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    CITOMETRA DE FLU

    RESENTADO POR:Torres Garcia, Maziel

    Santos Medina Mariliz

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    CITOMETRA DE FLU

    INTRODUCCIN

    se inici en la dcada de los 60 como un impo

    el proceso de contar y medir el tamao de paen poblaciones no homogneas.

    Aparato que es capaz de medir componentede clulas y organelos celulares (partculas!luyen en una suspensin celular.

    CONCEPTO

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    CITOMETRA DE FLU

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    CITOMETRA DE FLUAPLICACIONES:

    " #a $%& se puede emplear paraestudiar caractersticas estructurales y!uncionales de clulas o partculas ensuspensin.

    " #as aplicaciones !undamentales deesta tcnica se dan en biologa y

    medicina y son la identi!icacin deantgenos celulares mediante tcnicasde inmuno!luorescencia y el estudiodel contenido de A' y !ases del ciclocelular.

    LA CMF SE HA

    )n hemato )n !armaco )n inmuno

    )n oncolog )n microbi

    )n gentic

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    CITOMETRA DE FLUPROCESAMIENTO DE LAS

    MUESTRAS:

    La muestra a analizar debeencontrarse en forma desusensi!n monodisersa" #a$muestras como la san%re erif&rica,m&dula !sea, o otros 'uidos

    biol!%icos, (ue recisan de unm)nimo rocesamiento* en cambiolos tumores s!lidos o las muestrasara+nadas necesitan de unadis%re%aci!n ms o menos intensa-mecnica, enzimtica, etc"."

    CARACTERISTICAS GE

    DE LOS CITMETROS

    " *ara la lectura por $!lu+o, las clulas son!luorocromos que espec!icamente

    constituyente celular." #as clulas son inyec

    !lu+o lquido laminar y una por un punto iluminado con luzintensidad (l-ser.

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    CITOMETRA DE FLU#a $itometra de &lu+o es una tcnica de an-lisis celular multiparamtr!undamento se basa en hacer pasar una suspensin de partculas (gener

    clulas alineadas y de una en una por delante de un haz de l-ser !ocaliz

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    )/1$/1A 234$A ') 1 $4/5%)/ ')

    " S/STEMA 0L12DR/3O 4 /n$ecci!n de lamuestra"

    " 4 3mara de'u5o"6 S/STEMA OPT/3O 4 0uentes deluz" 4 Detectores

    " 6 S/STEMA ELE3TR/3O 4 Amli+cadorcon7ertidor

    4 Sistemainformtico

    CITOMETRA DE FLU

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    SISTEMA FLUDRICO:

    " )ste sistema consta de dos!luidos, uno que contiene ensuspensin a la muestra y otro

    que lo envuelve a !in de darleestabilidad. #as clulas debenpasar una a una por delantedel haz del l-ser. Ambos!luidos (olucin !isiolgica,*2, aire no se mezclanporque circulan a di!erentepresin.

    CITOMETRA DE FLU

    SISTEMA PTI

    " Este sistema se comonede !ticas:

    " 4 La ptica de excitacide el lser $ las lentes adiri%ir el 9az de luz* $

    " 4 La ptica de lectura,las lentes de recolecci!nlue%o de la interacci!n elser $ las art)culas $ elese5os $ +ltros ara direlon%itudes de onda eselos detectores correson

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    " SISTEMA ELECTRICO:El sistemaelectr!nico con7ierte todo en sealesdi%itales ara almacenar en lacomutadora

    CITOMETRA DE FLU

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    INFORMACION OBTENIDA POR CITOMETRIA DE FLUJO

    " ;sicamente odemos obtener los si%uientes d" 4 Tamao de la c&lula" 4 3omle5idad de la membrana celular

    " 4 3on el uso de 'uorocromos se uede det9asta < colores con un mismo laser

    CITOMETRA DE FLU

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    " eales de dispersin8 #a dispersin resulta de la interaccin de la luuna partcula que produce un cambio de direccin (no de la longitud donda en todas las direcciones del espacio.

    #as caractersticas mor!olgicas que determinan la dispersin de la luz !undamentalmente el tamao celular, la membrana, el n9cleo y el matergranular del interior de la clula, llamado comple+idad.

    En los Clit!t"os #! Fl$%o s! i#!n #os &"'((ion!s #! #is)!"sin::#a luz dispersada en -ngulo cnico pequeo (0:;0

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    CITOMETRA DE FLUS!*'l!s #! Fl$o"!s(!n(i':1n !luorocromo es una molcula qumica que absdeterminada longitud de onda (energa y emite a una longitud superior (meno

    espectro de absorcin o e>citacin es el rango sobre el que un !luorocromo abespectro de emisin es el rango sobre el que un !luorocromo emite luz. $uand!luorocromo interacciona con la luz de e>citacin procedente del l-ser emite eradiante.

    )l espectro de absorcin o e>citacin es el rango sobre el que un !luorocromoel espectro de emisin es el rango sobre el que un !luorocromo emite luz. $ua

    !luorocromos interacciona con la luz de e>citacin procedente del l-ser emite eradiante.

    'ebido a que parte de la energa se utiliza para la absorcin, la luz emitida es energa que la luz de e>citacin, es decir la longitud de onda emitida es mayorentre la longitud de onda de absorcin y emisin se denomina to?es shi!!.

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    GRACIAS