siembra de microroganismos agar

7/18/2019 Siembra de Microroganismos AGAR

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I. INTRODUCCION

El cultivo es el procedimiento mediante el cual se promueve el crecimiento delos microorganismos, esto se logra proporcionándoles las condicionesambientales adecuadas, por lo cual es necesario conocer el efecto del medioambiente sobre el crecimiento.

El medio debe contener todos los nutrientes necesarios y debe controlarsecuidadosamente factores tales como el pH, la temperatura y la aireación. Todaslas sustancias químicas que un organismo requiere de su medio ambiente paracrecer y reproducirse se denominan nutrientes. Muchos medios de cultivo pueden obtenerse del comercio en forma

deshidratada, solo hay que aadirles agua, distribuirlos y esterili!arlos. "lgunosmedios de agar frecuentemente utili!ados se hallan en el comercio en placas otubos inclinados en material de vidrio o de plástico desechable.Este medio se basa en la fórmula original de Mac#on$ey a base de salesbiliares, ro%o neutro y lactosa para el aislamiento de bacilos ent&ricos 'ram(negativos. El medio ha sufrido m)ltiples variaciones en el transcurso deltiempo, ya sea por la adición de otros ingredientes o por la modificación de lasproporciones entre ellos.

El agar Mac#on$ey es un tipo de gelatina que se produce de unas algas ro%as.*e usa ampliamente en microbiología por sus propiedades al utili!arse para el

aislamiento y cultivo de bacilos 'ram negativos de fácil desarrollo, aerobios yanaerobios facultativos. "dicionalmente sirve como selector de bacterias lactosa filas en muestrasclínicas, de agua y alimentos. +a ra!ón de la selección es que de bacterias'ram positivas no admiten lactosa que se encuentran en el medio. or fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Estoproduce un vira%e del color del indicador de pH -ro%o neutro, la absorción en lascolonias, y la precipitación de las sales biliares.

II.OBJETIVOS /econocer un agar sólido. "prender la forma correcta para sembrar en un medio de cultivo sólido. "prender que tipos de microorganismos pueden desarrollarse en un

medio de cultivo sólido. 0eterminar la funcionalidad del medio de cultivo con microorganismos

típicos.



III.MARCO TEORICO (generalidades):

AGAR

"gar("gar1 *ustancia mucilaginosa que se e2trae de algunas algas ro%as o/odofíceas, frecuentes en el 3c&ano "tlántico, acífico e 4ndico. Es unasustancia amorfa. *e emplea como medio de cultivo en bacteriología, comoapresto de sedas, como sustituto de la gelatina, etc.

+a forma seca del "gar("gar se conoce de mediados del siglo 56777, cuando un %apon&s descubrió, accidentalmente, la manera de purificarlo y secarlo. 8uellevado de #hina a Europa y traído a "m&rica a mediados del siglo 575, parautili!arse, principalmente, como substituto de la gelatina en la confección depostres gelatinosos.

9uímicamente, el "gar("gar es una me!clacomple%a de sales de polisacáridos,fundamentalmente, galactósidos. +asgrandes mol&culas que lo constituyendeterminan sus cualidades sobresalientes,como coloides y espesantes, que lo hanhecho hasta ahora insustituible.

"demás de los polisacáridos, el "gar("gar

contiene numerosos cationes asociados,tales como sodio, potasio, calcio, magnesio,etc. 0e los cuales no está, claramente,establecida su influencia sobre laspropiedades de este producto.

/eferente a las propiedades y contenidos del "gar("gar, básicamente,dependen de la materia prima empleada, procedencia geográfica, &poca decosecha y madure! del alga.

9uímicamente, el agar es un polímero de subunidades de galactosa: enrealidad es una me!cla heterog&nea de dos clases de polisacáridos1agaropectina y agarosa. "unque ambas clases de polisacáridos comparten elmismo esqueleto de galactosa, la agaropectina está modificada con gruposácidos, tales como sulfato y piruvato. +os polisacáridos de agar sirven como laestructura primaria de la pared celular de las algas. 0isuelto en agua caliente yenfriado se vuelve gelatinoso. *u uso principal es como medio de cultivo enmicrobiología, otros usos son como la2ante, espesante para sopas, gelatinasvegetales, helados y algunos postres y como agente aclarador de la cerve!a.



PLACA DE AGAR:

;na placa de agar es una placa de etri que contiene un medio de cultivo-com)nmente agar más nutrientes usada en microbiología para cultivar microorganismos o pequeas plantas como la briofita hyscomitrella patens.

*e pueden agregar compuestos como antibióticos, para hacer el medioselectivo.

"l colocar microorganismosindividualmente en la placacrecerán en colonias individuales.#ada r&plica del microorganismo esseguramente id&nticogen&ticamente a su antecesor -e2cepto por la ba%a e inevitabletasa de mutación. or lo tanto, laplaca se puede usar para estimar laconcentración de microorganismosen un cultivo o una solución de esecultivo, usando un contador de colonias. Tambi&n se puede usar para generar cultivo s gen&ticamente puros a partir de un cultivo mi2to, con diferentesespecies de microorganismos, usando una t&cnica llamada <estriado=. En estat&cnica, una gota del cultivo es tomada de la muestra, mediante un instrumentollamado <asa bacteriológica=, est&ril: despu&s se distribuye la muestra sobre la

superficie del medio de cultivo dibu%ando estrías -de ahí el nombre, de%ando deesta forma un gran n)mero de microorganismos al principio y una ba%a cantidadal final de colonias aisladas. +uego, las colonias que crecieron puedenremoverse individualmente con otra asa est&ril, y así determinar a qu& especiecorresponde cada colonia individual. Este m&todo es además, usadoprácticamente en todos los laboratorios de microbiología para hacer cualquier cultivo bacteriológico.

TIPOS:

#omo otros medios de cultivo, las formulaciones de agar usadas en placespueden ser clasificadas como definidos e indefinidos. ;n medio definido esaquel creado a partir de sustancias químicas individuales, requeridasespecíficamente por el microorganismo , así que la composición molecular e2acta es conocida: mientras que un medio indefinido esta hecho de productosnaturales, donde la composición e2acta es desconocida.

+as placas de agar pueden ser elaboradas como no selectivas, donde puedecrecer cualquier organismo sin especificación, o pueden ser selectivas, dondesolo crecen organismos específicos.> Esta especificidad, puede ser por un

requerimiento nutricional -por e%emplo lactosa como )nica fuente de carbono,permitiendo crecer de esta manera solo microorganismo capaces de



metaboli!ar lactosa, o agregando antibióticos u otras sustancias con el fin devolver al medio selectivo. Esto se relaciona con las definiciones de mediosdefinidos e indefinidos: los medios indefinidos hechos de productos naturales,contienen una gran variedad de mol&culas orgánicas, y es más permisivo ensentido que provee de nutrientes a una amplia gama de microorganismos,mientras que los medios definidos pueden ser precisamente elaborados paraseleccionar microorganismos con propiedades específicas. +as placas e agar,tambi&n act)an como indicadores, donde los organismos no son seleccionadosen base al crecimiento, sino por un cambio de color en algunas colonias,generalmente causada por la acción de una en!ima del microorganismo, sobreun componente del medio. "lgunos tipos de places de agar utili!adas son1

Agar sangre:

#ontiene sangre de mamíferos -generalmente ove%a, cone%o, humanos a unaconcentración de ? a @AB. El agar sangre, es un medio enriquecido,diferencial, usado para aislar microorganismos fastidiosos y detectar actividadhemolítica. +a C(hemolisis, se manifiesta como una lisis y digestión completa delos eritrocitos que rodean la colonia, por e%emplo algunas bacterias del g&nero*treptococcus. +a D(hemolisis, aparece solo como lisis parcial -los eritrocitos,no son lisados completamente o la digestión no fue completa, por tanto lahemoglobina aparece como una halo verdoso alrededor de la colonia. #ontienee2tracto de carne, triptona, cloruro de sodio y agar.

Agar c!c!la"e

Es un tipo de agar sangre, donde las c&lulas sanguíneas han sido lisadas por calentamiento a ? F#. El agar chocolate se usa para cultivo de bacteriasrespiratorias fastidiosas como por e%emplo Haemophilus influen!ae. Gocontiene chocolate, solo es llamado así por la coloración.

Agar Ta#er$Mar"in

"gar chocolate diseado para aislar Geisseria gonorrhoeae.

Agar TCBS

T#* -Tiosulfato(#itrato(ilis(*acarosa,( agar enriquecido, permite elcrecimiento de todos las especies patógenas del g&nero 6ibrio spp.

Agar C%ED (Agar cis"ina$lac"!sa de&icien"e en elec"r!li"!s)

Es un medio de cultivo diferencial para aislar y contar las bacterias presentesen la orina. 8avorece el crecimiento de los patógenos y contaminantes urinariosaunque, debido a la ausencia de electrolitos, impide la indebida proliferación de

especies de roteus



Agar en"'ric! de e"!en

Este es un medio ideal para el aislamiento selectivo de *almonella y *higella, apartir de heces y alimentos.

Agar McC!ne#

Este medio se utili!a para el aislamiento de bacilos 'ramnegativos de fácildesarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. ermite diferenciar bacterias quefermentan lactosa -+I de las no fermentadoras -+( en muestras clínicas, deagua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae sedesarrollan en el mismo. #ontiene sales biliares y cristal violeta, lo que inhibe elcrecimiento de bacterias 'rampositivas, lo que convierte en un mediodiferencial poco selectivo.

Agar Mani"!l salad!

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utili!ado para el aislamiento ydiferenciación de estafilococos. Es recomendado para el aislamiento deestafilococos patog&nicos a partir de muestras clínicas, alimentos, productoscosm&ticos y otros materiales de importancia sanitaria.

Este medio tambi&n puede utili!arse para el cultivo de especies halófilas de6ibrio, si no se dispone de medios apropiados -T#* Medio, Medio Marino,etc., aunque algunas especies pueden no desarrollar.

Agar M*eller$in"!n

Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la prueba desensibilidad a los antimicrobianos. "demás es )til con el agregado de sangrepara el cultivo y aislamiento de microorganismos nutricionalmente e2igentes.

Agar n*"ri"i+!

Medio de cultivo utili!ado para propósitos generales, para el aislamiento demicroorganismos poco e2igentes en lo que se refiere a requerimientos

nutritivos. *u uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis dealimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Agar ,n-

El agar JnK! permite un diagnostic bacteriológico rápido de *almonella y*higella +as colonias son fácilmente diferenciables de otras enterobacterias.

Agar /enile"il alc!!l

Este agar selecciona especies de *taphylococcus mientras inhibe bacilosgamnegativos como Escherichia coli, *higella, roteus, etc.



Agar R0A

;n agar inespecífico que imita el agua. ;sado para análisis del agua.

Agar Tri1"icasa s!#a (TSA)

T*" es una medio multiuso, producido por la digestión en!imática de soya ycaseína. Es la base de otros tipos de agar, por e%emplo el agar sangre estáhecho de T*" enriquecido con sangre. T*" permite crecer muchas bacteriassemifastidosas incluyendo algunas especies de rucella, #orynebacterium,+isteria, Geisseria, y 6ibrio.

Agar 2il!sa3 %isina3 Des!4ic!la"!

Es utili!ado para el aislamiento y diferenciación de bacilos ent&ricos

'ramnegativos, especialmente del g&nero *higella y rovidencia. Agar ce"ri5ida

Medio utili!ado para el aislamiento selectivo de seudomonas aeruginosa y deotras especies del g&nero seudomonas.

Agar Tinsdale

#ontiene telurito de potasio y puede aislar #orynebacterium diphteriae.?

6ista desde aba%o de una placa etri de agar de *abouraud con una colonia deTrichophyton rubrum var. rodhaini.

Agar gl*c!sad! de Sa6!*ra*d

El "gar glucosado de *abouraud es usado para cultivar hongos y tiene un pHba%o que inhibe el crecimiento de la mayoría de bacterias, además tiene unantibiótico -gentamicina que inhibe específicamente el crecimiento debacterias gramnegativas .

Agar In&*si7n Cere6r! C!ra7n

Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollomicrobiano. +a infusión de cerebro de ternera, la infusión de cora!ón vacuno yla peptona, son la fuente de carbono, nitrógeno, y vitaminas. +a glucosa es elhidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balanceosmótico y el fosfato disódico otorga capacidad buffer.

Agar 1a1a de4"r!sa

Es un medio utili!ado para el cultivo de hongos y levaduras a partir de

muestras de alimentos, derivados de leche y productos cosm&ticos.



Agar e4"rac"! de 5al"a

Tiene un alto contenido de peptona.

o A CONTINUACIÓN, SE CARACTERIZARÁN LOS TIPOS DE MEDIOS

DE CULTIVO SEGÚN SU ESTADO Y COMPOSICIÓN.

ESTADO:

Medi!s s7lid!s: *u proporción de "gar es siempre por encima del @?B. Medi!s se5is7lid!s: *on medios intermedios entre los medios líquidos

y sólidos, su proporción de "gar suele ser suele ser inferior al ?B, perosiempre suele presentar cierta cantidad que le proporcione unaconsistencia semisólida.

Medi!s l89*id!s ! cald!s: Go contiene "gar y su composición -además

de agua suele contener al menos una fuente de carbono, salesminerales, y a veces seg)n las características de medio, factores decrecimiento, vitaminas, peptonas, aminoácidos, entre otros.

COMPOSICIÓN:

Medi!s sin"'"ic!s ! 9*85ica5en"e de&inid!s: +levan fuentes de carbono,

nitrógeno, sales que suplan iones -, L, Mg, 8e, #a, etc., otros elementoscomo estimuladores de crecimiento pero siempre a concentraciones conocidas.

Medi!s c!51le!s ! de c!51!sici7n inde&inida: Estos medios llevaningredientes como e2tracto de levadura, peptona, infusión de cerebro, e2tractode carne, etc. que contienen nutrientes en abundancia pero sin saber cone2actitud la composición cualitativa ni cuantitativa de estos nutrientes.

Medi!s de enri9*eci5ien"!: *on medios comple%os, normalmente, conaditivos adicionales para favorecer el crecimiento de determinados

microorganismos -particularmente heterótrofos e2igentes. Tales como1adicción de sangre, suero o e2tractos de te%idos de animales y plantas.

Medi!s selec"i+!s: *on aquellos que favorecen por su diseo el crecimientoespecífico de un microorganismo particular o grupo de microorganismos. Es degran utilidad para el aislamiento de microorganismos a partir de una poblaciónmicrobiana mi2ta. E%emplo1 #3 como fuente de carbono es selectivo paraautótrofos, adicionando cristal violeta se inhibe el crecimiento de los 'ram -I,utili!ando maltosa como )nica fuente de carbono sólo crecerán los que usenmaltosa.



Medi!s di&erenciales: *on aquellos destinados a facilitar la discriminación demicroorganismos de una me!cla por sus propiedades diferenciales decrecimiento en dichos medios. E%emplo1 "gar sangre diferencia hemolíticos deno hemolíticos: Mc#on$ey diferencia lactosa -I de lactosa -(.

Medi!s de 5an"eni5ien"!: *uelen ser distintos a los de crecimiento óptimo yaque el crecimiento rápido y prolífico suele ocasionar la muerte rápida de lasc&lulas. or e%emplo1 al aadir glucosa y utili!arla los microorganismosproducen ácidos, acidificándose el medio por lo que es preferible no utili!ar glucosa en los medios de mantenimiento.

IV.MATERIA%ES ; E<UI=OS:

MATERIA%ES ; M>TODOS:

"sa de siembralacas etriMechero

'uantes de láte2Mascarilla quir)rgica'orro quir)rgicoMuestra de #arne "gua destiladarobeta

• olvo para la preparación de agar

Mac#on$ey• alan!a• Espátula

• 8osforo• 7ncubadora



V.M>TODO (1r!cedi5ien"!)

?. AGAR MAC CON@E;:

esar @Agr de agar M"# #3GLEN y diluirlo con @AAml de agua destilada.

6aciar la preparación en una botella esterili!ada, #alentar el agar preparado-%arra. Entibiarlo hasta hacerlo mane%able.



0. =%A<UEADO:

a. render el mechero -llama a!ulb. "brir la placa, llenar hasta las terceras partes con el agar -cerca delmechero luego hacer un movimiento en ocho en la placa y de%ar enfriar -solidifique.

. =RE=ARACIN DE %A MUESTRA:

@. 0e una muestra de hamburguesa, tomar @A g. de muestracon ayuda de un cuchillo y un tenedor. Tomar muestra dediferentes partes de la hamburguesa

. oner la muestra dentro de un pomo gerber est&ril y pesar e2actamente. Hacerlo dentro de la cabina de la balan!a



digital. "adirle A ml de agua hervida fría sobre la muestra ydesmenu!ar con tenedor.

. T>CNICA DE SIEMBRA =OR AGOTAMIENTO:

@. 9uemar el asa al ro%o vivo, enfriar.Tomar la muestra -una película "brir la placa, hacer la estría madre sobrela superficie del medio sólido, hacer estrOas y cerrar.Gota1 de%ar un espacio sin sembrar al centro. Go romper el agar.

9uemar el asa al ro%o vivo, enfriar, abrir laplaca, hacer un grupo de estrías. #errar la placa.

P. "brir la placa y contin)e con las estrías enel tercer lado, cierre la placa.

>. "brir la placa y contin)e con la estría en el cuarto lado, cierre la placa.Envolver cada placa.

?. Empaquetar las > placas %untas en papel $raft y pabilo. /otular.

.

7ncubar a P?F# por >Q horas



VI.RESU%TADOS ; DISCUSIN

+uego de haber reali!ado la siembra de microorganismos en las placas etri,reali!adas en el laboratorio, se llevaron a la Estufa ba%o una temperatura de >?F#durante >Q horas. #uando se fue a ver cada una de las siembras se visuali!ó lassiguientes características de las colonias1



;n dato a resaltar es que las colonias de bacterias presentaron una consistencia secay lisa, factor que permite asegurar que las bacterias que conforman esta coloniaposeen capsula en su estructura, ya que la capsula es característica de las bacteriasque presentan una colonia lisa, además la consistencia lisa es propia de

microorganismos salva%es, es decir, reci&n sacados de su habitad, lo que puedeayudar a concluir que las bacterias de la colonia tratada son reci&n sacadas de suhabitad: la colonia que creció fue clasificada como lisa ya que presentaba una te2tura

N°2 N°1 y N°3



homog&nea y uniforme . El hecho de que tenga bordes ondulados puede permitir otraclasificación de las bacterias tratadas, ya que este borde es característico de baciloslargos, entonces las bacterias tratadas pueden ser bacilos largos.

+as colonias fueron clasificadas de acuerdo a su forma en irregulares, ya que nopresentaba una forma definida, e2cepto una que era de forma circular.

El hecho de que en algunas de las siembras no se haya obtenido resultados se puededeber a ra!ones como1 contaminación del agar, mal mane%o de la ca%a de petri,quemas de las bacterias al no enfriar el asa antes de tomar el inoculo, rasgar el agar con las asas en el momento de la siembra -en la siembra por estrías, quema de lasbacterias que se encontraban en el agar en el momento en que se esterili!aba el asa yse volvía a esparcir el inoculo.

;na ve! incubadas las bacterias se observaron sus características macroscópicas oculturales y sus características microscópicas: +os resultados de estas observacionesreali!adas se pueden ver en la tabla anterior, en la que se puede observar que cada

una de ellas varía de acuerdo a sus características específicas de crecimiento en losdiferentes medios.3bservamos presencia de Escherichia coli debido a que ha fermentado la lactosapuesto que las colonias aparecen de color rosado.+as colonias de *almonella sp. *on de color amarillo lo cual demuestra que no hanfermentado la lactosa.

VII.CONCLUSIONES

• *e logró aprender a reali!ar algunos de los m&todos que e2isten para cultivar bacterias y de esta manera observar sus características tanto macroscópicascomo microscópicas e interpretación de las mismas, con lo que se observó que

para cada bacteria e2isten características diferentes que son las que lasidentifican y diferencian de otras bacterias, por lo que de esta manera se le



puede llegar a identificar con su correcta siembra y observación para análisisposteriores o simplemente para la identificación de una bacteria en alg)nmedio u organismo.

• En la práctica se aprendió a mane%ar de forma óptima y adecuada las distintas

formas de siembra como la de placas etri: como crear un ambiente limpio,desinfectando el lugar de traba%o con alcohol y traba%ando durante la siembracon mecheros cerca de nuestro cultivo, para evitar contaminación por parte deagentes e2terno y tambi&n para esterili!ar las asas llevándolas al ro%o vivo.

• El flameado es de vital importancia para la preparación de la siembra, ya quenos permite esterili!ar el ambiente donde se encuentra nuestra siembra yademás nos permite esterili!ar las asas ya que si estas se ponen en contactocon el medio de cultivo sin flamear pueden daarlo pues puede traer en ellasagentes que ataquen a las bacterias. Tambi&n hay que tener cuidado cuando

se esterili!an las asas con el flameado, ya que si no de%amos que estas seenfríen pueden acabar con las colonias de bacterias.

• *e logró adquirir agilidad en la siembra con placas por estrías, ya que para ellose hace necesario abrir la ca%a de petri con una sola mano y requiere deagilidad.

VIII.RECOMENDACIONES

I2.CUESTIONARIO O ACTIVIDAD

2.BIB%IOGRA/IA

@. RentSorth , asel$ivs, 0oern '6 Et al. 0iagnostic procedures for bacterial infections th Ed. @UQ. Rashington, 0.# "m ub Health "ss.



. Murray E. The life and time of Enterococcus. #lin Microbiol /ev @UUA:P1>(?

P. faller M". Microbiology. *ection 75, #hapter >>, acteriology pg @@@@(@@Qin #linical +aboratory Medicine Edited by Mc#7atchey L0. @UU> Rilliams and

Ril$ins. altimore M0 @A ;*".

>. Manual de laboratorio para identificación de prueba de susceptibilidad a losantimicrobianos de patógenos bacterianos de importancia para salud p)blica enel mundo en desarrollo. ;*"70, 3M*, #0# AA>

2I.ANE2O

Mac C!ne# Agar:

Este medio se utili!a para el aislamiento de bacilos 'ramnegativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobiosfacultativos. ermite diferenciar bacterias que utili!an o no,lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas lasespecies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en elmismo.

/*nda5en"!:

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el

desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y lame!cla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos queinhiben el desarrollo de gran parte de la flora 'ram positiva.or fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Estoproduce un vira%e del color del indicador de pH -ro%o neutro, la absorción en lascolonias, y la precipitación de las sales biliares.

+os microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

/RMU%A (EN GRAMOS =OR%ITRO)

INSTRUCCIONES

=e1"!na @.A *uspender ?A g del polvo por litrode agua destilada. /eposar ?minutos y me!clar hastauniformar. #alentar suavemente yhervir @ a minutos hastadisolver. Esterili!ar en autoclave a@@F# durante @? minutos.

=l*ri1e1"!na P.A

%ac"!sa @A.A

Mecla de sales6iliares

@.?



Cl!r*r! de s!di! ?.A

Agar @P.?

R!! ne*"r! A.AP

Cris"al +i!le"a A.AA@

1 &inal: .? F.0

Sie56ra( *embrar en superficie.( ;tili!ando la t&cnica de our late1 sembrar @ ml de muestra y agregar apro2imadamente @? ml de medio de cultivo fundido y enfriado a >?(?A V#.

Inc*6aci7n0urante @Q(>Q horas, a P?(P V#, en atmósfera aeróbica

Res*l"ad!s

Micr!!rganis5!s C!l!nias

Escericia c!li ATCC 0H00 /o%as con halo turbio

@le6siella 1ne*5!niae ATCC FFF /osadas mucosas

Sal5!nella "#1i5*ri*5 ATCC ?F0 7ncoloras, transparentes

Sigella &le4neri ATCC ?0F00 7ncoloras, transparentes

=r!"e*s 5ira6ilis ATCC F? 7ncoloras, transparentes

En"er!c!cc*s &aecalis ATCC 0H0?0 0iminutas, incoloras,opacas

Carac"er8s"icas del 5edi!Medio preparado1 ro%o p)rpura

Al5acena5ien"!:Medio deshidratado1 a @A(P? V#.Medio preparado1 a (Q V#.

=resen"aci7n



4 ?FFg :C7dig!: BF0$??$F 2 ?AAg 1#ódigo1 A(@@>(A

CRITERIOS DE DESEM=EKO ; %IMITACIONES DE% M>TODO:

El agar Mac#on$ey permite el crecimiento de microorganismos ent&ricos, esinhibitorio de cocos grampositivos: la lactosa incorporada permite diferenciar los fermentadores de los no fermentadores por el cambio de color de la coloniaque se torna de color rosado para las bacterias fermentadoras de lactosa talescomo Escherichia coli y Llebsiella pneumoniae e incolora para bacteriaslactosa negativa. ;na ve! recuperado el microorganismo se reali!an losestudios subsiguientes para establecer su identificación final. Este medio no es)til para cultivo y recuperación de microorganismos grampositivos.

CONDICIONES DE A%MACENAMIENTO ; ESTABI%IDAD DE %OSREACTIVOS:El medio "gar Mac#on$ey debe conservarse a TF de > (QF# colocando lasplacas en posición invertida paraevitar que el agua de condensación puedacaer sobre la superficie del medio. Este medio debe manipularse con cuidadoevitando movimientos bruscos o caídas que puedan resquebra%ar la capa delmedio. +a congelación arruina totalmente el medio. #onservado en condicionesóptimas el medio es estable hasta la fecha de e2piración sealada.

INTER=RETACIN DE RESU%TADOS ANA%LTICOS:

#recimiento y colonias de color rosado1 Microorganismo ent&rico gramnegativolactosa positivo. #recimiento y colonias incoloras o ligeramente amarillas1Microorganismo ent&rico gramnegativo lactosa negativo. Go crecimiento1Microorganismo grampositivo ó muestra negativa en el caso que igualmente nose observe crecimiento en un medio enriquecido.

CONTRO% DE CA%IDAD:

El agar Mac#on$ey tiene un estricto control de calidad a lo largo del proceso deproducción. El producto final tiene un cuidadoso control para asegurar quecada lote llene lasespecificaciones del medio1 #olor, consistencia, tersura,esterilidad, pH. El desempeo del medio se controla mediante el cultivo decepas control "T## de1Escherichia coli ?Uroteus mirabilis UUA*almonella typhi ;. Galseudomonas aeruginosa Q?Ppara determinar calidad y características del crecimiento bacteriano que deben

observarse en el medio. ara determinar su capacidad inhibitoria se confrontacon una cepa de1



Enterococcus faecalis @U>PP.El usuario recibe una copia de este estudio.

VA%OR DE RE/ERENCIA:

Este medio al usarse, debe ser est&ril y permitir un desarrollo óptimo de lascepas de referencia.

=RECAUCIONES ; ADVERTENCIAS:

Na que para la utili!ación de este medio se deben manipular muestra clínicas ymicroorganismos patógenos, se deben guardar las mas estrictas normas deasepsia y antisepsia, los cultivos una ve! leídos deben esterili!arse y luegocolocarse en bolsa ro%a identificada y entregada a la compaía especiali!adaen recolección de productos biológicos de desecho.

siembra de microroganismos agar

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