Inoculacin: la inoculacin es una estrategia utilizada cuando es posible una cierta permanencia del enemigo natural en el cultivo pero que es incapaz de vivir sobre l de forma permanente. Las liberaciones inoculativas se hacen al establecimiento del cultivo para colonizar el rea durante el tiempo de permanencia del cultivo (o estacin climatolgica) y de esta forma prevenir los incrementos de la densidad del agente perjudicial.

noculacin (Del latn inoculare, injertar). Introduccin en el organismo, a travs de una escara practicada en los tegumentos, de una sustancia que contiene los grmenes de una enfermedad (microbio patgeno o virus).

Medio de cultivo

Una placa de agar -- un ejemplo de crecimiento medio bacteriano. Las lneas y los puntos naranjas son colonias bacterianas. Un medio de cultivo consiste en un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir (bajo condiciones favorables de pH y temperatura) el crecimiento de virus, microorganismos, clulas o incluso pequeas plantas. Segn qu se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones. Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado slido, semislido y lquido. El objetivo ltimo del cultivo es variado: antibiograma, identificacin, multiplicacin... Los Virus, por ejemplo, son obligados parsitos intracelulares por eso necesitan de un medio que contenga clulas vivas.

[editar] ClasificacinSegn sus cualidades fsicas distinguimos:

Lquidos Semi-slidos Slidos

Segn su formulacin:

Qumicamente definidos: se conoce exactamente la cantidad de cada uno de los compuestos que hay en el medio. Complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura, sangre,...). Por tanto, no se conoce exactamente cual es la composicin del medio. Sin embargo, presenta la ventaja de que ya estn presentes todos o casi todos los elementos que una clula puede requerir.

Segn su uso:

Medio General: Es aquel medio donde crecen todo tipo de microorganismos, excepto aquellos que necesitan de unas condiciones especiales.

Ejemplo:Agar CLED

Selectivos: permiten seleccionar el crecimiento de una especie o grupo determinado (hongos, bacterias entricas, protozoos...). Diferenciales: permiten identificar una especie o grupo por su crecimiento ya sea por su metabolismo, respiracion, etc.

Ejemplo:Medio de McConkey

De enriquecimiento: son medios diseados para permitir el crecimiento del mximo nmero de especies posible. Pueden usarse, por ejemplo, para estudiar todos los microorganismos presentes en una muestra. Mnimo: contienen la mnima cantidad de nutrientes posible que permite el crecimiento de una especie. De transporte: est preparado para servir de almacenamiento temporal a especmenes transportados. manteniendo su viabilidad y su concentracin. Simple

[editar] Conteo BacterianoGeneralmente tras anlisar un cultivo se realiza un conteo bacteriano con el fin de saber cul es la densidad de poblacin microbiana que se encuentra en el medio. 1 Los medios de cultivo en microbiologa Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan su licuacin. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes. Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).

http://www.danival.org/notasmicro/medioscult/_madre_medios.html .Denominacin de especies De acuerdo con la convencin que establece el sistema binomial de nomenclatura, cada especie biolgica lleva un nombre latinizado que consiste en dos palabras: la primera indica en grupo (gnero) a que pertenece la especie, y la segunda palabra indica la especie de ese gnero: por ejemplo, Escherichia coli, Escherichia (nombre genrico gnero) y coli (nombre especfico especie). En la ordenacin taxonmica de un grupo biolgico, las distintas especies se van agrupando sucesivamente en una serie de categoras de orden superior: gnero, familia, orden clase, y divisin (o phylum). Esta es la llamada ordenacin jerrquica, porque cada categora, en la serie descendente, agrupa un nmero cada vez mayor de unidades taxonmicas, basndose en un nmero cada vez menor de propiedades compartidas.

introduccion:El medio de cultivo es la combinacin slida o lquida de nutrientes y agua. Usualmente incluye sales inorgnicas, carbohidratos y vitaminas y aminocidos. A menudo se

denomina Medio Basal y puede ser suplementado con algn regulador de crecimiento y ocasionalmente con otras sustancias varias.http://www.monografias.com/trabajos/bactevet/bactevet.shtml

MEDIOS DE CULTIVOS Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Su creicmiento es favorecido por la adicin de sangre y suero, son adecuados agar y caldo sangre.Es necesario incubar 48 hr para distinguirlas de las colonias de estreptococos y se presentan grisceas, cremosas, hmedas, trnaslcidas, opacas o pigmentadas, con hemlisis alfa en caso de C. pyogenes y C. pseudotuberculosis. Son catalasa positiva a excepcion de C. pyognes y C. suis. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION: Prueba de potenciacin de la hemolisis entre C. pseudotuberculosis y R. equi. GENERO: Erysipelothrix CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos pleomrficos que tienden a formar largos filamentos, aerobios aunque su crecimiento se favorece en microaerobiosis (5-10% de bixido de carbono), inmviles, no producen cpsula ni esporulan, son Gram positivos. ESPECIES IMPORTANTES: E. rhusopathiae: 8 serogrupos HABITAT: Materia orgnica en descomposicin y como parsito del tracto intestinal, urinario y piel de un gran nmero de especies animales incluyendo mamferos, aves, peces y crustceos. FACTORES DE VIRULENCIA. Indefinidos ENFERMEDADES EN ANIMALES: E. rhusiopathiae se encuentra ampliamente difundido en la naturaleza como parsito de mamferos, aves y peces. Es el agente etiolgico de la erisipela o mal rojo del cerdo, produce poliartritis crnica en ovinos, bovinos y ocasionalmente en otras especies, septicemia en aves. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar sangre ms azida de sodio (alfa hemolticas o no hemolticas), donde crecen colonias mucoides o rugosas despus de 48 hr. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION:

Produce muerte en ratones entre 2 y 5 das post-inoculacin intraperitoneal.. GENERO: Escherichia CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos cortos facultativos, mviles y Gram negativos ESPECIES DE IMPORTANCIA: E. coli: Se distinguen varios serotipos en base a la presencia de antigenos somticos (0), capsulares(K) y flagelares(F). HABITAT: Tracto intestinal de animales y hombre. FACTORES DE VIRULENCIA: - Sindrome enterotoxignico - pili o fimbria (antgenos F4 y F5, antes denominados K88 y K99 respectivamente) -Produccin de enterotoxinas: ST , LT. -Sndrome enterotoxmico: - Endotoxina (LPS). -"EDP" (principio de la enfermedad del edame) -Sndrome colisepticmico: -CLT (toxina letal para pollos). -Plsmido Col. V: El mecanismo por el cual confiere mayor virulencia no est bien esclarecido. ENFERMENDADES EN ANIMALES: Serotipos enteropatgenos que se asocian a la produccin de diarreas en cerdos, bovinos, ovinos, caprinos y equinos. Cerdos: diarrea del recin nacido, diarrea de las tres semanas, diarrea al destete, enfermedad del edema. Becerros: septicemia, endotoxemia, diarrea. Aves: Colisepticemia, coligranuloma (no descrito en Mxico). Se considera patgeno oportunista en infecciones de vas urinarias y respiratorias, mastitis, onfalitis y otros procesos infecciosos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES:

Como el resto de las enterobacterias, no son exigentes pero es adecuado el uso de medios selectivos y diferenciales como: agar McConkey, eosina azul de metileno y ENDO entre otros; en el segundo las colonias presentan un caracterstico verde con brillo metlico que lo distingue como fermentedor rpido de la lactosa, caracterstica que comparte con dos gneros ms de enterobacterias: Enterobacter y Klebsiella. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION: -La capacidad de produccin de enterotoxinas puede evaluarse con las siguientes pruebas: Inoculacin en segmento ligado de intestino de lechones (LT y ST); Inoculacin de ratones lactantes para determinacin de ST. Efecto citoptico en cultivos celulares de las lneas CHO y VERO (LT). -Aglutinacin serolgica: diferentes cepas de E. coli aisladas de diversos procesos patolgicos pueden serotipificarse mediante antisueros de referencia. -Fagotipificacin GENERO.Salmonella CARACTERISTICAS GENERALES Son bacilos cortos facultativos, generalmente mviles y Gram negativos. ESPECIES IMPORTANTES: La desintegracion de especies en el gnero Salmonella es controversial. Tentativamente se aceptan todos los serotipos de Salmonella que no son typhosa o cholerasuis. Ejemplo: S. enteritidis serotipos abortus, equi, typhimurim, Los serotipos se definen con base en antgenos somticos (0), capsulares (Vi) y flagelares(H). HABITAT: Tracto intestinal de animales portadores. Algunos serotipos tienen poca especifidad de huesped y pueden aislarse inclusive del tracto intestinal de animales de sangre fra. Otros serotipos muestran una alta especificidad de husped. Ejemplo: S. enteritidis serotipo abortus equi est adaptada a equinos; S. enteritidis abortus ovis a ovinos; S. enteritidis pullorum y gallinarum a aves y S. enteritidis dublin a becerros. FACTORES DE VIRULENCIA: Endotoxnas (LPS) Cpsula (antigno Vi) presente slo en algunas cepas de S. typhosa, S. enteritidis serotipos paratyphi y dublin.

Se considera que algunos serotipos pudieran producir una enterotoxina. ENFERMEDADES EN ANIMALES: S. enteritidis serotipos: abortus ovis, abortus equi y dublin abortos en bovinos, equinos y ovinos, respectivamente. abortus equi provoca diarreas y septicemias en diferentes especies de animales (salmonelosis) S. cholerasuis enteritis, septicemia y neumona en cerdos MEDIOS DE CULTIVOS Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Caldo Selenito y tetrationato como medios de enriquecimiento que debern incubarse por 18-24 hr despus de su inoculacin, para despus sembrar diferentes medios selectivos y diferenciales como: agar Salmonela-Shigella SS y verde brillante entre otros. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION: -serotipificacin por medio de antisueros de referencia. -fagotipificacin GENERO:Campylobacter CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos curvos microaeroflicos, sin agrupacin definida, Gram negativos, con movimiento caracterstico en espiral que se observa en microscopa de campo oscuro o contraste de fases. Difcil de observar en frotis teidos a campo claro. C. fetus ss. veneralis es un espirilo de1.5-5um de largo por 0.2-0.3 um de ancho, por lo general mvil, acapsulados, no esporulados. ESPECIES IMPORTANTES: C. fetus ss. venerealis C. fetus ss. fetus C. jejuni C. sputorum ss.sutorum, bubulus y mucosalis C. coli C. concisus

C. hyointestinalis Los diferentes serotipos se definen con base en los antignos somticos y flagelares. HABITAT: tracto intestinal de bovinos y ovinos; prepucio de los toros (C. sputorum ss. bubulus como agente saprfito) FACTORES DE VIRULENCIA: ENFERMEDADES EN ANIMALES: C. fetus ss. fetus aborto en ovinos C. fetus ss. venerealis infertilidad, reabsorciones embrionarias y en algunas ocasiones aborto C. sputorum ss. mucosalis y C. hyointestinalis asociados a enteritis proliferativa en cerdos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Se emplean medios enriquecidos y selectivos (adicionando antibiticos), son adecuados los medios SET, Duffty y BU7.Caldo tioglicolato-Agar Brucella con bacitracina y novobiocina (medio selectivo). Es necesario incubar en microaerobiosis y diferentes temperaturas 37 C y 42 C (C. jejuni). Las colonias son grises, convexas y brillantes de 1-2 mm de dimetro, no producen hemlisis y son oxidasa positivos. El aislamiento es el nico medio para confirmar las enfermedades en el hato o rebao. GENERO: Treponema CARACTERISTICAS GENERALES: Son espirilos que no se tien bien con Gram, su observacin se realiza en preparaciones hmedas bajo el microscopio de campo oscuro.Anaerobios. ESPECIES IMPORTANTES: T. hyodisenteriae T. cuniculi T. suis T . carateum T. pallidum. HABITAT: Membranas mucosas de animales y hombre. Animales portadores.

FACTORES DE VIRULENCIA: No bien identificados, es posible que T. hyodisenteriae produzca una citotoxina. ENFERMEDADES EN ANIMALES: T. hyodisenter asociado a la disentera porcina. T. cuniculi Sfilis del conejo. T. suis ulceracin del prepucio en cerdos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar sangre incubado en anaerobiosis.En ocaciones es preciso filtrar una suspencin de la muestra clnica (especialmente heces), a travs de una membrana con poro de 0.65 um a fin de eliminar contaminantes, pueden utilizarse medios selectivos (agar sangre con spectinomicina) GENERO: Moraxella CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos cortos, aerobios, generalmente mviles y Gram negativos. ESPECIES DE IMPORTANCIA. M. bovis HABITAT: Membranas mucosas de amimales (principalmente conjuntiva ocular y cavidad nasal). FACTORES DE VIRULENCIA: fimbrias, hemolisinas, endotoxina (LPS), posiblemente una exotoxina. ENFERMEDADES EN ANIMALES: Queratoconjuntivitis infecciosa bovina. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar Sangre (produce zonas de beta hemlisis). GENERO: Mycoplasma. CARACTERISTICAS GENERALES:

Son microorgansmos que carecen de pared celular, pleomrficos, no mviles, facultativos. ESPECIES IMPORTANTES: M. bovis. M. mycoides ss. mycoides. M. mycoides ss. capri. M. agalactiae. M. hyopneumoniae. M. synoviae M. hyorhinis. M.gallisepticum. M. meleagridis. Algunas especies son subdivididas en serotipos en base a antgenos membranales. HABITAT: Membranas, mucosas y epitelios de animales y hombre. La mayora de los Mycoplasmas muestran una alta especificacidad de husped. FACTORES DE VIRULENCIA: Cpsula (en el caso de M. mycoides ss. mycoides, est constituida a base de galactano). Produccin de H2O2 y NH3, de hemolisinas y es posible que algunas especies produzcan exotoxinas. ENFERMEDADES EN ANIMALES: M. mycoides Pleuroneumona contagiosa bovina. M bovis Artritis y mastitis bovina. M. bovigenitalium Mastitis, vaginitis bovina. M.. mycoides ss. capri posible agente etiolgico de la pleuroneumonia contagiosa caprina y ovina. M. agalactiae Agalactia contagiosa en ovinos y caprinos. M. hyopneumoniae Pneumonia enzootica en cerdos.

M. synoviae Sinucitis infecciosa en aves. M. gallisepticum Enfermedad crnica respiratoria de aves. M. meleagridis Aerosaculitis en pavos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Para el cultivo de los Mycoplasmas se requieren factores de crecimineto presentes en el suero (colesterol), extracto de levadura (precursores de DNA) y algunas vitaminas.Medio selectivo PPLO caldo o agar, adicionado de penicilina y acetato de talio. La mayora forma colonias tpicas con aspecto de huevo estrellado. La identificacin de especies puede realizarse mediante pruebas bioqumicas o mediante inhibicin de crecimiento o metabolismo utilizando antisueros de referencia. GENERO: Haemophilus CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos cortos con tendencia a formar filamentos, no mviles, no esporulados, anaerobios facultativos y Gram negativos. ESPECIES IMPORTANTES: H. influenzae A. pleuropneumoniae (H. pleuropneumoniae). H. parasuis. H. paragallinarum. H. somnus y Taylorella o Haemophilus equigenitalis son especies de clasificacin incierta en el gnero. HABITAT: Son comensales del aparato respiratorio superior de los animales. Membranas mucosas de animales y hombre. FACTORES DE VIRULENCIA: Cpsula (H. influenzae, H. paragallinarum, A.. pleuropneumoniae). Endotoxina (LPS) ENFERMEDADES EN ANIMALES: H. pleuropneumoniae Pneumona con alta mortalidad en ausencia de factores predisponentes en cerdos H. parasuis enfermedad de Glasser de cerdos (poliserositis). H. paragallinarum Coriza contagiosa de las aves

H. somnus Afecta a los bovinos de tres formas principalmente: 1. problemas de tipo neumnico acompaados de bacteremia, 2. localizacin a nivel de SNC dando orgen a la meningoencefalitis tromboemblica y problemas articulares y 3. infecciones del tracto genital (aborto). H. equigenitalis Endometritis y cervicitis en equinos transmisin venrea. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Para su cultivo se requieren factores de crecimiento: el factor X (protoporfirina IX o protohemina) y/o protoporfirina y el factor V (nicotinamin adenin dinucletido o NAD). Los requerimientos del factor X y V pueden determinarse inoculando agar triptosa conteniendo una estra de Sta. aureus como cepa nodriza (satelitismo).Algunas especies requieren 5-10% de CO2. GENERO: Pasteurella CARACTERISTICAS GENERALES: Son cocobacilos no mviles, Gram negativos que tienen aspecto bipolar teidos con Leishman o Wright, aerobios y anaerobios facultativos, poseen cpsula y no forman esporas. ESPECIES IMPORTANTES: P. multocida: 5 serotipos en base a antgenos capsulares (A,B,D,E y F) y en 16 serotipos de orgen somtico. P. haemolytica: 2 biotipos A y T en base a la fermentacin de arabinosa y trealosa respectivamente y 16 serotipos basados en antgenos capsulares. P. peumotropica P. aerogenes P. gallinarum HABITAT: Su distribucin es mundial, son comensales de Membranas y mucosas de las vas respiratorias altas y tracto digestivo de animales (mamferos y aves) clnicamente sanos, por lo que son considerados invasores secundarios (oportunistas) al verse reducida la resistencia del animal por diferentes circunstancias. FACTORES DE VIRULENCIA: Endotoxina (LPS) Cpsula citotoxica (P. multocida)

ENFERMEDADES EN ANIMALES: P. multocida procesos neumnicos en bovinos, ovinos, cerdos, caprinos y otras especies, catarro de los conejos y rinitis atrfica del cerdo. mastitis severas en rumiantes. agente primario del Clera aviar Septicemia hemorrgica en bovinos y bfalos (solo los serotipos B y E no reportados en Mxico) P. haemoltica Pneumona en bovinos ovinos y caprinos. Septicemia en corderos. Mastitis en ovinos. P. pneumotropica invasor secundario en casos de neumona en ratones y ratas y casos de enteritis en hamsters P. gallinarum oportunista en problemas respiratorios de aves. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: P. multocida requiere de medios enriquecidos con suero o sangre.P. haemoltica produce hemlisis y crece en MacConkey. Es adecuado el agar o caldo sangre. La prueba de oxidasa es positiva para todo el gnero. GENERO: Bordetella CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos cortos que se observan generalmente solos o en pares, Gram negativos, tincin bipolar frecuente, aerobios estrictos, con movilidad variable, cpsulados y no forman esporas. ESPECIES IMPORTANTES: B. pertusis B. bronchiseptica HABITAT: Epitelio ciliado de la nariz y tonsilas. FACTORES DE VIRULENCIA: Cpsula Exotoxinas (toxina pertusis; toxina dermonecrtica de B. pertusis y B. bronchiseptica) Fimbria (B. bronchiseptica) ENFERMEDADES EN ANIMALES:

B. bronchiseptica Rinitis atrfica del cerdo en asociacin con P. multocida. Importante agente etiolgico de la llamada tos de las perreras. Pneumona en porcinos y candeos (solo o como germen de asociacin del moquillo canino). Aislado en problemas respiratorios en roedores, gatos y equinos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar MacConkey con 1% de glucosa, adicionado de penicilina GENERO: Mycobacterium CARACTERSTICAS GENERALES: Bacilos cido-alcohol resistentes. (Tincin de Ziehl-Neelsen, tincin fluorescente a base de auramina es utilizada con frecuencia). No mviles. ESPECIES IMPORTANTES: M. leprae M. tuberculosis M. bovis M. avium/intracelulares Con base en la velocidad de crecimiento y a la produccin de pigmentos Runyon distingui 4 grupos: Fotocromgenas, Escotocromgenas, No cromgenas y de crecimiento rpido. HABITAT: Medio ambiente como saprfitos del suelo, animales infectados (portadores) FACTORES DE VIRULENCIA: Factor de acordonamiento (6,6 - Dimicoliltrealosa) Sulfolpidos (Trealosa,2-sulfato) Produccin de micobactinas (protenas quelantes del hierro) ENFERMEDADES EN LOS ANIMALES: M. bovis Tuberculosis en bovinos, humanos y ocasionalmente en otras especies M. avium Tuberculosis en aves y ocasionalmente en otras especies. M. paratuberculosis Paratuberculosis en bovinos

Con creciente frecuencia, las micobacterias distintas al M. tuberculosis se encuentran asociadas a diversas infecciones de animales y el hombre. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Requieren aporte de lpidos (a menudo proporcionados mediante la adicin de yema de huevo en el medio de cultivo). Medios selectivos: Lowenstein-Jensen, StonebrickLeslie. La produccin de pigmentos en presencia o ausencia de la luz y la velocidad de crecimiento son factores importantes en la identificacin. GENERO: Clostridium CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos Gram positivos en estados jvenes de crecimiento, mviles o inmviles. Las especies mviles son peritricos. producen esporas de forma oval o esfrica cuya posicin vara con la especie. Anaerobios obligados, no poseen cpsula excepto Cl. perfringens. Segn la especie los bacilos pueden observarse rectos, curvos, delgados, con extremos romos, redondos, afilados y en ocasiones hasta en espirales o enrrollados. ESPECIES IMPORTANTES: Cl. tetani Cl. botulinum tipos A-G. Cl. haemolyticum (Cl. novyi D) Cl. septicum Cl. novyi Cl. chauvoei Cl. perfringens Cl. sordelii HABITAT: Medio ambiente: suelo, agua, tracto intestinal de animales y el hombre. FACTORES DE VIRULENCIA: C. tetani: tetanolisina y tetanospasmina C. botulinum: toxina botulnica (neurotoxina). La produccin de toxina por algunas cepas de este, depende de la presencia de un profago. Existen 7 tipos inmunolgicos de toxina (A-G)

C. novyi: La especie es dividida en cuatro tipos: A-D, de acuerdo a la produccin de toxinas alfa (letal necrosante), beta (lecitinasa) y gamma (necrosante, lecitinasa). C. septicum y C. chauvoei producen 4 tipos de exotoxinas: Alfa (letal, necrosante y neurotxica para el caso de C. chauvoei), Beta (desoxiribonucleasa), Gamma (hialuronidasa) y Delta ( hemolisina). C. perfringens: produce una amplia gama de exotoxinas y enzimas extracelulares, las ms importantes son : alfa (lecitinasa, letal), beta, epsilon y Jota (letales necrosantes). En base a la produccin de estas toxinas se reconocen 5 tipos de C. perfringens (A-E). C. perfringens tipo A produce la enfermedad de: cordero amarillo --------------------B: Disentera en corderos, enteritis ulcerativa en potros. --------------------C: Enfermedad del golpe, enteritis necrtica en lechones --------------------D: Enfermedad del rin --------------------E: Enterotoxemia en becerros y borregos ENFERMEDADES EN ANIMALES: C. botulinum Botulismo en diferentes especies de animales y el hombre C. tetani Ttanos en diferentes especies animales y el hombre C. novyi tipo A Cabeza grande en carneros. Gangrena gaseosa en ovinos --------------B Hepatitis necrtica (enfermedad negra) en ovinos --------------C Hemoglobinuria bacilar en ovinos C. septicum Gangrena gaseosa (edema maligno) en bovinos, ovinos, cerdos y ocasionalmente otras especies, infeccin del abomaso (braxy) en ovinos. C. chauvoei Gangrena gaseosa (pierna negra) en ovinos y bovinos MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Caldo tioglicolato, Agar sangre incubado en anaerobiosis(Gas-pack). La presencia de toxinas especficas en sangre (tetanolisina, tetanospasmina, toxina botulnica), o en contenido intestinal (toxinas de C. perfringens), puede realizarce inoculando ratones o cuyes. La identidad de la toxina presente en la muestra clnica se confirma bloqueando el efecto letal con antitoxinas de referencia (pruebas de proteccin) La diferenciacin entre C. chauvoei y C. septicum ( y otras especies de Clostridium), puede realizarce fcilmente por medio de inmunofluorescencia. GENERO: Fusobacterium

CARACTERISTICA GENERALES: Son bacilos Gram negativos, anaerobios estrictos, no mviles. ESPECIES IMPORTANTES: F. necrophorum HABITAT: Tracto gatrointestinal de animales y el hombre. FACTORES DE VIRULENCIA: LPS, Leucocidina, Posiblemente otras exotoxinas. ENFERMEDADES EN ANIMALES: Abscesos hemticos y en pezua (gabarro o pododermatitis) en bovinos.Difteria de los terneros, Dermatitis interdigital en ovinos (gabarro). Rinitis necrtica de los cerdos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar sangre incubado en anaerobiosis. Pueden aadirse antibiticos como Kanamicina, eritromicina y bacitracina.Caldo tioglicolato. GENERO: Actinobacillus CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos pleomrficos Gram negativos, facultativos, no mviles. ESPECIES IMPORTANTES: A. lignieresii A. suis A. equuli A. sominis HABITAT: Parsitos del tracto respitatorio, gastrointestinal y genital de animales y hombre. FACTORES DE VIRULENCIA: indefinidos ENFERMEDADES EN ANIMALES: A. lignieresii "lengua de madera" y abcesos en otros tejidos blandos en bovinos. Abscesos en piel, pulmones, testculos y glndula mamaria en ovinos.

A. equuli Septicemia en potros, Nefritis y artritis en potros y lechones. Endocarditis, meningitis, metritis y abortos en equinos y porcinos adultos. A. suis Septicemia, pneumona y artritis en cerdos A. sominis Orquitis y epididimitis en carneros. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar sangre: colonias generalmente duras y enterradas en la superficie del agar. GENERO: Pseudomonas CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilococos Gram negativos, aerobios y mviles. ESPECIES IMPORTANTES: Ps. aeruginosa Ps. mallei Ps. pseudomallei HABITAT: Saprfitos del suelo. FACTORES DE VIRULENCIA: Ps. aeruginosa: LPS, proteasas, hemolisinas, Linasas, Lecitinasas, enterotoxina, toxina letal (exotoxina A) que inhibe sntesis protica. Ps. mallei: Produccin de malena (substancia endotxica) Ps. pseudomallei: Toxina letal con efecto anticoagulante, toxina necrosante. ENFERMEDADES EN ANIMALES: Ps. aeruginosa Abscesos e infecciones purulentas (pus verde amarillento o azul verdoso) en diferentes especies animales. Mastitis en bovinos. Enteritis y pneumonas en cerdos. Ps. mallei Muermo en equinos Ps. pseudomallei Mieloidosis en diferentes especies animales. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES:

Agar nutritivo, donde Ps. aeruginosa produce una coloracin azul verdosa debido a la produccin de pigmentos piocianina y fluorescena. Tambin produce un olor caracterstico a tortilla hmeda. GENERO: Leptospira CARACTERISTICAS GENERALES: Son espirilos que muestran forma de gancho en uno o ambos extremos, no se tien con la tincin de Gram, pero s con Giemsa o con tinciones argnticas como las de Levaditi y Fontana. Aerobios obligados o microaeroflicos. mviles. ESPECIES IMPORTANTES: L. interrogans. subdividida en 20 serogrupos y aproximadamente 200 serotipos. L. biflexa L. illini HABITAT: L. interrogans: parsito obligado del tracto urinario (rin y tbulos contorneados) de animales portadores. L. illini y L. biflexa: Saprfitos del suelo y agua. FACTORES DE VIRULENCIA: Posiblemente LPS, produccin de hemolisinas y lipasas. ENFERMEDADES EN ANIMALES: L. interrogans Leptospirosis en diversas especies animales. Los serogrupos ms frecuentemente reportados son: L. icterohaemorrhagica, L. cancola, L. gripothyphosa. L. tarasovi, L. hebdomadis. Los signos clnicos ms comunes asociados a las leptospirosis son: conjuntivitis, anemia, hepatitis, ictericia, hematuria, infertilidad y abortos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Medios semislidos adicionados con suero de conejo: Fletcher, Stuart, Kohrtoff. La temperatura ptima de incubacin es de 30 C. La observacin microscpica de las leptospiras generalmente se lleva acabo en preparaciones hmedas observadas al microscpio de campo obscuro o contraste de fases. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION: Prueba serolgica de microaglutinacin con cepas vivas de referencia, que las identifican a nivel de serotipo.

GENERO: Brucella CARACTERISTICAS GENERALES: Son cocobacilos Gram negativos que miden 0.5-0.7 um , no tienen agrupacin especfica, aerobios estrictos o microaeroflicos, no mviles, no forman esporas,. ESPECIES IMPORTANTES: B. abortus: 9 biotipos B. mellitensis: 3 biotipos B. suis: 4 biotipos B. ovis B. canis B. neotomae HABITAT: Parsitos del tracto genital, glndula mamaria y sistema retculo endotelial de animales portadores. FACTORES DE VIRULENCIA: LPS, resistencia a la fagocitosis (intracelulares facultativos). ENFERMEDADES EN ANIMALES: B. abortus Abortos principalmente en bovinos, mal de cruz en equinos (asociados a Actinomyces) B. melitensis Abortos en ovinos y caprinos principalmente. B. suis Infertilidad y abortos en cerdos B. ovis Epididimitis e infertilidad en ovinos B. canis Abortos en perros. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar triptosa o Agar Brucella. Algunos biotipos requieren la adicin de suero y 5-10% de CO2, el crecimiento es lento 2-5 das, la diferenciacin de especies y biotipos se realiza mediante: pruebas bioqumicas, inhibicin por colorantes, pruebas de aglutinacin con sueros monoespecficos anti "A "y "M" y fagotipificacin. PRUEBAS COMPLEMENTARIAS DE IDENTIFICACION:

Inmunofluorescencia fagotipificacin ELISA Aglutinacin con sueros monoespecficos A y M. GENERO: Bacillus CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos rectos solos o agrupados en cadenas, Gram positivos, aerobios estrictos o microaeroflicos, mviles por flagelos peritricos, aerobios o anaerobios facultativos, poseen cpsula de naturaleza polipeptdica o polisacrida o de ambas. Producen endosporas, la forma elptica, la posicin y el tamao de la espora son de utilidad taxonmica.. (la formacin de esporas es inhibida cuando la presin parcial de CO2 es elevada como ocurre en los tejidos animales infectados). ESPECIES IMPORTANTES: B. anthracis B. cereus B. subtilis B. licheniformis B. alvei B. piliformis HABITAT: La mayora son saprfitos del aire, suelo y agua. FACTORES DE VIRULENCIA: Cpsula antifagoctica de naturaleza protica, exotoxina (factor adematizante), un antgeno protico que induce la formacin de anticuerpos neutralizados y un factor letal. ENFERMEDADES EN LOS ANIMALES: B. anthracis Muerte sbita con hemorragias en orificios naturales (anthrax o fiebre carbonosa) en bovinos y ovinos. Esta enfermedad es de distribucin mundial y afecta a todos los mamferos, puede presentarse en forma aguda, subaguda y crnica. Edema localizado principalmente en el cuello y faringe en equinos y cerdos. Enteritis en cerdos y perros.

B. cereus involucrado en problemas de intoxicacin alimentaria, mastitis y aborto. B. subtilis intoxicacin alimentaria B. licheniform lcera corneal B. alvei locus americano B. piliformis enfermedad de Tyzzer en ratones GENERO: Listeria CARACTERISTICAS GENERALES: Son bacilos Gram positivos, facultativos, mviles (movimiento tambaleante caracterstico) ESPECIES IMPORTANTES: Listeria monocytogenes: 15 serotipos HABITAT: Saprfito del suelo, comunmente aislado de forrajes, en silados y heces de diferentes especies de animales. FACTORES DE VIRULENCIA: Resistencia a la fagocitosis (intracelular facultativo) ENFERMEDADES EN ANIMALES: Movimiento en crculos, incoordinacin y parlisis (signos de encefalitis) en diferentes mamferos, aborto en bovinos y ovinos, muerte sbita en aves. Los animales infectados pueden desarrollar monocitosis (aumento en el nmero de monocitos en sangre). MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Agar sangre (Beta hemlisis, serotipos patgenos), el aislamiento de L. monocytogenes puede incrementarse realizando siembras peridicas (intervalos de 5-7 das) a partir de triturados de muestras clnicas mantenidas en refrigeracin (puede multiplicarse a 4 C). La virulencia de una cepa puede demostrarse mediante la prueba de Anton. Genero: Chlamydia CARACTERISTICAS GENERALES:

Son microorganismos anaerobios, Gram negativos con un ciclo caracterstico que presenta dos fases: la forma infecciosa extracelular (cuerpo elemental) y la forma de multiplicacin intracelular (cuerpo reticular). La forma extracelular es esfrica de aproximadamente 0.25 um.Se prefiere la tincin de Gimnez a la de Gram, con la que los cuerpos elementales se observan como cocos muy pequeos de color rojo sin agrupacin definida. La fase intracelular est representada por microcolonias constitudas por cuerpos elementales, cuerpos reticulares y formas intermedias. Se observan mediante la tincin de Giemsa donde se distinguen inclusiones basoflicas (moradas) caractersticas en el citoplasma de las clulas infectadas. ESPECIES IMPORTANTES: C. psittaci C. pneumoniae C. trachomatis HABITAT: C. psittacci tiene como huespedes naturales al hombre, otros mamferos y aves, las dos restantes al hombre solamente. ENFERMEDADES EN ANIMALES: Asociados a cuadros neumnicos, conjuntivitis e infecciones genitales en ovinos. MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS IMPORTANTES: Requieren sistemas biolgicos: animales de laboratorio (embriones de pollo, cuyes y/o ratones), o cultivos celulares. BIBLIOGRAFIA: Bailey, W.R. y E.G. Scott.1974. Diagnostic microbiology. The CV Mosby Company. Martnez P. J. 1995. Caractersticas relevantes de los principales gneros bacterianos de inters en medicina Veterinaria. Facultad de Med. Vet. y Zoot. UNAM Departamento de Microbiologa e Inmunologa.1995. Prcticas del Curso de Bacteriologa y Micologa Veterinarias. Facultad de Med. Vet. y Zoot. UNAM Departamento de Microbiologa.1995. Manual de prcticas de Bacteriologa Veterinaria. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas. I.P.N.

Autor: Alberto Yamasaki Maza

http://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-i/pb-i-2-concepto.htm

BIBLIOGRAFA 1. 2. 3. 4. 5. Microbiologa Mdica, Mims, Playfair, Roitt, Wakelin, Williams Microbiologa Mdica, De Torres Cartillas de la Ctedra de Microbiologa, Facultad de Medicina, UNT Principios de Enfermedades Infecciosas, Mandell Douglas - Bennet Clnica Mdica, Farreras - Rozman

http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.%20Cultivo%20de%20microorganismos.pdf

Medios de cultivo: llevan los nutrientes necesarios o adecuados para que se desarrolle la bacteria en cuiestin. (protenas, lpidos, de C., vitaminas, oligoelementos, agua). Las sustancias nutritivas son muy parecidas a las nuestras, y si no aportamos estos nutrientes no se reproducen. Clasificacin de medios de cultivo: Por su consistencia: - slidos (en placa de petri, agar-agar medio de cultivo) lquidos (tubo) (1 o 2 especies disitintas). Medios de cultivos: M. Normales: en los que crece todo Ej: agar-nutritivo M. Enriquecidos: en los que crecen los que no lo pueden hacer en los normales. Ej: agar-sangre, agar-chocolate. M. Selectivos: MacConkey, en los que se inhibe el desarrollo de microorganismos y selecciona el microorganismo de mi bsqueda. M. Diferenciales: son los que manifiestan una caracterstica fenotpica de los microorganismos. Ej: Bateria que asimila lactosa y bateria que no asimila lactosa. M. Selectivo y diferencial: el medio MacConkey es utilizado para ambos. A cada colonia se le llama U.F.C., unidad formadora de colonias. Caractersticas del cultivo: Composicin: sera buscar un medio adecuado, HC, lpidos, protenas... Ph: entre 6,5 y 7,5 Presin osmtica: debe ser isotnica Potencial redox: atmsfera en funcin de su metabolismo respiratorio, se divide en:

-

aerobios----- metabolismo respiratorio oxidativo (atmsfera con O2) anaerobios---- metabolismo respiratorio anaerobio (atmsfera sin O2) aerobios, anaerobios facultativos---- dos tipos de metabolismo (oxidativo y

-

-

fermentativo)12

MICROBIOLOGIA

Dibujo: El potencial redox quiere decir que en funcin de las condiciones que queremos aislar hay que poner atmsferas distintas para facilitar el cultivo. Temperatura: adecuada para que los microorganismos crezcan, son de 37C. Humedad: para que no se deseque el medio de cultivo. Curva de crecimiento bacteriano: la velocidad de crecimiento es igual a 1 x 2n, si han crecido a partir de una bacteria van diferencindose; n se llama a cada generacin, es decir el n de generaciones. El tiempo de duplicacin es de cada 20 en todo tipo de bacterias. Dibujo: Curva tpica de crecimiento bacteriano A---- fase latencia, adaptacin B---- logartmica o exponencial C---- estacionaria o mantenimiento D----- mortalidad o descenso 7. MECANISMOS DE REPRODUCCION. Se reproducen por: divisin binaria o biparticin, de una clula salen dos. 8. GENETICA BACTERIANA. La gentica bacteriana estudia la transmisin hereditaria y la variabilidad de las caractersticas de los microorganismos. Dnde reside esa capacidad de hacer la gentica bacteriana? Reside en los genes. Qu es un gen? El soporte de los genes son las molculas de DNA.13

MICROBIOLOGIA

Un gen es un segmento de DNA que determina a travs del proceso de transcripcin la secuencia de nucletidos de una molcula de RNA mensajero, la cual a travs de un proceso de traduccin expresa las diferentes protenas. El DNA de una bacteria est en el cromosoma bacteriano, pero tambin puede haber DNA fuera del cromosoma, extracromosmico---- plsmido.

Cambios genotpicos----- variabilidad de los genes. La variabilidad puede ser genotpica----- cambios en el DNA. Variabilidad fenotpica---- cuando se expresa en los medios de cultivo. Mecanismos de intercambio gentico:se producen mediante 3 formas: Transformacin: incorporacin a una bacteria de DNA extracromosmico (DNA libre al DNA bacteriano). Transduccin: es la incorporacin de DNA extracromosmico (plsmidos etc.) y a veces cromosmico de una bacteria a otra a travs de un vector (fundamentalmente virus). Conjugacin: es el intercambio de material gentico de bacterias donantes a bacterias receptoras a travs de los pilis o fimbrias. Mutaciones: son cambios en la secuencia de nucletidos de DNA realizado espontneamente o por agentes qumicos. 9. PRINCIPALES METODOS DE IDENTIFICACION. Macroscpicos: morfologa y pigmentacin. Microscpicos: tincin de Gram y pruebas bioqumicas diferenciales 10. TAXONOMIA BACTERIANA. Gnero: conjunto de especies muy parecidas. La primera letra se escribe con mayscula. Especie: siempre se escribe con minscula. Un conjunto de especies constituyen un gnero. Un conjunto de gneros relacionados constituyen la familia y un conjunto de familias relacionadas constituyen un orden.Medios de Cultivo Los medios de cultivo son soluciones nutritivas que contiene factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.

Se pesa correctamente el medio de cultivo deshidratado segun las indicaciones de los fabricantes

luego se licua para poder disolver el agar

PRUEBAS BIOQUIMICASMEDIO DE CULTIVOTratamiento

RESULTADOS

PROPOSITO

INOCULACION

Post

POSITIVOincubacion

NEGATIVO Color negro alrededor del cultivo

Agar de Almidn

Produccin de la exoenzima Amilasa

24-48 h/ 37C

Yodo (2-3 gotas)

rea clara alrededor del cultivo

Agar con Gelatina

Produccin de la

24-48h/ 37C

Colocar en Nevera por 30

Licuefaccin de la gelatina

Solidificacin

exoenzima Gelatinasa

Estocada hasta el fondo

minutos

Rojo FenolCarbohidrato

Dextrosa Mannitol Lactosa Sacarosa Agar de Tres azucares y Hierro (TSIA)

Determinar si la bacteria puede utilizar, ese carbohidrato

24-48h/ 37C

-

loop

Amarillo (produccin de cidos, fermentacin del carbohidrato) Puede haber produccin de gas

Rojo, aumento del pH (produccin de sustancias alcalinas por utilizacin de peptonas)

Ver el patrn de fermentacin de la bacteria

18-28h/ 37C 1-estocada 2

-

Utilizacin de glucosa

Utilizacin de peptonas

1

Rojo

Rojo Amarillo 2-estriar Utilizacin de Lactosa y/o sucrosa Rojo

Am

Am En ambos puede haber produccin de gas y H2S (negro)

SIM

1. Determinar si la bacteria a travs de Triptofanasas puede degradar el Triptfano a indol. 2. Determinar si hay produccin de H2S a partir de aminocidos azufrados 3. Determinar si la bacteria es mvil.

24-48h/ 37C Estocada hasta el fondo

Para Indol: 2 a 3 gotas del reactivo de Kovac

Rojo (anillo) presencia de indol (triptfano fue degradado).

Amarillo, la bacteria no puede degradar el triptfano

Negro (precipitado), produccin de H2S

Medio de cultivo se queda igual.

Difuminacin de la bacteria hacia los lados

La bacteria slo crece en la lnea de inoculacin

Caldo MRVP Prueba de Rojo de Metilo

Determinar habilidad de las bacterias para producir cidos estables por fermentacin de la glucosa

48h/ 37C loop

2 a 3 gotas de Rojo de Metilo (despus de los siete das)

Rojo, presencia de cidos, pH 4

Amarillo,no produccin de cidos estables.

Prueba de VogesProskauer

Determinar la capacidad de producir acetoina por fermentacin de la glucosa

10 gotas de naphtol 5 gotas KOH 40% 48h/ 37C

Color rosa, presencia de acetoina

No desarrollo de color rosa, ausencia de acetoina

loop

Simmons Citrate

Utilizacin del citrato como nica fuente de carbono.

24-48h/ 37C Estriar

Azul Verde

Caldo de Urea

Determinar si la bacteria degrada la Urea

48h / 37C loop

-

Rosa intenso

Medio permanece igual

Litmus Milk

Observar diferentes reacciones metablicas que ocurren en la leche: Fermentacin

24-48 h/ 37C loop

Reduccin del Litmus

-

Rosa

Violeta

Cogulo: a. Renina

-

Blanco

Violeta

b. Acido

-

Suave, se mueve si se inclina el tubo Duro, se queda atascado en las paredes del tubo, si este se

No hay formacin de cogulo No hay formacin de cogulo

-

inclina Produccin de Gas Cogulo roto Cogulo intacto

Protelisis

Violeta Violeta arriba y brown acuoso abajo -

Reaccin Alcalina

Violeta Rosa

-

Agar de Nitrato

Determinar si la bacteria tiene la capacidad de reducir nitratos a nitritos

24-48 h/ 37C

1 gota de cido sulfanlico 1 gota de naphtilamina Polvo de Zinc

Rojo (sin echar el polvo de zinc)

Medio permanece igual (con el polvo de zinc cambia a rojo)

Catalasa : Agar Nutritivo

Determinar si la bacteria produce catalasa para degradar el H2O2.

1 gota de H2O2 a una colonia

Efervescencia

Permanece igual

http://www.uprm.edu/biology/cursos/micro/pruebas.htm

Fundamentos de las Pruebas Bioqumicas Comnmente Utilizadas en un Laboratorio de Microbiologa:

Las pruebas bioqumicas no determinan cultivos mixtos son nica y exclusivamente para microorganismos puros. Adicionar Pruebas Bioqumicas para la Identificacin del Patgeno en Alimento: Prueba "Catalasa" Principios: La enzima descompone el perxido de hidrgeno H2O2 Mtodo: Aadir una gota de H2O2 a un cultivo denso y buscar burbujas (O2) Utilizacin ms frecuente Bacillus (+) de Clostridium (-) estreptococcus (-) de micrococcus (-) staphilococcus (+) Prueba de la B Galactosidasa (ONPG) Principio: El Ortomitrofenil B galactsido (UNPG) es un sustrato artificial para la enzima. Cuando se hidroliza, si forma nitrofenol (amarilla) Mtodo: Incuba, una suspensin pesada de un cultivo lisado en ONPG buscar en color amarillo Utilizacin Mas Frecuente: Litrobacter y Arizona (+) de Salmonella (-). Identificacin de algunas especies de Shigella y Pseudomonas. Prueba: Licuefaccin de la gelatina Principios: Muchas hidrolasas hidrolizan la gelatina y destruyen el gel. Mtodo: Incubar un caldo de 12% de gelatina. Enfriar para comprobar la formacin de gel. Si se hidroliza la gelatina, el tubo permanece lquido cuando se enfra. Utilizacin mas frecuente: Ayuda a la identificacin de serratia, pseudomonas, flavobacterium, clostridium.

Prueba: Oxidasa Principio: El citocromo xido al aceptar de electrones artificial: tetrametil (o dimetil) p fenilendiamina Mtodo: Caldo o agar. Las colonias oxidasa positivas en agar pueden detectarse sumergiendo la placa en un reactivo y buscando colonias azuladas o marrones. Utilizacin mas frecuente: Separa Neisseria y Moraxella (+) de Acinetobacter (-). Separa enterobacterias (todas -) de pseudomonas (+) ayudar a la identificacin de aeromonas (+). Prueba: "Ureasa " Principio: La urea (H2N CO NH2) se escinde en 2NH3 + CO2 Mtodo: Medio con un 2% de urea y rojo fenol como indicador. La liberacin de amonio eleva el pH, intenso color rojo rosado. Utilizacin mas frecuente: Distinguir Klebsiella (+) de Escherichia (-) Distinguir Proteus (+) de Providencia (-). Prueba: "Salmonella" Se hace en un pre-enriquecimiento de caldo nutritivo durante 24 horas, y esto se recomienda para alimentos desecados liofilizados. Algunos autores recomiendan muestras de 20 o 30 gr y otros creen conveniente en dos muestras de 25 gr. En dos fraseos. Se toma la muestra y se aaden 225 ml de caldo tetrationato en uno de los fraseo y en el otro la misma cantidad de caldo selenito cistena. Si los alimentos presentan un alto contenido en grasas se aade adems 6 ml de la solucin al 10% de tergitol nro 7 (sulfato heptadecilo sdico). Despus de la incubacin se siembra por estras, a partir de cada uno de los cultivos de enriquecimiento, una placa de agar salmonella shiguella. La salomnella sobre agar 55 suelen ser incolora o transparente o marrn claro, la salmonella sobre agar verde brillante pueden ser verdes y transparentes. Descubra la Diferencia entre Exoenzimas y Endoenzimas

La exoenzima desdobla las macromolculas para que la endoenzima la coma La endoenzima usa el alimento para sus procesos metablicos La Exoenzima se produce en el protoplasma y lo libera al ambiente. La endoenzima lo produce en el protoplasma y lo deja all.

Compare sus Resultados con la Bibliografa: Experimento N 1; "Hidrlisis del Almidn" Segn el libro de la fermentacin Industrial de Alfred Jrgensen, las colonias de bacterias que atacaron el almidn est rodeado por una zona incolora que fue el resultado obtenido en el laboratorio. Ambos resultados estn relacionados. Los microorganismos empleados fueron E. Coli y B. Sutilis Experimento N 2; "Hidrlisis de la Casena" Segn la bibliografa de Pelczar / Reid / Chan los microorganismos que proliferan en el agar leche liberan exoenzimas hidrolticas que atacan la casena desdoblando y produciendo una sucesin de molculas de tamao decreciente hasta aminocidos libres (cristaloide). En cuanto al resultado obtenido en el laboratorio en la zona de inoculacin se observ una hidrlisis del microorganismo inoculado, convirtiendo la casena en aminocidos. Ambos resultados concuerdan. Los microorganismos empleados fueron E. Coli y B. Sutilis. Experimento N 4; "Produccin de Hemolisina" Segn el libro de Bailey Scott Diagnstico Microbiolgico; Se utiliza como sustrato agar sangre. Los microorganismos que proliferan en este agar liberan exoencimas con efectos destructivos sobre los glbulos rojos. Observando las placas de petri las zonas inoculadas, se apareci una rea clarificada alrededor de la colonia. Es decir la enzima hemolisina fabric la hemlsis beta destruyendo y decolorando la hemoglobina de los glbulos rojos produciendo hemolisina del tipo alfa que no decoloran la hemolisina pero la cambiaron a un color verdoso lo que implica que estn relacionados ambos resultados. Los microorganismos utilizados fueron E. Coli, B. Sutilis y S. Aureus. Experimento N 5; "Produccin de Coagulasa" El sustrato utilizado fue plasma humano al cual se le agreg sustrato de sodio que es un anticoagulante. El microorganismos utilizado fue Stphilococcus Aureus, el cual prolifer y liber un tipo de exoenzima, la "coagulasa" elaborada por el microorganismo patgeno ayudando a que este microorganismo se estableciera en el tejido del husped.

En el ensayo demostrativo que lo realiz un grupo del laboratorio se observ un coagulo en el tubo de ensayo. Indicndonos que los resultados obtenidos en el laboratorio se asemeja a los resultados del libro. El microorganismo usado es S. Aureus. Experimento N 6; "Produccin del Alcohol por la Levadura" En ambos tubos pasteurizado y no pasteurizado se le agreg pasas trituradas y levaduras y a las 48 horas al oler ambos tubos inhalbamos alcohol. Luego al hacer la tincin de gram se observ en el microscopio cadenas ramificadas de levaduras, y en la bibliografa de Alfred Jrgensen dice que las levaduras atacan a los carbohidratos produciendo alcohol y CO2 y al observarse en el microscopio dos cadenas de levaduras largas. El microorganismo utilizado fue S. Cereviciae Experimento N 7; "Fermentacin Bacteriana de Carbohidratos" Segn la bibliografa de Philip Carpenter de Microbiologa, precisa que la capacidad de un microorganismo para atacar y desdoblar varios carbohidratos como los empleados en la prctica = sacarosa, glucosa, fructosa y varios alcoholes como = manitol, glucitol, que implica un medio nutritivo adecuado el cual contiene los carbohidratos y un indicador cido brico. En mabos tubos tenan invertidos un tubo de duhan para juntar parte del gas que se produce, la formacin de cido y gas indica ataque a los carbohidratos. En cuanto a los resultados obtenidos en el laboratorio en los carbohidratos fructosa, sacarosa, glucosa dio un cambio de color, hubo produccin de cido sin gas. Y en los alcoholes manitol y glucitol no hubo cambio de coloracin se mantuvo rojo. El microorganismo usado fue el S. Aureus Experimento N 8; "Reduccin de Nitratos" Segn el libro de Ohili Carpenter los nitratos sirven como fuente de nitrgeno para muchos microorganismos pero para ello debe ser degradado, pero los microorganismos utilizan los nitratos para su reduccin a nitrito eliminando una molcula de oxgeno. Las enterobactericiae y muchos otros bacilos gran negativos y hongos reducen los nitratos a nitritos ya que en la prueba realizada en el laboratorio con los microorganismos sembrados en el medio nitrolado se le agreg alfa naftalina, cido sulfanlico y el resultado fue positivo indicado por un rojo intenso, procedindose a valorar el amoniaco con el reactivo de Nessler apareciendo un color ladrillo y concluimos que ambos resultados concuerdan con la bibliografa. Los microorganismos usados fueron B. Cereus, E. Coli. Experimento N 9; "Produccin de cido Sulfhidrico (H2S) por los Microorganismos" Los microorganismos utilizados en el laboratorio fueron Salmonella, E. Coli; dio positivo ya que es un microorganismo anaerobio y tiene la posibilidad de produccin de hidrgeno sulfurado descomponiendo sustancias proteicas o descomponiendo sulfato y esto se pone de manifiesto con el ennegrecimiento del medio al producirse los sulfuros metlicos correspondientes ya que el sulfato utilizado contena cistena que contiene

aminocidos sulfurados por lo cual la enzima del microorganismo (E. Coli) dependa del tomo de azufre de este aminocido reducindolo ha hidrgeno para formar cido sulfhdrico correspondiendo a los resultados que emite Philip Carpenter en su libro de microbiologa. Experimento N 10; "Demostracin de la Produccin de Indol" Los microorganismos usados en el laboratorio fueron; E. Coli, y B. Sutilis. La bacteria correspondiente al coli tpico forma indol desaminacin y descarboxilacin de un compuesto bencnico pirrolico detectando la presencia de indol al reaccionarlo con la reaccin de Kova que es un aldelhido unido a alcohol amilico que extrae el indol formndose en la parte superior un anillo rojizo intenso causado por dicho alcohol que se deposita en la superficie del medio; correspondiendo a los resultados del libro de Philip Carpenter. Experimento N 11 "Prueba de RM VP" Los microorganismos usado en el laboratorio fueron E. Coli y C. Cereus. Segn la bibliografa de Baile Scott los microorganismos que utilizan la glucosa pueden producir abundantes compuestos acdicos como formato y acetato a partir del piruvato que es un metabolito intermedio. Mediante rojo metilo y Borges Proskaver se determin la cantidad de acidez formada por los microorganismos E. Coli, Klesiela; como ambos microorganismos en estudio al agregarle los reactivos correspondientes dieron una coloracin rojiza debido al pH que estaba en un rango de (4,5 5) dando la prueba positiva (+). E. Coli (+) Klesiela (+) Elabore Los diagramas de Flujos para las pruebas bioqumicas mas empleadas para patgenos en alimentos (incluidas las enterobacterias) Esquema que ilustra los parmetros bsicos para la identificacin de bacterias: Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior

Colonia (la biologa)De Wikipedia, la enciclopedia libre En biologa , una referencia a varias colonias individuales de los organismos de la misma especie que viven en estrecha colaboracin, por lo general para el beneficio mutuo, como la ms fuerte defensa o la capacidad de atacar grandes presas. Algunos insectos ( hormigas y las abejas , por ejemplo) slo viven en colonias. La guerra

portugus o del hombre es un ejemplo de una colonia de cuatro diferentes plipo formas.

Un sistema electrnico de bacterias contador de colonias . Una colonia de organismos unicelulares que se conoce como un organismo colonial. Organismos coloniales fueron, probablemente, el primer paso hacia la multicelulares organismos a travs de la seleccin natural . [ cita requerida ] La diferencia entre un organismo multicelular y un organismo colonial es que los organismos individuales de una colonia puede, si se separan, sobrevivir por s mismos, mientras que las clulas de un multicelulares forma de vida (por ejemplo, las clulas de un cerebro ) no se puede. Volvox (tcnicamente un coenebium) es un ejemplo de la frontera entre estos dos estados. Una colonia de bacterias se define como un grupo visible de bacterias que crecen en la superficie o dentro de un medio slido, en teora, cultivadas a partir de una sola clula. [1] Debido a que todos los organismos dentro de la colonia descienden de un ancestro comn, que son genticamente idnticos (excepto de las mutaciones que se producen con una frecuencia baja, es inevitable, as como la posibilidad ms probable de la contaminacin ). La obtencin de esos organismos genticamente idnticos (o pura cepas ) puede ser til en muchos casos, esto se hace mediante la difusin de bacterias en una placa de cultivo y de comenzar un nuevo stock de bacterias de una sola colonia. Un biofilm es una colonia de microorganismos a menudo formadas por varias especies, con las caractersticas y capacidades ms que la suma de las capacidades de los organismos individuales.

ColoniaDefinicin sustantivo, plural: las colonias

(Biologa) Varios individuales organismos (especialmente de la misma especie ) que viven juntos en estrecha colaboracin. (Cultivo celular) Un grupo de idnticas clulas ( clones ) en la superficie de (o dentro) de un medio slido, por lo general deriva de una sola clula original, como en la colonia bacteriana.

Suplemento En biologa, ejemplos tpicos de las colonias son insectos colonias. Por ejemplo, una hormiga colonia se compone de hormigas que viven muy cerca, debido a los beneficios mutuos, como para hacer ms fuerte la defensa. Los organismos unicelulares tambin pueden formar colonias, como cenobio es una colonia de Volvox unicelulares especies . Las bacterias forman colonias cuando se cultivan en un medio slido. La colonia es en realidad (y lo ideal) un grupo de clones bacterianos, ya que se derivan de slo una clula madre soltera.

Origen de la palabra: del latn colonia Formas conexas: colonial (adjetivo) Trminos relacionados:

Colonia spera Colonia lisa Hija de la colonia Madre colonia Colonia contra Unidades formadoras de colonias Biologa) Una poblacin localizada en los individuos de la misma especie que viven ya sea conectado o por separado. (Microbiologa) Un grupo de microorganismos que crecen en la superficie o dentro de un medio slido, por lo general cultivadas a partir de una sola clula. Read more: http://www.answers.com/topic/colony-wordnet#ixzz1bAo6iuEx

Unidades formadoras de coloniasDe Wikipedia, la enciclopedia libre Este artculo no cita ninguna referencia o fuentes . Por favor, ayudar a mejorar este artculo agregando citaciones a las fuentes confiables . Material de referencias puede ser impugnado y eliminado . (Diciembre 2009) Para el de clulas hematopoyticas humanas, consulte con clulas madre hematopoyticas . En microbiologa , unidad formadora de colonias (UFC o UFC) es una medida de la viabilidad bacteriana o por hongos nmeros. A diferencia de directo microscpico cuenta en todas las clulas, vivos y muertos, se cuentan,

UFC medidas clulas viables. Para mayor comodidad se dan los resultados en UFC / ml (unidades formadoras de colonias por mililitro) para lquidos, y UFC / g (unidades formadoras de colonias por gramo) para slidos.

[ editar ] Teora

Una dilucin hecha con bacterias y peptoned agua se coloca en una placa de agar (recuento en placas de agar para muestras de alimentos o agar tripticasa de soja para muestras clnicas) y se extiende sobre la placa de inflexin en el modelo que se muestra. La teora detrs de la tcnica de la UFC es establecer que una sola bacteria puede crecer y convertirse en una colonia , a travs de la fisin binaria . Estas colonias son claramente diferentes entre s, tanto microscpicamente y macroscpicamente . Sin embargo, algunas bacterias no se separan por completo durante el proceso de preparacin de la muestra ( Staphylococcus , Streptococcus ) y los resultados de la cuenta ser inferior al nmero de celdas individuales utilizando mtodos directos.

[ editar ] UsosTcnicas tales como el Miles y Misra mtodos permite la determinacin del nmero de UFC por ml en la muestra, y por lo tanto la carga microbiolgica y la magnitud de la infeccin en humanos o animales, como por ejemplo en cultivos de sangre o cultivos de orina . Adems, se puede medir el grado de contaminacin en muestras de agua, vegetales, suelo o frutas, y en los productos y equipos industriales. Las clulas madre tambin se puede medir en UFC. Por ejemplo, irradiado ratones pueden tener su sistema inmunolgico reconstituido por la inyeccin de mdula sea las clulas de un animal no irradiados. Las clulas inyectadas forma colonias en el bazo , y cada colonia representa la descendencia de una sola clula madre pluripotente . Por lo tanto, operativamente, el nmero de unidades formadoras de colonias es una medida del nmero de clulas madre. Unidades formadoras de colonias son tambin muy tiles en los procesos industriales para la produccin de biofertilizantes .

Microbiologa] tamao de las colonias bacterianasmerhawi debesai travs 40net.bio.net% microbio (por samiboy_4ever de yahoo.com) Mar 06 de julio 00:17:35 EST 2010

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Hola a todos, Soy estudiante de licenciatura micro Actualmente, estoy usando dos cepas bacterianas (de tipo salvaje y la cepa mutante) para mi proyecto Cuando la placa de las cepas en placas de LB, el tamao de las colonias del tipo salvaje es ms grande que la de la cepa mutante. Y me pregunto por qu esto est sucediendo. Alguna idea por favor ... Muchas gracias sam

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http://es.wikipedia.org/wiki/Bacteria

Morfologa de las colonias: Descripcin de las colonias bacterianas ____________ Con frecuencia durante el semestre tendr que describir las bacterias (o hongos) el crecimiento observado en sesgos o placas de Petri. Ser de gran utilidad para aprender el teminology utilizado para describir los tipos ms comunes de colonias. La siguiente esquema ser til para comunicar verbalmente la aparicin de crecimiento observado colonial. 1. Forma - La forma se refiere a la forma de la colonia. Estas formas representan las formas ms comunes de la colonia, es probable a encontrar.