prueba de compatibilidad pretransfusional - ispch.cl pruebas de compatibilidad... · universidad de...

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología Médica

Prueba de Compatibilidad Pretransfusional

Leonor Armanet BernalesUniversidad de Chile


Abordaremos

• Riesgos asociados a la transfusión de GR• Concepto y elementos que incluye• Prueba cruzada o crossmatch

o Métodos

o Modalidades

o Control de Calidad

• Control de calidad y seguimiento• Algunos problemas


Frecuencia de Reacción Adversa a la Transfusión (RAT)

Frecuencia de Reacción Adversa a la Transfusión (RAT)

• Generalmente no ocurren, cuando aparecen son benignas.

• Algunas pueden causar Morbilidad severa o mortalidad

Síntomatología a menudo muy similar


RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA

Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85

RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA

Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85

Nº de muertes (%) Causa Comentarios159 (48.5%)

23 (7.0)55.5%

Hemólisis inmune agudaHemólisis retardada

Principalmente incomp. ABOMuerte de causa múltiple,pero asociada a nuevosanticuerpos: Rh, Kell, Duffy yKidd

73 (22.2) Enf transmisibles portransfusion

Hepatitis NANB, B, VIH

33 (10.1) Edema agudo pulmonar26 (7.9) Contaminación bacteriana Bacterias Gram + y Gram -

aeróbicas y anaeróbicas14(4.2) Anafilaxis, Hemólisis

externa, GVHD

Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología Médica182 Muertes debida a hemólisis postransfusional182 Muertes debida a hemólisis postransfusional

Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990

Nº de muertes Grupo ABO delReceptor

Grupo ABOtransfundido

82208611118

OOOAABB

Desconocido

AB

ABB

O*A

ABDesconocido

14 Diferentes causas Información insuficiente8 Acs diferentes a ABO 5 anti-Kell

1 anti-e1 anti-Fya1 anti-Jka+b

*Sangre total

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaRIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*

BJM 1999;319:16-19 (3 July)RIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*

BJM 1999;319:16-19 (3 July)

62 ABO incompatible:Error de identificación en cualquier etapa del proceso3 muertes

4 bacterianas7 virales1 malaria

164 hospitales341 casos en 6 millones

analizados (en 2 años)22 muertes

*

*

*

*

*

*Serious Hazards of Transfusion

52%

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaReacciones transfusionales

hemolíticas tardías

• 8 muertes

o 53% anti-Jka/Jkb

o 38% anti-Rh

• 14% errores podrían haber sido evitados

mejorando los procesos de laboratorio. o Error humano


Calidad y Seguridad Transfusional

• Regulaciones• Recomendaciones internacionales (OMS,AABB,ISBT, otras)

• Normativas, Estándares, Orientaciones Nacionales.o (Servicios de Sangre, Bioseguridad)

• Controleso Control de los procesos de toda la cadena transfusional.

o Control de Calidad de los procedimientos.Garantía de Calidad


• Riesgo: 1% por unidad transfundida (Issit).o Pacientes generales: 3%o Politransfundidos: 35%o Anemia Falciform: 35%.o Talasémicos 10%o >60% receptores crónicos (otra serie)

• Puede ocurrir por transfusión, embarazo o aborto

• 2ª exposición al mismo ag � rápida respuesta imune � destrucción g.rojos transfundidos.

Prevalencia de Sensibilización de Receptores


Prevalencia de Inmunización• 3% - 8.4% receptores eventuales

• Persistencia del Ac (26% a los 10 meses hasta años)o Anticuerpos Kidd: < tiempo de detección

• Respuesta inmune en 7 dias o Anti-Jka en 4 dias

• 1 – 2% de los potenciales receptores tendrán aloanticuerpos significativos diferentes a anti-Do 75% de dichos acs. con especificidad Rh o Kell.


Anticuerpos clínicamentesignificativos

• Causan destrucción de los GR incompatibles

• Cruzan la placenta y causan EHRN

• Importante recordar que la unión de anticuerpos a los eritrocitos no les causa daño directo

• Respuesta es heterogénea, depende de múltiples variables


Factores que influencian la destruccióninmune de GR

1. Concentración plasmática y avidéz del Ac.

2. Rango térmico del Ac.

3. Clase y subclase de la inmunoglobulina

4. Densidad del Ag. en la membrana del GR

5. Volumen de eritrocitos transfundidos

6. Presencia de Ag en el plasma

7. Actividad del sistema fagocitario mononuclear

8. Sensibilidad de eritrocitos al complemento

9. Grado de activación del complemento


Importancia clínica de los Alo Acs• Transfusión solo tomado en cuenta tipificación ABO y Rh: 98% de seguridad

• Acs. siempre asociados a potenciales riesgos

transfusionales:o ABO, Rh, Kell, Duffy, Kidd, SsU, Di,

• Acs. a veces asociados a riesgo transfusional:o Lea , MN, P1, Lutheran (Lua, Lub), Cartwright ( Yta), Sda, Bg(HLA), Ge, Vel

• Rara vez asociado a riesgo transfusional:o Leb, Chido/Rodgers, York (Yka), Sda, Xga, Bg, HTLA, Csa, Kna, JMH, Jra


Inmunogenicidad relativa de antígenoseritrocitarios

D> K> c> E> k> e> Fya > C> Jka > S> Jkb > s


Test de Compatibilidad PretransfusionalTest de Compatibilidad Pretransfusional

• Serie de procesos y procedimientos cuyo objetivo final es asegurar el mejor resultado posible de una Transfusión sanguínea. Ausencia de RPTH

• Su aplicación es para aumentar la seguridad transfusional, ya que no pueden garantizar una sobrevida normal de los GR transfundidos.


Elementos de la P de C1. Indicación de Transfusión 2. Identificación del Receptor

1. En la muestra2. En la solicitud3. Del receptor

3. Análisis a realizar a la muestra del R1. Características y condiciones de la muestra2. Grupo ABO y RhD3. Detección de Acs Irregulares4. Identificación de Anticuerpos5. Comparación con resultados previos

4. Selección de la unidad a transfundir1. Confirmación ABO y RhD del Componente

5. Prueba Cruzada o Crossmatch1. Serológico2. Electrónico

6. Etiquetado de componente a transfundir

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaIdentificación del Receptor

Dispositivos para mejorar identificación del paciente

Vox Sanguinis (2006) 91, 97–101


Identificación pre transfusional• Recordar:

o La mayoría de las RPTH ocurren por una errada identificación del paciente o de la Unidad a transfundir

• Cada SS debe:o Establecer e implementar el procedimiento para una identificación segura del paciente, muestra y producto

• Puede ser solamente de lectura visual o visual y electrónica

• Uso de N° único de identificación• Definir sistema de ID para pacientes inconscientes• Datos de ID en la muestra (EJ:código de barras)


La muestra

• Correctamente tomada, etiquetada y apta para el análisis que se va a realizar. o Plasma (EDTA), Suero o Volumen

o Carácterísticas: definir limitaciones y excepciones

• Presencia de hemólisis visible• Presencia de lipemia• Presencia de un “buffy coat” anormalmente grande• Presencia de coágulos• Bajo volumen• Una razón célula:plasma, inesperadamente grande

• Tiempo:


Dos Modelos

Paciente transfundido dentro de: La muestra se debe tomar no más de:

3 – 14 días 24 horas antes de la transfusión

15 – 28 días 72 horas antes de la transfusión

29 días - 3 meses 1 semana antes de la transfusión

o Pctes transfundidos o embarazadas en los últimos 3 meses: NO MAS DE 3 DIAS al momento de la transfusión, para reflejar el estado inmunológico del paciente

o Sin esta restricción para otro tipo de pacientes

o Pctes sin historia clínica o transfusional demostrable, usar criterio de 3 días


¿Cuánto tiempo guardar la muestra pretransfusional?

• Almacenar por 7 días en refrigeración (AABB)

• Otras referencias 3 días

• Muestra del donante (tubuladura)

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaSelección de la unidad a

transfundir

• ISOGRUPO• Aspecto

o Hemólisis, contaminación, aire

• Circuito cerradoo Indemnidad del equipo

o No abierto

• Días de almacenamiento, según condición del receptor

• Tipo de paciente: Pediatrico, adulto…

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaComponentes compatibles para transfusión

1ª opción: ISOGRUPO

Grupo del receptor

Plasma / crioprecipitado compatible

GR compatibles

Plaquetas compatibles 1ª opción

Plaquetas compatibles 2ª opción

A A, AB A, O A, AB B, O

B B, AB B, O B, AB A, O

O O, A, B, AB O O A, B, AB

AB AB AB, A, B, O AB A, B, O

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaTiempos de prueba estimado y riesgo

de los diferentes métodos

Procedimiento Tiempo que requiere, desde recepción de

solicitud a término de pruebas compatibilidad

(min)

Riesgo de hemólisis, %

Inmediata, sin pruebas 5 > 5

Solo ABO y Rh D 5 a 10 2-5

Type and screen 30 a 45 < 0,1

Type and screen +prueba cruzada

serológica

30 a 45 < 0,1


25

Preparación de los hematíes de la tubuladura del componente

• La principal dificultad reside en lograr la identificación segura

de la tubuladura y del tubo secundario utilizado en el test, a

partir del número en código de barra del producto: Recontrol

ABO y RhD.

• Preparación de los GR: lavado con PBS – resuspensión 5%.

• Mantener circuito cerrado del componente por seguridad.

Utilizar dispositivos limpios/ desechables para cortar la

tubuladura.

• Mantener la cadena de frío.


Prueba Cruzada o Crossmatch• Es una investigación de anticuerpos irregulares (TAI)

“personalizada”, se usan los GR del D y plasma del R.• Controla compatibilidad ABO entre R y D, de forma inmediata.

• El plazo de validez de este análisis es de 72 horas.

• Hay que disponer de:o POE, CC con aplicación y programa computacional para cada test

o Reactivos aptos y suficientes

o Equipos aptos y suficientes

o Material apto y suficiente


27

Ejecución técnica

• La prueba cruzada se efectúa en iguales condiciones técnicas que el TAI, utilizando un suero AGH humana poliespecífico, con incubación a + 37°C.o Si reacción positiva >>> componente incompatibleo Si reacción negativa >>> componente compatible

• Pd ser en tubo o en gel. • Pd ser Manual o automatizada

• Se puede usar LISS para disminuir tiempo de incubación y aumentar sensibilidad.


Modalidadestécnicas

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaMétodo type and screen

(Clasificación y Detección)

• Realizar ABO, Rh D y TAI a todo potencial receptor de transfusión

• Guardar la muestra para crossmatch por posible transfusióno En caso de TAI (-) � Se transfunde componente isogrupo ABO / Rh D, con

crossmatch salino. Muy rara vez se requiere transfusión tan urgente como para no hacer clasificación ABO / D � toma 5 – 10 min.

o Mantener un stock suficiente de GR para pacientes que se operan con esta modalidad.

o En caso de TAI positivo � identificar los anticuerpos, y PC completa

o Si hay anticuerpos significativos, seleccionar unidades antígeno negativo.


• Un type and screen es válido hasta por 72 horas (3 días), si el paciente no ha recibido una transfusión o no ha estado embarazada en los últimos 3 meses.

Método type and screen(Clasificación y Detección)


31

Uso de Prueba Cruzada completa

• Obligatorio en :

o Paciente que haya desarrollado un aloanticuerpo anti eritrocitario : TAI +

o Recién nacido con un TAD positivo – uso de muestra de la madre.

o Recién nacido cuya madre está aloinmunizada

o Pacientes con AHAI

• Recomendado en (puede usar T/S):

o En pacientes no transfundidos

o En pacientes con TAI negativo


MSBOSMaximum Surgical Blood Order Schedule

• Definido por Comité Hospitalario de Transfusión.• Corresponde la lista de cirugías electivas más comunes, con el número máximo de unidades que deben estar disponibles para la operación.

• Se recomienda para procedimientos que requieren poca sangre (menos de 0.5 unidades de glóbulos rojos/ paciente/ procedimiento).

• Disminuye costos en PC• Disminuye reservas innecesarias de unidades

• Preparar con T/S + PC salino el número específico de unidades requeridas de acuerdo al MSBOS.

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaDespacho electrónico

Electronic cross match

• Paciente con type and screen previo en 2 ocasiones. o Si ambos son negativos, está registrado en el sistema y no ha sido transfundido en ese periodo, se transfunde con componente ABO compatible elegido por computación y no se le hacen más pruebas.

• Es muy rápido y ahorra tiempo.


Esquemas para Test Pretransfusionales

AABB


Casos complejos

• Sueros conteniendo Acs. múltiples• Anticuerpos contra antígenos de alta frecuencia• Transfusión en AHAI

“GR raros” es la unidad de componente sanguíneo negativo para los antígenos de alta frecuencia y

mezcla de antígenos mas comunes.

(AABB)

Raro:< 1/5.000 Difícil manejo: <1/100


Casos complejosAc contra Ag de alta frecuencia

• Difícil identificación

• Difícil encontrar la GR compatibles

Ac contra Ag de baja frecuencia

• Algunas veces de difícil identificación

• Fácil encontrar la GR compatibles

Ac Múltiples

• Algunas veces de difícil identificación

• Muchas veces difícil encontrar GR compatibles


39

Antígenos “raros” en panel de ID


SELECCIÓN DEL MEJOR MÉTODO

• Uso de metodologías sensibleso Deben ser tan buenas como el test de AGH con LISS (LISS-IAT) en el uso de rutina. (Gold Standard)

o Entregar resultados reproducibles

o Costo efectivas

o No detectar Ac. sin importancia clínica (crioaglutininas)

o Tubo, Gel, Microplacas, molecular, etc.

• Automatización de procesos permiteo Mejor utilización del tiempo, recursos humanos y económicos

o Lectura objetivada


Procedimiento para la validar técnicas inmunohematológicas

• Lectura y análisis de insertos o Tubo, columna o microplaca

• Sensibilidad: o Usar un panel de Acs. débiles (no usar Acs. diluidos ya que tienen una alta afinidad por el Ag. y

son fácilmente detectados). Si se puede cuantificar el anti-D, debe ser 0,1 - 0,2 iu/ml o 20 - 40 nanogramos/ml

o Enfrentarlos a un panel de GR heterocigotos para los Ags. Importantes

• Validación de resultados negativos (tubo):o Usar GR sensibilizados con IgG (1+/2+)

• Determinar la sensibilidad del test LISS-AGH:o Realizar tablero de ajedrez usando anti-D, anti-K y/o anti-Fya

• Estudio de falsos positivos por AGH:o Realizar pruebas cruzadas usando suero fresco, permite detectar exceso de anti-C3d en el

sistema. (métodos automatizados utilizan suero, anti-Jka y anti-Jkb se detectan por la presencia de un Ac. Anti-cadena liviana)


• Estudio “ rutinario” en paralelo (gran Nº de tests):o Conocer las fortalezas y debilidades del sistema en el trabajo diario del laboratorio

o Determinar incidencia de reacciones falsas positivas y negativas.

• Estudio del efecto de dosis:o Comparar reactividad de Acs. Débiles frente a GR homo y heterocigotos para varios Ags.

Procedimiento para la validar técnicas inmunohematológicas


CONCLUSIONES

• NO EXISTE UN MÉTODO UNICO QUE SEA CAPAZ DE DETECTAR TODOS LOS ACS. DE IMPORTANCIA.o ELEGIRLO EN BASE A UN ANÁLISIS DE CALIDAD Y COSTO-BENEFICIO EN CADA INSTITUCION.

o MUCHA DEDICACION Y TRABAJO

• EDUCACION Y CAPACITACION DEL PERSONAL DEL SS Y DEL HOSPITAL

• Indicación de la Transfusión• Pesquisa, manejo y estudio de RPT

• Comité Hospitalario de Transfusiones


Muchas Gracias


• Grupo internacional de serologistas y científicos.

• Programa de intercambio de Sueros, Células y Fluídos Raros.

• Inclusión del participante en el programa.

• Los participantes pueden pedir sueros/ hematíes de interés

directamente en la página del programa.

• Los participantes deben enviar anualmente sueros y/o

hematíes en la pagina del programa para los que puedan

interesarse.

S.C.A.R.F.(Serum Cels and Rare Fluids Exchange Program)

http://scarfex.jove.prohosting.con/

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnología MédicaSCARF – Programa internacional

de cambio de muestras

prueba de compatibilidad pretransfusional - ispch.cl pruebas de compatibilidad... · universidad de...

Documents