laboratorio biologia

Escuela de Ciencias Agrícolas, Pecuarias y del Medio Ambiente Biología Ambiental

BIOLOGIA AMBIENTAL

PRACTICA DE LABORATORIO

PEDRO NEL PATIÑO PINILLA

Código: 93238403

CLAUDIA PATRICIA DORIA CAPERA.

Código: 1.013.655.299

Tutora:

BILMA ADELA FLORIDO CUELLAR

Magister.

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (UNAD)

INGENIERÍA AMBIENTAL

CEAD IBAGUE

2015


INTRODUCCIÓN

La invención del microscopio establece el punto de partida para el descubrimiento de la

célula y el desarrollo científico de la teoría celular. Hombres como Rober Hooke, Loren

Oken, Jacob Scheiden, Teodor Schwan y Rodol Virchow, establecieron los primeros

postulados que dan fundamento al basto conocimiento que la biología ofrece para beneficio

de la humanidad.

En el siguiente informe se describe las actividades realizadas en el laboratorio de biología

ambiental, sobre el proceso de manejo del microscopio óptico compuesto, estaremos dando

a conocer las estructuras externas e internas de los diferentes objetos y células observadas

en la práctica de laboratorio, presentando fotografías del resultado de la observación.


OBJETIVOS

GENERAL

Aprender a manejar el microscopio óptico de la mejor manera adecuada.

ESPECIFICOS

Conocer las partes que componen un microscopio óptico.

Realizar prácticas que permitan observar células vegetales.

Realizar prácticas que permitan observar células animales.


MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO

Procedimiento:

1. Recorte un cuadrado de 10 mm de lado de papel periódico, con letras impresas de

preferencia que contenga la letra “e” minúscula, colóquelo sobre la lámina y

deposite encima 2 a 3 gotas de agua y cúbralo con una laminilla. (Al colocar el

montaje en el microscopio la lámina debe quedar de tal manera que cuando usted

vea a simple vista las letras, las pueda leer).

Técnicas de enfoque

El enfoque es la operación primordial en el manejo correcto del microscopio óptico

compuesto. En el enfoque se ajustan las distancias focales del sistema de lentes, objetivo,

ocular y objeto. El procedimiento enumerado a continuación debe seguirse rigurosamente

cada vez que se va a usar el microscopio:

a. Encienda la luz del microscópico

b. Coloque el micro preparado sobre la platina sujetándolo con las pinzas, con los

botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la

platina coincidiendo con el eje óptimo del M.O.C.

c. Siempre con el Objetivo de Menor aumento 4X o 5X, acerque al máximo la

muestra al objetivo, manipulando el tornillo macrométrico.

d. Colocando los ojos abiertos en los oculares, aleje lentamente la platina del

objetivo, manipulando el tornillo Macrométrico, hasta que observe la formación

de una imagen. Una vez enfocado el objeto, defina la imagen con el tornillo


(botón) micrométrico. (Un cuarto de vuelta hacia delante y hacia atrás es

suficiente y lo recomendable). Si no logro la imagen repita la operación desde el

item c.

e. Enfoque y defina la letra “e” impresa en el papel periódico con los objetivos de

4X o 5X y 10X o 20X. Realice un dibujo de los que observa.

f. Recorra los bordes de la letra elegida. Una mano maneja los botones de

accionamiento de la platina y la otra está sobre el micrométrico perfeccionando

cada vez y constantemente los poderes de definición y penetración.

g. Gire el revólver para pasar al objetivo de 40X y realice un dibujo de lo que

observa.

h. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía

destinado para ello

5X 20X

40 X


Descripción de la observación:

Se observó la letra e de un papel periódico, desde tres diferentes lentes, comenzando, por el

lente de color rojo (5X), con este lente empezamos a observar, algunos puntos en blanco

dentro de la letra, que sin la utilización del microscopio no es posible. Con el lente de 20X,

ya se puede ver los pixeles que conforman la letra y con el lente de 40X, se observa un

trazo de la letra en forma de ziz zaz, y nos damos cuenta que la unión de ellas con las que

dan la forma a la letra e.

2. Realice un montaje similar al anterior, pero esta vez con un cuadrado de 10 mm

de lado de papel milimetrado, la tinta con que se imprimió debe quedar hacia

arriba.

Medición del campo del microscopio

Es importante conocer el tamaño del campo que nos permite observar cada objetivo para

poder determinar qué objetivo podemos utilizar para visualizar la muestra de interés. El

procedimiento enumerado a continuación nos permitirá conocer esta importante

información:

a. Enfoque con el objetivo de 4X, como aprendió en el punto anterior, el montaje del

papel milimetrado.

b. Coloque el micropreparado sobre la platina sujetándolo con las pinzas, con los

botones de desplazamiento de la platina, centre el objeto sobre el eje central de la

platina coincidiendo con el eje óptimo del M.O.C.

c. Ubique una de las líneas verticales del papel sobre el borde izquierdo del campo.


d. Realice la medición del diámetro del campo óptico de este objetivo de

acuerdo con las marcas del papel.

e. Repita los pasos del a hasta el d para los objetivos de 10X o 20X y de 40X.

f. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía

destinado para ello.

5X 20X

En 5X: se observan 8 mm En 20X se observan 3 mm

40 X

En 40X observamos 2 mm

Poderes del microscopio óptico compuesto

Básicamente los poderes del microscopio óptico compuesto son los de resolución,

penetración, ampliación y definición.


El poder de resolución es la propiedad definida por la distancia más pequeña que

separa dos objetos y en la que se pueden distinguir como elementos independientes.

El poder de penetración o profundidad de foco es la propiedad del objetivo de permitir

observar varios planos del micropreparado con la misma posición del foco.

El poder de ampliación: corresponde a la capacidad de aumento del objeto observado.

El poder de definición: es la capacidad del microscopio de formar imágenes con contornos

bien definidos.

Estos poderes se logran esencialmente con el tornillo micrométrico.

a. Haga un montaje seco de un trozo de 1 cm de lado de tela no coloque laminilla,

realice observaciones con los objetivos panorámicos del menor al mayor 4X o 5X,

10X o 20X y 40X, destaque las profundidades del objeto con el micrométrico.

b. Haga un montaje seco de cristales de azúcar y sal, no coloque laminilla obsérvelos a

diferentes aumentos y profundidades.

c. Dibujar lo observado en cada uno de los objetivos, en el espacio de esta guía

destinado para ello.


TELA

5X 20X

40 X


Se observó un trozo de tela, color negra, se miró desde tres lentes, empezamos por el lente

color rojo, que corresponde a 5X, como podemos ver en la imagen se visualizan dos fibras,

que a sus vez están integradas por micro fibrillas. En el lente de 20X, se puede observar que

esas micro fibrillas, están compuestas por micro fibrillas más delgadas. Y por último en el

lente de 40X, la imagen se distorsiona.


AZÚCAR

5X 20X

40x


En esta práctica se observó unos gramos de azúcar, al igual que en los demás

procedimientos empezamos por el lente color rojo (5X), pudimos ver una imagen muy linda

muchas veces hemos mirado la azúcar, pero tal vez nunca habíamos podido ver los cristales

que la conforman, al aumentar o cambiar de lente la imagen se empieza a distorsionar. Fue

importante la aclaración de la docente, donde nos refería que esos lentes son más potentes y

se utilizan para aquellos organismos microscópicos.


SAL

5X 20X

40X


Se observó solo algunos granos de sal, luego de analizar las imágenes tomadas

directamente del microscopio, creemos que tuvimos una falla en la sincronización de la

luz,(mucha luz.

Al momento de ver la sal, aumentada por medio de la ayuda del microscopio, pudimos

observar que son granos redondos e inmediatamente hicimos la comparación con la azúcar

y físicamente son muy diferentes. Nos causó curiosidad el ver que a diario manipulamos

este elemento, pero que en realidad nunca hemos visto la forma real de la sal.


2. LA CÉLULA

Procedimiento:

Observación de las células vegetales (Cebolla)

a. Tome un trozo pequeño de epidermis de cebolla, de 1 cm de lado aprox. Y colóquelo

sobre una lámina portaobjetos.

b. Cubra el trozo de epidermis de cebolla con 2 a 3 gotas de azul de metileno. Luego retire

cuidadosamente el colorante con agua.

c. Realice un montaje húmedo de la muestra teñida.

d. Enfoque y realice la observación a menor aumento 4X o 5X.

e. Enfoque luego a aumento 10X o 20X y luego 40X de manera que se vean con claridad

las células.

f. Dibuje lo que observa en todos los aumentos

5X 20X

40 X


Observación de células Animales (Epitelio bucal)

En el revestimiento interno de la mejilla existen unas células escamosas o planas que

forman el epitelio. Su función es la mantener la humedad y dar protección a la cavidad oral.

Utilizamos estas células porque son fácilmente removibles.

a. Realice un montaje húmedo de sus propias células escamosas: colocando una gota de

azul de metileno en el centro de la lámina.

b. Con el extremo delgado de un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de

abajo para arriba.

c. Ponga el producto del raspado en la gota de azul de metileno y esparza suavemente,

luego cubra la muestra con una laminilla o lámina cubreobjetos.

d. Dibuje lo que observa en todos los aumentos y resalte la presencia de la membrana

celular, núcleo, membrana nuclear, nucléolo y citoplasma.

5X 20X

40 X


Observación de microorganismos (procariotas y eucariotas)

En los cuerpos de agua dulce tales como estanques, humedales, lagos y lagunas habitan un

sin número de formas vivientes unicelulares, que van desde bacterias, hongos, protistos

hasta algas microscópicas. Descubra como en una gota de agua de un ecosistema acuático

habitan diversas formas de vida.

a. Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna

b. Cúbrala con una laminilla

c. Observe en todos los aumentos diferenciando todos los organismos que encuentre.

d. Dibuje lo observado distinguiendo cada uno de los organismos.

5X 20X

40 X


I. METABOLISMO CELULAR

Procedimiento:

Productos de la Fotosíntesis

La elodea es una planta multicelular acuática, que habita en los estanques de agua y es

utilizada en los acuarios como planta ornamental, su hoja es de forma lanceolada.

a. Tomar una ramita de Elodea sp. colocarla en el interior del vaso de precipitado y

cubrirla con agua

b. Introducir el embudo invertido en el vaso de precipitado, de manera que la Elodea

sp. quede en su interior.

c. Colocar un tubo de ensayo lleno de agua invertido cubriendo el pico del embudo.

d. Realizar una marca donde se encuentra el nivel del agua en el tubo de ensayo al

inicio con un marcador indeleble

e. Encender la lámpara cerca al montaje y dejarlo 45 minutos, realizar observaciones

permanentes del montaje durante este tiempo.

f. Al finalizar los 45 minutos observar, dibujar y anotar todo lo que sucedió en el

montaje.

Nota: esta práctica no se realizó.

Observación de Cloroplastos

a. Cortar una hoja de Elodea sp. desde la base.

b. Colocarla extendida sobre una gota de agua en la lámina portaobjetos.

c. Cubrirla con la lámina cubreobjetos teniendo cuidado de que no se forme burbujas

en el montaje.

d. Observarla al microscopio con el objetivo de 4X o 5X. Dibujar y describir

detalladamente la observación.

e. Observarla al microscopio con el objetivo de 10X o 20X. Dibujar y describir


f. Observarla al microscopio con el objetivo de 40X Dibujar y describir



5X 20X

40X


La observación de la hoja de Elodea, es una de las imágenes más fascinantes que pudimos

ver en esta práctica y es donde uno se da cuenta de la importancia de una herramienta como

lo es el microscopio.

En las imágenes pudimos ver específicamente dos cosa, la primera tiene que ver con la

pared celular y su respetiva organización para formar el tejido de la hoja, de igual manera

se podía ver de una forma muy clara los cloroplastos que era el objetivo principal de la

observación de esta hoja, los cloroplastos se podían visualizar como un puntico en cada

célula, lo reconocimos gracias a la asesoría de la docente.

Producto de la Respiración

a. Servir en el vaso de precipitado, aproximadamente un tercio del volumen de la

solución de cal 0.5%.

b. Introducir el pitillo.

c. Soplar y producir burbujas durante 3 a 5 minutos.

d. Observar qué sucede y describirlo detalladamente.

Nota: esta práctica no se realizó.


CUESTIONARIO – ANÁLISIS DE RESULTADOS

I. MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO

1. ¿Cómo se observan las imágenes en el microscopio óptico compuesto? ¿Por

qué?

RTA: las imágenes vistas a través del microscopio se pueden observar de una forma mucho

más a fondo, para nosotros es como la radiografía de los objetos, que a la simple vista

humana no se puede ver. Mediante el microscopio podemos ver las imágenes desde lo más

profundo de su estructura, se puede ver cómo está conformada.

¿Por qué? Esto se debe principalmente a los lentes de aumento que maneja el microscopio,

los cuales nos permite que se den algunas características o propiedades entre ellas tenemos:

Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del

microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden

verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es

menor a una décima de milímetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de

onda de la radiación empleada; en el microscopio óptico, el poder separador máximo

conseguido es de 0,2 décimas de micrómetro (la mitad de la longitud de onda de la luz

azul), y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta 10 Å.

Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto

a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las

aberraciones de las lentes utilizadas.

Ampliación del microscopio. En términos generales se define como la relación entre el

diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si

el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100

veces mayor linealmente que el tamaño real del objeto (la superficie de la imagen será

1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que está proporcionando un


microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular

empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la

ampliación con que estamos viendo la muestra será: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere

decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces, también expresado como 450

diámetros.

2. Indique los poderes del microscopio que identifico en los montajes de la tela, la

sal y el azúcar. Explique brevemente cómo los identificó.

En la tela: en este montaje se identificó 3 poderes que se prestaron para observar el

pedacito de tela los cuales fueron el de resolución, nos permitió visualizar mejor las fibras

como objetos independientes de las otras fibrillas; el de penetración, que nos permitió ver

más de cerca estas fibrillas; y el de ampliación, que visualizó las micro fibrillas que

componen las fibras de la tela.

En la azúcar: de igual forma en este montaje seco se reconoció el uso de los 3 poderes que

en el punto anterior como la resolución, en donde pudimos ver que cada partícula era

independiente de las demás; el de penetración, se podía mirar más a fondo de cada una de

las partículas; y el de ampliación que nos amplió la imagen de estas partículas para su

mejor visualización.

En la sal: sucede exactamente lo mismo que en los puntos anteriores, se identificó los 3

poderes los cuales son: el de resolución, el de penetración y el de ampliación

Nota: no se identificó el poder de definición ya que cada vez que acercábamos la imagen

con los objetivos de mayor capacidad se veían cada vez más distorsionada la imagen debido

a que estos objetivos son diseñados para ver objetos más pequeños o microscópicos, como

bacterias. Etc.


ll. LA CÉLULA

1. Indique los organelos que identificó en las células vegetales. ¿Por qué pudo

observar esos y no otros? (Revisar qué componentes o moléculas de la célula

tiñe el azul de metileno).

RTA: En la observación con el microscopio, pudimos identificar la pared celular y los

cloroplastos de la Elodea ps según las imágenes tomadas con la cámara, son los mismos

organelos que se tiñen con el azul de metileno, siendo más fácil de ver con los objetivos

de menor alcance.

2. Indique los organelos que identificó en las células animales. ¿Por qué pudo

observar esos y no otros? (Revisar qué componentes o moléculas de la célula

tiñe el azul de metileno).

RTA: Se observó la membrana celular, núcleo, membrana nuclear y citoplasma los

mismos organelos que se tiñen con el azul e metileno y los más visibles sin necesidad

de usar los objetivos de mayor aumento.

lll. METABOLISMO CELULAR

1. ¿Qué tipo de sustancias espera encontrar en el tubo de ensayo del montaje

“productos de la fotosíntesis” al final del experimento? ¿Por qué?

RTA: no se hizo la práctica.

2. ¿Dónde se ubican los cloroplastos en las células vegetales? ¿Por qué?

Al microscopio óptico pueden ser observados, en fresco y sin teñir, y aparecen

generalmente como unos orgánulos discoidales en los que, ocasionalmente, se distinguen


en su interior unos cuerpos densos o grana. Se encuentran localizados en el citoplasma.

No tienen un lugar fijo, aunque frecuentemente se encuentran entre la pared vacuolar y la

membrana plasmática. Están sometidos a movimientos de ciclosis debido a las corrientes

citoplasmáticas, pero también pueden presentar movimientos activos de tipo ameboide o

contráctil relacionados con la iluminación.

3. ¿Por qué cambia la solución de cal? Y ¿Qué organelo de nuestras células

interviene en la formación de ese precipitado?

RTA: no se hizo la práctica.

PREGUNTA INTEGRADORA:

Si lo llaman para la evaluación y propuesta de un plan de manejo de un humedal que está

siendo contaminado por el vertimiento de aguas residuales de una planta procesadora de

grasas y aceites. ¿Cuáles de los conceptos (tipos de organismos y procesos metabólicos)

trabajados en esta práctica consideran que usted debe tener en cuenta como ingeniero

ambiental, para proponer una solución para la recuperación y mantenimiento de este

sistema y por qué?

RTA: Lo primero que tengo que se hacer es un diagnostico o evaluación del impacto

ambiental que ha ocurrido en el agua, Para conocer el estado de las aguas del humedal es

necesario recoger una serie de muestras que reflejaran la calidad del agua tras el respectivo

análisis de los parámetros físico-químicos. Con el fin de garantizar homogeneidad y

continuidad en los análisis en todo el cuerpo de agua, Para el muestreo se analizara los

siguientes parámetros:

Temperatura agua y ambiente, humedad relativa, transparencia agua, pH, turbidez (cualitativo),

color (cualitativo), olor (cualitativo).En laboratorio: color (cuantitativo), turbidez (cuantitativo),

conductividad, oxígeno disuelto ,DQO, DBO5, sólidos, acidez, alcalinidad, dureza, nitratos, hierro, fosfatos,

cloruros y nitritos.


Una vez determinado el grado de contaminación, recomendaríamos el cierre de la fuente que está generando

la contaminación en este caso la procesadora de aceites y grasas. Seguidamente haría un plan de

contingencia para absorber el material superficial y por ultimo plantearía un manejo de fitorecuperación y

fitoremediación y de esta manera tratar de descontaminar el humedal.


CONCLUSIONES

Una vez terminada la práctica de biología ambiental podemos concluir:

Como futuros ingenieros ambientales, es de suma importancia conocer el manejo

adecuado del microscopio.

En nuestra labor profesional, muy posiblemente tendremos que hacer estudios de

evaluación, donde el manejo del microscopio será fundamental para este tipo de

actividades.

La importancia de algunos tips aprendidos en la práctica, como por ejemplo, la

utilización del azul de metileno para identificar mejor algunas estructuras, son

herramientas que permitirán un mejor desempeño de nosotros a nivel profesional.

Realizar diferentes observaciones, con diferentes elementos, genero mejor habilidad

en nosotros como estudiantes.


BIBLIOGRAFIA

Biología. LOS CLOROPLASTOS. Organelos (2013) consultado el 17 septiembre 2015.

Disponible en: www.infobiologia.net/p/cloroplastos.htm

Claves. FITORREMEDIACIÓN Y FITORECUPERACION. (2010) consultado el 17

septiembre 2015. Disponible en: http://digital.csic.es/bitstream/10261/16683/1/eco.pdf

Guía. LABORATORIO. Componente practico. (2015) consultado el 17 septiembre 2015.

Disponible en: http://campus02.unad.edu.co/ecapma01/course/view.php?id=529

Video. MICROSCOPIO. Virtual (2012) consultado el 17 septiembre 2015. Disponible en:

https://www.udel.edu/biology/ketcham/microscope/

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