UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS E INGENIERIASDEPARTAMENTO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUIMICAPRACTICA Nº

VITAMINAS Y MINERALES

OBJETIVOS:

Separar algunos constituyentes de la leche Identificar la presencia de vitaminas y minerales en la leche Reconocer la vitamina A presente en la mantequilla.

TEORIA RELACIONADA

Algunas enzimas requieren para su función la presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catálisis. Estas sustancias se llaman en general cofactores. Los cofactores de naturaleza orgánica se suelen denominar coenzimas.

Hay coenzimas que no pueden ser sintetizadas integralmente en el organismo, sino que algunos de sus componentes o precursores debe ser incorporado a partir de la dieta. Entre los precursores exógenos necesarios para el normal desarrollo, crecimiento y reproducción de una gran variedad de seres vivos se encuentra un grupo de biomoléculas orgánicas llamadas vitaminas, además de otras sustancias de carácter inorgánico frecuentemente conocidas como minerales.

MATERIALES Y REACTIVOS

Vaso de precipitados de 400ml Leche (traer)Probeta de 50ml Acido acético al 10%Erlenmeyer de 100ml KCL Pipetas de 5 y 10ml Ferrocianuro de potasio al 1%Agitador de vidrio NaOH al 10%5 Tubos de ensayo Alcohol isobutilicoGradilla Oxalato de amonio al 4%Embudo de vidrio Acido molibdico (SOLUCIÓN)Espátula Acido 1,2,4 aminonaftolsulfonicoCapsulas de Vitamina A (traer) CloroformoVaso de precipitados de 400ml

PROCEDIMIENTO:

1. Precipitación de la caseína: En un vaso de precipitado de 400ml; agregar 50ml de leche y 50ml de agua destilada, añadir con una pipeta gota a gota y con agitación constante acido acético al 10% hasta la formación de un precipitado flocúlenlo de caseína. Dejar decantar y filtrar sobre gasa; descartar la caseína que no es de interés en la presente practica y conservar el filtrado para las posteriores pruebas cualitativas de vitamina B1 (tiamina) y minerales.

2. Vitamina B1: Vierta 2.5ml de filtrado en un tubo de centrifuga; añada una pequeña cantidad de KCl, y 0.5ml de ferrocianuro de potasio al 1% y 1ml de NaOH al 10%, mezcle y disuelva totalmente el KCl. Agregar 2.5ml de alcohol isobutílico, agitar cuidadosamente por 2 minutos y centrifugar por 5 minutos a 2000 rpm. La formación de precipitado indica la presencia de vitamina B1.

3. Calcio: A 0.5 ml de filtrado adicionar unas gotas de solución de oxalato de amonio al 4%. Observar el precipitado que se forma.

4. Fosfatos: A 0.5 ml de filtrado adicionar 0.5ml de acido molibdico y 0.5ml de acido 1, 2, 4, aminonaftolsulfonico. Observe la coloración obtenida.

5. Vitamina A: En un tubo de ensayo; disolver una capsula de vitamina A de 100U, luego se disuelve en 1ml de cloroformo y adicionar 5 gotas del reactivo de Carr-Price. En presencia de vitamina A, se produce un intenso color azul que desaparece al poco tiempo.

PREGUNTAS:

1- ¿Cual es el fundamento químico de los procedimientos desarrollados en la práctica?2- ¿Que importancia presenta la vitamina A, la tiamina, el calcio y los fosfatos en mamíferos?

BIBLIOGRAFIA:

PLUMER, D.T. Introducción a la bioquímica práctica. México. MaGraw- Hill Latinoamericana, S.A.

CONN, E y Stumpf, P.K. Bioquímica F.

LOPEZ, E y ANZOLA, C. Guías de laboratorio de Bioquímica. Facultad de ciencias. Universidad Nacional de Colombia sede Bogotá.