Javier de Jess Lin Gonzlez Matricula: A01128940 Curso: BT2005.1 Enzimologa y Biocatlisis. Dr. Julin Alejandro Yunes Rojas. Extraccin y purificacin de la enzima nmero 16 en ProtLab.

Caractersticas: Actividad de la protena es estable por muchas horas a temperatura hasta 40C y a un pH entre 5.5-9.5 Paso 1. Fraccionamiento con sulfato de amonio.

Paso 2. Filtracin en gel (Sephacryl S-200 HR)

Paso 3. Cromatografa de intercambio inico. DEAE-celulosa, Buffer pH 7, gradiente salino 0.01-1 M

Paso 4. SDS-Page 2

Cuadro 1. Resultados de la extraccin y purificacin de la enzima 16 Paso Fraccionamiento con sulfato de amonio 50% Protena total (mg) 246.1 Enzima total (U) 9200 enriquecimiento 2.1 Rendimiento % 100 Costo (personah/100U) 0.02 Observaciones. precipito 0% de la actividad enzimtica y 51.8% de la protena; continuo con el supernadante Se observ actividad enzimtica entre las fracciones 85 y 102 Se observo actividad enzimtica entre las fracciones 40 y 46. Las fracciones fueron unidas y diluidas en un factor de 2 Solo se observo una protena, se confirmo con prueba inmunolgica. Peso molecular. 15 k. PI 6.5-7

Filtracin en gel (Sephacryl S-200 HR)

54.5

8593

8.8

93.4

0.10

Cromatografa de intercambio inico. DEAEcelulosa, Buffer pH 7, gradiente salino 0.01-1 M

42.9

8521

11

92.6

0.27

SDS-Page 2