transferencia de hembriones en bovinos
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TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES
ELIANA HERNANDEZ
STEFANIE ANAYA
RUTH MENESES
FARY MENESES
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Técnica en la que se aprovecha la
calidad genética de los padres
(donadores) mediante, la obtención
de varios óvulos, para fecundarlos,
extraerlos e implantarlos en hembras
diferentes (receptoras).
OBJETIVOS
Aumentar la capacidad reproductora de las vacascon alto valor genético.
Recuperar hembras infértiles de alto valorgenético (enfermedades, edad, accidentes).
Intercambiar material genético (transporte,adaptación al medio, patógenos).
PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
VACAS DONADORAS:
SELECCIÓN
TRATAMIENTO
INSEMINACIÓN
CUIDADOS
SELECCIÓN DE DONADORAS
Animales de alto valor genético, que este libre de
leptospira, brucelosis y trichonoma.
Que presente ciclicidad ovárica cada 18 ó 21 días.
Tener descanso post parto de mínimo 60 días.
TRATAMIENTOS
Se inicia a partir de los días 8-12 del ciclo estral
(fase luteal ó diestro)
Se aplica cualquier hormona con acción de FSH
Se aplica dosis mañana y tarde, o bien una sola dosis
en el día por cuatro días, esto para
SUPEROVULACIÓN.
Para SINCRONIZACIÓN, aplicar prostaglandina un
día después de iniciado el tratamiento
superovulatorio.
TRATAMIENTOS
Se coloca PROGESTERONA por unos ocho días,
luego se retira abruptamente, el celo se presentará
de dos a cuatro días de retirar la
PROGESTERONA. Esto para SINCRONIZAR Celos.
INSEMINACIÓN
Se realiza el mismo procedimiento que para
INSEMINACIÓN ARTIFICIAL, pero Dos veces,
una a las doce horas de presentarse el celo y
otra veinte y cuatro horas después de éste.
Algunos investigadores recomienda 3; unas 12
horas después del celo, otra 24 horas después, y
por último 36 horas luego del celo. Esto porque
son muchos óvulos y estos no se liberan a la vez.
CUIDADOS
Durante el tratamiento superovulatorio
Evitar estrés por temperatura, o cambios bruscos de
alimentación
Evitar realizar vacunaciones.
Tenerla en lugares tranquilos, con buena sombra y
disposición de alimento y alejada de personal
agresivo.
PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
HEMBRAS RECEPTORAS
Selección:
• Buen comportamiento reproductivo
• Buen tamaño y amplitud pélvica
• Útero con mas de 60 días de descanso
• Buen estado nutricional y sanitario
• Debe estar libre de enfermedades
• Buena habilidad materna
PARÁMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
Tratamiento
Cuidados
• Evitar palpaciones demasiado tempranas
• Evitar el estrés
• Evitar que los programas de vacunación coincidan
con los de transferencia de embriones
TRATAMIENTOS DONADORA VS RECEPTORA
celo
PARAMETROS PARA UN PROGRAMA DE
TRANSFERENCIA DE EMBRIONES
EMBRIONES:
RECOLECCIÓN O LAVADO
MANEJO
EVALUACIÓN
CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN
IMPLANTE ó TRANSFERENCIA A RECEPTORAS
CONGELACIÓN, REFRIGERACIÓN
MICROCIRUGIA (OPCIONAL)
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
RECOLECCION Se hace del entre el día 7-8 luego de
inseminar y para ello se usan los siguientes
MATERIALES PARA RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
Suero fetal inactivado, sirve como alimento a los
embriones(+concentrado en el medio de manutención
10-20%)
Sondas de Foley, sonda de transferencia de 2-3 vías;
Dilatador cervical. Para animales que no dilatan
suficientemente el cérvix, facilita la introducción de
las sonda bien sea de Foley o Cossou.
Lupa estereoscópica, para la búsqueda y
clasificación de embriones. Debe contar con lentes
desde 40x hasta mínimo 120x.
Medio PBS de lavado, es un buffer, es que funciona
como medio de arrastre de los embriones una vez es
introducida hasta los cuernos.
Anestesia epidural (xilocaina al 2%), colocada al
final del sacro, sobre la cola, para relajar los
músculos de esta y facilitar el trabajo del operario.
Agua bi destilada y de ionizada
Jeringas (hormonas y anestesia)
RECOLECCIÓN DE EMBRIONESProbeta de 1 litro, para preparar el medio de
lavado PBS.
Micro pipetas
Congelador de embriones
Esterilizador (vapor, calor o ultravioleta)
Mini pajillas con capacidad de 0.25cc
Pistola miniaturizada
Cajas cuadriculadas de Petri y discos de cultivo,
permiten o ayuda a la búsqueda de los embriones.
Incubadora con rango de temperatura de 5-32ºC
MATERIALES
PROCEDIMIENTO TECNICO DE LA
RECOLECCION DE EMBRIONES
Preparación del medio PBS 1000 ml (1l)
Aseo del brete o cajilla para toma de muestras y
colocación de la donadora en él.
Lavar cuarto trasero de la donadora
Chequear el correcto funcionamiento del equipo
Aplicación de xilocaina al 2% (anestesia epidural )
Despejar la materia fecal del recto
Aplicar la técnica de lavado de embriones ( Vía del
aire)
Filtrado del medio
RECOLECCIÓN DE EMBRIONES
RECOLECCION DE EMBRIONES: vía de aire Introducción de la sonda de lavado Foley (Rush o
Cassou), con ayuda de un soporte metálico, hasta
los cuernos. Hasta la bifurcación de los dos cuernos.
Aplicación de aire a la baloneta de la sonda, con
una jeringa, de a 5cc , hasta que se palpe que esta
cerrando completamente el cuerno.
Cerrar la válvula de recolección y aplicar el medio en
bajas cantidades, con la mano que esta en el recto
hacer masajes, sobre el cuerno
Cerrar la válvula de aplicación del medio y
abrirla de recolección y sacar el medio, con los
embriones
Repetir el procedimiento, hasta que se esté
seguro que se ha lavado todos los embriones.
Una vez obtenido los embriones, se filtra el
medio, con filtros especiales y se trasladan a un
recipiente de transporte
Se transportan los embriones, se cubre el
recipiente con papel parafinado. Evitar que les
de la luz solar directamente.
MANEJOS Y ELECCIÓN
1) Reposo, por 20-30 minutos.
2) Decantación del medio (se deja 50ml ó
100 ml con los embriones)
3) Pasar cajas de Petri y búsqueda de
embriones, con la lupa estereoscópica.
4) Cajas de cultivos, se dejan por unos 30
minutos, si el embrión esta en buen
estado, si se duda, se dejan de 30-40
minutos y luego se observan con lente de
mayor aplicación 120x
5) Clasificación y Selección .
6) Pasado a pajillas de embriones (0.25-
0.5ml)
EMBRIONES VIABLES Y NO VIABLES
CONGELACIÓN Y DESCONGELACIÓN DE
EMBRIONES
Refrigerar: Temperatura a 0- 4ºC / 24 horas
Congelar : Liquido de Nitrógeno a -196ºC
Descongelar : Agua a 37ºC/30 segundos
CLASIFICACIÓN DE LOS EMBRIONES
GRADO 1: su estado de desarrollo corresponde al
día de recolección, es casi esférico, no presenta
células en el blastocele sueltas, la zona pelucida esta
intacta, todas las células se encuentra del mismo
tamaño y está unidas
GRADO 2: Todo su desarrollo corresponde al día de
la recolección, pero presenta algunas células en el
blastocele sueltas, presenta pocas alteraciones en la
zona pelucida. Puede presentar vacuolas y
granulaciones en su superficie.
GRADO 3-4: Presentan serias alteraciones en la
zona pelucida, Esta puede presentar orificios, en
algunos casos el embrión está saliendo de su zona
pelucida, presenta un elevado número de células
sueltas, de morfología y tamaño variado. Puede
presentar coloraciones oscuras e incluso desgarres
en la zona pelucida, existe poca compactación
entre células y estas son de diferentes tamaños.
Solo se usan para transferencia los que están en
los GRADOS 1 y 2; los del grado 2 con más
reservas.
IMPLANTE DE EMBRIONES
NO QUIRURGICA
NO QUIRURGICA
Usa una pistola similar a la de I.A, pero la pajilla es
más larga, y permite depositar al embrión
directamente en el cuerno. Todo el procedimiento es
similar al de I.A
Aquí se debe primero realizar palpación de la
RECEPTORA, para determinar en que cuerno está el
C.L
El procedimiento de transferencia, se debe hacer unas
dos horas después de cosechar los embriones, si estos
no van a recibir ningún tratamiento de congelación.
IMPLANTE DE EMBRIONES
QUIRURGICARealizando una laparotomía ventral bajo
anestesia general (Rowson y col 1969) o
a través del flanco, con anestesia local
QUIRURGICA
LAPAROTOMIA VENTRAL
QUIRURGICA
Se usaba principalmente en pequeños
rumiantes,(ovejas, cabras) y en porcinos
Se necesita exponer por medio de corte, ventral,
cerca la los ovarios, para exponer el cuerno donde
se depositará el o los embriones, se ubican en la
parte uterovarico del cuerno.
VENTAJAS
Acortar el intervalo generacional e incrementa
la ganancia genética.
Permite introducir y difundir rápidamente
nuevas razas de alto valor genético.
Disminuye el riesgo de transmisión de
enfermedades.
selección genética rigurosa por lado materno,
que incrementa el progreso genético
VENTAJAS
Si se usa bipartición, se puede obtener más
crías por vaca de alta calidad genética.
Si se usa fertilización y congelamiento en
laboratorio, se puede obtener crías de vacas
de alta calidad que hayan muerto.
Se pueden obtener más crías por vaca,
aproximadamente 100 en toda su vida útil.
DESVENTAJAS
Costosa por: adquisición del equipo, compra
de las hormonas, adquisición del alimento
para receptora y donante, y, la mano de
obra especializada.
Es imposible predecir los resultados (alta
variabilidad genética en los embriones)
Tiene un protocolo estricto, que debe
realizarse de forma perfecta para lograr
los resultados deseados.
DESVENTAJAS
Distocias
Falla de donadoras en un 12%
Abortos y reabsorciones en 6%
Disponibilidad de receptoras
Tiempo de espera en receptoras
Sólo aptos embriones de buena calidad
Daños por congelación (10%)
COSTOS DE TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES
