seminario uv-b

14

Click here to load reader

Upload: krla-fernanda-valdes-sith

Post on 03-Jul-2015

26 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Seminario UV-B

1. Introducción En las últimas décadas varios cambios climáticos en el planeta se han llevado a cabo. La mayoría de estas alteraciones se producen como consecuencia de actividades humanas. En este sentido, el descubrimiento del agujero de ozono'''' durante la primavera antártica representa uno de los eventos atmosféricos más importantes. Se cree que el adelgazamiento de la capa de ozono en los resultados de un aumento sustancial en la cantidad de radiación UV-B de llegar a la terreno, especialmente en esas longitudes de onda que son biológicamente más activo. Estas hipótesis han sido corroboradas por la NASA y las mediciones locales llevaron a cabo por el Laboratorio de Ozono del Departamento de Física de la Universidad de Magallanes [1]. Ellos han determinado que estas reducciones en el ozono atmosférico puede dar lugar - en ciertos períodos del día - en una sustancial aumento de la cantidad de radiación UV-B en huelga la región de Magallanes. Por ejemplo, en octubre, el 12 de 2002, se produjo un hecho de ozono baja de 41,8% que produjo un aumento del 80% en el espectro integral de la gama UV-B. En general, por cada reducción del 1% en la concentración de ozono, existe un 1.3-1.8% aumento en la cantidad de radiación que llega a la biosfera [2]. Varios estudios han demostrado los efectos nocivos de esta radiación sobre organismos vivos y por tanto no No cabe duda acerca de los impactos sobre la flora local y la fauna, debido a los niveles de radiación UV-B aumentó alcanzando la Patagonia Austral. Las plantas y otros sésiles organismos se vean especialmente afectados. Además de otras reacciones, los efectos sobre la productividad de las plantas (reducción de la biomasa), fotosíntesis y el crecimiento se han descrito en la literatura [3-5]. Estas alteraciones se deben a la alta absorción por las proteínas y ácidos nucleicos, que son los cromóforos principales implicados en estos fisiológicos y las respuestas morfológicas de plantas a la radiación UV-B. La irradiación de ADN se suma a la radiación UV produce fotoproductos múltiples ADN [6], que puede alterar la secuencia de nucleótidos y causar mutaciones severas durante replicación [7]. El daño en el ADN más común es la dimerización de las bases de pirimidina adyacentes que dímeros de pirimidina ciclobutano produce tipo (CPD). Esta fotoproducto de ADN y la pirimidina (6,4) pyrimidone son los más importantes inducidas por UV base cambios par [8]. proteínas de ADN enlaces cruzados, y el ADN rupturas de cadenas y la supresión o inserción de pares de bases También puede ser inducida por la exposición UV [9]. Todos estos cambios estructurales del ADN puede resultar en el fenotipo inducido alteraciones, pero también puede pasar desapercibida (silencio mutaciones). En este último caso, los cambios también pueden tener

Page 2: Seminario UV-B

ocurrió en una porción de ADN además de los genes que no afecta el producto del gen. Por el otro lado, los cambios en el gen pueden causar considerables progresos económicos las pérdidas en la agricultura, el retraso de floración y disminuyendo la producción de flores y [esperanza de vida 10]. Sin embargo, esta situación puede ser afectada si más variedades de plantas resistentes al estrés se identifican. Cuando las plantas están expuestas a la radiación UV-B de la aumento de la producción de metabolitos secundarios ha sido detectada. De hecho, un aumento en flavonoides y antocianinas se ha informado y ha asumido sido que las plantas pueden usar defensas fitoquímicas a evitar esta radiación dañina [11-15]. magellanica Jaborosa es una herbácea, perenne planta con una raíz principal y tallos fuertes que llegan a 5-30 cm de altura. Las hojas están dispuestas en racimos y flores axilares en grupos. Su fruto es una baya de color café grisáceo con numerosas semillas. La floración comienza en noviembre y dura hasta diciembre. Se encuentra en la costa de arena abierta de la Región de Magallanes. En este trabajo, se llevaron a cabo experimentos para estudiar los efectos de la radiación UV-B sobre J. magellanica, una planta que crece en la zona de Magallanes directamente debajo de la capa de ozono'' ''agujero producido en la primavera austral. 2. Materiales y métodos 2.1. Material vegetal Las semillas de J. magellanica se recogieron en 1999, cerca de Seno Otway, en los suburbios de la ciudad de Punta Arenas (52? Años 590-71? 140W). Ellos se mantienen a 0 º C para dos meses a un tratamiento por frío. Las semillas fueron sembradas en varias bandejas de plástico, que contiene una mezcla de suelo de arena (40%) y el compostaje (60%). Después de 60-65 días? el crecimiento, las plantas fueron trasplantadas en macetas de plástico individuales, llena con la mezcla de compost mismo y luego fueron se trasladó a la cámara de UV-B al día siguiente. Plantas fueron regadas cada 1-2 días y la temperatura ambiente durante el día dentro de la cámara de UV-B fueron 27-32 º C y humedad relativa 38-42%. En todas las mediciones de la hoja se tomaron muestras de hojas desarrolladas en una mayor UV-B ambiental. 2.2. Fuentes de luz Además de la luz solar de efecto invernadero (PAR: 1200 lmolm? 2 s? 1), la radiación UV fue proporcionada por cuatro fluorescentes tubos (Philips TL 20W/12; 1220 mm · 1000 mm). A fin de mantener la calidad espectral de la radiación de salida relativamente constante, estos tubos fueron 70 h antes de la quema [16]. La suplementación de radiación UV-B fue obtenido por blindaje de estos tubos con una presolarized (7 h) de celulosa película de acetato (0,075 mm de espesor) que corta todos los longitudes de onda por debajo de 280 nm. Para evitar la degradación UV foto

Page 3: Seminario UV-B

de película de acetato, los filtros fueron cambiados después de 90 h de exposición [16,17]. 2.3. Tratamientos UV Las plantas fueron expuestas continuamente a 9 h del día UVB la irradiación y se cosecha a los 51 días de exposición. Las lámparas fueron colocadas en un bastidor móvil y colgado en el 0,30 m por encima de las plantas. Elegimos esta distancia, ya que produce una radiación diaria UV-B la velocidad de fluencia de 4,5 MWM? 2, que está dentro de los valores medios medidos en Punta Arenas área durante el año 2000. Por ejemplo, en ''''Normal de ozono condiciones, la radiación a 300 nm el 15 de octubre fue de 2.23 MWM? 2. Por otra parte, bajo la capa de ozono''perturbado''condiciones 14,21 MWM? 2 Se detectó [1]. Después de la irradiación, los que absorben radiación UV películas fueron retirados con el fin de dar a la mismas condiciones de luz todas las plantas. 2.4. Radiación mediciones Los niveles de irradiancia espectral de la altura de la planta por debajo de las luces se midió con un fotómetro / radiómetro (Luz Solar Co. PMA 2200 1.10). La distribución espectral de la radiación ultravioleta proporcionado por estos tubos UV-B tiene Anteriormente, se reportó [12,13]. El radiómetro se calibrado usando una NIST 1000 filamento de tungsteno W lámpara de halógeno de cuarzo. 2.5. Diseño experimental El modelo experimental utilizado en este estudio corresponden a un diseño de bloques completos al azar con varias variables. Veinte plantas (60-65 días de edad) distribuidos en dos grupos dentro de la cámara experimental: el grupo control (? UVB) y grupo tratado (+ UVB). Una película de plástico que absorben radiación UV se utiliza para aislar tanto grupos. posiciones Pot fueron asignados aleatoriamente dentro de cada grupo cada dos días para reducir al mínimo los efectos de posición. El altura de la lámpara rack fue ajustada para mantener la radiación UV los niveles de una vez por semana. 2.6. variables de crecimiento El área foliar de la epidermis adaxial y longitud de la hoja se determinado por un procesador de imágenes (IMAGE-PRO PLUS 4,1) de las fotografías digitales (Mavica MVCFD 71). Peso de la hoja fresca se midió en una balanza digital (XT PRECISA 120A). Elongación del tallo (planta altura) se midió a partir del suelo (POT) el nivel de la parte superior de la planta. Las hojas utilizadas en peso fresco, área y longitud las mediciones se obtuvieron de la mitad superior de las plantas (Primera fase). Cada cosecha se llevó a cabo en cinco diferentes plantas. 2.7. pigmentos fotosintéticos Varias muestras de hojas de la mitad superior de las plantas fueron analizados. clorofilas y carotenoides totales se extrajeron de los distintos discos de hoja (1 cm2) con 5 ml de

Page 4: Seminario UV-B

DMSO durante 12 horas a 65 º C en la oscuridad. La absorbancia fue determinada a 664, 648 y 470 nm en 1 ml de muestras y la absorbancia del espectro registrado entre 200 y 700 nm (Shimadzu UV-160A espectrofotómetro). Fotosintéticos concentraciones de pigmentos se calcularon de acuerdo a las ecuaciones dadas en Chapelle et al. [18]. 2.8. compuestos absorbentes de radiación UV-B Interior fenólicos absorción de UV-B se extrajeron de las hojas por molienda utilizando un mortero con 2 ml de MeOH: H2O: HCl = 79:20:1 (v / v). Homogeneizados, combinado con otro lavado de la mano del mortero y mortero con 1 ml de la mezcla del solvente misma se centrifugaron a 3000 rpm durante 10 min. Sobrenadantes fueron entonces filtrado (Whatman N? 1) y se evapora a sequedad a 40 º C. Los residuos se disolvió en MeOH. Cuantificación de compuestos absorbentes de radiación UV-B se realizó siguiendo el procedimiento de Caldwell [19] y Mirecki y Teramura [20]. 2.9. El aislamiento de ADN cromosómico de las hojas La planta de ADN total de la PCR fue aislado de primera etapa de hojas usando un protocolo CTAB descrito por Doyle y Doyle [21] y modificado de la siguiente manera. Congelado el tejido (0,5-0,75 g) se molió en un mortero en un líquido nitrógeno y homogeneizada en 5 ml de precalentado (60 º C) extracción de solución tampón que contiene: 1 M Tris-HCl (pH 8,0); 1,4 M NaCl, 20 mM EDTA; CTAB 3% (w / v). La mezcla se incubó durante 20 min a 65 º C mezclando ocasionalmente agitando suavemente. El ADN se extrajo dos veces con un volumen igual de cloroformo: alcohol isoamílico = 24:1 (v / v) y se precipitó con un volumen de isopropanol frío. El ADN precipitado se extrajo con un gancho de vidrio, lavado en un 70% (v / v) de etanol durante 5 min, secos en la sala de la temperatura y la re-suspensión en el agua en el autoclave. La contaminación de ARN fue removido por la digestión con RNAsa A. El ADN se purifica aún más con cloroformo / la extracción de alcohol isoamílico y re-precipitado con etanol y resuspendido en agua autoclave. 2,10. RAPD y repetir cosas secuencia simple PCR Al azar oligonucleótidos decamer comprado de vida de la tecnología fueron utilizados como iniciadores único para PCR. Los iniciadores fueron diseñados de acuerdo a las anteriores informes publicados [22]. La mezcla de reacción para una reacción de 25 ll compuesto por 20 ng de ADN molde, 0,5 mM de imprimación, 0,2 mM de cada uno de los dNTP? S y 0,5 unidades de Taq polimerasa (Perkin-Elmer) en 1 · buffer de reacción proporcionada por de la empresa. Amplificación por PCR se llevó a cabo utilizando dos termocicladores un MJResearch (PTC-100) y un Perkin-Elmer Gene amplificador (sistema de PCR 2400) de acuerdo al siguiente programa: desnaturalización 4 min (94 º C), luego 40 ciclos de 1 min a 94 º C, 1 min a

Page 5: Seminario UV-B

34 º C, y 2 min a 72 º C. iniciadores ISSR se obtuvieron de la Universidad de British Columbia (Vancouver, Canadá) set # 9 y que figuran En el Cuadro 4. Fueron utilizados para la amplificación de PCR con el siguiente protocolo. Mezcla de reacción PCR (20 ll) que contiene: una unidad de Taq ADN polimerasa, 1.5 mM tampón MgCl2, 0,2 mM de cada dNTP, con 0,3 LM de una sola cartilla y 10 ng de DNA genómico. PCR amplificaciones se realizaron con un MJR PTC-100 Termociclador con el siguiente programa: 30 ciclos de 1 min a 94 º C, 2 min a 55 º C y 30 s a 72 º C, con un último período 5 min a 72 º C. 2,11. La reproducibilidad de los productos de amplificación El procedimiento de amplificación se realizó por duplicado cada vez. Las bandas se considera sólo reproducibles cuando el patrón mismo ADN se obtuvo por lo menos en dos de amplificación de ADN se ejecuta utilizando aislados en diferentes ocasiones. Dos termocicladores se utilizaron para determinar variación entre máquinas. 2,12. La separación de los productos de PCR productos de RAPD se separaron en gel de agarosa al 2% y productos ISSR-PCR fueron separados por electroforesis el 5% de urea geles de poliacrilamida y se tiñeron con plata para visualizar las bandas [22]. 2,13. Análisis de datos marcadores ISSR fueron tratados en todo momento como? genética? fenotipos. Los perfiles de ADN se registraron con la presencia (1) o ausencia (0) de bandas y los resultados reunidos en una matriz de datos de la tabla. Una medida de la distancia se calculó a partir de los datos ISSR matriz binaria de mesa utilizando el coeficiente de correlación (CORR). Estas distancias fueron utilizados para llevar a cabo análisis de componentes principales (ACC) utilizando NTSYSpc [23]. 2.14. Análisis estadístico Sobre la base del diseño experimental utilizado en este estudio, los datos se analizaron mediante el procedimiento de diseño de bloques completos al azar. Estadística evaluaciones (ANOVA, test LSD) se realizaron en todas las mediciones utilizando el sistema SAS 8.2 Paquete Estadístico. 3. Resultados 3.1. Interior UV-B absorber compuestos El espectro UV de MeOH extractos de las internas fenólicos de hojas mostró dos picos de absorción en las principales 293 y 332 nm y dos picos menores en 403 y 410 nm. El análisis con TLC extractos de MeOH reveló la presencia de varios compuestos desconocidos. Usando el típico fluorescencia bajo UV/NH3 como base, 2-3 compuestos (Rf = 0,8 y 0,6) fueron parcialmente identificados como hydroxycinnamoyl derivados. Debido a sus espectros de absorción (270-310 nm kmax), estos compuestos pueden

Page 6: Seminario UV-B

participar en la protección de la planta contra la radiación UV-B la radiación. Con el fin de comparar los efectos de la irradiación UV-B sobre estos compuestos internos absorber la radiación UV-B, cuantificación se llevó a cabo mediante la medición de MeOH extractos de absorbancia. El cuadro 1 muestra la absorbancia a 300 nm de control y las plantas tratadas después de 51 días de UV-B de tratamiento. Un claro aumento en la absorbancia de la radiación de plantas se observa. Esta es una planta conocida respuesta a la radiación UV-B, que se basa en la bandas de absorción de los ésteres hidroxi-cinámico se en el rango UV-B. 3.2. pigmentos fotosintéticos Los pigmentos fotosintéticos, clorofila a, clorofila b y carotenoides se han reducido los valores de tratados plantas en comparación con los controles. La Tabla 2 muestra el efecto del tratamiento de irradiación a los 51 días de exposición. El mayor descenso se observa tanto en la clorofila a (64,2%) y clorofila b (63,3%) su contenido. Los carotenoides no fueron dañados (4,5% de disminución, pero las diferencias no son estadísticamente significativas) como clorofilas, aunque carotenoides ayudan a proteger las clorofilas de photodestruction [24]. Por lo tanto, la ruta biosintética de clorofilas podría estar más influenciados por la radiación UV-B que el de los carotenoides. La reducción de las clorofilas contenido también puede estar relacionado con el fotomorfogénicas efectos encontrados en la biomasa vegetal como demostrado por los cambios importantes en altura de planta (Fig. 2), forma de la hoja y el área foliar de las plantas irradiadas (Fig. 1). 3.3. Crecimiento Además de los efectos sobre los pigmentos fotosintéticos, otros importantes procesos fisiológicos que determinan morfología y crecimiento de las plantas se vieron gravemente afectadas por la radiación UV-B (Fig. 1). Es evidente que, irradiados Tabla 1 Efecto de la radiación UV-B sobre la absorción interna de UV-B compuestos (A300) a, b Fc de control de tratamiento Pd 0,511 ± 0,025 0,893 ± 0,025 111.66 0.0001 una concentración media (UA; N = 15) y error estándar de interior compuestos absorbentes de radiación UV-B, tras 51 días de tratamiento. B Grados de libertad = 1, F y P (determinado en el ANOVA) se dado en los pigmentos absorbentes de UV-B por el tratamiento. c F-valor se determina dividiendo el cuadrado medio para el grupo por el cuadrado medio de residuales. d El nivel de significancia se determinó usando 10 y 9 DF. Cuadro 2 Efecto de la radiación UV-B sobre Contenta pigmentos fotosintéticos Control Pigmentb Fc Tratamiento Pd Chl a 6,31 ± 0,25 2,26 ± 6,40 0,0178 0.09a

Page 7: Seminario UV-B

Chl b 5,42 ± 0,25 1,99 ± 3,80 0,0620 0.09b Los carotenoides 1,41 ± 0,05 1,34 ± 1,00 0,3259 0.05b una concentración media (pigmento lg / ml, N = 15) y el error estándar de pigmentos vegetales. Medias con letras diferentes son estadísticamente significativas a P <0.05, según lo determinado por el LSD en el ANOVA. B Grados de libertad = 1, F y P (determinado en el ANOVA) se Para cada pigmento de las plantas por tratamiento. c F-valor se obtiene dividiendo el cuadrado medio para el grupo por el cuadrado medio de residuales. d El nivel de significancia se determinó usando 10 y 9 DF.

La figura. 1. Comparación entre las hojas de las plantas no irradiadas (izquierda)y las hojas de las plantas irradiadas (derecha).

plants have smaller leaves than control plants. Table 3shows that leaf area was decreased by about 92%, leaflength decreased by up to 72%, and leaf fresh weightwas decreased by about 88% in irradiated plants. Theseresults indicate that the physiological development ofleaves is affected by UV-B radiation. This negative effecton plant production is characteristic of ‘‘sun adapted’’plants which are smaller, with less leaf, stem, and root,therefore, total biomass [25].The daily rate of growth is given in Fig. 2 fromwhich it is clear that although irradiated plants growuntil day 14, they do so more slowly than controlsand at 14 days start to actually decline. On the contrary,non-irradiated plants continue to grow evenafter 28 days and at that point the difference betweenboth groups is quite clear. This effect of reducing plantheight is a well known response of sensitive plants andhas also been found in Cucumis sativa [26], Glycinemax [27], Hordeum vulgare [28] and Phaseolus vulgaris[29]. These plants have shown that these changes arefluence and wavelength dependent, and the most effectiveperiod occurs during the transition from vegetativeto reproductive stage.3.4. Analysis of the polymorphismsDNA was extracted from the different leaves andbulked for PCR analysis. The amplifications were performedin triplicates. Eleven out of twenty-two differentprimers tested were able to generate amplification products.Polymorphism was detected when irradiated andnon-irradiated DNAs were compared using both RAPDand ISSR primers. New fragments were amplified onirradiated samples, but in some cases the loss of fragmentswas also detected on the gel (Fig. 3). When a dissimilarityindex was calculated, taking into account allof the bands amplified, a 60% differences was found betweenthe bulked samples. This provides clear evidenceof the direct effect of UV-B radiation on DNA structure.

4. Discusión Después de 51 días de tratamiento UV-B, J. magellanica plantas, mostraron manifestaciones visibles, como la clorosis o bronce decoloración de las hojas. Además de estos bien conocidos

Page 8: Seminario UV-B

efectos dañinos, había otros fisiológicos y los cambios morfológicos que se discutirá en mayores detalles. El efecto de la radiación UV-B sobre la luz de cosecha complejos han sido reportados [25,30,31]. Sin embargo Estos estudios mostraron resultados contradictorios en las relativas cambio en el componente de pigmentos fotosintéticos. En este estudio, los pigmentos fotosintéticos parecen ser alterado después de la irradiación UV-B. Se puede observar que el grupo tratado se ha reducido los valores de las clorofilas contenido. Por el contrario, los carotenoides no fueron afectadas (las diferencias entre los grupos no son estadísticamente significativo). Dado que el porcentaje de clorofila a, b: la clorofila es similar en ambos grupos de plantas estas respuestas pueden ser interpretarse como un proceso de regulación en lugar de un daño resultado. Sin embargo, la evidencia experimental que resulta de los efectos negativos en la morfología vegetal, el decremento en el área foliar, el tamaño, el alargamiento del tallo y la planta de biomasa indica la producción de daños a las plantas significativas. Esta interpretación está bien apoyada por la literatura donde una disminución en la planta de producción de biomasa ha sido bien correlacionada con una disminución en el pigmento fotosintético contenido [32]. Por otra parte, las respuestas positivas o los procesos de regulación a menudo se han relacionado con un aumento en el contenido de clorofilas y carotenoides. Estas respuestas se consideran como una estrategia central para disipar esta radiación dañina de los tejidos internos evitando un daño irreparable a importantes fotosintéticamente sistemas de membranas [33,34]. En este sentido, Middleton y Teramura [25] han señalado que un aumento en los complejos de luz en la recolección de UV-B irradiados las plantas también podría proporcionar una mayor protección de la foto a través de una mayor concentración de xantofilas. morfogénica modificaciones observadas en este estudio (Reducción del área foliar y la longitud de la hoja) que indican la plantas tratar de evitar la penetración de esta radiación a la tejidos internos al disminuir el área de exposición de sus principales estructuras de absorción. Milthorpe y Newton [35] han señalado que el tamaño de la hoja es determinada por tres factores: (1) el tipo y la duración de la expansión celular; (2) el tipo y la duración de la división celular, (3) el número de células en el primordio de la hoja. El tercer factor puede ser ignorados en el contexto actual, ya que desde la hoja primordial tejido está bien protegido de la luz solar y por lo tanto la radiación UV-B no lo afectan. Sin embargo, los rayos UV la radiación parece afectar a los procesos de división celular, como se observó en las semillas germinadas expuestos a la radiación UV-B que generó plantas enanas con hojas pequeñas. Al parecer, un cambio en los fotorreceptores pueden inducir esta condición y la importancia de los fotorreceptores varias

Page 9: Seminario UV-B

y las vías de transducción de señales como una respuesta mecanismo ha sido demostrado en Arabidopsis y varias otras especies de plantas [36-38]. contenido de clorofila se vieron gravemente afectados y puede ser la causa del pequeño tamaño observado en irradiado plantas. Un efecto similar deletéreos sobre altura de la planta ha También se han encontrado en la alfalfa [39], el pepino [26] y, Gnaphalium spp [12,13]. De acuerdo con la literatura, el efecto negativo en el crecimiento de las plantas puede ser una consecuencia de cambios en las hormonas vegetales [26], o ser una consecuencia de la lesión directa del ADN causado por la acción dañina de la radiación UV-B [39,40], como hemos encontrado aquí. Los análisis anteriores de flavonoides y compuestos fenólicos asociados en plantas sometidas a estrés UV-B tienen bien han llevado a cabo en el contenido total de hojas o bien en la componentes de la hoja interior. En el presente estudio de J. magellanica atención se ha centrado en compuestos fenólicos internos recogidos por moliendo hojas en metanol acuoso ácido. Nuestros resultados muestran que se producen aumentos significativos en estos componentes internos después de la radiación UV-B. Al parecer, las plantas activan otros mecanismos - distintos para aquellos involucrados en los complejos de la luz recolección - Para hacer frente a mayores niveles de radiación UV-B. Estos resultados concuerdan con los reportados en la literatura mostrando que las plantas acumulan sin identificar UV-B absorción de los compuestos (reportado como la absorbencia a 300 nm) después de la irradiación con luz UV-B [11,13,19,41 - 46]. De esta manera, las plantas responden al estrés UV-B mediante la síntesis de mayores cantidades de metabolitos vacuolar que puede disipar de manera eficiente los altos niveles de este la radiación. Los resultados también estuvo de acuerdo con Cooper y Bhattacharya [47] que han sugerido que hidroxicinámicos El ácido es significativa en la planta de la protección UV-B. De manera similar al principio de la evolución de la tierra-plantas (470.106 años BP), cuando la atmósfera de ozono se reducen [48] y las plantas tuvieron que hacer frente con altos niveles de radiación UV-B [49], ácidos cinámico y sus derivados juegan un importante papel en la defensa de la planta contra la radiación UV-B. Es claro entonces que los resultados observados en este estudio, tales como aumento en el contenido de fenilpropanoides y la reducción tanto en el contenido de clorofila y la biomasa de las plantas irradiadas, están de acuerdo con los de la literatura informa, por ejemplo, en Gnaphalium spp, frijol, sp Colobanthus, soja y cebada [13,41, 47,50,51]. Cuando los polimorfismos genéticos se analizaron un pequeño grado de similitud fue detectado. En general, cebadores se utilizan en estudios de diversidad para demostrar las diferencias entre individuos de una población de plantas

Page 10: Seminario UV-B

[22]. El agrupamiento de las muestras se utilizan para reducir la variación genética natural de los individuos de la población y hacer hincapié en particular, las diferencias. En nuestras muestras, obtenidas de la misma especie, una alto nivel de similitud se espera (entre 80% y 90%). Sin embargo, el análisis estadístico mostró que sólo un 40% de similitud entre las plantas después del tratamiento y el control, sobre los efectos a nivel de ADN debido a laRadiación UV-B y los cambios en las secuencias de nucleótidosque deben ser complementarios a las secuencias iniciadoras(Ver Tabla 4).la radiación de plantas la radiación UV-B mostró morfológicas, bioquímicasy las diferencias genéticas respecto a los no irradiadosplantas. Estos resultados apoyan la idea de quelas plantas responden a la radiación UV-B, utilizando diferentes estrategias.La respuesta molecular se orienta a reducir al mínimolas perturbaciones externas a las que están expuestos ensu hábitat natural. Sin embargo, cuando estas interrupcionessuperar los niveles naturales a los que están expuestos enlos períodos iniciales de crecimiento, las plantas deben utilizar un complejomecanismo de integración de las diferentes vías haciasobrevivir [52]. Más se debe prestar atención en elcambios a nivel genético, en particular los que participan enlas vías metabólicas. Incluso si los efectos de la radiación UV-B son difícilesde detectar en condiciones naturales, que juegan un papel en la físicay los ecosistemas manejados. La integración de la biología molecular,químicos, fisiológicos y bioquímicosinformación podría proporcionar algunos detalles sobre el reallas respuestas a esta radiación.AgradecimientosDamos las gracias al Direccio'n de Investigacio'n de la Universidadde Magallanes (PR-F4-01RN-2000) para la financieraapoyo y también a Stephanie Whitfield por surevisión crítica.