introducción a la histología
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INTRODUCCIÓN A LA HISTOLOGÍA
Y TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
QUE ES LA HISTOLOGÍA?o Es la disciplina que estudia todo lo
relacionado con los tejidos orgánicos: su estructura microscópica, su desarrollo y sus funciones.
o Su estudio no se detiene en los tejidos, sino que va más allá, observando también las células interiormente
CONCEPTOS
Tejidos
• Estructuras constituidas por un conjunto organizado de células iguales.
• Es una agrupación de diversos tejidos que forman una unidad estructural encargada del cumplimiento de una función en un organismo pluricelular.
Órganos Sistemas
• Conjunto de órganos y estructuras similares que trabajan en relación para cumplir alguna función fisiológica en un ser vivo.
CIENCIAS CON LAS QUE SE RELACIONA
• Anatomía• Fisiología• Biología• Citología
• Bioquímica• Patología• Ontología• Odontología
TÉCNICAS HISTOLOGICAS
ETAPAS PARA LA PREPARACIÓN DE UN CORTE HISTOLÓGICO
• Fijación• Deshidratación• Aclaración• Inclusión• Corte• Coloración
• FIJACIÓN
El tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem y para conservar la forma original del tejido.
El mas común utilizado es el formol. También se utiliza glutaralehido para proteínas y osmio para lípidos
Puede realizarse por inmersión, perfusión y mediante vapores
• DESHIDRATACIÓN
Se utiliza una serie gradual de soluciones acuosas con una concentración de menor a mayor, como el alcohol etílico
La deshidratación gradual se hace para evitar la deformación del tejido debido a la rápida salida de agua
• ACLARACIÓN
Se debe sumergir el tejido en un liquido que pueda ser mezclado tanto en la inclusión como en la deshidratación
El liquido mas común utilizado es el Xilol. También están el cloroformo, benceno y tolueno
• INCLUSIÓN
Tiene como finalidad proporcionar al tejido un soporte fijo para poder realizar un corte muy fino
Se forman bloques de parafina dentro de los cuales están las muestras a estudiar Después de la inclusión y el secado, la muestra se pone a congelar para pasar al
corte
• CORTEEl instrumento que se usa para hacer cortes se llama micrótomoSe realizan los cortes muy delgados de acuerdo a lo requerido, y
van desde los .5 micras hasta 8 u 10 micras.Los cortes se ponen en un baño de flotación y se pescan con un
portaobjetos. Se clasifica con el tejido y el tipo de tinción que se va a utilizar
TIPOS DE MICRÓTOMOS
Parafina
• Se utiliza en tejidos blancos y la pieza es la que se desplaza. En ocasiones puede que la cuchilla también se desplace
• Se utiliza para tejidos frescos/congelados.
• Es una cuchilla que se desliza y que esta conectada a una botella de gas carbónico que a su salida, congela la muestra
Congelación Criostato
• Es para muestras frescas y cuenta con una cámara de congelación
• El corte se adhiere a la cuchilla desde el portaobjetos sin tocarla, por efecto de diferencia de temperaturas
• COLORACIÓN
Los colorantes mas usados son Hematoxilina y eosina
Se utiliza para diferenciar en los tejidos las diferentes estructuras y sustancias
Se utilizan colorantes específicos para identificar ciertas estructuras
Colorantes con afinidades especificas:
Proteínas: Se tiñen de rojo con eosina Ácidos nucleicos: se tiñen de azul con
hematoxilina Hueso: depósitos de calcio se tiñe azul con
hematoxilina y las sustancias periféricas rojas con eosina
Lípidos: se tiñen negro con tetra oxido de osmio
Carbohidratos: se tiñen purpura con hematoxilina
Mucopolisacaridos: se tiñen de rojo con toluidina
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Cultivo de células• Celulas y tejidos se cultivan en soluciones
como sales, aminoácidos y vitaminas.
• Al estar las células separadas se ponen en suspensión o sobre una placa de Petri, donde se adhieren formando una única capa celular
Fraccionamiento celular• Proceso físico donde se utiliza el
centrifugado para separar los orgánulos y los componentes celulares
• Después son examinados en un microscopio eléctrico para comprobar su pureza y composición química