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UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
MACHALA2016
AVILA CAMPOVERDE JHON JAIRO
EFECTO ANTIFÚNGICO DE SEIS EXTRACTOS VEGETALES SOBRE ELHONGO MYCOSPHAERELLA SP EN EL CULTIVO DE BANANO
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
MACHALA2016
AVILA CAMPOVERDE JHON JAIRO
EFECTO ANTIFÚNGICO DE SEIS EXTRACTOS VEGETALESSOBRE EL HONGO MYCOSPHAERELLA SP EN EL CULTIVO DE
BANANO
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA
MACHALA2016
AVILA CAMPOVERDE JHON JAIROINGENIERO AGRÓNOMO
EFECTO ANTIFÚNGICO DE SEIS EXTRACTOS VEGETALES SOBRE EL HONGOMYCOSPHAERELLA SP EN EL CULTIVO DE BANANO
Machala, 19 de octubre de 2016
JARAMILLO AGUILAR EDWIN EDISON
TRABAJO DE TITULACIÓNTRABAJO EXPERIMENTAL
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2
U R K N DU
DEDICATORIA
Quiero dedicar este trabajo de investigación con mucho amor a las
personas que en todo momento me apoyaron para no desmallar y lograr a culminar con
éxito la meta trazada como lo es ser un buen profesional.
A mi madre Sra. Lilia V. Campoverde Campoverde, quien con su ternura y sabios
consejos supo poner en mi corazón toda la fortaleza necesaria para lograr con éxito lo
mejor que la vida nos puede brindar.
A mi padre Sr. Raul S. Avila Sánchez, quien con su dedicación, humildad y
responsabilidad, supo poner en mí esa mística de responsabilidad y humildad en todo lo
que un hombre pueda aportar tanto en el trabajo como en el hogar.
A mi hermana Srta. Evelyn C. Avila Campoverde, quien me brindó su apoyo incondicional
en el transcurso de mi carrera.
A mí querida novia Srta. Jessica K. Obando Saldarriaga quien con su amor puro e
incondicional supo brindarme toda la fortaleza para superar las adversidades emocionales
y de trabajo para seguir adelante.
Jhon Jairo Avila Campoverde
AGRADECIMIENTO
En primer lugar quiero agradecer a DIOS que me han dado la oportunidad y la suficiente
inteligencia para poder aprender y prepararme para enfrentarme a la vida.
A la Universidad Técnica de Machala y en especial a la Facultad de Ciencias
Agropecuarias, Escuela de Ingeniería Agronómica, quienes con la dedicación de aporte a
la Ciencia por parte de todos sus titulares académicos para brindarnos los conocimientos
necesarios en todas y cada una de las asignaciones relacionadas a nuestra carrera y
ejecutarlas en el campo profesional.
Al Sr. Ing. Agr. Edwin Jaramillo Aguilar, quien aportó con sus conocimientos técnicos y
científicos para el desarrollo y culminación de este trabajo de investigación y que sirve de
guía para la sociedad que tiene afinidad con la producción de banano.
A los Sres. Miembros del Honorable Concejo Directivo Ing. Agr. Sara Castillo, Ing. Agr.
Abraham Cervantes, quienes me brindaron su apoyo y confianza en la culminación y
exposición de mi trabajo de titulación.
A mis amigos Adrián Rubio, Iván Zhiñin y especialmente a Cinthia Calva, por su
cooperación en el presente trabajo ayudándome así a culminar con éxito mi trabajo de
titulación.
A todos mis compañeros de aula, autoridades y personal administrativo de nuestra
Facultad que de una u otra manera colaboraron en mi proyecto.
El autor.
EFECTO ANTIFÚNGICO DE SEIS EXTRACTOS VEGETALES SOBRE EL HONGO
Mycosphaerella sp EN EL CULTIVO DE BANANO
Avila Campoverde, Jhon;
Jaramillo Aguilar, Edison
RESUMEN
El presente trabajo se realizó en la Unidad Académica de Ciencias Agropecuarias, de la
Universidad Técnica de Machala. Debido a la problemática que se presenta en el cultivo
de banano a causa del hongo Mycosphaerella sp., es un ascomiceto que ataca
principalmente a la parte foliar de la planta, reduciendo su capacidad fotosintética e
impidiendo que la planta pueda desarrollarse con un alto vigor vegetativo, causando
pérdida de peso en los racimos y precocidad en la madures del fruto del banano,
afectando de gran manera los intereses tanto de productores como comerciantes del
sector bananero. El sector bananero Ecuatoriano en el año 2012 exportó USD
2,078,239.38 millones de dólares por divisas y 5,196,065.09 toneladas ubicando a esta
fruta como el principal producto de exportación del país El uso excesivo de fungicidas en
los cultivos agrícolas, los hongos han desarrollado un sistema de resistencia antes estos
productos fúngicos, contaminación ambiental y riesgos de salud pública, de tal manera se
está desarrollando extractos que inactiven la actividad anti fúngica, para la búsqueda de
nuevas alternativas en el control de hongos y sus micotoxinas. Los extractos vegetales
poseen un origen biológico, son biodegradables y presentan un mínimo impacto negativo
contra el medio ambiente y la salud humana; los extractos y aceites esenciales de plantas
contienen muchas de ellas actividad antimicrobiana y antifúngica los cuales dichos
conocimientos son conocidos desde la antigüedad. Las especies vegetales constituyen
una fuente de estructuras bioactivas las cuales poseen actividad intrínseca y servir para el
uso de fungicidas orgánicos y seguros. En el laboratorio de fitopatología se realizaron
pruebas para comprobar el efecto antifúngico que contienen los extractos de las plantas
de hierba luisa (Cymbopogon citratus Staff.), borraja (Borago officinalis L.), romero
(Rosmarinus officinalis L), cedrón (Aloysia triphylla L) e hinojo (Foeniculum vulgare M.). Se
recolectaron hojas de banano infectadas con el hongo de la sigatoka negra
(Mycosphaerella sp.), se aisló a nivel in vitro usando como medio de cultivo PDA (papa +
dextrosa + agar), evaluando los diferentes extractos vegetales. Para el ensayo se realizó
6 tratamientos con 5 repeticiones, incluido el testigo, tomando variables como crecimiento
radial del micelio y porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp, Los extractos
vegetales evaluados fueron Hierba luisa (T1), Hinojo (T2), Cedrón (T3), Romero (T4),
Borraja (T5) y un Testigo (T6). Se utilizó un Diseño Completamente al Azar (DCA), por
las condiciones homogéneas que presenta el ensayo. Las variables se evaluaron cada 10
días después de la inoculación en un periodo de duración de 30 días. De acuerdo a los
resultados obtenidos los mejores extractos que presentan efecto antifúngico son el T1, T3
y T4, siendo el T1 el mejor de ellos con un porcentaje de control de 64,52% en relación al
tratamiento testigo; el efecto antifúngico de la hierba luisa se debe a que contienen aceite
esencial (0.5 – 0.7 %) citral, Geranial y neral. Triterpenoides (cimbopogana, cimboponal) y
flavonoides (luteolina, isoorientina y derivados); la Borraja (T5) mostró un efecto
estimulante en el crecimiento radial del micelio superando al testigo con una diferencia del
4,42%.
Palabras clave: Mycosphaerella sp., PDA, extracto vegetal, micelio, variables, antifúngico
ANTIFUNGAL EFFECT OF SIX PLANT EXTRACTS ON THE FUNGUS Mycosphaerella
sp IN THE CULTIVATION OF BANANAS
Avila Campoverde, Jhon;
Jaramillo Aguilar, Edison
SUMMARY
The present work was carried out in the Academic Unit of Agricultural Sciences of the
Technical University of Machala. Due to the problem that is presented in the cultivation of
bananas at the cause of the fungus Mycosphaerella sp., is a ascomiceto that primarily
strikes to the part of the plant leaf, reducing its photosynthetic capacity and preventing the
plant can be developed with a high force vegetative, causing loss of weight in the clusters
and precocity in the madures of the fruit of the banana, affecting in a big way the interests
of both producers and traders in the banana sector. The Ecuadorian banana sector in the
year 2012 exported USD 2,078,239.38 million dollars for foreign currency and
5,196,065.09 Tons placing this fruit as the main export product of the country the
excessive use of fungicides in agricultural crops, fungi have developed a system of
resistance before these fungal products, environmental pollution and public health risks, so
is developing extracts that inactivate the anti fungal, to the search for new alternatives in
the control of fungi and the mycotoxins. The plant extracts have a biological origin, are
biodegradable and have a minimum negative impact against the environment and human
health; extracts and essential oils from plants contain many of them antimicrobial activity
and antifungal which such knowledge are known since antiquity. The plant species are a
source of bioactive structures which possess intrinsic activity and serve to the use of
organic fungicides and insurance. In the plant pathology laboratory tests were conducted
to check the antifungal effect that contain extracts from plants Luisa Herb (Cymbopogon
citratus Staff.), borage (borago officinalis L.), rosemary (Rosmarinus officinalis L), Cedrón
(Aloysia triphylla L) and fennel (Foeniculum vulgare M.). Were collected banana leaves
infected with the fungus of the black Sigatoka (Mycosphaerella sp.), was isolated at the
level in vitro using as a culture medium PDA (potato dextrose agar), evaluating the
different plant extracts. The trial was conducted for 6 treatments with 5 replicates,
including the witness, taking variables such as radial growth of mycelium and percentage
of control of the fungus Mycosphaerella sp, the plant extracts were evaluated grass luisa
(T1), Fennel (T2), Cedrón (T3), Rosemary (T4), Borage (T5) and a control (T6). It was
used a Completely Randomized Design (DCA), by homogeneous conditions that presents
the test. The variables were assessed every 10 days after inoculation in a duration of 30
days. According to the results obtained the best extracts which have antifungal effect are
the T1, T3 and T4, being T1 the best of them with a percentage control of 64,52% in
relation to the witness; the treatment antifungal effect of the grass luisa is due to that
contain essential oil (0.5 - 0.7 %) citral, Geranial and neral. Triterpenoids (cimbopogana,
cimboponal) and flavonoids (luteolina, isoorientina and derivatives); Borage (T5) showed a
stimulating effect on the radial growth of mycelium surpassing the witness with a difference
of 4.42%.
Key words: Mycosphaerella sp., PDA, vegetal extract, mycelium, variables, antifúngico
ÍNDICE DE CONTENIDO
TEMA PÁGINA
1. INTRODUCCIÓN ..................................................................................................................... 1
2. REVICION DE LITERATURA ................................................................................................... 2
2.1. Caracteristicas del cultivo de banano ............................................................................... 2
2.2. Enfermedad en el cultivo de banano ................................................................................. 2
2.3. Sintomologia de la enfermedad. ........................................................................................ 3
2.4. Reproducción del patógeno ............................................................................................... 3
2.5. Extractos vegetales ............................................................................................................. 4
A) Hierba Luisa ..................................................................................................................... 5
B) Borraja ............................................................................................................................... 6
C) Romero ............................................................................................................................. 7
D) Cedrón............................................................................................................................... 8
E) Hinojo ................................................................................................................................ 9
3. MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................................... 11
3.1. Materiales ....................................................................................................................... 11
3.1.1. Ubicación política ................................................................................................... 11
3.1.2. Ubicación geográfica ............................................................................................. 11
3.1.3. Clima y ecología .................................................................................................... 11
3.1.4. Materiales y equipos utilizados ............................................................................ 11
3.1.5. Tratamientos ........................................................................................................... 12
3.1.6. Variables evaluadas ............................................................................................. 12
3.1.7. Medición de las variables ..................................................................................... 12
3.2. Métodos .......................................................................................................................... 13
3.2.1. Preparación de medio de cultivo pda .................................................................. 13
3.2.2. Extracción por maceración ................................................................................... 13
3.2.3. Aislar “in vitro” Mycosphaerella sp., agente causal de la enfermedad de la
sigatoka negra en el cultivo de banano, usando como medio de cultivo p.d.a.
(papa+dextrosa+agar) .......................................................................................................... 13
3.2.4. Evaluar el efecto antifúngico de extractos vegetales sobre Mycosphaerella
sp en el cultivo de banano.................................................................................................... 14
3.2.5. Diseño experimental .............................................................................................. 14
3.2.6. Modelo matemático ............................................................................................... 14
3.2.7. Hipótesis ................................................................................................................. 15
4. RESULTADOS Y DISCUSIONES ...................................................................................... 16
4.1. Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., a los 10 días después de
inoculación.................................................................................................................................. 16
4.2. Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., a los 20 días después de
inoculación.................................................................................................................................. 18
4.3. Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella spp., a los 30 días después de
inoculación.................................................................................................................................. 21
5. CONCLUSIONES .................................................................................................................. 25
6. RECOMENDACIONES ........................................................................................................ 25
7. BIBLIOGRAFÍA ..................................................................................................................... 26
8. APÉNDICE ............................................................................................................................. 29
ÍNDICE DE CUADROS
TEMA PÁGINA
Cuadro 1. Tratamientos que se utilizara en control antifúngico de extractos vegetales
sobre Myscospherella sp., en condiciones de laboratorio. 2016 ........................................... 12
Cuadro 2. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp.,
a los 10 días después de la inoculación. ................................................................................... 17
Cuadro 3. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 10 días después
de la inoculación. ........................................................................................................................... 18
Cuadro 4. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp.,
a los 20 días después de la inoculación. ................................................................................... 20
Cuadro 5. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 20 días después
de la inoculación. ........................................................................................................................... 20
Cuadro 6. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella
spp., a los 30 días después de la inoculación. .......................................................................... 22
Cuadro 7. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 30 días después
de la inoculación. ........................................................................................................................... 23
ÍNDICE DE FIGURAS
TEMA PÁGINA
Figura 1.Representación del ciclo de vida de la sigatoka negra (Mycosphharella sp) ......... 4
Figura 2. Crecimiento radial de micelio del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días
después de la inoculación. ........................................................................................................... 16
Figura 3. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días después de la
inoculación. .................................................................................................................................... 17
Figura 4. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 10 días después de
la inoculación. ................................................................................................................................ 18
Figura 5. Radio de crecimiento de micelio del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días
después de la inoculación ............................................................................................................ 19
Figura 6. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días después de la
inoculación. .................................................................................................................................... 19
Figura 7. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 20 días después de
la inoculación. ................................................................................................................................ 20
Figura 8. Radio de crecimiento de micelio del hongo Mycosphaerella spp., a los 30 días
después de la inoculación ............................................................................................................ 21
Figura 9. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella spp., a los 30 días después de
la inoculación. ................................................................................................................................ 22
Figura 10. Test de Tukey con significancia α= 00.5, para diámetro a los 30 días después
de la inoculación. ........................................................................................................................... 23
Figura 11. Crecimiento radial del hongo Mycosphaerella sp., a los 10, 20 y 30 días
después de la inoculación. ........................................................................................................... 24
Figura 12. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 10, 20 y 30 días
después de la inoculación ............................................................................................................ 24
1
1. INTRODUCCIÓN
El principal problema que se presenta en las plantaciones de banano es causada por el
hongo ascomiceto Mycospharella fijiensis que ataca el sistema foliar de la planta,
reduciendo la acción de la fotosíntesis e impidiendo que la planta pueda concluir con su
floración y un buen desarrollo vegetativo, dando como resultado racimos con poco peso
muy por debajo de los estándares comerciales requeridos (Durán, 2016).
La planta de banano tiene el aspecto de árbol por su tamaño y apariencia, es en realidad
una planta herbácea perenne gigante, que alcanza de 3.5 a 7.5 metros de altura y cuyo
“tallo” consiste en un cilindro formado por los pecíolos de las hojas, las cuales están
dispuestas en forma de espiral, de diverso tamaño (Cedeño, 2015).
Durante el curso de su desarrollo los frutos se doblan hacia atrás geotrópicamente. A su
madurez un racimo puede contener de 5 a 10 manos, cada una con 2 a 20 frutos color
amarillo verdoso, amarillo, amarillo-rojizo o rojo, según la variedad (Moreno, 2006).
Ante lo expuesto es necesario realizar esta investigación con la finalidad de controlar el
ataque de este hongo por medio de las acciones anti fúngicas de extractos vegetales,
disminuyendo la aplicación de productos químicos, ya que alteran nuestro ecosistema y
ocasionan problemas tóxicos en nuestro organismo.
Objetivo general
- Evaluar el efecto antifungico de extractos vegetales sobre el hongo
Mycosphaerella sp.
Objetivo especifico
- Determinar el efecto inhibitorio del crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella
sp en condiciones de laboratorio.
- Determinar a nivel in vitro el porcentaje de control de los extractos vegetales sobre
Mycosphaerella sp.
2
2. REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. CARACTERÍSTICAS DEL CULTIVO DE BANANO
El banano en el Ecuador es considerado un producto tradicional de exportación, el cual
tiene un alto nivel de competitividad entre países latinoamericanos. El puesto número uno
le corresponde a Ecuador, seguido de Belgica, Filipinas, Costa Rica y Colombia
(Versesoto, 2016).
El sector bananero Ecuatoriano en el año 2012 exportó USD 2,078,239.38 millones de
dólares por divisas y 5,196,065.09 toneladas ubicando a esta fruta como el principal
producto de exportación del país (Inversiones, 2013).
El banano comprende un 12 % de producción total de frutas en el mundo. En el 2003, la
superficie de cultivo de banano en el mundo fue de 4,494,686 hectáreas. (ANACAFE,
2013). (Paiz, 2013).
Este cultivo pertenece a la familia musácea del género musa de especies acuminata y
balbisiana. Mediante la formación de híbridos ha dado origen a los plátanos que son
partenocárpicos comestibles. El cultivo de banano en climas tropicales y subtropicales,
tiene una actividad vegetativa continua, generando crecimientos y fructificación todo el
año. (Rodriguez Huamanchay, 2013) (Guerrero, 2010).
2.2. ENFERMEDAD EN EL CULTIVO DE BANANO
En el cultivo de banano uno de sus mayores problemas es el causado por el hongo de la
familia Mycosphaerellaceae (sigatoka negra) el cual centra su daño en el follaje de este
cultivo provocando necrosidad y perdida intensa de follaje. (Yangali, 2014).
Clasificación científica
Reino: Fungi
Filo: Ascomycota
Clase: Dothideomycetes
Orden: Capnodiales
Familia: Mycosphaerellaceae
Género: Mycosphaerella
Especie: M. fijiensis Morelet
3
2.3. SINTOMATOLOGÍA DE LA ENFERMEDAD.
Este hongo se lo pueden reconocer a través de seis estados (HORTA, 2009).
Estado 1. Pequeñas lesiones o puntos de color blanco-amarillento a marrón, de 1
mm de longitud, denominadas pizcas, apenas visibles en el envés de las hojas.
Estado 2. Rayas o estrías cloróticas de 3–4 mm de longitud por 1 mm de ancho,
de color marrón.
Estado 3. Las rayas o estrías se alargan y amplían dando la impresión de haber
sido pintadas con pincel, sin bordes definidos y de color café, que pueden
alcanzar hasta 2 cm de longitud.
Estado 4. Manchas ovaladas de color café en el envés y negro en el haz.
Estado 5. Manchas negras rodeadas de un anillo negro y a veces un halo
amarillento y centro seco y semihundido.
Estado 6. Manchas con centro seco y hundido, de coloración marrón clara,
rodeadas de tejido clorótico. (SUÁREZ, 2015).
2.4. REPRODUCCIÓN DEL PATÓGENO
El hongo Mycospharella sp tiene tres cuerpos de fructificación (Perdomo, 2015).
Peritecio
Espermogonios
Conidióforo
Estas son producidas por Mycospharella musicola en una cámara bajo los
estomas de la hoja. (Cuéllar Quintero, 2011).
Peritecio: presenta la forma de una pera de pared gruesa color café oscuro, y con
cuello grueso que emerge a través de la estoma de la hoja. Cada peritecio
puede llegar a producir 150 ascosporos. (Hidalgo S. , 2012).
Espermogonios: representan los órganos sexuales masculinos del hongo,
presentan una forma de pera en los cuales se producen centenares de espermas
sin color alguno. Cuando maduran fluyen suavemente hacia la superficie de la
hoja en roció o lluvia. (Hidalgo S. , 2012).
Conidióforo: son filamentos fungales que emergen a través del estoma de la hoja,
en el extremo final de estos se produce el conidio sin unión sexual, como en el
4
caso de los ascorporas. Los conidios solamente cuando hay presente una
película de agua en la hoja o cuando la atmosfera está saturada de vapor de
agua. Cuando la temperatura es superior a 21ºC en una sola noche se puede
producir una cosecha de conidios, pudiendo una sola mancha producir un
promedio de seis cosechas antes de extinguirse, en la figura 1 se muestra su
ciclo de vida. (Hidalgo S. , 2012).
Figura 1. Representación del ciclo de vida de la sigatoka negra (Mycosphharella sp)
(Hidalgo, 2012)
2.5. EXTRACTOS VEGETALES
Son una mezcla compleja, que contienen compuestos químicos, obtenidos mediante
procesos físicos, químicos y/o microbiológicos, partiendo de una fuente. (Zapata, 2002).
Los extractos vegetales poseen un origen biológico, son biodegradables y presentan un
mínimo impacto negativo contra el medio ambiente y la salud humana. (Segura Contreras,
2015).
Concentrado obtenido de productos vegetales con solventes como agua, etanol,
elementos solubles o procesos mecánicos, fisicoquímicos. Estos contienen principios
activos y sustancias inertes extraídos de partes de las plantas ya sean secas o frescas.
(Elington, 2015).
Debido al usos excesivo de fungicidas en los cultivos agrícolas, los hongos han
desarrollado un sistema de resistencia antes estos productos fúngicos, contaminación
ambiental y riesgos de salud pública, de tal manera se está desarrollando extractos que
5
inactiven la actividad anti fúngica, para la búsqueda de nuevas alternativas en el control
de hongos y sus mico toxinas (Centeno S, 2013).
La planta de hierva luisa contiene un alto rendimiento de actividad antifúngica además no
presenta Fito toxinas, tal manera que no afecta la actividad agrícola, recomendado su
aplicación e investigaciones. En un estudio reciente realizado en la Universidad Técnica
de Machala de aceites esenciales demuestra que existe un mayor rendimiento de control
fúngico de Mycosphharella sp con la utilización de Hierva luisa (Sánchez, 2015).
Los extractos y aceites esenciales de plantas contienes muchas de ellas actividad
antimicrobiana y antifúngica los cuales dichos conocimientos son conocidos desde la
antigüedad (Valdés Oderlaise, 2016).
Las especies vegetales constituyen una fuente de estructuras bioactivas las cuales
poseen actividad intrínseca y servir para el uso de insecticidas orgánicos y seguros
(Albrecht A, 2015).
a) HIERBA LUISA
Nombre científico: Cymbopogon citratus (DC) Staff.
Nombre vulgar: caña santa, cañita de limón, hierba luisa
Familia botánica: Poacea
Origen: Sureste Asiático
Características botánicas
Hojas: aromáticas (con aroma alimonada), agrupadas cerca de la base, lineares, de hasta
casi 1 metro de longitud, con el borde cortante, de 6 a 10 decímetros, sus ramas
alargadas y un tanto penduladas.
Tallos: muy ramificado de 1 a 2 metros de alto con los nudos ceríferos.
Flores: se reúnen en espiguillas en pares.
Principios activos:
Las hojas contienen aceite esencial (0.5 – 0.7 %) citral, Geranial y neral. Triterpenoides
(cimbopogana, cimboponal) y flavonoides (luteolina, isoorientina y deerivados).
(Altamirano F, 2016).
6
Según un estudio realizado el 2010 mencionan que el extracto de hierba luisa mostro un
efecto auntifúngico del hongo sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis), en condiciones
semicontroladas (Morales Lian, 2011).
Según estudio realizado por Karen Montesinos declara que el aceite esencial de hierba
luisa presenta un efecto antifúngico ante el crecimiento del hongo Mycosphaerella fijiensis
(Montesinos, 2014).
El extracto de hierba luisa (Cymbopogon citratus) presento un excelente resultado sobre
Fusarium controlándolo a un 100%, en cambio el aceite esencial alcanzo un porcentaje de
control de 50 y 75% (Cabrera Arévalo, 2009).
El aceite esencial de hierba luisa (Cymbopogon citratus), para control de Fusarium
demostró un resultado positivo inhibiendo por completo su crecimiento (Cárdenas
Verdezoto, 2014).
Para el control de Fusarium oxysporum f. sp., se realizaron pruebas con aceite esencial
de (Cymbopogon citratus), obteniendo buenos resultados en la inhibición de su
crecimiento (Villa Martinez., 2015).
Trabajo realizado en el cultivo de melocotón determinan que el aceite esencial de hierba
luisa (Cymbopogon citratus) a concentración de 0,15 y 0,20% posee propiedades
antifúngicas contra Monilinia fructicola agente causal de la podredumbre parda (Pansera
M, 2015).
b) BORRAJA
Nombre científico: Borago officinalis L.
Nombre vulgar: borraga, borracha, bora, corrago, alcohelo.
Familia botánica: Boragináceas
Origen: Europa y el norte de África
Características botánicas
Es una planta de 60 cm robusta cubierta por pelos ásperos muy rígidos, de gruesa y
prolongada de raíz
Hojas: esparcidas y oscuras muy gruesas.
Tallos: erectos cubiertos de cerdas
Flores: azueles, blancas o violáceas que forman ramilletes
7
Principios activos
Contienen mucílagos (sustancias gelatinosas), taninos, saponina, ácido salicílico, nitrato
de potasio, sales minerales, alantoína, vitamina A. Las hojas jóvenes poseen bastante
vitamina C.
La borraja es rica en GLA (Ácido Gamma Linoleico), un ácido graso precursor de las
protaglandinas antiinflamatorias, y perteneciente a la familia de los omega 6, e importante
para la salud de la piel. Por ello se elabora el aceite de borraja, que puedes adquirir en
herbolarios para aplicar sobre la piel.
Según estudio realizado por Cuvi Jemberly, señala que el extracto de Bixa orellana a
concentraciones de 1,5 y 0,5 mg/mL estimula el crecimiento del hongo del genero
Sclerotium., y a una concentración de 1.5 y 3 0,5 mg/mL estimulo el crecimiento del
genero Sclerotinia sp. También se evidencio quien el extracto de Carica papaya a
concentración de 0,5, 1,5 y 3 mg/mL estimulo el crecimiento del hongo del genero
Sclerotium y Sclerotinia sp., (Cuvi Cuvi, 2013).
Estudio realizado en la Universidad del Azuay mencionan que el extracto de borraja
(Borago officinalis L.) presenta actividad biocontroladora sobre Alternaria sp., (Cabrera
Arévalo, 2009).
c) ROMERO
Nombre científico: Rosmarinus officinalis L
Nombre vulgar: Romero
Familia botánica: Lamiáceae
Origen: península ibérica
Características botánicas
Es un arbusto aromática pude medir de 1 a 2 metros de altura
Hojas: crecen sobre el tallo sin pedúnculo de forma abundante siendo de forma larga y
estrecha, una longitud de 1,5 a 3 cm y de 2 a 3 de anchura
Tallos: erectos
Flores: azueles, rojas o violáceas que forman ramilletes en la unión del tallo con la hoja
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Principios activos
En las hojas contienen ácido ascórbico, acido nicótico, vitaminas como (beta - caroteno),
colina, además existen minerales como calcio, hierro, magnesio y fosforo. (Tránsito
Lopez, 2008).
Mientras que en la planta se encuentra ácidos acético y láctico, azucares como arabinosa
y galactosa, además presenta fibra, mucilago, taninos y alcaloides. (Avila Sosa, 2011).
Un estudio realizado por Alex Ruilova menciona que el aceite esencial de romero
(Rosmarinus officinalis L), tuvo un buen comportamiento en el control del crecimiento de
la bacteria Pseudomona siringae. y en control de hongos fitopatógenos este aceite
esencial de romero presenta una eficiencia para el control de Alternaria sp., (Ruilova
Reyes, 2007).
El aceite esencial de romero (Rosmarinus officinalis L), para el control de Fusarium no
mostro ninguno control en la inhibición del crecimiento del hongo (Cárdenas Verdezoto,
2014).
d) CEDRÓN
Nombre científico: Aloysia triphylla (L’Hérit.) Britt.
Nombre vulgar: cedrón, hierba luisa o verbena de Indias
Familia botánica: Verbenaceae
Origen: Originaria de la región montañosa de Argentina (Catamarca, La Rioja, Salta),
Chile y Perú, en donde se la puede encontrar silvestre. Se la cultiva en numerosas partes
del mundo: América, desde Estados Unidos, hasta la Argentina; Europa, en el sur; África,
en el norte y en el sur (CIID, 1998).
Características botánicas
Arbusto caducifolio, de entre 3 a 7 m de altura, con tallos sub leñosos o leñosos en la
parte superior.
Hojas: verticiladas de hasta 7 cm, de forma lanceolada, apicada, con el margen liso o
dentado y el pecíolo muy corto, son de color verde claro por el haz, con el envés marcado
por glándulas oleosas bien visibles. Despiden una fuerte fragancia a limón.
Flores pequeñas blanquecinas o blanquecino-violáceas, agrupadas en espigas. También
tiene flores de color rosa. Florece en verano, formando inflorescencias en espigas laxas,
9
de hasta 10 cm de largo, de color pálido o lila. El cáliz posee dos labios laterales; la corola
es acampanada, simpétala, con los lóbulos imbricados. El gineceo está formado por dos
carpelos unidos. (Elington, 2015).
Fruto es una drupa dividida en dos núculas monoseminadas.
Principios activos
Aceite esencial (0,1-0,3 %):
Monoterpenos: limoneno (6%).
Sesquiterpenos (1 8%).
Alcoholes alifáticos (1-1,5%).
Monoterpenoles (15-16%): a-terpineol, citronelol, nerol, geranio.
Sesquilerponoles (4-5%).
Esteres terpenicos (6%).
Aldehidos (39-40%)
Óxidos terpénicos.
Furocumarinas.
Flavonoides (Rojas, 2012).
Estudio realizado determino que el aceite esencial de cedrón (Aloysia triphylla) a
concentraciones de 0.03% inhibió la presencia de hongos y bacterias en germinación de
orquídeas (in vitro) (Serrano R, 2013).
El extracto de cedrón (Aloysia triphylla) mostro actividad larvicida a concentración de 5000
mg/L controlando hasta el 40% de las larvas del mosquito (Aedes aegypti). Para el control
de Fusarium verticillioides por medio de extractos vegetales demostraron que el aceite de
cedrón (Aloysia triphylla) presento capacidad hinibidora para este hongo (Albrecht A,
2015).
e) HINOJO
Nombre científico: Foeniculum vulgare M.
Familia botánica: Solanaceae
Origen: Europa meridional, Asia. Cultivada, cosmopolita. Terrenos incultos, colinas secas.
Se encuentra en los ribazos y eriales de la península Ibérica y Baleares.
10
Características botánicas
Planta vivaz de 0.80 - 2 m de altura
Hojas: envainadoras, finamente pinnadas, verdes azuladas
Tallos: Tallos ramoso, verde estriado de azul, brillante, pleno.
Flores: amarillas, en grandes umbelas.
Fruto: gris oscuro, fusiforme, estriado, glabro. Olor aromático, sabor picante amargo.
Principios activos
La planta, y particularmente las semillas, contienen un aceite esencial (Ol. Foeniculi), en
el que hay un 50 - 60% de anetol (de sabor azucarado) y un 20% de fenchona (amarga y
acre), así como una decena de otros compuestos como sales minerales, vitaminas A, B,
C. (Sanches, 1997).
El aceite esencial de hinojo (Foeniculum vulgare M.) presenta una actividad
biocontroladora frente a Alternaria sp (Ruilova Reyes, 2007).
Estudio realizado demostró que el extracto de hinojo (Foeniculum vulgare M.) en hojas
frescas induce la resistencia a nivel sistemático sobre la infección causada por Botrytis
cinérea P. en cultivo de Phaseolus vulgaris L. (Rey Casal, 2014).
11
3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. MATERIALES
3.1.1. UBICACIÓN POLÍTICA
El presente trabajo se realizó en la granja experimental Santa Inés de la Facultad de
Ciencias Agropecuarias de la Universidad Técnica de Machala, ubicada en el km 5,5 vía
Paquisha, perteneciente a la parroquia El Cambio, provincia de El Oro Ecuador.
3.1.2. UBICACIÓN GEOGRÁFICA
La ubicación geográfica del ensayo está ubicada en las siguientes coordenadas:
3.1.3. CLIMA Y ECOLOGÍA
Según la zona de vida natural de Holdridge y el mapa ecológico del Ecuador, corresponde
a un monte espinoso Tropical (me – T) con temperatura de 24 a 25° C, una precipitación
de 400 a 500 mm anuales y humedad relativa de 80 %.
3.1.4. MATERIALES Y EQUIPOS UTILIZADOS
Para la obtención de muestras del hongo se usaron hojas de banano con síntomas del
patógeno de Mycosphaerella sp., en estadio uno y dos, el medio de cultivo que se utilizo
es papa dextrosa agar (PDA), para la esterilización del medio y materiales se utilizó
autoclave 121 °C, etanol 70%, hipoclorito de sodio 1%, agua destilada esterilizada,
mechero de alcohol, para la medición de volúmenes utilizamos pipetas, erlenmeyer, para
la realización del bioensayo se utilizó una cámara de flujo laminar, incubadora 25-28 °C,
cajas petri, tubos de ensayos, para garantizar condiciones estériles, para la medición del
diámetro de las colonias se utilizó una regla, las plantas que utilizamos fueron Hierba
luisa, Borraja, Romero, Cedrón, Hinojo y un testigo.
12
3.1.5. TRATAMIENTOS
Los tratamientos de los extractos vegetales evaluados consistieron en una dosis de 750
ppm, los cuales tuvieron cada uno 4 repeticiones respectivamente y un testigo absoluto.
Cuadro 1. Tratamientos utilizados en el control antifúngico de extractos vegetales sobre
Myscospherella sp., en condiciones de laboratorio. 2016
TRATAMIENTOS COMPUESTO DOSIS (PPM)
T1 Hierba luisa 750
T2 Hinojo 750
T3 Cedrón 750
T4 Romero 750
T5 Borraja 750
T6 Testigo -
3.1.6. VARIABLES EVALUADAS
- Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., a los 10 días.
- Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., a los 20 días.
- Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., a los 30 días.
- Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días.
- Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días.
- Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 30 días.
3.1.7. MEDICIÓN DE LAS VARIABLES
Crecimiento radial del micelio de Mycosphaerella sp., cada 10 días después de la
inoculación, para esta evaluación se mide el micelio con la ayuda de una regla,
observando su crecimiento.
Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., cada 10 días después de la
inoculación, para esta medición de esta variable de porcentaje de control se usa para el
cálculo la siguiente formula usando la media de repeticiones de testigo (control) para cada
observación a analizar:
13
3.2. MÉTODOS
3.2.1. PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO PDA
Para preparar 1 lt de medio de cultivo, se procedió a pesar 39 gr de papa dextrosa agar
(PDA) y se adicionó 1 lt de agua en un Erlenmeyer o vaso de precipitación. Se calentó el
envase por 1 hora a Baño María, después de enfriar, se colocó en vaso de precipitación y
se tapó con papel aluminio, para llevarlo al autoclave a eterizarlo, por 20 minuto a 121°C.
3.2.2. EXTRACCIÓN POR MACERACIÓN
La extracción por maceración sigue el procedimiento descrito a continuación.
Aproximadamente 100 gramos de follaje de las plantas en estudio fueron colocadas en un
matraz, y sumergidos en 200 ml de agua hirviendo. Se dejó en reposo a temperatura
ambiente y oscuridad por 48 horas.
Luego de este periodo el material de maceración se filtró, en volúmenes de 1ml,
debidamente identificados. Con las soluciones obtenidas se desarrollaron los bioensayos
posteriores.
3.2.3. AISLAR “IN VITRO” Mycosphaerella sp., AGENTE CAUSAL DE LA
ENFERMEDAD DE LA SIGATOKA NEGRA EN EL CULTIVO DE BANANO, USANDO
COMO MEDIO DE CULTIVO P.D.A. (PAPA+DEXTROSA+AGAR)
Se seleccionaron hojas de banano con síntomas de sigatoka negra, de primer y segundo
estadio, de la bananera de la UACA, las muestras fueron puestas en fundas de papel y
transportadas al laboratorio de fitopatología para seleccionar las partes con mayor
presencia del hongo. En la cámara de flujo laminar se recortaron pedazos de 3x3 mm
estos son esterilizados por 5 minutos en etanol 70%, luego por 8 minutos en hipoclorito de
sodio al 1% y enjuagados con agua destilada.
Se las coloco en papel filtro para ser secadas los pedazos de hojas, estos fueron
ubicados en las cajas de petri con el envés frente al medio de cultivo PDA para la
descarga de ascosporas. Estas son incubadas a 25 °C por 15 días para el desarrollo del
hongo. Cuando el patógeno estuvo desarrollado se colocaron pequeñas porciones de
colonias en tubos de ensayos con 5 ml de PDA en una incubadora para su conservación
por 20 días para inocular en cajas de petri con medio cultivo envenados con los extractos
antifúngicos.
14
3.2.4. EVALUAR EL EFECTO ANTIFÚNGICO DE EXTRACTOS VEGETALES SOBRE
Mycosphaerella sp EN EL CULTIVO DE BANANO.
Para realizar la concentración de los extractos vegetales en ppm (partes por millón), se
utilizó esta fórmula:
ppm = x/y
De donde: x = ml del extracto vegetal; y = litro de agua
Con la ayuda de pipeta se medirá 2 ml de extracto vegetal, se mezcló en un vaso de
precipitación con 48 ml de agua destilada esterilizada obteniendo una concentración
patrón. Las dosis se calculó en 100 ml de medio de cultivo PDA para alcanzar 750 ppm
del extracto vegetal en el medio de cultivo y para el tratamiento control solo se usó agua
destilada esterilizada.
Con la ayuda de un sacabocados, en los aislados del hongo se obtiene 5 mm de diámetro
de micelios de Mycosphaerella sp., que fueron ser colocados en las cajas de petri con
PDA envenenado con los extractos vegetales, colocando el micelio en el centro la caja
petri en cada uno de los tratamientos. Se mantuvo en una incubadora a 25 °C por el lapso
de 30 días realizando las medidas de las variables en el crecimiento del diámetro del
hongo y el porcentaje de inhibición de los extractos vegetales en cada tratamiento.
3.2.5. DISEÑO EXPERIMENTAL
Se utilizó un Diseño Completamente al Azar (DCA) debido a las condiciones
homogéneas que presenta el ensayo. Se establecieron 6 tratamientos con 5 repeticiones,
obteniendo 30 unidades experimentales, las variables se evaluaron cada 10 días después
de la inoculación en un periodo de duración de 30 días.
3.2.6. MODELO MATEMÁTICO
El modelo matemático del diseño completamente al azar, viene simbolizado mediante la
siguiente ecuación:
Yij = μ+ τi + εij
i= 1,2,………t (número de tratamientos)
j=1,2,……….b (número de repeticiones)
15
Dónde:
Yij = Variable evaluada.
μ = Promedio general del ensayo.
τi = Efectos de los tratamientos.
εij = Error experimental
3.2.7. HIPÓTESIS
La hipótesis nula y alternativa de los tratamientos fue:
Ho: Los efectos de los tratamientos no difieren significativamente.
Ha: Al menos un tratamiento es estadísticamente diferente.
16
4. RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1. CRECIMIENTO RADIAL DEL MICELIO DE Mycosphaerella sp., A LOS 10 DÍAS
DESPUÉS DE INOCULACIÓN
En la figura 1 se observa el crecimiento radial del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días
después de la inoculación en los diferentes tratamientos con sus respectivos extractos
vegetales, podemos mencionar que el extracto de hierba luisa (Cymbopogon citratus)
presenta una acción inhibidora del crecimiento micelial de este hongo, tomando en
consideración lo expuesto por Morales (2011) que indica que el extracto de hierba luisa
(Cymbopogon citratus) mostró un efecto antifúngico sobre el hongo causante de la
sigatoka negra.
Figura 2. Crecimiento radial de micelio del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días
después de la inoculación.
En la figura 2 se muestra el porcentaje de control a los 10 días después de la inoculación
realizada en los distintos tratamientos, el extracto de borraja tuvo un efecto estimulante,
estadísticamente significativo, en el crecimiento del hongo con respecto al testigo, Cuvi
(2013) menciona que el extracto de Bixa orellana estimuló el crecimiento del hongo
Sclerotium a concentración de 1,5 y 0,5 mg/mL y para el género Sclerotinia sp a
concentraciones de 1.5 y 3 0,5 mg/mL, además el extracto de Carica papaya a
concentraciones de 0,5, 1,5 y 3 mg/mL estimuló el crecimiento del hongo del genero
Sclerotium y Sclerotinia sp. En cuanto al extracto de hinojo que presenta un control de
2.47%, es estadísticamente igual al testigo, a diferencia del extracto de cedrón y romero
0.55
0.79
0.68 0.68
1.06
0.81
0.00
0.20
0.40
0.60
0.80
1.00
1.20
HIERBALUISA
HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGO
crec
imie
nto
rad
ial d
el m
ice
lio (
cm)
TRATAMIENTOS
17
que presentaron un control medio, pero estadísticamente significativo hacia el testigo. El
extracto de hierba luisa sigue siendo el que mejor control.
Figura 3. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 10 días después de la
inoculación.
En la determinación del crecimiento micelial de Mycosphaerella sp., el análisis de varianza
(Cuadro 2) mostró significancia entre los tratamientos, tomando en cuenta el p-valor
0.0001 es menor que al valor de α=0.05, por lo tanto se rechaza la hipótesis nula y se
acepta la hipótesis alternativa, teniendo un coeficiente de variación de 12.746. En el test
de Tukey (Cuadro 3) a los 10 días de evaluación se evidencia distintos agrupamientos
entre los tratamientos. Se observa que la borraja (T5) mostró un efecto estimulante,
estadísticamente significativo, en el crecimiento micelial del hongo; los tratamientos
Testigo (T6) y Hinojo (T2) son estadísticamente iguales, mientras que el Cedrón (T3) no
presenta diferencia significativa al Romero (T4) y Hierba luisa (T1).
Cuadro 2. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp.,
a los 10 días después de la inoculación.
Fuente Gl Suma de
cuadrados Cuadrado
media F.
calculada Pr > F
Tratamientos 5 0.755 0.151 15.96 < .0001
Error 24 0.227 0.009
Total 29 0.982
C.V. 12.746
32.1
2.47
16.05 16.05
0 0 0
5
10
15
20
25
30
35
HIERBALUISA
HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGO
% C
ON
TRO
L
TRATAMIENTOS
18
Cuadro 3. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 10 días después
de la inoculación.
Agrupamiento Media N Tratamiento
A 1.062 5 T5
B 0.814 5 T6
B 0.794 5 T2
C B 0.678 5 T3
C B 0.678 5 T4
C 0.554 5 T1
Figura 4. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 10 días después de
la inoculación.
4.2. CRECIMIENTO RADIAL DEL MICELIO DE Mycosphaerella sp., A LOS 20 DÍAS
DESPUÉS DE INOCULACIÓN
En la figura 4 se observa el crecimiento radial del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días
después de la inoculación en los diferentes tratamientos con sus respectivos extractos
vegetales, en lo que podemos evidenciar que el extracto de borraja tiene un crecimiento
estimulante del hongo superando al tratamiento testigo.
A 1.062
B 0.814
B 0.794 C B
0.678 C
0.678 C 0.554
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
T5 =BORRAJA
T6 = TESTIGO T2 = HINOJO T4 =ROMERO
T3 = CEDRÓN T1 = HIERBALUISA
CR
ECIM
IEN
TO D
EL M
ICEL
IO (
cm)
TRATAMIENTOS
19
Figura 5. Radio de crecimiento de micelio del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días
después de la inoculación
El porcentaje de control del hongo a los 20 días después de la inoculación (figura 5), el
extracto de hierba luisa es el mejor tratamiento con un 55.92 % de control seguido del
extracto de cedrón con un 28.29 %. El extracto de borraja no presenta control inhibitorio
del hongo ya que estimula su crecimiento micelial.
Figura 6. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 20 días después de la
inoculación.
El análisis de varianza (Cuadro 4) presenta una significancia estadística entre los
tratamientos siendo el p-valor 0.0001 es menor al 0.05 de significancia, rechazando la
hipótesis nula y aceptando el alternativa que al menos un tratamiento es diferente.
0.67
1.43
1.09
1.33
1.72
1.52
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
HIERBA LUISA HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGOCR
ECIM
IEN
TO R
AD
IAL
DEL
M
ICEL
IO (
cm)
TRATAMIENTOS
55.92
5.92
28.29
12.5
0 0 0
10
20
30
40
50
60
HIERBA LUISA HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGO
% C
ON
TR
OL
TRATAMIENTOS
20
Cuadro 4. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp.,
a los 20 días después de la inoculación.
Fuente Gl Suma de
cuadrados Cuadrado
media F.
calculada
Pr > F
Tratamientos 5 3.444 0.688 25.99 <.0001
Error 24 0.636 0.026
Total 29 4.08
C.V. 12.578
A los 20 días después de la inoculación del hongo, en el test de Tukey (Cuadro 5), nos
muestra que el extracto de hierba luisa (T1) es diferente estadísticamente al testigo (T6),
el extracto de cedrón (T3) y romero (T4) son iguales estadísticamente entre ellos, pero
muestran diferencia estadística en relación al tratamiento testigo (T6).
Cuadro 5. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 20 días después
de la inoculación.
Agrupamiento Media N Tratamiento
A 1.724 5 T5
B A 1.522 5 T6
B A 1.428 5 T2
B C 1.332 5 T4
C 1.092 5 T3
D 0.668 5 T1
Figura 7. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 20 días después de la inoculación.
A 1.724
B A 1.522
B A 1.428
B C 1.332 C
1.092 D
0.668
0
0.5
1
1.5
2
T5 =BORRAJA
T6 =TESTIGO
T2 = HINOJO T4 =ROMERO
T3 =CEDRÓN
T1 = HIERBALUISA
CR
ECIM
IEN
TO D
EL M
ICEL
IO
(cm
)
TRATAMIENTOS
21
4.3. CRECIMIENTO RADIAL DEL MICELIO DE Mycosphaerella spp., A LOS 30 DÍAS
DESPUÉS DE INOCULACIÓN
En la figura 7 se observa el crecimiento radial del hongo Mycosphaerella sp., a los 30 días
después de la inoculación en los diferentes tratamientos con sus respectivos extractos
vegetales, en lo que podemos evidenciar que el mejor tratamiento en nuestro estudio es el
extracto de hierba luisa (Cymbopogon citratus) ya que presenta una acción inhibidora del
crecimiento micelial de este hongo, afirmando lo expuesto por Morales (2010), Rojas
(2014) que menciona que el extracto de hierba luisa (Cymbopogon citratus) presenta un
antifúngico sobre el hongo causante de la sigatoka negra. Además Villa (2015), menciona
que el aceite esencial de hierba luisa tiene un control sobre Fusarium oxysporum.
Figura 8. Radio de crecimiento de micelio del hongo Mycosphaerella spp., a los 30 días
después de la inoculación
El porcentaje de control del crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp., a los 30
días después de la inoculación (Figura 8), determina que el extracto de hierba luisa
presento un control de 64.52%. Según Cabrera (2009) declara que el extracto de hierba
luisa tiene control antifúngico del 100% sobre Fusarium y el aceite esencial de hierba
luisa controla entre un 50 y 75%; el extracto de cedrón presenta un porcentaje de control
de 36,41%, afianzando lo expuesto por Serrano (2013) que menciona sobre el aceite
esencial de cedrón inhibe el crecimiento de hongos y bacterias en la germinación de
orquídeas (in vitro) a concentración de 0.03%. El extracto de hinojo solo controlo un 2.3%
de crecimiento micelial del hongo causante de la sigatoka negra, estudio realizado por
0.77
2.12
1.38
1.85
2.266 2.17
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
HIERBALUISA
HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGOCR
ECIM
IEN
TO R
AD
IAL
DEL
MIC
ELIO
(c
m)
TRATAMIENTOS
22
Rey (2014) menciona que el extracto de hinojo reduce la resistencia de infección causada
por Botrytis Cinérea P.
El extracto de romero presentó un control de 14.75%, según Cárdenas (2014) menciona
que el aceite esencial de romero (Rosmarinus officinalis L) no tiene efecto antifúngico
sobre el hongo Fusarium.
Figura 9. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella spp., a los 30 días después de
la inoculación.
El análisis de varianza (Cuadro 6), muestra que existe diferencia entre los tratamientos ya
que el valor Pr >F 0.0001 es menor al 0.05 de significancia, rechazando la hipótesis nula y
aceptando el alternativa que al menos un tratamiento es diferente y el coeficiente de
variación es de 7.33 dando homogeneidad entre las repeticiones de los tratamientos
analizados.
Cuadro 6. ANOVA, para determinar el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella
spp., a los 30 días después de la inoculación.
Fuente Gl Suma de
cuadrados Cuadrado
media F.
calculada Pr > F
Tratamientos 5 8.392 1.678 100.85 <.0001
Error 24 0.399 0.016
Total 29 8.791
C.V. 7.33
64.52
2.3
36.41
14.75
0 0 0
10
20
30
40
50
60
70
HIERBA LUISA HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGO
% C
ON
TRO
L
TRATAMIENTOS
23
Los agrupamientos de los tratamientos expuestos por el test de Tukey (Cuadro 7)
determinan que el extracto de hierba luisa (T1) es el mejor tratamiento en este ensayo, ya
que es estadísticamente diferente a los demás tratamientos. El extracto de romero (T4) y
el extracto de cedrón (T3) muestran que son estadísticamente diferentes al testigo (T6),
mientras que el extracto de borraja (T5) e hinojo (T2) son estadísticamente iguales al
testigo (T6).
Cuadro 7. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 30 días después
de la inoculación.
Agrupamiento Media N Tratamiento
A 2.266 5 T5
A 2.17 5 T6
A 2.12 5 T2
B 1.85 5 T4
C 1.38 5 T3
D 0.774 5 T1
Figura 10. Test de Tukey con significancia α= 0.05, para diámetro a los 30 días después
de la inoculación.
En la Figura 10 y 11 nos muestra las evaluaciones tomadas a lo largo del ensayo,
confirmando que el extracto vegetal con mejores propiedades antifúngicas, sobre el
crecimiento micelial de Mycosphaerella sp., es el extracto de hierba luisa (T1)
A 2.266
A 2.17
A 2.12 B
1.85 C
1.38
D 0.774
0
0.5
1
1.5
2
2.5
T5 =BORRAJA
T6 =TESTIGO
T2 =HINOJO
T4 =ROMERO
T3 =CEDRÓN
T1 = HIERBALUISAC
REC
IMIE
NT
O R
AD
IAL
DEL
MIC
ELIO
(c
m)
TRATAMIENTOS
24
Figura 11. Crecimiento radial del hongo Mycosphaerella sp., a los 10, 20 y 30 días
después de la inoculación.
Figura 12. Porcentaje de control del hongo Mycosphaerella sp., a los 10, 20 y 30
días después de la inoculación
0.554
0.794 0.678 0.678
1.062
0.814
0.668
1.428
1.092
1.332
1.724
1.522
D 0.774
A 2.12
C 1.38
B 1.85
A 2.266 A
2.17
0
0.5
1
1.5
2
2.5
T1 HIERBALUISA
T2 HINOJO T3 CEDRÓN T4 ROMERO T5 BORRAJA T6 TESTIGO
CR
ECIM
IEN
TO R
AD
IAL
DEL
MIC
ELIO
(cm
)
TRATAMIENTOS
10 DÍAS
20 DÍAS
30 DÍAS
32.1
2.47
16.05 16.05
0 0
55.92
5.92
28.29
12.5
0 0
64.52
2.3
36.41
14.75
0 0 0
10
20
30
40
50
60
70
HIERBALUISA
HINOJO CEDRÓN ROMERO BORRAJA TESTIGO
% C
ON
TRO
L
TRATAMIENTOS
10 DÍAS20 DÍAS30 DÍAS
25
5. CONCLUSIONES
El extracto de hierba luisa presento el mejor porcentaje de control sobre
Mycosphaerella sp.
El extracto de cedrón presento un nivel medio en el porcentaje de control sobre el
hongo Mycosphaerella sp.
El extracto de romero presento un bajo nivel de control sobre el hongo Mycosphaerella
sp.
El extracto de hinojo no presento control sobre el hongo Mycosphaerella sp.
El extracto de borraja a dosis de 750 ppm estimulo el crecimiento del hongo
Mycosphaerella sp.
6. RECOMENDACIONES
Con los resultados obtenidos se recomienda seguir investigando las propiedades
antifúngicas, pero en dosis crecientes para los extractos de hierba luisa, cedrón y
romero; probar a nivel in vitro.
Realizar un análisis de los extractos vegetales con un cromatografo de gases
acoplado a un espectrofotómetro de masas, para determinar los componentes que
inhiben el crecimiento micelial del hongo Mycosphaerella sp.
26
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29
8. APÉNDICE
Apéndice 1. Datos del crecimiento del micelio tomadas de cada una de las
unidades experimentales.
Tratamiento Replica Fecha Lados Crecimiento micelial (cm)
1 1 20/05/2016 Izquierda 0.5
1 1 20/05/2016 Derecha 0.4
1 1 20/05/2016 Superior 0.5
1 1 20/05/2016 Inferior 0.5
1 2 20/05/2016 Izquierda 0.6
1 2 20/05/2016 Derecha 0.5
1 2 20/05/2016 Superior 0.6
1 2 20/05/2016 Inferior 0.5
1 3 20/05/2016 Izquierda 0.6
1 3 20/05/2016 Derecha 0.6
1 3 20/05/2016 Superior 0.7
1 3 20/05/2016 Inferior 0.6
1 4 20/05/2016 Izquierda 0.6
1 4 20/05/2016 Derecha 0.6
1 4 20/05/2016 Superior 0.6
1 4 20/05/2016 Inferior 0.5
1 5 20/05/2016 Izquierda 0.6
1 5 20/05/2016 Derecha 0.5
1 5 20/05/2016 Superior 0.6
1 5 20/05/2016 Inferior 0.4
2 1 20/05/2016 Izquierda 0.8
2 1 20/05/2016 Derecha 0.7
2 1 20/05/2016 Superior 0.8
2 1 20/05/2016 Inferior 0.7
2 2 20/05/2016 Izquierda 0.8
2 2 20/05/2016 Derecha 0.9
2 2 20/05/2016 Superior 0.8
2 2 20/05/2016 Inferior 0.6
2 3 20/05/2016 Izquierda 0.8
2 3 20/05/2016 Derecha 0.8
2 3 20/05/2016 Superior 0.8
2 3 20/05/2016 Inferior 0.7
2 4 20/05/2016 Izquierda 0.8
2 4 20/05/2016 Derecha 1
2 4 20/05/2016 Superior 0.9
2 4 20/05/2016 Inferior 0.6
30
2 5 20/05/2016 Izquierda 0.9
2 5 20/05/2016 Derecha 0.8
2 5 20/05/2016 Superior 0.8
2 5 20/05/2016 Inferior 0.8
3 1 20/05/2016 Izquierda 0.3
3 1 20/05/2016 Derecha 0.5
3 1 20/05/2016 Superior 0.5
3 1 20/05/2016 Inferior 0.3
3 2 20/05/2016 Izquierda 0.8
3 2 20/05/2016 Derecha 0.8
3 2 20/05/2016 Superior 0.8
3 2 20/05/2016 Inferior 0.7
3 3 20/05/2016 Izquierda 0.5
3 3 20/05/2016 Derecha 0.8
3 3 20/05/2016 Superior 0.6
3 3 20/05/2016 Inferior 0.6
3 4 20/05/2016 Izquierda 0.7
3 4 20/05/2016 Derecha 0.8
3 4 20/05/2016 Superior 0.8
3 4 20/05/2016 Inferior 0.6
3 5 20/05/2016 Izquierda 0.8
3 5 20/05/2016 Derecha 0.8
3 5 20/05/2016 Superior 1
3 5 20/05/2016 Inferior 0.8
4 1 20/05/2016 Izquierda 0.6
4 1 20/05/2016 Derecha 0.7
4 1 20/05/2016 Superior 0.8
4 1 20/05/2016 Inferior 0.6
4 2 20/05/2016 Izquierda 0.7
4 2 20/05/2016 Derecha 0.7
4 2 20/05/2016 Superior 0.6
4 2 20/05/2016 Inferior 0.5
4 3 20/05/2016 Izquierda 0.8
4 3 20/05/2016 Derecha 0.7
4 3 20/05/2016 Superior 0.6
4 3 20/05/2016 Inferior 0.6
4 4 20/05/2016 Izquierda 0.7
4 4 20/05/2016 Derecha 0.6
4 4 20/05/2016 Superior 0.6
4 4 20/05/2016 Inferior 0.7
4 5 20/05/2016 Izquierda 0.7
31
4 5 20/05/2016 Derecha 0.7
4 5 20/05/2016 Superior 0.9
4 5 20/05/2016 Inferior 0.7
5 1 20/05/2016 Izquierda 0.7
5 1 20/05/2016 Derecha 0.9
5 1 20/05/2016 Superior 0.9
5 1 20/05/2016 Inferior 0.9
5 2 20/05/2016 Izquierda 1.3
5 2 20/05/2016 Derecha 1.2
5 2 20/05/2016 Superior 1.3
5 2 20/05/2016 Inferior 1
5 3 20/05/2016 Izquierda 1
5 3 20/05/2016 Derecha 1.4
5 3 20/05/2016 Superior 1.1
5 3 20/05/2016 Inferior 1
5 4 20/05/2016 Izquierda 1.1
5 4 20/05/2016 Derecha 1
5 4 20/05/2016 Superior 1
5 4 20/05/2016 Inferior 1.4
5 5 20/05/2016 Izquierda 1.3
5 5 20/05/2016 Derecha 0.9
5 5 20/05/2016 Superior 0.7
5 5 20/05/2016 Inferior 1.1
6 1 20/05/2016 Izquierda 0.8
6 1 20/05/2016 Derecha 0.9
6 1 20/05/2016 Superior 0.9
6 1 20/05/2016 Inferior 0.7
6 2 20/05/2016 Izquierda 0.8
6 2 20/05/2016 Derecha 0.8
6 2 20/05/2016 Superior 0.9
6 2 20/05/2016 Inferior 0.7
6 3 20/05/2016 Izquierda 0.8
6 3 20/05/2016 Derecha 0.7
6 3 20/05/2016 Superior 0.9
6 3 20/05/2016 Inferior 0.7
6 4 20/05/2016 Izquierda 0.8
6 4 20/05/2016 Derecha 0.7
6 4 20/05/2016 Superior 1
6 4 20/05/2016 Inferior 0.8
6 5 20/05/2016 Izquierda 0.6
6 5 20/05/2016 Derecha 1.1
32
6 5 20/05/2016 Superior 1
6 5 20/05/2016 Inferior 0.7
1 1 30/05/2016 Izquierda 0.6
1 1 30/05/2016 Derecha 0.6
1 1 30/05/2016 Superior 0.6
1 1 30/05/2016 Inferior 0.6
1 2 30/05/2016 Izquierda 0.7
1 2 30/05/2016 Derecha 0.7
1 2 30/05/2016 Superior 0.7
1 2 30/05/2016 Inferior 0.6
1 3 30/05/2016 Izquierda 0.7
1 3 30/05/2016 Derecha 0.7
1 3 30/05/2016 Superior 0.8
1 3 30/05/2016 Inferior 0.7
1 4 30/05/2016 Izquierda 0.7
1 4 30/05/2016 Derecha 0.7
1 4 30/05/2016 Superior 0.7
1 4 30/05/2016 Inferior 0.6
1 5 30/05/2016 Izquierda 0.7
1 5 30/05/2016 Derecha 0.7
1 5 30/05/2016 Superior 0.6
1 5 30/05/2016 Inferior 0.7
2 1 30/05/2016 Izquierda 1.6
2 1 30/05/2016 Derecha 1.5
2 1 30/05/2016 Superior 1.5
2 1 30/05/2016 Inferior 1.5
2 2 30/05/2016 Izquierda 1.4
2 2 30/05/2016 Derecha 1.2
2 2 30/05/2016 Superior 1.7
2 2 30/05/2016 Inferior 1.5
2 3 30/05/2016 Izquierda 1.6
2 3 30/05/2016 Derecha 1.7
2 3 30/05/2016 Superior 1.5
2 3 30/05/2016 Inferior 1.3
2 4 30/05/2016 Izquierda 1.6
2 4 30/05/2016 Derecha 1.6
2 4 30/05/2016 Superior 1.5
2 4 30/05/2016 Inferior 1.4
2 5 30/05/2016 Izquierda 1.4
2 5 30/05/2016 Derecha 0.9
2 5 30/05/2016 Superior 0.8
33
2 5 30/05/2016 Inferior 1.3
3 1 30/05/2016 Izquierda 1.1
3 1 30/05/2016 Derecha 0.8
3 1 30/05/2016 Superior 0.9
3 1 30/05/2016 Inferior 1.2
3 2 30/05/2016 Izquierda 1
3 2 30/05/2016 Derecha 1.1
3 2 30/05/2016 Superior 1
3 2 30/05/2016 Inferior 1
3 3 30/05/2016 Izquierda 1
3 3 30/05/2016 Derecha 1
3 3 30/05/2016 Superior 1
3 3 30/05/2016 Inferior 1.1
3 4 30/05/2016 Izquierda 1
3 4 30/05/2016 Derecha 0.9
3 4 30/05/2016 Superior 1.5
3 4 30/05/2016 Inferior 0.6
3 5 30/05/2016 Izquierda 1.4
3 5 30/05/2016 Derecha 1.4
3 5 30/05/2016 Superior 1.5
3 5 30/05/2016 Inferior 1.3
4 1 30/05/2016 Izquierda 1.2
4 1 30/05/2016 Derecha 1.4
4 1 30/05/2016 Superior 1.4
4 1 30/05/2016 Inferior 1.2
4 2 30/05/2016 Izquierda 1.3
4 2 30/05/2016 Derecha 1.4
4 2 30/05/2016 Superior 1.2
4 2 30/05/2016 Inferior 1.2
4 3 30/05/2016 Izquierda 1.5
4 3 30/05/2016 Derecha 1.3
4 3 30/05/2016 Superior 1.3
4 3 30/05/2016 Inferior 1.3
4 4 30/05/2016 Izquierda 1.3
4 4 30/05/2016 Derecha 1.2
4 4 30/05/2016 Superior 1.2
4 4 30/05/2016 Inferior 1.4
4 5 30/05/2016 Izquierda 1.4
4 5 30/05/2016 Derecha 1.6
4 5 30/05/2016 Superior 1.5
4 5 30/05/2016 Inferior 1.3
34
5 1 30/05/2016 Izquierda 1
5 1 30/05/2016 Derecha 1.4
5 1 30/05/2016 Superior 1.3
5 1 30/05/2016 Inferior 1.2
5 2 30/05/2016 Izquierda 1.9
5 2 30/05/2016 Derecha 2
5 2 30/05/2016 Superior 1.6
5 2 30/05/2016 Inferior 1.7
5 3 30/05/2016 Izquierda 1.7
5 3 30/05/2016 Derecha 2.2
5 3 30/05/2016 Superior 2
5 3 30/05/2016 Inferior 1.8
5 4 30/05/2016 Izquierda 1.5
5 4 30/05/2016 Derecha 1.8
5 4 30/05/2016 Superior 1.8
5 4 30/05/2016 Inferior 2.2
5 5 30/05/2016 Izquierda 2.1
5 5 30/05/2016 Derecha 1.6
5 5 30/05/2016 Superior 1.6
5 5 30/05/2016 Inferior 2
6 1 30/05/2016 Izquierda 1.5
6 1 30/05/2016 Derecha 1.6
6 1 30/05/2016 Superior 1.6
6 1 30/05/2016 Inferior 1.4
6 2 30/05/2016 Izquierda 1.6
6 2 30/05/2016 Derecha 1.5
6 2 30/05/2016 Superior 1.7
6 2 30/05/2016 Inferior 1.6
6 3 30/05/2016 Izquierda 1.5
6 3 30/05/2016 Derecha 1.5
6 3 30/05/2016 Superior 1.6
6 3 30/05/2016 Inferior 1.4
6 4 30/05/2016 Izquierda 1.6
6 4 30/05/2016 Derecha 1.4
6 4 30/05/2016 Superior 1.8
6 4 30/05/2016 Inferior 1.7
6 5 30/05/2016 Izquierda 1.4
6 5 30/05/2016 Derecha 1.8
6 5 30/05/2016 Superior 1.6
6 5 30/05/2016 Inferior 1.6
1 1 09/06/2016 Izquierda 0.7
35
1 1 09/06/2016 Derecha 0.7
1 1 09/06/2016 Superior 0.7
1 1 09/06/2016 Inferior 0.8
1 2 09/06/2016 Izquierda 0.9
1 2 09/06/2016 Derecha 0.9
1 2 09/06/2016 Superior 0.8
1 2 09/06/2016 Inferior 0.7
1 3 09/06/2016 Izquierda 0.8
1 3 09/06/2016 Derecha 0.8
1 3 09/06/2016 Superior 0.8
1 3 09/06/2016 Inferior 0.8
1 4 09/06/2016 Izquierda 0.9
1 4 09/06/2016 Derecha 0.7
1 4 09/06/2016 Superior 0.7
1 4 09/06/2016 Inferior 0.8
1 5 09/06/2016 Izquierda 0.7
1 5 09/06/2016 Derecha 0.8
1 5 09/06/2016 Superior 0.6
1 5 09/06/2016 Inferior 0.8
2 1 09/06/2016 Izquierda 2.2
2 1 09/06/2016 Derecha 2.1
2 1 09/06/2016 Superior 2
2 1 09/06/2016 Inferior 2.1
2 2 09/06/2016 Izquierda 2.2
2 2 09/06/2016 Derecha 2.2
2 2 09/06/2016 Superior 2.1
2 2 09/06/2016 Inferior 1.9
2 3 09/06/2016 Izquierda 2.1
2 3 09/06/2016 Derecha 2.1
2 3 09/06/2016 Superior 2
2 3 09/06/2016 Inferior 2.2
2 4 09/06/2016 Izquierda 2
2 4 09/06/2016 Derecha 2.3
2 4 09/06/2016 Superior 2.4
2 4 09/06/2016 Inferior 2.1
2 5 09/06/2016 Izquierda 2.2
2 5 09/06/2016 Derecha 2.1
2 5 09/06/2016 Superior 2
2 5 09/06/2016 Inferior 2.1
3 1 09/06/2016 Izquierda 1.3
3 1 09/06/2016 Derecha 1.3
36
3 1 09/06/2016 Superior 1.5
3 1 09/06/2016 Inferior 1.4
3 2 09/06/2016 Izquierda 1.4
3 2 09/06/2016 Derecha 1
3 2 09/06/2016 Superior 1.1
3 2 09/06/2016 Inferior 1.2
3 3 09/06/2016 Izquierda 1.3
3 3 09/06/2016 Derecha 1.4
3 3 09/06/2016 Superior 1.3
3 3 09/06/2016 Inferior 1.5
3 4 09/06/2016 Izquierda 1.5
3 4 09/06/2016 Derecha 0.7
3 4 09/06/2016 Superior 2
3 4 09/06/2016 Inferior 0.7
3 5 09/06/2016 Izquierda 1.6
3 5 09/06/2016 Derecha 1.8
3 5 09/06/2016 Superior 2
3 5 09/06/2016 Inferior 1.5
4 1 09/06/2016 Izquierda 1.6
4 1 09/06/2016 Derecha 1.8
4 1 09/06/2016 Superior 1.9
4 1 09/06/2016 Inferior 1.9
4 2 09/06/2016 Izquierda 1.9
4 2 09/06/2016 Derecha 2
4 2 09/06/2016 Superior 1.8
4 2 09/06/2016 Inferior 1.7
4 3 09/06/2016 Izquierda 2
4 3 09/06/2016 Derecha 1.8
4 3 09/06/2016 Superior 1.9
4 3 09/06/2016 Inferior 1.7
4 4 09/06/2016 Izquierda 1.8
4 4 09/06/2016 Derecha 1.7
4 4 09/06/2016 Superior 1.7
4 4 09/06/2016 Inferior 1.8
4 5 09/06/2016 Izquierda 2
4 5 09/06/2016 Derecha 2.1
4 5 09/06/2016 Superior 2
4 5 09/06/2016 Inferior 1.9
5 1 09/06/2016 Izquierda 1.9
5 1 09/06/2016 Derecha 2.2
5 1 09/06/2016 Superior 1.9
37
5 1 09/06/2016 Inferior 2
5 2 09/06/2016 Izquierda 2.1
5 2 09/06/2016 Derecha 2.4
5 2 09/06/2016 Superior 1.7
5 2 09/06/2016 Inferior 2.2
5 3 09/06/2016 Izquierda 2.2
5 3 09/06/2016 Derecha 2.7
5 3 09/06/2016 Superior 2.5
5 3 09/06/2016 Inferior 2.3
5 4 09/06/2016 Izquierda 2.4
5 4 09/06/2016 Derecha 2.3
5 4 09/06/2016 Superior 2.3
5 4 09/06/2016 Inferior 2.6
5 5 09/06/2016 Izquierda 2.8
5 5 09/06/2016 Derecha 2.1
5 5 09/06/2016 Superior 2.1
5 5 09/06/2016 Inferior 2.6
6 1 09/06/2016 Izquierda 2.1
6 1 09/06/2016 Derecha 2.2
6 1 09/06/2016 Superior 2.2
6 1 09/06/2016 Inferior 2
6 2 09/06/2016 Izquierda 2.3
6 2 09/06/2016 Derecha 2.1
6 2 09/06/2016 Superior 2.2
6 2 09/06/2016 Inferior 2.1
6 3 09/06/2016 Izquierda 2.2
6 3 09/06/2016 Derecha 2.1
6 3 09/06/2016 Superior 2.1
6 3 09/06/2016 Inferior 2.2
6 4 09/06/2016 Izquierda 2.1
6 4 09/06/2016 Derecha 2
6 4 09/06/2016 Superior 2.4
6 4 09/06/2016 Inferior 2.3
6 5 09/06/2016 Izquierda 2.1
6 5 09/06/2016 Derecha 2.1
6 5 09/06/2016 Superior 2.2
6 5 09/06/2016 Inferior 2.2
38
Apéndice 2. Tratamientos con su respectivo promedio de crecimiento micelial y su porcentaje de control a los 10, 20 y 30 días
después de la inoculación.
10 DIAS 20 DIAS 30 DIAS
TRATAMIENTOS 20/05/2016 PROMEDIO % DE CONTROL 30/05/2016 PROMEDIO % DE CONTROL 09/06/2016 PROMEDIO % DE CONTROL
HIERBA LUISA
T1 0.48
0.55 32.1
T1 0.6
0.67 55.92
T1 0.73
0.77 64.52
T1 0.55 T1 0.68 T1 0.83
T1 0.63 T1 0.73 T1 0.8
T1 0.58 T1 0.68 T1 0.78
T1 0.53 T1 0.65 T1 0.73
HINOJO
T2 0.75
0.79 2.47
T2 1.53
1.43 5.92
T2 2.1
2.12 2.3
T2 0.78 T2 1.45 T2 2.1
T2 0.78 T2 1.53 T2 2.1
T2 0.83 T2 1.53 T2 2.2
T2 0.83 T2 1.1 T2 2.1
CEDRON
T3 0.4
0.68 16.05
T3 1
1.09 28.29
T3 1.38
1.38 36.41
T3 0.78 T3 1.03 T3 1.18
T3 0.63 T3 1.03 T3 1.38
T3 0.73 T3 1 T3 1.23
T3 0.85 T3 1.4 T3 1.73
ROMERO
T4 0.68
0.68 16.05
T4 1.3
1.33 12.5
T4 1.8
1.85 14.75
T4 0.63 T4 1.28 T4 1.85
T4 0.68 T4 1.35 T4 1.85
T4 0.65 T4 1.28 T4 1.75
T4 0.75 T4 1.45 T4 2
BORRAJA
T5 0.85
1.06 0
T5 1.23
1.72 0
T5 2
2.27 0
T5 1.2 T5 1.8 T5 2.1
T5 1.13 T5 1.93 T5 2.43
T5 1.13 T5 1.83 T5 2.4
T5 1 T5 1.83 T5 2.4
TESTIGO
T6 0.83
0.81
T6 1.53
1.52
T6 2.13
2.17
T6 0.8 T6 1.6 T6 2.18
T6 0.78 T6 1.5 T6 2.17
T6 0.83 T6 1.38 T6 2.2
T6 0.83 T6 1.6 T6 2.17
39
Apéndice 3. Proceso de aislamiento de hongo causante de la sigato kegra a nivel in vitro
40
Apéndice 4. Diferencia del crecimiento del hongo Mycosphaerella sp., por cada
tratamiento.