Microbiología Médica I

Tema # 10

Lic. Yudy Aranguren

Enero 2009

UNIVERSIDAD CENTROOCCIDENTAL “LISANDRO ALVARADO”

DECANATO DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SOCIAL

SECCION DE MICROBIOLOGÍA

BLOQUE 2:

TEMA 10: CONTENIDO:

• Cocos Gram positivos patógenos

• Morfotipos

• Géneros

• Características biológicas

• Diferenciación bioquímica

OBJETIVOS:

10.1.- Diferenciar los diferentes morfotipos de cocos según el exámen directo al

Gram

10.2.- Diferenciar los géneros Staphylococcus, Streptococcus y Enterococcus

según sus características morfológicas, tintoriales y bioquímicas.

10.3.- Describir los pasos para identificación de los diferentes géneros de cocos

Gram positivos

COCOS GRAM POSITIVOS

GÉNEROS DE IMPORTANCIA CLÍNICA

GÉNERO

STAPHYLOCOCCUS

GÉNERO

STREPTOCOCCUS

Clasificación de Lancefield:

Grupo A

Grupo B

Grupo C

Grupo D

No tipificables

GÉNERO

ENTEROCOCCUS

No Enterococcus:

Streptococcus bovis

1984 Estudios

ADN

GÉNERO:

• Cocos Gram positivo

Tinción de Gram

GENERALIDADES:

• No forman esporas

• Tienen forma redondeada y se presentan en pares o en grupos en forma de racimos de uva

• Inmóviles

• Aerobios y anaerobios facultativos

• Crecen a una temperatura óptima entre 30-37ºC.

• Fáciles de cultivar

• Algunos producen pigmentos

• Muy activos metabolicamente: Fermentan azúcares

- +

• Resistente a concentraciones de sal (7%)

Agar Salado Manitol 7%

• Son catalasa positivo:

ESPECIES DE IMPORTANCIA CLINICA

Staphylococcus saprophyticus

Staphylococcus aureus.

Staphylococcus epidermidis

Flora normal, pero potencialmente patógenos en casos de paciente inmunocomprometidos

CARACTERISTICAS :

• Produce pigmentos (algunas cepas)

• Coagulasa positivo• Manitol positivo

• Beta Hemolítico

IgGProteína A

Pared celularPeptidoglicano

Ac. Teicóico:

Adherencia inespecífica

Cápsula: Inhibe la fagocitosis

Adhesinas: Proteínas de superficie que favorece al anclaje a la célula huésped.

FACTORES DE PATOGENICIDAD: ESTRUCTURA CELULAR

U

U

U

UU

U

U

U

U

U

UU

U

U

U

U

TOXINAS:

Leucocidina

Hemolisinas

Toxina del sindrome del

shock tóxico (TSST-1)

Exfoliativa: sindrome de la “piel escaldada”

ENZIMAS (Invasinas):

Hialuronidasa

Lipasas

Nucleasa

Coagulasa

Estafiloquinasa

FACTORES DE PATOGENICIDAD: FACTORES SOLUBLES

Coagulasa: Transforma el fibrinógeno en fibrina formando una capa protectora

Lipasas

Proteasas

Hialuronidasa

Nucleasa

PRODUCTOS CELULARES:

ENZIMAS (Invasinas):

Difusión de la bacteria en los tejidos.

ENTEROTOXINAS

• Enterotoxinas: Hay 7 tipos diferentes que producen intoxicación alimentaria

• Leucocidina: Toxina que produce lisis de polimorfonucleares y de macrófagos

• Hemolisinas: Cuatro tipos de toxinas (alfa, beta, gamma y delta) lisan gróbulos rojos, leucocitos y la alfa es también dermonecrótica.

EXOTOXINAS:

• Toxina del Sindrome del Shock Tóxico (TSST-1): provoca los síntomas del SST.

• Exfoliativa: Toxina del sindrome de la “piel escaldada”

CARACTERISTICAS :

• Coagulasa negativo

• No hemolíticos

• Crece a 7% NaCl

• No fermenta Manitol

• Sensible a la Novobiocina

FACTORES DE PATOGENICIDAD:

• Presenta un glicocalix de protección

• Adherencia a superficies plásticas y metálicas

CARACTERISTICAS :

• No contiene proteína A

• Coagulasa negativo

• No hemolítico

• Crece a 7% NaCl

• No fermenta Manitol

• Resistente a la Novobiocina

FACTORES DE PATOGENICIDAD:

• Receptores oligosacáridos específicos de células de la uretra

Diagnóstico de laboratorio

REDUCCIÓN DE NITRATOS

COCOS GRAM POSITIVOS

CATALASA

? ?

NEGATIVAS

GÉNERO

Streptococcus

GÉNERO

Staphylococcus

POSITIVAS

PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:

REDUCCIÓN DE NITRATOS

COCOS GRAM POSITIVOS

CATALASA

• S. aureus

• S. epidermidis

• S. saprophyticus?

POSITIVAS

SENSIBILIDAD

A

LA

NOVOBIOCINA

COAGULASA

POSITIVA NEGATIVA

Staphylococcus aureus

S. epidermidis S. saprophyticus ?

+ -

SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO

RESISTENTE-CON

CRECIMIENTO

S. epidermidis S. saprophyticus

MORFOTIPOS

CARACTERISTICAS DEL GÉNERO

• Cocos Gram positivos dispuestos en cadenas

o en pares

• No poseen cápsula : Excepto los Streptococcus pneumoniae

• No son esporulados

• Catalasa negativo

• Aerobios facultativos

• Muy exigentes en cuanto a requerimientos nutritivos

• Fermentan azucares sin producir gas

- +

• Producen diferentes patrones de hemólisis:

ALFA

BETA

GAMMA

Grupo D no Enterococcus(Streptococcus bovis)

Enterococcus sp.

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL TIPO DE HEMÓLISIS

Streptococcus pyogenes

Streptococcus agalactiae

Enterococcus sp( algunas cepas)

Streptococcus pneumoniae

Streptococcusviridans

Enterococcus sp( algunas cepas)

Streptococcus pyogenes

Streptococcus agalactiae

CLASIFICACIÓN SEGÚN EL CARBOHIDRATO DE PARED CELULAR

• Clasificación de Rebeca Lancefield (1933)

• Sólo para los beta hemolíticos según el carbohidrato de pared especifico de grupo

GRUPO A

GRUPO B

Enterococcus sp.

GRUPO D (ac. Teicóico)

GRUPO C y G

CLASIFICACION SEGÚN SUS DIFERENCIAS FISIOLÓGICAS Y BIOQUÍMICAS:

Se establecen diferencias entre las 65 especies que componen este género.

• Se utilizan galerías de identificación específicas, como la galería API Strep • Posee más de 20 pruebas bioquímicas

API 20 Strep

ENFERMEDADES

FACTORES DE PATOGENICIDAD Streptococcus pyogenes

• Diplococos Gram positivos

Alfa hemolíticos

• Poseen cápsula FACTOR DE VIRULENCIA

Factores de patogenicidad:

1.- Cápsula

2.- Enzimas: neuraminidasa: factor de difusión

3.- Toxinas:

• Hemolisina dermatotóxica (neumolisina)

• Leucocidina

• Sensibles a la Optoquina

CARACTERÍSTICAS:

• Son beta hemolíticos

Streptococcus agalactiae

• Hidrolisan el hipurato

• Prueba de CAMP: El estreptococo

del grupo B produce un factor que aumenta la beta hemólisis de una cepa indicadora de S. aureus. S.pyogenes

S. aureus

S. agalactiae

Factores de patogenicidad: Producen enzimas: neuraminidasa, proteasa, hialuronidasa, y hemolisina

+ -

CARACTERÍSTICAS:

• Morfotipo: Diplococos

• Aerobios facultativos

• Hemólisis Gamma (No hemoliticos)

• Poco exigentes para cultivar

• Crecen a 6,5% de NaCl

• Enfermedades nosocomiales: Resistencia natural a cefalosporinas y otros antibióticos

• 12 Especies: Más comunes: Flora normal intestinal

Enterococcus faecalis 85-90%

Enterococcus faecium 5-10%

FACTORES DE PATOGENICIDAD: citolisinas, hialuronidasas,

beta lactamasa

CLASIFICACIÓN POR PRUEBAS BIOQUÍMICAS:

1.- Hidrólisis de bilis-esculina:

Todos lo Streptococcus del Grupo D son Bilis-esculina

POSITIVO

-+ -+

2- Crecimiento en solución salina al 6,5%

• Enterococcus (Enterococcus faecalis , Enterococcus faecium) : CRECEN

• No Enterococcus (Streptococcus bovis): NO CRECEN

+ -

CARACTERISTICAS:

• Habitan la boca principalmente: Flora normal

• Responsables de las caries

• Hemólisis Alfa

Streptococcus mutans

Streptococcus mitis

Streptococcus salivarium

Streptococcus sanguis

• No son tipificables con las pruebas anteriores

COCOS GRAM POSITIVOS

(Cadenas y pares)(Grupos)

HemolisisCoagulasa

MUESTRA: Extendido y frotis para Tinción de Gram

• Exudado faringeo

• Pus

• Sangre

• LCR

1.- EXAMEN DIRECTO: Tinción de Gram

Gram: cocos Gram positivos

EN RACIMOS ?

EN CADENAS?

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE COCOS GRAM POSITIVOS

2.- PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:

REDUCCIÓN DE NITRATOS

NEGATIVAS

Streptococcus

COCOS GRAM POSITIVOS

CATALASA

• S. aureus

• S. epidermidis

• S. saprophyticus?

POSITIVAS

COAGULASA

POSITIVA NEGATIVA

Staphylococcus aureus

S. epidermidis S. saprophyticus?

SENSIBILIDAD A LA NOVOBIOCINA

SENSIBLE-SIN CRECIMIENTO

RESISTENTE-CON

CRECIMIENTO

S. epidermidis S. saprophyticus

Enterococcus sp (Grupo-D)

Crece en NaCl 6,5%

S. pyogenes

(Grupo-A)Sensible a Bacitracina

S. agalactiae (Grupo-B)

Prueba Camp positiva

S. pneumoniaeSensible a Optoquina

Grupo Viridans Reacciones bioquímicas

ALFA GAMMA BETA

Streptococcus3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE: Agar sangre en 10% Co2:

Enterococcus sp (Grupo-D)

Crece en NaCl 6,5%

Enterococcus sp (Grupo-D)

Crece en NaCl 6,5%

Grupo-D

No EnterococcusNo crece en NaCl 6,5%

Grupo Viridans Reacciones bioquímicas

PRUEBA BIOQUÍMICASTAPHYLOCOCCUS

AUREUSSTAPHYLOCOCCUS

EPIDERMIDISSTAPHYLOCOCCUS

SAPROPHYTICUS

Coagulasa POSITIVO NEGATIVO NEGATIVO

Produce pigmentos SI NO NO

Crece a 7% NaCl SI SI SI

Fermenta

ManitolSI NO NO

Sensibilidad a

la Novobiocina ----- SI NO

AUTOEVALUACIÓN

TIPO DE HEMÓLISIS

AUTOEVALUACIÓN

NO HEMOLITICO

Unidos podemos

cambiar al mundo!