IV . COMUNICACIONES CORTAS

V ARIACION DEL pH DEL SUSTRATO Y CONTENIDO DE DIVERSOS NUTRIENTES EN EXPLANTOS DE ESPECIES LEÑOSAS CUL1IVADAS <<IN VITRO»

(NOTA PREVIA) Po r

M. CANTOS, J. M. MURrLLO, A. TRONCOSO (*) A . LEVA (**)

SUMMARY

VARIATION OF S BSTRATE pH AND SOME NUTRIENT CONTE TS1 IN EXPLANTS OF THE WOODY SPECJES GROWN «IN VITRO) (PR ELlMINARY RCSU LTS)

An «in vit ro» experimen t was design ed to study lhe nULrient content 01' ex ­plan ts of lNRA Pescoma lldor/u GF 677 peach x almo lld hybrid in (he MS (M U­RASHIGE & SKOOG), P4 and PM (FIORI O & LEVA) substrates. and (he cv ­lution of the substrates themselws with and wit hout explanr. . A ¡igh ( acidifí cation has been observed in th se subSlratcs wit hout cx planb al lhe end of lhe expai­men t, more pron unced in P4 a nd PM med ia . T he prescnce of expl¡.¡nls prod uces a ma rked init ial acidifica lÍon , with a subseq uent pH increase in MS and P.¡ subsl ra­tes (bUI nOL in lhe PM). The c.x.perimen l causes a decrease in nut rient contents of the subsl rates only in the case of N, P, Zn and eu (except Zn in P4 medi um). Con ­ten ls in Nan d P of exp lanls are ver} high (L1p lo 9 % in MS mediu m and 0 .8% in P.¡ medium, respect ively), and increase as lhe subst rate co nLenls increase

I In another experiment. ¡he in Ouencc 01' vary ing lhe Zn/C u ra lio of the MS anu PM subslralcs on growth of lhe explants and on thcir Zn and el! contcnls (app lc S tar Spur Colden) has been studied . In both med ia, lhe best to la l grow lh corres ­ponds lO a Zn /Cu ra ti o of 10/ I O (i. e., ~:oncenlralÍons of ZnS04. 71-1 10 ancJ CuSO... 5H 20 len limes highcr ¡han ¡hose of both subst rates) . High Zn level s in ¡he ex­pl ants (more Ihan 5.000 ppm), bul il Ís nol poss iblc lO 'ay whcthcr they are harm ­fui lo lhe explan lS as lhe bes t gra \\olh (l O/ lO rat io, MS medium) correspo nds lO a 4. 87 5 ppm Zn content i 11 lh e e . pla nts . T he 50 / 50 ralio ca uses a lso an inc rease ID

eu con l nts f lhe cxp lants , b UI In less degree than in Lhe case af Zn .

INTRODUCCION

El cultivo de plantas «in vilro» cuenta actualmente con diversas apli­caciones de interés agrícola. como la posibilidad de lograr una propaga ­ción clonal rápida de gran número de variedades vegetales de interés. Sin embargo, a pesar de la Imporlancia y ampl io desarrollo de esta técnica.

(*) Institu to de Recursos ~[j l uralt:s y Agrob iología. e.s.te.. Scvtlla (Apa rtado 1052). (*"l Instituto su !la Propagazione delle $peci.: Legnose, C. N. R. Florcnc a (Italia).

An. FdafoL Agrob io l. Págs. 1.6'i5 1.662 19~6

1.656 AN · LES DE DAFOLOG IA y >\GROB10LOG lt\

existen aspectos comparativamente poco estudiados. como, por ejemplo, las posibles variaciones de pH que experimenta el sustrato durante el cul­t ivo «in vitro».

Por otra parte, y en el caso concreto de las plantas arbóreas de fruto, también es relat ivamente escasa la informac ión existente sob re el estado nutritivo de los ex plantos durante su culti o «in vitro~~ (BARROSO y col. 1985) aspecto importante, puesto que, entre otros factores, debe in­fluir en la capacidad de resistencia de las plantas a las condiciones de l medio, fu era del ambiente controlado propio de la rnicropropagación, fase que resulta crítica en esta técnica. En el presen te trabajo se aborda n los a pectos que se han indicado, prestando especial atención a la iní1uencia que pueden tener algunos micronutrientes en el desarrollo y contenido correspondiente en los explan tos .

MATERIAL Y METODOS En el presente trabaj se utilizan tres medios nu t ritivos: MS (MURAS­

HrGE y SKOOG. 1962), p~ Y PM (FJORINO y LEVA, 1981). En todos los casos se añaden (ppm): liamina (0,1) , ácido ascórbico (lO) o glutatión (1 00, prueba de Zn y Cu), mioinositol (lOO), piridoxina (0,5), sacarosa (30 g/I), agar Dj fco (4,2 gil) Y bencil amino purina (1).

En un primer ensayo se estudia la variación del pH de los sustratos (7, 14 Y 21 días) y el contenido de N orgán ico y elementos minerales de los explantos del híbrido melocotón-almendro (portainjerto) lNRA ­pescomandorlo GF 677 (21 días de cu lt ivo), explanto procedentes de un sustrato MS con 1 ppm de BAP. Se uti lizan vasos de cultivo de 500 mI , 150 m i del sustrato correspondiente y 10 explantos po r vaso. El pH de cada sustrato se ajusta inicia lmente a 5,5, antes de su sterilización en au­toclave a 1200 C durante 10 minutos. La determinac ión de N orgánico se realiza por el procedim iento KJELDAHL y lectura posterior en autoana­lizador. Para la dete rminación de elementos minerales se sigue la metodo­logía de mineral ización (5000 C) y diso lución de cenizas (Hel) propuesta po r PINTA y col. ( [969, 1973), aunque sin la utilización de HF, dado que no lo ex igen la naturaleza de lo' ex plantos ni la de los sustratos (LA­CHICA Y ROBLES, 1974). La determinación de P se realiza por colori­metría (PINTA y col., 1969), así como e[ B, aunque en este caso por el procedim iento de la quinali zarina en medio sulfúrico (BARBIE R y CHA­BANNES. 19 53). Los elementos K y Na se detennina por fotometría de llama y los restantes nutrientes Ca, Mg, Fe, Mn, Zn y Cu po r espectrofo­tometría de absorción atómica.

En un segundo ensayo se estudia la influencia de diversas relaciones Zn/Cu del sustrato sobre el desa rro llo y contenidos de Zn y Cu de explan ­tos de manzano, variedad Stark Spur GoMen, procedentes de un sustrato MS con 1 ppm de BAP. La duración de la prueba es de 50 días y se ut ili ­zan Jos sustratos MS y PM, cuyo pH inicial se ajusta a 5,5. Las re laciones Zn/Cu que se ensayan son: 1/ 1, l/ lO, 10/ 1, 10/10 Y SO/50, donde la un i­dad representa la cantidad de ZnS04, 7H20 o de CUS04, 5H20 d cada sustrato en condiciones no rmales, esto es, 6,3 1 y 0 ,01 5 mg/l (PM) y 8,6 Y 0,025 mg/I (MS) respectivamente. Se utili zan vasos de 500 mI, 75 m I de sulrato, 5 explantos po r vaso y 5 repeticiones por cada tratamiento y me­dio.

En todos I ambiente esté mantcniéndo l tura de 25 ± n iea de 3.000

La figu ra utilizados, M plantos. Cua med io en el el caso del s todos los m l sign ificativa cia ele pH el tro en el m{ y col., (l?8' dio MS sin ' na de ensay

La prese su evolució¡ (fig. 1). pue censo muy

pH

4.8

4.6 ­

4.4

4 .2

4 .0

ME O

FIG . 1. - 1 tos y con (

1.657

)or ej emplo, -an te e l cul ­

as de fruto 'e el es tad~ lRROSO y :S, debe in­iciones del ;ación, fase bordan los influ encia contenido

MURAS­En lodos glu tatión arosa (30

tratos (7, s de los INRA­

es de un 500 mI, I pH de 1 en au ­m Ico se utoana­netodo­)puesta :', dado )$ (LA ­CO IOli ­

por el HA­

tría de :t ro fo­

~ I ones

ep lan­strato u ti! i­

:lOnes uni­

cada 8,6 y 11 1 de me-

LTI MOS <<IN V ITRO». VARIACION DEL pH

En todos los casos la man ipu lación del material vegetal se efectúa en ambiente esté ril, median te cámara de aire m icrofiltrado por flujo laminar manten iéndolo posterio rmente en cámara de crecimiento a una tem pera­tu ra de 25 ± 1.° C y un fotoperiodo de 16 ho ras de luz e intensidad lumí­nica de 3.000 lu xo

RESULTADOS y DISCUSION

La fi gura 1 muestra la evolución del pH de cada uno de los sustratos uti lizados, MS, P.¡ y PM, tanto con la presencia como con ausencia de ex­p lantos. Cuando no existen exp lantos, se observa una ac idificación del med io en el t ransc urso del tiempo, q ue es com parativamente pequeña en el caso del sustrato MS y algo más acusada e los sustratos PM y P4 . En todos los m uestreos efectuados las dife rencias de pH son estad isticamente signi ti cativas (p < 0,0 1), debido fundamentalmente a la mayor constan­

ia de p H en e l s ustrato MS y a l b rusco descenso que sufre este paráme­tro en el medio P4 durante la p rimera semana. Cabe indicar que L EVA y co l. , (1984), también observaron una acidificación ap reciable de l me­dio MS sin cxplantos, aunq ue ésta se produjo a partir de la quinta sema­na de ensayo.

La presencia de exp lantos influye claramente sobre el pH, puesto que su evolución en el medio es bastante diferente a la indicada anterio rmente (tig. 1). P uede comprobarse que en los tres sustratos el pH sufre un des­censo m uy acusado d u rante la primera semana de ensayo, especialmente

pH

4 .6 ­

4 .4

4 .2 4.2

4 .0

14

dias 21

4.0 ­

14 dias

21

M E D IO SIN EXPL ANT OS ME 010 CON EXPL AN TOS

FIG . 1. - Evo luc ión del plI en los sustratos MS (* ), P4 (*) v PM (*) sin explan­lOS y con explantos del híb rido 1 RA Pescoma/1dorlo GF 677 (melocotón x al­

m endro) .

I

1.658 NALES DE EDAFOLO<IIA y AGROAIO l OG IA

en e l caso de los sustratos MS y Poi. Posteriormente comienza una recupe­rac ión del pH en estos dos medios, recupemción que. no se observa en el medio PM durante el período que dura el ensayo. Los resultados de esta prueba confirman en gran medida los obtenidos previamente por LEVA y co l. (1984). Estos autores también observaron un acusado descenso inicial del pH en el sustrato ante la presencia de exp lanto , lo que atrib uyeron a un período inicia l de intensa actividad respiratoria de los explanto y una recuperac ión poste rior de este parámetro.

TABLA 1

Variación de los contenidos de N, P, Zn y Cu en los sustratos ensayados, tras el cultivo «in "itro» de explantos del híbrido INRA Pescomandor/o GF 6 77

MEDIO PERIODO N (%) P (%) Z n (ppm) Cu (pPI11)

INICIAL 1,29 0 ,1 0 39 ,7 4,2 MS

FINAL 0,08 34,4 3,6 1.1°

tiv idad celu le ya e ha COl

1983). Otros en estos proc riaciones imr sente trabajo .

La tab la 1 brido INRA sayados, a lo: efecti vamen t¡ notab le con t< ta n los exp lal n ivel del e le n observa un c( nidos de Ca como corres~

nidos de Fe,

INICIAL 1,08 0,16 34,5 3, 1 Contenido de 11

PM FI AL 0 ,76 0.14 30,8 2,4

INICIAL 1,2 0,29 52,2 2,1 P4

FINAL 0.98 0.28 55,7 1,4

Los re 'ullados se cx.presan sobre materia seca (liofí li Lación ).

En relación con la nutrición de los explantos se puede afirmar que, en principio, los elementos N, P, Zn y Cu son los que se absorben en mayor cantidad. puesto que só lo con ellos se han registrado algunas variaciones apreciab les a nivt:/ analítico, según se pone en ev idencia en la tabla 1, donde aparee n los contenidos inicial o fina ! de estos nutrientes en los sustralos, t ras 2 [ días de cultivo «io vitro» . Sólo en el sustrato p~ aparece un resu ltado aparentemente anóm' lo para el ln, dado que la concenl ra­ción fi na l es superior a la in icia l, ci rcunstancia que no puede se r explica ­da con los resu ltados obten idos en el presente trabajo. En los restan tes elem entos examinados, Ca, Mg, K, Na, Fe y Mn, no se encuen tran d ife­rencia. ap reciables entre los estados inicia l y fi nal. En genera l, e tos resu l­tados coinciden en gran medida con los obtenidos por BARROSO V col. , ( 198 5) ara manzano Go/den Dclicious, con la única excepción del Cu , pa ra el q ue I s autores ci tados no encuentran d iferencias aprecia bles. Pero la notab le coincidencia , en lo que se refiere a los nutrientes N, P Y Zn, pa rece ind ica r que una absorción fuerte de estos nutrientes puede ser un h c ho generalizado en el cul tivo de plantas «in vitre». Se lrata rea lmente de elementos muy eslre hamente relacionados con procesos de in ten a ac-

MEDIO

MS 9.00 PM 5, 14 Poi 8. 80

Los resu I tados SI

Ante esto «in vitro» un q ue facil ita fÍ; y que p redor pod ría con tri y o tros traba.

1nfluencia dE

Los resull los e lemento especia lme nl Otros nu trí 1

cantidades ir Cu BARR con manzan(

1.659

za una rccupe ­~ observa en el uItados de esta :e por LEVA y escenso inicial : at ribuyeron a '(plantos y una

ayados, tras el ·10 (lF 677

Cu (ppm)

4,2

3,6

3,1

2,4

CULTIMOS ,<I N VITRO,,- VAR IAC ION DEL pll

tividad celular, como es el complejo mecanismo de organogénesis, donde ya se ha comprobado la importancia de estos nutrientes (NICOLAS, 198 3). Otros elementos, como K y B, también juegan un papel relevante en estos procesos, aunque en el pri mer caso, K, no se han observado va ­riaciones importantes y en el segundo, B, no se han estudiado en el pre ­sente trabajo.

La tab la 11 recoge los contenidos de n utrientes de los explanlOs del hí­brido INRA pescomandorfo GF 677 c ul tivados en los tres sust ratos en ­sayados, a los 21 días de iniciado su subc ulti vo. Puede comprobarse que, efectivamente, la absorción de N y P es importante, como lo demuestra el notable contenido de ambos nu tr ientes (de N especia lmente) que presen­tan los exp lantos. Este con tenido es tan to mayor cuanto más elevado es el nive l de l elemento en el medio. Con los restantes nut rientes no siempre se observa un comportamiento definido, aunque cabe destacar que los conte­nidos de Ca y M g son comparativamente bajos y los de N, P Y K altos como corresponde a un material joven. También son elevados los conte ­nidos de Fe, Mn y Zn , siendo más normales los de Cu y B.

TABLA 11 Contenido de nutrientes en los explantos del híbrido JNRA Pescomandorlo GF 677

correspondientes al tercer control efectuado (21 días)

% ppm2,1

MEDIO N P K Ca Mg Na Fe Mn Zn Cu B1,4

rma r que, en en en mayor s variaciones n la tabla 1. .en tes en los

p~ aparece a concentra-ser expl ica­

los restan tes Jentran dife­, estos resul­.oSO y col., ;ión del Cu , :iablcs. Pero N, P y Zn,

uede ser un a rea lmente : intensa ac-

MS 9,00 0 .3 3 1,65 0,20 0, 10 0.09 249,0 130,0 164,0 5,0 26,0 PM 5,1 4 0,40 1.10 0,20 0,07 0,18 23 1,0 100,0 86,0 7,0 29,0 P4 8.80 0. 80 1,65 0,23 0.14 0.14 396 ,0 100,0 97.0 10,0 21 ,0

Los resultados se expresan sob re materi a seca (liofili zación).

Ante estos resultados, parece lógico admitir que exista en el cu ltivo «in vitro» una fase inicia l de intenso acúmulo de nutrientes, circunstancia que faci litaría el ajuste osmótico que requiere todo desarrollo organizado,

que predominaría sobre la acti vidad puramente fotosintét ica. Todo ello podria con trib uir a la acidificación inicia l del sustrato, observada en éste y ot ros trabajos anteriores (LEVA y col., 1984).

Innuencia de la concentración de Zn y eu del sustrato

Los resultados considerados hasta el momento ponen en evidencia que los elementos N y P son absorbidos de forma intensa por los explan tos, especialmente en las primeras fases de su cultivo o subcultivo «in vitro»). Otros nu trientes. como Zn y Cu, también parece que son absorbidos en cantidades importantes por los explantos, aunque en el caso concreto del Cu, BARROSO y col. , (1985) no aprecian esta circunstancia trabajando con manzano Colden DC'licious.

1.660 ANALES DE I:.DAFOLOGIA y :\GRODIOLOGI

dientemente (Con el fin de comprobar la intluencia que puede tener la concentra­ IU) . Puede ce

ción de estos dos nutrientes en e; medio , sobre su absorción por los ex­ zar conten idoplantos, se decidió reali ar un segundo ensayo util izando diversas relacio­ en plantas . nes entre ambos e lementos y [a va riedad de ma nza no Stark Sp ur Golden. tam bién puee La tabla III presenta los resultados que se han obtenido en relación con la (tab la IIl), nucomposición de la p lanta, en fun ción de esto dos nu trientes, as í amo los su ltados pa revalo res de cant idad de crecimiento (número de brotes por longi tud) de los portante en I explanLOs. que tener en

m uy ' upen OJTABLA 111 puede facili ta

otra ue tíónInOuencia de di\'ersas relaciones Zn/Cu del medio sobre el desarrollo (*) v conte~ nidos de Zn y eu de explantos de manzano S tark Sp ur Golden. Los resultados se absorber C u,

expresan sobre materia seca (liofilización) bajas frente a siva de Cu al más que la d, Tratamiento Re lac ión Zn/Cu Z n ppm C u ppm

(Zn/Cu) Medio dd medio expln t. explnt. Desa rrollo to a desarro ll al medio cor

PM 377 ,1 292 ,5 4,0 48,1 ción 1011 O, s 1/1 sustrato son 1

( control ) MS 307.5 301,0 3,0 42 ,9 minu ye conSI

a l menos enPM 3.771,1 1.992 ,0 3,0 49.3 marse que la

10/ 1 del sustrato FMS 3.075 .5 2.56 7,0 7,0 41,8 pues, n e l 1

PM 37,7 177 ,0 3,0 65 ,5 ** tos de 4 .87 5 1/l0 gistrado (Tat

MS 30 ,8 155 ,5 4,0 104.5 ** mente, la ab~ de especies I

PM 377,1 1.55 7,0 3,0 74,7 ** de cierta can lO/ lO en cuenta , a

MS 307,5 4.875,0 4,0 177 ,4 ** que incluso dad que e l ~PM 377,1 5.392 O 13,0 23,9 ** efectuándose50/ 50

MS 307.5 4.38 7,0 6,0 57 ,6**

(*) Expresado como producto del número medio de brotes por la longitud (mm) media de estos brotes (valores medios de 5 explantos y 5 repeti ciones).

(**l Va lores significativos con relación al con trol (p < 0,0 I l.

Puede comprobarse q ue cuando la relación Z n/ u es 1/1 (relación rea l de 377 .1 para e l medio PM y 30"1 .6 para el su trato MS) los contenidos de Zn de los ex plantos son sim il ares, próx imos a 300 ppm en ambos casos, contenidos realmente altos que pueden ser deb idos, parcia lmen te al me­nos, a que se trata de una prueba de corta d uración. Cuando se adiciona C u a l medio re lación Zn/Cu l / 10, se reduce el conten ido de Z n de los explantos, per no varía prácticamente su n ive l de C u (Tabla 111) .

Ahora b ien, lo resultados más sorprendentes que se han obtenido en esta pru ba corresponden a una adic ión al ta de Zn al med io, indepen-

Se estudi exp la nt s de ¡­sustrato' MS la evol ución ( sustratos su fre los medios P4

sada , inc reme días), no hab i t s , P, Zn ~ n utritivos con en tre los co nt tos . Los conte

1.661

~ r la conccn tra­ión po r los ex­ii versas relacio­'k Sp ur Golden. re lación con la

:!S, así como los longitud) de los

rollo (* ) r conte­..A)S resultados se

n Desa rrollo

48, l

42 ,9

49,3

4 1,8

65,5 **

104,5 **

74,7 **

177,4**

23,9 **

57,6 **

j (mm) media de

(re lació n rea l ontenidos de :llnbos casos, nente a l rne­) se ad iciona j e Zn de los 11 1). obtenido en io, indcpen -

CULT IMOS «IN VITRO" . VAHIACION DEL pI!

d ientemente de que la razón Z n/Cu del sustrato se incremente o no (tab la I1I) . Puede comprobarse que, efectivamente, los exp lantos p ueden a lcan ­zar con tenidos de Zn p ró ximos a 5.000 ppm, va lores to tal mente inusuales en plantas. Au nque una fuerte ad ic ión para lela de C u (relación SO/50) ta mbién puede incrementa r los nive les de este elemento en los exp lantos (tabla IJI), nunca se ll ega a valo res tan elevados como los de Zn. Estos re­sul tados parecen con fi rmar q ue efectivamente, la abso rción de Zn es im­portante en los cultivos «in vitro» de plan tas lefi osas. S in embargo, hay que tene r en cuenta que los sustratos ensayados p resenta n ni veles de Zn m uy super iores a los de eu, más de 300 veces, lo que ind udab lemente puede fac il itar la ac umulación de Zn. Esta circunstancia plan tea, además, o tra cuestión interesante, como la capacidad q ue tienen los explantos de abso rber Cu, elemen tos que aparece en el medio en concentraciones muy bajas frente a las de Zn. Es interesante comprobar cómo la adición exclu­siva de C u a l medio (relac ión 1/ I O) favorece el desarro llo de los explantos más q ue la de Zn (re lación 1O/!), aun que los mejores resu ltados en cuan­to a desarrollo se refie re, se obt ienen cuando ambos nutrientes se añaden al medio conj untamente, en cantidades a ltas, au nq ue no excesivas (rela­ció n 10/ 10, sustrato MS. tabla 111). Si los nive les de Zn y C u añadidos al sustrato son m uy altos (relación 50/50), el desarro llo de los explantos dis­minuye conside rablemente en el medio PM, a un q ue no en el sustra to MS, a l menos en relación al test igo (relaci ón 1/ 1). Si n embargo, no puede afi r­marse que la elevada concentración de Zn de los exp lantos procedentes del sust rato PM (5392 ppm, Zn/Cu 50/ 50) influya en su escaso desarro llo , pues, en el sust rato MS, por ejemplo, u n contenido de Zn en los exp lan­tos de 4.875 ppm corresponde al mayor desarrol lo de cuantos se han re­gist rado (T abla 111). Por el momento sólo puede indicarse que, e fecti va­mente, la absorción de Zn «in vitro~> es muy notable, tratándose al menos de especies leñosas, cuyo desarrollo parece ser favorec ido por la adición de cierta cantidad de este nutriente al sustrato. Es muy importante tener en cuenta , además, su re lación con el Cu, y con o t ros micronut rientes, que in cluso pueden ser absorbidos, proporcionalmente, en mayor canti­dad q ue el Zn. Se trata de aspectos interesantes cuyo estudio continúa efectuándose.

RESUMEN

Se estud ia « in vitro» la evolución del pH y el contenido de nutrientes de los cxplan tos de híbrido INRA Pescomandorlo GF 6 77 (melocotón x a lmendro) en los sustratos MS (MU RAS_H IGE-SKOOG), P4 y PM (FIORINO y LEVA), así como la evolución de los propios sustratos con y sin explanlos. Sin explantos, los tres sust ratos su fren una ligera ac id ifi cación al (ina l de la p rueba, más pronunciada en los medios P4 y PM. Con exp lantos se produce una acid ifi cación in icia l más ac u­sada , incrementando después el pH de los sustratos MS y P4 (a part ir de los 7 días), no habiéndose observado esta recupe ración en el sus trato PM. Los elemen­tos N , P, Z n y Cu son los que sufren una dismin ución más acusada en los medios nutritivos como consecuencia del cult ivo. No se aprecian variaciones sign ificativas entre los contenidos inicial y [inal de Ca . Mg, K. Na, Fe y Mn de los tres sustra­lOS . Los contenidos de N y P de los explantos ~on m uy altos (hasta 9 %, en MS, y

..--­

1.662 Al ALES DE EDAFOLOGI -\ y A ROSIOLOGIA

0,8% en P4 , respect i amente), ' iendo más elevados cuando mayor es su ni ve l en el sus tralO correspondiente.

En una segunda prueba se estud ia la inOuencia de las variac iones de las rela ­cÍo í'es Z n/C u de los sustra to:; MS y PM n el d sarrollo y con t n id o de Ln y Cu de exp : ~ n tos de manza no S lark Spur Cuiden c ult ivados « in vitrm) en los sustratos indicados . En a m bos medi s se obtiene el may r desarro llo pa ra una re lac ión Zn/Cu de 10/ 10 (cont rol 1/ 1, siendo la unidad la can tidad de Z nS04 7H~O y CUS04, 5H20 normal en los dos sust ra tos). Concentracio nes a ltas de Zn en el me­dio (razón 50/5 0) determ inan ni ve les m uy altos en los exp lantos (más de 5.000 ppm), sin qu e pueda a fi rmar. e por e l m omento que p uedan res ultar perjud ic ia les, pues el máxi 1110 desarrollo ohservado (razón 1011 0, med io MS). coincide con un ni vel de 4.875 ppm de Zn en los ex p lan tos. Una ad ición fuerte de C u tam bi én in ­

rementa los niveles del n trien t en los exp lantos. a unque no de fo rm a tan sor­prendente como en el caso d 1 Z n.

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Rec ibido : 31- : -$\ 6 Aceptado: 24-11 -87

NORMAS PARA

1.- Envr'o. - J EDAFOLOGIA te guientes apartado registro. Se devoh Deber," enviarse I

2.- Tr'tulo. - E su contenido. Se~ donde ha Sido rei tulo abreviado.

3.- Resumen .­resumen, que eOIl experimental, si e las conclusiones e la traducción al i del mismo en frar

4.- Redacción más concisa posil por una sola Cal': podrán indicar, p niente se realice l

5.- Bib/iograf. sable, que tenga mentarios extenSl

Dichas referel correlativamente cita se consignará

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