3 obtención de componentes sanguineos fraccionamiento
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Obtención de ComponentesSanguíneos: Fraccionamiento
JUAN CARLOS CALDERON M. D.
MAYO 2010
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Ca. 1786 Bellevue Hospital, NY
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1892. Adler J, “Transfusión de sangre de cabra”, detalle. (Simon Bernheim"Transfusion de sang de chevre et tuberculose pulmonaire")
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Dr. Lewisohn, 1915
Dr. Durán, 1937
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Botella para Colecta de sangre 1945
Bolsa de sangre de Baxter, 1954
Transfusión sanguínea en una ambulancia
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Hemoterapia
• Los progresos en la obtención y conservación de los diferentescomponentes sanguíneos han hechoposible la administración separada de las distintas fracciones hemáticas.
Hemoterapia Moderna
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Hemoterapia
Colecta de donante
Aferesis de plaquetas
Plasmaferesis
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Densidad de los componentes sanguíneos
Importante conocerla en el banco de sangre moderno para una adecuada separación de los componentes sanguíneos
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SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA SANGRE POR GRADIENTE DE CENTRIFUGACIÓN SEGÚN SUS
DENSIDADES ESPECÍFICAS.
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SEPARACIÓN DE LOS COMPONENTES DE LA SANGRE POR GRADIENTE DE CENTRIFUGACIÓN SEGÚN SUS
DENSIDADES ESPECÍFICAS.
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AUTOMATIZACION DEL BANCO DE SANGRE
• Distintas configuraciones bolsas de extracción:
– “Arriba-Abajo”
– “Arriba-Arriba”
– “Bioseguras”
• Filtración prealmacenamiento
• Fraccionadores automáticos
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CLP: Capa Leucoplaquetaria, CHPL: Concentrado Hematies, Leucocitos y plaquetas
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Conservación
Como consecuencia de fraccionar la donación de sangre total.
Los componentes sanguíneos obtenidos precisan condiciones diferentes para su conservación.
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Condiciones óptimas deAlmacenamiento
En el caso de componentes celulares (hematíes y plaquetas) el almacenamiento debe asegurar no solo la FUNCIÓN sino también suVIABILIDAD.
En el caso del plasma y sus derivados, deben conservar la función de las proteínas, especialmente de los factores de coagulación. (Termodependientes).
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Hematíes o Glóbulos Rojos
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Almacenamiento de los hematíes
OBJETIVO:• Mantenimiento de la viabilidad
celular:– Supervivencia de los hematíes a las
24 horas de la transfusión (≥75%).
• Mantenimiento de su función celular:– Capacidad de las células
transfundidas para transportar normalmente el oxígeno a los tejidos.
• Refrigerados entre 2º C a 6º C
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Almacenamiento de los hematíes
Produce una serie de alteraciones:
• “Lesión de almacenamiento”:
– 1. Cambios bioquímicos
– 2. Cambios biomecánicos
– 3. Cambios Oxidativos
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Metabolismo
Bioquímico
Lactato
Depleción del sustrato
El glutatión reducido (GSH) es un tripéptido que se encuentra
presente en elevadas concentraciones dentro del eritrocito (2 mM).
La HbNO transfiere el NO a los grupos tiol (-SH) de ß93Cys
para formar S-NitrosoHb (SNO-Hb). SNO-Hb ↓
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
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Oxidativos
SNO-Hb ↓
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
Biomecánicos
Hemólisis
Morfología
Vesiculación
Area de Membrana
Area/Volumen
Deformabilidad
Fosfatidil – Serina
Volumen
Gradiente Na/K
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Biomecánicos
LESIÓN POR ALMACENAMIENTO
Oxidativos
Oxidación de la Hemoglobina
Desnaturalización de la Hemoglobina
Peroxidación de los Lípidos
Antígenos anti Bd3
Sustancias liberadoras bioactivas
Daños en el citoesqueleto
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Metabolismo del Hematíe
• Dos fosfatos orgánicosdesempeñan un papelfundamental:
– 2, 3 -difosfoglicerato (2,3-DPG)
– Adenosintrifosfato (ATP)
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Metabolismo del Hematíe
• 2,3-DPG hace que la hemoglobina tenga una mayor afinidad
por el O2 cesión menor del mismo a los tejidos.
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Metabolismo del Hematíe
Grupos S-nitrosotioles – S nitrosohemoglobina
Acción sobre arteriolas y capilares incremento del
flujo sanguíneo
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1. Cambios bioquímicos
a) Descenso progresivo en los niveles de 2,3-DPG.
b) Progresivo descenso en la concentración de ATP y cambios morfológicos en los hematíes.
c) Cambios metabólicos:• Preferencia vía glicólisis anaerobia frente a
la pentosa fosfato, perdiendo poderreductor volviéndose más sensible a ataques oxidativos.
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• Los niveles de 2,3-DPG disminuyen linealmente las dos primeras semanas durante el almacenamiento.
• Recuperación rápida de la mitad de los niveles de 2,3-DPG a las 12 horas de transfundidos.
• A las 24 horas niveles normalesde 2,3-DPG.
1. Cambios bioquímicos: 2,3-DPG
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Metabolismo Hematíe
90% vía Glucólisis anaerobia
• Energía: ATP
• NADH: Mantiene el hierro reducido (ferroso).
• 2,3-Difosfoglicerato: Regula afinidad de la hemoglobina por el oxígeno
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Soluciones de almacenamiento
• ACD: Acido-Citrato-Dextrosa
• CPD: Citrato-Fosfato-Dextrosa
Retrasa la pérdida de 2,3-DPG, mejorando la función y ligeramente la supervivenciaal incrementar el pH.
• CPD-A: Citrato-Fosfato-Dextrosa-Adenina.
Adenina se desamina en inosina rápidamente → niveles aceptables de ATP.
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2.Cambios biomecánicos
a) Pérdida de fosfolípidos de la membrana eritrocitariay una distribución anómala de los mismos:
– Equinocitos y esferocitos
b) Aumento de la fragilidad osmótica:
– Hemólisis de los hematíes
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Soluciones aditivas
• CPDA-1; CPDA-2– Incremento cantidad de glucosa
• SAG-M:– Manitol como protector de la membrana
eritrocitaria.
• ADSOL:– Incremento dosis de adenina 27 mg/dL– Mayor cantidad de Manitol (750 mg)– Solución salina Isotónica (0.9gr/dL)
• OPTISOL (AS-5):– Buena dosis de adenina 30 mg/dL– Menor cantidad de Manitol que todas las
del mercado (525 mg)– Cantidad de NaCl, levemente menor que
la del plasma (0.877 gr/dL)
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Viabilidad de los hematíesRefrigerados
• ACD ó CPD: 21 días
• CPDA: 35 días
• Soluciones aditivas:
• SAG-M [Salina, adenina, glucosa, manitol]: 42 días.
• ADSOL: 42 días. (45?)
• OPTISOL: 42 días.
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A FUTURO
• Estandarización de los concentrados de hematíes
• Disminución riesgotransfusional por infección
• Concentrados de hematíesuniversales
• Alargamiento de caducidadactual:– EAS-61 Para almacenamiento
hasta por 9 semanas– EAS-64 Para almacenamiento
hasta por 10 semanas– EAS-76 Para almacenamiento
hasta por 11 semanas
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A FUTURO• Alargamiento de caducidad
actual (Cont.)
– Estas soluciones cumplen con los estándares de la FDA (hemólisis <1%; Sobrevida de GR >75% al final del tiempo de preservación de cada uno).
– Otras soluciones están en estudio y son diseñadas para recuperar y aumentar los niveles de ATP y 2,3 DPG en los GR almacenados por varias semanas
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Plaquetas
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Ciclo de preparación
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Ciclo de preparación
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Almacenamiento de plaquetas
• El almacenamiento debe asegurar
no sólo la FUNCIÓN si no también
su VIABILIDAD.
• No contienen ADN ni ARN
activación y liberación de sus
gránulos incapaces de
resintetizarlos.
• Particularmente susceptibles a
dañarse si se almacenan de manera
incorrecta.
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Plaquetas: Cambios Morfológicospor Activación
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Puntos críticos en la conservaciónde las plaquetas
• Temperatura
• pH
• Intercambio gaseoso
Proceso de reparación de una herida 1
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Conservación de Plaquetas
• Temperatura:– Frío produce DAÑO
PLAQUETARIO las plaquetas cambian su forma DISCOIDAL por ESFÉRICA.
• 18-24ºC• Observación del fenómeno del
remolino u “ondas muaré” (“Swirling”)
Proceso de reparación de una herida 2
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ACTIVACION PLAQUETARIA
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Puntos Críticos en Consevación Plaquetaria
• Temperatura
• pH
• Intercambio Gaseoso (CO2 O2)
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Conservación Plaquetaria
• Temperatura
– Frío produce daño plaquetario las plaquetascambian su forma discoidal por esférica
– 18° a 24° C
– Observación del fenómeno de “Swirling”(remolino u ondas Muaré) Fenómeno causado porla diferente refractariedad de la luz por lasplaquetas.
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Swirling plaquetario
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Swirling Plaquetario
Plaquetas normales de forma discoide
Plaquetas normales de forma discoide
Refracción de la Luz = “Swirling”
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Swirling Plaquetario
pH bajo o alteración metabólica alteran la forma plaquetaria y
pierden su forma discoide, como resultado no hay refracción de
la luz = No “Swirling”
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Conservación Plaquetaria
• pH
– Pérdida rápida de Glucógeno plaquetario, hay aumento del lactato pH
– pH de 6.2 a 6.8 = Cambios reversibles
– pH < 6.2 = Cambios irreversibles en la plaqueta
• Proceso es Irreversible cuando:– Hinchazón o pérdida de la forma discoide
– Aglutinación
– Lisis
– pH limites = 6.4 a 7.4
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Conservación Plaquetaria
Intercambio Gaseoso:• Bolsa de conservación debe ser
gas permeable– Oxigenación adecuada– Eliminación del CO2 resultante del metabolismo
del ácido Láctico
• Mantener la agitación continua– Facilitar el intercambio gaseoso a través de la
pared de PVC de la bolsa– 24 Hrs sin agitación, los daños son reversibles.
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Conservación Plaquetaria
• Viabilidad Plaquetaria = 7 días
• Periodo Máximo de conservación = 5 días
– Riesgo aumentado de sepsis en receptores por contaminación bacteriana
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Conservación Plaquetaria
• RD 1088/2005 hasta 7 días si
se emplean métodos de
detección o reducción de la
contaminación bacteriana
– Azul de Metileno (Theraflex)
– Intercept – Cereus (Amotosalem)
– Mirasol – Caridian BCT (este usa
Riboflavina e iluminación)
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El problema
Estafilococo spp
Estreptococo spp
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El problema: CONTAMINACION
Causas más probables: A- Limpieza del área de venopunción deficiente o inadecuada
B- Set de donación abierto
C- Bacteremia asintomática del donante (E. Coli)
D- Defectos de manufactura del set
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PLASMA FRESCO CONGELADO
Volumen: 200 a 250 ml
Proteínas: 12 grs (albúmina)
Contiene:Agua
Sodio
Todos los factores de coagulación lábiles y estables
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PLASMA FRESCO CONGELADO
1 ml de PFC x Kgr de peso del paciente, eleva la mayoría de los factores de coagulación en +/- 1% de su actividad
NO DEBE USARSE COMO EXPANSOR PLASMÁTICO DE ELECCIÓN.
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PLASMA FRESCO CONGELADO
INDICACIONES:
Hemorragia por defecto de factores de coagulación sin terapia específica
Intoxicación por cumarínicos y PT mayor 16 sg
PTT mayor de 55 sg (No por heparina)
PT y PTT mayor de 1,5 del promedio normal en pacientes prequirúrgicos ó INR de 1.6
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PLASMA FRESCO CONGELADO
INDICACIONES:
Deficiencias de factores II, V, VII, IX, X, XI
CID en fase hemorrágica
Transfusión masiva
Deficiencia de antitrombina III, proteína C y S
Hemofilia B
Tratamiento de la PTT con plasmaféresis
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CRIOPRECIPITADO
Volumen: 10 a 20 ml
Fibrinógeno: 300 a 350 mg.
Factor VIIIC: 80 a 100 UI
F. Von Willebrand: 70%
Factor XIII
Trombina
Fibronectina
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CRIOPRECIPITADO
INDICACIONES:
• Hemofilia A: deficiencia de factor VIIIC
• Enfermedad de Von Willebrand
• Hipofibrinogenemia
• Disfibrinogenemia con hemorragia
• Aporte de fibronectina tisular
DOSIS: 2 U por 10 Kg de peso
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Parámetros previos al fraccionamiento a tener en cuenta
• Extracción: 450 mL +/- 50 mL (405 a 495 mL) + anticoagulante: 63 mL de CPDA-1 o 63 mLCPD + 100 mL SAG/Manitol (Optisol = AS5)
• Temperatura de conservación:– Refrigerada entre +20° C y +24°C en placas de
1,4 Butanodiol (desde +37°C hasta 22°C)
– Hasta un máximo de 18 a 24 horasprefraccionamiento (depende de la temperaturamedioambiantal) con un mínimo de 2 horas antes del fraccionamiento
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Cadena continua de producción
Donante de
sangre
Paciente
La calidad en todos los aspectos del trabajo en banco de sangre
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MUCHAS GRACIAS!
SIEMPRE ES UN PLACER TRABAJAR PARA UN GRUPO SELECTO COMO ES EL DE USTEDES!!!