El sistema Primo Vascular

Los efectos teraputicos de la acupuntura estn siendo cada vez ms aceptados en todo el mundo , y es cada vez ms imperativo elucidar el mecanismo de estos efectos en conceptos y terminologa de la ciencia moderna.

Por lo tanto, debemos preguntarnos qu tienen de especial los puntos de acupuntura y los canales o meridianos? y que los distingue a de otras zonas vecinas de la piel? Si hay caractersticas especiales, cmo funcionan la puncin u otros mtodos de estmulo aplicados en los puntos de acupuntura?

Para responder a estas preguntas, hay que investigar la estructura anatmica de los puntos de acupuntura y los canales y colaterales descritos por la Medicina Tradicional China.

Heine observ que en los sitios de los acupuntos existe un compuesto de vasos sanguneos y nervios dentro de una hoja del mesnquima laxo que perfora la fascia superficial que separa el tejido subcutneo del tejido muscular. - Heine H. Anatomical structure of acupoints. J Tradit Chin Med 1988;8:20712. - Heine H. Morphologie der ohrakupunkturpunkte. Dtsch Zschr Akup 1993;36:99103. [In German] - Heine H. Der akupunkturpunktein meridianorgan. Dtsch Zschr Akup 1996;39:7580. [In German]

He demostr una estructura similar al meridiano o canal de acupuntura por la cadena facia-musculo-tendn del Canal del pulmn, lo que fue apoyado por otros informes .

Estructuralmente, los puntos de acupuntura son haces neurovasculares ,uniones neuromusculares -Liu KY, Varela M, Oswald R. The correspondence between some motor points and acupuncture loci. Am J Chin Med 1975;3:34758. -Gunn CC, Ditchburn FG, King MH, Renwick GJ. Acupuncture loci: a proposal for their classification according to their relationship to known neural structures. Am J Chin Med 1976;4:18395. - Dung HC. Anatomical features contributing to the formation of acupuncture points. Am J Acupunct 1984;12:13943. y varios tipos de terminaciones nerviosas sensoriales -Ciczek LSW, Szopinski J, Skrzypulec V. Investigations of morphological structures of acupuncture points and meridians.J Trad Chin Med 1985;5:28992. - Wang K, Liu J. Needling sensation receptor of an acupoint supplied by the median nerve-studies of their -electrophysiological characteristics. Am J Chin Med 1989;17: 14555. Li A, Zhang J, Xie Y. Human acupuncture points mapped in rats are associated with excitable muscle/skin-nerve complexes with enriched nerve endings. Brain Res 2004;1012: 1549.

Langevin observ que ms del 80% de los puntos de acupuntura y 50% de las intersecciones de los meridianos en el brazo parecen coincidir con planos de tejido conectivo Inter o Intra muscular -Langevin HM, Churchill DL, Cipolla MJ. Mechanical signaling through connective tissue: a mechanism for the therapeutic effect of acupuncture. FASEB J 2001;15:227582. -Langevin HM, Churchill DL, Wu J, Badger GJ, Yandow JA, Fox JR, et al. Evidence of connective tissue involvement in acupuncture. FASEB J 2002;16:8724.].

Jones aplic imgenes por ultrasonido a la investigacin de los acupuntos -Jones JP. Ultrasonic acupuncture and the correlation between acupuncture stimulation and the activation of associated brain cortices using functional magnetic resonance imaging. Bulletin Sci Tech Soc 2002;22:36270 y Ifrim trat de tinturar puntos de acupuntura y meridianos de acupuntura con Azul Alcian -Ifrim-Chen F, Ifrim M. Acupuncture and meridians: a histochemical study. Ital J Anat Embryol 2005;110:517.28.

Una revisin completa de la caracterizacin anatmica del sistema de acupuntura se puede encontrar en la revisin hecha por Van Wijk Van Wijk R, Soh KS, Van Wijk EPA. Anatomic characterization of acupuncture system and ultra-weak photon emission. Asian J Phys 2007;16:44374.29.

Tc 99 en Pc6

Tc 99 eminencia tenar

Isabel Giralt

Tc 99 corazn

Isabel Giralt

Hasta ahora, ninguna investigacin ha revelado ninguna estructura anatmica que corresponda a puntos de acupuntura o canales y colaterales de acupuntura que no se hayan descrito antes en la biologa o medicina occidental.

En 1962, el Instituto Nacional para la Investigacin de los Meridianos de Acupuntura, dirigido por Kim Bong Han, public una serie de cinco informes sobre la estructura anatmica y el estudio fisiolgico de los puntos de acupuntura y canales y Meridianos de la Medicina Tradicional China todos ellos en coreano -Kim BH. Study on the reality of acupuncture meridians. J Jo Sun Med 1962;9:513. -Kim BH. On the acupuncture meridian system. J Jo Sun Med 1963;90:635. - -Kim BH. The Kyungrak system. J Jo Sun Med 1965;108:138. -Kim BH. Sanal theory. J Jo Sun Med 1965;108:3962. -Kim BH. Sanal and hematopoiesis. J Jo Sun Med 1965;108: 16. y una revisin en Ingls disponible en la mayora de la bibliotecas universitarias Kim BH. On the Kyungrak system. J Acad Med Sci DPR Korea 1963;90:141.35].

En 1962 Bonghan Kim de la Repblica Democrtica de Korea propone la existencia de un nuevo sistema circulatorio cuyos conductos estn vinculados ya sea a uno o ambos extremos de un corpsculo y se encuentran distribuidos por todo el cuerpo, no slo de los seres humanos, sino de todos los vertebrados.

El sistema circulatorio propuesto por Bonghan est compuesto por varias sub-redes ubicadas en diferentes lugares dentro del cuerpo. Estas sub-redes se pueden clasificar como:

1.- Un corpsculo/ducto de Bonghan superficial localizado en la piel, 2.- un corpsculo/ducto de Bonghan intravascular que corre a lo largo del interior de las grandes venas, arterias y vasos linfticos y se encuentran flotando en el torrente sanguneo / linftico, no adherido a la pared del vaso, 3.- un corpsculo/ducto de Bonghan extravascular que corre a lo largo del exterior de los vasos sanguneos grandes, 4.- un corpsculo/ducto de Bonghan de la superficie de los rganos que se extiende sobre la superficie de varios rganos internos 5.- un corpsculo/ducto de Bonghan Intra rgano que se encuentra dentro de varios rganos internos, y 6.- un corpsculo/ducto de Bonghan neural que existe en el interior del cerebro y la mdula espinal y corre a lo largo del exterior de los nervios perifricos.

Bong Han Kim plante que por los conductos fluye un liquido y realiz el anlisis correspondiente, entre los componentes ms importantes que logr identificar se encuentran cido hialurnico, hormonas neurotransmisoras ( adrenalina y noradrenalina), aminocidos, y nucletidos libres.

Bong Han describi adems unas micro clulas a las que llam 'Sanal, las que consisten en un cuerpo esfrico o de forma ovalada con un dimetro de 1-2 micras y que contienen uno o dos cromosomas y est delimitada por una membrana delgada.

Bong Han Kim afirm que el 'Sanal' desempea un importante papel en la regeneracin de los tejidos daados.

Hasta hace poco, las afirmaciones de Bong Han Kim no podan ser reproducidas o confirmadas principalmente porque la frmula del colorante de tincin, esencial para el rastreo y la identificacin de los conductos no fue revelada. As, su trabajo ha sido ignorado durante largo tiempo, y no ha habido ningn seguimiento o investigacin, excepto en el caso de la anatomista japons Fujiwara Fujiwara S, Yu SB. Bonghan theory morphological studies. Igaku no Ayumi 1967;60:56777. [In

Japanese], que era, de hecho, capaz de reproducir parcialmente los resultados de Bong Han Kim, sin embargo, su trabajo tampoco atrajo mucha atencin.

Hasta donde sabemos, slo ha habido una serie de estudios histolgicos de los puntos de acupuntura que niegan las afirmaciones de Bong Han. Kellner examin a fondo la piel en los puntos de acupuntura y concluy que no hay una estructura como la descrita por Bong Han Kellner G. Bau und Funktion der Haut. Dtsch Zschr Akup 1966;15:131. [In German] Sin embargo, hay que ser cuidadosos al sacar conclusiones a partir de una observacin basada en un mtodo histolgico nico, porque ninguno puede revelar completamente todas las estructuras en un tejido. Es esencial utilizar un tinte adecuado para visualizar una nueva estructura como es un conducto de Bong Han.

Desde el ao 2002, se ha realizado una intensa investigacin del sistema de Bong Han por el Laboratorio de Fsica Biomdica de la Universidad Nacional de Sel, y apoyado por el Ministerio Coreano de Ciencia y tecnologa a travs del Programa Nacional de Investigaciones de Laboratorio.

Un corpsculo Bonghan ( BHC) y un conducto de Bonghan ( BHD) corresponden a un punto de acupuntura y un meridiano de acupuntura respectivamente.

Imagen estreo microscpica de canalculos unidos a un corpsculo. La rama del canalculo est especialmente bien desarrollada y el corpsculo se encuentra conectado a cuatro de ellas. (Usualmente los corpsculos se unen a dos. La imagen se obtuvo teniendo el hgado como fondo.)

ADN de microcelula de Bong Han evidenciada mediante tincin TEM de seccin ultrafina, la mayor parte supone que es de microncleos "N", teidos con naranja de acridina; varios grnulos de 250 nm de tamao y muchos grnulos mas pequeos dentro de la membrana; todos grnulos estn rodeados por una membrana lipdica con denso contenido de electrones,

barra de escala, 500 nm

El primer objetivo para la deteccin fue el conducto de Bong Han intravascular en los vasos sanguneos grandes y los vasos linfticos de conejos, ratas y ratones. A continuacin, se busc el conducto de Bong Han sobre la superficie de rganos internos y dentro de los ventrculos cerebrales y en el canal central de la mdula espinal. En la actualidad, est en desarrollo un mtodo para identificar Conductos de Bong Han en la piel.

(B) Conducto de Bonghan (flecha) despus de la tincin con azul de metileno. (C) Corpsculo de Bonghan (punta de flecha) en el intestino delgado relacionado con los conductos de Bonghan (flechas).

(A) Conducto de Bonghan (flecha) en la superficie de intestino grueso; conducto intacto, estructura mvil semitransparente.

corpsculo y conductos contrastados usando azul de metileno

Imgenes estereomicroscpicas de los conductos y corpsculo de Bonghan en la superficie de los rganos internos de conejo.

Estructura histolgica del conducto de Bonghan.

(A) Microfotografa de fusin de contraste de fase e imgenes fluorescentes de un conducto; conducto formado por haz de varios conductillos (flechas) con ncleos en forma de varilla caractersticos teidos con DAPI (azul), clulas inmunes (puntas de flecha) en la superficie de conducto; barra de escala, 50 m.

(B) Microfotografa de varios conductillos en seccin transversal a travs del conducto, vista histolgica general del conducto, la barra de escala, a 10 micras.

Propiedades estructurales del conducto de BH comparadas con capilares sanguineos y linfticos. E= endotelio, L= lumen; AC= clulas accesorias; CBL= lamina basal completa; IBL= lamina basal incompleta

Enfermedad a lo largo del Canal del Rin Shaoyin del pie

Se han realizado una serie de investigaciones para establecer la novedad de los BHD y BHC y dilucidar sus detalles. Adems de la tincin convencional y procedimientos de microscopa de luz, se han utilizado instrumentos y tcnicas que no estaban disponibles en los tiempos de Bong Han -Microscopia confocal de Lser de barrido, -Microscopa electrnica de barrido(SEM), crio-SEM, -SEM enfocada en haz inico y microscopa electrnica de transmisin de alto voltaje (TEM) , -microtomografa de rayos X y microscopa de fuerza atmica para estudiar la ultraestructura. Adems de las tecnologas ms modernas, tales como - nanopartculas fluorescentes , -inmunohistoqumica, anlisis protemico, -tcnica de ELISA para el anlisis de hormonas y -mtodos electrofisiolgicos.

Estudios recientes sobre el Sistema de Bonghan

Conductos y corpsculos de Bong Han Intravascular

Se eligieron conductos de Bong Han dentro de la vena cava caudal de conejos y ratas como el primer sitio para la observacin de una estructura filiforme transparente flotando en el flujo sanguneo. La tcnica clave fue la inyeccin intravenosa de una solucin de dextrosa al 10% en la vena femoral izquierda para reemplazar la sangre con un lquido transparente, manteniendo el conducto de Bong Han en el interior del vaso sanguneo para la observacin in situ con un microscopio estereoscpico. Esta tcnica tena una muy baja tasa de xito, porque se confunde fcilmente con un fenmeno de coagulacin de la fibrina, en que esta formaba cadenas que no se podan distinguir de un conducto de Bong Han con un microscopio estereoscpico o uno de Contraste de Fase.

Dado que no se describe en la obra de Bong Han, fue necesario encontrar un mtodo para distinguir un conducto de Bong Han de las cadenas de fibrina. La tcnica actual utiliza tincin con naranja de acridina para revelar los ncleos en forma de varilla que son el sello distintivo de los conductos de Bong Han, pero estn ausentes en la fibrina .

Microfotografa del ms largo conducto de Bong Han intravascular de una arteria rata jams obtenido utilizando un mtodo quirrgico.

Un mtodo quirrgico, consistente en el corte de una pieza de los vasos sanguneos y la bsqueda de un conducto de Bong Han en la muestra no tuvo xito debido a que el conducto, aparentemente se redujo y efectivamente desapareci. Una tcnica de tincin de un vaso sanguneo entero con nitrgeno lquido tampoco tuvo xito debido a que no era posible identificar un conducto de Bong Han en la seccin transversal de la sangre congelada.

En 2006, se ide un nuevo mtodo para revelar un conducto de Bong Han in vivo en la vena cava caudal de un ratn mediante la inyeccin de un colorante de tincin, azul Alcian, en la vena femoral. Otro mtodo in vivo desarrollado para observar conductos de Bong Han inclua un microscopio de fluorescencia y un tinte fluorescente, naranja de acridina, inyectado por va endovenosa. Tambin se observaron conductos de Bong Han pero el anlisis requiere mayor cuidado para la identificacin.

En la actualidad, estos mtodos para la observacin conductos intravasculares todava no estn plenamente desarrollados, son necesarios habilidad y suerte para obtener el resultado deseado. Es necesario desarrollar una nueva variedad de endoscopio intravascular para la observacin de un conducto de Bong Han intravascular sin tincin.

Conducto y corpsculo de Bong Han Linftico

Como no es fcil observar un conducto de Bong Han intravascular in situ en los vasos sanguneos a causa de la sangre, sera beneficioso poder examinar vasos transparentes, como los vasos linfticos. Se ha intentado detectar conductos de Bong Han en los vasos linfticos de gran tamao utilizando un microscopio estereoscpico, pero slo se pudieron ver vlvulas linfticas. Se inyect entonces varios tipos de tinturas qumicas en un vaso linftico o ganglio y se pudieron visualizar conductos de Bong Han in situ e in vivo.

Imagen estereomicroscpica del vaso linftico alrededor de la vena caudal de rata. La foto muestra la estructura fibrilar (flecha azul) que pasa a travs de la vlvula linftica (flecha rosada) Fotografa tomada in vivo e in situ y una pieza de papel negro se utiliz como fondo. Barra de escala 100 micras.

Dos corpsculos en acupunto cubierto por tejido adiposo

Imgenes estereomicroscpicas de corpsculos de Bong Han y un ndulo linftico cercano a la vena caudal en la cavidad abdominal de una rata.

Los corpsculos de BH estn indicados con un ovalo, y el linftico con una flecha.

Corpsculo in situ

Corpsculo aislado que demuestra los capilares en la superficie.

Ndulo linftico tipico con baja densidad de capilares sangineos

Se han encontrado tres tinciones eficaces con especificidad preferencial por los conductos de Bong Han Janus Verde B Nanopartculas magnticas fluorescentes Azul Alcian .

Conducto de Bong Han linftico, teido por Janus verde B , flotando en el interior de los vasos linfticos de un conejo.

El inconveniente de estos tres mtodos fue que la inyeccin de agentes qumicos en el sistema de vasos linfticos, podra daar el conducto de Bong Han o generar artefactos. Un mtodo ptico intensificador del contraste se desarroll para el estudio in vivo de conductos de Bong Han flotando dentro de los vasos linfticos de gran calibre y se ha tenido xito capturando pelculas que muestran el movimiento de los conductos de Bong Han.

Las caractersticas histolgicas importantes incluyen la presencia de una estructura de paquete formada de varios conductillos y la distribucin de varios ncleos en forma de varilla ordenados en forma de lneas quebradas. Se han realizado extensas investigaciones sobre las caractersticas morfolgicas y la naturaleza funcional de conductos y corpsculos de Bong Han de la superficie de rganos para dilucidar sus detalles estructurales y establecer definitivamente que se trata de una estructura nueva.

La manera mas simple de diferenciar los conductos de BH de otras estructuras transparentes es la presencia de ncleos en las estructuras filiformes.

Estos ncleos son redondeados y se distribuyen

de manera alineada. Las formas, longitudes, y la distribucin de los

ncleos en forma de lnea son similares en linfticos, vasos sanguneos, y superficies de rganos, lo que sugiere que pertenecen al mismo sistema, el de los conductos de Bong Han

Escaner lser confocal de imgenes microscpicas de conductos de BH que muestran los ncleos redondeados (flechas) distribuidos en lneas

Conducto de BH teido con YoYo-1, colorante especfico para ADN.

Conducto de BH teido por naranja de acridina, especfico de ADN.

Conductos de BH teidos por reaccin de Feulgen, especfico para ADN,

Conducto de BH teido por naranja de acridina en vena cava caudal de conejo.

Conducto y corpusculos de Bong Han en la superficie de rganos internos

Una red de conductos y corpsculos de Bong Han en las superficies de diversos rganos internos debiese ser una estructura fcilmente confirmable, pero diferentes obstculos evitan la observacin. 1.- los conductos de Bong Han son delgados y transparentes, y por lo tanto casi invisibles para el ojo desnudo o con el aumento de un microscopio quirrgico. 2.- la fibrina coagulada desde la sangre durante la ciruga no se puede distinguir de los conductos de Bong Han. 3.- los tejidos de aspecto similar del peritoneo o de las capsulas internas de los rganos internos no son fcilmente discernibles, sin examen histolgico.

Imgenes intra operatorias del sistema primo-vascular en la cavidad abdominal de ratn. La propagacin In situ de azul tripn revel primo-vasos semitransparentes (flechas), que se distribuyen en la superficie de varios rganos. Conductos delgados y rectos fcilmente visibles que en ocasiones presentan cruces Los conductos son movibles a diferencia de los linfticos

LI, intestino grueso, SI, intestino delgado, O oviducto, L, hgado, K, rin, AW, pared abdominal.

Visualizacin intraoperatoria del sistema primo-vascular conectado a ndulos tumorales en pulmn de ratn

Los Primo Vasos (flechas) teidos con azul de tripano se encuentran principalmente alrededor de los ndulos tumorales (puntas de flecha). Especialmente algunos primo-vasos mostraron patrones de distribucin ya sea en el interior o alrededor de los ndulos tumorales. SI, intestino delgado, AW, pared abdominal.

Una caracterstica distintiva de conductos de Bong Han es que no se adhieren a las superficies o cpsulas de rganos internos, sino que se mueven libremente. Adems, un corpsculo de Bong Han puede estar conectado a conductos de manera doble o mltiple.

Un corpsculo est relacionado con conductos en lados opuestos (flechas). La mayora de los ductos se tien parcial o totalmente por azul alcin. Los espesores de los conductos son aproximadamente 50 m y los corpsculos aproximadamente 400500 m .

Caractersticas generales de conductos de BH teidos con Azul Alcian.

Los ductos y los corpsculos son delgados, semitransparentes y moviles

Imagen estereomicroscopica de conductos y corpsculos Bonghan del colon transverso teidos con Azul Alcian. Los corpsculos grandes (LC) y pequeos (SC) estn unidos porconductos de BH filiformes. Los corpsculos se adhiere a la superficie del intestino conectado al colon, mientras que el conducto de BH no se adhiere a la superficie y se mueve libremente .

imagen estereomicroscopica de conductos de BH teodos con Azul Alcin con un corpsculo en la superficie de la pared abdominal derecha. El grancorpsculo (LC) y los conductos filiformes se mueven libremente..

Aumento mayor mostrando algunos puntos de azul alcin (flechas cerradas) y una estructura de paquete que contiene algunos subductos

Red de conductos de Bonghan teidos con Azul Alcian en los intestinos.

Conductos de BH teidos pasando sobre el duodeno y conectados entre si.

Conductos de BH formando una red en el colon. Transparentes an en baja ampliacin.

Comparacin de un conducto Bonghan antes y despus de la tincin con azul tripn.

Tejido adiposo alrededor del intestino delgado. Se detect un corpsculo de BH (flecha) pero su conducto de BH se pudo observar con gran dificultad.

Despus de la tincin con azul de tripano, el conducto de BH (flecha gruesa) en el tejido adiposo era claramente visible. Los vasos sanguneos y los tejidos adiposos no se tien.

Conductos y corpsculos de Bong Han en el cerebro y mdula espinal de conejo

Se han observado Conductos de Bong Han de 20-40 micras de dimetro flotando en el lquido cefalorraqudeo de los ventrculos cerebrales y el canal central de la columna vertebral de un conejo. Se utiliz una eficaz tcnica de tincin in situ utilizando hematoxilina para visualizar el conducto de Bong Han, y la presencia de ncleos en forma de varilla se confirm usando una serie de colorantes especficos de tincin de ncleos.

Ubicacin de los conductos de BH contra las paredes de un ventrculo del cerebro y del acueducto cerebral en un conejo.

Azul de tripano como una tincin especfica para conductos de Bong Han

Encontrar la correcta tincin fue el factor ms crtico en el redescubrimiento del sistema de Bong Han. Sin un colorante adecuado, es probable que el tejido no se note, incluso bajo gran aumento. El colorante azul secreto que Bong Han Kim utiliz cuando descubri los conductos no ha sido identificado.

Se han encontrado una variedad de materiales, tales como azul de metileno, verde de metilo, verde de Janus, azul Alcian, hematoxilina, hematoxilina de cromo, y nanopartculas fluorescentes, pero que han sido solo parcialmente tiles. Slo muy recientemente, se encontr un tinte de coloracin eficiente, el Azul de Tripano, que tie preferentemente conductos de Bong Han en lugar de vasos sanguneos, linfticos, nervios, msculos o tejido adiposo.

El azul de tripano es una de las diversas bases ismeras del C14H16N2, derivados del tolueno. (Se llama as porque puede matar a los tripanosomas, los parsitos que causan la tripanosomiasis).

El azul de tripano y el rojo de tripano fueron sintetizados por primera vez por el cientfico alemn Paul Ehrlich en 1904. (Premio Nobel de Medicina 1908, creador del Salvarsn)

Con azul de tripano, los conductos de Bong Han son teidos in vivo e in situ, sin que se manchen otros tejidos, por lo tanto es extremadamente til como un colorante especfico de conductos de Bong Han con lo que se ha podido hacer significativas nuevas contribuciones, incluyendo la bsqueda de las redes de conductos de Bong Han en el epipln de una rata.

Red de conductos de BH en peritoneo visceral en torno al estmago cerca de bazo de rata; varios pequeos corpsculos de BH en los puntos de cruce (flechas); capilares sanguneos no teidos.

Red de conductos de BH en el epipln por debajo del estmago y sobre el intestino delgado, tres pequeos corpsculos en los puntos de cruce de los conductos (flechas).

Red de conductos revelada por uso de azul de tripano.

Frecuentemente se haba observado que los conductos de BH se introducen en el tejido adiposo alrededor de los rganos internos, pero no era posible seguirlos. Actualmente esto se puede hacer con azul de tripano , y se hace interesante el esclarecimiento de su posible participacin en relacin con la obesidad. Ms an, investigadores han sido capaces de detectar conductos de Bong Han sobre la fascia que rodea el tejido tumoral usando un mtodo de tincin con azul de tripano in situ.

Importancia Biolgica y Mdica

La funcin circulatoria

El requisito morfolgico para que un sistema tenga funcin circulatoria es la presencia de canales. Esta condicin fue confirmada en el sistema de BH mediante un mtodo de tincin y varios tipos de microscopa electrnica tales como microscopa de transmisin de electrones (TEM), TEM de alto voltaje , microscopa electrnica de Cryo-escaneo (Cryo-SEM), y microscopa electrnica de barrido de haz de iones centrado (SEM-FIB).

La evidencia a nivel celular fue la localizacin de las clulas endoteliales que comprenden el lmite interior de los ductos en el sistema de Bong Han, tambin confirmado por TEM, y un estudio inmunohistoqumico que apoy la existencia de clulas endoteliales .

Para demostrar el flujo de lquido, se inyectaron nanopartculas fluorescentes en los conductos de BH de la superficie de un rgano, revelndose un solo sentido flujo.

18 minutos; velocidad de 0,6 mm / min en una sola direccin

4 minutos

12 minutos,

La velocidad media de flujo, recientemente medida mediante la inyeccin Azul Alcian en un conducto de Bong Han en la superficie de un hgado de conejo fue de 0,3 0,1 mm / s, en concordancia con los datos entregados por Bonghan Kim. El flujo de lquido a travs un conducto de Bong Han de la piel hacia los rganos internos se observ mediante la inyeccin de cromo-hematoxilina y nanopartculas fluorescentes en la piel cerca del testculo de una rata.

Electrofisiologa: la excitabilidad

La funcin circulatoria de un sistema tambin requiere la existencia de clulas excitables, lo que puede ser probado mediante experimentos electrofisiolgicos. Un conducto de Bong Han obtenido a partir de superficies intestinales de ratas fue colocado en una solucin de Locke y se insert un electrodo microcapilar en la membrana celular del conducto de Bong Han, lo que mostr una abrupta caida del potencial elctrico de 40 mV en relacin al potencial de referencia seguido por rfagas irregulares de picos evocados espontneamente en el potencial de reposo de una duracin media de 16 segundos.

Potencial de reposo y actividad elctrica espontnea de una clula en un conducto de BH

En el momento de la insercin del microcapilar en la membrana celular del conducto de BH , el potencial disminuye bruscamente en un 38 15,5 mV (n = 11) de potencial de referencia del bao, Vd es la cada de potencial, el potencial aumenta paulatinamente hasta el potencial de reposo de 10.5 a 8,4 mV (n = 11); Ve es el pequeo aumento (lnea punteada), y Te es el tiempo de aumento (18,1 14,0 segundos (n = 11)). El potencial de reposo se mantuvo estable, con leves fluctuaciones; la actividad irregular de picos espontneos en el potencial de reposo se levant para las duraciones (Ds) de alrededor de 16,6 14,9 segundos (n = 11).

El potencial de reposo y patrn de rfagas irregulares de las clulas en el conducto de Bong Han mostr una suave excitabilidad similar a la muscular. Adems, las rfagas irregulares mostraron cierta semejanza a ciertos patrones de disparo de las neuronas, lo que sugiere una transmisin de seal elctrica similar a la de los nervios en el sistema de Bong Han.

La naturaleza de las clulas excitables se determin mediante el estudio de los efectos de la estimulacin por acetilcolina y pilocarpina y los resultados mostraron hiper-depolarizacin, como se ha observado en los msculos lisos vasculares. Un factor crtico a nivel molecular para la contractibilidad del sistema es la existencia de canales de ion calcio. Las pruebas con nifedipino confirman que las clulas excitables en un conducto de Bong han tienen canales de ion Ca .

En conclusin, los resultados electrofisiolgicos apoyan la funcin circulatoria del sistema de Bong Han. La electrofisiologa del sistema de BH podra proporcionar una base cientfica para la electroacupuntura y para las propiedades elctricas de los puntos de acupuntura, que han sido estudiados por muchos aos en todo el mundo.

Vas Hormonales, funcin inmune y hematopoyesis

Se ha medido la noradrenalina y adrenalina en los conductos de BH en la superficie del un rgano de conejo utilizando el kit CatCombi ELISA y se identificaron clulas cromafines que secretan Noradrenalina y Adrenalina. La presencia de clulas cromafines en el punto Ren 12 se explor utilizando una tcnica inmunohisto-qumica, dando resultados consistentes con la afirmacin de Bong Han Kim. Estos resultados proporcionan una nueva visin de los puntos de acupuntura como un rgano endocrino, adems de la mdula adrenal, fibras post ganglionares y clulas de Merkel .

A menudo se describen mejora de la funcin inmune y efectos beneficiosos sobre la inflamacin despus del tratamiento con acupuntura y se ha reportado abundancia de Mastocitos en los puntos de acupuntura. Actualmente se conoce que en los conductos de BH en la superfice de los rganos hay abundantes monocitos, eosinfilos, mastocitos y macrfagos. La abundancia de estas clulas inmunes en el sistema de Bong Han aporta evidencias para los efectos teraputicos relacionados con el tratamiento de acupuntura

Se sabe que las clulas sanguneas se generan en la mdula sea, pero Kim afirm que el conducto intravascular es otro rgano hematopoytico. En efecto, se ha observado que el conducto se hace ms grueso y por tanto ms fcil de detectar, cuando se induce anemia por inyeccin de fenilhidrazina. Se ha observado gran presencia de eritrocitos en estados tempranos de maduracin en los conductos de BH de la superficie de rganos cuando se induce anemia.

Regeneracin y Sanal (micro clulas)

La regeneracin de las clulas daadas del hgado se inform en el cuarto artculo de Bong Han Kim. Teniendo en cuenta esta afirmacin, se hipotetiz acerca de la existencia de clulas madre adultas en los conductos de Bong Han. Para verificarlo, se tieron cortes de conductos de BH con anticuerpos marcadores de clulas madre. Se observ que los marcadores de clulas madre mesenquimaticas (MSC), se expresaron con fuerza de una manera similar a la mdula sea. Las matrices extracelulares tambin fueron consistentes con expresin de clulas madre.

Los anlisis protemicos de los tejidos y lquidos a partir del conducto de BH en las superficies intestinales de conejo indicaron la existencia de protenas relacionadas con clulas madre mesenquimticas, procesos celulares en clulas madre mesenquimticas (ezrina, actinina, y miosina) y diferenciacin de clulas madre mesenquimticas / miofibroblastos (alfa-actina de msculo liso y CD147). Estos perfiles de protenas sugieren que los conductos de Bong Han situados en las superficies de los rganos tienen un papel como almacenes temporales y puntos de diferenciacin de clulas madre para la regeneracin de tejidos.

Insercin de la punta de un capilar de vidrio en un conducto de Bonghan, sostenido por microforceps, por encima del intestino grueso de conejo utilizando in situ e in vivo con el fin de extraer su lquido.

Segn Bong Han, los tejidos del hgado daados fueron regenerados por la llegada de Sanales que haban migrado a travs de los conductos. Este proceso no se ha investigado especficamente, pero algunos estudios bsicos llevados a cabo en microcelulas del sistema de BH, han revelado que su movimiento es del tipo Browniano, y que tambin muestran cierto grado de interaccin con la luz. Su promedio de velocidad no se v afectada por la luz visible, pero se incrementa significativamente por la radiacin UV-A (360 nm).

La presencia de ADN dentro de una Sanal se identific utilizando varios tipos de tincin especfica de ADN, tales como reaccin Feulgen, DAPI y PI . La morfologa de la superficie de los Sanales se estudi por imgenes topogrficas y por imgenes de errores de seal de microscopa de fuerza atmica, Las propiedades mecnicas fueron investigadas por microscopio de modulacin de fuerza, y su caracterizacin elctrica determinada por microscopa de fuerza electrosttica.

Microscopa electrnica de barrido (SEM) y microscopa electrnica de transmisin (TEM) imgenes de microclulas de Bonghan (BH-MC) en filtro de membrana de policarbonato.

Imagen SEM que muestra todo el BH-MC, ~ 1 micra de dimetro, barra de escala 5 micras.

Gran aumento que muestra la estructura de superficie irregular.;

Barra de escala, 200 nm

Ampliacin de que muestra el borde del microncleo "N", la membrana no es una bicapa como en una membrana nuclear.

barra de escala 100 nm.

Otra funcin importante que se describi es la transmisin de las seales elctricas a travs de la red de conductos de Bong Han, que puede explicar un fundamento estructural para el fenmeno bien conocido de baja impedancia elctrica en los puntos de acupuntura -Reichmanis M, Marino AA, Becker RO. Electrical correlates of acupuncture points. IEEE Trans Biomed Eng 1975;22: 5335. -Johng HM, Cho JH, Shin HS, Soh KS, Koo TH, Choi SY, et al. Frequency dependance of impedances at the acupuncture point quze (PC3). IEEE Eng Med Biol 2002;21:336. -Ahn A, Colber AP, Anderson BJ, Martinsen OG, Hammerschlag R, Cina S, et al. Electrical properties of acupuncture points and meridians: asystematic review. Bioelectromagnetics 2008;29:24556.36-38].

Se ha hipotetizado acerca de la funcin de la propagacin de la luz en el Conducto de Bong Han, lo que puede explicar los efectos casi instantneos que se perciben en el cuerpo con algunas agujas en los puntos de acupuntura Soh KS. Bonghan duct and acupuncture meridian as optical channel of biophoton. J Kor Phys Soc 2004;45:11968.

Modelo de canal optico de biofotones en un conducto de Bong Han. El ADN es la fuente de biofotones coherentes que se propagan a lo largo del conducto ( diagrama)

Obesidad y Cncer

La obesidad es uno de los principales problemas de salud en las sociedades actuales. Incidentalmente se han visualizado Conductos y corpsculos de Bong Han en los tejidos adiposos utilizando azul de tripano.

Corpusculo y conducto de BH conectados en el interior del tejido adiposo alrededor del intestino delgado de rata

Conducto y corpsculo de BH cerca de intestino delgado de la misma rata, vasos sanguneos y tejidos adiposos no teidos

Tincin con azul tripn de conductos y corpusculos de BH al interior de tejido adiposo.

Al parecer, las grasas almacenadas y el sistema de Bong Han tienen diversas relaciones que requieren de investigacin ms detallada.

Cncer

Buikis et al observaron que las microcelulas en ciertos tejidos tumorales crecen rpidamente y se transforman en jvenes clulas indiferenciadas y llam a este mecanismo citolgico "sporosis" . Se conjetura entonces que dicha sporosis es en realidad uno de los procesos de proliferacin de los Sanal que normalmente se producen en el sistema de Bong Han. Los datos protemicos del fluido en los conductos de BH muestran una abundancia de procesos basados en hidratos de carbono asociados a clulas madre, clulas de cncer y diferenciacin de clulas mieloides .

Se ha encontrado una relacin directa del sistema de Bong Han a los tejidos tumorales. Se inyectaron clulas cancerosas por va subcutnea en un ratn calvo y se observaron conductos y corpsculos de Bong Han en la fascia que envolva el tejido tumoral que creci en la piel ,lo que se visualiz mediante el uso del mtodo de azul de tripano.

Marcacin intracelular de clulas tumorales por puntos cunticos electroportados QD permite el estudio in vivo de las metastasis.

Micrografa de fluorescencia y de contraste diferencial de interferencia (DIC) micrografas de puntos cuanticos electroportados en clulas humanas de cncer de pulmn (NCI-H460) (rojo: puntos cuanticos, azul: ncleos).

Micrografa electrnica de transmisin muestra los puntos cunticos (flechas) incorporados en las clulas tumorales NCI-H460 para su identificacin por a su tamao (8-10 nm) y forma (tetrpodos).

Imgenes multiespectrales de ratn de 6 semanas despus de la inyeccin de clulas NCI-H460 cargadas con puntos cunticos. La imagen de fluorescencia corregida mediante el uso de los datos espectrales delinea la frontera del tumor mejor que la medicin de fluorescencia original.

Clulas marcadas con puntos cunticos en el tejido tumoral disecado en c se observa mediante microscopa multifotnica

Imagen multiespectral in vivo de la diseminacin de clulas cancerosas a travs del sistema primo-vascular en la superficie de tumores crecidos

Crecimiento del tumor en el sitio de inyeccin de celulas marcadas con puntos cuanticos (a), se form una imagen con una fuerte intensidad de seal y observ la formacin de un nuevo tumor en un lugar adyacente, (b)

La medicin de fluorescencia, corregida por atenuacin de tejidos y autofluorescencia, delinea la frontera del tumor mejor que la imagen sin corregir

La migracin colectiva de los grupos de clulas cancerosas a travs de un primo vasos (flecha slida) entre dos tumores se observ y se compar con la va linftica (flecha punteada). El vaso primo puede diferenciarse de un linftico por sus caractersticas anatmicas; color blanco lechoso, superficie irregular, y estructura fibrilar

Imgen intraoperatoria multiespectral de la difusin de las clulas cancerosas a travs del sistema primo vascular peritoneal en un modelo de injerto de tumor subcutaneo

Imgenes de fluorescencia intrnseca y fluorescencia corregida de la formacin de tumores.

Despus de que el abdomen fu abierto, el vaso primo conteniendo clulas cancerosas marcadas por puntos cuanticos se encontr sobre hgado , pared abdominal, intestino y vejiga

Visualizacin intraoperatoria del sistema primo-vascular conectado a ndulos tumorales en pulmn de ratn

Los Primo Vasos (flechas) teidos con azul de tripano se encuentran principalmente alrededor de los ndulos tumorales (puntas de flecha). Especialmente algunos primo-vasos mostraron patrones de distribucin ya sea en el interior o alrededor de los ndulos tumorales. SI, intestino delgado, AW, pared abdominal.

El desarrollo de los vasos Primo (PV) en funcin del crecimiento del tumor

da 15: La primera etapa de un tumor de melanoma se muestra como un crculo de puntos blancos

da 43: La etapa intermedia de un tumor de melanoma se muestra como una lnea de puntos blancos. Las flechas blancas= PV. Flecha negra= vaso sanguneo (BV).

La estructura filiforme del vaso primos y un primo nodo (PN, flecha blanca) teidos con azul de tripano se distribuyen en el tejido adiposo (AT), que cubre el tumor

Representacin esquemtica de los conductos de Bong Han en un melanoma

Imgenes de fluorescencia de los tejidos debajo de la superficie del tumor en un melanoma de ratn

Imagen de contraste de fase

Flechas en (A) y (B) muestran ramas del vaso primo (VP).

CT tejido conectivo, AT tejido adiposo,

escala, 200 um

(D) Un delgado vaso primo con pequeos primo nodos (PN).

un unico y delgado vaso primo brota del vaso sanguneo (VB) en el interior del tumor.

En conclusin, se ha demostrado la presencia de una ruta metastsica adicional de las proximidades del tumor a la cavidad peritoneal mediante la obtencin de imgenes in vivo de la migracin de las clulas cancerosas y su implantacin en el sistema Primo-vascular. Este sistema puede funcionar de manera independiente de las vas hematgena y linftica durante las diversas fases de la progresin del tumor. Por lo tanto, los resultados presentados aqu pueden proporcionar nuevas pistas sobre el desarrollo de estrategias de tratamiento.