practica 6 y 7
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UNIVERSIDAD DR. ANDRÉS BELLO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
LICENCIATURA EN LABORATORIO CLÍNICO
TEMA DE INVESTIGACIÓN
(Practica 6 y 7)
SIGNATURA
Hematología
FACILITADOR
LICDO. HECTOR PARADA
INTEGRANTES
Carol Iveth Lemus
Gerson Mauricio Aguirre
José miguel romeroSandra yamileth parada
Winderman Emilio Hernández
SAN SALVADOR, 25 DE ABRIL DE 2012
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INDICE PÁGINA
portada…………………………………………………………………...I
Índice………………………………………........................................II
Introducción………………………………………………………..…....III
Objetivos….…………………….………………………………………..4
Justificación………………………………………………………………5
Prologo……….…………………………………………………………..6
Marco teórico …………………………………………………………….7
Conclusión………………………………………………..……………..14
Bibliografía………………………………...…………………………….15
Anexos…………………….……………………………………………..16
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Introducción
El presente trabajo ha sido elaborado con el fin inminente de dar a conocer
algunas de las técnicas más comúnmente conocidas; en este reporte se citaran
tres técnicas que se realizan a diario y como pruebas de rutinas en todos los
laboratorios clínicos privados, como en los del sistema de salud pública y nos
referimos a:
Hematocrito
Hemoglobina y
Conteo de reticulocitos.
En concreto realizaremos las prácticas y procedimientos para la correcta
realización de dichas pruebas.
El Hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de
toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende
del número de glóbulos rojos.
En cuanto a la Hemoglobina es una proteína en los glóbulos rojos que transporta
oxígeno. Un examen sanguíneo puede determinar qué tanta hemoglobina tiene
uno en la sangre. Y por últimos el conteo de Reticulocitos es una prueba que mide
el porcentaje de reticulocitos (glóbulos rojos ligeramente inmaduros) en la sangre.
Por ende esperamos que el siguiente documento sea de la total y fácil
comprensión.
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Objetivos
GENERAL
Establecer y estandarizar los procedimientos básicos de un examen de
hemograma, que sirvan de ayuda diagnóstico clínico.
ESPECIFICOS
Manejar una buena técnica para realizar el hematocrito y por ende
para generar un buen diagnostico.
Conocer la forma más indicada para la realización de la
cianometahemoglobina y realizar un buen diagnostico.
Conocer y realizar la cuantificación de reticulocitos para una buena
diagnostico clínico.
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JUSTIFICACION
Como grupo, tenemos la obligación de especializarnos en el conocimiento de las
diferentes técnicas que se utilizan en hematología.
Y a continuación se describen las técnicas primordiales para poder proseguir y
generar diagnósticos de una manera segura y fidedigna. Empezando por poner en
práctica las medidas de bioseguridad y luego técnicas que corresponden a un
diagnostico de cuantificación de componentes sanguíneos adecuadamente.
Que después nos servirá para realizar uno de los exámenes más importantes de
hematología el cual se ejecuta de la buena técnica para realizar un frotis y una
buena tinción sanguínea para la cuantificación hemática.
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Prologo
En siguiente reporte hablaremos sobre lo que es la hemoglobina, reticulocitos, y
hematocrito.
La Hemoglobina es una proteína globular, que se encuentra en grandes
cantidades dentro de los glóbulos rojos y importancia fisiológica, para el aporte
normal de oxigeno a los tejidos.
Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes inmaduro y sin núcleo que contiene
material reticular RNA que se tiñe de color gris azulado. Este retículo se observa
en las células nuevas durante uno o dos días antes que la célula alcance su
madurez completa. Normalmente, se observa un pequeño número de estas
células en la sangre circulante.
Para que la cuenta de reticulocitos sea importante, debe compararse con la cuenta
total de reticulocitos. La cuenta de reticulocitos se utiliza para diagnosticar las
anemias producidas por insuficiencia de la médula ósea de las que son causadas
por hemorragia o hemólisis, para vigilar el tratamiento de la médula ósea en la
anemia a plástica y para determinar los efectos de las sustancias radiactivas en
los individuos que están expuestos a este factor.
Hematocrito Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda
la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del
número de glóbulos rojos y de su tamaño.
El hematocrito, hemoglobina y recuento de reticulocitos implica casi siempre que
se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma).
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MARCO TEÓRICO
PRACTICA No 6
HEMATOCRITO
PROPOSITO:
El hematocrito es el volumen de eritrocitos expresados en porcentaje del volumen de
sangre como una fracción del volumen de sangre, para determinar si un paciente presenta
o no anemia.
Razones por las que se realiza el examen
El médico puede ordenar este examen si usted tiene signos de:
Anemia Deficiencia en la dieta
Leucemia
Otra afección médica
Materiales Requeridos
Capilares azules (75mm x 1,5mm).
Plastilina.
Lector manual de hematocrito
-Tomar la muestra sangre venosa con anticoagulante EDTA.
- Debe llenarse aproximadamente 70%-80% del capilar.
- Ocluir o tapar un extremo del capilar con plastilina.
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- Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrífuga de micro
hematocrito, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma.
-Centrifugar por 5 minutos entre 10´000-12´000 rpm.
Resultados (lectura)
La lectura se realiza con una escala estandarizada que expenden en el comercio.
Uso de la escala
-Sostenga el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna de
eritrocitos (no el extremo inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de
la línea horizontal correspondiente al cero.
-Desplace el tubo a través de la escala hasta que la línea marcada con el número
1,0 quede al nivel de tope de la columna de plasma. Vigile el fondo de la columnade eritrocitos continúe sobre la línea cero. El tubo debe encontrarse
completamente en posición vertical.
-La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicará la fracción
de volumen de estos.
Valores de Referencia
Hombres 40%-50%
Mujeres 38%-44%
Niños (5 años) 38%-44%
Lactante (3 meses) 37%-42%
Recién nacidos 50%-58%
Interpretación de los resultados
Los valores de referencia del HCT están comprendidos entre el 42% y el 47% en las
mujeres, y entre el 45% y el 52% en los varones.
Un valor bajo del HCT suele ser signo del padecimiento de una anemia. Sin
embargo, hay falsos descensos del HCT ocasionados hemodilución
paradújicamente, el HCT suele ser normal en la fase más temprana de las
hemorragias agudas, pues en estos se pierden células y plasma en la misma
proporción.
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Un valor alto del HCT suele ser signo del padecimiento de una poliglobulina. Sin
embargo, también hay engañosos ascensos del HCT producidos por
hemoconcentración (por ejemplo, el de desidratación).
Se puede hacer un cálculo aproximado del nº de hematíes por el de sangre, si los
hematíes son de forma, tamaño y contenido en hemoglobina normal. La relación
entre el nº de hematíes y el hematocrito es una constante K Hematocrito x K=Nº
hematíes/mm3 Suero K=110.000.
Resultados obtenidos
Hemos obtenido un hematocrito de 38, por tanto la concentración de hematíes será
38x110.000=440.000 hematíes/mm3. Para saber si se ha procedido correctamente,tendremos que comparar nuestro resultado con el obtenido en la cámara de recuento.
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PRACTICA No 7
HEMOGLOBINA
METODO DE CIANAMETAHEMOGLOBINA
Propósito:
Evaluar la presencia y la severidad de la anemia. Este método consiste en efectuar una
dilución exacta de sangre en una solución que contiene ferrocianuro de potasio, que
convierte la hemoglobina en cuanametahemoglobina y se compara colorimétricamente
con una solución patrón de cianmetahemoglobina de concentración exacta y estable.
MUESTRA REQUERIDA:
Sangre venosa con EDTA.
MATERIALES Y REACTIVOS:
Cubeta
Pipetas automáticas de 20 ul
Tubos de ensayo Puntas
Reactivo de cianometahemoglobina
Estándar de hemoglobina.
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PROCEDIMIENTO:
Hacer una serie de tres tubos con el estándar de hemoglobina para calcular el
factor de calibración. Colocar al primer tubo 5 ml de estándar puro.
Colocar al segundo tubo 2.5 ml de estándar puro.
Colocar en el tercer tubo 1 ml de estándar puro
Llevar al volumen de 5 ml con cianametahemoglobina el segundo y tercer tubo.
Mezclar y dejar reposo 10 minutos.
Leerlos en espectrofotómetro a 540 nm y anotar la densidad óptica de los tubos.
Obtener la concentración de cada tubo entre gramos por decilitros.
Dividir la concentración de cada tubo entre la densidad óptica.
Sumar los tres factores y sacar un promedio. Este será el factor de calibración por el cual se multiplicara las densidades ópticas
de las muestras.
La preparación de la cianametahemoglobina estará sujeta a las indicaciones del
fabricante del reactivo.
Medir exactamente 5 ml de solución de cianametahemoglobina en un tubo de
13x100 mm.
Con pipeta automática colocar 20 ul de sangre.
Mezclar bien y dejar reposar por 10 minutos.
Transferir a la cubeta de lectura y leer en el espectrofotómetro a 540 nm.
FUENTES DE ERROR:
Toma inadecuada de muestra
Estasis prolongada que resulta de dejar un torniquete en el brazo.
Mezclar incorrectamente la muestra
Errores de pipeteado o dilución
Coagulación de la muestra.
FORMA DE TEPORTAR:
La hemoglobina se reporta en gr/dl
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VALORES DE REFERENCIA:
Hombre: 14.0-17.0 gr/dl
Mujer: 12.5-15.0 gr/dl
Niños: 11.0-13.0 gr/dl
0.42 x 15 = R/ 12.35 mg/dl
0.51
PRACTICA No 8
RECUENTO DE RETICULOCITOS
Los reticulocitos son glóbulos rojos inmaduros formados por ARN y protoporfirinaen el citoplasma.PROPOSITO:
Evaluar el funcionamiento de la medula ósea ya que los reticulocitos son glóbulos jóvenes
que constituyen un índice de la respuesta eritropoyetina.
FundamentoLos reticulocitos contienen una fina red de ARN y protoporfirina que se puede teñir
con el azul de cresil brillante. Este colorante en combinación con una misma
cantidad de sangre anti coagulada se mezcla y con la ayuda de la temperatura
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(baño maría) se produce la coloración de estos eritrocitos jóvenes visualizándose
en los frotis sanguíneos por microscopía.
PROCEDIMIENTO:
Verter un capilar lleno azul cresil brillante y dos capilares llenos de sangre en un
tubo 12x75 mm.
Mezclar bien uncubar a 37 oC o a temperatura ambiente durante 15 minutos.
Preparar Frotis de la mezcla de la forma usual dejar secar.
Leer al microscopio con objetivo de inmersión.
Contar 10 campos en donde observen 100 eritrocitos por campo. Anotar los
reticulocitos observados.
FORMA DE REPORTE:
Se reportan los reticulocitos por cada 100 eritrocitos observados.
% reticulocitos = total de reticulocitos observados en 10 campos
10
9 = 0.9 %
10
VALORES DE REFERENCIA:
ADULTOS: 0.5 - 1.5%
RECIEN NACIDOS:
2.5 - 6.5%
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Conclusión
Como grupo se llego a la conclusión de que estas pruebas son de vital importancia
para poder generar un diagnostico de cualquier enfermedad. Por ejemplo
El hematocrito es una gran herramienta para determinar en una persona si tiene
anemia o se encuentra normal en cuanto a la hemoglobina, porque esta sirve
para determinar problemas como la falta de hierro u otra vitamina y también que
tipo de anemia presenta el paciente.
En cuanto al conteo de reticulocitos nos ayuda a saber si la medula ósea esta
produciendo adecuadamente los glóbulos rojos y también para poder hacer
correcciones en el conteo de glóbulos blancos al ser necesario.
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Bibliografía
Bauer J. Análisis clínicos. Métodos clínicos e interpretación. 1ª ed. Barcelona:
Editorial Reverté S.A., 1986.
Rapaport S. Introducción a la hematología. 2ª ed. México: Salvat Editores;
1989.
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003645.htm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003637.htm
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Anexo
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Anexo 2
Hemoglobina
Como medir un hematocrito