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Página 1 Ultimos Desarrollos Tecnológicos: iFunnel- LC/MS QqQ o QTOF, GC/QTOF (EI-CI) ICP/QqQ LCxLC Jornada sobre Posibilidades de la Espectrometría de Masas en Laboratorios de Investigación. El poderdel análisis comparativo de muestras en Alimentación, Proteómica y Metabolómica. Regina Orenga Agilent Technologies 5 Julio 2012

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Página 1

Ultimos Desarrollos

Tecnológicos: iFunnel-

LC/MS QqQ o QTOF,

GC/QTOF (EI-CI)

ICP/QqQ

LCxLC

Jornada sobre Posibilidades de la

Espectrometría de Masas

en Laboratorios de Investigación.

“El poder” del análisis comparativo de

muestras en Alimentación, Proteómica y

Metabolómica.

Regina Orenga

Agilent Technologies

5 Julio 2012

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AGENDA

• Definición Tecnología del Análisis Instrumental y su Desarrollo

Tecnológico

• Tecnologia Nueva y Novedosa :

ICPMS QQQ y su Acoplamiento a LC y GC

• Desarrollos Tecnológicos en Espectrometria de Masas:

iFunnel

GCQTOF

• Desarrollos Tecnológicos en Cromatografia de Liquidos:

LCXLC

Detector DAD Multi

ULTTIMOS DESARROLLOS

TECNOLOGICOS Page 2

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LC/MS-QTOF Page 3

• TÉCNICA METODOS DE EXTRACCIÓN Y/O

ENRIQUECIMIENTO DE MUESTRA

EQUIPO INSTRUMENTAL CON ALTO PODER DE

SEPARACION

LECTURA DE DATOS

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

• TECNOLOGÍA SEGURIDAD Y FIABILIDAD DE LOS DATOS

SENSIBILIDAD Y SELECTIVIDAD

REPRODUCIBILIDAD DE RESULTADOS

SENCILLEZ

ECONÓMICA Y ROBUSTA

• DESARROLLO TECNOLÓGICO MEJORAR LAS CARACTERISTICAS

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LC/MS-QTOF Page 4

NUEVO ICPMS QQQ AGILENT 8800

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Introducción al nuevo 8800 ICP-MS/MS

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Page 6

¿Donde encaja el ICP-MS?

Click to add text

ICP OES

(number of analyses)

low

(s

ensi

tiv

ity

) h

igh

high low

GFAA or

HGAA

Flame AA ICP-OES

ICP-MS

low (capital cost) high

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Page 7

ICP-MS como alternativa

• Mejores límites de detección que GFAAS (ppts o sub-ppts)

• Más amplio intervalo dinámico lineal que GFAAS o ICP-OES (9 órdenes)

• Más elementos a niveles traza que GFAAS

• Acceso a los elementos “hidruros”, sin requerir la generación del hidruro (no diferente tratamiento de muestra)

• Capacidad para medir Hg directamente a niveles analiticamente “útiles” (ng/L)

• Preparación de muestra sencilla

TÍpicamente digestiones ácidas sin la necesidad de “matrix matched standards,” modificadores de matriz

• Compatibilidad con sistemas cromatográficos (ionización)

• Simplicidad espectral y facilidad de uso

• Medida de relaciones isotópicas

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Page 8

¿Qué es un ICP-MS?

ICP - Inductively Coupled Plasma

Fuente de iones a alta Tª

descompone, atomiza e ioniza la muestra

• MS – Espectrómetro de masas

• Diferentes tipos de analizadores de

masas (Qpole, QQQ,)

• Intervalo de masas de 7 a 250 amu (Li

a U.)

• Detector de modo dual (ppt a ppm)

• Proporciona información isotópica

Técnica de análisis elemental inorgánico

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Page 9

Importancia de la alta temperatura del plasma

• Buena descomposión de la matriz, minimiza operaciones de mantenimiento

• Mejora la ionización de elementos de alta Eion (Be, B, As, Se, Zn, Cd, Hg, …)

• Reduce los niveles de óxidos y otras interferencias poliatómicas de la matriz

(CeO/Ce ratio – indica el grado de descomposición del CeO)

• Un plasma ICP-MS robusto alcanzará una ratio CeO/Ce de <0.8%

+

Zona más caliente del plasma ~ 8000K

Partículas son decompuestas y disociadas

La mayor población de M+ debería correspondese con la menor población de iones poliatómicos

Analitos presentes como iones M+

Aerosol es secado Se forman átomos y estos se ionizan

Canal de muestra ~6700K

Tiempo de residencia de unos pocos milisegundos

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INTERFERENCIAS ESPECTRALES

• Presencia de otros elementos

Solapamiento isobárico de más de un elemento compartiendo la misma masa nominal.

Especies doblemente cargadas (menos frecuente e importante).

• Especies moleculares

• Especies poliatómicas:

• Plasma based derivadas de combinaciones de elementos presentes en el plasma y en el agua/nitrico de las muestras . Ej –ArO+, -ArH+, Ar2+,CO2+

• Por la matriz Una matriz sintética con alto TDS (C, Ca, Br, Cl, Na, S) origina un gran número de señales en la zona 24-85 m/z. Esa zona afecta a la mayor parte de los elementos de transición.

LC/MS-QTOF Page 10

Existen 2 fuentes principales

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¿ QUÉ ES UNA CELDA DE COLISIÓN/REACCIÓN? Una celda presurizada colocada entre la interfase del ICP-MS y el

analizador de cuadrupolo del espectrómetro de masas

La celda contiene una guía de iones multipolar

– cuadrupolo - 2º orden - 4 barras

– hexapolo - 3º orden - 6 barras

– octopolo - 4º orden - 8 barras

Cuando no está presurizada actúa como una guía de iones

Cuando está presurizada los iones interaccionan con el gas de la celda, Analito, matriz e iones interferentes entran en la celda

Las condiciones de la celda deben eliminar de forma efectiva las interferencias sin reducir excesivamente la transmisión del analito

LC/MS-QTOF Page 11

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Modo Reacción

pero... Limitaciones:

Un solo gas reactivo no elimina todas las interferencias – Múltiples gases para múltiples analitos

Se debe identificar la interferencia – no adecuado para matrices desconocidas (≠gas: ≠matriz)

Debe ser una interferencia sencilla – no adecuado para matrices complejas

La interferencia debe ser constante – no adecuado para matrices variables

El gas reacciona también con la matriz y analitos para crear nuevas e impredecibles interferencias - no

adecuado para matrices complejas

Condiciones de la celda de reacción: seleccionadas para eliminar la interferencia de interés.

Muy eficiente – reducción de 9 órdenes de magnitud.

Funciona bien para las interferencias poliatómicas tipo “plasma-based”

Gases reactivos no son adecuados para análisis

multielemental en matrices complejas y de alta variabilidad

Un gas reactivo (NH3, H2, CH4, O2 etc) reacciona con la interferencia y

la convierte en otras especies (de ≠ m/z) eliminando la interferencia.

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Page 13

Modo de Colisión

Un gas de celda inerte (He) colisiona con el ión en la celda. Las interferencias

poliatómicas (puesto que son mayores) colisionan más, perdiendo más energía

son entonces eliminadas por “Kinetic Energy Discrimination (KED)”

Se eliminan múltiples interferencias en múltiples masas, bajo las mismas

condiciones

No se seleccionan unas condiciones de celda para cada pareja analito/interferencia

No se necesita conocer las especies interferentes a eliminar – ideal para muestras

desconocidas

He es inerte – no reacciona con la matriz de la muestra – no se forman nuevas

interferencias

Menos eficiente para eliminar interferencias tipo “plasma-based” que LAS CELDAS DE REACCIÓN con gas H2

Mayor pérdida de sensibilidad especialmente en masas bajas (5 ml/min vs 1,5 ml/min)

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Page 14

Modo colisión con He – y discriminación por energías cinéticas (KED)

- He

- Colisión

Ar

Cl

Ar

Cl

As

As

Potencial eléctrico (celda)

Reaction cell

Potencial electrico (analizador)

El ión molecular (ArCl) tiene mayor tamaño que el

analito a la misma masa (As)

Colisiones más frecuentes con He

Reduccion significativa en su energía cinética en

relación con la del analito (As)

Energía

del ión

As (ión atómico) y ArCl (ión molecular)

– entran en la celda con la misma energía

Una pequeña diferencia de voltaje

entre celda y analizador (bias

voltage) actúa como barrera de

potencial para iones de baja

energía (poliatómicos) - KED

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Energía Energy

Cell

Entrance

Cell

Exit

La pérdida de energía en cada colisión con un átomo de He es la misma para analito y poliatómico, pero poliatómicos tienen mayor tamaño y sufren más colisiones.

A la entrada de la celda , analito y poliatómico tienen la misma energía. La dispersión de energías de ambos grupos de iones es estrecha, debido al sistema ShieldTorch

iones poliatómicos

iones analito

Distribución de energías de analito e ion poliatómico interferente con la misma masa

Voltaje discriminación Elimina iones con baja energía (poliatómicos)

A la salida de la celda, energías de los iones son distintas. Los poliatómicos son eliminados usando un voltaje de discriminación “barrera”. Iones analito tienen suficiente energía residual para superar el “escalón” de potencial; poliatómicos no (discriminación de energías)

Principios del modo colisión con He y KED

*KED = Kinetic Energy Discrimination

iones poliatómicos

iones analito

Un gas de celda inerte (He) colisiona con el ion en la celda

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¿

• En modo He no se pueden eliminar directamente las interferencias isobáricas , por ejemplo el 40 del Ar con el Ca40 ni las interferencias de iones con doble carga

• Los gases reactivos eliminan las intereferencias a concentraciones muy bajas, ppt

LC/MS-QTOF Page 16

¿POR QUÉ UN ICPMS QQQ?

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MODO DE OPERACION

LC/MS-QTOF Page 17

La formación del Plasma y la interfase es la misma que para el 7700

Q1 Controla

los iones que entran en la celda

ORS3, se añade un

Gas de reaccion/col Forman Products Ions

Q2 selecciona el

Target y solo deja pasar ese ion al Detector

Detector EMF

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ICP-MS/MS: Cómo funciona?

EM (detector): Mide los

iones que son escaneados

por el Q2 (como en el

7700)

18

Q1 –Controla los iones

que entran a la celda

• Reaciones

consistentes incluso si

la matriz de la muestra

cambia

ORS3 –

Colisión/reacción

controlada

• Los iones reaccionan

y son eliminados o

neutralizados

• Se forman nuevos

iones

Q2 – Selecciona la masa

de nuestro analito

• El analito libre de

interferencias pasa al

EM

July 5, 2012

ICP (plasma) e interferencias:

Forma y extrae iones de la

muestra (como en el 7700)

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1. Medida “On-Mass”: El analito no reactivo no reacciona con el gas

de la celda, mantiene su m/z original y puede ser separado de las

interferencias reactivas. No se producen nuevas interferencias, ya

que todas las masas que no coinciden con las de nuestro analito son

rechazadas en el Q1

En ICP-MS/MS, el Q1 rechaza todas las masas que no coinciden con la

de nuestro analito, asegurando que no se formen nuevos productos

iónicos que interfieran con la masa original de nuestro analito

Cómo funciona el modo reacción en ICP-MS/MS

Reaction

product ion

On-mass

interference

Analyte

Off-mass

interference

Reaction

gas

Interference

M+ MR+

Q1 set to analyte

mass – rejects all

non-target masses

Q2 set to original analyte

mass – rejects any off-

mass product ion(s)

Analyte

Interference reacts

to form product ion

All non-target

masses

19 July 5, 2012

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2. Medida “Mass-Shift”: El analito reactivo reacciona con el gas

elegido, y se forma un nuevo producto iónico que puede ser

separado de las interferencias no reactivas. No existen iones que

puedan interferir nuestro nuevo analito, ya que todas las masas que

no coincidian con la nuestra han sido rechazadas en el Q1

En ICP-MS/MS, Q1 elimina todas las masas que no coinciden,

asegurando que no existen iones (analito, matriz, o poliatómicos) que

puedan interferir

Cómo funciona el modo reacción en ICP-MS/MS

Original

interfering ion

On-mass

interference

Analyte

Off-mass

interference

Reaction

gas

Analyte

M+ MR+

Q2 set to analyte product

ion mass – rejects original

interfering ions

Analyte

product ion

Analyte reacts

to form product

ion

Q1 set to analyte

mass – rejects all

non-target masses

All non-target

masses

20 July 5, 2012

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ESPECIACION

LC/MS-QTOF Page 21

Análisis de DNA, Proteinas/Peptidos a muy bajas concentraciones basados en la relación S/P como SO+ y PO+

Metionina (S) BNPP (P)

BIS(4nitrofenil)fosfato

DATOS EXPORTABLES

A MPP

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Agilent Restricted

Page 22

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Tecnología iFunnel con

LC/MS-QqQ, QTOF

• Sensibilidad

• Exactitud de Masa

• Resolución Espectral

• Fidelidad Isotópica

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iFunnel Technology Revolutionizes Ion Sampling CAPTURA 10% MAS DE IONES INCREMENTO SENSIBILIDAD

Agilent Jet

Stream

Hexabore

Capillary Dual Stage Ion Funnel

10X Sensitivity Breakthrough for 6550 QTOF

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TECNOLOGIA iFUNNEL, UN 10% MAS DE IONES

LC/MS-QTOF Page 25

AGILENT JETSTREAM THERMAL GRADIENT FOCUSING TECHNOLOGY Elevada mejora en Sensibilidad. Mejora en la Nebulización. Mejora en la Desolvatación. Iones Focalizados en una zona colimada por contención térmica. Mejora en la Eficiencia de la Ionización y Muestreo.

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LC/MS-QTOF Page 26

Agilent Jet Stream: La máxima

Sensibilidad en QTOFs: Agilent-6530

Especificación: 1pg Reserpina inyectada

en columna S/N > 50:1 (N= 1x RMS)

Sin calentar el “Sheath Gas”

Calentando el “Sheath Gas”

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TECNOLOGIA iFUNNEL , GANANCIA DRAMATICA SENSIBILIDAD

iFUNNEL TECNOLOGIA CAPILAR HEXABORO

• Sistema Hexabore con seis capilares de entrada dieléctricos fríos (aislados del gas de secado) a contracorriente para evitar degradaciones térmicas y obstrucciones.

• La corriente de gas de secado, a alta temperatura, exterior a los capilares, está controlada electrónicamente en flujo y temperatura. Este diseño permite aumentar la sensibilidad ya que mejora la transferencia de los iones al interior del equipo ya que se hace a alta presión

• Captura la mayoria del gas de la zona de la fuente

LC/MS-QTOF Page 27

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TECNOLOGIA iFUNNEL CAPTURA UN 10% MAS DE IONES

LC/MS-QTOF Page 28

DUAL ION FUNNEL •

Elimina el gas pero captura los iones

Elimina los neutros

Aumenta la vida de la bomba turbo

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Beneficios por aumentar la Sensibilidad

Detección de bajas concentraciones de compuestos

Sensibilidad

Minimizar la interferencia de matriz

Simplifica la preparación de muestra

Posibilidad de Volumen de muestra limitado

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LC/MS-QTOF Page 30

Mass Spec/tacular

Agilent LC/MS-TOF’s & QTOF’s

2004: True Hi-Def TOF Technology: - Innovación en Tecnología de Tiempo de Vuelo.

Muy elevada & Robusta Exactitud Masa y Resolución Espectral (2004: 3ppm –Rs 10K)

-Otras Innovaciones Agilent “clave” en LC/MS: - 1996 Nebulización Ortogonal y “Autotune” Robustez y Facilidad de uso. - 2005 HPLC-Chip/MS nano-HPLC Robusta, Eficiente y Fácil de usar - 2008 Jet-Stream Technology mejora típica x5 sensibilidad en LC/MS - 2009 Ultra High Definition TOF Technology mejora Resolución (40K) y Exactitud de masa (tip. 500pbb)

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GC/Q-TOF para Target, No-target y Desconocidos :

Las ventajas de la Alta Resolución, Masa Exacta y la alta

Velocidad de adquisición en MS y MS/MS

7200 GC-QTOF Una nueva herramienta para

solucionar complejos

problemas analíticos

Regina Orenga

Agilent Technologies Spain

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El reto en GCMS : problemas analíticos complejos

1a Estrategia :

La tecnología MS-TOF recoge y analiza simultáneamente todos los iones a lo

largo del rango de masas en contraposición a los instrumentos de barrido

convencional donde los iones son filtrados y detectados secuencialmente.

Consecuentemente, el GC-QTOF-MS en modo TOF no tiene parangón en

sensibilidad trabajando en “Full Scan”, comparable a la técnica GC-MS en

modo SIM, pero con el espectro completo y

Además ,el GC-QTOF-MS genera datos en masa exacta lo cual permite obtener

una alta selectividad y sensibilidad utilizando ventanas de extracción del orden

de 0.02-0.05Da.

PERO, ¿Qué pasa cuando la Resolución y la Δ Masa no son suficientes?

2a Estrategia: GC-QTOF-MS/MS

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= +

GC7890 + QQQ7000 + QTOF6500 = 7200 GC/Q-TOF

Quadrupolo Tiempo de Vuelo MS

Tiempo de vuelo MS

Triple Quadrupolo MS

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La unión de 2 plataformas

Turbo 2

Ion Pulser

Turbo 3

Ion Source

Turbo 1b Turbo 1a

Quad Mass Filter (Q1)

Collision Cell

Transfer

optics

6500 LC/MS

Q-TOF based

7000 GC/MS

QQQ based

Ion Mirror

Ion Detector

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7200 Analyzer Cuatro etapas de vacío

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Nuevo. . . Pero Totalmente Probado

Dual-stage ion mirror improves

second-order time focusing for

high mass resolution.

Hexapole collision cell accelerates

ion through the cell to enable

faster generation of high-quality

MS/MS spectra without cross-talk

Split-flow turbo differentially

pumps the ion source and

quadrupole analyzer

compartments

4GHz ADC electronics enable a high

sampling rate (32 Gbit/s) which

improves the resolution, mass

accuracy, and sensitivity for low-

abundance samples. Dual gain

amplifiers simultaneously process

detector signals through both low-gain

and high gain channels, extending the

dynamic range to 105.

Analog-to-digital (ADC) Detector:

Unlike time-to-digital (TDC) detectors

which record single ion events, ADC

detection records multiple ion events,

allowing very accurate mass

assignments over a wide mass range

and dynamic range of concentrations.

New Removable Ion Source

includes repeller, ion volume,

extraction lens and dual filaments

Proprietary INVAR flight tube

sealed in a vacuum-insulated

shell eliminates thermal mass

drift due to temperature

changes to maintain excellent

mass accuracy, 24/7. Added

length improves mass

resolution.

Hot, quartz monolithic quadrupole

analyzer and collision cell identical

to the 7000 Quadrupole MS/MS

New Internal Reference Mass

can be delivered to the source

at a low and high

concentration

Two 300L/s t urbos pump the

focusing optics and flight tube

From 3 pg of brochure

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Removable Ion Source (RIS)

Automated

Retractable

Transfer Line

RIS

Automated

Gate Valve

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Removable Ion Source (RIS)

• RIS, Sistema Estandar en Q-TOF

• Permite cambios de fuente EI/CI

rápidos sin romper el vacío.

• Permite cambiar la fuente

entera, incluyendo filamentos,

en ~30 minutos sin romper

el vacío.

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Cambio de fuente en 30 minutos con RIS

Nueva fuente limpia

Fuente sucia

1pg OFN

Ventearenfriar la fuenteabrir la cámara y cambiar/limpiar componentes

Cerrar la cámaraeliminar el airecalentar la fuente

dejar estabilizar temperatura y vacío

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LC/MS-QTOF Page 40

AJS HD “versus” UHD-QTOF’s

• Ion Beam Compression (IBC) Technology* drives higher

resolution. IBC technology compresses and cools the ion beam up

to 10-fold. The more dense and uniform the ion beam, the fewer the

ion losses, resulting in more precise mass assignment. Both mass

resolution and mass accuracy are improved by up to 200%.

• UHD Q-TOF technology is the result of new innovations in ion

beam compression,enhanced mirror technology, plus a longer flight

tube, fast bipolar detector and further refinements in reference

mass calibration.

•* Patent pending

6530A UHD-

6540A Sensitivity 1 pg; 50:1

S/N

2 pg; 50:1

S/N

Mass

Accuracy

< 2ppm < 1 ppm

Mass

resolution

Up to

20,000

Up to

40,000

Dynamic

range

Up to 5

orders

Up to 5

orders

Speed (MS

scan/sec)

20

scan/sec

20

scan/sec

Mass

range

Up to

20,000

Up to

10,000

SIN SACRIFICAR EXACTITUD/ SENSIBILIDAD/

LINEALIDAD/ RESOLUCION ESPECTRAL

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Internal Reference Mass (IRM)

• El objetivo de exactitud de masa para el 7200 es de ~2-5ppm en cualquier

condición

– Agilent ha desarrollado un sistema propio Internal Reference Mass (IRM)

que proporciona al sistema corrección del eje de masas “en el aire”.

• El sistema IRM utiliza compuestos conocidos del background para

bloquear el eje de masas en cada espectro

• Requiere un sistema robusto de señal de calibración IRM en muestras con

y sin matriz

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1. Bloqueo del eje de masas por Referencia Interna

para exactitud sub 5ppm incluso en muestras con

alta carga de matriz

2. Fuente extraíble RIS para una limpieza, cambio de

filamentos o intercambio de fuentes EI/CI rápida y

sin romper vacío.

3. Q-TOF MS/MS:

• Reducción del ruido químico

• Selectividad

• Information estructural

• Desarrollo de métodos

4. Herramientas de software – Formula calculator /

MSC (MS/MS Structural Correlation Tool)

Características Clave en el 7200

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43

UHD Q-TOF

Ion path innovations to allow greater ion flux

High Sensitivity at

High Resolution

Ion Beam Compression

Beam Shaping

Ion Beam Compression and Shaping (IBCS)

Automated dual mode beam shaper

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LC/MS-QTOF Page 44

Innovaciones Patentadas por Agilent en

Tecnología UHD-QTOF

Total 24 patentes + tubo vuelo más largo HD-QTOF 6520/30 UHD-QTOF 6538/40

Los Agilent QTOF /TOF solventan las tradicionales limitaciones históricas de TOF/QTOF y ofrecen: •EXCELENTES prestaciones cuantitativas: sensibilidad (fg –pg), rango dinámico (5 órdenes) y reproducibilidad. •Su exactitud de masa NO está afectada por cambios en la concentración del analito (hasta 5 órdenes) •Su exactitud de masa NO está afectada por los habituales cambios en la temperatura del laboratorio.

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LCxLC: Cromatografía Bidimensional Exhaustiva “Comprehensive 2D-LC“ and heart-cutting 2D-LC

LC/MS-QTOF Page 45

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LCxLC: Cromatografía Bidimensional Exhaustiva

“Comprehensive 2D-LC“ and heart-cutting 2D-LC

“Comprehensive 2D-LC“ (LCxLC):

LC1

LC2

1st peak from

1st

dimension

2nd peak

from 1st

dimension

3rd peak from

1st

dimension

LC1

LC2

El eluyente completo de la primera columna se inyecta

a la 2ª columna y se analiza con gradientes muy

rápidos, un pico de la primera dimensión debe

muestrearse al menos 3 a 4 veces. El tiempo en la 2 ª

dimensión coincide con el de la recolección del

eluyente y los picos se reconstruyen mediante

software.

Página: 46

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Hardware LCxLC – Flexibilidad de Módulos

1ª Dimensión

2ª Dimensión

1290 Infinity

Binary Pump

1290 Infinity

Binary Pump

1290 Infinity

Autosampler or 1260

HiP Autosampler

Optional

1260/1290

Infinity

Detector 1ª

Dimensión

One or two

1290 Infinity

TCC

Optional

1260/1290

Infinity

Detector

1260/1290

Infinity

detector

2ª Dimensión

1260 Infinity Binary

or Quaternary Pump

1260 Infinity

Capillary Pump 1260 Infinity

Autosample

r

For 1st

dimension

chromatogram

and peak-

triggering

To monitor

waste-line

La mayoría de Bombas o Autoinyectores Agilent sirven en la 1st dimensión!

Casí todos los detectores están soportados!

La 2ª dimensión requiere una Bomba 1290 Infinity Binaria.

waste

Loop1

Loop2

2pos/4port-duo

Nueva vávula Agilent

2D-LC con 2 rutas de

flujo completamente

simétricas y vaciado a

contracorriente de

ambos “loops“.

Página: 47

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Muy Sencilla y Rápida Programación Gráfica

del Gradiente de la 2ª dimensión.

Muy sencilla programación gráfica del

gradiente de la 2ª dimensión (operación muy

tediosa y laboriosa por procedimientos habituales)

Página: 48

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1290 Infinity Detector Diode-Array

Page 49

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1290 Infinity Detector Diode Array - Como trabaja la óptica:

Deuterium

lamp

Max-Light cartridge

cell

Programmable

slit

1024 element

diode-array

Grating Mirror 160 Hz

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Cartucho de Celda “Max-Light“ - Optofluidic waveguides

High Light Transmission utiliza el principio “Total-Internal Reflection (TIR)“

Para conseguir (~ 100 % Light efficiency)

Non-coated fiber (fused silica)

Beneficios: Alta sensibilidad (S/N) con pequeños volúmenes de celda (efecto dispersión)

No se ve afectado por los cambios de Indice de Refracción generados por las

temperaturas de los disolventes.

Fácil elección de celda (una celda para la mayor parte de las aplicaciones)

Diseño de cartucho para su fácil manejo

Page 51

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Cartucho de Celda “Max-Light“ - Tipos de Celda

Non-coated fiber (fused silica)

CELDA Estandard: De 10 mm de camino óptico y tan solo 1 µl de volumen

CELDA de Alta Sensibilidad: De 60 mm de camino óptico y tan solo 1,3 µl de volumen

Page 52

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1290 Infinity Detector Diode-Array - Rendija programable:

nm 230 240 250 260 270 280

Absorbance

0

0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

(mAU)

1 nm

2 nm

4 nm

8 nm

Nivel de ruido

Rendija Programable para la fácil optimización de la

sensibilidad o resolución espectral.

Page 53

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Ganancia de Sensibilidad - Comparación de la celda Standad con la celda de Alta Sensibilidad

min 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8

mAU

0

5

10

15

20

25

30

35

40

DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-STD-CEL7.D)

DAD1 B, DAD1A, DAD: Signal A, 251 nm/Bw:10 nm Ref 360 nm/Bw:100 nm (F:\AE4-ANTHRACENE\ANTHRA-HS-CEL07.D)

Max-Light standard cell flow cell (10 mm)

S/N: 612 Sample: Anthracene, 16.4pg/µl

Column: 2.1x50mm BEH C18, 1.8µm

Mobile phases: Water/Acetonitrile = 30/70

Flow rate: 0.5ml/min

Detection 251, PW >0.05min,

Injection volume:1µl

Column temp: 36°C

Max-Light High Sensitivity cell (60 mm)

S/N: 2339

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Up to 4 x Higher Sensitivity*

* Preliminary Spec

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GRACIAS A TODOS

POR VUESTRA ATENCIÓN

Regina Orenga

Agilent Technologies

Tfno 901 11 68 90

Móvil 654434701

[email protected]