siembra de aerobios mesofilos por el metodo de vertido en placa

5/28/2018 siembra de aerobios mesofilos por el metodo de vertido en placa

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

PRACTICA # 1

TEMA: SIEMBRADE AEROBIOS MESOFILOS POR EL MTODO DE VERTIDO EN PLACAS.

OBJETIVO: DETERMINAR LA PRESENCIA O AUSENCIA DE AEROBIOS MESOFILOS EN

MUESTRAS LIQUIDAS.

MATERIALES:

AGUA DESTILADA

AGUA PECTONADA

AGAR

MATRAZ

BALANZA PROBETA

PIPETA

AGITADOR Y PASTILLA AGITADORA

AUTOCLAVE

ENCUBADORA

CONTADOR DE COLONIAS

CABINA DE FLUJO LAMINAR

CAJA PETRI

MORTERO

MUESTRAS (TECNIAGUA; AGUA DE RIO)

MUESTRA (PAN)

PROCEDIMIENTO

1. Esterilizar muy bien los materiales (previo a la prctica).

2. Preparar una solucin de 300 ml de AGAR (medio de cultivo slido), en agua des

ionizada (el envase contiene 23.4g de medio de cultivo slido para 1 litro de agua); para

esta prctica tomamos 7.1g de Agar.

23.4g.. 1L

X.. 0.3L

X=7.1g

3. Hervir esta solucin para que se disuelva completamente. No sobre calentar.

4. Una vez listo el AGAR se lo lleva a un autoclavado a una temperatura de 1210

C por untiempo de 15min (el tiempo corre a partir de que se alcance la temperatura deseada).


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5. Realizado este paso se lo retira del autoclave y se lo deja enfriar a una temperatura de

entre 45 y 520C.

6. Se lo lleva a la cabina de flujo laminar junto con la muestras previamente preparadas (si

son liquidas se coge 1ml de dicha muestra en una caja Petri y si son slidas se trabaja 1

en 10; quiere decir 1g de muestra en 10 ml de agua pectonada).7. Una vez en la cabina se procede a colocar AGAR en las muestras.

La cantidad de AGAR no se mide (3/4 de la placa de la muestra).

Las cajas Petri se las coloca de revs.

8. Se la lleva a la incubadora por un periodo de 24 horas a 300C (despus que se hace

solida).

9. Pasado este tiempo se retira de la incubadora y se procede a realizar el conteo de las

colonias de aerobios mesfilos.

MARCO TEORICO

Un mesfiloes un organismo cuya temperatura de crecimiento ptima est entre los 15

y los 35C

El recuento de microorganismos mesfilos aerbicos, conocido tambin como recuento

de placas aerbicas (APC), es el mtodo ms usual para la estimacin del nmero de

microorganismos viables en alimentos, aunque frecuentemente es usado mal. El APC no

mide el total de la poblacin de bacterias en una muestra de comida, sino la fraccin dela flora microbiana que es capaz de producir colonias en el medio de cultivo bajo las

condiciones predominantes en la incubacin de la placa. Este trabajo hace un anlisis de

los microorganismos mesfilos aerbicos, su significado y cmo interpretar su presencia

en los alimentos.

Dependiendo de las caractersticas del medio utilizado (medio rico, medio limitado en

nutrientes para medida de la flora no lctica de alimentos fermentados) y de las

condiciones de incubacin (mesfilos, psicrfilos) los microorganismos analizados sern

miembros de poblaciones diferentes. En general se investiga la presencia de

microorganismos aerobios o aerotolerantes (anaerobios facultativos); aunque, enciertas situaciones (alimentos envasados al vaco), puede ser de inters hacer recuentos

de anaerobios totales.

Este mtodo es uno de los indicadores microbiolgicos de calidad ms utilizado y Se

aplica a todos los alimentos con excepcin de los productos fermentados o madurados

tales como algunos quesos, ciertos tipos de embutidos, yogurt, etc.

Los resultados de este anlisis permiten: Verificar la efectividad de los procedimientos

de limpieza y desinfeccin.

Determinar si las temperaturas aplicadas en los procesos fueron las adecuadas.


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Se denominan aerobioso aerbicosa losorganismos que pueden vivir o desarrollarse

en presencia deoxgeno diatmico,mientras que si lo necesitan se denominan aerobios

estrictos. El adjetivo "aerobio" se aplica no slo aorganismos sino tambin a los

procesos implicados ("metabolismo aerobio") y a los ambientes donde se realizan. Un

"ambiente aerobio" es aquel rico en oxgeno, a diferencia de unoanaerobio,donde el

oxgeno est ausente, o unomicroaeroflico,donde el oxgeno se encuentra a muy bajaconcentracin.

Elmetabolismo aerobio (respiracin)surgi en laevolucin despus de que la

fotosntesis oxignica,la forma ms comn defotosntesis,liber a laatmsfera

oxgeno, el cual haba sido muy escaso hasta entonces. Inicialmente represent una

forma de contrarrestar la toxicidad del oxgeno, ms que una manera de aprovecharlo.

Como laoxidacin de laglucosa y otras sustancias libera mucha msenerga que su

utilizacin anaerobia por ejemplo, lafermentacin,los seres aerobios pronto se

convirtieron en los organismos dominantes en laTierra.

El antepasado comn de los organismoseucariontes (con clulas nucleadas) adquiri la

capacidad de realizar el metabolismo aerobio integrando a unabacteria aerobia como

orgnulo permanente, lamitocondria (teora de laendosimbiosis).

Aerobiosis, es un proceso conocido comorespiracin celular,usa el oxgeno para

oxidacin del sustrato (por ejemploazcares ygrasas para obtenerenerga).

BIBLIOGRAFIA

http://www.respyn.uanl.mx/viii/3/articulos/calidad_de_agua.htm

http://es.answers.com/Q/Que_son_los_mesofilos_aer%C3%B3bicos

RESULTADOS

MUESTRA # 1

PAN72 UFC/ml

MUESTRA # 2TECNIAGUA...41UFC/ml

MUESTRA # 3

AGUA DE RIOCHICO481UFC/ml
http://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgeno_diat%C3%B3micohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivohttp://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Microaerof%C3%ADlicohttp://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismo_aerobiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Respiraci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Evoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotos%C3%ADntesis_oxig%C3%A9nicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotos%C3%ADntesishttp://es.wikipedia.org/wiki/Atm%C3%B3sferahttp://es.wikipedia.org/wiki/Redoxhttp://es.wikipedia.org/wiki/Glucosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Tierrahttp://es.wikipedia.org/wiki/Eucariontehttp://es.wikipedia.org/wiki/Bacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Org%C3%A1nulohttp://es.wikipedia.org/wiki/Mitocondriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Endosimbiosishttp://es.wikipedia.org/wiki/Respiraci%C3%B3n_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/Oxidaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcareshttp://es.wikipedia.org/wiki/Grasahttp://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Grasahttp://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcareshttp://es.wikipedia.org/wiki/Oxidaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Respiraci%C3%B3n_celularhttp://es.wikipedia.org/wiki/Endosimbiosishttp://es.wikipedia.org/wiki/Mitocondriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Org%C3%A1nulohttp://es.wikipedia.org/wiki/Bacteriahttp://es.wikipedia.org/wiki/Eucariontehttp://es.wikipedia.org/wiki/Tierrahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fermentaci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Energ%C3%ADahttp://es.wikipedia.org/wiki/Glucosahttp://es.wikipedia.org/wiki/Redoxhttp://es.wikipedia.org/wiki/Atm%C3%B3sferahttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotos%C3%ADntesishttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotos%C3%ADntesis_oxig%C3%A9nicahttp://es.wikipedia.org/wiki/Evoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Respiraci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismo_aerobiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Microaerof%C3%ADlicohttp://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgeno_diat%C3%B3micohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ser_vivo


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CONCLUSIONESAl terminar la presente prctica podemos concluir:

Al utilizarel agua potable como materia prima para la elaboracin de productos

de consumo humano, la concentracin de aerobios mesfilos, no deber ser

superior a 100 UFC/ml.

Norma Tcnica Ecuatoriana NTE INEN 1108Agua Potable Requisitos. Instituto

Ecuatoriano de

Normalizacin. Quito, 2006-03

Los lmites microbiolgicos permitidos o aceptables para el consumo seguro de

los emparedados y panes son: Recuento Total de Aerobios Mesfilos hasta

105 UFC/g

RECOMENDACIONES

Se recomienda:

Utilizar lo EPP en todo el momento de la practica

Realizar correctamente las prcticas para obtener ptimos resultados y verificar

estos con los estndares ya establecidos.

Tratar de minimizar al mximo el margen de error posibles en mediciones

Consumir aguas de embotelladoras que tengan registros sanitarios o

certificados.

Estar atentos a los imprevistos puedan ocurrir en el laboratorio.


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ANEXOSPREPARACION DEL AGAR O MEDIO DE CULTIVO

AGAR PESAR EL AGAR

MEDICION DEL AGUA DESTILADA MEDIO DE CULTIVO LISTO PARA LLEVARLO AL

AUTOCLAVE

LLEVADO AL AUTOCLAVE

TAPADO DEL AGAR COLOCADO EN EL AUTOCLAVE


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ESPERANDO QUE ALCANCE LA TEMPERATURA DESEADA

PREPARACION DE LAS MUESTRAS

MUESTRAS PESADO DE LA MUESTRA SOLIDA (PAN)

MUESTRA DE PAN MEDICION DE LA MUESTRA LIQUIDA (AGUA)


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COLOCACION DEL MEDIO DE CULTIVO A LAS MUESTRAS EN LA CABINA DE

FLUJO LAMINAR

SE LLAVA LAS MUESTRAS A LA INCUVADORA POR 24 HORAS

CONTADOR DE COLONIAS

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