“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

DOCENTE: Bioq. Farm. Carlos García MSc.

ESTUDIANTE: Ochoa Verzosa Stefanny Ximena

CURSO: Quinto Año PARALELO: “A”

GRUPO N°: 7

FECHA DE ELABORACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 28/09/2015

FECHA DE PRESENTACIÓN DE LA PRÁCTICA: Lunes, 05/09/2015

CALIFICACIÓN:

PRÁCTICA N° 17

TÍTULO DE LA PRÁCTICA:

INTOXICACIÓN POR ÁCIDO NÍTRICO

TÓXICO:

Administrar 5 mL (mililitros) de Ácido Nítrico

ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN: Rata wistar

VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Intraperitoneal

T. DE MUERTE: 10 minutos

SINTOMAS:

Lagrimeo,

Irritación de mucosas oculares y respiratorias,

Vómito con sangre. ÁCIDO

TIEMPOS: NÍTRICO

Inicio de la práctica: 7:30 am

Hora de muerte: 7:40 am

Hora de disección: 7:50 am

Hora del baño maría: 8:00 am

Finalización del baño maría: 8:30 am

Final de la práctica: 10:30 am

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA:

1. Observar las reacciones que presenta el animal de experimentación

ante la Intoxicación por Ácido Nítrico.

2. Observar cuidadosamente las manifestaciones clínicas (síntomas) y

controlar el tiempo en que actúa el toxico ácido nítrico e ir adquiriendo

la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de

identificación.

MATERIALES:

Bisturí,

Gradilla,

Panema,

Fósforos,

Piola larga,

Mandil largo,

Perlas de vidrio,

Varilla de vidrio,

Tubos de ensayo,

Jeringa de 10 mL,

Gorro desechable,

Agitador de vidrio

Espátula de metal,

Tabla de disección,

Mechero de Alcohol,

Equipo de disección,

Equipo de destilación,

Guantes desechables,

Tapa tubos de caucho,

Mascarilla desechable,

Zapatones desechables,

Recipientes de aluminio,

Tubos de ensayo de vidrio,

Pipeta graduada de 10 mL,

Pinza para tubos de ensayo,

Papel para realizar pesadas,

Vaso de precipitación 250 mL

Vaso de precipitación 600 mL

SUSTANCIAS:

Agua destilada,

Ácido Nítrico,

Papel rojo congo,

Solución Alcoholica de

violeta de metilo,

Reactivo de Ginziburg,

Brusina,

Anilina,

Sulfato ferroso,

Fenol.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

MUESTRAS:

Muestra de medios biológicos.

EQUIPOS:

Balanza analítica,

Cocineta eléctrica,

PROCEDIMIENTO:

1. Inmediatamente al ingreso de los estudiantes al Laboratorio de

Toxicología se debe equipar adecuadamente con mandil largo, limpio,

sin manchas, gorro desechable, mascarilla desechable, guantes

desechables y zapatones desechables. Todo esto se realiza siguiendo

las normas del Laboratorio para evitar posibles contaminaciones y

contribuir con el orden.

2. Desinfectar el área de trabajo para realizar la práctica de Toxicología,

siempre se debe tener limpio el mesón de trabajo y tener listo a

disposición los respectivos materiales que se utilizaran en la práctica

correspondiente en el Laboratorio de Toxicología.

3. Se procede a la administración del tóxico en este caso es el Ácido

Nítrico y la dosis es de 5 (cinco) mililitros al animal en experimentación

que es la rata wistar; con la dosis de veinte mililitros ocasiona la

muerte del animal en experimentación.

4. Se prepara la solución tóxica de Ácido Nítrico y con ayuda de una

jeringa de diez mililitros se procede a la administración del tóxico por

vía intraperitoneal y una vez transcurrido el tóxico al animal en

experimentación, se observan los síntomas inmediatamente.

5. A dosis de cinco mililitros causa la muerte del animal, observando la

sintomatología del animal, transcurrido este tiempo se coloca a la rata

wistar en el panema se procede a afeitar el área a realizar la incisión.

6. Con la ayuda de un bisturí estéril se disecciona todo el dorso del

animal evitando perforar las vísceras luego se recogen las vísceras en

un vaso de precipitación.

7. Observamos los cambios que presentan sus órganos y con la ayuda de

una jeringuilla se recoge el líquido que hay en su cavidad abdominal

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

8. Triturar las vísceras lo más fino posible, agregar las 50 perlas de vidrio

más 2 gramos más solución Clorato de potasio e ir añadiendo con

pipeta graduada los 25 mililitros de Ácido clorhídrico concentrado,

llevamos a baño maría por 30 minutos con agitación regular. Este paso

se lo realiza en la campana extractora de gases tóxicos.

9. Una vez finalizado el baño maría dejar enfriar, filtrar y con el filtrado

realizar las reacciones de identificación. Al finalizar la práctica, se

procede al levantamiento de todos los medios biológicos y materiales de

Laboratorio, se desinfecta nuevamente el área de trabajo, se desechan

los materiales y que queden en su lugar y en orden luego desinfectarse

las manos.

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS:

Destruida la materia orgánica se realizan las reacciones de

reconocimiento, después de haber filtrado la mezcla. Estas reacciones

son:

REACCIONES PARA RECONOCER AL ACIDO NITRICO

1. Al hacer reaccionar un papel embebido con rojo congo, este se

colorea de azul en caso positivo.

2. Se trata una porción del líquido con solución alcohólica de violeta

de metilo 1:100, produciéndose una coloración azul-gris-verde ante

la presencia de acidos minerales.

3. La reacción con el reactivo de gunzburg (1 g de vainillina, 1 g de

fluoroglucina en 30 ml de alcohol), es posiblemente la reacción más

específica para identificar a los acidos minerales para lo cual se

evapora una pequeña cantidad de la muestra a baño maria y se

agrega unas gotas del reactivo; en presencia de los acidos

minerales un color rojo-amarillento o rojo.

4. Con la brusina disuelta en el acido sulfúrico, se produce un color

rojo en caso positivo.

5. Con la anilina en acido sulfúrico toma un color azul en presencia de

acido nítrico.

6. Con el sulfato ferroso, al adicionar a la muestra unas gotas del

reactivo y luego acido sulfúrico puro, debe dar un color rosado.

7. Con el fenol al agregar en acido sulfúrico a la muestra acidificada

en acido acético debe formarse un color amarillo en caso de

encontrarse el acido nítrico, si al principio se los agregan gotas de

amoniaco, el color amarillo original, se vuelve mas intenso.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

GRÁFICOS:

1. Animal de experimentación

rata wister

2. Inyectar 10 ml del tóxico

3. Obseravr los síntomas de la rata

luego de haber administrado el tóxico

7. Una vez finalizado el baño maria dejar enfriar

y filtrar.

8. Obtener el filtrado para realizar las reacciones

correspondientes

4. Colocar las salesde mercurio y agitar

5. Extraer y triturarlas víceras, colocar50 perlas de vidrio

6. Llevar a bañomaria por 30 minutoscon agitación regular

5 4

3 2 1

6

7 8

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS CON

LA SOLUCIÓN PROBLEMA:

1. REACCIÓN CON EL PAPEL ROJO CONGO

REACCIÓN POSITIVA

Al hacer reaccionar un papel embebido con rojo congo, este se colorea de azul en caso positivo.

RESULTADO:

POSITIVO CARCATERÍSTICO

2. REACCIÓN CON LA SOLUCIÓN ALCOHÓLICA DE VIOLETA DE

METILO 1:100

REACCIÓN POSITIVA

Se trata una porción del líquido con solución alcohólica de violeta de metilo 1:100, produciéndose una coloración azul-gris-verde ante la presencia de acidos minerales.

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo carcaterístico

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

3. REACCIÓN CON EL REACTIVO GUNZBURG:

REACCIÓN POSITIVA

La reacción con el reactivo de gunzburg (1 g de vainillina, 1 g de fluoroglucina en 30 ml de alcohol), es posiblemente la reacción más específica para identificar a los acidos minerales para lo cual se evapora una pequeña cantidad de la muestra a baño maria y se agrega unas gotas del reactivo; en presencia de los acidos minerales un color rojo-amarillento o rojo.

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

4. REACCIÓN CON LA BRUSINA DISUELTA EN ÁCIDO SULFÚRICO:

REACCIÓN POSITIVA

Con la brusina disuelta en el acido sulfúrico, se produce un color rojo en caso positivo.

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

5. REACCIÓN CON LA ANILINA DISUELTA EN ÁCIDO SULFÚRICO:

REACCIÓN POSITIVA

Con la anilina en acido sulfúrico toma un color azul en presencia de acido nítrico.

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

6. REACCIÓN CON EL REACTIVO GUNZBURG:

REACCIÓN POSITIVA

Con el sulfato ferroso, al adicionar a la muestra unas gotas del reactivo y luego acido sulfúrico puro, debe dar un color rosado.

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

7. REACCIÓN CON FENOL:

REACCIÓN POSITIVA

Con el fenol al agregar en acido sulfúrico a la muestra acidificada en acido acético debe formarse un color amarillo en caso de encontrarse el acido nítrico, si al principio se los agregan gotas de amoniaco, el color amarillo original, se vuelve mas intenso.

RESULTADO:

POSITIVO CARACTERÍSTICO

OBSERVACIONES:

En la realización de ésta práctica al haber administrado los cinco

mililitros de Solución tóxica de Ácido Nítrico por vía intraperitoneal

en la rata wistar y se pudo observar el deceso del animal.

RECOMENDACIONES:

Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el

laboratorio para evitar accidentes.

Toda sustancia a manipular en la práctica se las debe de realizar

bajo la campana extractora de gases.

CONCLUSIONES:

En esta práctica se pudo observar la intoxicación por Solución tóxica de Ácido Nítrico y con dosis de cinco mililitros de este tóxico ocasionó la muerte del animal con un tiempo de diez minutos, debido a la alta toxicidad que tiene este compuesto produciendo así diferentes manifestaciones o síntomas como lagrimeo, irritaión de mucosas oculares y respiratorias, vómito con sangre. Y así comprobamos que en las reacciones de identificación la presencia del tóxico como es la Solución tóxica de Ácido Nítrico

REACCIÓN ANTES

Reacción de coloración:

DESPÚES

RESULTADO: Positivo Característico

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

CUESTIONARIO:

1. CUAL ES LA DOSIS AGUDA Y CUAL ES LA DOSIS CRÓNICA

DEL ÁCIDO NÍTRICO

Es muy común en zonas rurales como la zona sur del estado de México,

que involucra a pacientes jóvenes e incluso niños predominando el sexo

femenino, previamente sanos, originarios de medios rurales, nivel

socioeconómico generalmente bajo.

2. EN QUÉ SE UTILIZA EL ÁCIDO NÍTRICO EN LAS INDUSTRIAS

EN LA INDUSTRIA AGRÍCOLA.- Se emplea como fertilizante de abono.

GLOSARIO

DOSIS LETAL: La dosis letal, también conocida por sus siglas en inglés

LD, es una forma de expresar el grado de toxicidad de una sustancia

ANEXOS:

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“

BIBLIOGRAFÍA

Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-

Médico. Madrid. España

AUTORIA

Ochoa Verzosa Stefanny Ximena

BQF. García González Carlos

FIRMA DE RESPONSABILIDAD:

-----------------------------------------------

FECHA DE ENTREGA:

Lunes 05 de Octubre del 2015