GRUPO GRUPO SYMSYM

SYM - Señal y Medida en QuímicaIQMA - Departamento de Química

Universidad Politécnica de Valencia

10 Doctores10 Doctores• 7 PDI• 3 Contratados• 7 PDI• 3 Contratados

7 Becarios Pre-Doctorales7 Becarios Pre-Doctorales

2 Técnicos de Laboratorio2 Técnicos de Laboratorio

PERSONALPERSONAL

• Desde 1991 el grupo está desarrollando investigaciones en el área inmunoanalítica relacionadas con problemáticasmedioambientales, agrícolas y alimentarias

• Además, desarrolla otros proyectos de investigación menoresrelacionados con la calidad de las aguas y del suelo, y sobrela revalorización de residuos

• Todas las actividades están financiadas por diferentesprogramas de investigación competitivos (españoles y europeos) y por la Universidad Politécnica de Valencia

• Finalmente, colabora con diferentes empresas españolas en la solución y desarrollo de aspectos de interés común

GRUPO GRUPO SYM SYM -- PresentaciPresentacióónn

Líneas de investigaciónÁreas de

aplicaciónResultados científicos

(5 últimos años)Inmunoanálisis

• Síntesis de haptenos

• Desarrollo de ELISAs

• Desarrollo de Tiras reactivas

Biosensores

• Inmunosensores en flujo

• Sistemas basados en Micromatrices

BIOMEMS

• Derivatización superficies poliméricas

• Sistemas basados en Discos Compactos

Agricultura

Alimentos

Medioambiente

Proyectos > 15-InvestigaciónCICYT,DGES,GV,UPV, EU

-Transferencia Tecnol.PETRI, PROFIT,…

Publicaciones > 50

Patentes3 Internacionales3 Nacionales

Tesis Doctorales 5 Defendidas 7 En realización

Congresos > 40

GRUPO GRUPO SYMSYM

Título del proyecto Organismo y referencia del proyecto

Estudio de formatos homogéneos-heterogéneosaplicados a sistemas inmunosensores

MCYTRef. BQU2003-02729

Desarrollo de inmunoensayos multirresiduo en soportes interactivos para el screening de plaguicidas en el medio acuático

MCYTRef. BQU2003-02777

Ultrahigh sensitivity spot-waveguide biosensor on a highly integrated chip for simultaneous diagnosis of multiple diseases. SABIO

European UnionFP6-2004-IST-4

Desarrollo de tiras reactivas para el screening de plaguicidas organofosforados en vegetales

FECOAM

Nuevos formatos de inmunoensayo para la determinación de drogas con actividadfarmacológica en alimentos

MECBIO2001-3024

Proyectos de InvestigaciónProyectos de InvestigaciónGRUPO GRUPO SYMSYM

LÍNEAS DE TRABAJO

Síntesis de inmunorreactivosDesarrollo de ensayos (ELISA)

Residuos de contaminantes

• Síntesis de haptenos

• Inmunización

• Obtención anticuerpos

policlonales

• Síntesis de trazadores

y otros inmunorreactivos

• Puesta a punto de ensayos tipo ELISA

• Caracterización ensayos

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Varias estructuras propuestasVarias estructuras propuestas

ObtenciObtencióón de suerosn de sueros PurificaciPurificacióón de anticuerposn de anticuerpos

UniUnióón a proten a proteíínasnas SSííntesisntesis

DiseDiseñño deo dehaptenoshaptenos

DiseDiseñño de o de competidorescompetidores

MolMoléécula pequecula pequeññaa

INMUNINMUNÓÓGENOSGENOS

((conjugadosconjugados para tapizado y para tapizado y trazadorestrazadores) )

InmunorreactivosPlaguicidas: Atrazina, Carbaril, 3,5,6-tricloro-2-piridinol, Irgarol,

Organofosforados: Diazinón, Fentión, Malatión, Clorpirifos

Cloroacetanilidas: Alacloro, Acetocloro, Metolacloro

Fenoxiácidos: 2,4-D, 2,4,5-TP, 2,4-DB, MCPA

Triclosán

Clorofenoles: Pentaclorofenol, 1-naftol

Trihalometanos

Ésteres ftálicos

AntibióticosTetraciclinas - Oxitetraciclina, clortetraciclina, tetraciclinaSulfonamidas - STZ, SSZ, SMX

GRUPO GRUPO SYMSYM

• Desarrollo de inmunosensores ópticos automatizados

Residuos herbicidas y sulfonamidas

• Desarrollo de tiras reactivas

Residuos organofosforados

• Desarrollo Micromatrices multianalito

en soportes interactivos tipo CD

μELISAS

Ensayos de SNPs y expresión génica

Ensayos para Proteómica

LÍNEAS DE TRABAJO

Desarrollo de Biosensores

Desarrollo de nuevos formatos de ensayo

a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)

ControlAtrazinaCarbaril

a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)a) b) c) d) e) f)

ControlAtrazinaCarbaril

GRUPO GRUPO SYMSYM

ABC

D E FG

H

AHG

FEDC

B

S S SS P PPS SS

A

E

SISTEMA SENSOR

Lum

inis

cenc

ia (u

.e.)

tiempo

1. Competición2. Captura3. Lavado4. Revelado5. Regeneración

ETAPAS

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Analito I50 Límite de detección

Rango dinámico

Carbaryl 0,12 0,016 0,04 - 0,85

Atrazina 0,05 0,007 0,01 - 0,23

Irgarol 1051 0,05 0,010 0,02 - 0,16

3,5,6-Tricloro-2-piridinol 0,13 0,021 0,04 - 0,50

Glifosato 0,18 0,021 0,05 - 1,00

Pentaclorofenol 19,0 1,3 3,7 - 82,0

Sulfatiazol 3,2 0,11 0,4 - 24,0

SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOSENSORES (µg/L)SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOSENSORES (µg/L)

GRUPO GRUPO SYMSYM

Analito Matriz Nivel de adición

Recuperación media (%)

Carbaryl AguaMiel

1 µg/L0,5 mg/kg

104113

Atrazina Agua rio 12 µg/L 98

Irgarol 1051 Agua mar 0,5 µg/L 104

3,5,6-Tricloro-2-piridinol Agua lagoAgua mar

0,5 µg/L0,5 µg/L

95

Glifosato AguaSuelo

0,75 µg/L 60 µg/kg

107103

Pentaclorofenol Agua 50 µg/L 109

Sulfatiazol Agua 50 µg/L 103

APLICACIÓN DE LOS INMUNOSENSORESAPLICACIÓN DE LOS INMUNOSENSORESGRUPO GRUPO SYMSYM

ACTUALMENTE: 20-25 min/ensayo

REDUCCIÓN DE TIEMPOS DE ENSAYO (1- 5 min/ensayo)

Aumento de la capacidad de trabajo de los sensores Aumento de la capacidad de trabajo de los sensores

• Regeneración del inmunosensor• Marcaje de haptenos con fluoróforos

Aspectos a resolverAspectos a resolver

Nuevo formato de ensayo Homogéneo-Heterogéneo

Materiales de acceso restringido (RAM)

Procedimiento general de marcaje

Hapteno

Hapteno-COOH + H2N-TGCAGACACAACTA-F*

Oligonucleótido marcado (fluoróforo)

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MICROMATRICES MULTIANALITO EN SOPORTES INTERACTIVOS PARA

ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS

MICROMATRICES MULTIANALITO EN SOPORTES INTERACTIVOS PARA

ANÁLISIS DE RESIDUOS DE PLAGUICIDAS

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BlancoTestigo

Resultado

100 µm200 µm

4. Resultado4. Resultado

MICROMICRO--ELISA ARRAYELISA ARRAY

1. Ordenación espacial conjugados1. Ordenación espacial conjugados 3. Lavado y adición del trazador3. Lavado y adición del trazador2. Adición muestra y anticuerpos específicos2. Adición muestra y anticuerpos específicos

CD

Conjugados de hapteno

Analitos

Anticuerpos específicos

Trazador

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LÍNEAS DE TRABAJO

Derivatización química de superficies como soportes para

anclaje de bio-receptores

BIOMEMS

• Modificación química superficial de polimetilmetacrilato (PMMA)

• Modificación química superficial de policarbonato (PC)

• Anclaje covalente de proteínas y oligonucleótidos sobre superficies poliméricas modificadas

• Modificación química superficial de óxido de silicio y nitruro de silicio para anclaje covalente de proteínas

GRUPO GRUPO SYMSYM

SLOT-WAVEGUIDE

Variación del índicede refracción 3 veces mayor que en las ondas guiadasconvencionales

Ultrahigh sensitivity Slot-wAveguide BIOsensor (SABIO)on a highly integrated chip for

simultaneous diagnosis ofmultiple diseases

Ultrahigh sensitivity Slot-wAveguide BIOsensor (SABIO)on a highly integrated chip for

simultaneous diagnosis ofmultiple diseases

UPV (NTC-SYM)

Universidad Politécnica de ValenciaCamino de Vera s/n, Valencia. C.P. - 46022

e-mail: ciqma@upv.eshttp://www.upv.es/iqma

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