técnicas de identificación bacteriana

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  • 7/25/2019 Tcnicas de Identificacin Bacteriana

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    Clasificacin e

    Identificacinbacteriana

    Tema 3.

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    Clasificacin bacteriana

    Tamao

    Morfologa

    Caractersticas de tincin

    En funcin de

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    1.Tamao

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    2.Forma

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    3.Caractersticas de tincin

    Tincin de Gram

    Tincin de Ziehl-Neelsen

    Otras tinciones: Blanco de CalcoflorPanpticoAzul de Lactofenoletc.

    Diferencias constitutivas en la estructura de

    la pared bacteriana

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    Tincin de Gram

    http://www.youtube.com/watch?v=XouOC0gRfyc

    (lugol)

    http://www.youtube.com/watch?v=XouOC0gRfychttp://www.youtube.com/watch?v=XouOC0gRfyc
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    Parsitos y bacterias contienen cidos grasos (c. miclico)

    (Cryptosporidium spp., Micobacterium spp., Nocardia spp.,

    Actinomices spp.) Resisten la decoloracin con alcohol-cido (BAAR)

    Requiere calor

    Tincin de Ziehl-Neelsen

    Aadir fucsina-fenicada (5 min)

    Calentar hasta la emisin de vapores (3-5 min)

    Decolorar con alcohol-cido (1-3 min)

    Aplicar azul de metileno (1 min)

    http://images.google.es/imgres?imgurl=http://www.uvg.edu.gt/dti/profesores/ggini/parasitologia/imagenes_para/img_coccidios_microsporidios/cyclosp1.jpg&imgrefurl=http://www.uvg.edu.gt/dti/profesores/ggini/parasitologia/cyclospora.htm&usg=__5CiylvN10SlsqFmAp_Xh5OrMkCw=&h=317&w=444&sz=60&hl=es&start=3&um=1&tbnid=3K7YBYCty9BO1M:&tbnh=91&tbnw=127&prev=/images%3Fq%3Dtincion%2Bde%2Bziehl%2Bneelsen%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1http://images.google.es/imgres?imgurl=http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/7/71/Mycobacterium_tuberculosis_Ziehl-Neelsen_stain_02.jpg&imgrefurl=http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Mycobacterium_tuberculosis_Ziehl-Neelsen_stain_02.jpg&usg=__eyewrBuqPADjIv4KGRkFHuRPqMw=&h=1336&w=2073&sz=1799&hl=es&start=1&um=1&tbnid=cJNxxga91MzSJM:&tbnh=97&tbnw=150&prev=/images%3Fq%3Dtincion%2Bde%2Bziehl%2Bneelsen%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1
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    Identificacin de

    bacterias

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    MUESTRA

    COLONIAEN

    CULTIVO PURO

    MATERIALGENTICO

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    Mtodos fenotpicos

    Pruebas rpidas

    Catalasa

    Coagulasa

    Oxidasa

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    Prueba de la catalasa

    Agua oxigenada diluida + emulsionar colonia bacteriana

    Aparicin de burbujas de oxgeno por la

    accin de la catalasa del m.o. sobre el H2O2

    Negativo

    Positivo

    - La catalasa es una enzima que protege a las clulas frente al perxido

    de hidrgeno producido en el metabolismo del oxgeno

    - Cataliza la formacin de agua y oxgeno a partir del perxido de

    hidrgeno

    Cocos Grampositivos

    H2O2 H2O + O2

    http://images.google.es/imgres?imgurl=http://html.rincondelvago.com/000411743.png&imgrefurl=http://html.rincondelvago.com/diagnostico-medico.html&usg=__Ft4UMULFpmaCuDuRcV6yWA5Qt7U=&h=125&w=189&sz=43&hl=es&start=5&um=1&tbnid=cTK1zyhue-uWeM:&tbnh=68&tbnw=103&prev=/images%3Fq%3Dprueba%2Bde%2Bla%2Bcatalasa%2Ben%2Btubo%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1http://images.google.es/imgres?imgurl=http://html.rincondelvago.com/000411743.png&imgrefurl=http://html.rincondelvago.com/diagnostico-medico.html&usg=__Ft4UMULFpmaCuDuRcV6yWA5Qt7U=&h=125&w=189&sz=43&hl=es&start=5&um=1&tbnid=cTK1zyhue-uWeM:&tbnh=68&tbnw=103&prev=/images%3Fq%3Dprueba%2Bde%2Bla%2Bcatalasa%2Ben%2Btubo%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1http://images.google.es/imgres?imgurl=http://html.rincondelvago.com/000411743.png&imgrefurl=http://html.rincondelvago.com/diagnostico-medico.html&usg=__Ft4UMULFpmaCuDuRcV6yWA5Qt7U=&h=125&w=189&sz=43&hl=es&start=5&um=1&tbnid=cTK1zyhue-uWeM:&tbnh=68&tbnw=103&prev=/images%3Fq%3Dprueba%2Bde%2Bla%2Bcatalasa%2Ben%2Btubo%26hl%3Des%26sa%3DN%26um%3D1
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    Prueba de la coagulasa

    Coagula el plasma por la presencia

    de la enzima plasmocoagulasa

    La coagulasa es una enzima capaz de desnaturalizar la fibrina del plasma

    Se aade una suspensin densa de bacterias a un tubo

    pequea con plasma y se incuba a 37 oC.

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    Bacilos/Cocos Gramnegativos

    Detecta la presencia de citocromo C oxidasa en la cadena de

    trasporte de electrones

    Puede detectarse en el laboratorio utilizando un aceptor de electronesartificial (p-fenilendiamina)

    Prueba de la Oxidasa

    Se utiliza para diferenciar Pseudomonas spp(+)de Enterobacterias (-)

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    Serotipo:-Segn los, antgenospresentes en la superficie celularTambin, segn factores de virulencia, lipopolisacridos en bacterias gram-, presencia de

    exotoxinas, plsmidos, bacterifagos, etc.

    - Permite diferenciar organismos a nivel de subespecie

    - Diferencia subpoblaciones con pruebas serolgicas(Las respuestas inmunitarias del organismo frente a un serotipo de un microorganismo

    (p.e. la gripe) pueden no proteger frente a otro serotipo de la misma especie)

    Otras identificaciones de las bacterias

    Genotipo:contenido gentico fenotipo

    Serogrupo:definidos por el polisacrido capsular(Neisseria meningitidis13 serogrupos)

    http://es.wikipedia.org/wiki/Ant%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Exotoxinahttp://es.wikipedia.org/wiki/Serolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Gripehttp://es.wikipedia.org/wiki/Gripehttp://es.wikipedia.org/wiki/Serolog%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Exotoxinahttp://es.wikipedia.org/wiki/Ant%C3%ADgeno
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    Clasificacin Bacteriana

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    Cocos

    Grampositivos

    Bacilos

    Grampositivos

    BacteriasGrampositivas

    Aerobios

    Anaerobios

    Aerobios

    Anaerobios

    Cocos

    Gramnegativos

    Bacilos

    Gramnegativos

    BacteriasGramnegativas

    Aerobios

    Anaerobios

    Aerobios

    Anaerobios

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    Cocos Grampositivos

    Estafilococos(Staphylococcus spp.)- En ttradas racimos

    - Catalasa positivos

    - 2 clases: Coagulasa negativos: SCN

    Coagulasa positivos: S. aureus

    Estreptococos (Streptococcus spp. / Enterococcus spp)

    - Catalasa negativos

    - En parejas cadenas

    - -hemlisis (alfa-hemlisis), -hemlisis

    (beta-hem.) - hemlisis (no hemlisis)

    http://images.google.es/imgres?imgurl=http://mikroby.blox.pl/resource/Streptococcus.jpg&imgrefurl=http://openumente.blogspot.com/2009/05/reino-monera.html&usg=__p6HsqQHwVoqYW0Sf0HXfcSBm2ho=&h=172&w=203&sz=62&hl=es&start=3&tbnid=5ymyNB_RYZ4qUM:&tbnh=89&tbnw=105&prev=/images%3Fq%3Destreptococos%26gbv%3D2%26hl%3Des
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    Hemlisis

    Capacidad de lisar los hemates mediante la produccin de

    hemolisinas

    -hemlisis /

    hemlisis total-hemlisis /

    No hemlisis

    -hemlisis /

    hemlisis parcial

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    Bacilos Grampositivos

    Segn caractersticas morfolgicas :

    Corineformes ( No esporulados)

    Familia Bacillaceae (Esporulados)

    Esporulados (aerobios o anaerobios)

    No esporulados (aerobios o anaerobios)

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    Cocos Gramnegativos Gnero Neisseria

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    Bacilos Gramnegativos

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    Otras bacterias

    Bacterias cido alcohol resistentes

    Bacterias Gramnegativos curvadas

    Espiroquetas

    Bacterias de crecimiento intracelular obligado

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    Otras bacterias

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    Otras bacterias