2 NO ES TAN SIMPLE CULTIVOS DE TEJIDOS CONSIDERACIONES FINALES BIBLIOGRAFÍA

Upload: phamtu

Post on 04-Oct-2018

214 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

ACTIVIDADES PRÁCTICAS

TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

Dra. MARIA ANTONIA MALAJOVICH

Coordinadora de Biotecnología Instituto de Tecnología ORT de Rio de Janeiro (Brasil)

Directora Científica de la ANBIO (Associação Nacional de Biossegurança, Brasil)

ORGANIZACIÓN DEL TEXTO

PREOCUPACIÓN POR LA SEGURIDAD Y CULTURA DE SEGURIDAD

RIESGO DE ACCIDENTES

RESPONSABILIDAD DEL PROFESOR

SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE BIOLOGÍA

AMBIENTE DEL LABORATORIO

SALIDAS DE CAMPO

EXPERIMENTOS CON SERES VIVOS

Plantas

Animales

Tejidos y fluidos

SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA

MICROORGANISMOS PARA ACTIVIDADES PRÁCTICAS

ACTIVIDADES POSIBLES EN CADA NIVEL DE ENSEÑANZA

Enseñanza Infantil y Fundamental 1

Enseñanza Fundamental 2 y Media

Enseñanza Media (Técnica), Terciaria, Graduación Universitaria

NORMAS DE TRABAJO STANDARD

ASPECTOS ESPECÍFICOS LIGADOS A LA ENSEÑANZA DE BIOTECNOLOGÍA

A TRABAJAR CON PATÓGENOS, TAMBIÉN SE ENSEÑA.

PASAR DE NB 1 A UN NB 2 NO ES TAN SIMPLE

CULTIVOS DE TEJIDOS

CONSIDERACIONES FINALES

BIBLIOGRAFÍA

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

2

PREOCUPACIÓN POR LA SEGURIDAD Y CULTURA DE SEGURIDAD

Insertas en la sociedad a través de la imposición de normas y reglamentaciones,

las medidas de seguridad buscan la protección de la salud del individuo, del grupo,

de la comunidad y del ambiente. Circunscriptas a problemas bien definidos, dichas

medidas solo estarán incluidas dentro de nuestro patrimonio cultural cuando estén

presentes en los modelos de enseñanza, como parte del sistema educativo.

RIESGO DE ACCIDENTES

¿Cuál es el número real de accidentes en el laboratorio de enseñanza? Se sabe

que está relacionado con el número de alumnos en el laboratorio y la disciplina del

aula (ruido, risas, conversaciones fuera del tema). El riesgo aumenta con la

improvisación y con la falta de reflexión sobre el desarrollo de la secuencia de

acciones descriptas en el protocolo.

Todos los manuales de actividades contienen largas listas de recomendaciones que

dependen no sólo del buen sentido, sino de la experiencia personal del docente.

Actitudes medianamente rígidas pueden parecer contradictorias con las tendencias

educativas modernas, donde el alumno es estimulado a construir el conocimiento

a partir de su propia experiencia. El abandono de las normas también puede ocurrir

por rebeldía de los alumnos o por dificultad del profesor en asumir la autoridad.

Lamentablemente, tanto el exceso como la falta de ponderación terminan sirviendo

como disculpa para limitar el acceso de los alumnos a las actividades prácticas.

RESPONSABILIDAD DEL PROFESOR

La construcción de una cultura de seguridad no puede estar limitada a dar una

clase al inicio del año. Antes del inicio de cualquier actividad dentro del laboratorio,

el Profesor debe instruir a los alumnos acerca de posibles riesgos. La supervisión

de la actividad debe incluir conductas tales como no dejar a los alumnos solos en

el laboratorio, no permitir la entrada a los alumnos una vez iniciado el trabajo, etc.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

3

En muchos centros educativos, la responsabilidad del Profesor abarca también la

elección de las actividades experimentales y su adaptación a condiciones locales,

que es donde surgen las preguntas fundamentales. ¿La actividad propuesta

coloca a los participantes en peligro? ¿La actividad propuesta perjudica a la

comunidad o al medio ambiente? La respuesta permite iniciar acciones para

prevenir y minimizar los riesgos, incluso sabiendo que el riesgo 0 no existe, ni en

la vida cotidiana ni en la situación de enseñanza.

SEGURIDAD EN LA ENSEÑANZA DE BIOLOGÍA

La comprensión del mundo natural se construye progresivamente, a lo largo de la

Enseñanza Fundamental y Media, mediante una aproximación concreta a los

fenómenos y objetos naturales. Las actividades prácticas son indispensables

porque además de motivar a los alumnos, el “aprender haciendo” estimula su

curiosidad sobre el mundo que los rodea.

Un establecimiento educativo que quiera estimular las actividades prácticas tendrá

que asegurar al Profesor una carga horaria que permita la organización y el

acompañamiento de los experimentos, un presupuesto adecuado, una asistencia

técnica compatible con el objetivo y grupos poco numerosos.

Actividades como observar, medir, experimentar y construir modelos son

realizadas en el aula de clases, en el laboratorio o en el exterior de la escuela, en

condiciones que deben ser analizadas cuidadosamente. El reconocimiento y la

evaluación de los riesgos permite al Profesor seleccionar las actividades y

desarrollarlas con seguridad.

AMBIENTE DEL LABORATORIO

El laboratorio de Biología debe estar instalado en un ambiente bien ventilado y

contar con piletas, agua, gas y electricidad. Debe contar con suficiente espacio

para el crecimiento de especímenes vivos para el estudio en las aulas.

Si en el mismo laboratorio se desarrollan actividades de química, se debe preveer

la instalación de una ducha y de un lava-ojos en el mismo laboratorio o bien cerca,

en un lugar al que se llegue rápidamente (20 segundos).

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

4

El alumno debe estar informado acerca de los riesgos inherentes a la manipulación

de algunas sustancias químicas (inflamabilidad, reactividad, toxicidad, corrosión)

así como de su responsabilidad en relación con los desechos.

Obsérvese que en Internet existen manuales excelentes sobre seguridad en el

laboratorio de Química, como el School Chemistry, Laboratory Safe Guide del

National Institute for Occupational Safety and Health.

Se discute si el laboratorio debería estar abierto a profesores y alumnos fuera del

horario de clase. Se admite como respuesta que eso depende de la presencia de

un responsable.

SALIDAS DE CAMPO

La persona responsable debe identificar y excluir las actividades que presenten

riesgos, organizar actividades compatibles con las aptitudes físicas de los alumnos

y disponer de teléfonos de auxilio. También debe estar familiarizado con las plantas

y animales peligrosos del área y tener alguna formación en primeros auxilios.

Ni el trayecto, ni el horario pactado deben alterarse a menos que surja algún

imprevisto que justifique los cambios, recomendándose conservar la calma frente

a cualquier situación inesperada.

Las salidas de campo deben respetar la fauna, la flora y los ambientes frágiles. No

es necesario tomar muestras ni retirar especímenes de la naturaleza. En el

ambiente educativo, las colectas son actualmente reemplazadas por fotografías,

con resultados excelentes. Algunas de las recomendaciones de Gerald Durrell al

naturalista amateur continúan vigentes:

1. En su búsqueda por una especie, no perturbe todos los sitios potenciales

habitables. Por ejemplo, no revise todas las hierbas toras en descomposición en

un bosque, ni investigue todos los huecos de los árboles.

2. No grite ni haga ruido innecesario. El ruido ahuyenta a los animales.

3. Deje las cosas como las encontró: piedras que haya tomado del lugar o hierbas

que haya recogido de un lago.

4. No deje basura en el campo, principalmente en los manantiales.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

5

5. Tenga cuidado con no provocar un incendio. Todo el año, vastas áreas de bosque

y selvas se pierden por la falta de cuidado por parte de las personas que realizan

picnics o campamentos.

6. No comente a cualquiera donde vio algo de interés. Recuerde que un secreto

del que muchos tienen conocimiento ya no es más un secreto. Coméntelo solo a

las personas que respetarán el sigilo de la información.

EXPERIMENTOS CON SERES VIVOS

Plantas

En los experimentos con seres vivos, las plantas son la mejor opción. De todos

modos, deben evitarse aquellas que son tóxicas y alertar a los alumnos en relación

con las semillas comerciales que son tratadas con pesticidas.

Los hongos, esporas y polen pueden provocar alergias, de modo que se debe evitar

o reducir su diseminación por el aire.

Animales

En la Enseñanza Fundamental la crianza de animales es una forma de estimular la

observación y la educación para el respecto de la vida en todas sus formas. Se

recomienda que la crianza se limite a animales invertebrados que no presenten

ningún peligro. Algunos invertebrados permiten estudios de comportamiento

relacionados con la alimentación (tenebrios) y la reproducción (drosófilas).

Criados en un espacio que reproduzca su ambiente natural, los animales deben

recibir los cuidados adecuados (agua y alimento, condiciones de temperatura,

iluminación) también en feriados, vacaciones escolares y recesos.

Los experimentos con animales van de la observación a la disecación. ¿Llevan al

conocimiento de la Biología? ¿Son apropiados para la clase y para la edad de los

alumnos? Estos aspectos deben ser analizados cuidadosamente.

Francia autoriza la experimentación en invertebrados y formas embrionarias de

vertebrados ovíparos. También lo permite cuando se trata de observaciones que

no provoquen ningún sufrimiento ni daño. Se considera una falta grave matar a

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

6

un animal frente a los alumnos para la disección.

La disección se debe limitar a los órganos (corazón) o animales ya muertos (peces,

mariscos), comprados en establecimientos comerciales. Actualmente, hay mucho

material en la web para sustituir las disecciones.

Tejidos y fluidos corporales

No presentan riesgos los tejidos vegetales, la carne o derivados de la carne

obtenidos en restaurantes o comercios de alimentos, cabellos, dientes

(esterilizados previamente), tejidos fosilizados o especímenes arqueológicos y

preparados histológicos (tejidos fijados).

Las muestras de fluidos y secreciones humanas incluyen sangre, células de la

mejilla, heces, saliva, moco, semen, sudor y orina. Tanto las muestras como las

células extraídas de esas muestras pueden transmitir enfermedades. Por ser

potencialmente infecciosas deben ser sustituidas por otros materiales o por otras

actividades virtuales.

La sangre es especialmente peligrosa ya que tanto el contacto directo como

indirecto puede transmitir patógenos como el HBV (virus de la hepatitis B) y el HIV

(virus de la inmunodeficiencia humana). Se debe excluir toda manipulación de

sangre en la escuela, a menos de obtener una muestra segura, esto es que haya

pasado por todos los controles habituales, en un centro especializado.

En relación con el uso del microscopio, nunca usar luz solar como fuente de

iluminación y evitar el acceso a los estudiantes con infecciones oculares. Antes de

usar un colorante, se debe verificar su toxicidad.

MICROBIOLOGÍA Y BIOTECNOLOGÍA

La renovación de los programas de enseñanza de Biología mediante la introducción

de tópicos de Biotecnología nos exige repensar el trabajo experimental, una

actividad fundamental para la compresión y el dominio de la tecnología.

Consideramos que dentro de esta área específica, la formación de una cultura de

la seguridad debe comenzar cuanto antes, en los primeros niveles de enseñanza,

a lo largo del camino de la especialización los riesgos irán en aumento.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

7

MICROORGANISMOS PARA ACTIVIDADES PRÁCTICAS

La introducción de actividades prácticas con microorganismos es cada vez más

frecuente en los cursos de Biología en la Enseñanza Fundamental y Media. Existen

diversas listas de microorganismos, elaborados por instituciones de tradición y

prestigio, o por sociedades científicas que pueden ser utilizadas en actividades

escolares (MISAC, ASE, NABT). Estas listas, disponibles en Internet, indican

algunas aplicaciones posibles y aportan información sobre el cultivo y el

mantenimiento de los linajes.

Los microorganismos están clasificaciones en grupos de riesgo, siendo estas

categorías usadas (en países de la Unión Europea, WHO) como parte de la

validación que permite determinar el nivel de bioseguridad apropiado ( NB1, NB2,

NB3, NB4). Un nivel de bioseguridad es definido por una combinación de prácticas

y procedimientos de laboratorio, equipamiento de seguridad (barreras primarias)

e instalaciones de laboratorio (barreras secundarias).

Los microorganismos ideales para la enseñanza son los clasificados dentro del

Grupo de riesgo 1, nivel de bioseguridad NB1. Se trata de microorganismos que

hasta el momento no causan enfermedades para el hombre (bajo riesgo individual

y colectivo) y que no representan riesgos para el ambiente (Lactobacillus,

Lactococcus, Saccharomyces, varias especies de Bacillus, cepas no patogénicas de

Escherichia coli, etc.).

Los microorganismos “seguros” entran y salen de las listas divulgadas por las

autoridades, siendo aconsejable que el Profesor se mantenga actualizado. El uso

de Serratia marcescens está actualmente desaconsejado por haber sido causa de

algunas infecciones hospitalarias. Algunas especies de Aspergillus y de Penicillium

no son más consideradas peligrosas siempre que se respeten las buenas prácticas.

Se discute el cultivo de microorganismos ambientales, aceptable en placa cerrada

(recuento de organismos o de colonias), pero que debería ser objeto de mayores

cuidados, si fuera abierta o repicada, requiriendo el uso obligatorio de guardapolvo

(delantal) y lentes de protección, en gabinetes de inoculación.

Obsérvese que los microorganismos considerados seguros no presentan riesgos

para las personas sanas cuando se mantienen las prácticas de laboratorio

adecuadas, pero pueden ser peligrosos para las personas con baja inmunidad.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

8

Dentro del grupo de riesgo 1, hay microorganismos y actividades adaptados a cada

franja etaria y nivel de aprendizaje (Básico, Fundamental, Medio, Técnico,

Graduado Superior).

ACTIVIDADES POSIBLES EN CADA NIVEL DE ENSEÑANZA

Enseñanza Infantil y Fundamental 1

Incluye alumnos menores de 11 años y docentes sin ningún entrenamiento

especial.

Las actividades prácticas involucran microorganismos que entran en la elaboración

y composición de alimentos humanos, y aquellos que crecen naturalmente en

material vegetal en descomposición.

El cultivo es realizado en las sustancias en las que esos microorganismos crecen

naturalmente, tales como pan, vino, frutas, vegetales, leche, queso, yogurt,

hierbas, césped, etc. Los cultivos se incuban a temperatura ambiente, salvo en el

caso de la preparación de yogurt que ocurre a 43 ºC, utilizando como starter un

producto comercial con lactobacilos.

Enseñanza Fundamental y Media

Incluye alumnos entre 11 y 16 años y Profesores de Ciencias con algún

entrenamiento específico (Biología, Física, Química) y, eventualmente, la

supervisión de algún profesor de Biología.

Los agentes biológicos posibles son microorganismos comerciales provenientes de

colecciones de cultivos o con requisitos particulares (salinidad, pH, temperatura).

Microorganismos del ambiente, exceptuando los del cuarto de baño, pueden ser

cultivados. En relación con la superficie corporal, el cultivo estará limitado a los

microorganismos de las manos.

Los medios de cultivo admiten en la composición agar y nutrientes, excluyendo

aquellos que seleccionan microorganismos potencialmente patógenos para el

hombre (agar sangre, agar Mc Conkey).

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

9

Los cultivos se incuban a 30ºC, una temperatura en que los microorganismos

permitidos crecen bien. Las excepciones son las bacterias lácticas del yogurt

(43ºC, starter), Streptococcus thermophilus (50ºC), Bacillus stearothermophilus

(60ºC) y líneas debilitadas de Escherichia coli (37ºC).

Se minimiza el riesgo de cultivar microorganismos nocivos mediante la elección

cuidadosa de las fuentes y el cultivo en recipientes cerrados y sellados, que

permanecerán así hasta que los cultivos sean esterilizados. En caso de abrir los

recipientes, se deben exterminar los microorganismos 24 hs antes, con un papel

de filtro embebido en formol (40%). Los repiques quedan excluidos.

Como barrera primaria, se aconseja el uso de guardapolvo (delantal). Barreras

secundarias incluyen un laboratorio con piletas y la previsión de tratamiento

específico en caso de derrame. La esterilización del material de descarte es

indispensable (autoclave/ olla a presión).

Enseñanza Media (Técnica), Terciario, Graduación Universitaria

Incluye alumnos mayores de 16 años y Profesores con entrenamiento específico y

calificación en técnicas de esterilidad.

Las limitaciones en relación a los agentes biológicos, medios de cultivo e incubación

son equivalentes a las descriptas en el nivel anterior. De todos modos,

dependiendo del curso, organismos del ambiente y del cuerpo pueden ser

cultivados en placas, que permanecerán cerradas.

El uso de guardapolvos se considera obligatorio como barrera primaria. Las

prácticas de laboratorio patrón (standard) y una técnica aséptica experimentada

son condiciones importantes.

En relación con las barreras secundarias no hay modificaciones respecto del nivel

anterior.

Las normas correspondientes a los 3 niveles de enseñanza se encuentran

resumidas en la tabla 1.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

10

LAS NORMAS DE TRABAJO STANDARD

1. Acceso al laboratorio con vestimenta adecuada. Quitarse joyas (pendientes,

collares) y también sombreros y gorros. No usar ropas demasiado largas ni

zapatos abiertos (sandalias). Recoger el cabello. Usar guardapolvo de algodón.

2. Acceso al laboratorio limitado o restringido cuando los experimentos están en

marcha (Decisión del Profesor).

3. Tener la certeza de haber comprendido bien el procedimiento antes de

comenzar.

4. Lavarse las manos antes y después de realizar el procedimiento.

5. No fumar, beber, comer, chupar caramelos, morder lápices, ponerse lentes de

contacto o cosméticos.

6. Mantener la mesada bien organizada.

7. Utilizar las técnicas asépticas apropiadas para trabajar con cultivos bacterianos,

microbiológicos o virales.

8. No pipetear con la boca, minimizar la formación de aerosoles.

9. Limpiar la mesada al menos 1 vez al día y cada vez que se produzca un derrame

con un desinfectante apropiado.

10.Limpiar y descartar adecuadamente el material utilizado.

Corresponde al Profesor limitar el acceso al laboratorio durante el desarrollo de las

actividades, sin permitir a los alumnos llegar tarde o salir antes de terminada la

clase, y por su parte no dejar a los alumnos solos.

Estas normas representan un cambio de comportamiento en el laboratorio, tanto

para los docentes como para los alumnos.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

11

Tabla 1: Normas de seguridad en los diferentes niveles de enseñanza.

Enseñanza Fundamental I Fundamental II y Media

(11 a 17 años)

Media Técnica

Terciaria

Universitaria

Agentes

biológicos

Alimentos y material

vegetal en

descomposición

Colecciones de cultivos

M’os com requerimientos raros

M’os ambientales

Colecciones de cultivos

M’os com requerimientos raros

M’os ambientales

Prácticas y

procedimientos

Medios naturales

T = 300C

y recipientes cerrados

Agar y nutrientes

T = 300C

y recipientes cerrados

Agar y nutrientes

T = 300C y recipientes cerrados

Se pueden hacer repiques

Barreras

primarias

Ninguna Guardapolvo opcional Guardapolvo obligatorio

Prácticas standard de laboratorio

Técnicas de esterilidad

Barreras

secundarias

Ninguna Laboratorio (pileta, autoclave,

tratamiento p/ derrames, etc.)

Laboratorio (pileta, autoclave,

tratamiento p/ derrames, etc.)

Abreviación M’os = Microorganismos

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

12

ASPECTOS ESPECÍFICOS DE LA ENSEÑANZA DE BIOTECNOLOGÍA

Se aconseja trabajar con microorganismos comerciales o provenientes de

colecciones de cultivos, especialmente con requerimientos poco comunes.

Para el Profesor, no siempre es fácil obtener linajes microbianos de fuentes

seguras. En varios países, existen bancos de recursos biológicos que los proveen

gratuitamente o por un precio módico. En Brasil, la Fiocruz y la Fundación André

Tosello disponen de algunos linajes, pero la fuente principal suele ser algún centro

universitario.

De modo general, se aconseja evitar los cultivos anaerobios. Las excepciones son

la fermentación alcohólica y la producción de biogas. En este último caso los

excrementos de animales deben ser sustituidos por cortes de pasto inoculados con

compost. Organismos parcialmente anaerobios como los que crecen en las

columnas de Winogradsky no presentarían problemas.

Otras recomendaciones son la de evitar cultivos en gran escala que produzcan

antibióticos (penicilina) e iniciar las fermentaciones con un volumen de inóculo en

crecimiento activo, equivalente al 20% del volumen total. Los medios de cultivo

deben ser esterilizados antes de usar, así como el material que será descartado.

A TRABAJAR CON PATÓGENOS, TAMBIÉN SE ENSEÑA.

El trabajo con patógenos es inconcebible en la enseñanza básica, fundamental o

media y también en la Media Técnica, en que los alumnos son menores de edad.

No obstante, dicha experiencia es necesaria en algunas áreas de formación

profesional, ya sea a nivel técnico o nivel superior. ¿Cuándo se debe exponer el

alumno al trabajo con patógenos? ¿En qué modo?

Para muchos autores, un curso básico de introducción a la microbiología debería

utilizar exclusivamente organismos no patogénicos. Se trate de un curso de grado

o de post-grado, el alumno debe aprender primero a utilizar las técnicas de

esterilidad en la preparación y manipulación de cultivos con agar, y analizar las

condiciones necesarias para el crecimiento de microorganismos y a diseñar y

conducir experimentos que permitan evaluar el efecto de agentes antimicrobianos.

Un curso básico tiene como objetivo el desarrollo de las habilidades esenciales,

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

13

conocidas como “práctica segura”, en relación con las técnicas generales de

crecimiento, identificación y recuento de microorganismos.

También se propone desarrollar algunos procesos conceptuales, tales como la

naturaleza de la investigación microbiológica y la organización de documentación

y del registro de los experimentos.

Todo debe ser repasado, desde el material hasta las condiciones de trabajo. Dejar

caer tapones, pipetas o ansas de inoculación son errores frecuentes en los cursos

de iniciación. La capacidad de concentración suele verse reducida en clases llenas,

con asistentes apenas mejor preparados que los alumnos. Antes de trabajar con

patógenos, el alumno debe adquirir varias habilidades y mostrar cierto grado de

madurez.

PASAR DE NB 1 A NB 2 NO ES TAN SIMPLE

El NB1 representa un nivel básico de contención, que depende de prácticas

microbiológicas standard, sin más barreras que una pileta para el lavado de las

manos.

El laboratorio NB2 consiste en instalaciones, equipamientos y procedimientos que

permiten el trabajo con agentes infecciosos de riesgo moderado, presentes en la

comunidad y asociados a enfermedades humanas de severidad variable. Estos

laboratorios se utilizan en la enseñanza o en el diagnóstico clínico.

Las instalaciones son de acceso restringido, cuentan con gabinetes de bioseguridad

apropiados y con equipamientos para la esterilización de los desechos y material

de descarte. Las barreras primarias y secundarias son específicas. Se contempla

un control eficiente de insectos y roedores.

De acuerdo con la Organización Mundial de la Salud, el nivel NB2 difiere del NB1

en varios puntos:

1. El personal de laboratorio recibe un entrenamiento específico para manipular

los agentes patogénicos.

2. El laboratorio está dirigido por científicos con experiencia en la manipulación de

agentes patogénicos.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

14

3. El acceso al laboratorio está limitado cuando el trabajo está en marcha.

4. Se prepara y adopta un manual de bioseguridad específico del laboratorio.

5. Los procedimientos capaces de generar aerosoles potencialmente infecciosos

son realizados en gabinetes de seguridad de clase I o II u otro equipamiento de

contención primaria. El personal recibe entrenamiento específico en el uso

adecuado del equipamiento de contención y emplea estrictamente las prácticas

microbiológicas recomendadas.

CULTIVOS DE TEJIDOS

Además de requerir reactivos caros y equipamientos sofisticados, los cultivos de

tejidos animales no deben ser realizados en el laboratorio de enseñanza porque

existe el riesgo de estar infectados por patógenos. De todos modos, el cultivos de

tejidos vegetales es suficiente para mostrar los principales aspectos tecnológicos

y sus dificultades. Los medios son simples, pero se debe tener cuidado con la

manipulación de las hormonas, algunas de las cuales pueden ser tóxicas (o

cancerígenas?).

CONSIDERACIONES FINALES

En la enseñanza, el dinero es un factor limitante. Las inversiones generalmente

están destinadas a la construcción de laboratorios de investigación o de

diagnóstico clínico. Los laboratorios más antiguos, donde se desarrollas las clases

prácticas, no siempre son apropiados. Faltan gabinetes de seguridad y material de

protección. Sabemos que conciliar la falta de recursos con la necesidad de

formación práctica y de actividades experimentales no es una tarea simple. De

todos modos, en un establecimiento de enseñanza, la educación para un

comportamiento responsable incluye varios actores: las autoridades deben

garantizar y exigir el seguimiento de normas de seguridad; los profesores tienen

la responsabilidad directa del cumplimiento de dichas normas; los técnicos y los

alumnos de mantener actitudes positivas y hábitos relativos a la cultura de la

seguridad.

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

15

BIBLIOGRAFÍA

AIHA LABORATORY HEALTH AND SAFETY COMMITTEE WEB SITE

http://www2.umdnj.edu/eohssweb/aiha/accidents/index.htm

AMERICAN BIOSAFETY ASSOCIATION

http://www.absa.org/abomenu.html

AMERICAN PHYSIOLOGICAL SOCIETY. Questions people ask about animals in research.

http://www.the-aps.org

AMERICAN SOCIETY OF MICROBIOLOGY (ASM). Biosafety standards and training.

Microbe 2:12, 2007

ANDRIEU J-L ET AL. Risques biologiques. Les cahiers de prévention, CNRS, 2002

http://www.sg.cnrs.fr/cnps/guides/doc/risquebio/cahierpreventionrisquesbio.pdf

ASE SAFEGUARDS IN SCIENCE COMMITTEE. Microorganisms for Investigations in Schools

& Colleges.

http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/PDF/Microbes.pdf

ASSOCIAÇÃO NACIONAL DE BIOSSEGURANÇA (ANBIO)

http://www.anbio.org.br

ASSOCIAÇÃO NACIONAL DE BIOSSEGURANÇA (ANBIO). Instrução Normativa CTNBio nº

6, de 28.02.97.

http://www.anbio.org.br/legis/instrucao6.htm

BIOLOGY LABS ONLINE

http://www.biologylab.awlonline.com/

BIOSAFETY PROGRAM. Role of aerosols and their significance.

http://www.lbl.gov/ehs/biosafety/Biosafety_Training/html/aerosols.shtml

CASE C. Hand washing. Access Excellent Classic Collection, 1996

http://www.accessexcellence.org/AE/AEC/CC/hand_background.php

CASE C. & J.DOUTHWRIGHT (1995) Point/Counterpoint: Microbiological Safety in the

Undergraduate Teaching Laboratory. Focus on Microbiology Education.

CENTER FOR PUBLIC HEALTH PREPAREDNESS – KENT STATE UNIVERSITY. Safety First.

http://cphp.kent.edu/Middle.htm

DURRELL G. O naturalista Amador. São Paulo, Livraria Martins Fontes Editora Ltda.,

1984.

EWALD H.T et al. Micro-organisms for education, 1997.

http://www.science-projects.com/safemicrobes.htm

FUNDAÇÃO OSWALDO CRUZ (FIOCRUZ) / INSTITUTO NACIONAL DE CONTROLE EM

QUALIDADE DE SAÚDE (INCQS). Coleção de microrganismos de referência utilizados em

controle da qualidade (Catálogo).

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

16

HORN, TOBY MOGOLLON; FRAME, KATHY Working with DNA & Bacteria in Precollege

Science Classrooms, NABT, 1993

http://www.nabt.org

INSTITUTE OF LABORATORY ANIMALS RESOURCES OF THE NATIONAL RESEARCH

COUNCIL (ILAR). Guide for the Care and Use of Laboratory Animals in Precollege

Education, 2006.

http://dels.nas.edu/ilar_n/ilarhome/Principles_and_Guidelines.pdf

JOHNS HOPKINS UNIVERSITY/DEPARTMENT OF BIOLOGY/UNDERGRADUATE COURSES.

Virtual Lab demonstrations.

http://www.bio.jhu.edu/Undergrad/Default.html

KELLER M.J. Faster, Safer, Better: recommendations for DNA electrophoresis in the

teaching lab. The American Biology Teacher 71:4, 2009

LABORATORY HEALTH & SAFETY COMMITTEE

http://www2.umdnj.edu/eohssweb/aiha/accidents/index.htm

LAXON J. & SUCHMAN E. Safety Recommendations from the Concurrent Sessions on

Safety in the Microbiology Teaching laboratory at the Undergraduate Education

Conference 2003. Focus on Microbiology Education 10:1, 2003

MALDARELLI G. et al. (2009) Journal of Microbiology & Biology Education 10-:51-57

MANGAN K. & M.PHILPOTT. Point/Counterpoint: The Use of BSL-2 Organisms in the

Microbiology Classroom. Focus on Microbiology Education 11:2, 2005

MASTROENI M.F. Biossegurança aplicada a laboratórios e serviços de saúde. Segunda

Edição. São Paulo, Editora Atheneu, 2006.

MASTROENI M.F. A difícil tarefa de praticar a biossegurança. Tendências. Ciência e

Cultura 60:2, 2008.

MICROBIOLOGY IN SCHOOLS ADVISORY COMMITTEE (MISAC). Microbiology fact sheets

for schools - Safety Guidelines.

http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/PDF/Topics15.pdf

MINISTÉRIO DA SAÚDE – Secretaria de Ciência, Tecnologia e Insumos estratégicos –

Departamento de Ciência e Tecnologia. Classificação de Risco dos Agentes Biológicos.

Série A. Normas e Manuais Técnicos. Brasília – DF, 2006

NATIONAL ASSOCIATION OF BIOLOGY TEACHERS (NABT) http://www.nabt.org

NATIONAL CENTRE FOR BIOTECHNOLOGY EDUCATION (NCBE). Safety in the school

laboratory.

http://www.ncbe.reading.ac.uk/NCBE/SAFETY/menu.html

NATIONAL INSTITUTE FOR OCCUPATIONAL SAFETY AND HEALTH. U.S. Chemistry.

Laboratory Safety Guide, 2007.

http://www.cdc.gov/niosh/docs/2007-107/pdfs/2007-107.pdf

OBSERVATOIRE NATIONAL DE LA SÉCURITÉ DES ÉTABLISSEMENTS SCOLAIRES ET

D’ENSEIGNEMENT SUPÉRIEUR. Risques et Sécurité en Sciences de la Vie et de la Terre et

en Biologie-Écologie.

http://ons.education.gouv.fr

LAS ACTIVIDADES PRÁCTICAS / TRABAJAR EN CONDICIONES SEGURAS

María Antonia Malajovich / Guías de actividades

Biotecnología: enseñanza y divulgación

http://www.bteduc.bio.br

Guía 67

17

ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE Manual de segurança biológica em laboratório – 3a

edição, Genebra 2004

http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/BisLabManual3rdwebport.pdf

PANEC M. Online Science Laboratory Courses: by what criteria? Focus on Microbiology

Education 13:2, 2007

RÉSEAU RESSOURCE RISQUE BIOLOGIQUEhttp://www.3rb-bgb.com/

ROY K. Targeting Biosafety for High School Level Biotechnology and Microbiology Courses

Safe Science Series: Article # 18. National Science Education Leadership Association -

NSLA – The Navigator, Fall 2000

SANTILLO H., DOS SANTOS D.H. E A.J.LEITE RODRIGUES. Situação de Biossegurança

encontrada nos laboratórios de biologia do Campus. UEG.

http://www.prp.ueg.br/06v1/ctd/pesq/inic_cien/eventos/sic2005/arquivos/biologicas/situ

acao_biosseguranca.pdf

SCIENCE EDUCATION SECTION AND MANPOWER BUREAU Learning and Teaching

Resources on Safety in Science Laboratories, 2004.

http://cd1.edb.hkedcity.net/cd/science/laboratory/SAFETY/safety_exemplars_e.pdf

SCLEGEL E.F.M. & J.L. MUÑOZ JORDÁN. A classroom transformed into a lab:

microbiology for elementary school. Focus on Microbiology Education10:2, 2004

SCOTT WEESE J. Evaluation of bacterial & Fungal culture practices in School classrooms.

The American Biology Teacher 71:3, 2009

SINGER S., HILTON M.L. e SCHWEINGRUBER H. America’s Lab report – Investigations in

High School Science Committee on High School Science Laboratories: Role and Vision,

National Research Council, 2005

SMITH H. A case for Microbiology in Secondary Education and Implications for

undergraduate educators. Focus on Microbiology Education 14:1, 2007

SOCIETY FOR GENERAL MICROBIOLOGY (SGM). Micro-organisms for investigations in

schools & colleges, 2001.

http://www.microbiologyonline.org.uk/forms/bpmlist.pdf

SUCHMAN E. & J. LAXON. Update of biosafety level designations. Focus on Microbiology

Education, 5/1/2004.

http://www.microbelibrary.org

THE BIOTECHNOLOGY PROJECT

http://matcmadison.edu/biotech/resources/methods/labManual/unit_2/exercise_4.htm

THE LABORATORY SAFETY INSTITUTE

http://www.labsafetyinstitute.org/Resources.html

THOMPSON C. Biosafety levels – What we need to know about them in teaching Labs.

Focus on Microbiology Education, 10:3, 2004

VIRTUAL STEM CELL LABORATORY

http://www.childrenshospital.org/research/Site2029/mainpageS2029P23sublevel39.html