recombinación homóloga recombinación sitio-específico recombinación
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Recombinación homóloga Recombinación sitio-específico
Recombinación
Cómo se inicia la Recombinación?
Enzimas involucradas en la generación de la cadena sencillacon el extremo 3´OH libre
RecBCD helicasa y nucleasaque forman el sustrato para RecA
sitio chi5´GCTGGTGG3´3´CGACCACC5´
Filamento de Rec A
Rec A
Ruv A se une a las cuatro hebrasdel intermediario de Holliday
Ruv B es hexámero con actividad de ATPasa que sirve de motor para su movimiento. El consumo de ATP permite girar a la molécula
Ruv C es una endonucleasa que resuelvelos intermediarios de Holliday
En eucariontes no se han encontrado homólogos para las proteínas Ruv, pero sí para la Rec A
Resolución de las uniones Holliday
Enfermedades humanas asociadas a problemas en los mecanismos de reparación
Reparación del ADN
Depurinación y desaminación de bases
100 al día
5000 al día
La naturaleza de las basespermite detectar mejor el daño
Citocinas metiladas al desaminarse producen timina
Dímeros de timina
Exposición a radiacionesultravioleta
Mutaciones que pueden producir los errores en el ADN
MECANISMOS DE REPARACION
1- Fotoreactivación (ruptura de los dímeros de pirimidinas por acción de una fotoliasa (phr) activada mediante luz visible).
2- Escisión + reparación
* Reparación de nucleotidos aislados por lesión u.v: necesita la otra hebra como templado (hasta 30 bp)
Intervienen las endonucleasas uvrA,B,C y la helicasa uvrD
* Reparación de bases modificadas (sitiosAP, alquilación o metilación)
3- Reparación post- replicativa
* Reparación del apareamiento (“mismatch”): una metilasa reconoce DNA recientemente replicado (dam) e intervienen las proteínas “mut” (helicasas, etc)
* Reparación por recombinacion
Acción de la fotoliasa
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Reparación por escisión de bases
Reparación por escisión de nucleótidos
uvrABC (excinucleasa)
Mecanismos de reparación del ADN
Reparación por escisión en bacterias y en humanos
Mecanismos de reparación cuando las dos cadenas se dañan
Reparación por recombinación
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Reparación post-replicativa
Cómo distinguir la cadena molde cuando se repara un error?
Respuesta SOS
RecA está involucrada en activar la respuesta SOS
La recombinación puede involucrarla formación de heteroduplex o derecombinantes
Actividades de RecA