viroides mexico 1
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Los viroides de los cítricos:
Enfermedades y control
Núria Duran-Vila
Departamento de Protección Vegetal y Biotecnología
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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• El descubrimiento de los viroide como
agentes patógenos de citricos está
ligado a su propagación por injerto.
LOS VIROIDES DE LOS CITRICOS
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Historia de los cítricos injertados (1)
España 1850: Utilización de plantas injertadas
en lugar de plantas de semilla. Elección de un
buen patrón (cidro, limonero, naranjo dulce,
naranjo agrio,....
España 1862: La mayoría de patrones resultaron
ser sensibles a Phytophthora.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Phytophthora gummosis
on sweet orange seedling tree,
Bijayachap, Nepal, 1994
Daños producidos por PhytophthoraI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Historia de los cítricos injertados (2)
España 1862: La mayoría de patrones resultan ser
sensibles a Phytophthora. EL NARANJO AGRIO
resultó ser resistente.
España 1870: Auge del naranjo agrio como patrón
tolerante en España, los países de la cuenca del
Mediterráneo, California y América del Sur.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza
1904. Declinamiento de
árboles en Sudáfrica.
1930. Declinamiento rápido
de árboles en Argentina.
1937. La misma enfermedad
en Brasil.
1939. La misma enfermedad
en California.
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Declinamiento rápido afectaba los árboles sobre naranjo
agrio, pero no los árboles sobre otros patrones. Riverside,
California.
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Una nueva enfermedad en árboles
injertados en naranjo agrio: Tristeza
1946. La enfermedad es trasmisible por injerto
Probablemente causada por un virus
Los pulgones actuan como vectores
1963. Se observa el virus (CTV) por EM
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Control de la TristezaCTV:
Afecta la combinación de dos individuos: patrón
(naranjo amargo) y variedad (naranjo dulce,
mandarino y otros)
Búsqueda de patrones alternativos que den
combinaciones tolerantes:Poncirus trifoliata y sus híbridos (citranges,
citrumelo), naranjo, mandarino Cleopatra,
tangelos, limón rugoso, lima Rangpur,
Citrus volkameriana,…I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (1)
Exocortis (California, 1948)
Scaly butt (Australia, 1949)
Rangpur lime disease (Brazil, 1956)
Descamaciones: P. trifoliata,
citranges, citrumelos (?), lima
Rangpur, .....
Un viroide es el agente causal: CEVd
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Xiloporosis (Palestina, 1934)
Caquexia (Florida, 1950)
Acanaladuras y exudación de goma
en algunos patrones: lima dulce de
Palestine, tangelo Orlando, lima
Rangpur, C. macrophylla
Variedades: mandarinas, clementinas,
satumas, ....
Un viroide es el agente causal: HSVd
Problemas asociados con la sustitución
del naranjo amargo (2)
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¿Qué son los viroides?
Los viroides no son virus
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Viroides• Moléculas circulares de RNA monocatenario.
• Los viroids no codifican para proteínas.
• Replicación autónoma.
• Pequeño tamaño (246 y 401 nt.)
• Fósiles moleculares de un mundo precelular.
• Agentes fitopatógenos.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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• No EM
• No serología
• Análisis de ácidos nucleicos
Diagnóstico de viroides
exocortis
caquexia- xiloporosis
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
Estructura secundaria de los viroides
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• Auto-complementaridad.
• Estructura secundaria en forma de varilla.
• Apareamiento de bases alternando con bucles.
• Estabilidad.
• Transmisión mecánica.
Estructura secundaria de los viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Criterios de clasificación
• Pospiviroidae (PSTVd)
• Avsunviroidae (ASBVd)
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Viroides de cítricos
Familia Género Especie
Pospiviroidae Pospiviroid CEVd
Hostuviroid HSVd
Cocadviroid CBCVd (CVd-IV)
Apscaviroid CBLVd (CVd-I)
Apscaviroid CDVd (CVd-III)
Apscaviroid “CVd-OS”
Apscaviroid “CVd-V”I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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CBLVd
HSVd
CEVd
CDVd
CVd-IV
Viroides de cítricos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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CBLVd
HSVd
CEVd
CDVd
CVd-IV
Viroides de cítricos
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Enfermedades
producidas por viroides
Viroide Enfermedad
CEVd Exocortis
HSVd Caquexia (xiloporosis)
CBCVd
CBLVd
CDVd
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Enfermedades
producidas por viroides
• Exocortis producida por CEVd
• Caquexia producida por HSVd
• Efecto de otros viroides
• Métodos de control
• Otras enfermedades atribuidas a viroides
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CEVd es el agente causal de exocortisDescamaciones de la corteza en P. trifoliata
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Exocortis•Clementino injertado en Poncirus trifoliata
•Escamas en el patrón Poncirus trifoliata
•Enanismo acusado
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EnanismoI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Exocortis: CitrangesI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Exocortis: Citranges I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Exocortis: Citranges I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Exocortis: Clementino / C. carrizo
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Exocortis: Navelina / C. carrizo
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Síntomas en lima RangpurI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Síntomas en lima RangpurI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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HSVd es el agente causal de caquexiaExhudaciones de goma en tangelo Orlando
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Síntomas en Citrus macrophylla
![Page 42: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/42.jpg)
Síntomas en C.macrophylla como
patrón de limonero
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Síntomas en clementino
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![Page 45: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/45.jpg)
Cachexia
No-cachexia
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Síntomas de cachexia en
mandarino Parson’s I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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¿Qué producen los otros viroides?
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Otros síntomas causados por
viroides en P. trifoliata
CEVd HSVd CVd-IV
![Page 49: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/49.jpg)
Estos síntomas están asociados con
síntomas en corteza y madera
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Viroide Escamas Grietas Enanismo
CEVd + + Acusado
CBLVd - - Leve
CVd-III - - Moderado
CVd-IV - + -
HSVd - + Leve
Resumen
Alteraciones en P. trifoliata
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Other alterations:
Enanismo
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El enanismo causado por viroides
conduce a una reducción de la cosecha
Enanismo Cosecha
Control - 100%
CEVd Acusado 54%
CBLVd Leve 81%
CDVd Moderado 66%
CVd-IV - 99%
HSVd Leve 98%
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Disminución de la cosecha
![Page 54: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/54.jpg)
Las plantaciones de cítricos
Cualquier árbol sobre Poncirus trifoliata,
lima Rangpur, citrange Troyer o Carrizo es
sensible a exocortis y a otros viroides.
Cualquier árbol sobre C. macrophylla
es sensible a caquexia – xiloporosis.
Todos los mandarinos, clementinos,
satsumas e híbridos sobre cualquier patrón
son sensibles a caquexia – xiloporosis
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El material vegetal en relación a estas
enfermedades
Disponibilidad de plantas libres de viroides
(viveros autorizados)
Distribución de plantas portadoras de viroides
(viveros clandestinos)
Coexistencia de plantaciones antiguas sobre
naranjo amargo que aunque no manifiestan
síntomas son portadoras de viroides
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Control
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Epidemiología
• No se conocen vectores
• No hay transmisión por semilla
• Dispersión de las enfermedades:
Propagación de material infectado
Transmisión mecánica
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Las plantas portadoras de viroides son
reservorios desde los que pueden ser
transmitidos a plantas inicialmente sanas
Modo de transmisión:
• Propagación
• Sobreinjerto
• Transmisión mecánica
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Control de las enfermedades
producidas por viroides
• Utilizar material de propagación sano
• Utilizar yemas procedentes de plantas
sanas para el sobreinjerto
• Evitar la difusión de viroides mediante
transmisión mecánica
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Uso de material libre de viroides para la
propagación
Se necesitan métodos de detección
Se necesitan métodos de saneamiento
Cuarentena y certificación
Evitar la transmisión mecánica
Viveros
Plantaciones comerciales
Control de las enfermedades
producidas por viroides
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Métodos de detección
Bioensayo
Transmisión a plantas indicadoras
Observación de síntomas
Detección por métodos de laboratorio
Análisis de ácidos nucleicos
Detección biológica + laboratorio
El cidro actua como amplificador
Análisis de ácidos nucleicosI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Bioensayo
Bioensayo de exocortis
Uso de cidro Etrog como indicator
Se detectan los otros viroides
Bioensayo de caquexia
Mandariono Parson’s Special
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Respuesta del cidro Etrog
• Inoculation por injerto del cidro Etrog
• Incubación a 28-32ºC durante 3-6 meses
• Observación de síntomas
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CEVd HSVd
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Respuesta del mandarino Parson’s Special
• Inoculación por injerto del mandarino Parson’s
propagado sobre un patrón vigoroso.
• Incubación a 28-32ºC durante 9-15 meses
• Observación de síntomas en la unión
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Métodos de diagnóstico
+
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Métodos de diagnóstico
+
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Métodos de diagnóstico
+
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Hibridación Northern
RT-PCR
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Evitar la transmisión mecánica
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Otras enfermedades atribuidas a
viroides
“Quebra galho”
Corteza gomosa (“gummy bark”)
Bolsas de goma-acanaladuras gomosas
(“Gum pocket - Gummy pitting”)
Enfermedad de Kassala (“Kassala disease”)
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“Quebra-galho”
Desorden observado en limón Persa
![Page 72: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/72.jpg)
“Quebra-galho”: CEVd
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“Quebra-galho”: CEVd
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![Page 74: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/74.jpg)
“Quebra-galho” no es “Wood pocket”
![Page 75: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/75.jpg)
“Gummy bark”
Desorden descrito en naranjo dulce
Descrita en países del este del Mediterráneo,
Norte de Africa and Oriente próximo.
![Page 76: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/76.jpg)
“Gum pocket - Gummy pitting”
Desorden descrito en P. trifoliata
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![Page 77: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/77.jpg)
![Page 78: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/78.jpg)
“Kassala disease”
Desorden observado en toronja
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![Page 79: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/79.jpg)
Dra. Carmen Fagoaga
Dr. Juan Romero Durbán
Dra. Ana Palacio Bielsa
Dr. Mohammed Chaffai
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda
Dra. Mónica GandíaDra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becariaI V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
![Page 80: Viroides Mexico 1](https://reader034.vdocumento.com/reader034/viewer/2022052315/5571f2e849795947648d3b0d/html5/thumbnails/80.jpg)
Dra. Carmen Fagoaga
Dr. Juan Romero Durbán
Dra. Ana Palacio Bielsa
Dr. Mohammed Chaffai
Dr. Ziad Ghaleb Nimer Fadda
Dra. Mónica GandíaDra. Cristiane de Jesús Barbosa
Dra. Karelia Velázquez
Dra. Lucía Bernad Palomares
Dr. Pedro Serra Alfonso
Mehdi Beni Hashemian, becario
Nubia Murcia, becaria
Esther Debón, becaria
Dolores Abanto Peiró
Margarita Bazzi
Ana Gabriela Pagliano
José María Corvera Llúcia Martinez Priego
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