Seminario de Microbiologa

Seminario N5

Paciente de sexo masculino de 18 aos, sin antecedentes de importancia Hace 24 horas empieza a sentirse mal, decado, sin fuerzas, con dolor muscular, falta de apetito y dolor de cabeza intenso y nota manchitas moradas en todo el cuerpo que se unen. Al examinarlo se observan mculas violceas en varias partes del cuerpo pero sobretodo en manos y pies. Paciente est somnoliento, pero alerta al llamado. No hay fiebre. Al poco tiempo de estar en la Emergencia el paciente empeora: temperatura 38.9 C, aumento del nmero de las lesiones y se evidencia rigidez de nuca.

1. Mencione las caractersticas morfolgicas del gnero Neisseria.

Las especies Neisseria son bacterias gram negativas aerobias de dimetro comprendido entre 0,6-1m y que se disponen en parejas (diplococos) cuyos lados adyacentes se aplanan para adoptar una morfologa semejante a la de un gramo de caf. Las bacterias son inmviles y no forman endosporas. Todas las especies son oxidasa-positiva y casi todas sintetizan catalasa; propiedades que, junto a la morfologa de la tincin de Gram, hacen posible la identificacin rpida de sospecha de una cepa clnica. Generan cidos por oxidacin de carbohidratos (No por fermentacin).

2. Cules son las especies del gnero Neisseria qu son patgenas para el ser humano?

El gnero Neisseria engloba 10 especies detectadas en el ser humano, dos de las cuales son patgenas estrictas del ser humano:a. Neisseria gonorrhoeae Sus factores de virulencia son la Pilina, protena I, II y III, protenas que se unen a transferrina, protenas que se unen a hemoglobina, LOS, proteasa de IgA1 y la B-lactamasa.b. Neisseria meningitidis El principal factor de virulencia es el polisacrido de la capsula.

3. Explique la funcin de las estructuras de superficie de la bacteria.

Las estructuras de la superficie son:a. Pilina Permiten adhesin inicial a las clulas humanas no ciliadasb. Protena POR(Protena I) Permite la supervivencia intracelular, al evadir la fusin de los fagolisosomas en los neutrfilosc. Protena OPA(Protena II) Permite la adhesin firme a las clulas eucariotasd. Protena RMP(Protena III) Permite la proteccin de los antgenos frente a los anticuerpos bactericidase. Protenas que se unen a Transferrina Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacterianof. Protenas que se unen Lactoferrina Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacterianog. Protenas que se unen a la Hemoglobina Permiten la adquisicin de Hierro para el metabolismo bacterianoh. Lipooligosacrido (LOS) De actividad endotxicai. Proteasas de IgA1 Permite la destruccin de la Inmunoglobulina A1j. Beta Lactamasa Permite la hidrolizacin del anillo beta lactmico de la penicilina

4. Cules son las caractersticas del crecimiento de Neisseria y en qu medio de cultivo se desarrollan?

La temperatura adecuada para el crecimiento de este microorganismo oscila entre los 35C a 37C; se debe evitar la desecacin y presencia de cidos grasos; requerimientos de cistina y una fuente de energa; se debe aadir aminocidos, purinas, pirimidinas, vitaminas y almidn soluble, este ltimo inhibe el efecto txico de los cidos grasos; y por ltimo un requerimiento de presencia de dixido de carbono al 5%. Se pueden desarrollar tanto en medios selectivos (Medio de Thayer Martin modificado), ya que inhiben los microorganismos contaminantes; como en medios no selectivos (Agar Chocolate), ya que algunas cepas de la Neisseria son inhibidas por la Vancomicina presente en los medios selectivos

5. Cul es el reservorio y la puerta de entrada de N. meningitidis?

La transmisin deN. meningitidisse realiza por contacto de persona a persona, o por la inhalacin de gotas respiratorias que contienen meningococos.1, 2, 7Al no sobrevivir en el ambiente y no tener un reservorio en animales, el hombre constituye su nica posibilidad de sobrevivir y propagarse. El contacto es usualmente con un enfermo o un portador asintomtico que aloja a la bacteria en la nasofaringe y que la transmite por gotas respiratorias o secreciones orales.Neisseria meningitidises susceptible a cambios de temperatura y a la desecacin y, por lo tanto, la infeccin no se transmite por fmites. Los actos de toser o estornudar contribuyen al mecanismo de transmisin,1,2por lo que no resulta sorpresivo que la tasa de colonizacin puede ser mayor a 50% en escuelas, internados, o en cuarteles militares, especialmente durante periodos asociados a un incremento en infecciones virales del tracto respiratorio superior.

6. Cul es la prueba de laboratorio que se emplea para identificar a N. meningitidis? Qu muestras deben recolectarse?| Directos a. Muestras LCR hemocultivo b. Cultivos- poner el microorganismo en un medio mixto se puede identificar mediante la tincin Gram y la prueba de oxidasa. c. Frotis- la tincin de Gram con el lquido cefalorraqudeo centrifugado o en material aspirado de las petequias. d. Serologa- Los anticuerpos a polisacridos meningococos pueden medirse mediante pruebas de aglutacion con perlitas de ltex o hemoaglutinacin o por su activacin bacteriana.

7. Cules son las enfermedades causadas por N. gonorrhoeae?

Las enfermedades ms comunes que causa son:a. Gonorrea Caracterizada por secrecin purulenta en la localizacin afectada (p.ej; uretra, cuello del tero, epiddimo, prstata, ano) tras un periodo de incubacin de 2-5dias. b. Gonococemia Es una enfermedad de transmisin sexual causada por la bacteria Neisseria gonorrhoeae, la cual se disemina desde el sitio inicial de infeccin a travs del torrente sanguneo hacia otros rganos del cuerpo.c. Infecciones diseminadas Diseminacin de la infeccin desde el aparato urinario a travs de la sangre hasta la piel o las articulaciones; se caracteriza por exantema pustular con base eritematosa y artritis supurativa en las articulaciones afectadas.d. Oftalmia neonatal Infeccin ocular purulenta adquirida por el neonato durante el nacimiento.

8. Cules son los exmenes de laboratorio que se utilizan para identificar a N. gonorrhoeae?

Los exmenes a realizar son:a. Directo Tincin de Gram en muestras uretrales es precisa solo en hombre, nuevos mtodos de diagnstico rpido (inmunofluorescencia directa con anticuerpos monoclonales, ELISA, sondas de ADN y PCR).b. Cultivo y aislamiento En medios selectivos como agar de chocolate y otros medios de cultivo enriquecido con un atmosfera con dixido de carbono al 5%.c. Identificacin Pruebas bioqumicas o tcnicas serolgicas (IF directa, ELISA, coaglutinacin).

Seminario N6Paciente de 26 aos, sexo masculino. Acude a consulta porque ha tenido nuseas y vmitos, a lo que se aade diarrea acuosa no sanguinolenta, que inici de forma gradual y que ha ido empeorando. Nota un aumento de temperatura y dolor de cabeza intenso, adems de mialgias. Hace 2 das acudi a una reunin y comi pollo a la brasa con ensaladas y aderezo (mayonesa) Al examen fsico: Paciente adelgazado. Temperatura: 39 C, frecuencia cardiaca (FC): 84/min, frecuencia respiratoria (FR): 20/min. Deposiciones sin sangre y sin moco.

1. Seale agentes bacterianos ms frecuentes que causan diarrea.

Los agentes bacterianos ms frecuentes son: a. Gastroenteritis bacteriana: Es una inflamacin del estmago e intestinos causada por bacterias.b. Escherichia coli: LaEscherichia coliest dividida por sus propiedadesvirulentas, pudiendo causar diarrea en humanos y otros animales. Otras cepas causan diarreashemorrgicaspor virtud de su agresividad, patogenicidad y toxicidad.c. Campylobacter jejuni Provoca infecciones intestinales usualmente de origenzoontico. El cuadro clnico se manifiesta por unadiarreaaguda, que puede o no ir acompaada devmitos, dolor abdominal, dolor de cabeza y malestar general. El perodo de incubacin es de 1 a 10 das, el cuadro clnico es autolimitado y dura entre 2 a 5das.d. Salmonela Shigella Producesalmonelosiscon un perido de incubacin de entre 5 horas y 5 das,diarreay dolor abdominal. A travs de las heces (excremento) del enfermo se elimina un gran nmero de esta bacteria y se observa fiebre entrica con un periodo de incubacin de 7 a 28 das, causante dedolor de cabeza,fiebre, dolor abdominal y diarrea, erupcin mculo-papulosa enpechoyespalda. Los enfermos presentan un perodo de convalecencia entre 1 y 8 semanas y las personas curadas eliminanSalmonella. Tambin puede ocasionar fiebres entricas o infeccin intestinal por intoxicacin con algunos alimentos.e. Yersinia. La yersiniosis es laenfermedad infecciosacausada por lasYersinia, comnmente porY. enterocolitica, y frecuente en nios. La infeccin rara vez causasntomasen adultos, en nios pueden causarfiebre, dolor abdominal ydiarrea, a veceshemorrgica.

2. Cules son las caractersticas morfolgicas y fisiolgicas de las enterobacterias?

Las caractersticas morfolgicas son: Las enterobacterias de la familia Enterobacteriaceae son bacilos gramnegativos comnmente mviles mediante flagelos pertricos a excepcin hecha del gnero Klebsiella y Shigella que son siempre inmviles. Poseen pili comunes. Son organismos no esporulados y no capsulados a excepcin de las especies del gnero Klepsiella, que si son capsuladas, y de E. coli que puede adquirir la cpsula. Las caractersticas fisiolgicas son: La familia enterobacteriaceae son organismos quimiorgantrofos, anaerobios facultativos de metabolismo fermentativo y no exigentes nutricionalmente, creciendo en medios de cultivos ordinarios. Son catalasa y nitrasa positivos y oxidasa negativos.

3. Cules son los factores de virulencia de las enterobacterias? Qu efecto producen en el humano?

Los factores de virulencia sona. Adherencia a clulas intestinales y a clulas cultivadasb. Capacidad de INAVADIR y REPRODUCIRSE del citoplasma, destruyendo a la clula hospedera.c. Elaborar Citotoxinasd. Poros en las cilias del intestino delgadoe. Pilis pequeosf. Flagelosg. Siderforos Muchas de estas bacterias son patgenas y causa deinfeccinoportunista, otras sondescomponedorasque viven en lamateria orgnicamuerta o viven en el ser humano como parte de una poblacinmicrobiananormal. Algunas enterobacterias patgenas causan principalmente infeccin deltracto urinarioy deltracto respiratorio.

4. Cul es el reservorio y mecanismo de transmisin de Salmonella?

El mecanismo de transmisin es por el consumo de alimentos contaminados (aves, huevos y productos lcteos) y transmisin directa fecal-oral en los nios. El principal reservorio de Salmonella son las aves de corral, el ganado vacuno y el porcino; por lo tanto, son fuentes de infeccin importantes las carnes de estos animales y los huevos. En el caso de S. typhi y S. paratyphi son patgenos humanos estrictos.

5. Enumere las especies de Salmonella que son nocivas para los humanos. Qu enfermedades causan?

Las especies nocivas son:a. Gastroenteritis Forma ms frecuente de salmonelosis causada por Salmonella Enteritidis. b. Septicemia Causada por todas las especies de salmonella, aunque las infecciones por S. choleraesuis, S. paratyphi y S. typhi son las que mayor frecuencia la producen. c. Fiebre entrica o ms conocida por fiebre tifoidea Causada por la S. typhi. Una forma leve de esta enfermedad, la fiebre paratifoidea: se produce por S. paratyphi A, Salmonella schottmuelleri (anteriormente conocida como S. paratyphi B) y Salmonella hirschlfeldi (conocida antescomo S. paratyphi C). d. Colonizacin asintomtica Las especies de Salmonella responsables de producir la fiebre tifoidea y paratifoidea se mantienen por la colonizacin del ser humano.

6. Mencione los mtodos bacteriolgicos que se emplean para el aislamiento de Salmonella

Los aislamientos de Salmonella se conservan: a. En agar semislido: (caldo nutritivo adicionado de agar al 0,8%) en viales de vidrio o de plstico, con cierre hermtico. La cepa se siembra por puncin, se incuba a 37C durante 18-24 horas. Los viales se almacenan a temperatura ambiente. b. A - 70C en caldo-glicerol: La cepa se siembra en caldo tripticasa de soya y se incuba a 37C durante 3 a 4 horas, a fin de que alcance la fase logartmica de crecimiento. En criotubos se coloca 400 l de glicerol estril y se agrega 1000 l del cultivo bacteriano. Se conserva en congeladora a 70C. Para ser utilizada para distintos propsitos se toma una porcin de la suspensin congelada con un palillo de madera y se subcultiva en un medio slido o lquido.

7. Enumere las especies de E. coli que son nocivas para los humanos.

Las especies nocivas son:a. E. coli enterotoxgena (ECET)b. E. coli enteropatgena (ECEP)c. E. coli enteroagregativa (ECEA)d. E. coli enterohemorrgica (ECEH)e. E. coli enteroinvasiva (ECEI).

8. Cmo actan las toxinas de E. coli enterotoxignica?

Coloniza el intestino delgado. Posee fimbrias que le permiten adherirse fuertemente y suministrar la toxina al epitelio. Produce 2 toxinas, una termolbil (TL) y otra termoestable (TE), o ambas a la vez. Las toxinas actan al desencadenar el sistema adenilciclasa y aumentar la secrecin de agua y electrlitos, pero sin producir lesin ni destruccin celular. La toxina TL est relacionada de forma funcional, inmunolgica y estructural con la toxina del clera. LT es funcional y estructural mente semejante a la toxina del clera, esta toxina est formada por una subunidad A y por cinco subunidades B idnticas. Las subunidades B se unen a receptores iguales a la del clera, as como a otras glucoprotenas de superficie en las clulas epiteliales del intestino delgado. Despus de la endocitosis, la subunidad A de LT-I se transloca por la membrana de a vacuola, la subunidad A tiene actividad difosfato adenosina (ADP)-ribosiltransferasa e interacciona con una protena de membrana (Gs) que regula adenil ciclasa. E l resultado es el aumento de las concentraciones de monofosfato de adenosina cclico (AMPc), con un incremento de la secrecin de cloro y disminucin de la absorcin de cloro y sodio, que se manifiesta con diarrea acuosa. Tambin la toxina estimula la secrecin prostaglandinas y citosinas inflamatorias. La toxina ST est relacionada con ciertas cepas de E. coli de Yersinia. El dao que produce es esencialmente funcional. La ST es una toxina pequea y monomrica que se une al receptor de transmembrana de la guanilato ciclasa, lo que provoca el aumento de las concentraciones guanosina monofosfato ciclasa (GMPc) y la posterior hipersecrecin de lquidos.

9. Explique el mecanismo por el que E. coli causa infeccin del tracto urinario.

10. Cules son las especies de Shigella que causan infeccin en el ser humano? Explique los factores de virulencia de esta bacteria.

De acuerdo con su antgeno O, el gnero se divide en cuatro grupos o especies que, a su vez, abarcan 43 serotipos (42, de acuerdo a algunos autores). La estructura antignica deShigellase caracteriza por presentar antgeno somtico O y pueden o no poseer antgeno K.Cada serogrupo puede subdividirse en tipos, sobre la base de variantes del antgeno O, y estos serotipos se designan mediante nmeros arbigos.Shigella dysenteriaese puede dividir en 1, 2, 3, 4, 5 siendo el 1 el ms patgeno. Todas las especies poseen una exotoxina, en mayor cantidadShigella dysenteriae1. Se caracteriza porque produce accin citotoxica, entetoxica y neurotoxica. Factores de virulencia. Shigellase adhiere a las clulas HeLa (lnea celular de cncer crvico-uterino humano), provoca que estas lo internalicen en su citoplasma y escapa del fagosoma para reproducirse en el citoplasma eucarionte. Posteriormente, se disemina a clulas vecinas, sin entrar en contacto con el medio extracelular. Plsmido de virulencia. Este plsmido de 220 kb es esencial en el proceso de invasin; las cepas que carecen de l son incapaces de promover su internalizacin, y cuando es transferido experimentalmente a otras especies, se obtienen cepas transformadas capaces de ingresar a las clulas HeLa. A este respecto, el plsmido de virulencia es fundamental en las siguientes funciones bacterianas: Produccin de adhesinas e invasinas. Diseminacin intercelular de la bacteria. Secrecin de diversos factores de virulencia. La regin plasmdica que determina la entrada bacteriana a la clula hospedadora codifica para la sntesis de las protenas Ipa(InvasionPlasmidAntigens), de su chapern molecular IpgC y un sistema de secrecin de las Ipa, conocido como Mxi-Spa(Membrane excretion ofIpa andsurface presentation of Ipa). Las protenas IpaA, IpaB, IpaC e IpaD son indispensables para la adherencia e invasin deShigella; IpaD funciona como la adhesina primaria, en tanto que IpaB e IpaC actan como invasinas, solamente se detectan en el medio extracelular despus del contacto entre la bacteria y la clula epitelial, y ambas conforman un complejo extracelular que promueve la internalizacin bacteriana. Por lo que se refiere al Mxi-Spa corresponde a un clsico sistema de secrecin proteica tipo III y manifiesta su relevante funcin hasta que han interactuado las superficies del bacilo y de la clula hospedera; adems, incluye la participacin de IpgC, para estabilizar a IpaB e impedir que sta interacte con IpaC en el citoplasma bacteriano, ya que ello impedira el traslado y la exportacin de ambas molculas.

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