tema ii enzimas celulares del suero-010

FAC. DE C. QUÍMICAS/UNACH / CAMPUS IV

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

CAMPUS IV

APUNTES IMPRESOS DE LA MATERIA DE :

BIOQUIMICA CLINICA II

UNIDAD 2

ENZIMAS CELULARES DEL SUERO

LICENCIATURA DE QUIMICO FARMACOBIOLOGO

TITULAR DE LA MATERIA: M. EN C. CONSUELO CHANG RUEDA

M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 17


CICLO ENERO-DICIEMBRE .2010

TAPACHULA, CHIAPAS

INDICE

INTRODUCCION . . . . . . . . 3

DEFINICION Y CARACTERISTICAS DE LAS ENZIMAS

CARACTERISTICAS . . . . . . . 4

ESTRUCTURA Y CLASIFICACION . . . . .

4

UNIDADES DE ACTIVIDAD ENZIMATICA . . .

8

CLASIFICACION Y DISTRIBUCION . . . . 9

DESTINO DE LAS ENZIMAS . . . . . .

10

METODOLOGIA ENZIMATICA . . . . . 11

PRINCIPALES ENZIMAS DE INTERES DIAGNOSTICO

TRANSAMINASAS . . . . . . . .

14

FOSFATASAS . . . . . . . . .

16

COLINESTERASA . . . . . . . .

17



GAMMAGLUTAMILTRANSFERASA . . . . 18

LIPASA SERICA . . . . . . . . 19

AMILASA . . . . . . . . . .

20

DESHIDROGENASA LACTICA. . . . . . 20

CREATIN FOSFOQUINASA. . . . . . 22

TROPONINAS . . . . . . . . .

23

BIBLIOGRAFIA . . . . . . . . 24

INTRODUCCION:

Las enzimas son proteínas con propiedades catalíticas que nos ayudan a regular la gran mayoría

de las funciones metabólicas del organismo, por lo cual en esta unidad nos enfocaremos como

además nos pueden servir de marcadores bioquímicos para la detección de enfermedades en base

a su aumento o disminución en la sangre, es por ello que mediante estos apuntes el alumno le

permitirá comprender los siguientes objetivos como son:

Objetivos Específicos:

Reconocerá las principales enzimas séricas del plasma

Identificará las principales aplicaciones clínicas de las enzimas organoespecíficas y no

organoespecíficas.

Conocerá los métodos de diagnostico enzimático para él diagnostico de enfermedades

cardiacas, pancreáticas, hepáticas, etc.

2.1 Origen y significado.M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 19


2.2 Características.

2.3 Unidades de actividad enzimática

2.4 Clasificación y distribución.

2.4.1 Principales enzimas celulares de diagnóstico.

2.4.2 Destino de las enzimas celulares.

2.4.3 Enzimas séricas más importantes y su significado.

2.5 Metodología enzimática.

2.5.1 Técnicas calorimétricas.

2.5.2 Técnicas cinéticas.

DEFINICION Y CARACTERISTICA DE LAS ENZIMAS.Las enzimas son proteínas, o sea substancias orgánicas producidas por la célula viva, con

funciones catalíticas especificas. Como catalizadores tienen las siguientes propiedades:

1.- Producen efectos en cantidades mínimas.2.- Resultan inalterables de la reacción .3.- En cantidades pequeñas respecto al substrato, las enzimas no afectan el equilibrio de la reacción reversible, sino aumentan la velocidad con la cual se alcanza el equilibrio.

Las enzimas poseen todas las propiedades características de las proteínas.

Se conocen hasta unas 2000 enzimas, de las que mas de 100 se han podido cristalizar. Los pesos moleculares oscilan entre 12,700 (ribonucleasa) y 1,000,000 (glutamato-deshidrogenasa).

ESTRUCTURA Y CLASIFICACION.

En los últimos años ha sido posible aclarar en muchos casos la composición y la estereoestructura de las enzimas. Muchas de estas contienen un grupo prostético (por ejemplo una vitamina o un metal) que no es de naturaleza proteica. La parte proteica de las enzimas constituye como otras proteínas, un componente polímero con estructura polipeptidica. La cadena polipeptidica, a su vez se compone de aminoácidos unidos entre si a través de enlaces peptídicos (enlaces amidicos) en los que los restos aminoácidos están alineados a los lados.



REPRESENTACION ESQUEMATICA DEL ENLACE POLIPEPTIDICO

H O O H R4 I II II I I N C C N C

C C N C C N II I I I II I O R1 H R2 O H

Se distinguen:

ESTRUCTURA PRIMARIA : Correspondiente a la secuencia de aminoácidos en la cadena proteica, la cual esta acondicionada por enlaces covalentes que pueden ser no solo peptídicos sino también pueden haber enlaces bisulfuro. La estructura primaria la determinan los enlaces covalentes amidicos y carboxílicos. Ejemplo: Papaína, la Quimiotripsina.

ESTRUCTURA SECUNDARIA: Correspondiente a la reticulacion transversal por puentes de hidrogeno entre grupos CO y NH. En la naturaleza la estructura secundaria que más se encuentra es la alfa espiral.

ESTRUCTURA TERCIARIA: Esta se origina por el acomodamiento de la cadena polipeptidica en forma compacta tridimensional (en el caso de las enzimas, esta es un glóbulo esférico). La cadena polipeptidica tiende a acomodarse de tal manera que sus partes hidrofobicas de los residuos de los aminoácidos se escondan buscando de esta forma manera el equilibrio termodinámico; además en la formación de esta estructura tridimensional participan otros tipos de enlaces; entre ellos tenemos: enlaces por puentes de hidrogeno entre grupos peptídicos, puentes de H entre grupos laterales, en lace iónico, interacciones hidrofobicas.

ESTRUCTURA CUATERNARIA: Correspondiente a la composición de grandes moléculas de subunidades. Se presenta cuando la macromol proteica tiene más de una cadena polipeptidica y no están unidas entre si por enlaces covalentes sino también por los enlaces arriba mencionados.



Las estructuras secundarias y terciarias ocasionan cierto plegado y enrollado de la proteína enzimática.

Se extiende por complejo multienzimatico, una forma de organización todavía más elevada, constituida por varias enzimas muy juntas en el espacio , que hace discurrir por orden, una tras otra toda una cadena de reacciones. Este complejo se encuentra en las estructuras subcelulares. Por ejemplo, las enzimas que participan en la síntesis de ácidos grasos en el citosol.

De suma importancia para la enzimología es la relativa inestabilidad de las estructura enzimática (proteica). Una alteración en la estructura o desnaturalización son equivalentes a una perdida enzimática ( de actividad). La estabilidad depende, entre otras cosas, de la temperatura, la concentración de iones H (pH) y de la concentración de sales.

Según su acción catalítica, las enzimas se dividen en 6 clases:

1.- OXIDOREDUCTASAS. (Lactado deshidrogenasa, etc.)2.- TRANSFERASAS (Alanina aminotransferasa)3.- HIDROLASAS (Colinesterasa)4.- LIASAS ( Aldolasa)5.- ISOMERASAS ( Fosfoglucosa isomerasa, PGI)6.- LIGASAS (Piruvato carboxilasa).

Las proteínas son electrolitos multivalentes que contienen grupos ionizables. El grado de ionización influye en la actividad de una enzima y depende del pH.

En forma de electrolitos, las proteínas se desplazan en el campo eléctrico. Las moléculas con carga positiva se desplazan hacia el cátodo y las cargas negativas hacia el ánodo. Cuando mas alta es la carga neta, tanto más rápida es la migración de la molécula. Una mezcla de proteínas con diferentes cargas netas puede, por ello, fraccionarse electroforéticamente. Este procedimiento se usa para la separación de isoenzimas.

LAS ENZIMAS desde el punto de vista clínico son proteínas , o sea sustancias orgánicas, producidas por la célula vía. La vida va unida a complejas transformaciones materiales que están acopladas energéticamente unas con otras y que transcurren a temperatura constante, relativamente baja.- Esta peculiaridad esta posibilitada por la acción de las enzimas, que pueden designarse como catalizadores biológicos. La mayoría de ellas catalizan específicamente una reacción química determinada; la sustancia transformada se denomina SUSTRATO, y la substancia resultante de la reacción se denomina PRODUCTO.

Otras obran menos específicamente y aceleran diversas reacciones, por lo general análogas. En muchos casos, la misma reacción puede estar catalizada por enzimas diversas que se producen en células distintas. La mayoría de la enzimas pueden definirse además como CATALIZADORES QUIMICOS: Aceleran las reacción en ambos sentidos, es decir tanto adelante como hacia atrás, sin consumirse en ella.

IN VITRO: La reacción catalizada transcurre hasta que se llega al estado de equilibrio que se instauraría sin catálisis (equilibrio químico).M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 22


IN VIVO: En la célula viva, la actividad catalítica de las enzimas esta gobernada por la regulación biológica.

Una enzima se combina temporalmente con la sustancia (SUBSTRATO) sobre el cual actúa para formar un complejo SUBSTRATO – ENZIMA que se rompe para formar los productos de reacción y libera a la enzima para continuar su función catalítica. Como todo catalizador las enzimas participan directamente en la reacción y permanecen inalteradas.

SUBSTRATO (S) + ENZIMA (E) = E - S + E + P

+ + +

Una enzima es activa porque posee un sitio especifico que tiene afinidad por el substrato. A este sitio se le llama CENTRO O SITIO ACTIVO DE LA ENZIMA. Es el responsable de la actividad de la enzima, cada enzima puede tener varios centros o sitios activos, dependiendo de la naturaleza de la misma. El sitio activo puede ser de naturaleza proteica, constituyendo parte de la molécula misma de la enzima, o bien pueda ser de naturaleza no proteica, llamándosele COENZIMA y por si mismo no es activo. El resto de la molécula proteica (APOENZIMA) no es activa y solo se convierten enzima activa (HALOENZIMA) al combinarse con su coenzima.

LA COENZIMA constituye en estos casos el centro activo de la halo enzima. La coenzima puede estar unida fuertemente a la proteína, es decir, a la parte proteica de la enzima (APOENZIMA) y entonces se le denomina GRUPO PROSTETICO. Por lo tanto puede diferenciarse entre la coenzima ( la parte no proteica de la enzima) que no esta unido a esta tan firmemente, y el grupo prostético que si esta unido firmemente al resto de la proteína y no puede separarse fácilmente de ella.

Para ejercer su efecto, muchas requieren en grupo prostético de bajo peso molecular llamadas coenzimas. Cuando se trata de un ión inorgánico se habla de un ACTIVADOR O COFACTOR. Si esta substancia esencial es un componente orgánico complejo, hidrosoluble de naturaleza no proteica se llama COENZIMA.

Las enzimas son muy lábiles, de tal forma que pueden alterarse presentándose 2 fenómenos principalmente la INACTIVACION Y LA DESNATURALIZACION. La inactivación es un proceso reversible que puede reestablecerse al desaparecer el agente causante de la misma, pero la desnaturalización es un proceso irreversible, prácticamente una vez que se ha desnaturalizado una enzima no es posible que esta recupere su actividad, especialmente cuando esta desnaturalización ha sido muy profunda al grado de romper los enlaces peptídicos de las proteínas.



En los organismos vivos, las enzimas son degradadas rápidamente y el organismo repone su suministro de enzimas por nuevas síntesis.

Las enzimas se producen intracelularmente y van a parar al plasma y a los fluidos del organismo, no se sabe con certeza porque se encuentran en la sangre. Algunas actúan en ella, pero la presencia de la mayoría probablemente abscede a la constante destrucción celular.

VARIANTES ENZIMATICAS: Las variantes enzimáticas moleculares se subdividen en tres grupos.

ISOENZIMAS: Enzimas de función semejante, típicas de los tejidos , órganos y organelas celulares de la misma especia, pero poseen diferentes propiedades físicas y químicas (determinadas genéticamente) ejemplo LDH.

HETEROENZIMAS: Enzimas de función semejante, especificas de las diversas especies biológicas ejemplo: LDH del hombre y LDH del conejo.

ALOENZIMAS: Variantes de enzimas e isoenzimas condicionadas genéticamente que sólo aparecen en parte de los componentes de una especie. La mayoría de la aloenzimas no conducen a manifestaciones patológicas, por ejemplo las aloenzimas de la fosfatasa alcalina , entre otras. Sirven para caracterizar el tipo bioquímico de un individuo y son de utilidad práctica en Medicina legal y en Genética.

Todas las enzimas se caracterizan por su:

1.- ACTIVIDAD.

2.- ESPECIFICIDAD. Actúan sobre substratos específicos en condiciones particulares. El grado de espeficidad varia de una enzima a otra, Algunas muestran especificidad absoluta, otras tienen especificidad de grupo, otras tienen estereoespecificidad.

3.- SENSIBILIDAD. A la influencia del pH, temperatura, concentración del substrato y tiempo de exposición de la enzima sobre el substrato, que son los factores que gobiernan la velocidad de reacción enzimática.

UNIDADES DE ACTIVIDAD ENZIMATICA

Su cantidad en el plasma es muy baja, y como se parecen mucho químicamente, no se estudian por su concentración sino por su actividad, la que se expresa en unidades. Las unidades en que se expresan los resultados son arbitrarias y varían según el método empleado. El empleo de unidades diferentes para expresar los resultados en cada laboratorio hace que realmente sea difícil comparar los resultados y evaluar los datos existentes en la literatura por lo que en la actualidad se pugna por el empleo de u “UNIDAD INTERNACIONAL” (UI) para expresar los valores de actividad enzimática.



La UNIDAD INTERNACIONAL es la cantidad de enzima (actividad enzimática) que reacciona con un macromol (ni) de substrato por minuto en condiciones optimas de concentración de substrato y pH, así como temperatura a la cual se lleve acabo la reacción.

La actividad enzimática deberá indicarse como mU/ml, o bien como U/l. La unidad enzimática no es una medida de la concentración de la enzima, sino un dato de la actividad de la misma, en un volumen determinado, por ello debe indicarse como unidad volumen.

Es necesario tomar en cuenta que aun cuando los resultados de una determinación enzimática se expresan en UI, solo se podrán obtener resultados similares en los diferentes laboratorios si las determinaciones se hacen siguiendo el mismo método y condiciones es decir empleando el mismo substrato, tampón, temperatura, pH optimo, etc.

Utilizando otros métodos de estudio, electroforesis, cromatograficos e inmunológicos, se ha podido apreciar el hecho de que enzimas con la misma especificidad puedan tener diferente estructura si proceden de diferentes órganos. A los grupos enzimas con esos caracteres, se les conoce como isoenzimas; las fosfatasas alcalinas, por ejemplo, abarcan varias isoenzimas: óseas, placentarias, hepáticas, intestinal.

CLASIFICACION Y DISTRIBUCION:

Desde el punto de vista de diagnostico, es conveniente clasificar a las enzimas según su origen y función en: 1.- Enzimas especificas del plasma.

2.- Enzimas de secreción.

3.- Enzimas celulares.

Las enzimas específicas se originan en el hígado pero son liberadas activamente al plasma, donde llevan acabo su actividad catalítica. Son de interés clínico porque se encuentran en el plasma a niveles más bajos que los normales como resultado de lesión en el hígado. La pseudocolinesterasa o Colinesterasa sérica y las enzimas de la coagulación son ejemplos clínicos importantes. Actúan en el propio plasma sanguíneo.

La enzimas de secreción y las enzimas celulares se localizan en el plasma sanguíneo, en concentraciones mucho mas bajas que sus concentraciones en ciertos tejidos, pero no desempeñan funciones fisiológicas importantes en el plasma. Entre las enzimas de secreción se encuentran la amilasa., lipasa y las fosfatasas. Aunque se secretan a alta velocidad, se dispone rápidamente de ellas y son eliminadas por los canales de eliminación usuales como la orina, bilis M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 25


y el tracto intestinal, y a sus niveles normales son relativamente bajos y constantes. Sin embargo, si esta bloqueado alguno de los caminos usuales de eliminación, o se acelera súbitamente la velocidad con que son liberadas al liquido extracelular, puede ocurrir aumento importante de los niveles de estas enzimas en plasma.

Las enzimas de metabolismo celular están situadas en el interior de las células tisulares y en ellas están presentes en concentraciones muy altas. Algunas existen libres en el liquido celular y otras están contenidas en estructuras celulares como mitocondrias y lisosomas. Cuando las enzimas se localizan exclusivamente en un solo sitio, se llaman enzimas uniloculares, como GTP y GLDH en citoplasma y GLDH en mitocondria. Cuando pueden estar localizadas en 2 o mas sitios diferentes se les llama biloculares, como GOT y MDH en citoplasma y mitocondria.

Si una enzima está presente en concentraciones apreciables solo en un órgano, un aumento en el nivel de la enzima apuntaría a la fuente de la enzima y de este modo identificaría la enfermedad o el órgano afectado. Estas enzimas reciben el nombre de ENZIMAS-ORGANO-ESPECIFICAS. Ejemplo de ella se tienen la Fosfatasa ácida presente en glándula prostática.

Debe considerarse que las enzimas celulares o enzimas órgano especificas serán eliminadas de su lugar de origen en una proporción mayor a lo normal, solo cuando se presente daño celular o una alteración de la permeabilidad celular. Además es importante considerar que el aumento de los niveles enzimáticos no siempre debe asociarse a una necrosis celular, ya que existen también daños reversibles o que permiten la elevación de los niveles enzimáticos temporal, por ejemplo en hepatitis aguda, existe una relación directa entre el incremento de la actividad enzimática del suero y la gravedad de una lesión ocurrida. Lo que constituye la base fundamental del diagnostico enzimático.

DESTINO DE LAS ENZIMAS CELULARES.

La salida, distribución y transporte de enzimas en el espacio extracelular son cuestiones investigadas hasta el momento, pero la explicación hasta el momento es la siguiente: Antes de que las enzimas lleguen al plasma sanguíneo, deben pasar la membrana celular. Las enzimas especificas del plasma pueden pasar activamente a través de la membrana celular. Contra un gradiente de concentración en el espacio extracelular por lo que se realiza un trabajo que implica gasto de energía por parte de la célula.

Por el contrario las enzimas inespecíficas del plasma son diseminadas y difundidas en el plasma inespecíficamente, inmediatamente después de su salida se producen modificaciones de la actividad catalítica de las enzimas, la que puede disminuir o aumentar y así mismo sufrir modificaciones en su camino. Cuando existen condiciones patológicas (enfermedades, intoxicaciones), la membrana puede ser lesionada de forma reversible o irreversible. Tras la lesión irreversible de la membrana celular aparece rápidamente la muerte celular. Las células necróticas colaboran, si es que lo hacen en muy escasa medida al aumento de las enzimas en suero; la parte principal procede de células todavía vivas. Normalmente se encuentra en el plasma un nivel de enzimas muy constante, con las oscilaciones que dependen por ejemplo de la edad, peso, etc. La concentración de las enzimas celulares se mantienen la desintegración normal de las células, es decir la destrucción celular fisiológica.



Todas las proteínas están sometidas a transformación constante. Así también las enzimas del organismo vivo se neo forman y transforman continuamente ( por ejemplo la activación del tripsinogeno a tripsina) y finalmente se inactivan y descomponen. Al igual que las restantes proteínas del plasma sanguíneo, se supone que muchas enzimas se desintegran hasta el grado de aminoácido y después se vuelven a utilizar.

METODOLOGIA ENZIMATICA:

La determinación de las actividades enzimáticas en suero o plasma sanguíneo, células sanguíneas, orina o extractos y homogéneos tisulares, constituye actualmente un instrumento muy importante en el diagnostico clínico. Las enzimas altamente purificadas y cristalizadas que se encuentran en el comercio, facilitan la determinación cuantitativa y especifica de metabolitos en líquidos corporales y extractos tisulares.

En esta exposición vamos a describir la teoría que forma base de la ejecución eficaz y óptima de los test enzimáticos en el laboratorio clinico-quimico.

ENZIMAS COMO AYUDA AL DIAGNOSTICO Las actividades de las numerosas enzimas presentes en cada célula corporal se mantienen

a niveles relativamente constantes por un equilibrio entre la síntesis de las enzimas y su degradación . Una pequeña fracción de algunas de las enzimas pasa continuamente a través de las membranas celulares y puede comprobarse en los líquidos corporales. Por ejemplo en el plasma sanguíneo.

En el suero y plasma, las actividades de las enzimas varían sólo en límites relativamente estrechos, incluso en los individuos sanos.

En muchas enfermedades aumenta la cesión enzimática desde las células del órgano enfermo, sea debido a la permeabilidad elevada de la membrana celular, sea por la descomposición más o menos completa de la estructura celular. Alteraciones de las actividades enzimáticas en el plasma (suero) no solo son indicativos de trastornos sino que constituyen además ayudas muy valiosas en el diagnostico diferencial, pronostico y valoración de la eficacia de la terapéutica.

Las determinaciones en plasma o suero y a veces en otros líquidos corporales, pertenecen a la rutina del laboratorio clínico, las determinaciones tisulares (muestras) están confinadas o reservadas al laboratorio especializado.

ENZIMAS COMO REACTIVOS: Hoy en día se encuentra en el comercio gran numero de enzimas cristalizadas o por lo menos altamente purificadas en los test enzimáticos copulados y como catalizadores específicos para la determinación cuantitativa de metabolitos.



PRINCIPIOS DE MEDICION: La porción cuantitativa de enzimas en las proteínas totales del plasma o del suero es tan diminuta, que no puede ser separada y diferenciada con los métodos usuales.

Para medirlas se sirve por ello de su función, su capacidad de catalizar determinadas reacciones químicas. La velocidad de reacción catalizada es la medida de la llamada “actividad enzimática”, que puede ser equiparada en la practica a la cantidad de enzima.

Fundamentalmente, hay 2 caminos para medir una actividad enzimática:

1.- Mediante la determinación del consumo de un substrato transformado en la reacción enzimática, bajo condiciones exactamente definidas y estrictamente controladas.

2.- Mediante la medida dl producto formado en la reacción enzimática (concentración del metabolito).

Cada uno de los 2 caminos permite por su parte 2 procedimientos de medición:

1.- Medida en dos puntos: Reacción parada.

Todos los participantes en la reacción son incubados con el suero conteniendo las enzimas, durante un periodo fijo, al cabo del cual se interrumpe la reacción enzimática midiéndose, ya sea la cantidad de substrato no transformado para el primer caso, en el cual el substrato debe tener una concentración alta, y solo una pequeña parte de este deberá consumirse durante el tiempo de medición.

Para el segundo caso sea la medición del producto formado, y esto va asar posible solo después de una segunda transformación química del producto o substrato a una compuesto coloreado.

2.- Medición continua: Método cinético.

Si en una reacción intervienen las coenzimas NAD o NADP como suministradores o receptores de hidrogeno, se puede seguir la reacción enzimática directamente en el fotómetro, por que tales compuestos absorben la luz u en su estado reducido, pero no en su estado oxidado, se decir después de ceder el H.

Esto se basa en el hecho de que los nicotinamida-adenin-dinucleotidos en forma reducida (NADH y NADPH) absorben la luz con al pico entre 338.5 y 340.5nm, mientras que las formas oxidadas NAD y NADP no muestran absorción entre 300 y 400 nm.

La prueba conteniendo enzimas, se incuba con todos los participantes en la reacción, midiéndose en intervalos de tiempo regulares el cambio de extinción originado por la coenzima que recibe y libera hidrogeno. La velocidad de las variaciones de coenzima es proporcional a la actividad enzimática buscada.

Mediante la “copulación de la reacción con un sistema de deshidrogenasa, el test óptico puede servir también para la medición de reacciones enzimáticas que no son dependientes de nicotinamida-adenin-dinucleotidos.M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 28


Por ejemplo la determinación de la acidad de GOT tenemos que GOT cataliza la reacción. GOT Aspar tato + alfacetoglutarato ---------------- Glutamato + oxalacetato

Para dicha determinación de la actividad con el test óptico, se añaden NADH y un exceso de MDH a la solución reactiva y la reacción prosigue de la manera siguiente:

MD Oxalacetato + NADH + H ---------------- malato + NDH

Por cada mol de aspartato transformado en oxalacetato se forma un mol de NAD, la velocidad de la disminución de extinción es el parámetro de la actividad de GOT. La reacción MDH sirve de reacción indicadora.

Si la reacción enzimática investigada no es posible la copulación con una reacción dependiente de NAD y NADP, se tratara de emplear substratos sintéticos cuyo cambio de extinción puede leerse directamente en el espectro visible (con menor frecuencia en el ultravioleta).

ENZIMAS SERICAS DE INTERES DIAGNOSTICO.

Aunque se han podido identificar más de 50 enzimas en la sangre, algunas no tienen valor

clínico o solo lo poseen en casos especiales, como la ceruloplasmina (degeneración hepatolenticular de Wilson). Las que tienen mayor aplicación y que se determinan rutinariamente en el laboratorio común son las siguientes: Transaminasas, Fosfatasas acida y alcalina, Deshidrogenasa lácticas, Creatinfosfoquinasa, lipasa y amilasa. Generalmente se prefieren las determinaciones hechas en los sueros a las realizadas en plasma, ya que algunos anticoagulantes usados para obtención del plasma interfieren en la actividad enzimática.

Las cuales serán descritas a continuación para estudiar su principal aplicación en la

detección de enfermedades

MARCADORES HEPATICOS:

TRANSAMINASAS

Desde el punto de vista catabólico los aminoácidos (a.a.) constan de dos fracciones : el grupo amino y el resto de la molécula.La perdida del grupo amino se efectúa por : 1) transaminación, 2) desaminación.



1) transaminacion: Es el intercambio que lleva a cabo un a.a. y un alfa cetoacido cambiando el grupo amino por el grupo cetona y viceversa.Las enzimas encargadas de este proceso son las aminotransferasas y por lo general su acción es reversible, tiene como coenzima el fosfato de piridoxal.La transaminación se desarrolla en la siguiente secuencia:

1) El fosfato de piridoxal con el grupo aldehído se une al radical amino del ala con perdida de una molécula de agua y formación de doble enlace.

2) Hay reacomodo del doble enlace .

3) Finalmente por la introducción de una molécula de agua se separa el grupo amino y se forma un grupo cetona.,el piridoxal queda como piridoxamina.En la segunda fase de reacción el fosfato de piridoxamina se une a un cetoácido cediendo una molécula de agua, se reacomoda el doble enlace con la introducción de una molécula de agua, el radical amino queda en el ácido y se reconstruye el fosfato de piridoxal.

Hay dos transaminasas cuya elevación sanguínea se correlaciona con la clínica de diagnostico, pronostico y evolución del padecimiento.

TRANSAMINASA GLUTAMICA OXALACETICA ( TGO).E n la actualidad se le denomina como aspartato aminotransferasa; cambia de manera reversible el grupo amino del Glutamato al oxalacetato para dejar alfa cetoglutarato y aspartato.

Su elevación sanguínea se encuentra en casos de inflamación del hígado o en un infarto del miocardio.

TRANSAMINASA GLUTAMICA PIRUVICA (TGP).

alanina amino transferasa: por transaminación reversible toma Glutamato y oxalacetato para dejar alfa cetoglutarato y aspartato.

Su elevación en la sangre indica el mismo tipo de lesiones que el anterior. Estas dos enzimas no son especificas de algún tejido por lo que sirve poco en el diagnostico, pero sirve mucho en el pronostico para controlar la evolución del padecimiento.Los ala que sufren transaminación son: alanina,arginina,aspartato,cisteina,fenilalanina,glutamato,lisina,triptofano,tirosina y vallina.

TRANSAMINASAS. TGO (AST) TGP (ALT)

Son enzimas representadas por proteínas simples, conjugadas y sintetizadas por células de diferentes tejidos: Hepatocito, Miocardio, Renal, Nervioso y Musculo estriado. Las cantidades de estas enzimas son pequeñas.



En el suero hay mas TGO que TGP . En el hepatocito la top se encuentra en el citoplasma y la tugo se encuentra en el citoplasma y mitocondrias.TGP:Se indica en todo proceso inflamatorio necrótico del hígado principalmente, es empleada para descartar hepatitis viral activa.Esta enzima tiene una concentración muy elevada en el hígado mientras que en el corazón, musculo y riñón estas concentraciones son relativamente vagas.Es una enzima citoplasmática del hepatocito, que se libera fácilmente cuando existe una alteración celular. Su elevada manifestación en la ictericia de origen viral. Y su aumento ligeramente en el infarto del miocardio e intensamente se predomina la estasis hepática por insuficiencia cardiaca.

VALORES NORMAL ES: Adultos: 7 a 56 U/LNiños: 10 a 35 U/LNeonatos: 6 a 50 U/LLos valores son ligeramente mayores en varones y en negros; en el recién nacido se encuentra mas elevada debido a la mayor permeabilidad del hepatocito.Los valores bajos: Corresponden a la baja nutrición con piridoxina (vitamina B6).También en la mujer que toma anticonceptivo y en paciente que se les practica hemodiálisis.Esta prueba se utiliza para diagnosticar hepatopatías y vigilar la evolución del tratamiento del hepatitis, cirrosis pos necrótica activa y los efectos del tratamiento.

SIGNIFICADO CLINICO: (elevación moderada o alta)La TGP ayuda a distinguir entre ictericia hemolítica y ictericia producida por problemas hepáticos.Enfermedades que causan elevación:*Enfermedades Hepatocelular.*Cirrosis activa (elevación leve)*Tumor hepático metastasico (elevación leve).*Ictericia obstructiva biliar (elevación moderada)*Hepatitis viral(30 a 50 veces mayor que lo normal).*Infarto al miocardio.*Pancreatitis(elevación leve).*Quemaduras graves.

TGO: Esta presente en la epidermis de la piel, miocardio, musculo esquelético estriado. páncreas, riñones, cerebro, hígado, bazo y pulmones. Los G.R. contienen unas diez veces más TGO que en el suero.Esta enzima es liberada en la circulación cuando hay lesión o muerte celular. Cualquier enfermedad que provoque cambios metabólicos, provoca aumento de la TGO.

VALORES NORMALES: Edad.:0 a5 días=35 140 U/L;6 dias-3años:20 a60 U/L;3 a 6 años de 15 a20 U/L; DE 6 A 12 años: 10 a 50 U/L;12 a18 años; de 10 a40 U/L.;Adultos: 5 a40 U/L.

SIGNIFICADO CLINICO: La TGO se utiliza para diagnosticar enfermedades cardiacas y hepáticas .ENFERMEDADES:

Infarto al miocardio.M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 31


Hepatitis aguda y crónica. Mononucleosis infecciosa. Traumatismo o radiación del musculo esquelético. Dermatofitosis. Gangrena.

NOTA: Todas estas causan elevación de la TGO.

ENFERMEDADES:*Hiperazohemia.*Diálisis renal crónica.*Ligeramente durante el embarazo.

NOTA: Todas estas causan disminución de la TGO.

FOSFATASAS:

A las fosfatasas que se activan mejor a un pH de 9- 11 se les llama alcalinas. Los huesos son ricos en ellos por que abundan en los osteoblastos. Normalmente la fosfatasa alcalina total en suero consiste de isoenzimas de origen hepático, ósea, y en algunos individuos de intestino. Elevaciones fisiológicas de fosfatasa alcalina se observan en la infancia y en tercer trimestre del embarazo. En esta última es a expensas de la isoenzimas placentaria.

Esta enzima cataliza la hidrólisis de monoestéres del ácido. Fosfórico; sus valores normales por litro en suero son de 15 – 69 unidades internacionales ( U.I ) la cifra de 100 unidades se aceptan como máximo normal del incremento y en la etapa final del embarazo.

La principal utilidad clínica de esta prueba reside en el estudio de los problemas hepáticos, porque la fosfatasa alcalina se eleva mucho ( 100 – 400 U.I ) en los procesos obstructivos de las vías biliares ( litiasis, tumores ) y en las lesiones ocupantes del espacio de la glándula ( carcinoma hepático primario o secundario, abscesos ); en cambio en las hepatitis y en las cirrosis, y la elevación es moderada ( 70 – 100 U:I ).

No se conoce la razón del ascenso de ésta enzima en los problemas hepatobiliares; es posible que exista una mayor formación de fosfatasa alcalina por los hepatocitos o las células de los canalículos biliares junto con un obstáculo a la excreción.Sin embargo, se ha visto que las cifras no se elevan en la atresia congénita de las vías biliares extrahepáticas.



También se observan elevación importante en todas las lesiones que se acompañan de actividad osteoblástica: osteítis deformante, raquitismo, osteomalacia, hipoparatiroidismo, metástasis de carcinomas. En la consolidación de fracturas, el ascenso es moderado.

Ejemplo donde la fosfatasa alcalina es normal es en una enfermedad ósea generalizada como el mieloma múltiple

FOSFATASA ÁCIDA:-

SIGNIFICACIÓN CLÍNICA:-

Las fosfatasas ácidas se encuentra presente en casi todos los tejidos del organismo, siendo particularmente altas las cantidades de estas enzimas en próstata, estomago, hígado, músculo, bazo, y eritrocitos y plaquetas. Las distintas isoenzimas se diferencian entre si por su pH óptimo, P.M. , y requerimiento de activadores e inhibidores. La fosfatasa ácida prostática (FacP ) constituye un valiosos auxiliar en el diagnóstico de cáncer prostático pero en etapas avanzadas, cuando el tumor ha hecho metástasis, una de las formas neoplásicas de mayor mortalidad, por lo cual en si no ha sido utilizada con prueba oportuna para dicho diagnóstico. En este sentido, la determinación cinética de FacP usando x-naftil fosfato como sustrato ha mostrado sensibilidad y especificidad comparable a las técnicas radioinmunológicas, con semejante poder discriminatorio y evidente ventajas de orden práctico.

COLINESTERASA

la Colinesterasa se origina en el hígado y cundo existe alteración hepática, su concentración disminuye en relación directa con los hepatocitos alterados. existen dos tipos : la Colinesterasa verdadera o acetilcolinesterasa, cuya función es hidrolizar la acetilcolina en la placa motora principal. se encuentra principalmente dentro de los eritrocitos y en las terminaciones nerviosas de los nervios colinérgicos. es capaz de producir crisis de apnea postanestésica, cuando hay deficiencia de esta y metabolismo insuficiente de la succinil colina. frecuencia 1/1500 pacientes . la otra es la Colinesterasa del suero o plasma , conocida como pseudocolinesterasa que esta influenciada por los insecticidas especialmente fosforados. su deficiencia inhibe la actividad de la Colinesterasa del suero y desencadena transitoriamente trastornos visuales con obnubilación mental, por lo que es de importancia en pilotos fumigadores.

USOSDe screen en el preoperatorio de pacientes con sensibilidad a los anestésicos donde la

succinil colina no despolariza los relajantes musculares y origina crisis de apnea . en los pilotos fumigadores que emplean insecticidas a base de fosforo o carbonato. para valorar el daño del hepatocito en hepatitis viral y atrofia aguda, donde sus niveles son tanto más bajos cuanta mayor sea la alteración hepática .

RANGOS NORMALES son variables según el método empleado. con el sistema cinético con butiriltiocolina como

substrato, las cifras normales fluctúan entre 3200 a 9000 unidades internacionales.



INTERPRETACION las pacientes que toman estrógenos o contraceptivos bajan sus niveles. la Colinesterasa

verdadera es estable en el medio ambiente hasta 80 días, se debe mantener en congelador hasta el momento de procesarla.

PREPARACION DEL PACIENTE no se requiere ninguna preparación TOMA DE MUESTRA no es necesario estar en ayunas y se puede emplear el suero o plasma usando anticoagulante edta

VALOR CLINICOde utilidad en pilotos fumigadores y en anestesia

GAMMA-GLUTAMILTRANSFERASA

Es una enzima microsomal que regula el transporte de aminoácidos a través de la membrana celular, catalizando la transferencia de un grupo glutamilo desde el glutatión a aminoácidos libres. Aunque se encuentra en la mayoría de los órganos corporales con la excepción del músculo, la actividad plasmática se atribuye fundamentalmente a la isoenzima hepática. Puede estar implicada en el transporte de péptidos a través de las membranas celulares como péptidos gamma-glutamilo. Las gammaglutamil-transferasa tiene una mala especificidad para las enfermedades hepáticas e incluso en un paciente con ictericia ayuda poco a la información obtenida de la medida de la AST y FAL.

Sin embargo, su medida puede ser útil en dos circunstancias particulares. Primero, cuando el origen de una FAL sérica elevada es dudoso, una elevación concomitante en la gamma-glutamiltransferasa sugiere que la FAL es de origen hepático. En segundo lugar se refiere al área controvertida de la relación de la gamma-glutamiltransferasa con el consumo crónico de alcohol. La gamma-glutamiltransferasa puede elevarse en pacientes con alcoholismo crónico debido a la inducción enzimática por el alcohol y al daño hepático. La gamma-glutamiltransferasa se eleva más en alcohólicos con enfermedad hepática y existe una tendencia a que los niveles se mantengan altos después de la abstinencia.



Contrariamente, en pacientes alcohólicos sin enfermedad hepática, aproximadamente la mitad tienen una gamma-glutamiltransferasa elevada y generalmente vuelve a lo normal después de 8 semanas de abstinencia.

El aumento de la gamma-glutamiltransferasa no se relaciona ni con la cantidad de alcohol consumido ni con la duración de su consumo. De esto se deduce la escasa eficiencia de la gamma-glutamiltransferasa como rastreo en poblaciones con consumo excesivo de alcohol. Se observan resultados falsos positivos en los que toman fármacos inductores de la enzima y resultados falsos negativos en los que no tienen enfermedad hepática. Sin embargo, el hallazgo de una gamma-glutamiltransferasa muy elevada, más de 5 veces el límite superior de referencia, es una buena razón para indagar acerca de un posible abuso de alcohol. La gamma-glutamiltransferasa sigue manteniéndose como la mejor de las pruebas de detección precoz de laboratorio y, dependiendo de la población estudiada, la sensibilidad es el orden de un 50% y la especificidad de un 85%.

La gamma-glutamiltransferasa puede detectarse en suero en 3 formas enzimáticas principales, aunque estas determinaciones no suelen realizarse rutinariamente. La forma de elevado peso molecular aparece en suero normal así como en la obstrucción biliar y más frecuentemente en la infiltración maligna del hígado. Una forma de peso molecular intermedio consta de dos fracciones, la más importante se detecta en enfermedades hepáticas y la otra se encuentra en la obstrucción biliar. La tercera forma es un componente de bajo peso molecular de importancia desconocida. En nuestra experiencia, la determinación de estas fracciones carece de la suficiente sensibilidad y especificidad como para que se introduzcan en las pruebas de rutina de los laboratorios.

MARCADORES PANCREATICOS:

LIPASA:ES UNA ENZIMA QUE HIDROLIZA LOS TRIGLICERIDOS EMULSIFICADOS. Las cadenas de ésteres de los carbonos 1 y 3 del glicerol son preferentemente divididos, liberando dos moles de cadenas largas de ácidos grasos y 1 mol de 2-acilmonoglicérido por mol de triglicérido.

El páncreas es el principal órgano productor de lipasa la cual es secretada en el jugo pancreático junto con otras enzimas digestivas. Algunas lipasas se encuentran en mucosa gástrica e intestinal.

Normalmente el suero contiene baja actividad de lipasa sérica se eleva rápidamente en pancreatitis aguda y permanece elevada por un periodo más largo de tiempo que la amilasa.

ALFA AMILASA.

En el humano la alfa amilasa es una enzima que rompe los enlaces alfa 1-4 glucosídicos presentes en las cadenas de almidón, rompiéndolo en varias unidades. El producto final es una mezcla de glucosa, maltosa y dextrinas.



La alfa amilasa es excretada por las glándulas salivales y pancreáticas en sus respectivos jugos los cuales entran al tracto gastrointestinal. Esta enzima es importante para la digestión e ingestión del almidón ; pero la amilasa del páncreas juega un papel más importante ya que la amilasa de la saliva es inactiva en las condiciones ácidas que prevalecen en el estomago.

La alfa amilasa en sangre es excretada por el riñón y depurada renalmente con una estimación de 1-3 mL por minuto.

Los valores normales son generalmente consideradas entre 60 y 150 Unidades Somogy; valores normales de alfa amilasa en orina son de 35 a 260 unidades por hora.

La elevación de la alfa amilasa en suero ocurre por pancreatitis aguda y otras condiciones caracterizadas por edema e inflamación del páncreas, por incremento en la presión interna. Otras condiciones en las que la elevación ha sido reportada incluye trauma cerebral, embarazo ectópico, ruptura esplénica, carcinoma broncogénico y neumonía.

MARCADORES CARDIACOS

Dentro de los marcadores cardiacos tenemos a las enzimas que principalmente se encuentran en el musculo cardíaco y por lo cual apuntan hacia dicho órgano como son:

DESHIDROGENASA LACTICA (LDH)

Se encuentra en todos los tejidos; la diferencia entre uno y otro tejido es la proporción de LDH (isoenzimas). Los glóbulos rojos y blancos contienen grandes cantidades de esta enzima, así como la piel, músculo cardiaco, riñón e hígado. Reacción que cataliza:

CHCOCOOH + NAD|-H2 CH3CHOHCOOH + NAD

La LDH es un tetrámero compuesto por 2 cadenas de polipéptidos diferentes que se han llamado H y M. La combinación de estas dos cadenas da lugar a diferentes isoenzimas identificadas por electroforesis en gel de agar o acetato de celulosa:

LD 1 (H4) LD2 (H3M1) LD3 (H2M2) LD4 (HM3) LD5 (M4)M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 36


Una isoenzima contiene 4 de estas unidades cada una con un PM vecino de 35 000. LD1 y LD2 se encuentran en concentraciones elevadas en el músculo cardiaco, los glóbulos rojos y la corteza renal. LD5 se encuentra en concentraciones máximas en músculo esquelético, hígado, íleon y piel. Una sexta isoenzima la LDH, que se encuentra en el testículo humano después de la pubertad, posee otro tipo de subunidad monomérica; su estrecha afinidad con el grupo LDH del suero se traduce por la capacidad de la subunidad monomérica H y M de combinarse con las de la variedad testicular de LDH, formándose una nueva serie de tetrámeros , con propiedades distintas respecto a la electroforesis y otras características.

En el infarto agudo de miocardio la elevación de la LDH puede ser hasta 10 veces límite

superior normal, éste se inicia aproximadamente 12-24 hrs tras el inicio del dolor pectoral, y alcanza un máximo a las 48-72 hrs. La LDH se encuentra en la mayoría de los tejidos, lo que reduce la utilidad de su medida para el diagnóstico de IM. La medida de las isoenzimas de LDH puede aumentar la especificidad de las determinaciones de LDH.

Límites de valores normales:

Con el método colorimétrico midiendo la reacción antes señalada son normales de 200 a 600 u/ml. La reacción se vigila a través de la disminución de la absorbancia a 340 nm por transformación de HAD.H2 en NAD. En el método colorimétrico los valores dependen de la técnica empleada. Cuando se mide la desaparición de Piruvato, a través de la disminución de formación de hidracina coloreada con 2,4-dinitrofenilhidracina, los límites normales son de 100-350 U/ml.En niños de menos de 1 semana de edad pueden alcanzar 1800U/ml.

Significado Clínico: Por la ubicuidad de la LDH en tejidos y glóbulos rojos , es dudoso su valor clínico, y en caso que los resultados sean altos indica que el paciente presenta una enfermedad activa, como podría deducirse de una sedimentación acelerada. Las mediciones simultáneas de TGO, LDH y bilirrubina han sido útiles para distinguir un infarto pulmonar de uno al miocardio; en los 1ros TGO es normal , pero se elevan LDH y Bilirrubina; en los 2dos TGO y LDH son elevados pero Bilirrubina se mantiene normal. La medición de los niveles de LDH y de Fosfatasa alcalina en orina permite ciertos diagnósticos diferenciales del riñón.

® LDH elevado en orina Pielonefritis crónica, glomerulonefritis aguda, nefritis luposa, glomeruloesclerosis

diabética.

® LDH elevado en orina y Fosfatasa alcalina Normal Carcinoma de la vejiga, pielonefritis crónica, hipertensión maligna y glomerulonefritis

esclerosante.M.C. CONSUELO CHANG RUEDA 37


® LDH y Fosfatasa alcalina elevadas en orinaCáncer de riñón y próstata, adenomas y carcinomas suprarrenales.

Medición de la LDH en Suero:

Incubar 0.1 ml de una dilución de suero1 a 6 con 1.0 ml de substrato de Piruvato amortiguado, en un frasco que contiene 1.0 mg de NADH muy puro, durante 30' a 37° C.

Añadir 1.0 ml de 2,4-dinitrofenilhidracina, y dejar 20 ' a T ambiente. Añadir 10 ml de Na OH 0.40 N. A los 5' leer en la longitud de onda.

Creatinfosfoquinasa (CPK) .

La creatina quinasa (CK) es una enzima intramuscular constituida por una subunidad M (músculo) y otra subunidad B (cerebro)que sé combinan dando lugar a isoenzimas:

1. CK-MM (MUSCULAR)2. CK-BB (CEREBRAL)3. CK-MB (MIOCARDICA)

Dentro del conjunto de actividades enzimáticas que pueden valorarse en la enfermedad muscular, el indicador más sensible es la CK. Esta es una enzima que requiere de Mg, debido a esto no debe utilizarse como anticoagulante citrato porque sobrepone la quelación de Mg y se inhibe la actividad de la enzima.En un paciente con IM hay aumento de CK de 6-8 hrs, máximo en 15 y vuelve a la normalidad en 3-5 días. Con el daño muscular aumenta la actividad de CK total y una proporción es del tipo CK-MB (menos del 6%). CK muy elevada con una fracción mayor del 6% de CK-MB indica daño al miocardio.

Causas de elevación de CK: Diferentes tipos de operaciones Administración intramuscular de drogas Tos violenta Ejercicio (cuando se hace a p atmosféricas elevadas) Consumo de cantidades elevadas de alcohol Convulsiones Infarto cerebral o hemorragia Necrosis o regeneración del músculoRecomendaciones :

Conservar los sueros para análisis de CK a 4°C o congelarlos y analizarlos a los pocos días. Evitar muestras hemolizadas. Protegerlas de la luz azul.



La CK-MB está confinada principalmente al corazón (representa 6-20% de la actividad total) pero existen cantidades medibles en el músculo esquelético.

TROPONINASMuchos estudios se han centrado en la utilización de la determinación de troponina T

(TnT) y troponina I(TnI)para el diagnostico de IM. La troponina es un complejo de tres proteínas que regulan la interacción de la miosina con la actina en el proceso contráctil:1)troponina T (39 Kda),responsablemente de la unión del complejo a la tropomiosina,2)troponina1(26.5Kda) un inhibidor de la actomiosina ATPasa que bloquea la contracción en ausencia de calcio y 3) troponina C (18 Kda),que une calcio en el inicio de la contracción La troponina C tiene solo una forma y se encuentra en los músculos mientras que la Ty la I tiene cada una isoforma de músculos esquelético y cardiaco.

Aunque la mayoría de la TnT se encuentran asociadas con la tropomiosina como una proteína miofibrilar, también se encuentra en un conjunto citológico. Esta distribución se refleja en una liberación bifásica de la TnT del músculo cardiaco dañado esto se explica por una liberación inicial como consecuencias del daño de membrana durante la isquemia grave (iniciándose a las 3 horas) y continua una lenta disociación y degradación de miofilamentos , lo que conduce a una liberación continua durante 3-5 días. Debido a su liberación relativamente rápida , tras la mioglóbina y antes de la CK-MB, se le ha dado un papel de marcador precoz de IM, y debido a su liberación prolongada también se utiliza para suministrar un diagnostico tardío de IM. Los datos actuales sugieren que es probable que realice con la CK-MB como marcador de IM con una eficiencia diagnostica de un 98% en el diagnostico de IM para la TnT ( con un punto de corte de 0.2ug/L y un tiempo de 12-24Horas) comparado con la CK-MB(masa) con una eficiencia del 99% (a las 8 horas ). El aumento de la TnT en el IM es mucho mayor que el de lo normal . El rango de referencia es de 0 a 0.1 ng/ml. Como se a indicado, el incremento es prolongado , lo que permite la detección de IM incluso a los 10 días del inicio de los síntomas.Se ha indicado que debido a la naturaleza de su liberación desde la célula miociticas, puede ser útil en la detección de microinfartos y , de forma similar a la mioglóbina ,puede utilizarse para valorar el éxito de la repercusión .Tras el inicio de los síntomas , en las 4 primeras horas , aumenta de forma muy notable la concentración de TnT ; a continuación , sigue una caída que se corresponde con la repercusión y luego aumenta otra vez aproximadamente durante 4 días mas , correspondiendo a la liberación de troponina ligada a los miocito necróticos.También se ha estudiado su utilización en la angina inestable, que es una isquemia miocardio grave y transitoria, ocasionada por una estenosis coronaria rápida y progresiva y que se puede conducir a un IM completo . La TnT se utiliza en este marco para determinar los pacientes que probablemente progresan a IM . sin embargo , al igual que la CK-MB, la TnT puede carecer de especificidad cuando coexiste daño del músculo esquelético , debido a que los anticuerpos frente a la TnT cardiaca también presentan reacciones cruzadas con la TnT del músculo esquelético , y es del orden de un 0.5 a un 2% . por otra parte , en TnT cardiaca no aumenta o lo hace muy ligeramente .De forma similar a la TnT , la TnI se libera durante un periodo de tiempo mayor que la CK-MB y , por lo tanto, puede utilizarse de forma análoga . estudios recientes muestra que pueden tener incluso mayor especificad de la TnT cardiaca ya que se ha indicado que es normal , por ejemplo, la CK total llega a 74000UL y la CK-MB es de 280 µg /L, como ocurre en la Rabdomiolicis, por



lo demás, sus características son similares a las de la TnT . la CK total , la CK-MB y la mioglobina aumenta mucho en la sangre de los maratonianos tras la carrera , a pesar de no haber ninguna lesion miocardio ; por el contrario , la concentración de TnI no aumenta , esta prueba puede resultar muy útil para el diagnostico de un IM en deportistas tras realizar un esfuerzo físico intenso.La miosina , otra proteína miofibrilar, interacciona reversiblemente con la actina durante la contracción muscular , esta constituida por una cadena pesada con dos cadenas ligeras en cada extremo ,existen dos tipos de cadenas , cadenas ligeras :las cadenas ligeras de tipo 1, que tienen un peso molecular de 29 Kda y las cadenas ligeras de tipo 2 que tienen un peso molecular relativo de 24 Kda y las cadenas ligeras de tipo 1 no son detectables en sangre de personas sanas . al igual que la troponina , las cadenas ligeras de miosina se liberan de forma continua entre las 3 y las 6 horas siguientes al infarto .La concentración máxima se alcanza entre los días 2 y 4, en general la concentración de la cadenas pesadas puede aumentar ligeramente tras un esfuerzo físico intenso. Después de un IM las cadenas pesadas tardan en parecer en la sangre periférica , entre 1 y 4 días tras el inicio de los síntomas . El máximo de concentración se alcanza tras unos 6 días . La vuelta a la normalidad no se observa hasta 3-4 semanas después. Uno de los aspectos positivos de las cadenas de miosina es la relativa insensibilidad de la reperfucion de la zona infartada en caso de re canalización de la arteria obstruida , por eso , las cadenas ligeras de miosina pueden ser muy útiles para la determinación de la magnitud del infarto.

La Troponina I es la proteína inhibitoria del complejo regulador Troponina - tropomiosina que confiere sensibilidad al Calcio al músculo estriado, es por eso la regulación de la interacción de actina y miosina en el músculo estriado. Se prefiere el uso de Troponina I en el diagnóstico de infarto agudo al miocardio.

B I B L I O G R A F I A

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tema ii enzimas celulares del suero-010

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