[2]

Resumen

El alumno percibe como poco comprensible, apenas útil e independiente de las

situaciones de la vida real temas como: “Respiración celular como proceso

metabólico productor de energía”. En este sentido, el presente estudio tuvo como

objetivos: la elaboración de vino artesanal mediante las fermentaciones

tradicionales para promover el aprendizaje y motivación del alumnado al abordar los

tópicos de glucolisis y fermentación; observar y cuantificar la producción de etanol

empleando distintos tipos de uvas; evidenciar la producción de CO2 en la

elaboración de este producto a partir de microorganismos que llevan a cabo rutas

metabólicas y demostrar la utilidad de la comprensión de estos temas.

Se emplearon 500g de uva morada, verde, blanca, roja y orgánica, se molieron y

repartieron en frascos limpios (inóculo y preinóculo) al preinóculo se le adicionó 1gr

de levadura seca granulada Saccharomyces cerevisiae y al cabo de 3 días se juntó

el contenido del preinóculo e inoculo por dos semanas, se eliminaron las células de

la levadura mediante centrifugación y con el vino clarificado se determinó la

presencia de etanol para cada una de las muestras mediante una prueba

colorimétrica y para determinar el porcentaje de alcohol se utilizó un densímetro.

Los resultados mostraron que los aprendizajes adquiridos en el aula son útiles en la

vida cotidiana, el vino artesanal evidenció la producción de CO2 y etanol mediante

la prueba colorimétrica cualitativa y los porcentajes de etanol generados en los

distintos vinos artesanales son muy similares.

Finalmente se puede concluir que se aplicaron conocimientos biológicos y químicos

en la obtención de vino artesanal, Saccharomyces cerevisiae fue capaz de

metabolizar los glúcidos a través de la fermentación mostrando la presencia de

etanol y fue fácil de evidenciar la liberación del CO2 mediante el olor a uva madura

característico de los vinos. Los porcentajes de etanol generados en los distintos

vinos no muestran diferencia estadísticamente significativa y la elaboración de vino

demanda no solo conocimientos biológicos y químicos, también es necesario contar

con ingenio para llevar a cabo actividades prácticas y útiles con materiales

accesibles y de bajo costo para comprender temas considerados complejos.

[3]

Introducción

Marco teórico

La bebida resultante de la fermentación alcohólica del zumo de algunas frutas es el

vino, este se lleva a cabo por la compresión o no de diversos frutos y este es

realizado por las levaduras silvestres que se mezclan con los jugos ricos en azúcar

(Ferreyra et al., 2009).

Existen registros históricos que apuntan que hace aproximadamente 5,000 años

atrás, los seres humanos ya utilizaban la habilidad de las levaduras para fermentar

los azúcares de las frutas y obtener alcohol; de esta manera se producía cerveza y

vino de distintos tipos de manera comercial (Audesirk et al., 2018).

Las levaduras son hongos unicelulares oportunistas que pueden realizar la

respiración en presencia de oxígeno, pero en ausencia de este realizan la

fermentación alcohólica. Así, el vino debe fermentarse en toneles especiales que

eviten la entrada de oxígeno, pero que permitan que el dióxido de carbono producido

por las levaduras escape, para que los toneles no estallen.

Además de las levaduras silvestres responsables de la fermentación del vino se

encuentran algunas especies del género Saccharomyces en especial la especie

cerevisiae un organismo eucarionte muy estudiado por poseer un genoma

relativamente pequeño que se añade al mosto para iniciar la fermentación, los

azúcares contenidos en el mosto se convierten en alcohol (etanol) con

desprendimiento de CO2 (Alberts et al., 2016).

Saccharomyces cerevisiae comprende dimensiones aproximadas entre 2.5 y 10

micras de ancho y 4.5 a 21 micras de largo, con diversas formas desde cilíndricas

y filamentosas hasta redondas, ovoides y elipsoides con pared celular y núcleo

verdadero. Al ser un organismo eucarionte posee mitocondrias, ribosomas y en

algunas ocasiones vacuolas, cuando se forman colonias suelen presentar un color

crema o blanco, de apariencia húmeda y brillante, de bordes irregulares, la

temperatura adecuada para su crecimiento oscila entre los 25-30 °C y llega a

[4]

producir ascosporas cuando los nutrimentos son óptimos (Fajardo y Sarmiento,

2007).

Existe una amplia variedad de nutrimentos a través de los cuales la respiración

celular puede extraer energía, en el caso de Saccharomyces cerevisiae que utiliza

la fermentación alcohólica el piruvato producido mediante la glucólisis se convierte

en etanol y CO2; la glucólisis genera dos ATP y dos NADH por cada molécula de

glucosa metabolizada sin oxígeno, no hay aceptor final para los electrones

acumulados por el NAD+ para formar NADH. De esta forma, al existir la fermentación

el NADH generado en la glucólisis vuelve a formar NAD+, lo que evita que la

glucólisis se detenga, continúe la formación de energía y de esta manera la levadura

permanezca viva y pueda producir etanol en forma de vino partiendo de los

azucares de las frutas y CO2 como desecho de manera gaseosa (Alberts et al.,

2016).

Objetivos

Mostrar que los aprendizajes adquiridos en el aula son útiles en la vida cotidiana del

estudiante a partir del tema respiración celular para que obtenga vino artesanal

mediante el uso de microorganismos empleando la biotecnología.

Observar cómo la fermentación de Saccharomyces cerevisiae metaboliza los

azúcares naturales de la uva hasta producir etanol y CO2.

Cuantificar la producción de etanol en el vino con base en la fermentación de

Saccharomyces cerevisiae empleando distintos tipos de uvas.

Problema

El alumno percibe como poco comprensible, apenas útil e independiente de las

situaciones de la vida real o de las practicas sociales de la cultura a la que pertenece

temas como: “Respiración celular como proceso metabólico productor de energía”.

En este sentido, se pretende la elaboración de vino artesanal mediante las

fermentaciones tradicionales para promover el aprendizaje y motivación del

alumnado al abordar los tópicos de glucolisis y fermentación, para que observe la

[5]

producción de etanol y CO2 en la elaboración de este producto a partir de

microorganismos que llevan a cabo rutas metabólicas y evidencie la utilidad de

comprender estos temas.

Hipótesis

Los teóricos de la enseñanza consideran que parte del fracaso de las instituciones

educativas para promover el aprendizaje e interés de los alumnos es, que lo que se

enseña en las aulas proporciona una insuficiente motivación y se percibe como poco

comprensible y difícilmente útil, sobre todo en aquellos temas bioquímicos como

glucolisis y fermentación, puesto que no se pueden establecer asociaciones

coherentes con respecto a las representaciones científicas mostradas de manera

verbal, en el pizarrón o diapositivas acerca del tema, entonces, si se emplean

situaciones educativas como la elaboración de productos como el vino artesanal

empleando microorganismos que llevan a cabo dichas vías metabólicas, en las

cuales, el alumno sea participe, aprenda en contextos pertinentes para desarrollar

sus potencialidades, el conocimiento o producto del aprendizaje sea el resultado de

la actividad del aprendiente en interacción con sus pares, será posible que este

ambiente y aprendizaje de creación y representación sea significativo para el

estudiante, tomando como premisa que aprender y hacer son acciones

inseparables.

Desarrollo

El vino es una bebida producida por fermentación alcohólica utilizando la levadura

Saccharomyces cerevisiae en condiciones enológicas de variedades de uvas Vitis

vinífera, el cultivo de estas vides cubre actualmente el 90% de las superficies de los

viñedos en el mundo, mientras que el 10% restante son variedades no viníferas

utilizadas generalmente como frutas de mesa (Miño et al., 2015), tomando como

referencia este acontecimiento, se decidió obtener vino a partir de distintas uvas:

morada, verde, blanca, roja y orgánica, cuantificar la producción etanol y observar

la producción de CO2.

[6]

Con este fin, se emplearon 500g de cada una de las uvas, lavadas con abundante

agua y desinfectadas con cloro, se molieron y fueron repartidas de manera

equitativa cada tipo de uva en dos frascos limpios (inóculo y preinóculo

respectivamente) cuidando no superar las ¾ de volumen del mismo, se cerraron las

tapas al llegue y se les colocó una camisa de papel aluminio para esterilizarlos en

autoclave de 115 a 120°C durante 10 minutos (figura 1), se dejó enfriar a

temperatura ambiente y al frasco nombrado preinóculo se le adicionó 1gr de

levadura seca granulada Saccharomyces cerevisiae pesada cuidadosamente con

ayuda de un vidrio de reloj y una balanza analítica en la campana de extracción para

evitar la contaminación con algún organismo patógeno y se incubó a 37°C por 3

días (figura 2), el frasco nombrado inóculo se mantuvo en refrigeración por el mismo

lapso de tiempo.

Figura 1. Etiquetado de frascos inóculo, preinóculo y montado de camisas de aluminio para la esterilización.

Una vez transcurrido el tiempo mencionado se junto el contenido del preinóculo e

inoculo en una botella plástica de 1L, previamente lavada y desinfectada con cloro,

se procedió a agitar la botella y a desenroscar la tapa dos o tres veces al día durante

dos semanas sin abrir, para liberar de manera controlada el dióxido de carbono y

evitar que reventara la botella.

[7]

Figura 2. Adición de 1gr de la levadura Saccharomyces cerevisiae e incubación a 37°C durante 3 días.

Terminado el tiempo de fermentación se coló el mosto con un colador de cocina

convencional y el vino clarificado se centrifugó a 4000rpm por 15 minutos, se

eliminaron las células de la levadura que se depositaron en el fondo con los residuos

de las uvas dentro de los tubos de la centrifuga y fueron apartados como desechos

biológicos.

Se determinó la presencia de etanol para cada una de las muestras mediante una

prueba colorimétrica que consistió en poner a baño maría durante 10 minutos en un

tubo de ensayo 1:1 (mililitros) vino: solución sulfocrómica; etanol absoluto: solución

sulfocrómica y agua: solución sulfocrómica como testigo o muestra control para

evidenciar la presencia de etanol en el vino artesanal.

Para determinar la concentración de alcohol se utilizó una probeta de vidrio de

250ml lavada y desinfectada la cual se llenó del mosto obtenido de cada una de las

uvas sin fermentar (gravedad original) y después de la fermentación (gravedad final)

con ayuda de un densímetro el cual fue introducido en la probeta, se registraron

ambos resultados antes y después de la fermentación masa volúmica g/mL para

después ser convertidos en porcentaje de etanol producido mediante la siguiente

formula:

[8]

GO – GF= _____________x 131.25= ______________%.

(Gravedad original) – (Gravedad final) x (constante de alcohol/ volumen) = (Porcentaje de alcohol)

Resultados

Con la finalidad de mostrar que los aprendizajes adquiridos en el aula son útiles en

la vida cotidiana, el estudiante elaboró vino artesanal en conjunto con la adquisición

de conocimientos conceptuales, procedimentales y actitudinales sobre el tema

respiración celular como proceso metabólico productor de energía, utilizando

levaduras y diferentes tipos de uva para adentrarse al mundo de la biotecnología

(figura 3).

Figura 3. Alumnos mostrando la elaboración del vino artesanal.

Una vez obtenido el vino artesanal, éste fue utilizado para evidenciar la producción

de etanol a partir de los azucares de las uvas en presencia de Saccharomyces

cerevisiae mediante la fermentación con una prueba colorimétrica cualitativa. Se

pueden observar de izquierda a derecha tres tubos de ensayo (figura 4): en el

[9]

primero se muestra la solución sulfocrómica con agua (control negativo) de color

marrón, en el segundo tubo se aprecia el vino artesanal con la solución sulfocrómica

de color verde (grupo experimental) y finalmente en el tercer tubo se presenta el

etanol absoluto mezclado con la solución sulfocrómica de color azul (control

positivo) todos en la misma proporción 1:1 a baño maría durante 10 minutos.

Figura 4. Prueba colorimétrica cualitativa para evidenciar la producción de etanol. De izquierda a derecha agua, vino artesanal y etanol absoluto con solución sulfocrómica en proporción 1:1.

Para dar testimonio de la producción de CO2 mediante la fermentación de

Saccharomyces cerevisiae al metabolizar los azúcares naturales de la uva se

observó la botella casi a reventar en todas las muestras y en cada una de las

agitaciones durante las dos semanas siguientes después de juntar el inóculo y el

preinóculo en la misma botella y al girar la taparrosca se podía escuchar la salida

del gas y el olor a uva madura característico de los vinos.

Para cuantificar la producción de etanol en el vino se utilizó el densímetro en el

mosto de cada una de las muestras, antes de la fermentación se obtuvo una

gravedad original de 1.01 en todos estos, una vez transcurridos los 14 días de la

fermentación se observaron gravedades finales muy similares en cada uno de los

[10]

mostos de las diferentes uvas morada, verde, roja, blanca y orgánica (0.992, 0.993,

0.993, 0.994,0.992; respectivamente (figura 5).

Figura 5. Gravedad original y final del mosto de las distintas uvas antes y después de 14 días de

fermentación en presencia de la levadura Saccharomyces cerevisiae.

Finalmente se muestra en la figura 6 una grafica comparativa de la producción de

etanol a partir de los azucares metabolizados por Saccharomyces cerevisiae de las

uvas seleccionadas a través de la fermentación alcohólica, aplicando la formula

antes mencionada y utilizando las gravedades originales y finales para obtener el

porcentaje de etanol en los diferentes vinos artesanales elaborados (figura 6).

[11]

Figura 6. Porcentajes de etanol producidos por la levadura Saccharomyces cerevisiae al fermentar los azucares de las distintas uvas durante 14 días.

Análisis e interpretación de resultados

A través del uso de la biotecnología se pueden utilizar microorganismos para

producir bienes y servicios, de la gran inmensidad de estos se encuentran las

bebidas alcohólicas, estas pueden ser divididas en dos categorías: bebidas

fermentadas (vino, cerveza) y bebidas destiladas (whisky, ron, brandy, etc.). Las

bebidas fermentadas se elaboran utilizando un microorganismo (levadura) que

transforme el azúcar del jugo de la fruta en alcohol a través del proceso de

fermentación, con este proceso solo se obtienen bebidas con un contenido máximo

de alcohol equivalente a 14 grados que es la tolerancia máxima de la levadura

(Freile, 2011).

Con la ayuda del proceso de fermentación alcohólica se puede obtener además del

vino, una diversidad de productos a partir de sustratos no frutales, tales como la

cerveza africana, hecha a base de sorgo; la cerveza tradicional, elaborada a partir

de cebada; el pulque, producido con el jugo extraído del agave; el arroz, con el cual

se fabrica el “Sake” japonés (Freile, 2011).

[12]

Se nombra “vino” exclusivamente al liquido obtenido de la fermentación alcohólica

total o parcial del zumo de uvas, sin adición de sustancia alguna. Por otro lado,

cuando se emplea otro tipo de fruta, el producto siempre se denomina vino, pero

seguido del nombre de la fruta, por ejemplo: vino de naranja, vino de manzana, etc.,

(Ferreyra et al., 2009)

En este sentido, la producción de vino artesanal a partir de los distintos tipos de uva

y los contenidos del tema respiración celular (glucolisis y fermentación) apoyaron la

herramienta propuesta en este trabajo debido a que se observó el entusiasmo de

los estudiantes, al demostrar que les agrada que la clase sea distinta, las

actividades de este tema tan complejo incida en algo que forme parte de su realidad,

esto permitió que el estudiante se viera motivado a aprender al cambiar sus

estrategias de aprendizaje y cuestionar el contenido que observa. Sumado a esto,

el docente promovió un ambiente de confianza para que el alumno interactuara con

el objeto de conocimiento.

Tan importantes son los logros de los contenidos conceptuales como los

procedimentales y actitudinales que nuestra propuesta promovió destrezas

técnicas, manipulación de material respetando las normas de uso, la realización de

la actividad utilizando instrucciones, identificación y partes de cada una de las

etapas, descripción de gráficos y reacciones, todos ellos elementos que de acuerdo

con de Pro (2013) ayudan a crecer intelectualmente al estudiante, desarrollar sus

potencialidades, capacidades personales y colectivas que forman parte de una

enseñanza en las ciencias integral.

Esto produjo emotividad y generó sentimientos favorables hacia el aprendizaje,

estimulando la atención, receptividad del aprendiz, trabajo colaborativo y el sentido

de pertenencia a un grupo donde el compromiso de los estudiantes incrementó y el

ambiente de aprendizaje mejoró al fomentar el dialogo entre los alumnos, la

discusión de los distintos puntos de vista y la convivencia con los demás (figura 3).

Continuando con nuestros objetivos para poder observar cómo la fermentación de

Saccharomyces cerevisiae metaboliza los azúcares naturales de la uva hasta

producir etanol y CO2, se utilizó la prueba colorimétrica cualitativa con la solución

[13]

sulfocrómica (Hernández, s/f) ya que es conocido que esta solución cambia de color

cuando se reduce (gana electrones), estas reacciones de oxido-reducción ocurren

también en los alcoholes ya que se oxidan (perdida de electrones) al estar en

contacto con agentes oxidantes fuertes como lo es la solución sulfocrómica. En

virtud de ello, pudimos observar el cambio de coloración a simple vista (figura 4) ya

que, al mezclarse el etanol producido en el vino artesanal, la oxidación del etanol

en el medio ácido implica la pérdida de uno o más hidrógenos que tiene el grupo

OH y dependiendo del tipo de alcohol si es primario, secundario o terciario será el

producto obtenido. En este caso, es un alcohol primario (etanol) que solo posee dos

hidrógenos y puede perder uno para generar un aldehído. Al poner los tubos a baño

maría a 100°C, esto aseguró que el etanol generado reaccionara con la solución

sulfocrómica ocasionando un cambio de coloración virando del naranja-rojizo, al

amarillo-verdoso y finalmente al azul esto debido a la concentración de alcohol del

menos concentrado o nulo hasta el más concentrado (figura 4).

En lo que respecta a la producción de CO2, este gas fue fácil de apreciar ya que se

observaron las botellas muy infladas debido al burbujeo y liberación del gas que en

los primeros días fue pequeña, aumentó de manera dramática en la fase tumultuosa

con el trascurrir de los días y finalmente decayó al filo de los 13 y 14 días de

fermentación, realizadas con el mosto de cada una de las diferentes uvas en

presencia de las levaduras Saccharomyces cerevisiae, también al girar la

taparrosca se podía escuchar la salida del gas y el olor a uva madura característico

de los vinos, hasta que el sonido de la liberación del gas fue casi imperceptible,

debido a la degradación y transformación de los azucares en productos de excreción

celular como etanol y en este caso en particular CO2.

Para cuantificar la producción de etanol en el vino artesanal existen diversos

métodos, uno de ellos es comparar la densidad del líquido antes y después de

fermentar, es decir obtener la gravedad específica introduciendo el densímetro en

la probeta que contiene el líquido y una vez inmóvil efectuar la lectura de la masa

volúmica por la parte superior del menisco, que es una comparación de la densidad

de un líquido con respecto al agua pura (García y Xirau, 2006). La densidad del

agua pura es 1, dado que 1 kilogramo de agua tiene un volumen de 1 litro. De esta

[14]

manera, un líquido azucarado (como el mosto) tendrá una densidad siempre mayor

a 1.

Tomando en consideración lo anterior, se observó que en todos los casos del vino

artesanal la densidad del mosto de las distintas uvas antes de la fermentación

(gravedad original) fue de 1.01, una vez transcurridos los catorce días de

fermentación la segunda lectura tomada (gravedad final) arrojó distintos resultados:

0.992 uva morada, 0.993 para la uva verde, para la uva roja se obtuvo 0.993, para

la blanca 0.994 y finalmente para la uva orgánica se 0.992 masa volúmica

respectivamente, esta densidad indica la evolución de la fermentación alcohólica

para saber si el vino contiene o no azúcares residuales. La fermentación se

considera completa cuando la densidad en los vinos tintos se sitúa alrededor de

0,992 a 0,994 g/l y los vinos blancos 0,990 a 0,992 g/l (Pszczólkowski y Ceppi,

2001), como en los presentes resultados (figura 5).

La variación en ambas lecturas tiene dos razones, la primera de ellas es porque

Saccharomyces cerevisiae ha consumido los azucares que se encuentran en el

mosto y la segunda es porque ya se encuentra un volumen de alcohol en el líquido,

por ello la segunda lectura es menor, recordemos que el alcohol es menos denso

que el agua 0.79Kg/L.

Por último, una vez aplicada la formula mencionada en el desarrollo y utilizando

ambas gravedades, se puede observar en la gráfica de la figura 6, que los

porcentajes de etanol generados al fermentar los glúcidos del mosto en los distintos

vinos artesanales son muy similares y no existió diferencia estadísticamente

significativa entre el etanol obtenido esto debido a que, de acuerdo con García y

Xirau, (2006) las distintas uvas contienen de un 15 a un 25% de glucosa y fructosa.

No olvidemos que la glucosa(C6H12O6) o dextrosa, es el azúcar principal de la uva

que es convertida en alcohol por la levadura, estas reacciones llevadas a cabo a

nivel micro-celular por la levadura convierten cada molécula de glucosa en dos

moléculas de alcohol etílico (CH3CH2OH) y dos moléculas de dióxido de carbono

(CO2), debido a que las levaduras fermentan preferentemente la glucosa no

importando si la uva es morada, verde, roja, blanca u orgánica.

[15]

Si bien es cierto que los vinos artesanales elaborados, en promedio produjeron un

porcentaje de 2.25% de alcohol volumen, en comparación con los vinos comerciales

que producen entre 10 y 14% se deben tomar en cuenta diversos factores que

pudieron afectar la producción de etanol: a) se utilizaron uvas comerciales que no

están particularmente destinadas a hacer vino como sí lo son: Vitis vinífera o Vitis

labrusca (Miño et al., 2015); b) no se agregó al mosto, azúcar (sacarosa) la

denominada “chaptalización” una práctica muy controvertida que es utilizada para

conseguir el grado alcohólico deseado cuando la cantidad de azúcar en la fruta no

es suficiente, una práctica permitida en los vinos de algunos países como Francia,

Alemania o Brasil y prohibida en otros como Argentina o Chile (Muñoz, 2008); c) se

utilizó una botella plástica para llevar a cabo la fermentación, mientras que en los

vinos comerciales se utilizan barricas o toneles de roble francés o americano que

filtran a través de sus poros una microoxigenación controlada sobre los taninos del

vino y aportan sabores y aromas que lo enriquecen, así como la alteración del color

(Boudet, 2013) y d) el tiempo de fermentación que fue de catorce días en

comparación con los vinos comerciales que deben permanecer entre seis y

veinticuatro meses de reposo en la barrica en sitios cercanos al mar (Boudet, 2013).

A pesar de las limitantes mencionadas el vino obtenido tenia un sabor agradable al

paladar, un delicioso aroma y lo más importante puntualizar que la aplicación de los

conocimientos adquiridos en el aula en temas tan complejos como respiración

celular son de utilidad en esta estrecha relación que guarda la ciencia, tecnología y

sociedad.

La enseñanza de la biotecnología en la preparación de vino artesanal es un tema

multidisciplinario que exige no solo comprender procesos metabólicos aerobios o

anaerobios, conocimientos en tópicos relacionados con crecimiento de poblaciones

microbianas, factores limitantes, fermentación láctica, acética, alcohólica, oxido-

reducción, viraje, volumetría, ecología, entre otros, sino que además demanda

conocimientos químicos, biológicos y una buena dosis de ingenio para llevar a cabo

actividades prácticas y útiles con materiales simples y de bajo costo.

[16]

Conclusiones

La aplicación de los conocimientos biológicos y químicos adquiridos con el tema

respiración celular a partir de la enseñanza de la biotecnología con

microorganismos, fue de utilidad para el alumno ya que obtuvo vino artesanal que

presentó un sabor agradable al paladar y un delicioso aroma, evidenciando que lo

aprendido en el aula es útil en la vida cotidiana.

Se observó de manera clara como Saccharomyces cerevisiae fue capaz de

metabolizar los glúcidos a través de la fermentación, ya que la prueba colorimétrica

da evidencia contundente de la presencia de etanol al virar la muestra control de

color marrón al verde en el grupo experimental (vino artesanal).

La producción de CO2 fue fácil de apreciar debido al burbujeo, liberación del gas

que hincho la botella, así como al girar la taparrosca se podía escuchar el escape

de gas y olor a uva madura característico de los vinos.

Los porcentajes de etanol generados al fermentar los glúcidos del mosto en los

distintos vinos artesanales fueron muy similares y no existió diferencia

estadísticamente significativa entre los diferentes tipos de uva.

Vale la pena resaltar que la enseñanza de la biotecnología en la preparación de vino

artesanal es un tema multidisciplinario que demanda no solo conocimientos

biológicos y químicos, también es necesario contar con ingenio para llevar a cabo

actividades prácticas y útiles con materiales accesibles y de bajo costo para

comprender temas considerados complejos.

[17]

Fuentes de información

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., y Water, P. (2016). Biología

molecular de la célula. (6a ed.). Ediciones Omega; Barcelona, España. (pp. 94-99).

Audesirk, T., Audesirk, G., y Byers B. (2018). Biología. (1a ed.) Editorial Pearson,

México. (pp. 293-295).

Boudet, C. (2013). Las barricas en la elaboración de vino: ¿fermentación y

envejecimiento? Blog de Verema.com. [En línea]. Consultado el 26 de Febrero de

2018. Accesible en: https://www.verema.com/blog/verema/1072390-barricas-

elaboracion-vino-fermentacion-envejecimiento

de Pro, A. (2013). Enseñar procedimientos: por qué y para qué. Alambique.

Didáctica de las ciencias experimentales. Núm. 73, pp. 69-76.

Fajardo, E. y Sarmiento, S. (2007). Evaluación de la melaza de caña como sustrato

para la producción de Saccharomyces cerevisiae. Tesis de maestría de la Pontificia

Universidad Javeriana. Bogotá, Colombia. [En línea]. Consultado el 20 de Febrero

de 2018. Accesible en: http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ciencias/tesis26.pdf

Ferreyra, M., Schvab, M., Gerard, L.; Zapata, L.; Davies, C., & Hours, R. (2009).

Fermentación alcohólica de jugo de naranja con S. cerevisiae. Ciencia, Docencia y

Tecnología Nº 39, Año XX, (143-158).

Freile, D. (2011). Elaboración y control de vino de Arazá (Eugenia stipitata subsp.

sororia). Tesina de fin de Master. Master en tecnología, control y seguridad

alimentaria (CESIF, 2010. Madrid, España. [En línea]. Consultado el 22 de Febrero

de 2018. Accesible en:

http://repositorio.educacionsuperior.gob.ec/bitstream/28000/94/1/Elaboraci%C3%B

3n%20y%20control%20de%20vino.pdf

García, J. y Xirau, M. (2006). Técnicas usuales de análisis en Enología. Panreac

Química S.A. Impresiones Creacions Gráfiques Canigó. Madrid, España. [En línea].

Consultado el 26 de Febrero de 2018. Accesible en:

http://www.linlabrioja.com/_pdf/enologia_tecnicas.pdf

[18]

Hernández, M. (s/f). Bromatología. Farmacia y bioquímica. Curso: bromatología.

Universidad Los Ángeles de Chimbote. Chimbote, Perú. [En línea]. Consultado el

24 de Febrero de 2018. Accesible en:

http://files.selvafarma.webnode.es/200000004-

cc8f3cd897/PRUEBA%20COLORIMETRICA%20DEL%20ETANOL.pdf

Miño, J., Martos, M., Herrera, J., y Gonzalez, E. (2015). Fermentación alcohólica

con mosto de uva Niágara rosada y levaduras de la misma fruta. [En línea].

Consultado el 24 de Febrero de 2019. Accesible en:

http://centroazucar.uclv.edu.cu/media/articulos/PDF/2015/2/2%20Vol%2042%20N

o2%202015.pdf

Muñoz, M. (2008). Biotecnología y vida cotidiana. Manual de trabajos prácticos de

biotecnología. Vinos y vinagres. Instituto de Tecnología ORT. Río de Janeiro, Brasil.

[En línea]. Consultado el 26 de Febrero de 2018. Accesible en:

https://bteduc.com/manuais/MALAJOVICH_MANUAL_vinosyvinagres.pdf

Pszczólkowski, P. y Ceppi, C. (2001). Manual de vinificación. Guía práctica para la

elaboración de vinos. Ediciones Universidad Católica de Chile. Santiago, Chile. [En

línea]. Consultado el 26 de Febrero de 2018. Accesible en:

https://www.researchgate.net/profile/Philippo_Tomaszewski/publication/259284987

_Manual_de_Vinificacion_Guia_practica_para_la_elaboracion_de_vinos/links/5458

f8f30cf26d5090acfc56/Manual-de-Vinificacion-Guia-practica-para-la-elaboracion-

de-vinos.pdf