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7/28/2019 Pruebas inmunolgicas.docx

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Pruebas inmunolgicas

Objetivo

Detectar infecciones a travs de las diferentes pruebas a realizar.

Reacciones Febriles

Material y equipo

Placa de HaylanPipeta de 100 microlitrosPalillosPuntas amarillasAplicador

Material biologico

Sangre centrifugada (suero)

Reactivos

Anfgenos Febriles

Procedimiento

Anotar el antgeno correspondiente en la placa de vidrio.


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Depositar en cada cuadro 0.02ml de suero del paciente para cada uno de losantgenos que se vayan a utiliza.

A cada gota de suero aadir una gota de cada antgeno.

Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador para cada antgeno.


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Observar la aglutinacin con ayuda de una lmpara.

Cuando hay reaccin positiva se repite la tcnica con diluciones las cuales se obtienencon el uso de las siguientes cantidades del suero en la siguiente forma.

40 ul --------------- 1/40

20 ul---------------- 1/80

10 ul----------------1/160

05 ul----------------1/320

PROTEINA C REACTIVA

Tcnica

Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de la

placa.


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A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al

ltimo una gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se

comparan las la muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si

presenta similitud con el positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no

habr aglutinacin.


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FACTOR REUMATOIDE

Tcnica

Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de

la placa.

A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al ltimo una

gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se comparan las la

muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si presenta similitud con el

positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no habr aglutinacin.


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ANTIESTREPTOLISINA

Tcnica

Se toman 100 microlitros de suero y se depositan en los tres crculos superiores de laplaca.

A uno se le agrega una gota de ltex, al otro una gota de control positivo y al ltimo una

gota de control negativo. Se revuelven bien con distintos palillos y se comparan las la

muestra del ltex con las del control positivo y negativo, si presenta similitud con el

positivo habr aglutinacin, y si es similar al negativo no habr aglutinacin.


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PRUEVA V.D.R..L

Tcnica

Se toman 100 microlitros de suero y se depositan sobre un porta y se le agrega

una gota de del reactivo V.D.R.L se observa a microscopio para ve4r si hay aglutinacin

lo que nos indicara que es positivo.

PRUEVA INMUNOLOGICA DE EMBARAZO (PIE)

Tcnica

Se centrifuga la orina a 3500 r.p.m. durante 5min.


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Despus se toman dos gotas del sobrenadante de la orina o sangre y se agregan a la

cinta reactiva

Se esperan 5 min y si la cinta reactiva marco los lneas es un resultados positivo y si

solo marca una 1 es negativo en caso de que no marque nada se se considera nulo y se

repite la prueba


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DETERMINACION DE TIPO SANGUINEO EN TUBO

Material y equipo

Tubos de ensayo Pipetas pasteur Rotulador de Vidrio Centrifuga Gradillas

Material Biolgico

Muestra de sangre en tubo lilaReactivos

Anti-A Anti-B Anti-AB Solucin salina

Tcnica

El primer paso es realizar el lavado de hemates, para esto aadimos un 1ml de sangre y

completamos el tubo con solucin salina y agitamos. A los hemates del tubo les

aadimos una cantidad suficiente de solucin salina para obtener una suspensin al

2%.

Centrifugamos a 2000 r.p.m. durante 4 min. y decantamos el sobrenadante.


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Se repite otras dos veces estos mtodos para obtener un lavado de hematies

Rotular tres tubos de ensayo limpios con las letras A, B, AB y se aade a cada tubo una

gota de los hemates, dos gotas de anti-A al tubo A, anti-B altuboB y anti-AB al tubo AB.


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Se centrifugan los tubos durante 1 min a 1000 r.p.m.

Y se sacan y se observan los resultados


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ESPERMATOBIOSCOPIA

Fundamento: Suele formar parte de la investigacin cientfica completa de unaprueba de infertilidad, as como las deformaciones que pueden presentar losespermatozoides como son: cabeza de alfiler, cabeza gigante, forma alargada, cabeza

doble, media cabeza, etc...

El anlisis se forma en varios aspectos como son medir el volumen, la viscosidad, elcolor, tiempo de licuefaccin el pH y observar las anormalidades que presentan.

MATERIAL:

Microscopio

Vaso para la toma de muestra

Regla

Portaobjetos

Caja de Neubauer

Probeta

Pipeta de glbulos blancos o rojos

Cintas reactivas

TCNICA:

Se procede a que el paciente done la muestra

Se mide el volumen con ayuda de un matraz


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La viscosidad se mide con ayuda de dos portas y una regla

El tiempo de licuefaccin es el tiempo que tarda la muestra en volverse lquidacompletamente.


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Con ayuda de una cinta reactiva se medir el pH, este mtodo esta indicado en elfrasco de las cintas reactivas (cmo medir el pH).

Posteriormente con ayuda de una pipeta de glbulos blancos o rojos, tomaremos unpoco de la muestra y se depositar en la cmara de Neubauer y se proceder a contarlos


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TIEMPOS DE COAGULACION ( TP y TPT )

MATERIAL

1.- Mechero de bunsen2.-Cristalizadores3.-Tripies4.-Telas de alambre con asbesto5.-Termmetros6.-Conometros7.-Reactivo para tiempos de coagulacin8.-Pipeta automtica de 10- 100 L9.-Pipeta automtica de 100-1000 L10.- Puntillas azules y amarillas11.- Tubos de vidrio

MMATERIAL BIOLOGICO

1.- Sangre con citrato de sodio

TECNICA DE TIEMPO DE PROTROMBINA

TECNICA:

1.-Centrifugar el tubo a 3500 RPM por 5 min. Marcar tubos de ensay conmuestra y reactivo.


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2.-Poner agua en el cristalizador y ponerla a calentar con el mechero,medir con el termmetro que la temperatura este siempre a 37C

para poder incubar aqu los tubos para los tiempos de coagulacin.

3.-Colocar en el tubo de muestra 100l se suero y ponerlo a incubar a 37Cpor 5 min, hacer lo mismo con el reactivo pero en ves de 100l se

colocara reactivo necesario para correr todas la muestras.

4.-Ya incubados los dos se colocaran 200l de reactivo de TP al suero, unavez que el reactivo entre en contacto con el suero tomar el tiempo en que

dilata enformarce el coagulo en el tubo con el cronometro.


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TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ( TPT)

TECNICA:

1.-Ya con el suero centrifugado, marcar tubos de ensaye con, muestra ycloruro de calcio. Colocar en un tubo 100l de suero y 100m de reactivo

para TPT y ponerlo a incubar a 37C por 5 min.

2.-En el tubo de cloruro de calcio colocar cloruro suficiente para todas laspruebas y incunbarlo a 37C por 5min.

3.-Una vez que el cloruro de calcio y la muestra con reactivo para TPT estnincubados se le colocaran 100l de cloruro de calcio al tubo en que esta lamuestra con el reactivo, una vez que entren en contacto el cloruro de


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calcio y la muestra se tomara el tiempo en que se forma el coagulo

en el tubo con el cronometro.

VALORES NORMALES:

TP 11.5 13.5 Seg.

TPT 25 40 Seg

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