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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO Tesina de grado previo a la obtención del título de Licenciado en Laboratorio Clínico e Histopatológico TEMA: IMPORTANCIA DE LA PRUEBA HBsAg CASSETTE COMO AYUDA DE DIAGNOSTICO PARA HEPATITIS DEL TIPO B EN PACIENTES ATENDIDOS EN EL SUB CENTRO DE SALUD Nª 6 DE LA CIUDAD DE RIOBAMBAEN EL PERIODO DE MAYO SEPTIEMBRE DEL 2007 AUTORES: MEJÌA MOROCHO CARLOS ALFREDO COLCHA LÒPEZ RUPERTO SAÙL TUTOR: Lcda. XIMENA ROBALINO RIOBAMBA - ECUADOR 2011

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Page 1: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

I

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE TECNOLOGIacuteA MEacuteDICA

ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLIacuteNICO E

HISTOPATOLOacuteGICO

Tesina de grado previo a la obtencioacuten del tiacutetulo de Licenciado en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico

TEMA

ldquoIMPORTANCIA DE LA PRUEBA HBsAg CASSETTE COMO AYUDA

DE DIAGNOSTICO PARA HEPATITIS DEL TIPO B EN PACIENTES

ATENDIDOS EN EL SUB CENTRO DE SALUD Nordf 6 DE LA CIUDAD DE

RIOBAMBAEN EL PERIODO DE MAYO ndash SEPTIEMBRE DEL 2007 ldquo

AUTORES

MEJIgraveA MOROCHO CARLOS ALFREDO

COLCHA LOgravePEZ RUPERTO SAUgraveL

TUTOR Lcda XIMENA ROBALINO

RIOBAMBA - ECUADOR

2011

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE TECNOLOGIacuteA MEacuteDICA

ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLIacuteNICO E

HISTOPATOLOacuteGICO

TEMA

ldquoIMPORTANCIA DE LA PRUEBA HBsAg CASSETTE COMO AYUDA

DE DIAGNOgraveSTICO PARA LA HEPATITIS TIPO B EN PACIENTES

ATENDIDOS EN EL SUB CENTRO DE SALUD Nordf 6 DE LA CIUDAD DE

RIOBAMBAEN EL PERIODO DE MAYO ndash SEPTIEMBRE DEL 2007 ldquo Tesina de grado que se presenta como requisito para obtener el tiacutetulo de Licenciado en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico

APROBADO POR EL TRIBUNAL

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

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helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Nombre Firma

Nota Final

ACEPTACIOacuteN DEL TUTOR(A)

Por la presente hago constar que he leiacutedo el protocolo del Proyecto de Grado

Presentado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea para optar al tiacutetulo de Licenciados en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico y que acepto asesorar a los estudiantes en

calidad de tutora durante la etapa del desarrollo del trabajo hasta su presentacioacuten

y evaluacioacuten

Riobamba 10 de mayo del 2011

XIMERA ROBALINO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Nombre y firma del tutor

DERECHOS DE AUTORIA

Nosotros Mejiacutea Morocho Carlos Alfredo y

Colcha Loacutepez Ruperto Sauacutel somos

responsables de las ideas doctrinas

pensamientos y resultados expuestos en el

presente trabajo los derechos de autoriacutea

pertenecen a la UNIVERSIDAD NACIONAL

DE CHIMBORAZO

AGRADECIMIENTO

A mis educadores que sin condicioacuten alguna

me han instruido con sus conocimientos y

voluntad para formarme como profesional

A la Universidad Nacional de Chimborazo y

en especial a la Escuela de Tecnologiacutea

Meacutedica con su rama de Laboratorio Cliacutenico

por los conocimientos que me entregaron

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE TECNOLOGIacuteA MEacuteDICA

ESPECIALIDAD DE LABORATORIO CLIacuteNICO E

HISTOPATOLOacuteGICO

TEMA

ldquoIMPORTANCIA DE LA PRUEBA HBsAg CASSETTE COMO AYUDA

DE DIAGNOgraveSTICO PARA LA HEPATITIS TIPO B EN PACIENTES

ATENDIDOS EN EL SUB CENTRO DE SALUD Nordf 6 DE LA CIUDAD DE

RIOBAMBAEN EL PERIODO DE MAYO ndash SEPTIEMBRE DEL 2007 ldquo Tesina de grado que se presenta como requisito para obtener el tiacutetulo de Licenciado en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico

APROBADO POR EL TRIBUNAL

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Nombre Firma

Nota Final

ACEPTACIOacuteN DEL TUTOR(A)

Por la presente hago constar que he leiacutedo el protocolo del Proyecto de Grado

Presentado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea para optar al tiacutetulo de Licenciados en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico y que acepto asesorar a los estudiantes en

calidad de tutora durante la etapa del desarrollo del trabajo hasta su presentacioacuten

y evaluacioacuten

Riobamba 10 de mayo del 2011

XIMERA ROBALINO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Nombre y firma del tutor

DERECHOS DE AUTORIA

Nosotros Mejiacutea Morocho Carlos Alfredo y

Colcha Loacutepez Ruperto Sauacutel somos

responsables de las ideas doctrinas

pensamientos y resultados expuestos en el

presente trabajo los derechos de autoriacutea

pertenecen a la UNIVERSIDAD NACIONAL

DE CHIMBORAZO

AGRADECIMIENTO

A mis educadores que sin condicioacuten alguna

me han instruido con sus conocimientos y

voluntad para formarme como profesional

A la Universidad Nacional de Chimborazo y

en especial a la Escuela de Tecnologiacutea

Meacutedica con su rama de Laboratorio Cliacutenico

por los conocimientos que me entregaron

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 3: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

ACEPTACIOacuteN DEL TUTOR(A)

Por la presente hago constar que he leiacutedo el protocolo del Proyecto de Grado

Presentado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea para optar al tiacutetulo de Licenciados en

Laboratorio Cliacutenico e Histopatoloacutegico y que acepto asesorar a los estudiantes en

calidad de tutora durante la etapa del desarrollo del trabajo hasta su presentacioacuten

y evaluacioacuten

Riobamba 10 de mayo del 2011

XIMERA ROBALINO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

Nombre y firma del tutor

DERECHOS DE AUTORIA

Nosotros Mejiacutea Morocho Carlos Alfredo y

Colcha Loacutepez Ruperto Sauacutel somos

responsables de las ideas doctrinas

pensamientos y resultados expuestos en el

presente trabajo los derechos de autoriacutea

pertenecen a la UNIVERSIDAD NACIONAL

DE CHIMBORAZO

AGRADECIMIENTO

A mis educadores que sin condicioacuten alguna

me han instruido con sus conocimientos y

voluntad para formarme como profesional

A la Universidad Nacional de Chimborazo y

en especial a la Escuela de Tecnologiacutea

Meacutedica con su rama de Laboratorio Cliacutenico

por los conocimientos que me entregaron

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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DERECHOS DE AUTORIA

Nosotros Mejiacutea Morocho Carlos Alfredo y

Colcha Loacutepez Ruperto Sauacutel somos

responsables de las ideas doctrinas

pensamientos y resultados expuestos en el

presente trabajo los derechos de autoriacutea

pertenecen a la UNIVERSIDAD NACIONAL

DE CHIMBORAZO

AGRADECIMIENTO

A mis educadores que sin condicioacuten alguna

me han instruido con sus conocimientos y

voluntad para formarme como profesional

A la Universidad Nacional de Chimborazo y

en especial a la Escuela de Tecnologiacutea

Meacutedica con su rama de Laboratorio Cliacutenico

por los conocimientos que me entregaron

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 5: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

AGRADECIMIENTO

A mis educadores que sin condicioacuten alguna

me han instruido con sus conocimientos y

voluntad para formarme como profesional

A la Universidad Nacional de Chimborazo y

en especial a la Escuela de Tecnologiacutea

Meacutedica con su rama de Laboratorio Cliacutenico

por los conocimientos que me entregaron

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 6: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

DEDICATORIA

Dedico a dios por guiarme por la senda de la

sabiduriacutea a mi hija Arianita Maitte quien con

su sonrisa angelical me ha inspirado para

alcanzar esta meta tan importante de mi vida a

mi esposa Victoria a mis padres hermanos y a

todos los que me supieron apoyar para hacer

este esfuerzo realidad

SAUacuteL COLCHA

DEDICATORIA

A quienes carintildeosamente me supieron

incentivar para vencer los obstaacuteculos y

lograr el eacutexito obtenido a mis padres

hermanos profesores y amigos es a quien

va dedicado este trabajo

CARLOS MEJIacuteA

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 7: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

RESUMEN

La presente investigacioacuten es una revisioacuten bibliograacutefica de antecedentes

recolectados en el laboratorio cliacutenico del Instituto Nacional de Higiene Leopoldo

Izquieta Peacuterez Nordf6 de la provincia de Chimborazo en el periodo de mayo-

septiembre del 2007 puesto que cumple un papel muy importante para el

diagnogravestico de una enfermedad del hiacutegado causada por los virus de la hepatitis

tipo A B y C La hepatitis B es la infeccioacuten del hiacutegado maacutes comuacuten del mundo La

causa el virus de la hepatitis B (VHB (su sigla en castellano)oacute HBV (su sigla en

ingleacutes) que ataca al hiacutegado y lo lesiona si no es detectada y tratada en forma

temprana puede producir fibrosis cirrosis e incluso caacutencer hepaacutetico

(hepatocarcinoma) es causa importante de necesidad de trasplante de hiacutegado

tiene un periodo aprox de incubacioacuten de 45 -160 diacuteas con una media de 100 diacuteas

Una de las principales caracteriacutesticas de la Hepatitis B es que en la mayoriacutea de los

casos no presenta siacutentomas visibles hasta que no estaacute en un periacuteodo avanzado o

bien en su etapa aguda que muchas veces es confundido con un malestar

hepaacutetico pasajeroSe transmite por la sangre las relaciones sexuales sin

proteccioacuten las agujas compartidas o reutilizadas y de la madre infectada al bebeacute

recieacuten nacido durante el parto La mayor parte de los adultos infectados pueden

librarse del virus de la hepatitis B sin ninguacuten problema pero algunos adultos y la

mayoriacutea de los bebeacutes y nintildeos infectados no pueden deshacerse del virus y

desarrollan infecciones croacutenicasLo bueno es que hay una vacuna segura para

prevenir la infeccioacuten de hepatitis B y existen tratamientos nuevos para los que ya

estaacuten infectados con el virusDetectada a tiempo la hepatitis B tiene tratamiento

farmacoloacutegico que prescribiraacute un medico especialista en hiacutegado (hepatoacutelogo)

Para el diagnoacutestico de la HBsAg se utilizoacute la prueba cualitativa de cassette dando

como resultado el 100 que corresponden a los 50 pacientes realizadas la prueba

no presentan el virus de la hepatitis B Con los datos obtenidos en la

investigacioacuten se procedioacute a realizar los diferentes cuadros estadiacutesticos dando sus

respectivas conclusiones y recomendaciones

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 8: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

SUMMARY

The present investigation is a bibliographical revision of antecedents gathered in

the clinical laboratory of the National Institute of HigieneLeopoldoIzquieta Peacuterez

Nordf6 of the county of Chimborazo in the period of May-September of the 2007

since it completes a very important paper for the diagnostic of an illness of the

liver caused by the virus of the hepatitis type TO B and C The hepatitis B is the

infection of the liver more common of the world The cause the virus of the

hepatitis B (VHB (their acronym in Castilian) or HBV (their acronym in English)

that it attacks to the liver and it injures it if it is not detected and tried in early

form it can produce fibrosis cirrhosis and even hepatic cancer

(hepatocarcinoma) it is important cause of necessity of liver transplant heshe

has one period aprox of incubation of 45 -160 days with a stocking of 100 days

One of the main characteristics of the Hepatitis B is that in most of the cases it

doesnt present visible symptoms until it is not in an advanced period or in their

sharp stage that many times are confused with an uneasiness hepatic passenger It

is transmitted by the blood the sexual relationships without protection the shared

needles or reutilized and of the mother infected the baby recently born during the

childbirth Most of the infected adults can get rid of the virus of the hepatitis B

without any problem but some adults and most of the babies and infected children

cannot come undone of the virus and they develop chronic infections The good

thing is that there is a sure vaccine to prevent the hepatitis infection B and new

treatments exist for those that are already infected with the virus Detected the

hepatitis on time B heshe has pharmacological treatment that will prescribe a I

prescribe specialist in liver (hematology) For the diagnosis of the HBsAg the

qualitative test of cassette was used giving 100 that correspond the 50 carried

out patients the test as a result they dont present the virus of the hepatitis B With

the data obtained in the investigation you proceeded to carry out the different

statistical squares giving their respective conclusions and recommendations

IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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IacuteNDICE

PAacuteGINAS PRELIMINARES

Derechos de autoriacutea

Dedicatoria

Agradecimiento

Resumen

Summary

INTRODUCCIOacuteN 1

CAPIgraveTULO I

1 MARCO REFERENCIAL- 3

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA- 3

12 FORMULACIOgraveN DEL PROBLEMA- 4

13 OBJETIVOS- 4

131 OBJETIVO GENERAL- 4

132 OBJETIVOS ESPECIgraveFICOS- 4

14 JUSTIFICACIOgraveN- 5

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 10: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

CAPITULO II

2 MARCO TEORICO 6

21 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIOgraveN 6

22FUNDAMENTACION TEOacuteRICA 6

221 EL HIGADO 6

2211 ANATOMIA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip7

22111 ASPECTOS GENERALES 7

2212 CIRCULACIOgraveN SANGUINEA 10

2213 FISIOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip11

2214HISTOLOGIgraveA DEL HIgraveGADO 12

222 HEPATITIS 14

2221 TIPOS DE HEPATITIS 15

22211 HEPATITIS A 15

22212 HEPATITIS B 15

22213 HEPATITIS C 18

22214 HEPATITIS D 20

22215 HEPATITIS E 22

223 CAUSAS DE LA HEPATITIS B

helliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip23

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 11: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

2231 VIAS DE TRANSMISIOgraveN 24

224 CUADRO

CLIgraveNICOhelliphelliphelliphelliphelliphellip25

225 DIAGNOgraveSTICO 26

226 PREVENCIOgraveN 27

227 INMUNOLOGIgraveA 28

2271 TIPOS DE INMUNIDAD 31

2272 ANTIgraveGENO 34

2273 ANTICUERPO 34

2274 TIPOS DE REACCIOgraveN ANTIgraveGENO -

ANTICUERPOhelliphelliphelliphelliphelliphellip35

228 FUNDAMENTO DE LA TEgraveCNICA 35

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA 35

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE

HEPATITIS B hellip37

229 OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE HEPATITIS B 44

2291MARCADORES SEROLOgraveLIGOS 45

2210 CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip

47

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS 48

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOShelliphelliphellip 49

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES 52

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 12: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

241 HIPOgraveTESIS 52

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN 52

25 OPERACIONALIZACIOgraveN DE VARIABLES 53

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO 54

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO 54

313 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN 54

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN 54

313 TIPO DE STUDIO 54

32 POBLACION Y MUESTRA 54

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS 55

331 OBSERVACION 55

332 INSTRUMENTOS 55

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANALISIS DE RESULTADOS

helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

341 TEgraveCNICAS ESTADISTICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip55

TABLA Nordm 1 56

TABLA Nordm 2 57

CAPITULO IV

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 13: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

4 CONCLUCIONES YRECOMENDACIONES 58

41CONCLUSIONES 58

42 RECOMENDACIONES 59

BIBLIOGRAFIAhelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip60

ANEXOShelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip62

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 14: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

INTRODUCCIOacuteN

La hepatitis B es una enfermedad inflamatoria del hiacutegado producida por el virus

de la hepatitis B (VHB) y caracterizada por diversos signos y siacutentomas de

comienzo raacutepido o bien de curso leve o asintomaacutetico El virus se transmite a

traveacutes de suero contaminado secreciones o empleo de agujas o instrumentos

contaminados saliva exudado de heridas secreciones cervicales o seminales

transfusiones exposicioacuten de mucosas a sangre o fluidos corporales contacto

percutaacuteneo con objetos inanimados contaminados relaciones heacutetero y

homosexuales y transmisioacuten materna fetal

Se sabe desde hace mucho tiempo que la viacutea percutaacutenea es una de las maacutes

importantes en la transmisioacuten de la hepatitis B pero la denominacioacuten anticuada de

laquohepatitis seacutericaraquo no es una etiqueta adecuada para el espectro epidemioloacutegico de

la infeccioacuten por VHB que hoy conocemos Seguacuten se indica maacutes adelante la

mayoriacutea de las hepatitis transmitidas por transfusioacuten sanguiacutenea no son causadas

por el VHB Ademaacutes en aproximadamente la mitad de los pacientes con hepatitis

aguda de tipo B no hay antecedentes de ninguna exposicioacuten percutaacutenea

identificable Actualmente se acepta que muchos casos de hepatitis de tipo B se

deben a formas menos evidentes de transmisioacuten no percutaacutenea encubierta Se ha

detectado HbsAg en casi todos los liacutequidos corporales de las personas infectadas

saliva lagrimas liacutequido seminal liacutequido cefalorraquiacutedeo ascitis leche liacutequido

sinovial jugo gaacutestrico liacutequido pleural y orina e incluso en raras ocasiones en las

heces Tambieacuten se ha descrito la transmisioacuten del virus de hepatitis B en

procedimientos quiruacutergicos donde los cirujanos han sido portadores de hepatitis B

con serologiacutea negativa

El virus de hepatitis B es un virus DNA de tamantildeo medio Es capaz de inducir

hepatitis aguda o croacutenica siendo tambieacuten causa importante en la morbilidad y

mortalidad por enfermedad hepaacutetica alrededor del mundo Estaacute descrito que

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 15: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

dependiendo de ciertos factores el 95 de pacientes con hepatitis croacutenica se

puede conducir a cirrosis carcinoma hepatocelular y muerte

En la Hepatitis B debe considerarse el peligro que representa dada su alta

frecuencia Soacutelo en Estados Unidos se informa de 50 mil a 100 mil nuevos casos

al antildeo calculaacutendose que en el mundo existen de 400 a 500 millones de personas

infectadas y que del 5 al 10 son portadores croacutenicos de la enfermedad

Se calcula que 300000 personas se infectan con el virus de hepatitis B cada antildeo

Una cuarta parte enferma con ictericia maacutes de 10000 pacientes requieren

hospitalizacioacuten y en promedio 250 fallecen de hepatitis fulminante por antildeo

Entre 6 y 10 de adultos joacutevenes se convierten en portadores Soacutelo en Estados

Unidos se estima un milloacuten de portadores La hepatitis croacutenica activa se presenta

entre 10 y 15 de los portadores y a menudo progresa a cirrosis Asiacute mismo los

portadores de virus presentan un riesgo de 12 a 300 veces mayor a sufrir caacutencer

hepaacutetico comparados con la poblacioacuten en general

CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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CAPIacuteTULO I

1 MARCO REFERENCIAL

11 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La hepatitis B es reconocida mundialmente como un problema de salud puacuteblica

importante Sin embargo sus proyecciones son difiacuteciles de cuantificar ya que el

acceso al diagnoacutestico etioloacutegico se limita por lo general a la determinacioacuten del

antiacutegeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y tanto el cuadro cliacutenico como el

patroacuten de laboratorio inespeciacutefico es similar al de hepatitis producida por otros

virus

Las intervenciones en salud puacuteblica maacutes comunes para prevenir la transmisioacuten del

virus de la hepatitis B son las siguientes a) impedir la transmisioacuten por sangre y

hemoderivados a traveacutes de la deteccioacuten de portadores croacutenicos y proscripcioacuten del

comercio de sangre b) vacunacioacuten en nintildeos adolescentes y adultos de

poblaciones seleccionadas c) prevencioacuten de la transmisioacuten sexual a traveacutes de las

praacutecticas de sexo seguro d) uso de material desechable y esterilizacioacuten en los

procedimientos meacutedicos y sanitarios invasivos e) evitacioacuten de la transmisioacuten

perinatal mediante la deteccioacuten oportuna en madres y la vacunacioacuten temprana del

recieacuten nacido y f) precauciones estaacutendar en la atencioacuten a pacientes que evitan el

riesgo de accidentes laborales y ademaacutes vacunacioacuten en este grupo de alto riesgo

Las acciones de prevencioacuten de transmisioacuten sexual orientadas sobre todo a la

evitacioacuten del VIHSIDA aunque uacutetiles tambieacuten para la prevencioacuten de la hepatitis

B se iniciaron desde 1985 y en 1999 comenzoacute la incorporacioacuten de la vacunacioacuten

en el esquema establecido

Por consiguiente la prevalencia de la hepatitis B es el resultado de la transmisioacuten

natural del virus pero tambieacuten algunas de las intervenciones han tenido efecto

sobre la transmisioacuten de esta enfermedad Con esta investigacioacuten se quiere llegar a

las autoridades competentes de la ciudad y del paiacutes para que dicten charlas

conferencias talleres etc

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

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12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 17: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

12 FORMULACIOacuteN DEL PROBLEMA

iquestCuaacutel es la importancia de la prueba HBsAg en cassette como ayuda de

diagnoacutestico para hepatitis tipo B en pacientes atendidos en el Sub-Centro de salud

Nordf 6 de la ciudad de Riobamba en el periodo Mayo ndash Septiembre del 2007

13 OBJETIVOS

131 OBJETIVO GENERAL

Determinar la presencia o ausencia del antiacutegeno de la Hepatitis B

mediante la prueba de inmunocromatografiacutea en cassetteHBsAg en

pacientes atendidos en el sub centro de salud Nordf 6 de la ciudad de

Riobamba en el periodo Mayo-Septiembre del 2007

132 OBJETIVOS ESPECIacuteFICOS

Identificar las causas y viacuteas de transmisioacuten por la cual se produce la

enfermedad

Determinar las ventajas y desventajas del meacutetodo de diagnoacutestico utilizado

en los pacientes

Tabular los datos estadiacutesticos obtenidos en Laboratorio cliacutenico del sub

centro Nordf6 de la provincia de Chimborazo realizando las debidas

conclusiones y recomendaciones

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

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7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 18: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

14 JUSTIFICACIOacuteN

Laimportancia del anaacutelisis del tema de investigacioacuten planteada es que a traveacutes de

este se podraacute profundizar y poner en praacutectica los conocimientos adquiridos

durante el transcurso del ciclo universitario Ademaacutes siendo la hepatitis B uno de

los problemas sociales es fundamental saber a queacute grupos afecta asiacute como

identificar las principales causas

Los bajos recursos econoacutemicos y la poca informacioacuten hacen que esta problemaacutetica

pase inadvertida ocasionando en lo posterior complicaciones que en algunos

casos son mortales

Al conocer las causas y efectos de esta enfermedad se puede contribuir de gran

forma prestando ayuda mediante la prevencioacuten de la misma con la realizacioacuten de

actividades y tratamientos que ayuden a combatir este problema evitando el

avance o aparicioacuten de esta enfermedad llegando asiacute a salvar las vidas de muchas

personas

A la vez esta investigacioacuten se la realiza porque va hacer de gran ayuda para

muchos estudiantes para el desarrollo de proacuteximas investigaciones fuente de

estudio o consulta

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

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Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 19: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

CAPIacuteTULO II

2 MARCO TEOacuteRICO

21 ANTECEDENTES DE INVESTIGACIOacuteN

En la Universidad Nacional de Chimborazo no se ha encontrado un trabajo

similar al que se ha realizado es de responsabilidad del autor todas las

investigaciones y los datos que se presentan en este trabajo siendo la meta

primordial que esta indagacioacuten sirva como una guiacutea tanto para el educador como

para el estudiante

22 FUNDAMENTACIOacuteN TEOacuteRICA

221 EL HIacuteGADO

Fuente Enciclopedia Encarta 2009

El hiacutegado es un oacutergano o viacutescera del cuerpo humano y a la vez la glaacutendula maacutes

voluminosa de la anatomiacutea y una de las maacutes importantes en cuanto a la actividad

metaboacutelica del organismo Desempentildea funciones uacutenicas y vitales como la siacutentesis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 20: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

de proteiacutenas plasmaacuteticas funcioacuten desintoxicante almaceacuten de vitaminas

glucoacutegeno etc Ademaacutes es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias

que pueden resultar nocivas para el organismo transformaacutendolas en otras inocuas

2211 ANATOMIA DEL HIGADO

El hiacutegado se localiza en la regioacuten del hipocondrio derecho del abdomen (no

sobrepasa el liacutemite del reborde costal salvo en caso de hepatomegalia) llenando el

espacio de la cuacutepula diafragmaacutetica donde puede alcanzar hasta la quinta costilla

y se relaciona con el corazoacuten a traveacutes del centro freacutenico a la izquierda de la

cavainferior Su consistencia es blanda y depresible y estaacute recubierto por una

caacutepsula fibrosa sobre la cual se aplica el peritoneo parte de la superficie del

hiacutegado (excepto en el aacuterea desnuda del hiacutegado que corresponde a su superficie

postero-superior)

22111 ASPECTOS GENERALES

Forma se compara con la mitad superior del ovoide horizontal de gran

extremo derecho alargado transversalmente

Coloracioacuten rojo pardo

Consistencia friable (fraacutegil) Estaacute constituido por un pareacutenquima rodeado

por una fina caacutepsula fibrosa llamada caacutepsula deGlisson

Longitud en el adulto mide aproximadamente 28 por 15 cm en sentido

antero posterior y 8 cm de espesor a nivel del loacutebulo derecho

Peso aproximado 1500 g aproximadamente

Estaacute dividido en cuatro loacutebulos

loacutebulo derecho situado a la derecha del ligamento falciforme

loacutebulo izquierdo extendido sobre el estoacutemago y situado a la izquierda del

ligamento falciforme

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 21: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

loacutebulo cuadrado visible solamente en la cara inferior del hiacutegado se

encuentra limitado por el surco umbilical a la izquierda el lecho vesicular

a la derecha y el hilio del hiacutegado por detraacutes

loacutebulo de Spiegel (loacutebulo caudado) situado entre el borde posterior del

hilio hepaacutetico por delante la vena cava por detraacutes

Cliacutenicamente y quiruacutergicamente sobre todo se emplea el concepto de segmento

hepaacutetico basaacutendose en las divisiones arteriales y en el hecho de que haya pocas

anastomosis entre segmentos Si miramos por la cara antero superior del hiacutegado

podemos distinguir de derecha a izquierda un segmento posterior en el borde del

lado derecho seguido de un segmento anterior un segmento medial y un

segmento lateral que forma el liacutemite izquierdo

El hiacutegado se relaciona principalmente con estructuras situadas al lado izquierdo

del abdomen muchas de las cuales dejan una impresioacuten en la cara inferior del

loacutebulo derecho del hiacutegado

Asiacute tenemos de atraacutes a delante la impresioacuten coacutelica la impresioacuten duodenal pegada

a la fosa ciacutestica y la impresioacuten renal menos marcada En la cara inferior del

loacutebulo izquierdo estaacuten la impresioacuten gaacutestrica y la escotadura del esoacutefago en el

borde posterior El hiacutegado tambieacuten se relaciona anatoacutemicamente con el diafragma

y con el corazoacuten

La base del hiacutegado da entrada al hilio hepaacutetico que no es sino la zona de entrada

de la vena porta la arteria hepaacutetica y la salida del conducto hepaacutetico El omento

(epiploacuten) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada

tubeacuterculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hiacutegado (surco del

ligamento venoso surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la

cara inferior donde el peritoneoque lo recubre pasa a revestir el diafragma y la

pared posterior formando el ligamento hepatorrenal Por delante el peritoneo

reviste la cara diafragmaacutetica hasta su liacutemite superior donde salta a revestir la cara

abdominal del diafragma Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 22: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

superficie del hiacutegado al diafragma queda comprendida la cara desnuda del

hiacutegado zona en la que el peritoneo no recubre la caacutepsula hepaacutetica Por esta zona la

cava inferior se relaciona con el hiacutegado y recibe las venas hepaacuteticas

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

Cara inferior del hiacutegado

En la cara diafragmaacutetica se encuentra el ligamento falciforme el cual se extiende

hasta alcanzar la zona umbilical Por su borde libre corre el ligamento redondo del

hiacutegado (restos de la vena umbilical embrionaria) Este resto de la vena umbilical

se une a las venas subcutaacuteneas peri umbilicales que irradian desde el ombligo las

cuales drenan en la vena iliacuteaca externa y finalmente en la cava inferior En casos

patoloacutegicos con hipertensioacuten portal estas venas se dilatan dando lugar al

fenoacutemeno de la cabeza de Medusa

El ligamento falciforme puede ser considerado como el resto del mesogastrio

ventral (en la porcioacuten no desarrollada del septum transversum por la invasioacuten

embrionaria del brote duodenal) que se extiende por el mesogastrio ventral y que

contribuye a la formacioacuten del hiacutegado Este ligamento al llegar a la parte posterior

de la cara diafragmaacutetica del hiacutegado se divide en dos hojas dando lugar al

ligamento coronario (liacutemite superior del aacuterea desnuda del hiacutegado) Cada una de

estas hojas se dirige hacia cada uno de los bordes derecho e izquierdo del hiacutegado

en donde se une a la hoja peritoneal de la cara visceral del hiacutegado que se refleja

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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al National Institutes of Health Consensus Development conference

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5 Enciclopedia Encarta 2009

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7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 23: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

sobre el diafragma formando los ligamentos triangulares derecho e izquierdo

(eacuteste uacuteltimo maacutes definido que el derecho)

2212CIRCULACION SANGUINEA DEL HIGADO

Fuente bp3bloggercomCG0v26rrXCws320higado4jpg

La circulacioacuten hepaacutetica es de naturaleza centriacutepeta y estaacute formada por el sistema

porta y la arteria hepaacutetica El sistema porta constituye el 70-75 por ciento del flujo

sanguiacuteneo (15 mlmin) y contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes

proveniente del tracto gastrointestinal y del bazo La circulacioacuten general depende

de la arteria hepaacutetica rama del tronco celiacuteaco que contiene la sangre oxigenada

(irrigacioacuten nutricia)

Cada espacio porta se encuentra en la confluencia de los lobulillos hepaacuteticos que

son formaciones maacutes o menos hexagonales de ceacutelulas hepaacuteticas y que posee en el

centro la vena centrolobulillar cuya confluencia da lugar a las venas hepaacuteticas

que finalmente drenan en la vena cava inferior Por lo tanto la sangre rica en

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 24: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

nutrientes de la absorcioacuten intestinal (vena porta) y en oxiacutegeno (arteria hepaacutetica) se

mezcla en los sinusoides hepaacuteticos (espacios entre hepatocitos) para

metabolizarlos y sintetizar las sales biliares Fenoacutemenos infecciosos toacutexicos e

inflamatorios entre otros desestructuran los lobulillos hepaacuteticos y los espacios

porta conduciendo a la hipertensioacuten portal porque obstaculizan el flujo sanguiacuteneo

En los uacuteltimos estudios acerca de los componentes del hiacutegado se ha encontrado

que eacuteste tiene la capacidad de producir gastrina y ayudar al estoacutemago en el

vaciamiento gaacutestrico ya que posee un citocromo llamado AS57 Este oacutergano es

el principal productor de la urea la que posteriormente es excretada en los

rintildeones

2213FISIOLOGIacuteA DEL HIacuteGADO

El hiacutegado desempentildea muacuteltiples funciones en el organismocomo son

produccioacuten de bilis el hiacutegado excreta la bilis hacia la viacutea biliar y de alliacute al

duodeno La bilis es necesaria para la digestioacuten de los alimentos

metabolismo de los carbohidratos

o la gluconeogeacutenesis es la formacioacuten de glucosa a partir de ciertos

aminoaacutecidos lactato y glicerol

o la glucogenoacutelisis es la fragmentacioacuten de glucoacutegeno para liberar

glucosa en la sangre

o la glucogenogeacutenesis es la siacutentesis de glucoacutegeno a partir de glucosa

eliminacioacuten de insulina y de otras hormonas

metabolismo de los liacutepidos

o siacutentesis de colesterol

o produccioacuten de trigliceacuteridos

siacutentesis de proteiacutenas como la albuacutemina y las lipoproteiacutenas

siacutentesis de factores de coagulacioacuten como el fibrinoacutegeno (I) la protrombina

(II) la globulina aceleradora (V) proconvertina (VII) el factor anti

hemofiacutelico B (IX) y el factor Stuart-Prower (X)

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 25: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

desintoxicacioacuten de la sangre

o neutralizacioacuten de toxinas la mayor parte de los faacutermacos y de la

hemoglobina

transformacioacuten del amonio en urea

depoacutesito de muacuteltiples sustancias como

o glucosa en forma de glucoacutegeno (un reservorio importante de

aproximadamente 150 g)

o vitamina B12 hierro cobre

En el primer trimestre del embarazo el hiacutegado es el principal oacutergano de

produccioacuten de gloacutebulos rojos en el feto A partir de la semana 12 de la

gestacioacuten la meacutedula oacutesea asume esta funcioacuten

2214 HISTOLOGIacuteA HEPAacuteTICA

Fuente lh4ggphtcomestructura20higadojpg

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 26: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

El tejido hepaacutetico es un tejido estable Presenta una gran capacidad de

regeneracioacuten en respuesta a estiacutemulos externos como lesiones o procesos

tumorales Sin embargo las lesiones croacutenicas como el alcoholismo y las

infecciones hepaacuteticas implican una peacuterdida constante y prolongada del

pareacutenquima sin la proliferacioacuten compensatoria necesaria En consecuencia el

pareacutenquima hepaacutetico es reemplazado por tejido fibroso y cuacutemulos de grasa

produciendo asiacute cirrosis

El pareacutenquima hepaacutetico estaacute formado por

lobulillos hepaacuteticos son subunidades irregularmente hexagonales

formadas por laacuteminas fenestradas de hepatocitos que se disponen en forma

radiada en torno a una vena central o vena centrolobulillar ubicada en el

centro del lobulillo

espacios porta o triacuteadas son aacutereas triangulares situadas en los aacutengulos de

los lobulillos hepaacuteticos constituidas por un estroma conjuntivo laxo

contienen en su interior una rama de la arteria hepaacutetica una rama de la

vena porta un capilar linfaacutetico y un conductillo biliar la bilis producida

por los hepatocitos se vierte en una red de canaliacuteculos dentro de las

laacuteminas de hepatocitos y fluye en forma centriacutepeta al lobulillo hacia los

conductillos biliares de los espacios porta

sinusoides hepaacuteticos son capilares que se disponen entre las laacuteminas de

hepatocitos y donde confluyen desde la periferia de los lobulillos las

ramas de la arteria hepaacutetica y de la vena porta la sangre fluye desde las

triacuteadas hasta la vena central circulando en forma centriacutepeta la pared de

los sinusoides estaacute formada por una capa discontinua de ceacutelulas

endoteliales fenestradas que carecen de membrana basal En los

sinusoides confluyen la circulacioacuten hepaacutetica y porta Eacutestos drenan su

contenido a la vena hepaacutetica central de eacutesta a las venas hepaacuteticas derecha

e izquierda y finalmente a la vena cava inferior

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 27: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

espacio de Disse es un estrecho espacio peri sinusoidal que se encuentra

entre la pared de los sinusoides y las laacuteminas de hepatocitos ocupado por

una red de fibras reticulares y plasma sanguiacuteneo que bantildea libremente la

superficie de los hepatocitos En el espacio de Disse se produce el

intercambio metaboacutelico entre los hepatocitos y el plasma donde se forma

la abundante linfa hepaacutetica En este espacio tambieacuten se encuentran ceacutelulas

almacenadoras de grasa de forma estrellada y con una funcioacuten auacuten poco

conocida

ceacutelulas de Kupffer son macroacutefagos fijos pertenecientes al sistema

fagociacutetico mononuclear que se encuentran adheridos al endotelio y que

emiten sus prolongaciones hacia el espacio de Disse Su funcioacuten es

fagocitareritrocitos envejecidos y otros antiacutegenos Ademaacutes actuacutean como

ceacutelulas presentadoras de antiacutegeno

Los hepatocitos constituyen alrededor del 80 por ciento de la poblacioacuten

celular del tejido hepaacutetico Son ceacutelulas polieacutedricas con 1 o 2 nuacutecleos

esfeacutericos poliploides y un nucleacuteolo prominente Presentan el citoplasma

acidoacutefilo con cuerpos basoacutefilos y son muy ricos en orgaacutenulos Ademaacutes en

su citoplasma contienen inclusiones de glucoacutegeno y grasa La membrana

plasmaacutetica de los hepatocitos presenta un dominio sinusoidal con micro

vellosidades que mira hacia el espacio de Disse y un dominio lateral que

mira hacia el hepatocito vecino Las membranas plasmaacuteticas de dos

hepatocitos contiguos delimitan un canaliacuteculo donde seraacute secretada la bilis

La presencia de muacuteltiples orgaacutenulos en el hepatocito se relaciona con sus

muacuteltiples funciones la siacutentesis de proteiacutenas (albuacutemina fibrinoacutegeno y

lipoproteiacutenas del plasma) el metabolismo de hidratos de carbono la

formacioacuten de bilis el catabolismo de faacutermacos y toacutexicos y el metabolismo

de liacutepidos purinas y gluconeogeacutenesis (centro para el control de las

enfermedadeshttpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm)

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

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5 Enciclopedia Encarta 2009

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 28: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

222 HEPATITIS

La hepatitis es una afeccioacuten o enfermedad inflamatoria que afecta al hiacutegado Su

causa puede ser infecciosa (viral bacteriana etc) inmunoloacutegica (por auto-

anticuerpos) o toacutexica (por ejemplo por alcohol venenos o faacutermacos) Tambieacuten es

considerada dependiendo de su etiologiacutea una enfermedad de transmisioacuten sexual

Hay virus especiacuteficos para la hepatitis es decir aquellos que soacutelo provocan

hepatitis Existen muchos virus A virus B C D E F G Los maacutes importantes

son los virus A B C y en menor medida el D y el E siendo los uacuteltimos F y G

los uacuteltimos descritos y los menos estudiados

2221 TIPOS DE HEPATITIS

22211 HEPATITIS A

Se transmite por viacutea enteacuterica o fecal-oral (aguas residuales) y tiene un periodo de

incubacioacuten de unas 4 semanas El HAV soacutelo se reproduce en el hiacutegado pero estaacute

presente ademaacutes en bilis heces y sangre al final del periodo de incubacioacuten Su

infeccioacuten disminuye raacutepidamente una vez que la ictericia se hace evidente

bull Durante la fase aguda hasta 6 meses o incluso maacutes se detectan anticuerpos

anti HAV de tipo IgM

bull En cambio en la fase de convalecencia predominan y se detectan

anticuerpos anti-HAV de tipo IgG que confieren proteccioacuten frente a la re

infeccioacuten por este virus

22212 HEPATITIS B

La hepatitis B es una enfermedad del hiacutegado causada por el virus de la hepatitis B

Puede causar una infeccioacuten aguda o persistir en la sangre toda la vida causando

cirrosis del hiacutegado caacutencer del hiacutegado insuficiencia hepaacutetica y la muerte Los

seres humanos necesitan que su hiacutegado esteacute sano Este oacutergano desempentildea muchas

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 29: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

funciones para mantenerlos vivos El hiacutegado combate las infecciones y detiene

las hemorragias Elimina medicamentos drogas y otras sustancias toxicas del

torrente sanguiacuteneo Tambieacuten almacena energiacutea que puede usarse en caso

necesario

Las consecuencias que la infeccioacuten tiene en el hombre son agudas 8 hepatitis

seroconversioacuten) o croacutenicas (cirrosis insuficiencia hepaacutetica y carcinoma

hepatocelular (CHC) Ademaacutes del riesgo de que los portadores del VHB puedan

transmitir la enfermedad a lo largo de varios antildeos

Se estima que maacutes de un tercio de la poblacioacuten mundial se ha infectado por el

VHB y de estos el 5 son portadores croacutenicos El 25 desarrollan enfermedad

hepaacutetica hepatitis croacutenica cirrosis y CHC

En el momento actual la disponibilidad de una vacuna efectiva la puesta en

marcha del screening optimizado de los donantes de sangre asiacute como las mejoras

en la esterilizacioacuten de los productos y derivados sanguiacuteneos han disminuido

mucho su prevalencia

Tres cuartas partes de la poblacioacuten mundial viven en aacutereas de alta prevalencia de

infeccioacuten (gt al 8 de la poblacioacuten) como son el sudeste asiaacutetico y China algunas

regiones de Europa donde aproximadamente del 70 al 90 de la poblacioacuten se

infecta por el VHB antes de los 40 antildeos y del 8 al 20 son portadores Las

regiones de baja prevalencia (del 2) corresponden al norte y algunas zonas del

sur de Aacutefrica Australia y norte y oeste de Europa

En la gran mayoriacutea de los casos (70) la infeccioacuten ocurre de forma asintomaacutetico

y de los que tienen cliacutenica menos del 1 tendraacuten una evolucioacuten fulminante Las

manifestaciones de la infeccioacuten variacutean en funcioacuten a la edad del paciente de la

situacioacuten inmunoloacutegica y del momento en que se reconoce la enfermedad

El periodo de incubacioacuten dura de 6 a 24 semanas con una media de 60 a 90 diacuteas y

se relaciona con la cantidad de carga viral del inoculo el mecanismo de

transmisioacuten y el hueacutesped En este periodo los pacientes pueden presentar un

cuadro insidioso con astenia anorexia nauseas voacutemitos dolor abdominal en

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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html)

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 30: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

hipocondrio derecho diarrea coluria Ictericia (un 10 de los nintildeos y entre un 30

a un 50 de los adultos) y febriacutecula En ocasiones se acompantildea de un Rash

cutaacuteneo y en un 10 a un 20 de artralgias La ictericia suele desaparecer entre las

4-12 semanas de su prestacioacuten y en algunos casos puede haber fatiga prolongada a

pesar de normalizarse los niveles de transaminasas

La hepatitis B se transmite por viacutea sanguiacutenea y otros fluidos corporales y la

infeccioacuten se puede presentar a traveacutes de

- Contacto con sangre en escenarios de atencioacuten meacutedica lo cual pone en riesgo a

meacutedicos enfermeras odontoacutelogos y otros miembros del personal meacutedico

- relaciones sexuales sin precaucioacuten con una persona infectada

- transfusiones de sangre

- Compartir agujas cuando se hace uso de drogas

- Someterse a tatuajes o acupuntura con instrumentos contaminados

- en el momento de nacer una madre infectada puede transmitirle el virus al bebe

en el momento del parto o inmediatamente despueacutes de este

Las personas que se encuentran en mayor riesgo incluyendo personas que vivan

con alguien que tenga hepatitis B y los trabajadores de la salud deben recibir la

vacuna contra la hepatitis B

La hepatitis aguda toma de uno a seis meses desde el momento de la infeccioacuten

hasta que los siacutentomas aparecen Los primeros siacutentomas pueden ser entre otros

nausea vomito peacuterdida de apetito fatiga dolores musculares y articulatorios

Luego se presenta ictericia junto con orina oscura y heces blandas Alrededor de

un 1 de los pacientes infectados con hepatitis B mueren debido al dantildeo hepaacutetico

en esta etapa temprana

El riesgo de llegar a infectarse de manera croacutenica depende de la edad de la

persona en el momento de la infeccioacuten maacutes del 90 de los recieacuten nacidos

alrededor del 50 de los nintildeos y menos del 5 de los adultos infectados con

hepatitis B desarrollan la hepatitis croacutenica

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 31: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

La mayor parte del dantildeo del virus de la hepatitis B es causado por la respuesta del

cuerpo a la infeccioacuten La respuesta inmune del cuerpo contra las ceacutelulas hepaacuteticas

infectadas (hepatocitos) dantildea las ceacutelulas provocando la inflamacioacuten del hiacutegado

(hepatitis) Como resultado de esto las enzimas que se eleven los niveles

sanguiacuteneos de eacutestas El virus deteriora la capacidad del hiacutegado para producir el

factor de coagulacioacuten protrombina aumentado el tiempo que requiere la sangre

para coagularse (Dienstag JL Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

22213 HEPATITIS C

Hepatitis no-A no-B de trasmisioacuten parenteral

Producido por un virus ARN unihelicoidal similar a un flavivirus

Permanecioacute desapercibido por mucho tiempo

No se detectan sus anticuerpos respectivos por pruebas de ELISA

(inmunoabsorcioacuten enzimaacutetica) sino a los 4 meses despueacutes de iniciada la

enfermedad

Actualmente la reaccioacuten polimerasa invertasatransferasa detecta en el suero el

virus en pacientes con enfermedad reciente siendo igualmente uacutetil para evaluar

la respuesta al tratamiento y tener con ello un valor pronoacutestico

Epidemiologiacutea

La transmisioacuten puede ocurrir por la administracioacuten parenteral de sangre o de sus

productos

Grupos de alto riesgo incluyen personas que abusan de drogas por viacutea parenteral

personas transfundidas con sangre o con componentes de lasangre (hemofiacutelicos

drepanociacuteticos y talaseacutemicos) trabajadores de la salud con exposicioacuten frecuente a

sangre y personas con contacto sexual o familiar con una persona infectada (raro)

El VHS no se ha aislado de la leche materna saliva semen secreciones vaginales

ni orina

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 32: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

La enfermedad se reconoce con maacutes frecuencia en adultos infrecuente en nintildeos

menores de 15 antildeos

Periodo de incubacioacuten de 2 a 12 semanas con un promedio de 7 a 9 semanas

Viacuteas De Contagio

Drogas por viacutea intravenosa 40

Sin causa aparente 40

Contacto heterosexual 6

Contacto en el hogar 3

Contacto ocupacional 2

Caracteriacutesticas

Hepatitis viral de peor pronoacutestico por su mayor frecuencia de enfermedad

fulminante o croacutenica

Se caracteriza por infeccioacuten leve o asintomaacutetica con un inicio insidioso de

ictericia y malestar general

Guarda relacioacuten en el adulto con el carcinoma hepatocelular pero no se ha

demostrado en el nintildeo

Tiende a la cronicidad hasta en un 50 pudiendo terminar en cirrosis

En la mujer gestante afectada que presente tiacutetulos altos puede transmitir la

infeccioacuten al hijo

Evolucioacuten

Croacutenica recurrente 80

Resolucioacuten 20

Cirrosis 11

Diagnoacutestico

Prueba seroloacutegica para anti-VHC positiva en la mayoriacutea de los pacientes

infectados VHC

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 33: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

A traveacutes de esta prueba sin embargo los anticuerpos anti-VHC pueden estar

ausentes durante la enfermedad aguda y ser detectadles solo 4-6 meses despueacutes

del inicio de la enfermedad por lo que una prueba seroloacutegica positiva para anti-

VHC no indica necesariamente infeccioacuten continua

Tratamiento

Interferon previa respuesta aunque el depoacutesito de hierro en el hiacutegado y las

muacuteltiples transfusiones altera la respuesta

Profilaxis

No es satisfactoria con la inmunoglobulina La vacuna a tenido problema por las

variaciones genotiacutepicas del virus ya que no es estructura fija sino que tiene una

aparicioacuten continua de nuevas especies

Recientemente se ha instituido un examen de seleccioacuten de sangre para transfusioacuten

de anticuerpos anti-VHC con el objeto de prevenir las hepatitis asociadas a

transfusioacuten

22214 HEPATITIS D

Virus delta caracterizado como una partiacutecula de 35 a37 nm que consiste en un

fragmento de ARN y en Ag proteico delta (HDAg) ambos cubiertos por el Ag de

superficie de la Hepatitis B (HbsAg) que constituye su estructura celular central

Necesita de la infeccioacuten previa por VHB quien le proporciona el Agde superficie

que forma su cubierta solo con este requisito logra ser captado por el hepatocito y

desarrollar su accioacuten patoacutegena

Mecanismos De Transmisioacuten

Inoculacioacuten parenteral (droga) percutaacutenea o mucosa

Sangre o sus productos

Contacto sexual

Infrecuente de madre a recieacuten nacido

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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al National Institutes of Health Consensus Development conference

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 34: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Epidemiologiacutea

Puede provocar una infeccioacuten al mismo tiempo que la infeccioacuten inicial por

Hepatitis B (coinfeccioacuten) o puede infectar a un individuo ya croacutenicamente

infectado por VHB (suacuteperinfeccioacuten)

El periodo de incubacioacuten para la superinfeccioacuten es de 4 a 8 semanas y e la

coinfeccioacuten es de 45 a 160 diacuteas con un promedio de120 diacuteas

Regiones de alta prevalencia sur de Italia zonas del este de Europa Ameacuterica del

sur Aacutefrica y medio Oriente Frecuente en hemofiacutelicos

Caracteriacutesticas

La combinacioacuten VHB-VHD es poco frecuente pero en toxicoacutemanos alcanza hasta

50 y en hemofiacutelicos 80

Representa esta combinacioacuten casos muy graves hepatitis fulminante o cirrosis en

un 80 o hepatitis croacutenica en un 90

Antiacutegeno delta sigue le curso cronoloacutegico del antiacutegeno de superficie aparece en 1-

2 semanas antes del comienzo y permanece por 3 meses o periodos indefinidos

Una persona infectada con Hepatitis B y es portadora de la hepatitis D es

imposible evitar la infeccioacuten e este ya que el Ac VHD no es neutralizante ni evita

la infeccioacuten por lo que impide utilizar la inmunoglobulina

Diagnoacutestico

Prueba para anticuerpos IgM especiacuteficos anti-VHD y para antiacutegenos Delta (Ag

Hepatitis D)

Si existen marcadores de infeccioacuten por VHD la coinfeccioacuten con virus de la

hepatitis B por lo general puede diferenciarse de la superinfeccioacuten de un portador

establecido de AgsHB por la prueba de los anticuerpos del nuacutecleo de la Hepatitis

B de clase IgM (anti-HBC IgM)

La ausencia de marcadores de infeccioacuten aguda por hepatitis B en un paciente con

infeccioacuten por VHD sugiere que la persona es un portador de AgsHB

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 35: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Medidas De Control

Similares a la infeccioacuten por VHB La prevencioacuten por la hepatitis B mediante la

vacuna es la manera maacutes importante para controlar la infeccioacuten por VHD

22215 HEPATITIS E

1 Virus no A no B

2 Virus ARN pequentildeo (27 a 30 nm de diaacutemetro)

3 Calicivirus con capacidad de transmisioacuten enteacuterica

4 Mecanismo trasmisioacuten de persona a persona por viacutea fecal-oral (alimentos y

bebidas contaminadas)

5 maacutes frecuente en Aacutefrica Asia y China

6 Epidemias en tiempos de lluvias por contaminacioacuten de las aguas de

consumo

7 periodo de incubacioacuten 15 a 60 diacuteas con un promedio de 40 diacuteas

8 Es maacutes frecuente en adultos que en nintildeos con una alta mortalidad en

embarazadas

Cliacutenica

Enfermedad aguda con ictericia

Anorexia

Fiebre

Decaimiento con malestar general

Dolor abdominal

Hepatomegalia

Artralgias

Mortalidad

Baja 05 a 4 excepto en mujeres embarazadas por causas desconocidas que

alcanza el 20

Diagnoacutestico

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 36: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

1 Deteccioacuten de IgM anti ndashVHE e IgG anti- VHE respectivamente o mediante

la reaccioacuten de polimerasa invertasatransferasa

2 Por exclusioacuten de la hepatitis A B C y D agudas

La inmunoglobulina seacuterica no evita la hepatitis E (de uso habitual) por carecer de

Ac Anti VHE

Recomendaciones especiales

Los viajeros a zonas endeacutemicas deben evitar el consumo de frutas y verduras

crudas o mal cocinadas Consumir agua potabley buenas condiciones sanitarias

(httpwwwmonografiascomtrabajos5epidemioepidemioshtm)

223 CAUSA DE LA HEPATITIS B

La hepatitis B es causada por un virus del genero Orthohepadnavirus

perteneciente a la familia hepadnaviridae conocido con el nombre de virus de la

hepatitis B (VHB o HBV)

Virus de la hepatitis B

Fuente Enciclopedia Encarta

El virus tiene aproximadamente 42 nm de diaacutemetro con un ADN de doble cadena

de unos 3200 pb de largo encapsulado por una caacutepside el cual estaacute a su vez

cubierta por una envoltura viralrodeado por liacutepidos y proteiacutenas incrustadas en su

superficie La proteiacutena viral de superficie (HbsAg) tiene tres formas principales

L- M- y S-

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 37: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

El virus de la hepatitis B consta de ocho genotipos (A-H) los cuales se

distribuyen de forma desigual geograacuteficamente

2231 VIAS DE TRANSMISION

El reservorio natural del VHB es el hombre y se transmite por contagio

percutaacuteneo o per mucoso El virus no se contagia por las heces alimentos

contaminados agua insectos ni tampoco por la leche materna

Solamente han demostrado ser infecciosos los fluidos vaginales y menstruales la

sangre y el semen

Se conoce cuatro viacuteas de transmisioacuten

Parenteral a traveacutes de jeringuillas y productos sanguiacuteneos infectados

Sexual perinatal o vertical de madre infectada a hijo en momento del parto Si la

madre embarazada es portadora del VHB y ademaacutes tiene el HbsAg positivo su

hijo tendraacute una probabilidad del 90 de infectarse y ser portador mientras que si

la madre es solamente portadora del HbsAg la infeccioacuten ocurre en alrededor del

105 de los recieacuten nacidos

Horizontal a traveacutes del contacto con personas infectadas El virus puede

permanecer estable hasta 7 diacuteas en distintas superficies del medio ambiente y

como consecuencia contagiar a traveacutes de objetos contaminados como son los

cepillos de dientes biberones juguetes cubiertos o equipamiento sanitario por el

contacto de membranas mucosas o heridas abiertas La transmisioacuten perinatal es la

maacutes frecuente en las zonas de mayor prevalencia mientras que la sexual y la

parenteral lo son en las menos prevalentes En un 35 de los casos no se

identifica la fuente de infeccioacuten Teniendo en cuenta estas viacuteas de transmisioacuten

existen grupos entre la poblacioacuten general con mayor susceptibilidad para

inyectarse y cronificarse Pacientes con inmunodeficiencia congeacutenita o adquirida

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 38: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

8HIV) pacientes inmunodeprimidos o pacientes en hemodiaacutelisis Tambieacuten existen

grupos de riesgo elevado de contraer la infeccioacuten como

Hijos de madres infectadas

Nintildeos pequentildeos que acuden a guarderiacuteas o internados de aeacutereas

endeacutemicas

Familiares convivientes y parejas sexuales de personas infectadas

Pacientes y empleados de hemodiaacutelisis

Personas adictas a drogas por viacutea parenteral y que comparten jeringuillas

224 CUADRO CLIacuteNICO

En la infeccioacuten el virus VHB estaacute presente en tiacutetulos altos en la sangre y el

hiacutegado La replicacioacuten tiene lugar principalmente en las ceacutelulas hepaacuteticas

(probablemente en menor medida tambieacuten en los linfocitos) por lo tanto la

condicioacuten puede cursar con diversas formas de hepatitis La infeccioacuten

asintomaacutetica3 con recuperacioacuten total y la adquisicioacuten de resistencia en un 80 de

los casos O bien una infeccioacuten deacutebilmente expresada que debuta con un siacutendrome

catarral con la plena recuperacioacuten La hepatitis aguda a menudo con ictericia en

un pequentildeo porcentaje de los casos Toma alrededor de 1-6 meses desde el

momento de la infeccioacuten hasta que aparecen los siacutentomas de una hepatitis aguda

Los siacutentomas maacutes frecuentes incluyen

Fatiga

Naacuteuseas

Fiebre baja

Peacuterdida del apetito

Dolor muscular de estoacutemago y

Diarrea

Dolor de cabeza

Posteriormente la mayoriacutea de los pacientes desarrollan

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 39: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Coluria u oscurecimiento de la orina

Acolia o deposiciones de color claro

Ictericia o color amarillento de los ojos y la piel

En un 01 de los casos aparece una hepatitis fulminante con alta mortalidad

Tambieacuten se puede expresar una hepatitis croacutenica en un 7 de los afectados La

infeccioacuten puede cursar con una alta replicacioacuten sin seroconversioacuten (HBe +) o una

infeccioacuten con baja replicacioacuten viral que se demuestra con la aparicioacuten de

anticuerpos Anti-HBe (HBe -) En la mayoriacutea de los pacientes con hepatitis B

croacutenica las consecuencias finales son la cirrosis hepaacutetica y sus complicaciones

ascitis encefalopatiacutea hepaacutetica insuficiencia hepaacutetica hipertensioacuten portal

sangrado de varices esofaacutegicas caacutencer primario de hiacutegado y en uacuteltima instancia

conduce a la muerte

225 DIAGNOacuteSTICO

Por lo general la hepatitis B al igual que otras enfermedades que causan dantildeos a

las ceacutelulas hepaacuteticas se puede sospechar como resultado de la presencia de

ictericia bilirrubina y de heces hipocroacutemicas (por deficiencia de estercobilina) La

hepatitis B se debe considerar en toda persona que esteacute expuesta a factores de

riesgo elevados Puede tambieacuten estar presente un aumento en el valor de las

transaminasas en la sangre fundamentalmente con un aumento del ALT y AST

superior a 2000 UIlitro y una relacioacuten ASTALT superior a 1 Otro valor de

importancia es el de la bilirrubina alterada tanto por su fraccioacuten directa como

indirecta El correcto diagnoacutestico de la hepatitis B soacutelo podraacuten efectuarse por la

determinacioacuten de marcadores virales especiacuteficos a saber

Deteccioacuten de antiacutegenos virales

o HbsAg el antiacutegeno Australia o de superficie en contacto positivo

con el virus incluso en el periacuteodo anterior a la manifestacioacuten de los

signos y siacutentomas de la enfermedad

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 40: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

o HbsAg antiacutegeno no corpuscular viral del nuacutecleo que indica

replicacioacuten viral y estaacute presente en el portador durante la

enfermedad aguda y croacutenica

Deteccioacuten de anticuerpos

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno de superficie producida por

los linfocitos B despueacutes de la recuperacioacuten positiva de la fase

aguda de la enfermedad o en personas vacunadas

o HbsAg anticuerpos contra el antiacutegeno viral del nuacutecleo o core

(HbsAg) puede haber dos clases de inmunoglobulinas clase IgM

presente en la fase aguda mientras que la clase IgG es de por vida

o HbeAb anticuerpos contra el antiacutegeno del virus no corpuacutesculo

central aparece en la etapa aguda cuando se empieza aresolver

tambieacuten pueden estar presentes tanto en la fase croacutenica activa e

inactiva

Nivel de albuacutemina en sangre

Pruebas de la funcioacuten hepaacutetica

Tiempo de protrombina puede incrementarse debido a insuficiencia

hepaacutetica severa

226 PREVENCIOgraveN

Puede vacunarse contra la hepatitis B La vacuna consta de uno o varios

antiacutegenos en forma de microorganismos vivos atenuados o inertes o soacutelo los

antiacutegenos que provocan una reaccioacuten inmune en el organismo receptor pero sin

provocar enfermedad De esta forma el organismo memoriza el antiacutegeno y si

en adelante se da alguna infeccioacuten puede reaccionar raacutepida y eficazmente en

contra de ella La vacuna de la hepatitis B se aplica en tres inyecciones Todos los

bebeacutes deben recibirla Los lactantes reciben la primera inyeccioacuten a las 12 horas de

haber nacido La segunda inyeccioacuten se les aplica entre 1 y 2 meses de edad y la

tercera entre los 6 y los 18 meses de edad

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 41: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

La vacuna tambieacuten se puede aplicar a nintildeos mayores y a adultos Se les aplican

tres inyecciones en el plazo de seis meses Los nintildeos que no se han vacunado

deben hacerlo Generalmente con 3 dosis de vacunas se obtienen tiacutetulos de

anticuerpos protectores suficientes para estar inmunes a la infeccioacuten Pero en

algunos casos no ocurrepor ello se aconseja en algunas personas dosar los

Anticuerpos Anti Antiacutegeno de superficie un mes o maacutes luego de haber terminado

el esquema de tres dosis de vacuna Si el tiacutetulo no es suficiente se agrega un

refuerzo de vacuna

Es necesario que se apliquen todas las inyecciones para quedar protegido Si usted

viaja a paiacuteses de riesgo aseguacuterese de recibir todas las inyecciones antes de viajar

Si no recibioacute alguna inyeccioacuten llame inmediatamente a su meacutedico o consultorio

para que le den una nueva cita

Usted tambieacuten puede protegerse a siacute mismo y proteger a los demaacutes contra la

hepatitis B si

Use preservativo cuando tenga relaciones sexuales

No comparte con nadie agujas para inyectarse drogas ni canutos para

inhalarlas

Usa guantes si tiene que tocar la sangre de otra persona

No usa el cepillo de dientes corta untildeas o la maacutequina de afeitar de una

persona infectada o cualquier otra cosa que pudiera tener su sangre

Aseguacuterese que cualquier tatuaje o perforacioacuten en una parte del cuerpo se haga

con instrumentos limpios asiacute como los instrumentos de podologiacutea odontologiacutea y

otros que necesitan esterilizacioacuten especiacutefica en autoclave (Dienstag JL

Hepatitis B virus infectionNengl J Med)

227 INMUNOLOGIgraveA

Inmunologiacutea-estudio del sistema inmunoloacutegico del organismo Inicialmente era

una rama de la medicina que estudiaba la defensa o resistencia frente a las

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 42: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

infecciones pero su campo de estudio se ha ampliado en el curso de las uacuteltimas

cuatro deacutecadas y ahora cubre todos los fenoacutemenos y mecanismos que discriminan

entre lo propio es decir los mecanismos moleacuteculas ceacutelulas y tejidos del cuerpo y

todo lo que pertenece a ellos y lo ajeno todo lo que procede de fuera del cuerpo

lo que le es extrantildeo En este uacuteltimo apartado se incluyen los microorganismos

infecciosos (protozoos hongos bacterias micro plasmas y virus) los paraacutesitos

las toxinas y venenos de tamantildeo suficiente y composicioacuten apropiada los tumores

y las ceacutelulas neoplaacutesicas los trasplantes y las ceacutelulas o moleacuteculas transfundidas de

animales no ideacutenticos geneacuteticamente

El sistema inmunitario es el sistema de defensas del cuerpo contra los organismos

infecciosos y otros agentes invasores A traveacutes de una serie de pasos denominada

respuesta inmunitaria el sistema inmunitario ataca a los organismos y sustancias

que invaden nuestro cuerpo y que podriacutean provocarnos enfermedades El sistema

inmunitario estaacute compuesto por una red de ceacutelulas tejidos y oacuterganos que

colaboran entre siacute para proteger nuestros cuerpos

Las ceacutelulas que forman parte de este sistema de defensa son los gloacutebulos blancos

o leucocitos Los hay de dos tipos baacutesicos diferentes (que veremos maacutes adelante)

que trabajan conjuntamente y se complementan para localizar y destruir los

organismos o sustancias que provocan las enfermedades

Los leucocitos se fabrican o almacenan en muchas partes diferentes del cuerpo

incluyendo el timo el bazo y la meacutedula oacutesea Por este motivo estos oacuterganos se

denominan oacuterganos linfoides Tambieacuten hay cuacutemulos de tejido linfoide en todo el

cuerpo prioritariamente en forma de ganglios linfaacuteticos que tambieacuten albergan

leucocitos en su interior

Los leucocitos circulan por todo el cuerpo entre oacuterganos y noacutedulos a traveacutes de los

vasos linfaacuteticos (Puede pensar en los vasos linfaacuteticos como una especie de

autopista entre aacutereas de descanso que seriacutean los oacuterganos linfoides y los ganglios

linfaacuteticos) Los leucocitos tambieacuten pueden circular a traveacutes de los vasos

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 43: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

sanguiacuteneos De este modo el sistema inmunitario funciona de forma coordinada

para detectar cualquier sustancia que pudiera provocar problemas

Hay dos tipos baacutesicos de leucocitos

Los fagocitosson ceacutelulas que destruyen a los organismos invasores

fagocitaacutendolos es decir devoraacutendolos literalmente

Loslinfocitosvienen a ser como la memoria del cuerpo en lo que a

infecciones se refiere ya que le permiten recordar y reconocer a invasores

previos

Hay diversos tipos de ceacutelulas que se consideran fagocitos El tipo maacutes frecuente

son los neutroacutefilos Eacutestos luchan prioritariamente contra las bacterias De modo

que cuando a un meacutedico le preocupa que un paciente pueda tener una infeccioacuten

bacteriana puede solicitar un anaacutelisis de sangre para averiguar si el paciente tiene

o no una cantidad de neutroacutefilos por encima de lo normal desencadenada por la

supuesta infeccioacuten Otros tipos de fagocitos desempentildean otras funciones para

asegurar que el cuerpo reacciona adecuadamente a tipos especiacuteficos de invasores

Hay dos tipos de linfocitos los linfocitos B y los linfocitos T Los linfocitos se

fabrican en la meacutedula oacutesea y bien permanecen alliacute y maduran a linfocitos B o

bien se desplazan hasta el timo donde maduran a linfocitos T Los linfocitos B y

los linfocitos T desempentildean funciones diferentes los linfocitos B vienen a ser el

sistema de inteligencia militar del cuerpo encargadas de buscar a los invasores y

enviarles soldados para que los ataquen Los linfocitos T son los soldados

encargadas de destruir a los invasores que ha identificado el sistema de

inteligencia He aquiacute coacutemo funciona el proceso

Las sustancias que invaden el organismo se denominan antiacutegenos Cuando se

detecta un antiacutegeno en el organismo varios tipos distintos de ceacutelulas colaboran

para identificarlo y reaccionar en consonancia Estas ceacutelulas desencadenan la

produccioacuten de anticuerpos en los linfocitos B Los anticuerpos son proteiacutenas

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 44: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

especializadas que se adhieren a antiacutegenos especiacuteficos Los anticuerpos y los

antiacutegenos encajan perfectamente entre siacute como si se tratara de una llave y una

cerradura

Una vez los linfocitos B fabrican los anticuerpos esos anticuerpos siguen

existiendo en el organismo de la persona Eso significa que si el mismo antiacutegeno

volviera a entrar en el organismo de esa persona los anticuerpos ya estariacutean alliacute

para cumplir con su funcioacuten Por eso cuando una persona enferma de determinada

enfermedad como la varicela lo maacutes habitual es que no vuelva a contraer la

misma enfermedad Y por eso tambieacuten utilizamos las vacunas a modo de

prevencioacuten asiacute las personas vacunadas no contraen determinadas enfermedades

Lo que hace una vacuna es introducir en el organismo el antiacutegeno de un modo que

no enferma a la persona vacunada pero que desencadena en su organismo la

respuesta de fabricacioacuten de anticuerpos que la protegeraacuten de ataques futuros del

germen o sustancia causante de la enfermedad

Aunque los anticuerpos pueden reconocer un antiacutegeno y adherirse a eacutel no pueden

destruirlo sin ayuda Y ahiacute es donde intervienen los linfocitos T Estos forman

parte del sistema que destruye los antiacutegenos que han sido identificados ya sea por

los anticuerpos o por aquellas ceacutelulas que han sido infectadas o han cambiado por

alguacuten motivo De hecho algunos de los linfocitos T se denominan ceacutelulas

asesinas o ceacutelulas k (por el ingleacutes killer = asesino) Los linfocitos T tambieacuten

contribuyen a indicar a otras ceacutelulas (como los fagocitos) que desempentildeen su

funcioacuten

Los anticuerpos tambieacuten tienen la facultad de neutralizar toxinas (sustancias

venenosas o nocivas) fabricadas por diversos organismos Y por uacuteltimo los

anticuerpos pueden activar un grupo de proteiacutenas denominadas complemento que

tambieacuten forman parte del sistema inmunitario El sistema del complemento

participa en la destruccioacuten de bacterias virus y ceacutelulas infectadas Todas estas

ceacutelulas altamente especializadas y oacuterganos del sistema inmunitarioofrecen al

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 45: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

organismo proteccioacuten contra las enfermedades Esta proteccioacuten se denomina

inmunidad

2271 TIPOS DE INMUNIDAD

Ademaacutes de las barreras fiacutesicas(piel secreciones de las mucosas pH aacutecido del

estoacutemago enzimas proteoliacuteticas etc) de gran importancia en la lucha frente a los

antiacutegenos los mamiacuteferos disponen de unos mecanismos no especiacuteficos que

componen lo que se denomina

La inmunidad natural La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica

no especiacuteficafrente a las infecciones a las que no estaba inmunizado previamente

Esta respuesta se desencadena a los pocos minutos u horas de sufrir la agresioacuten y

estaacute mediada fundamentalmente por ceacutelulas fagociacuteticas ceacutelulas de citotoxicidad

natural NK e Interferon

Cuando esta primera barrera falla se establece la infeccioacuten y comienza a

desarrollarse la inmunidad adquirida Los mecanismos inmunitarios relacionados

con la inmunidad natural estaacuten ligados a mecanismos no especiacuteficos es decir no

estaacuten producidos por la presencia de un antiacutegenodeterminado

La inmunidad natural es la primera barrera inmunoloacutegica no especiacutefica Los

principales mediadores de la inmunidad natural son las ceacutelulas fagociacuteticas las

ceacutelulas de citotoxicidad natural (NK) y el Interferon

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 46: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquiridaes el resultado de la respuesta inmune frente a una

moleacutecula o agente extrantildeo para el animal (antiacutegeno) Se genera una respuesta

especiacutefica frente a un estiacutemulo ajeno Tras el proceso de captacioacuten y

reconocimiento de los antiacutegenos se pondraacuten enmarcha losmecanismos de

presentacioacuten y activacioacuten de los linfocitos para la produccioacuten de anticuerpos y

linfocinas

Desde los primeros conceptos hasta nuestros diacuteas el conocimiento de la

inmunologiacutea ha ido avanzado de forma progresiva

En las uacuteltimas deacutecadas se han conseguido los avances maacutes importantes en el

conocimiento de la inmunologiacutea en general Tres han sido fundamentalmente los

desarrollos que han favorecido al mejor conocimiento de los diferentes

mecanismos inmunoloacutegicos

Fuentehttpwwwugreseianezinmunocap_01

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 47: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

La inmunidad adquirida se induce como respuesta a un antiacutegeno especiacutefico tras la

colaboracioacuten de ceacutelulas fagociacuteticas linfocitos T y B y la produccioacuten de

inmunoglobulinas (Ig) e linfocinas (IL)

Respuesta inmune Actuacioacuten integrada de un gran nuacutemero de mecanismos

heterogeacuteneos de defensa contra sustancias y agentes extrantildeos En general a las

sustancias extrantildeas se las denomina como antiacutegenos y son ellos los que

desencadenan en el organismo una serie de eventos celulares que provocan la

produccioacuten de losmecanismos dedefensa Como veremos los mecanismos de

respuesta tienen una componente celular y otra molecular

2272 ANTIgraveGENO

Un antiacutegeno es una moleacutecula (generalmente una proteiacutena o un polisacaacuterido) de

superficie celular que puede inducir la formacioacuten de anticuerpos Hay muchos

tipos de moleacuteculas diferentes que pueden actuar de antiacutegenos como las proteiacutenas

los polisacaacuteridos y maacutes raramente otras moleacuteculas como los aacutecidos nucleacuteicos

Cada antiacutegeno estaacute definido por su anticuerpo los cuales interactuacutean por

complementariedad espacial La zona donde el antiacutegeno se une al anticuerpo

recibe el nombre de epiacutetopo o determinante antigeacutenico mientras que el aacuterea

correspondiente de la moleacutecula del anticuerpo es el paraacutetopo

2273 ANTICUERPO

Los anticuerpos son glucoproteiacutenas (proteiacutenas unidas a azuacutecares) tambieacuten

llamadas inmunoglobulinas Secretadas por un tipo particular de ceacutelulas los

plasmocitos los anticuerpos tienen una altiacutesima afinidad por moleacuteculas llamadas

antiacutegenos Los plasmocitos son el resultado de la proliferacioacuten y diferenciacioacuten de

los linfocitos B que han sido previamente activados Su propoacutesito es reconocer

cuerpos extrantildeos invasores como las bacterias y virus para mantener al organismo

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 48: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

libre de ellos La produccioacuten de anticuerpos forma parte de la respuesta inmune

humoral

2274 TIPOS DE REACCIOacuteN ANTIacuteGENO-ANTICUERPO

La actuacioacuten de los anticuerpos al unirse especiacuteficamente a los antiacutegenos con la

finalidad de producir su destruccioacuten se produce mediante distintos tipos de

reacciones

Neutralizacioacuten de toxinas o patoacutegenos impidiendo su unioacuten a los

receptores de la membrana de las ceacutelulas diana y su penetracioacuten al

citoplasma

Aglutinacioacuten de los antiacutegenos que se encuentran en la superficie celular

facilitando su destruccioacuten por los macroacutefagos

Precipitacioacuten de moleacuteculas antigeacutenicas disueltas mediante la formacioacuten de

complejo antiacutegenoanticuerpo

Activacioacuten del sistema del complemento que permite la lisis u

opsonizacioacuten de los patoacutegenos

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

228FUNDAMENTOS DE LA TEgraveCNICA

2281 INMUNOCROMATOGRAFIgraveA

Introduccioacuten

La inmunocromatografiacutea es una de las teacutecnicas de inmunodiagnoacutestico maacutes

modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test Cada vez

son maacutes las aplicaciones de esta teacutecnica tanto en el campo agroalimentario como

test de campo debido a que no es necesario reactivos ni instrumentacioacuten adicional

como en el campo cliacutenico El ejemplo maacutes conocido son los test de embarazo de

las farmacias

LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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LINEA DE CAPTURA (TEST)

LINEA DE CONTROL

En el siguiente esquema se resume el fundamento del meacutetodo

La muestra se pone en contacto con la zona del conjugado

Esta lleva impregnada un conjugado formado por un anticuerpo especiacutefico contra

uno de los epiacutetopos del antiacutegeno a detectar y un reactivo de deteccioacuten Si la

muestra contiene el antiacutegeno a detectar eacuteste se uniraacute al conjugado formando un

complejo y empezaraacuten a migrar a traveacutes de la membrana de nitrocelulosa

Si no migraraacuten el conjugado y la muestra sin unirse

La zona de captura estaacute formada por un segundo anticuerpo especiacutefico contra otro

epiacutetopo del antiacutegeno Al llegar la muestra a esta zona los complejos formados por

la unioacuten del antiacutegeno y conjugado quedaraacuten retenidos y la liacutenea se colorearaacute

(muestras positivas)

Si la muestra no conteniacutea el antiacutegeno el segundo anticuerpo no captura nada y la

liacutenea queda transparente (muestras negativas)

La zona control estaacute formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de

deteccioacuten

ZONA DEL

CONJUGADO

Membrana de

nitrocelulosa

Membrana de

nitrocelulosa

ZONA DE

ABSORCIOacuteN

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

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12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 50: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Cuando el resto de muestra alcanza esta zona el anticuerpo se uniraacute al conjugado

libre que no ha quedado retenido en la zona de captura

Esta liacutenea es un control de que el ensayo ha funcionado bien porque se colorea

siempre con muestras positivas y negativas

2282 ANAgraveLISIS DEL ANTIgraveGENO DE SUPERFICIE HbsAg CASSETTE

a) INTRODUCCIOacuteN

El Cassette XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) permite

mediante un ensayo Inmunocromatograacutefico la determinacioacuten visual cualitativa en

un soacutelo paso de la presencia de Antiacutegeno de superficie de la Hepatitis B en Suero

Plasma como ayuda en el diagnoacutestico de la infeccioacuten por el Virus de la Hepatitis

B Los resultados de la prueba son raacutepidos faacuteciles de leer y no se requiere de

instrumentacioacuten o reactivos adicionales

b) RESUMEN Y EXPLICACIOacuteN DE LA PRUEBA

La hepatitis viral es una enfermedad que puede ser causada por virus tipo A tipo

B o C El Virus de la Hepatitis B estaacute compuesto por 3 Antiacutegenos dos dentro del

nuacutecleo (c y e) y otro de envoltura considerado como de superficie (s) La

TIPO DE ENSAYO CUALITATIVO

MUESTRA SUEROPLASMA

SENSIBILIDAD 990 mUImL

ESPECIFICIDAD 967

MEacuteTODO INMUNOCROMATOGRAacuteFICO

PRESENTACIOacuteN CASSETTE

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 51: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

presencia de antiacutegenos de superficie en suero o plasma es un indicador de

infeccioacuten activa de Hepatitis B aguda o croacutenica

El Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) es el primer marcador

seroloacutegico que aparece y es detectable en el Suero Plasma 30 a 60 diacuteas despueacutes

de la exposicioacuten al Virus por lo que su positividad en el inicio de una ictericia

indica que se trata de una Hepatitis B

La deteccioacuten de este marcador seroloacutegico se relaciona invariablemente con una

infeccioacuten por el VHB La posibilidad de que exista infeccioacuten siendo este marcador

seroloacutegico negativo soacutelo se puede dar en tres circunstancias excepcionales

Primero durante el primer mes del periodo de incubacioacuten de la infeccioacuten

Segundo en la fase de resolucioacuten de la infeccioacuten cuando se ha negativizado el

antiacutegeno sin llegar a desarrollarse anti-HBs todaviacutea Tercero en el caso de

mutacioacuten del VHB que determina una incapacidad de eacuteste para sintetizar el

HbsAg No obstante estas circunstancias son excepcionales en la praacutectica habitual

y la negatividad de este antiacutegeno se considera sinoacutenimo de ausencia de infeccioacuten

por el VHB

Sus niveles comienzan a elevarse desde antes que aparezca la ictericia y cuando

eacutesta aparece tienen su maacutexima concentracioacuten Su positividad persiste por unos tres

meses y luego desaparece paulatinamente en meses o antildeos

Hay un 30 de pacientes en los cuales el Antiacutegeno permanece por antildeos

(portadores croacutenicos) indicando que es portador de eacuteste y por lo tanto susceptible

de transmitir la Hepatitis B

c) PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) es un

inmunoensayo cualitativo de membrana para la deteccioacuten de HbsAg en suero o

plasma

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

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Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 52: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

La membrana es pre cubierta por anticuerpos anti-HbsAg en la regioacuten de la banda

de la prueba Durante el examen la muestra reacciona con la partiacutecula cubierta con

anticuerpos anti-HbsAg

La mezcla migra a lo largo de la membrana cromatograacuteficamente por accioacuten

capilar para reaccionar con los anticuerpos anti-HbsAg en la membrana generando

una liacutenea de color La presencia de esta liacutenea de color en la regioacuten de la banda del

examen indica un resultado positivo mientras que su ausencia indica un resultado

negativo

d) MATERIALES SUMINISTRADOS

Un dispositivo de diagnoacutestico XERION HbsAg

Un Gotero dispensador de la muestra de Suero Plasma

e) MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Reloj o Timer

Elementos para obtencioacuten y almacenamiento de la muestra de suero o

plasma

f) ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

Los dispositivos de diagnoacutestico XERION HbsAg deben permanecer hasta la fecha

de vencimiento en sus respectivos empaques de aluminio sin abrir refrigerados a

temperatura ambiente (4ordmC a 30ordmC) alejados de la luz solar directa la humedad y

el calor excesivo No congelar

La exposicioacuten del dispositivo de diagnoacutestico a temperaturas mayores a

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

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4 Centro para el control de enfermedades

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5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

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8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

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10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 53: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

30ordmC puede reducir la vida media del producto u ocasionar el dantildeo definitivo del

mismo

g) PRECAUCIONES

Se debe leer y seguir cuidadosamente las instrucciones del procedimiento

de ensayo con el objeto de realizarlo en forma correcta

Todos los materiales utilizados durante el ensayo deben ser considerados

como potencialmente infeccioso

Manipuacutelelos y deseacutechelos de acuerdo con las normas vigentes

Exclusivamente para diagnoacutestico IN VITRO y para ser usados por

profesionales

No utilice el dispositivo de diagnoacutestico despueacutes de la fecha de vencimiento

indicada en el empaque de Aluminio

No reutilice ninguno de los elementos del dispositivo de diagnoacutestico

Evite humedecer el aacuterea de la ventana de visualizacioacuten de resultados

El dispositivo de diagnoacutestico XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie

estaacute disentildeado para detectar la presencia de HbsAg en Suero Plasma El

anaacutelisis en otras secreciones corporales no ha sido validado y puede no

arrojar resultados correctos

El Cassette XERION HbsAg no puede detectar menos de 1ngml

h) OBTENCIOgraveN DE LA MUESTRA Y CONSIDERACIONES

Toda muestra debe ser manipulada con la suficiente precaucioacuten como si

fuera potencial infecciosa

La muestra debe tomarse mediante venopuncioacuten normal recolectarse en

un recipiente con o sin anticoagulante y manejarse con precaucioacuten seguacuten

los procedimientos utilizados en el laboratorio

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 54: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Puede tomarse en cualquier momento (no se requiere que paciente esteacute en

ayunas)

La muestra debe ser analizada preferiblemente el mismo diacutea de su

recoleccioacuten Si esto no es posible conseacutervela en refrigeracioacuten 2-8 ordmC

(maacuteximo 3 diacuteas) o congelacioacuten - 20 ordmC si el tiempo fuera mayor

No congele y descongele repetidamente la muestra porque podriacutea

afectar el resultado del ensayo

Remueva del SueroPlasma cualquier sedimento mediante centrifugacioacuten

No utilice muestras turbias ya que pueden estar contaminadas por

microorganismos ni hemolizadas porque pueden alterar el resultado

i) PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA

Permita que la muestra alcance la temperatura ambiente antes del ensayo

Extraiga el material (Cassette y Gotero) del empaque de Aluminio

Identifiacutequelo de acuerdo a los procedimientos de su laboratorio

Coloque 3 gotas (100microl Aprox) de la muestra de Suero o Plasma en el

orificio absorbente del Cassette

Espere entre 15 minutos e inteacuterprete los resultados No interprete

resultados despueacutes de 30 minutos

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 55: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

j) INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

Negativo Aparece uacutenicamente una banda de color en la regioacuten de control

(C) No hay una banda visible en la regioacuten de prueba (T)

Positivo Aparecen dos bandas de color una en la regioacuten de control (C) y

otra en la regioacuten de prueba (T) La intensidad del color de la banda en la

regioacuten de prueba (T) puede variar

El resultado positivo indica que se ha detectado una concentracioacuten mayor

o igual a 5 ngml de Antiacutegeno de superficie de Hepatitis B (HbsAg) en la

muestra

Prueba Invaacutelida No se visualiza bandas en absoluto o aparece una banda

de color en la regioacuten de prueba (T) pero ninguna banda de color en la

regioacuten de control (C) Repita el procedimiento utilizando un nuevo

Cassette

Nota la regioacuten de control (C) es la maacutes cercana al lado de sujecioacuten del

Cassette y la regioacuten de prueba (T) es la maacutes cercana al orificio absorbente

del Cassette

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 56: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

k) CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA REALIZADA

POR LA CASA COMERCIAL

La regioacuten de control (C) es el control interno del dispositivo que permite

confirmar que el volumen de muestras en el ensayo ha sido el adecuado y el

procedimiento ha sido realizado de manera correcta

Las Buenas Praacutecticas de Laboratorio recomiendan verificar cada cierto tiempo que

los componentes de los dispositivos de diagnoacutestico operan correctamente

utilizando materiales de control disentildeados para este fin Utiliacutecelos de manera

similar a una muestra de Suero Plasma

l) LIMITACIONES DEL ENSAYO

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegenos de superficie (sueroplasma) solo

indica la presencia de antiacutegeno de superficie en la muestra y no puede ser

utilizado como uacutenico criterio diagnoacutestico

Son indispensables otras pruebas confirmatorias y una evaluacioacuten cliacutenica de la

condicioacuten del paciente y su historia antes de establecer un diagnoacutestico definitivo

Si tiene alguna duda sobre el producto o el procedimiento por favor comuniacutequese

con el departamento de servicio al usuario de XERION

m) CRITERIOS DE DESEMPENtildeO

Sensibilidad

La prueba XERION Hepatitis B Antiacutegeno de superficie (sueroplasma) ha sido

probada con un panel de sensibilidad de 0 a 300 ngml Todos los 10 subtipos de

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 57: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

HbsAg mostraron un resultado positivo con la prueba Hepatitis B antiacutegeno de

superficie (sueroplasma)

El test puede detectar 5 ngml de Antiacutegeno de superficie en 15 minutos y 1 ngml

de Antiacutegeno de Superficie en 30 minutos Sensibilidad (99)

Especificidad

La prueba es especiacutefica para antiacutegeno de superficie del virus de la hepatitis B en

un 967

Precisioacuten

La precisioacuten fue determinada usando 15 reacuteplicas de tres muestras que conteniacutean 0

ngml 1 ngml y 5 ngml de HBsAg Los resultados negativos y positivos fueron

correctamente identificados en un 98 de las veces

Exactitud

La prueba Hepatitis B Antiacutegeno de superficie presenta una exactitud de

983

n) INTERFERENCIAS

Ninguna reportada por el fabricante

229OTRAS PRUEBAS PARA EL DIAGNOgraveSTICO DE LA

HEPATITIS B

Tras la infeccioacuten la evolucioacuten cliacutenica de la hepatitis B puede ser muy variableen

la mayoriacutea de los casos cursa de forma asintomaacutetica pero puede producir un

procesode hepatitis agua o incluso fulminante En algunas ocasiones se complica

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 58: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

evolucionandohacia la cronicidad (5-10 de los casos en adultos 90 en

neonatos y 30 en nintildeosentre 1 y 5 antildeos)

2291 MARCADORES SEROLOGICOS

bull HBsAg (antiacutegeno de superficie)Aparece muy pronto despueacutes de la infeccioacutenSi

la evolucioacuten es favorable desapareceraacute paulatinamente Por el contrario su

persistencia al cabo de 6-8 semanas son indicadores de mal pronoacutestico y

deevolucioacuten a la cronicidad Si este marcador se mantiene positivo al sexto mes

dela infeccioacuten el paciente sufre una infeccioacuten viacuterica persistente que puede ser

unainfeccioacuten croacutenica o una enfermedad hepaacutetica croacutenica

bull Confirmatorio HbsAg Primero se realiza un procedimiento de

neutralizacioacutencon anticuerpos anti- HBs y despueacutes se detecta la presencia de

HBsAg Estaprueba debe hacerse

Resultado positivo para HBsAg en muestra negativa para anti-HBc total y

anti-HBc IgM

HBsAg con bajo nivel de reactividad

bull Anti-HBs (anticuerpo frente al antiacutegeno de superficie)Es el indicador

derecuperacioacuten de la enfermedad Persiste durante muchos antildeos y es capaz

deneutralizar el virus y de conferir proteccioacuten frente a la reinfeccioacuten En

losindividuos vacunados con respuesta inmunoloacutegica es el uacutenico

marcadorpresente

bull Anti-HBc total (IgG e IgM) (anticuerpos frente al antiacutegeno del core)Es

elprimer anticuerpo que aparece y se mantiene positivo despueacutes de la

curacioacutenincluso en los casos en que el anti-HBs desaparece

bull Anti-HBcIgM) (anticuerpos IgM frente al antiacutegeno del core)Es el

primeranticuerpo que aparece tras la infeccioacuten por lo que es un indicador de

infeccioacutenaguda Sin embargo tambieacuten puede detectarse en los casos de

enfermedadcroacutenica con replicacioacuten activa del virus y lesioacuten hepaacutetica Si no hay

cronicidadse mantiene positivo hasta 12- 18 meses

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 59: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

bull HBeAg (antiacutegeno e)Se detecta en el suero en la fase aguda y en algunas formas

de enfermedad croacutenica que histoloacutegicamente suelencorresponder a patrones de

hepatitis croacutenica activa Tiene excelente correlacioacutencon la presencia de

replic8acioacuten del virus y viremia La desaparicioacuten de estemarcador suele indicar un

buen pronoacutestico Sin embargo puede estar ausente enportadores croacutenicos de

HBsAg con una replicacioacuten viral persistente lo quesupone la presencia de

variantes pre-coredefectuosas

bull AntiHBe (anticuerpos frente al antiacutegeno e)Su aparicioacuten en la infeccioacutenaguda

indica buena evolucioacuten En los casos de hepatitis croacutenica en los quecoexiste con

HBsAg suele indicar escasa actividad replicativa de la enfermedadviacuterica Sin

embargo en las infecciones croacutenicas por variantes pre-coredefectuosas la

seroconversioacuten para anti-HBe no supone una mejoriacutea ni cliacutenica nihistoloacutegica

bull ADN VHB

El virus de la hepatitis B (HBV) es uno de los virus causantes de la hepatitis

viacuterica Maacutes de dos billones de personas en todo el mundo han resultado infectadas

por el HBV y maacutes de 350 millones de ellas son portadores infectados de forma

croacutenica Los portadores croacutenicos corren un elevado riesgo de padecer

complicaciones infecciosas incluyendo hepatitis croacutenica carcinoma

hepatocelular Los indicadores seroloacutegicos se los utiliza generalmente como

diagnoacutestico yo indicadores de pronoacutestico de infecciones por HBV agudas o

croacutenicas El indicador maacutes comuacuten de la infeccioacuten por HBV es la presencia del

antiacutegeno de superficie del HBV Aunque los portadores pueden eliminar el

HBsAg y desarrollar anticuerpos contra el HBsAg parece que todaviacutea existe el

riesgo de complicaciones hepaacuteticas graves en antildeos posteriores El antiacutegeno e

(HBeAg) del HBV suele utilizarse como indicador secundario para marcar la

replicacioacuten activa del HBV asociada con hepatopatiacutea progresiva Cuando no se

logra eliminar el HBeAg parece aumentar el riesgo de hepatopatiacuteas terminales

Las cepas variantes del HBV pueden producir HBeAg no detectable en suero o

pueden perder la capacidad de fabricar HBeAg incluso cuando se produce una

infeccioacuten activa Por tanto el uso de este indicador para controlar la progresioacuten de

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 60: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

la enfermedad puede tener una utilidad limitada Se ha descubierto que la

capacidad para detectar el ADN del HBV en suero tiene un valor pronoacutestico para

el resultado por infecciones HBV de infecciones agudas y croacutenicas La

metodologiacutea puede permitir detectar el ADN del HBV despueacutes de eliminar el

antiacutegeno de superficie o detectar el HBV sin indicadores seroloacutegicos

(httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitishtml)

La deteccioacuten de ADN viacuterico en el suero constituye el marcador deeleccioacuten para

detectar la viremia y refleja la replicacioacuten del virus en loshepatocitos Se postuloacute

arbitrariamente el valor de 105 copias ml (17543 UIml)como el valor umbral

para diferenciar los diferentes estadios de la hepatitis B ycontrolar a los pacientes

con hepatitis croacutenica pero se pueden observar casos deenfermedad hepaacutetica

avanzada con valores menores por tanto se ha establecido

un valor de 5000 UIml para distinguir a los casos de hepatitis croacutenica y

Portadores croacutenicos (especificidad y sensibilidad del 90) Diversos

organismosinternacionales han establecido que si el paciente tiene maacutes de 105

copias (ml(17543 UIml) es candidato al tratamiento antiviral disminuyendo este

valor a104 copiasml (1754 UIml) en pacientes con HBsAg negativo

2210CONTROL DE CALIDAD PARA LAS PRUEBAS

CONFIRMATORIAS PARA HEPATITIS B

Como en cualquier procedimiento nuevo de Laboratorio los usuarios deben

considerar el uso in situ de controles positivos y negativos adicionales cada vez

que se realiza la prueba hasta que se alcance un nivel de confianza alto en su

capacidad de llevar a cabo la prueba de forma correcta

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 61: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

No existen requisitos relacionados con la posicioacuten de los controles en el

portatubos Compruebe la sentildeal de avisos y comentarios para asegurarse que la

serie es vaacutelida

(httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf)

22101 PRECAUCIONES OPERATIVAS

Como con cualquier otro procedimiento de prueba una buena teacutecnica de

laboratorio resulta esencial para la correcta realizacioacuten del ensayo debido a la alta

sensibilidad analiacutetica de esta prueba se debe prestar especial atencioacuten a la hora de

conservar la pureza de los reactivos del kit o las mezclas de amplificacioacuten Se

debe controlar estrechamente la pureza de los reactivos

Deseche cualquier reactivo que puede resultar sospechoso

Utilizar los resultados de su control en la casa como parte de las pruebas de

validacioacuten

Seleccioacuten de una muestra para la adecuada dilucioacuten

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 62: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

23 DEFINICIOgraveN DE TEgraveRMINOS BAgraveSICOS

AGLUTINACIOgraveN-diagnoacutestico viral Es un meacutetodo de diagnoacutestico de

laboratorio para la deteccioacuten de partiacuteculas virales (diagnoacutestico directo) o

anticuerpos

ARTRALGIAS- Dolor de las articulaciones

CALICIVIRUS-es una familia de virus infectivos para animales y causantes

de gastroenteritis en humanos Los calicivirus han sido encontrados en la mayoriacutea

de los animales domeacutesticos y muchos silvestres

CIgraveSTICA- El que da salida a los productos de la vesiacutecula biliar y que al unirse

al conducto hepaacutetico forma el coleacutedoco

CITOCROMO- son proteiacutenas de color oscuro que desempentildean una funcioacuten

vital en el transporte de energiacutea quiacutemica en todas las ceacutelulas vivas

CUALITATIVA- es un meacutetodo de investigacioacuten usado principalmente cortes

metodoloacutegicos basados en principios teoacutericos

DEPRESIBLE- suave blando recubierto por una caacutepsula fibrosa

DIAFRAGMATICA-Se conoce como arteria diafragmaacutetica inferior arterias

freacutenicas inferiores freacutenicas mayores o diafragmaacuteticas

ESTROMA- Trama o armazoacuten de un tejido que sirve para sostener entre sus

mallas los elementos celulares

ENZIMASon moleacuteculas de naturaleza proteica que catalizanreacciones

quiacutemicas

FALCIFORME-toda aquella estructura con forma de hoz o de media luna El

vocablo proviene del genitivo del teacutermino latinofalx que significa hoz maacutes un

derivado de forma

GLUCOgraveGENO- Hidrato de carbono que se encuentra en el hiacutegado y en

menor cantidad en los muacutesculos y en varios tejidos en el momento de ser

utilizada por el organismo se transforma en glucosa

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 63: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

HEMODIAgraveLISIS-meacutetodo para eliminar de la sangre residuos como potasio y

urea asiacute como agua en exceso cuando los rintildeones son incapaces de esto

HEMOLIZADO-es el fenoacutemeno de la desintegracioacuten de los eritrocitos

(gloacutebulos rojos o hematiacutees

HEPATOCITO-es la ceacutelula propia del hiacutegado y que forma su pareacutenquima

HEPATOMEGALIA-es un aumento patoloacutegico del tamantildeo del hiacutegado

Normalmente el hiacutegado no es palpable ya que queda por debajo del reborde

costal

HIPOCONDRIO- Cada una de las dos partes laterales de la regioacuten

epigaacutestrica situada debajo de las costillas falsas (o cartiacutelagos)

IN VITRO-se refiere a una teacutecnica para realizar un determinado experimento

en un tubo de ensayo o generalmente en un ambiente controlado fuera de un

organismo vivo La fecundacioacuten in vitro es un ejemplo ampliamente conocido

MUCOSA-es una capa formada por epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

que recubre las paredes internas de aqueacutellos oacuterganos que estaacuten en comunicacioacuten

con el exterior del cuerpo

NEUTRALIZACIOacuteN-es una reaccioacuten entre un aacutecido y una base Cuando en

la reaccioacuten participan un aacutecido fuerte y una base fuerte se obtiene una sal y agua

NUCLEOCAPSIDE- El nucleocaacutepside es una proteiacutena que envuelve a los

elementos virales

PARENTERAL- Efectuado por viacutea distinta de la digestiva o intestinal

POLIMERASA-es una enzima capaz de transcribir o replicar aacutecidos

nucleicos

POLIPLOIDES- se define como el fenoacutemeno por el cual se originan ceacutelulas

tejidos u organismos con tres o maacutes juegos completos de cromosomas

PROTROMBINA- Se define como el tiempo en segundos necesario para la

formacioacuten del coaacutegulo

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 64: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

SEROCONVERSION-ingreso del virus al organismo (despueacutes de la

infeccioacuten primaria o siacutendrome retro viral agudo) donde ademaacutes se produce la

seroconversioacuten

SIgraveNTESIS- Proceso quiacutemico que permite obtener sustancias que por lo

general se da tambieacuten en la naturaleza combinando sus componentes

24 HIPOgraveTESIS Y VARIABLES

241 HIPOgraveTESIS

El meacutetodo de anaacutelisis inmunocromatograacutefico determinara la ausencia o presencia

del antiacutegeno de la Hepatitis B en las muestras bioloacutegicas en los pacientes que

acuden al Instituto Leopoldo Izquieta Peacuterez de la ciudad de Riobamba

242 VARIABLES DE LA INVESTIGACIOgraveN

VARIABLE INDEPENDIENTE

Prueba de HbsAg en cassette o inmunocromatograacutefica

VARIABLE DEPENDIENTE

Ayuda diagnoacutestica de Hepatitis B

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 65: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

25 OPERACIONALIZACIOacuteN DE VARIABLES

VARIABLES CONCEPTO CATEGORIA INDICADORES TEacuteCNICAS

Variable

Independiente

Valora la presencia o

ausencia del antiacutegeno de

la Hepatitis B

La muestra es

aplicada al

pocillo de

muestra usando

una pipeta Esta

viaja por accioacuten

capilar a la zona

de reaccioacuten y se

evidencian los

resultados

mediante la

formacioacuten de una

banda simple o

doble

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Prueba de HbsAg

en cassette o

inmunocromatograacutefica

Pruebas de un

solo paso

disentildeadas para

uso cliacutenico y

profesional

Variable Dependiente

Permite valorar

la presencia o

ausencia de la

Hepatitis B

Meacutetodo

Inmunocromatograacutefico

Diagnostico

HBsAg (hepatitis

B antiacutegeno de

superficie)

Observacioacuten

guiacutea de

observacioacuten

Ayuda diagnoacutestica de

Hepatitis B

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 66: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

CAPITULO III

3 MARCO METODOLOgraveGICO

31 MEgraveTODO CIENTIgraveFICO

Meacutetodo a utilizarse es el meacutetodo loacutegico Deductivo ndash inductivo con procedimiento

analiacutetico sistemaacutetico

311 TIPO DE INVESTIGACIOgraveN

Descriptiva narra situaciones o sucesos detalla como es y coacutemo se comporta el

fenoacutemeno problema o hecho en nuestro la investigacioacuten realizada en las

muestras obtenidas

Explicativa explica como es y coacutemo se comporta el fenoacutemeno problema o hecho

llega a establecer las causas que produjeron el fenoacutemeno

312 DISENtildeO DE LA INVESTIGACIOgraveN

De campo cuasi- experimental

313 TIPO DE ESTUDIO

Longitudinal

32 POBLACIOgraveN Y MUESTRA

La investigacioacuten propuesta se realizoacute a 50 pacientes que acuden al sub centro Nordf

6 de la provincia de Chimborazo

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 67: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

33 TEgraveCNICAS E INSTRUMENTOS EN LA RECOLECCIOgraveN

DE DATOS Y TEgraveCNICAS

331 OBSERVACIOgraveN Uso de teacutecnicas de laboratorio con observacioacuten

macroscoacutepica de las muestras

332 INSTRUMENTOS

GUIA DE OBSERVACIOgraveN

34 TEgraveCNICAS PARA EL ANAgraveLISIS E INTERPRETACIOgraveN DE

RESULTADOS

341 TEgraveCNICAS ESTADIgraveSTICAS

Para el procesamiento de la informacioacuten usaremos el paquete Excel que permite

obtener resultados desarrollar cuadros y graficas al tema

342 TEgraveCNICAS LOgraveGICAS

Para le interpretacioacuten de los resultados se va a utilizar el anaacutelisis

COMPROBACIOacuteN DE LA HIPOacuteTESIS

Al realizar la presente investigacioacuten formulamos la siguiente hipoacutetesis El meacutetodo

del anaacutelisis inmunocromatograacutefico determina la presencia ausencia del antiacutegeno

del virus de la hepatitis B las cuales indicaron la ausencia del antiacutegeno en los 50

pacientes

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 68: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

Tabla Nordm 1

PACIENTES REALIZADOS LA PRUEBA PARA EL

DIAGNOSTICO DE HEPATITIS B

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo Izquieta Peacuterez de la

Provincia De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm1

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 100 que corresponden a 50 pacientes no presentan el antiacutegeno de la

Hepatitis B realizadas en el Sub-Centro Izquieta Peacuterez en la provincia de

Chimborazo

0

100

RESULTADOS DE HEPATITIS B

POSITIVO

NEGATIVO

Frecuencia Porcentaje

POSITIVO 0 0

NEGATIVO 50 100

TOTAL 50 100

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 69: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

TABLA Nordm 2

GRUPO ETARIO DE PACIENTES QUE SE REALIZARON

PRUEBAS DE HEPATITIS B

EDAD Frecuencia Porcentaje

lt 20 9 18

21-30 27 54

31-40 12 24

gt 40 2 4

Total 50 100

Fuente Datos obtenidosen el InstitutoNacional de HigieneLeopoldo IzquietaPeacuterez de la Provincia

De Chimborazo

Elaborado por Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

GRAFICO Nordm2

INTERPRETACIOgraveN DE RESULTADOS

El 18 que corresponden a 9 pacientes son menores de 20 antildeos

El 54 que corresponden a 27 pacientes estaacuten entre los 21 a 30 antildeos

El 24 que corresponden a 12 pacientes van entre 31 a 40 antildeos

El 4 que corresponden a 2 pacientes son mayores de 40 antildeos

0

5

10

15

20

25

30

lt 20 21-30 31-40 gt 40

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 70: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

CAPITULO IV

4CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

41 CONCLUSIONES

Una vez realizadas las pruebas por medio de la teacutecnica

inmunocromatograacutefica para la Hepatitis B se pudo conocer que no

presentan el antiacutegeno de superficie en las muestras que se realizoacute en el

laboratorio del sub centro nordm6 de la provincia de Chimborazo en el periodo

de mayo - septiembre del 2007

Al poseer conocimiento de a que se define como Hepatitis B como

tambieacuten los de su clasificacioacuten como ABC etc sus distintas

sintomatologiacutea viacutea de transmisioacuten mecanismo de accioacuten etc tenemos

una idea mucho maacutes clara de la importancia que tiene su estudio

El procedimiento para la determinacioacuten de la prueba

inmunocromatograacutefica en cassette tiene la ventaja de que es muy raacutepida y

sencilla siempre y cuando se sigan todos los procedimientos y paraacutemetros

establecidos

La desventaja es que por ser una prueba de escreenin no es cien por ciento

con fiable

Con la obtencioacuten de los datos estadiacutesticos se da a conocer que el 100 que

corresponden a 50 pacientes no se encuentra presente el anticuerpo de la

Hepatitis B

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 71: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

42 RECOMENDACIONES

No se debe trabajar con muestras hemolizadas ni lipeacutemicas interfieren en

su resultado final

Cada cassette debe ser claramente identificado para evitar confusioacuten al

momento de la interpretacioacuten de resultados

Se debe utilizar las barreras de proteccioacuten como guantes mascarilla

mandil etc para evitar la contaminacioacuten

Si es un profesional sanitario seguir las buenas praacutecticas de uso y

eliminacioacuten de agujas para evitar un accidente de trabajo o contagio

Autoclavar todo material infeccioso antes de ser eliminado

Si una prueba da como resultado positivo se debe confirmar por otros

meacutetodos

Todo el personal que trabaja en el aacuterea de laboratorio debe estar

vacunado

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 72: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

BIBLIOGRAFIacuteA

1 Harrison Tood Principios de Medicina Interna 14ordf edicioacuten en espantildeolpor

Mc Graw-Hill Interamericana de Espantildea Berkon R El Manual Merck 9ordf

edicioacuten espantildeola Editorial Oceacuteano 1994

2 Dienstag JL Hepatitis B virus Infection N engl J Med 2008 3591486-

1500

3 Sorrell MF Belongia EA Costa J Gareen IF Grem JL Inadomi JM et

al National Institutes of Health Consensus Development conference

Statement Management of hepatitis B Ann Intem Med2009150104-10

4 Centro para el control de enfermedades

Httpwwwcdcgovncidoddiseaseshepatitisbhechohtm

5 Enciclopedia Encarta 2009

6 Fcmjtrigosldcumaterialesfisiologiacuteahiacutegadodoc

7 Fundacioacuten de la Hepatitis B httpwwwhepdorgpatientsgeneral-

_informationhtm

8 Organizacioacuten Mundial de la Salud

httpwwwwhointmediacentrehechosheetsfs204en

9 httpwwwugresseianezinmunocap_01htm

10 httpwwwmonogflicomtubgscepidemiashthtml

11 (httpwwwtopalbertadoctorsorginformed_practicecpgsviral_hepatitis

html)

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

Page 73: UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOdspace.unach.edu.ec/bitstream/51000/982/1/UNACH-EC-LAB.CLIN-2… · “importancia de la prueba hbsag cassette como ayuda de diagnostico para hepatitis

12 httpwwwbcguidelinescagpacpdfviheppdf

FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm10 Prueba negativa

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

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FOTO Nordm1

Laboratorio cliacutenico en el Sub ndash Centro de Salud Nordm6 Izquieta Peacuterez de Riobamba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm2 Desechos cortopunzantes

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

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FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

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FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

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FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

Fuente Sauacutel Colcha y Carlos Mejiacutea

FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

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FOTO Nordm10 Prueba negativa

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FOTO Nordm3 Aacuterea de toma de muestras

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FOTO Nordm4 Aacuterea de Centrifugacioacuten

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FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

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FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

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FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

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FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

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FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

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FOTO Nordm10 Prueba negativa

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FOTO Nordm5 Muestras centrifugadas (sangresuero)

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FOTO Nordm6 Aacuterea de Serologiacutea

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FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

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FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

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FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

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FOTO Nordm10 Prueba negativa

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FOTO Nordm7 Realizacioacuten de las pruebas

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FOTO Nordm8

Desarrollo de la prueba

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FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

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FOTO Nordm9

Interpretacioacuten de resultados (positiva - negativa)

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FOTO Nordm10 Prueba negativa

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