UNIVERSIDAD DE CÓRDOBALABORATORIO DE BIOQUIMICA

PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIAPRACTICA Nº 2

SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

OBJETIVOS:

Prepara correctamente una solución amortiguadora. Reconocer la importancia de las soluciones amortiguadoras en organismos vivos. Relacionar los ácidos y bases fuertes. Adquirir habilidades técnicas en el uso de los materiales y equipos.

TEORIA RELACIONADA

Solución amortiguadora es aquella que se opone a los cambios de pH cuando se agrega ácido o álcali. Tales soluciones se usan en muchos experimentos bioquímicos en los cuales se necesita controlar exactamente el pH. De la ecuación de Henderson Hasselbach se puede deducir que el pH de una solución amortiguadora depende de dos factores: uno es el valor de pKa y el otro es la proporción de sal o acido. La mezcla esta formada por:

1. Ácidos débiles y sales muy disociables de estos ácidos, por ejemplo el amortiguador de acetato es ácido acético/acetato sódico; el amortiguador de bicarbonato es ácido carbónico/bicarbonato sódico; el amortiguador del borato es ácido bórico/borato sódico.

2. Bases débiles y sales muy disociables de estas bases, ejemplo, el amortiguador amónico es hidróxido amónico/cloruro amónico.

3. Sales mono y disustituidas de acido polibásico, ejemplo, el amortiguador fosfato es NaH2PO4.

4. La capacidad amortiguadora la poseen también electrolitos anfóteros, por ejemplo, aminoácidos, proteínas.

En una solución amortiguadora, el ácido débil reacciona con cualquier cantidad de OH - agregado, mientras que la base reacciona con el H+ introducido. Esto impide que se perturbe el equilibrio químico del cual depende el pH de la solución.

Para explicar la acción tampón basta despejar la concentración de H+, de la ecuación que representa la constante de dilución de dicho ácido.

Se deduce que la H+ depende de la fuerza del ácido y de la concentración del ácido con la concentración de la base. Una vez establecida esta razón se puede determinar el pH de la solución.

MATERIALES Y REACTIVOS

Balanza Beaker de 100 mL Espátula Frasco lavador Potenciómetro 3 Pipetas de 10 mL Vidrio de reloj Beaker de 50 mL 3 Balones aforados de 50 mL Plasma sanguíneo (VOLUNTARIO)

Orina reciente (VOLUNTARIO) Alkaseltser (TRAER) Leche fresca (TRAER) Limón (TRAER) Coca cola (TRAER) Acido acético 96% Acetato de sodio 99% Hidróxido de sodio 0,1 N Acido clorhídrico 0,1 N

PROCEDIMIENTO:

1. Verificación de sustancias ácidas y básicas:

SUSTANCIAS pH ácido pH básicoPlasma recienteOrina recienteAlkaseltser Leche frescaLimón Coca cola

2. Preparación de una solución buffer:Prepare 50 mL de una solución de ácido acético 0,5 N y lea el pH de la solución recién preparada, anote dicho resultado.Prepare 50 mL de una solución de acetato de sodio 0,5 N y lea el pH de la solución recién preparada, anote dicho resultado.Mezcle 25 mL de la solución de ácido acético con 25 mL de solución de acetato de sodio, lea el pH de la solución recién preparada y anote dicho resultado.

3. Propiedades de la solución buffer.Para llevar a cabo el estudio de las propiedades de la solución buffer prepare 5 soluciones así:

SOLUCION 1 2 3 4 5Buffer 50 mL 20 mL 20 mLAgua 20 mL 20 mL

NaOH 0,1 N 1 mL 1 mLHCl 0,1 N 1 mL 1 mL

pH

4. Prepare 100 mL de amortiguador de acetato 0,1 M con un pH = 5,22 (pKa = 4,74)

NOTA: Determinar la relación de la base conjugada (ión acetato) y del ácido débil (ácido acético) aplicando la ecuación:

PREGUNTAS:

1- Relacione el pH de las distintas soluciones y concluya.2- ¿Qué es un buffer? ¿Qué importancia biológica tiene?3- ¿Cuáles son los buffers que mantienen el pH en la sangre? ¿Qué sucede cuando dicho pH

varia?4- Realice los cálculos necesarios para preparar en el laboratorio 1 litro de un amortiguador de

fosfato 0,1 M a un pH de 8,0 (reactivos: fosfato dipotásico K2HPO4 y fosfato mono potásico KH2PO4) pKa = 7,2

5- ¿Qué papel desempeña el riñón en el pH de la orina?6- ¿Cuál es el pH de la vagina y el del semen? ¿de que manera puede influir este en la

fecundación?7- ¿En que consiste la alcalosis y la acidosis? ¿Qué importancia clínica tienen?8- ¿Qué amortiguador será mas conveniente para proteger un organismo contra los cambios de

pH resultantes de la generación o incorporación de ácido? a) una solución fosfato 0,1 M a pH = 7,71 o b) una solución de fosfato 0,1 M a pH = 6,71. Explique su respuesta.