Tinción NegativaObjetivo:

◦Realizar una tinción negativa.Principios:

◦ Una tinción negativa requiere el uso de un tinte ácido como lo es el India ink o nigrosina.

◦ La tinción acídica con el cromógeno cargado negativamente, no podría penetrar a la célula debido a la carga negativa en la superficie de la bacteria.

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Tinción NegativaPrincipios:

◦ Por lo tanto, las células no teñidas son fácilmente detectadas contra el fondo de color.

◦ La aplicación parcial de la tinción negativa es doble. Ya que no se requiere la fijación de calor y la célula no están sujetos a los efectos distorsionadores de los productos químicos y el calor, su tamaño natural y la forma pueden ser vistos.

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Tinción Negativa

Principios:- Además, es

posible observar bacterias que son difíciles de teñir , tales como algunos espirilos.

• Materiales:◦ Cultivo de 24 horas◦ Tinte ácidico

(nigrosina)◦ Mechero◦ “Loop” de

inoculación ◦ Bandeja de tinción ◦ Microscopio◦ Papel de lente◦ Porta objeto

Tinción Negativa

Procedimiento:◦Vierta una gota del tinte ácidico

cerca de uno de los extremos del lado limpio de la laminilla.

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Tinción Negativa

Procedimiento:◦Utilizando técnicas estériles, colocar

con el loop parte del cultivo de la bacteria en la gota del tinte y mezclar.

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Tinción Negativa◦Con el borde de la segunda laminilla

mantenga a un ángulo de 45 grados y colocado delante de la suspensión bacteriana, empujar la mezcla para formar una capa delgada.

◦Séquelo al aire (NO caliente)◦Examine en microscopio. 6

Tinción Negativa

7Bacillis

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Tinción de Cápsula

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Objetivos

• Conceptos básicos sobre la base química de la tinción de  la cápsula.

• El procedimiento para distinguir el material cápsular de la célula bacteriana.

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Tinción de Cápsula

• Cápsula:• Es una capa gelatinosa externa que es secretada por

la célula que rodea y se adhiere a la pared celular.

• No es común en todos los organismos.

• Células con cápsula fuerte suelen ser más virulentos.

• Causan enfermedades.

• Están protegidos de la fagocitosis.

• cápsula:

• Se componen de azúcares y proteínas.

• No es vital, pueden tenerla como no pueden tenerla.

• La tinción de cápsula se denomina como una tinción negativa.

• Ya que se tiñe el fondo de la preparación y no el organismo.

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Tinción de Cápsula

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Tinción de Cápsula

• La tinción es muchos más difícil:

• El material de la cápsula es soluble en agua.

• El tinte puede ser removido por los lavados vigorosos.

• Se utilizan dos tintes:• Cristal Violeta: Célula y cápsula cogen el color oscuro.• Sulfato de Cobre: Sirve como agente de lavado,

despinta la cápsula y se fija a la cápsula. Se verá azul en contraste con el color violeta oscuro de la célula.

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Tinción de Cápsula

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Tinción de Cápsula

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Tinción de Cápsula

• Materiales:• Cultivo de 48 horas• Cristal violeta• Sulfato de Cobre 20%• Laminilla

• Procedimientos:

• En una laminilla limpia, coloque varias

gotas de cristal violeta.

◦ Mechero◦ Loop” de

inoculación ◦ Microscopio◦ Papel de lente◦ Porta objeto

• Procedimiento:• Utilizando técnicas asépticas

añada con el loop parte del

cultivo al tinte.

• Regar la muestra de forma

uniforme hasta quedar una

capa fina y déjelo de 5-7 min.

• Dejar secar al aire. NO FIJAR

POR CALOR

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Tinción de Cápsula (Método Antoni)

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Tinción de Cápsula (Método Antoni)

Lavar con sulfato de cobre al 20 %.

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Tinción de Cápsula (Método Antoni)

• Dejar secar el extendido al aire.

• Observar al microscopio bajo objetivo de

inmersión.

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Tinción de Cápsula (Método Antoni)

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