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INSTITUTO DE INVESTIGACIONES TÉCNICO CIENTÍFICAS DE LA UNIVERSIDAD POLICIAL (IITCUP)

2 ITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2


DIRECTOR IITCUP: TCNL. DEAP. RUBÉN P. GEMIO BUSTILLOS, UNIPOL EDITOR: LIC. ESP. RUDDY LUNA BARRÓN, DIC, UNIPOL

COMITÉ REVISOR: CNL. DESP. GARY GONZALO OMONTE VERA, P. B.

PhD. DRA. MARÍA TERESA ÁLVAREZ ALIAGA, UMSA

DR. GONZÁLO TABOADA LÓPEZ, UMSA

DR. BERNARDO TORRICO ARZADY, UMSA

DRA. BEATRIZ LUNA BARRÓN, UMSA

DRA. JACQUELINE CORTEZ G., UMSA

DERECHOS RESERVADOS IITCUP © 2014

IITCUP

CIENCIA® PUBLICACIÓN CIENTÍFICA DE LA POLICÍA BOLIVIANA

No2 DICIEMBRE 2014

IITCUP-CIENCIA DICIEMBRE 2014 NÚMERO 2 3


ÍNDICE

PRESENTACIÓN ________________________________________________________ 4

LA COOPERACIÓN INTERNACIONAL EN LA EDUCACIÓN POLICIAL ______ 5

LA CRIMINALIDAD EN LA VÍA __________________________________________ 7

DESARROLLO TECNOLÓGICO EN ANAPOL ¿ES POSIBLE? ________________ 10

CRIMINALÍSTICA

EFICIENCIA DEL ENSAYO DE QUIMIOLUMINISCENCIA (LUMINOL) ENTRE

DIFERENTES SOPORTES Y TRATAMIENTOS ________________________ 11

COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD” ENTRE

MUESTRAS FRESCAS Y SECAS DE SEMEN HUMANO _______________ 18

ESTRÉS LABORAL Y ESTRATEGIAS DE AFRONTAMIENTO EN LA FUERZA

ESPECIAL DE LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA CASO: POLICÍAS

FEMENINAS _____________________________________________________ 22

VELOCIDAD INICIAL DE PROYECTILES 9 MM DE CARTUCHOS

ENSAMBLADOS EN FÁBRICA VS. RECARGADOS ARTESANALMENTE34

SATURACIÓN DE TRÁFICO EN LA AVENIDA 6 DE MARZO, EL ALTO,

BOLIVIA _________________________________________________________ 43

IDENTIFICACION DE RESTOS HUMANOS SEMI-CALCINADOS MEDIANTE

ADN NUCLEAR Y MITOCONDRIAL _______________________________ 49

DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA TECNOLÓGICO PARA LA

CAPTURA DIGITAL DE IMPRESIONES DACTILARES ________________ 61

CUADERNO DE CAMPO PARA REGISTRO DEL LUGAR DEL HECHO ______ 65

CIENCIAS

PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN DE ADN DE HOJAS DE THEOBROMA

CACAO L. PARA ESTUDIOS DE GENÉTICA POBLACIONAL CON

MICROSATÉLITES (STR) __________________________________________ 70

EXTRACCIÓN DE ADN EUCARIOTA A PARTIR DE HISOPADOS ORALES DE

AVES SILVESTRES EMPLEANDO PARTÍCULAS DE SILICA (DIÓXIDO DE

SILICIO) _________________________________________________________ 73

GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE HELICOBACTER PYLORI POR PCR

ANIDADO Y MULTIPLEX _________________________________________ 77

A LOS AUTORES _______________________________________________________ 81



PRESENTACIÓN

A cuatro años y medio de su creación, el Instituto de Investigaciones Técnico Científicas de la Universi-

dad Policial (IITCUP) entrega el segundo número de su revista IITCUP CIENCIA, cuyo contenido refleja

el genuino interés de la Institución Policial por introducir en sus filas los principios universales de la ob-

jetividad científica y de la formación profesional integral de los oficiales de policía.

La oportunidad otorgada a Damas y Caballeros Cadetes de la Academia Nacional de Policías (ANAPOL)

de realizar ensayos experimentales en los laboratorios de nuestro instituto y publicar sus resultados, no

es más que la clara señal de un paso en la dirección correcta de la evolución institucional. Más aún, el

novedoso aporte en balística, accidentología o psicología simboliza el inicio de la participación activa de

los peritos policiales en la producción científica institucional y nacional sostenida, como se ha visto pre-

viamente, por el impulso y ejemplo de los profesionales científicos adscritos a nuestra institución verde

olivo.

La gestión 2014 ha significado una de las más productivas para el IITCUP pues no solo se ha consolida-

do, proyectado y priorizado la investigación científica pura, sino también se ha recibido el impulso defi-

nitivo con la implementación de equipos de elevadas prestaciones tecnológicas para nuestros laborato-

rios, se ha organizado el trabajo técnico pericial para incluir nuevas capacidades de identificación crimi-

nal, basada en biometría, se ha aportado a la seguridad ciudadana participando en los esfuerzos estatales

por controlar la tenencia de armas de fuego, y se ha proyectado la extensión de nuestros laboratorios al

interior del país con el apoyo y confianza de gobernaciones y alcaldías, lo cual inevitablemente repercuti-

rá en la calidad y cantidad de la producción científica policial. Más aún, no debe olvidarse que la misión

y producción del IITCUP provee calidad plena e integral a la Universidad Policial como miembro del

Sistema Universitario Boliviano, convirtiéndose en pilar fundamental de la producción científica institu-

cional.

Sea pues este segundo número, motivo de celebración por la continuidad que ha sido posible gracias a la

fe y confianza vertida en nosotros, y sea asimismo invitación y consigna para aquellos que tomarán las

riendas del brazo científico institucional en el futuro.

Tcnl. DEAP. Rubén P. Gemio Bustillos

DIRECTOR DEL IITCUP



NOTA

LA COOPERACIÓN INTERNACIONAL

EN LA EDUCACIÓN POLICIAL

La internacionalización del crimen y los nuevos

escenarios determinados por los procesos de glo-

balización, plantean nuevos desafíos en materias

de seguridad, prevención y represión del delito,

que generan la necesidad de implementar y desa-

rrollar un abanico de estrategias que implica una

permanente actualización y fortalecimiento insti-

tucional, con criterios de cooperación e integra-

ción internacional en educación. En esa línea, exis-

ten importantes desafíos frente a la diversificación

del crimen y otros factores que inciden en la segu-

ridad humana, de las cuales naturalmente no se

sustrae ninguna Institución Policial, cuya misión,

como cualquier policía en un estado democrático

pasa por la generación de condiciones adecuadas

de convivencia, seguridad ciudadana y el control

racional del delito.

La experiencia ha demostrado que la cooperación

internacional en materias de educación policial es

un elemento determinante para el intercambio de

experiencias, el fortalecimiento de procesos co-

munes y la profesionalización de las policías, así

como un instrumento eficaz para cerrarle espacios

al delito. No podía ser de otro modo, puesto que

se generan espacios de intercambio de experien-

cias para contrastar opiniones con policías de dis-

tintos países y culturas, conociendo la dinámica

de la institución policial receptora, su cultura or-

ganizacional, su doctrina, sus problemas y las

formas de abordaje y solución para ellos, a la vez

que a nivel personal y profesional, se desarrolla

una mayor comprensión de distintas realidades

con mirada más crítica y sensibilidad frente a te-

mas policiales comunes de un mundo globaliza-

do. En suma, podemos afirmar que se internaliza

sobre las formas de cómo se aborda la profesión

policial en otros lugares, en sociedades con mani-

festaciones delictuales distintas pero con los mis-

mos problemas base: la inseguridad, el crimen

organizado trasnacional, la prevención situacional

del delito y otros similares.

Entonces, tenemos que la cooperación educativa

policial genera y optimiza espacios académicos

propicios entre los estados y sus instituciones po-

liciales, para ampliar panoramas de conocimiento

en temas de interés policial, seguridad ciudadana,

prevención, investigación criminal y problemáti-

cas sociales, además de potenciar la formación, la

especialización y el perfeccionamiento profesional

en aras de asimilar los avances y tecnologías sobre

aspectos que pueden ser tomados como elemen-

tos de referencia.

En perspectiva, que parte importante del proceso

de capacitación policial internacional es el de la

reproducción y socialización de los conocimientos

adquiridos (entiéndase condición sine qua non) en

los cuadros policiales nacionales. Es indistinta la

forma o procedimiento, lo importante es la distri-

bución del conocimiento fresco en forma oportu-

na. Bajo esa lógica, se deben poner en práctica

operativa las teorías, estrategias, planes, progra-

mas y buenas prácticas policiales que, sustancial-

mente, sean productivas para fortalecer las labo-

res institucionales, siempre teniendo el cuidado

que su aplicación responda a la base teórica de los

instrumentos metodológicos originales.

Esta ecuación se hace difícil, indudablemente,

porque a partir del respeto que se debe profesar

por aspectos propios de cultura, autonomía y au-



todeterminación de cada país, se deben superar

diferencias en sistemas legales, incompatibilidad

de mecanismos de investigación y distancias entre

capacidades y conocimientos policiales de las di-

ferentes organizaciones policiales. Además, en el

aspecto de jurisdicción, la lucha es desigual, por-

que mientras el crimen organizado tiene a su fa-

vor la inexistencia de fronteras, las policías del

mundo restringen sus acciones a los límites de sus

respectivas soberanías. El crimen organizado es

transnacional, mientras las policías y los organis-

mos judiciales no.

Bolivia no ha estado ajena a los procesos de inter-

nacionalizacion del conocimiento policial. Es co-

nocido a nivel centro y sudamericano el prestigio,

la disciplina, el rigor e integralidad en la forma-

ción policial del “Alma Mater Institucional”: la

Academia Nacional de Policías (ANAPOL), cuyas

aulas reciben y forman varios lustros cadetes de

diferentes policías de la región.

Del mismo modo, la Universidad Policial “Mcal.

Antonio José de Sucre”, como órgano de forma-

ción de post grado de la Policía Boliviana, está a la

vanguardia de los nuevos paradigmas educacio-

nales, por lo que varios policías que en la actuali-

dad están en funciones de mando en sus respecti-

vas instituciones, realizaron el Curso de Adminis-

tración Policial y Comando y Alta Dirección en

ese Instituto.

Mención especial merece el Centro de Entrena-

miento Internacional Antinarcóticos “Garras del

Valor”, ubicado en la localidad de Chimoré, Co-

chabamba, que se convirtió prácticamente desde

su inauguración en referente de primer nivel para

las instituciones policiales americanas en cuanto a

la especialización en la interdicción al narcotráfi-

co.

En el particular caso del suscrito, es siempre re-

confortante y halagador encontrar camaradas,

varones y mujeres, de otros países que hicieron el

curso Garras, que casi al unísono recuerdan con

nostalgia y cariño su paso por ese centro de espe-

cialización.

Cap. Cristian Sánchez Rodríguez

ESPECIALISTA EN CRIMINALISTICA

JEFE REGIONAL IITCUP-SANTA CRUZ



NOTA

LA CRIMINALIDAD EN LA VÍA

La presente nota discute y describe el fenómeno

social de la criminalidad en la vía de tránsito, esta

debe de realizarse desde criteritos claramente

establecidos y delimitados por las políticas crimi-

nales implantadas e impulsadas por el gobierno,

mismas, que están dirigidas a erradicar las con-

ductas criminales, la educación y prevención del

delito además del control social, tomando en

cuenta las distintas corrientes o escuelas crimino-

lógicas en función a los conceptos y objetivos que

componen el estudio de la criminología en gene-

ral, para que sea trazada desde diferentes enfo-

ques como el sociológico, psicológico, antropoló-

gico, jurídico y sobre todo el aspecto que involu-

cra al ser humano bajo la condición racional y

espiritual.

Es importante considerar que en los orígenes de la

criminología llega un momento que ocurre una

confusión y se llegan a superponer muchas veces

con las doctrinas, sobre las escuelas y los hom-

bres integrantes de su historia, por ello siguiendo

a Pablo Bonnet en su libro “Lecciones de Medici-

na Legal” establece que existen tres factores gene-

rales que marcan el inicio o la formación del inte-

rés del estudio del crimen en general. En primer

lugar, tenemos una reacción médico – jurídica

contra las escuelas penales exclusivistas que fun-

dan el derecho Penal considerando y analizando

solamente la infracción propia de la Normativa

Jurídica que se representa por la Ley y se descar-

ta o se deja de lado al elemento humano como

autor de la infracción, siendo este el principal ac-

tor de todo el proceso criminal. En segundo lugar,

se identifica la llegada de la exploración científica

del individuo humano, es decir, que hace un es-

tudio propio del elemento humano bajo diferentes

condiciones y perspectivas. Y en tercer lugar, la

revaluación a la luz de esta reacción y de estos

medios de exploración de doctrinas referentes a la

Fisiognomía y “Fisiognómica” (estudia el carácter

de la persona mediante el análisis de los rasgos

faciales) de Delia Porta y de Lavater, respectiva-

mente, a la “Frenología” (pretendía explicar por

medio de la inspección minuciosa del cráneo del

individuo características tales como la capacidad

mental, carácter y personalidad del mismo) de

Gall, a la “locura moral” de Prichard y Maudsley,

a la “ley de las grandes causas y de los grandes

efectos” de Quetelet, al concepto de “Degenera-

ción” de Morel y de Magnan y del “atavismo” de

Lombroso., pero además, ya en el año 1748 con

Charles de Secondat Baron de Mosntequieu, ex-

presa en su libro “Espíritu de las Leyes” que los

delitos que comenten las personas no deben ser

reprimidos con un pena dura y cruel, proponien-

do en sí que el legislador debe prevenir los delitos

y no castigarlos. El Sr. Jean Jacques Rousseau en el

año 1755 en su libro “Discurso sobre la desigual-

dad entre los hombres” sostiene la idea de que el

ser humano es por esencia bueno, es decir, que es

congénitamente bueno, pero este a medida que se

va desarrollando con la sociedad, es decir, va cre-

ciendo con la sociedad llega a adquirir la maldad.

En 1764 el Sr. Cesar Bonesana Marques de Beca-

ria, en su libro “De los Delitos y de las Penas”

protesta contra los castigos corporales aplicados

como pena. Si partimos de las definiciones plan-

teadas de la criminología como el concepto de

Pérez Pinzón que establece que es “el estudio del

origen y desarrollo de la criminalidad y de la cri-

minalización, con fines de política criminal” o que

según García Pablos de Molina en su libro Ma-

nual de Criminología (introducción y teorías de



criminalidad) (1988) que la define como “la cien-

cia empírica e interdisciplinaria que se ocupa del

crimen, el delincuente, la víctima y el control so-

cial del comportamiento desviado” donde a crite-

rio mío, se debe realizar una valoración integral

de los siguientes aspectos:

1. Como elemento esencial el crimen o delito,

que cuando toma un aspecto objetivo o

material va a ser la condición propia, por

la que se va a generar el estudio en sí, del

derecho, es decir, es el motivo o razón por

la cual se da inicio a la valoración real de

las ciencias jurídicas.

2. El elemento activo conocido como criminal

o delincuente, asignándole ese rol o condi-

ción por la autoridad competente (en este

caso Órgano Judicial que de acuerdo a

normativa en actual vigencia es, una vez

que es hallado culpable del hecho que se le

imputa), pero para emitir un criterio obje-

tivo, claro y concreto es necesario impul-

sar una verdadera y adecuada valoración

de su imputabilidad, misma que tiene que

estar en función a estudios científicos en

este caso Médicos, Psicológicos y Crimino-

lógicos con el objetivo de develar la diná-

mica personal que se resuelve en la moti-

vación del acto delictivo.

3. El elemento pasivo conocido como la víc-

tima, misma que debe de ser valorada

desde una perspectiva psicológico – social,

ya que esta establece un relacionamiento

con el delincuente (ya sea positivo – sín-

drome de Estocolmo o negativo – miedo,

odio, etc.), lógicamente sufriendo las con-

secuencias del acto antijurídico, que de

una u otra forma llegaría a afectar su con-

dición propia de ser humano.

4. Un elemento fiscalizador conocido como el

control social de la delincuencia, que es

una competencia del derecho, de las auto-

ridades de gobierno con una participación

mucho más activa de los sistemas de puni-

ción y reinserción social (en nuestro caso

de lo que se conoce como Régimen Peni-

tenciario dependiente del Ministerio de

Gobierno) además de la sociedad civil, ha-

ciendo notar que se habrá de considerar la

importancia de la Criminológica, Psicoló-

gica y Psiquiatría al momento de emitir un

criterio sobre la condición propia del de-

lincuente, para que de esta manera se

pueda develar, con un criterio sistémico y

objetivo una verdadera política criminal.

Por lo anteriormente expuesto el presente artículo

tiene por objetivo resaltar la importancia que exis-

te entre el estudio cuantitativo y cualitativo del

fenómeno criminal, mismo que está en relación

directa con las normas de convivencia social entre

miembros de una sociedad, donde se incorpora al

conocimiento teórico desde su origen hasta su

actual desarrollo, con fin de obtener una visión

mucho más crítica y objetiva de este fenómeno

social.

Ahora bien, es necesario hacer una definición de

lo que es la Seguridad Vial que de acuerdo a Gon-

zales – Espallardo, se entiende como un “Conjun-

to de condiciones que abarcan múltiples factores

(institucionales, legales, normativos, de infraes-

tructura, factor humano, vehículo y asistencia de

servicios de emergencia y médicos), que permiten

que el transporte viario se realice con el mínimo

riesgo de sufrir un accidente y, en caso de que

éste se produzca, con las menores consecuencias

posibles”. Si nos enfocamos en un estudio acci-

dentológico más profundo y revisamos un poco

los cuadros estadísticos sobre las causas y factores

de riesgo podemos establecer que entre un 10% se

reparte las condiciones atmosféricas, viales y del

motorizado, en cambio existe un gran 90% identi-



ficado como principal riesgo la conducta del hu-

mano en cualquiera de sus modalidades (conduc-

tor, peatón o pasajero), motivo por el cual es de

mucha importancia hacer un estudio y valoración

cabal del elemento humano dentro del proceso

accidentológico vial, por ello considero que se

forma el concepto de criminología vial, misma

que se identificada como: una disciplina depen-

diente de la criminología misma que está orienta-

da al estudio y prevención de los delitos contra la

seguridad vial, la evaluación del comportamiento

delictivo o desviado del elemento humano y a la

rehabilitación de la víctima, además del diseño de

políticas con apoyo del control social. Po sí sola la

Criminología tiene una función preventiva, como

explica Fernando Miró: "Pretendemos conocer

cómo sucede el incidente vial y cómo podemos

evitarlo. La Criminología está empezando a com-

prender que tiene un importante papel en la segu-

ridad vial, aplicando sus conocimientos científicos

en la prevención de la siniestralidad”.

Cap. Huáscar Wiliser Coca Maldonado

CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y

CAPACITACIÓN EN SEGURIDAD VIAL

IITCUP - UNIPOL



NOTA

DESARROLLO TECNOLÓGICO EN ANAPOL

¿ES POSIBLE?

En 2013 se inició un proceso experimental en la

Academia Nacional de Policías (ANAPOL) con la

introducción práctica del concepto de la tesis de

grado de investigación como modalidad de gra-

duación de DC y CC de cuarto año, bajo la coor-

dinación de docentes peritos IITCUP a cargo de

las materias de Biología, Genética, Estadística

Inferencial, Metodología de la Investigación Cien-

tífica y Taller de Graduación.

El “proyecto de grado” es el formato comúnmente

elegido para la graduación de los oficiales de po-

licía y aunque existen otros cuatro en la normati-

va vigente de la Universidad Policial (tesis de

grado, trabajo dirigido, examen de grado y exce-

lencia), este parece ser insustituible.

En el año 2013 se intentó en-

samblar un cronógrafo digital

(dispositivo para medir la ve-

locidad de proyectiles, foto

derecha), pero el tiempo no

fue suficiente. A finales de

2014 se intentó otra vez y dos

Caballeros Cadetes se atrevie-

ron a incursionar más allá de

las propuestas teóricas proyec-

tivas de carácter social, diseñando y ensamblando

un dispositivo simple para la captura digital de

impresiones digitales (Pág.79). Su trabajo fue re-

flejado en el cuerpo de un proyecto de grado, pe-

ro con el corazón de una tesis de investigación,

aunque al final éste recordó más un trabajo diri-

gido.

Dos prototipos se construyeron para tal fin, uno

de ellos permanece en los laboratorios del IITCUP

a la espera de una iniciativa sucesora, tanto en el

diseño como en el uso de programas informáticos

que optimicen su rendimiento y utilidad.

Sin embargo, los actuales subtenientes Carlos Án-

gel Patzi Vila y Jhonny Martín Alanoca Velasco

fueron los encargados de dar vida a esta iniciati-

va, cuyo objetivo fue reducir el costo de imple-

mentación tecnológica en huellografía y demos-

trar que es posible dar los primeros pasos hacia la

independencia tecnológica.

Ambos se graduaron como oficiales de policía

bajo la mención de Investigación Criminal, carrera

de la cual se espera surjan los futuros peritos ins-

titucionales, pero no fueron destinados en las filas

del IITCUP… Pues, aún faltan políticas de forma-

ción de “policías científicos”

que promuevan con ahínco la

carrera pericial de estos jóve-

nes policías.

El IITCUP se propone como

alternativa para lograrlo.

Nuestro instituto, el brazo

científico policial, es hoy un

barco que espera recibir al me-

nos dos valientes cada año para empezar ese viaje

a un nuevo mundo, a ese mundo donde nuestra

preciada Policía Boliviana es científica por exce-

lencia, por mérito, por dedicación, esfuerzo y es-

píritu, y es otra vez querida por su pueblo…

Ruddy Luna Barrón

DPTO. DE INVESTIGACIÓN CIENTÍFICA

IITCUP – UNIPOL



ARTÍCULO ORIGINAL – BIOLOGÍA

EFICIENCIA DEL ENSAYO DE QUIMIOLUMINISCENCIA

(LUMINOL) ENTRE DIFERENTES SOPORTES Y TRATAMIENTOS

Arteaga, D. & Serrudo, V.

División Biología, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia.

RESUMEN

Conociendo los buenos resultados que ofrece el ensayo quimioluminiscente de Luminol para la detección

presuntiva de manchas hemáticas, se propuso trabajar con el mismo para diferentes evaluaciones sobre

soportes (sustratos), fluidos biológicos, efecto de lavados, derivados de hidrocarburos e interferencia con

otros reactivos, para evaluar sensibilidad, especificidad y viabilidad para pruebas posteriores de ADN.

Los falsos positivos detectados fueron: hipoclorito de sodio, aluminio y asfalto, y los materiales porosos

absorbentes mostraron corto tiempo de fluorescencia. Se ha demostrado asimismo la interferencia nula

del Luminol para la amplificación posterior de marcadores moleculares tipo STR y de amelogenina en

cromosomas sexuales XY.

PALABRAS CLAVE: Luminol, soportes y genética.

ABSTRACT

Knowing the good results offered by the chemiluminescent assay of Luminol for presumptive detection

of hematological stains, it was proposed to work with the same for different assessments supports (sub-

strates), biological fluids, the effect of washes, hydrocarbon derivatives and interference with other rea-

gents, to evaluate sensitivity, specificity and feasibility for further DNA testing. False positives were de-

tected: sodium hypochlorite, aluminum and asphalt, porous and absorbent materials showed fluores-

cence short time. Were also demonstrated no interference of Luminol for subsequent amplification of

somatic STR type markers and the universal sexual amelogenin gene.

KEY WORDS: Luminol, supports and genetics.



INTRODUCCIÓN

El luminol (C8H7N3O2) es un reactivo quimiolu-

miniscente (es decir, emite luz en lugar de color),

que puede ser utilizado tanto como un ensayo

presuntivo para sangre como un ensayo para el

mejoramiento químico de impresiones de sangre

en varias superficies. Es una excelente técnica

para la búsqueda de manchas de sangre latentes

en la escena del crimen o escenas donde se sospe-

cha que estas manchas fueron lavadas, pues no

destruye el ADN, aunque su aplicación poste-

riormente impide la detección de sangre por

pruebas bioquímicas. Además, no es corrosivo

para la escena del crimen, no obstante no reaccio-

na con resolución suficiente para la identificación

de huellas dactilares (Watkings & Brown, 2004;

James & Nordby, 2005; Rohrig, 2008; Santos &

Kalapothakis, 2009).

Los primeros experimentos conducidos con miras

a utilizar el luminol como una herramienta de la

ciencia forense se realizaron en 1937 por Specht,

quien ensayó la sustancia sobre una variedad de

soportes como pastos, ladrillos o piedras mojadas

en sangre (Watkings & Brown, 2004), a esta le

siguieron evaluaciones de volumen de sangre,

tipo de sustrato y efecto de los lavados (Gross et

al., 1999; Mak et al., 2000), interferentes del Lumi-

nol (Quickenden & Creamer 2001; Negre et al.,

2002; Creamer et al., 2003), especificidad medida

cuantitativamente (Quickenden & Cooper, 2001,

Quickenden & Creamer, 2001), la eficacia de su

uso para la obtención de perfiles de identidad

genética (Castelló et al., 2002; Blum et al., 2006;

Santos et al., 2009), sensibilidad y especificidad

(Watkins y Brown, 2004; Villegas et al., 2005; Tobe

et al., 2007).

El presente trabajo incluye un compendio de ex-

perimentaciones que van desde la determinación

del grado de sensibilidad hasta el efecto de la pin-

tura sobre paredes, esto con el objeto de cubrir

todas las evaluaciones necesarias para desarrollar

una estandarización completa del ensayo que

permita su uso práctico en los casos forenses,

aplicando los medios, reactivos y materiales acce-

sibles a nuestra realidad y considerando los mate-

riales como telas y soportes más comunes halla-

dos en las escenas de los hechos.

MATERIALES Y MÉTODOS

La preparación de luminol fue una modificación

del protocolo del “Manual de entrenamiento de

laboratorio para análisis de ADN”: 5 g de Na2CO3,

0,1 g de luminol y lo necesario en volumen de

H2O2 al 3%, 10 volúmenes para aforar a 500 ml.

Sensibilidad

Se evaluó la sensibilidad de la técnica con un vo-

lumen de 20 µl de sangre ORh+ (colectada en tu-

bos vacutainer con anticoagulante EDTA) en una

batería de diluciones 1/2; 1/5; 1/10; 1/50; 1/100;

1/200; 1/500; 1/750; 1/1000; 1/10000; 1/100.000;

1/1’000.000; 1/10’000.000 y 1/100’000.000 v/v en

agua destilada, considerando 10 réplicas por cada

variable. Se evaluó el efecto del volumen de la

misma sangre sin diluir con 0,1; 0,5; 1,0; 5,0; 10,0;

50,0 y 100,0 µl, considerando 10 réplicas por cada

variable. Para la reproducibilidad, en un soporte

de vidrio y en un trozo de tela blanca (100% algo-

dón) se colocaron 30 gotas de 20 µl de la misma

sangre, sin diluir.

Especificidad

Para la especificidad, sobre un soporte de vidrio

se colocaron gotas de 20 µl, o sólidos de un diá-

metro equivalente, de: a) jugo de naranja, b) zumo

de remolacha, c) perfume (“Moving Cyzone”), d)

ceniza de cigarrillo, e) pintura roja (pintura para

tela “Acrilex”), f) tinta roja de bolígrafo marca

Faber Castell, g) lápiz labial color carmín marca



AVON y sangre ORh+, considerando 30 réplicas

por cada uno.

Para la especificidad con compuestos que contie-

nen elementos no metálicos de alta electronegati-

vidad, en distintos soportes de vidrio se colocaron

30 gotas de 20 µl de: hipoclorito de sodio (lavan-

dina al 8%), peróxido de hidrógeno (3%, 10 volú-

menes); alcohol iodado (1%) y pasta dental marca

Colgate (conteniendo monofluoruro fosfato de

sodio).

Para evaluar el efecto de compuestos orgánicos

derivados de hidrocarburos, se empleó el mismo

volumen y el mismo número de réplicas de aceite

hidráulico (color rojo) marca YPFB y aceite de

motor Castrol. Por otro lado, en un soporte de tela

blanca (100% algodón) se colocaron 10 gotas de 20

µl de aceite hidráulico, aceite de motor, aceite

para cadena de moto y gasolina.

Para valorar el efecto de otros fluidos biológicos

humanos, se trabajó con un volumen de 20 µl y 30

réplicas de saliva (5 gotas correspondientes a sali-

va de mujer y 5 gotas a saliva de varón), orina,

orina de un paciente con hemoglobinuria y líqui-

do seminal.

Para determinar cuál es el efecto del soporte (sus-

trato), se sembró sangre de distintos tipos sanguí-

neos (A, B, AB y O Rh+) con volúmenes de 1, 5,

20, 50, 100, 200 y 500 µl, en telas de: seda sintética,

seda, forro, tapiz, paño, lana, cuerina, popelina,

franela y tela licrada.

Se evaluó también: madera, metal, aluminio, plás-

tico, vidrio catedral, vidrio liso, tierra limosa seca,

tierra limosa húmeda, asfalto, pavimento rígido,

cemento, ladrillo gambote, madera de construc-

ción y azulejo.

Efecto de lavados

Para verificar el efecto de los posibles lavados en

el lugar del hecho, se manchó tela blanca (100%

algodón) con gotas de 20 µl de sangre tipo O Rh+,

con 30 réplicas que posteriormente fueron remo-

jadas en: lavandina con detergente y detergente

marca OMO. Del mismo modo se mancharon so-

portes de madera de zócalo y cerámica que fueron

lavadas con un cepillo de ropa de cerdas plásticas.

Finalmente, para evaluar si existía un efecto ad-

verso del Luminol frente al grupo sanguíneo (A, B

y O), se aplicó la técnica de Luminol a 30 gotas de

20 µl de los tres tipos en vidrio.

Todas las muestras secaron por 24 horas como

mínimo, aplicándose luego por aspersión la solu-

ción de luminol en oscuridad total. La toma foto-

gráfica se realizó con una cámara digital

SAMSUNG S1030 de 10,1 MP, lentes de 22,2 mm,

programación de disparo continuo, ISO1000,

apertura mayor “H”, a color, sin flash y con ma-

cro activado. Las fotografías obtenidas se editaron

convirtiendo las fotos oscuras en blanco y negro y

posteriormente se invirtió la coloración para que

resalte el color azul de la fluorescencia en el pro-

grama Adobe Photoshop CS4.

Efecto de pintura

A un trozo de pared sembrado con diez gotas de

20 µl de sangre, se aplicó una capa de pintura al

agua.

Ensayo genético

Las manchas sembradas sobre tela, hisopado de

las manchas procesadas sobre ladrillo gambote y

las manchas en tela lavada con detergente e hipo-

clorito de sodio, se remitieron al Centro de Inves-

tigación Genética (CINGEN) del Instituto de In-

vestigaciones Técnico Científicas de la Universi-

dad Policial (IITCUP), para la detección de ADN



y evaluación de su aplicación forense (identifica-

ción humana).

RESULTADOS

Tabla 1. Resultados estadísticos del ensayo de luminol

sobre diferentes soportes

Soporte Valor

chi2

Valor

p Característica

Madera zó-

calo 16,67 < 0,01 Buena señal

Metal 1,50 < 0,01 Buena señal

Aluminio - - Luminiscencia

tenue sin muestra

Plástico 2,04 0,19 Buena señal

Vidrio 1,50 0,24 Buena señal

Tierra limosa

seca 4,17 0,07

La señal se obser-

va como un res-

plandor

Tierra limosa

húmeda 15,04 < 0,01

La señal no es

nítida

Asfalto 0,00 0,06 Muestra una reac-

ción falso positivo

Pavimento

rígido 0,00 0,06

Absorbe y fluores-

ce rápidamente

Cemento 0,00 0,06 Absorbe y fluores-

ce rápidamente

Ladrillo

gambote 0,67 0,35

Absorbe y fluores-

ce rápidamente

Madera de

construcción 0,00 0,06

Fluorescencia

fugaz

Azulejo 0,00 0,06 Buena señal

Sensibilidad

En el ensayo de sensibilidad se observó luminis-

cencia detectable hasta la dilución v/v de

1/1’000.000 y en todo el rango de volúmenes (de

0.1 a 100.0 µl) de sangre. Su reproducibilidad tan-

to en vidrio como tela fue del 100%.

Especificidad

El ensayo de especificidad demostró que todos los

elementos empleados dieron resultados negati-

vos. El único compuesto no biológico y no metáli-

co de alta electronegatividad que mostro luminis-

cencia detectable fue el hipoclorito de sodio (la-

vandina al 8%).

Ningún compuesto orgánico derivado de hidro-

carburos presentó un resultado positivo frente al

Luminol y únicamente se observó una mancha

luminiscente, pero estadísticamente no significa-

tiva para las muestras de saliva.

En el caso de las telas, todas mostraron resultados

positivos. Sin embargo, algunas al ser más poro-

sas, como la lana, forro, paño y franela son más

absorbentes haciendo que el efecto de la luminis-

cencia perdure por un lapso menor de tiempo.

Figura 1. Luminiscencia en aluminio

(imagen en color invertido digitalmente).

El soporte de aluminio sin muestra de sangre

mostró una señal luminiscente tenue. Las mues-

tras realizadas utilizando el soporte de tierra (sue-

lo) mostraron resultados con poca luminiscencia,

ya que la misma absorbe la sangre rápidamente.

Las manchas que fueron lavadas en la tela de al-

godón no presentaron fluorescencia, lo contrario

ocurrió con las manchas sobre pared a las cuales

se les aplicó una capa de pintura cubriéndolas

totalmente.

Ensayo genético

De los quince marcadores genéticos que posee el

kit Identifiler (Applied Biosystems), se pudo ob-

tener más de la mitad con una intensidad prome-

dio de fluorescencia de 60 au (ver Figura 2).



DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos en este trabajo no difi-

rieron en gran medida de los mostrados por otros

autores. En el caso de la sensibilidad, los mismos

resultados fueron obtenidos por Villegas et al.

(2005) y si bien, en cuanto a la especificidad, el

hipoclorito de sodio resultó ser un falso positivo,

lo que no fue para otros trabajos, es posible que

esto se deba al menor porcentaje de dilución (6%),

empleado por Tobe et al. (2007) demostrando así

la importancia que tiene el factor de dilución de

hipoclorito de sodio y el tiempo que transcurre

desde su uso, ya que según Creamer et al., (2003 y

2005), la lavandina no se considera un interferente

después de ocho horas porque se evapora.

Con respecto a los resultados obtenidos del ensa-

yo genético, se pudo obtener, al igual que Blum et

al. (2006), diez marcadores claramente identifica-

bles con las tres muestras: mancha sobre tela, hi-

sopado de manchas sobre ladrillo gambote y

manchas en tela lavada con detergente OMO e

hipoclorito de sodio, lo cual demuestra que si

para la muestra más difícil se puede obtener ADN

rescatando casi el 70% del total de marcadores, es

aún más factible obtener perfiles completos en

otras muestras que no han sido significativamente

alteradas.

Un resultado destacado en cuanto al pintado de

una pared en la cual se sembró sangre fue la dis-

persión de esta última sobre la superficie hacien-

do que se observe una luminiscencia no de las

manchas colocadas al principio sino de toda la

superficie pintada (Figura 3), lo que demostraría

que la sangre se diluye con la pintura por lo cual

no se elimina, resulta útil conocer este comporta-

miento al momento de hacer conjeturas acerca de

la luminiscencia en paredes.

Al haber observado una tenue luminiscencia en el

material de aluminio y asfalto, se puede compro-

bar que este último en su composición posee me-

tales altamente electronegativos que darían como

resultado falsos positivos, sin embargo, la inten-

sidad observada a simple vista es lo suficiente-

mente distinguible para no considerarla como un

resultado positivo.

Figura 2. Intensidad de fluorescencia promedio de 10 repeticiones de la amplificación de marcadores genéticos

tipo STR´s más el gen amelogenina a partir de manchas hemáticas en tela lavada con detergente y lavandina.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

PENTAD

FGA TPOX D2 D7 D8 TH01 vWA D3 D5 AME

LARGO MEDIO CORTO

Inte

ns

ida

d p

rom

ed

io d

e f

luo

res

cn

en

cia

(a

u)

Sistema



La reducción de luminiscencia en las telas más

porosas demostrarían la necesidad de utilizar

además de Luminol otro ensayo orientativo como

el de Kastle Meyer debido a que se puede hume-

decer las telas más porosas, para que estas reac-

cionen mejor con los reactivos de fenoftaleina y

se puedan obtener resultados colorimétricos más

distinguibles que los de luminiscencia al momen-

to de buscar manchas hemáticas, ya que obligato-

riamente en el procedimiento es necesario hume-

decer el soporte para aplicar los reactivos, opera-

ción que favorecería la detección de reacciones

positivas.

A) B)

Figura 3. A) Manchas de sangre sembradas sobre trozo

de pared, B) Luminiscencia observada luego de pintar

sobre las manchas de A) (foto mejorada digitalmente).

CONCLUSIONES

Los falsos positivos detectados en el presente es-

tudio fueron el hipoclorito de sodio (lavandina al

8%), aluminio y asfalto.

Los materiales más porosos son a la vez más ab-

sorbentes y tienen como efecto un corto tiempo de

fluorescencia al momento de aplicar el Luminol,

por lo que se recomienda, además de éste, em-

plear otro ensayo orientativo cuando se trabaja

con soportes como el ladrillo gambote, madera,

lana, forro, paño y franela.

Queda demostrada la NO interferencia del ensayo

de Luminol para pruebas posteriores de genética,

en las cuales se emplee marcadores del tipo STR y

amelogenina.

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos al CINGEN por el procesamiento

de muestras de análisis genético. A Lidia Macu-

chapi y Vidal Huanca por el apoyo en la prepara-

ción de las muestras.

REFERENCIAS

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ARTÍCULO ORIGINAL - BIOLOGÍA

COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD”

ENTRE MUESTRAS FRESCAS Y SECAS DE SEMEN HUMANO

D. Arteaga V.1; J.L. Laura R.1 & Pol. L. Macuchapi2

1División Biología, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia.

Recibido Agosto 2014 – Aceptado Noviembre 2014

RESUMEN

La citología espermática provee un aporte significativo en la resolución de casos de delitos sexuales me-

diante el uso de la técnica del árbol de navidad (Christmas Tree, tinción Kernechtrot Picroindigocarmín)

para detectar células espermáticas en evidencia biológica. Muestras frescas y secas de semen humano

diluidas en agua miliQ e impregnadas en hisopos, fueron utilizadas para comparar la utilidad de la téc-

nica en el reconocimiento de células espermáticas. Se realizó la fijación mediante calor, posteriormente se

aplicaron colorantes y se observó al microscopio. La tinción e identificación de espermatozoides es más

adecuada en las muestras frescas en sus distintas diluciones respecto a las muestras secas, dificultándose

su observación y no distinguiéndose por completo su morfología.

PALABRAS CLAVE: Células espermáticas, tinción, muestras frescas y secas.

ABSTRACT

Sperm cytology provides a significant contribution in resolving cases of sexual crimes by the use of the

Christmas Tree (Kernechtrot Picroindigocarmín staining) to reveal sperm cells in biological evidence.

Fresh and dried samples of human semen, diluted in miliQ wáter and impregnated on swabs, were used

to compare the usefulness of the technique for recognizing sperm cells. Fixing was performed by heating,

and after appling the stains a microscope was used to photograph de results. They showed that the stain-

ing and identification of sperm is more suitable in fresh samples under various dilutions respect to the

dry samples, making it difficult to distinguish the sperm morphology.

KEY WORDS: Sperm cells, staining, samples cool and dry.



INTRODUCCIÓN

El semen es un fluido de compleja composición

producido por los órganos sexuales masculinos.

Su componente celular lo constituyen los esper-

matozoides (células haploides), morfológicamente

distinguibles por una cabeza, que contiene un

acrosoma, el cuál alberga el material genético y

protaminas, con una longitud de 4,5 m y 2,5 m

de ancho y una cola compuesta de proteínas que

le otorga movilidad, con una longitud de 40 m

(Tilstone, 2005). El estudio, la identificación y la

caracterización del semen (fluido biológico mas-

culino) es de gran importancia en el caso de deli-

tos sexuales, donde los indicios colectados corres-

ponden principalmente a hisopados vaginales,

cervicales, anales u orales (Owen & Smalldon

1975).

La citología espermática se realiza a través de la

tinción de árbol de navidad o “Christmas tree”, en

inglés. Esta técnica utiliza el “nuclear fast red”

que tiñe diferencialmente el ADN contenido en la

cabeza del espermatozoide de un rojo carmín bri-

llante y el acrosoma de rojo suave (rosa), y una

contra-tinción de ácido pícrico - indigocarmín

(PIC) tiñe la cola verde-azul-gris en función del

contenido de cada segmento. Así, la tinción dife-

rencial se realiza gracias al contenido celular y

composición de la membrana de cada segmento;

debido a su sensibilidad y facilidad para la lectu-

ra, se cataloga a esta técnica como muy eficiente

(Allery et al. 2001).

El objeto del presente estudio es emplear la técni-

ca del árbol de navidad para comparar las células

espermáticas frescas respecto de las conservadas

en hisopos.


La muestra de semen humano fue obtenida de

CIES (Centro Integral de Estudios de Sexualidad)

y conservada a 4°C, dicha muestra se diluyó en

agua milliQ, obteniéndose las siguientes solucio-

nes: 100%, 50 % (½), 25 % (¼), 12,5% (1/8) y 6,25%

(1/16), mismas que fueron hisopadas para luego

realizar el frotis en placas de vidrio (portaobjetos)

de las muestras frescas, y dejando luego estos por

15 días a una temperatura de 21°C. Transcurrido

el tiempo indicado, se procedió a remojar en 100

µl del mismo solvente por espacio de 2 horas y se

realizó el frotis respectivo.

Las placas (portaobjetos) fueron fijadas con calor

con la ayuda de un mechero, se adicionó 20 µl de

“fast red” refrigerado (4ºC), expandiéndose el

colorante y dejándolo por 15 minutos, luego se

agregó 20 µl de ácido pícrico saturado (con índigo

carmín), se expandió y se esperó 3 minutos. Poste-

riormente, se realizó el lavado de manera vertical

con 200 µl de metanol absoluto y se escurrió la

placa, luego se colocó un cubreobjetos procedién-

dose a sellar con esmalte de uñas transparente,

para finalmente obser-

var al microscopio con

aumento de 1000 X,

utilizando aceite de

inmersión. Como con-

trol negativo se utilizó

un portaobjetos sin

muestra y como con-

trol positivo una placa

con células espermáti-

cas sin teñir (Protocolo

modificado OMS,

1999).

Figura 1. Control Positivo

de tinción (400x).



Figura 2. Comparación de células espermáticas reveladas con la tinción “árbol de navidad”, empleando

diluciones seriadas de la solución de resuspensión de muestra al 100, 50, 25, 12.5 y 6.25% respectivamente,

en muestras frescas (izquierda) y secas (derecha).

1000X 1000X

1000X 400X

400X 400X

400X 400X

400X 400X



En el control positivo se observaron células es-

permáticas donde se distingue su flagelo, en cam-

bio, en el negativo no se observa la presencia de

ninguna célula (Figura 1).

La cantidad de células observadas fue de acuerdo

al tipo de dilución empleado, teniendo mayor

cantidad en las soluciones mayores y menor can-

tidad en las menores.

Las células espermáticas tienen la parte anterior

“cabeza” ovalada (acrosoma y núcleo) y un flage-

lo, al teñir estas células se observa que el acroso-

ma se tiñe de color rosado y verde en cambio el

flagelo únicamente se tiñe de color verde (Figura

2).

En las muestras frescas se distingue adecuada-

mente la morfología y estructura de los esperma-

tozoides, teniendo la cabeza ovalada y el flagelo

alargado (Figura 2).

Las células espermáticas observadas después de

pasado 15 días no son fácilmente distinguibles, la

estructura de la cabeza presenta constricciones y

el flagelo se observa con dificultad o no se lo ob-

serva. A medida que transcurre el tiempo la per-

sistencia de estas estructuras se dificulta por la

deshidratación del fluido seminal, por lo que se

puede distinguir únicamente la cabeza de los es-

permatozoides (Figura 2).

La técnica del árbol de navidad permite identifi-

car a células espermáticas mediante la tinción de

la cabeza (acrosoma) y su flagelo, estas células son

distinguidas de manera adecuada cuando la

muestra colectada en hisopos es fresca y se difi-

culta con muestras secas, además discrimina a las

células epiteliales.

Por lo tanto recomendamos aplicar la técnica en

muestras frescas o conservadas a bajas temperatu-

ras, más no así cuando el tiempo transcurre o si

no se encuentran a una temperatura adecuada de

conservación (4°C).

REFERENCIAS

Allery, J-P., Telmon, N., Mieusset, R., Blanc, A. &

Rougé, D.. 2001. Cytological detection of

spermatozoa: Comparison of three stain-

ing methods. Journal of Forensic Sciences

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Tilstone, B.. 2005. DNA Analyst Training, Foren-

sic Biology: Testing of Body Fluids and

Tissues. NFSTC, Science serving Justice.



ARTÍCULO ORIGINAL - PSICOLOGÍA

ESTRÉS LABORAL Y ESTRATEGIAS DE AFRONTAMIENTO EN LA

FUERZA ESPECIAL DE LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA

CASO: POLICÍAS FEMENINAS

Danitza Teresa Chuquimia Mendoza

Carrera de Psicología, Facultad de Humanidades y Cs. de la Educación

Universidad Mayor de San Andrés

RESUMEN

La falta de espacios adecuados, el relacionamiento con compañeros, la acumulación de denuncias de vio-

lencia y horarios extensos de trabajo de las Policías Femeninas de la F.E.L.C.V., ocasionan “estrés labo-

ral”, lo que requiere y demanda Estrategias de Afrontamiento como medio de equilibrio. Para analizar

este fenómeno se realizó el análisis cuantitativo de estas variables y su relación intrínseca, demostrando

que el “estrés laboral” se debe a la ausencia de información sobre la reestructuración organizacional, difi-

cultades en las relaciones superior-subordinado, espacio vital e individual para el desempeño, control

auditado del trabajo, y apoyo grupal. Asimismo, se identificó también que la percepción de los elementos

positivos ante una situación estresante, el escape del problema y el aislamiento en lugar de la interacción

social, son las estrategias menos utilizadas, lo que indica que las Policías Femeninas con “estrés laboral”

no utilizan adecuadamente las Estrategias de Afrontamiento, influyendo negativamente en su desempe-

ño general en la F.E.L.C.V.

PALABRAS CLAVE: Estrés laboral, policía femenina, estrategias de afrontamiento.

ABSTRACT

The lack of adequate work space, of relationship with peers, the accumulation of complaints of violence

and long hours of work of the Women's Police from F.E.L.C.V. causes the presence of Job Stress, which

demands the use of Confront Strategies as means of balance. To analyze this phenomenon, quantitative

analysis of those variables and their intrinsic relationship were conducted, showing that the "job stress" is

due to the lack of information on organizational restructuring, difficulties in superior-subordinate rela-

tionships, and individual living space, performance control, and social support. Likewise, it was also

identified that the perception of the positive elements to a stressful situation, the escape of the problem

and isolation, rather than social interaction strategies, are less used, indicating that the Female Cops

"work stress" are not properly using efficient Confront Strategies, negatively impacting in the overall

performance of FELCV personnel.

KEY WORDS: Work stress, female police, confront strategies.



INTRODUCCION

A partir de la declaración en 1975-1985 como la

década de la mujer (Pérez, 2009), comienza la in-

serción de la mujer al campo laboral progresiva-

mente en todas las profesiones. En Bolivia ac-

tualmente, las mujeres ocupan cargos y desempe-

ñan funciones al igual que los hombres, por ejem-

plo en el Gobierno Fuerzas Armadas y Policía

Boliviana; sin embargo, a la par de dicha inserción

también se originan aspectos como ser falta de

espacios adecuados para el desempeño de funcio-

nes, el buen relacionamiento con compañeros, así

como, el desequilibrio entre los roles familiar y

laboral, ocasionando la presencia de Estrés Labo-

ral y el empleo de Estrategias de Afrontamiento,

generando así el interés por la investigación de

ambas variables en la mayoría de los casos de

manera individual, siendo así, un desafío el análi-

sis de su relación ya que, por ejemplo la acumula-

ción de denuncias de violencia u horarios exten-

sos de trabajo, relación entre grupos de servicio,

de Policías Femeninas de la F.E.L.C.V., ocasiona

la presencia de Estrés Laboral definida como “un

conjunto de situaciones físicas y/o psicosociales

de carácter estimular que se dan en el trabajo y

que con frecuencia producen tensión y otros re-

sultados desagradables para la persona. Son por

tanto, elementos recurrentes de carácter estimular

ante las cuales las personas suelen experimentar

Estrés y consecuencias negativas”, asimismo, a

través de investigaciones la Organización Interna-

cional del Trabajo OIT define al Estrés Laboral

como “la reacción que puede tener el individuo

ante exigencias y presiones laborales que no se

ajustan a sus conocimientos y capacidades, y que

ponen a prueba su capacidad de afrontar la situa-

ción” proponiendo así, la clasificación de tipos de

estresores que juntamente con otras investigacio-

nes y análisis teórico se agrupan en tres dimen-

siones: 1) estresores organizacionales que con-

templan: clima, estructura y territorio organiza-

cional; 2) estresores individuales: territorio e in-

fluencia del líder; y 3) estresores grupales: falta de

cohesión y respaldo de grupo.

De esta manera, el individuo que presente niveles

de Estrés Laboral genera la utilización como me-

dio de equilibrio de Estrategias de Afrontamiento

término propuesto por Lázarus y Folkman repre-

sentantes máximos, quienes lo definen como

“conjunto de respuestas ante una situación estre-

sante ejecutadas para reducir de algún modo las

cualidades adversas de tal situación” (Salanova, et

al., 2005); que de acuerdo a su teoría el individuo

determina el significado de un evento, sin dicha

apreciación no hay experiencia de estrés, y duran-

te este proceso hay dos niveles:

- “Apreciación primaria: es la determinación

por parte del sujeto del carácter de un deter-

minado evento para él como irrelevante, be-

nigno o negativo. Esta puede estar influida

por variables personales como creencias,

compromisos, etc., y ambientales como fami-

liaridad del evento, probabilidad de ocurren-

cia y naturaleza de sus resultados.

- Apreciación secundaria: se da después que

un determinado evento ha sido apreciado

primariamente como negativo. Se refiere a la

evaluación de los recursos disponibles de

afrontamiento a nivel físico y psicológico; en

caso de que los recursos sean insuficientes

son considerados como necesidades.” (La-

zarus & Folkman, 1986)

Asimismo, investigaciones realizadas con base en

el aporte de Lázarus & Folkman (1986), quienes

proponen tres Estilos de Afrontamiento y que en

la adaptación española de su inventario realizado

por Cano, Rodríguez y García en el 2007 se pro-

ponen ocho Estrategias de Afrontamiento que

son: 1) Afrontamiento Cognitivo: resolución de



problemas, reestructuración cognitiva, pensa-

miento desiderativo y autocrítica; 2) Afrontamien-

to Afectivo: apoyo social y expresión emocional y;

3) Afrontamiento Conductual: evitación de pro-

blemas y retirada social.

Siendo así, de interés el determinar aquellos indi-

cadores percibidos como estresores y los tipos de

estrategias utilizadas por las Policías Femeninas.

Así como el nivel de relación entre el Estrés Labo-

ral y las Estrategias de Afrontamiento presente en

las Policías Femeninas destinadas en la Platafor-

ma de Atención de la F.E.L.C.V.

MATERIALES Y METODOS

Método y variables

El estudio se realizó bajo el enfoque de la Investi-

gación Cuantitativa que contempla un diseño de

investigación, recolección de datos y análisis esta-

dísticos mediante el Tipo de Investigación corre-

lacional, ya que se tiene al Estrés Laboral, y Estra-

tegias de Afrontamiento como variables; de las

cuales se estudiaron los niveles en que se presen-

tan y correlacionan.

El Diseño de Investigación implementado fue no

experimental de tipo transversal correlacional,

donde se estableció la relación entre Estrés Labo-

ral y Estrategias de Afrontamiento, identificando

las características de ambas variables así como el

grado de correlación.

Área de estudio

La población elegida para la investigación fueron

Policías Femeninas encargadas de la Plataforma

de Atención de la Fuerza Especial de Lucha Con-

tra la Violencia, Unidad Especializada de la Poli-

cía Boliviana específicamente la Dirección Depar-

tamental La Paz, que de acuerdo a datos obteni-

dos por la Unidad cuenta con un número de 40

Policías Femeninas destinadas al área de servicio

y recepción de casos en la Plataforma de Aten-

ción, cumpliendo un turno de 24 horas y que es-

tán divididos en tres grupos (datos obtenidos en

el año 2013).

Sujetos

La población que se estudió es una sola muestra

de tipo no probabilística de sujetos tipo, confor-

mado como un solo grupo; tomando en cuenta

como principal característica en común el perte-

necer a la Policía Boliviana y cumplir funciones

laborales dentro de la F.E.L.C.V., estando en con-

tacto permanente con la sociedad. La muestra

estuvo conformada por 40 sujetos, construida a

través de la técnica de muestra definida por crite-

rios del investigador. Siendo así Policías Femeni-

nas destinadas en la F.E.L.C.V., de diferente tiem-

po de permanencia en la Unidad, así como dife-

rencia en rango; en su mayoría madres de familia;

teniendo como característica principal el contacto

permanente con la sociedad por estar a cargo de

la sala de Plataforma de Atención, lugar donde se

reciben las denuncias de Violencia Intrafamiliar

y/o Doméstica, quienes después de la Resolución

Administrativa de la Policía Boliviana Nº01109/13

de la Gestión 2013 pasan a ser Investigadoras.

Instrumentos

Escala de Estrés Laboral u Organizacional:

Publicado por la OIT-OMS consta de veinticinco

ítems agrupados en siete criterios que generan

estrés, con un patrón de respuesta con escala de

tipo Likert comprendidas de 0 como condición

nunca, a 6 como condición siempre tomando en

cuenta que a mayor puntaje mayor nivel de Estrés

Laboral general. Permite también determinar ni-

vel de Estrés Laboral de forma específica a través

de 7 sub grupos mencionados en la introducción,

con la puntación directamente proporcional.



La puntuación valorada total es de 150 puntos,

considerando puntuaciones entre 1 y 55 como

Nivel Bajo, puntuación 55 a 87 como Nivel Medio

o Moderado y de 88 a 150 como Nivel Alto de

Estrés Laboral u Organizacional a nivel general.

Inventario De Estrategias de Afrontamiento

(Adaptación Española)

Presenta una estructura jerárquica compuesta por

ocho Estrategias de Afrontamiento mencionadas

en la introducción respondidas a través de la na-

rración de una situación estresante, esta prueba

ha sido diseñada como resultado de la adaptación

del Inventario de Estrategias de Afrontamiento de

Lázarus y Folkman (2007), esta adaptación fue

realizada por Cano, Rodríguez y García en Espa-

ña durante el año 2007, conformando 40 ítems;

según una escala tipo Likert que presenta opcio-

nes de respuesta desde 0 condicionado como na-

da, hasta 4 condicionado como totalmente. Al

final de la escala se contesta a un ítem adicional

Nº 41 acerca de la Autoeficacia percibida del

afrontamiento («¿En qué grado manejó adecua-

damente la situación?»). Siendo su puntuación

directamente proporcional a la frecuencia de ma-

nejo o utilización de Estrategias de Afrontamien-

to, donde la sumatoria de los 40 ítems dan un to-

tal de 160 puntos, más 4 puntos adicionales del

ítem 41. Considerando puntuaciones entre 1 y 70

como Nivel Bajo, puntuación 71 a 110 como Nivel

Medio o Moderado y de 111 a 160 como Nivel

Alto en cuanto a la utilización de Estrategias de

Afrontamiento general.

En cuanto a la narración sobre la situación estre-

sante su corrección es de tipo cualitativa y, de-

pendiendo de los indicadores identificados serán

agrupados a criterio del evaluador en una clasifi-

cación organizada.

Confiabilidad, Validez y Procedimiento

Cálculo de confiabilidad: Existen diversos proce-

dimientos para calcular la confiabilidad de un

instrumento de medición. Todos utilizan fórmulas

que producen coeficientes de confiabilidad. Estos

coeficientes pueden oscilar entre 0 y 1; dónde un

coeficiente de 0 significa nula confiabilidad y 1

representa un máximo de confiabilidad (confiabi-

lidad total). Entre más se acerque el coeficiente a

cero (0), hay mayor error en la medición.

En este sentido para ambos instrumentos el coefi-

ciente Spearman fue igual a 0,82, que sugiere con-

fiabilidad en los instrumentos para la medición de

las variables hasta en un 82%.

Validez

En cuanto a la validación de los instrumentos se

utilizó el tipo de “validez de expertos”, “que se

refiere en que aparentemente un instrumento de

medición mide la variable en cuestión de acuerdo

con expertos en el tema” (Hernández et al., 2010).

En este sentido para la validación de ambos ins-

trumentos en el contexto donde se realizó la in-

vestigación, se tomó en cuenta los siguientes crite-

rios:

Expertos en el tema: tomando en cuenta a tres

psicólogos que hayan observado la problemática

de la investigación en cuanto a la población selec-

cionada.

Los tres expertos tienen formación en Psicología,

siendo dos también Policías, desempeñando fun-

ciones laborales dentro de los Departamentos De

Psicología en la F.E.L.C.C. y F.E.L.C.V.. El tercer

experto también con formación en psicología

desempeñó funciones laborales dentro de la Poli-

cía Boliviana por más de diez años.

Los instrumentos fueron analizados en dos opor-

tunidades por los tres expertos seleccionados

quienes aprueban la aplicación de la prueba al ver



que el contenido, criterio y constructo conside-

rándolo como adecuado para la investigación y

para la medición de las variables en la población

seleccionada.

RESULTADOS

Se muestran los datos e información recogida en

el Trabajo de Campo, mismos datos que han se-

guido el procedimiento correspondiente, vale

decir la estructura de base de datos, tablas de fre-

cuencia, gráficos y cuadros; además del empleo

de procedimientos estadísticos en cuanto a la veri-

ficación de hipótesis y correlaciones, de acuerdo

al diseño de investigación correspondiente a la

investigación.

En lo que se refiere a datos generales, se obtuvo

como resultados que las Policías Femeninas desti-

nadas en la Plataforma de Atención en la

F.E.L.C.V. oscilan entre los 22 a 40 años lo cual

indica ser una población adulto joven; asimismo,

36 de las 40 Policías tienen conformado una fami-

lia estable y su tiempo de permanencia en la Uni-

dad Especializada varía de 1 a 5 años.

En cuanto al Nivel General de Estrés Laboral, se

aprecia que 20 policías, equivalente al 50% de la

muestra, tienen un Nivel Alto de Estrés Laboral

General considerando las puntuaciones directa-

mente proporcionales de la escala de entre 88 y

150 puntos. A su vez 16 Policías Femeninas que

corresponde al 40%, mantienen un Nivel de Estrés

Laboral general Moderado, entendiendo que ob-

tuvieron puntuaciones entre 55 y 87; y 4 Policías

Femeninas que implica el 10%, mantienen un Ni-

vel Bajo de Estrés Laboral, vale decir que obtuvie-

ron puntuaciones entre 1 y 55 en cuanto a la esca-

la de Estrés Laboral.

La Tabla 1 muestra la comparación de Niveles de

Estrés Laboral, Alto, Medio y Bajo en cuanto a las

Siete Dimensiones que evalúa el instrumento;

identificando aquellas Dimensiones donde se

concentra mayor número de Policías Femeninas

con Estrés Laboral Alto y con Nivel Medio enten-

Tabla 1: Niveles de Estrés Laboral en relación a las 7 dimensiones.

Dimensión Nivel alto Nivel Medio Total Nivel Bajo Total

Nº PF % Nº PF % % Nº PF % Nº PF

Clima Organi-

zacional 11 27% 23 58% 85% 6 15% 40

Estructura Or-

ganizacional 10 25% 24 60% 85% 6 15% 40

Territorio Or-

ganizacional 12 30% 23 57% 87% 5 13% 40

Territorio 16 40% 19 47% 87% 5 13% 40

Influencia del

Líder 12 30% 26 65% 95% 2 5% 40

Falta de Cohe-

sión 5 12% 31 78% 90% 4 10% 40

Respaldo de

Grupo 13 32% 23 58% 90% 4 10% 40



diendo que este nivel es considerado como riesgo

de pasar al Nivel Alto de Estrés Laboral (Tabla 1).

De esta manera, se observa en el Cuadro las com-

paraciones de los niveles de Estrés Laboral Alto,

Medio y Bajo en cuanto a las Dimensiones de

acuerdo al número de Policías Femeninas y sus

porcentajes correspondientes obtenidos como

resultados de sus puntuaciones al momento de la

aplicación del instrumento.

En primer lugar, se observa el número de Policías

Femeninas que están dentro del Nivel Alto de

Estrés Laboral, donde la concentración máxima en

porcentaje se encuentra dentro de las Dimensio-

nes Territorio Organizacional, Territorio, Influen-

cia del Líder y Respaldo de Grupo, considerando

que es la tercera parte de la muestra al estar por

encima del 30%, logrando así unos de los objeti-

vos de la presente investigación al determinar las

situaciones que ocasionan mayor nivel de Estrés

Laboral.

En segundo lugar, como se observa dentro del

Nivel Medio de Estrés Laboral se concentra gran

parte de la muestra, lo que da como resultado que

las Policías Femeninas dentro de este grupo están

en riesgo de incrementar su Nivel de Estrés a Al-

to; a su vez, las Dimensiones Estructura Organi-

zacional, Influencia de Líder y Falta de Cohesión,

son las que concentran la mayor proporción de

Policías Femeninas, con porcentajes por encima

del 60%.

De esta manera, considerando los porcentajes

tanto del Nivel Alto como del Medio se tiene que

por encima del 85% de la muestra se encuentra en

situación de riesgo o ya con Nivel Alto de Estrés

Laboral en alguna de las dimensiones, siendo In-

fluencia del Líder, Falta de Cohesión y Respaldo

Tabla 2: Niveles de Utilización de Estrategias de Afrontamiento en relación a las 7 dimensiones.

Dimensión/ Tipo

de Estrategia de

Afrontamiento

Nivel Bajo Nivel Medio Total Nivel alto Total

Nº PF % Nº PF % % Nº PF % Nº PF

Resolución de

Problemas 2 5% 25 63% 68% 13 32% 40

Reestructuración

Cognitiva 19 48% 16 40% 88% 5 12% 40

Pensamiento De-

siderativo 2 5% 7 18% 23% 31 77% 40

Autocrítica 10 25% 26 65% 90% 4 10% 40

Apoyo Social 9 29% 16 52% 81% 6 19% 40

Expresión

Emocional 8 20% 21 53% 73% 11 27% 40

Evitación de Pro-

blemas 14 35% 22 55% 90% 4 10% 40

Retirada Social 13 33% 25 62% 95% 2 5% 40



de Grupo las Dimensiones que producen mayor

nivel de Estrés Laboral en las Policías Femeninas

de la F.E.L.C.V..

En cuanto a las Estrategias de Afrontamiento se

obtuvo que 21 Policías Femeninas que corres-

ponde al 52%, mantiene un uso de las Estrategias

de Afrontamiento medianamente considerable

ante una situación de Estrés Laboral con puntua-

ciones entre 71 a 110 puntos, a su vez 15 Policías

Femeninas equivalente al 38% obtuvieron entre 1

y 70 puntos, que indica un Nivel Bajo de utiliza-

ción, y 4 Policías Femeninas que son el 10% man-

tiene un Nivel Alto con puntuaciones entre 111 y

160 puntos.

Asimismo, en cuanto a la utilización de los ocho

tipos de Estrategias de Afrontamiento se presenta

el cuadro de la Tabla 2.

En primer lugar, se observa el número de Policías

Femeninas que están dentro del Nivel Alto de

utilización de Estrategias de Afrontamiento, don-

de la concentración máxima en porcentaje se en-

cuentra dentro de las Dimensiones Pensamiento

Desiderativo con un 77% de la muestra, seguido

del 32% que utiliza Resolución de Problemas y el

27% que utilizan la Expresión Emocional. En se-

gundo lugar, como se observa dentro del Nivel

Medio se concentra gran parte de la muestra, lo

que da como resultado que las Policías Femeninas

dentro de este grupo están en riesgo de dejar la

utilización de las Estrategias para afrontar situa-

ciones de Estrés Laboral, sin embargo, Estrategias

como ser resolución de problemas, autocrítica y

retirada social son las que concentran mayor por-

centaje de utilización en cuanto a Nivel Medio y

que no son totalmente utilizadas en cada situación

estresante.

Y, en tercer lugar se tiene aquellas dimensiones

que son las menos utilizadas como ser Reestruc-

turación Cognitiva, Evitación de Problemas y Re-

tirada Social, ya que concentran los mayores por-

centajes en cuanto al Nivel Bajo de utilización. Por

último, se observaría entonces que las dimensio-

nes que concentran porcentajes de utilización de

Tabla 3: Clasificación y niveles de la narración estresante en el trabajo F.E.L.C.V.

Clasificación de Patrón de respuesta Nº Policías

Femeninas %

Tipo de Estrés La-

boral

1. Cambios en la estructura de la FELC-V

(Implementación de nuevo sistema de acuerdo

a la Ley Nº 348)

3 7% Estructura Organi-

zacional

1. Incremento de denuncias atendidas debido

al número de personal

(Acumulación de trabajo- presión)

12 21% Territorio

2. Falta de capacitación y orientación sobre las

funciones bajo la nueva Ley Nº348 (Temor a

equivocaciones)

16 28% Territorio y Estruc-

tura Organizacional

3. Temor y falta de confianza hacia superiores

(Temor a equivocaciones o sanciones) 14 24% Influencia del Líder

4. Falta de recursos materiales

(Dotación de material de escritorio) 6 10%

Estructura Organi-

zacional

5. Descuido de actividades paralelas al ámbito

laboral

(Familiar – Social – Personal)

6 10% Tipos de estresores

no Laborales



Bajo a Medio son consideradas como riesgo de

dejar de ser la opción ante una situación de Estrés

Laboral.

En cuanto a la narración estresante se obtuvo los

datos expuestos en la Tabla 3.

Como se observa un 28% de la muestra al no con-

tar con el conocimiento total de dichas funciones

incrementan su Estrés Laboral por temor a equi-

vocaciones. Esta clasificación correspondería a su

vez al tipo de Estrés Laboral –territorio por con-

templar funciones individuales.

El 24% de las Policías Femeninas del total de la

muestra, mencionan como situación estresante

Temor y falta de confianza hacia superiores; si-

tuación que desencadena Estrés Laboral por te-

mor a equivocaciones y posibles sanciones al no

poder contar con la confianza necesaria para dar

las explicaciones respectivas ante cualquier situa-

ción. Esta clasificación corresponde al tipo de Es-

trés Laboral - Influencia del Líder, por estar den-

tro del tipo de relacionamiento con Jefes Superio-

res.

También, se tiene que el 21% de la muestra total

percibe como situación estresante a la Nº 2 Incre-

mento de denuncias atendidas, que, de acuerdo a

las funciones nuevas y el tiempo determinado

para todo el proceso, perciben que el número de

Policías Femeninas debería ser incrementado, ya

que la acumulación de trabajo y presión por el

tiempo ocasionaría estrés Laboral en ellas. Esta

clasificación correspondería a dos tipos de Estrés

Laboral, a Territorio por contemplar funciones

individuales y, Estructura Organizacional, ya que

involucra a la Estructura de la F.E.L.C.V. en cuan-

to a Recursos Humanos y demás clasificaciones en

menores porcentajes.

Con estos datos encontrados se dio cumplimiento

a los objetivos planteados en la investigación, de-

terminando los niveles generales en cuanto a la

presencia de Estrés Laboral y utilización de Estra-

tegias de Afrontamiento; así como la determina-

ción de situaciones más estresantes y aquellas

situaciones percibidas como estresantes por las

Policías Femeninas, del mismo modo aquellas

estrategias mayormente y menormente utilizadas.

En cuanto a la validación de la hipótesis propues-

ta se realizó el análisis a través de la Correlación

de Pearson y docimasia de hipótesis. La correla-

ción de Pearson es, según Hernández et al., (2010),

una prueba estadística que permite analizar la

relación entre dos variables medidas en un nivel

por intervalos o de razón; y cuya simbolización es

“r”. Este tipo de análisis permite aprobar Hipóte-

sis cuyos resultados puede variar de -1.00 como

correlación negativa perfecta, a +1.00 como corre-

lación positiva perfecta, análisis que se realiza a

través de una regresión lineal (Gráfica 1).

Estos datos muestran que las variables Estrés La-

boral y Estrategias de Afrontamiento se encuen-

tran relacionadas, ya que presentan un r negativo

de –0,68, entre los Niveles de Medición Negativa

Media que es - 0,50 a Negativa Considerable que

es – 0,75; de esta manera se define que su Nivel de

Correlación es de Negativa Media a Considerable.

En cuanto a la docimasia de hipótesis entendida

como el análisis de los indicadores con los resul-

y = -0,4409x + 120,71R² = 0,4632R= -0,6806

0

20

40

60

80

100

120

0 50 100 150

Estr

és L

abo

ral

Estrategias de Afrontamiento

Gráfica 1: Correlación de estrategias vs. estrés laboral



tados encontrados, se halló que de 15 indicadores

presentados 9 aprueban la hipótesis, mientras que

6 lo rechazan, eso significa una aprobación alre-

dedor del 60%. Lo que indica que se estaría acep-

tando la hipótesis afirmativa y rechazando la hi-

pótesis nula y alternativa que se presentó en la

investigación de la Tesis de Grado.

Con este análisis queda probada y aceptada la

Hipótesis de Investigación:

Hi: A mayor nivel de Estrés Laboral, menor

nivel en el manejo de Estrategias de Afron-

tamiento; afectando de esta manera su

desempeño laboral.

Se descartan las hipótesis Nula y Alternativa;

quedando así comprobado que mientras se in-

cremente los niveles de Estrés Laboral en las Poli-

cías Femeninas, menor será la utilización de Estra-

tegias de Afrontamiento o viceversa. Además de

haber encontrado otros datos que no son dejados

de lado y que son explicados en las conclusiones

del presente artículo.

DISCUSIÓN

Si bien se determinaron los objetivos planteados y

comprobado la hipótesis propuesta, no se puede

dejar de lado las características de los resultados

encontrados, ya que la investigación realizada

muestra que gran parte de la población estudiada

mantiene niveles de riesgo y altos de Estrés Labo-

ral, lo cual obstaculiza el desempeño de sus fun-

ciones generales empezando por la utilización de

Estrategias de Afrontamiento para hacer frente a

situaciones dentro del trabajo, de igual manera se

tiene que la transición de Brigada de Protección a

la Familia a F.E.L.C.V., incrementó en sobremane-

ra dichos niveles, por las demandas de orienta-

ción y capacitación por parte de las Policías Fe-

meninas acerca del manejo de la ley Nº 348 que

garantiza a las mujeres una vida libre de violen-

cia.

Entendiendo de esta manera, que el individuo

ante cualquier cambio desconocido incrementa su

estrés ya sea dentro del campo laboral o cualquier

otro, lo cual dificulta su buen desenvolvimiento

obstruyendo la aplicación de las diferentes Estra-

tegias de Afrontamiento para hacer frente a tales

situaciones.

Dando así la inmediata idea que para cualquier

cambio dentro de la estructura, en este caso Poli-

cial y en las diferentes Unidades que compone la

misma, se deben fortalecer con actividades que

dispersen dudas, capacitaciones y nuevas funcio-

nes que serán implementadas para así proporcio-

nar los elementos necesarios a las Policías Feme-

ninas y así puedan cumplir con sus actividades

sin ocasionar cambios abruptos manejando los

niveles de estrés.

Por otra parte, el fomento de actividades paralelas

de distracción, relaciones entre pares y con supe-

riores y subordinados, son de igual importancia al

momento de despeñar las funciones en un día de

servicio, manejo de empatía con los camaradas y

apoyo intra e intergrupal impulsaría el desempe-

ño al momento de la atención a una víctima de

violencia, ya que estas características reducirían el

nivel de Estrés Laboral y potenciaría la utilización

de las Estrategias de Afrontamiento por parte de

las Policías Femeninas.

Una vez ya aplicado estos instrumentos y con los

resultados encontrados también se podría exten-

der la aplicación a diferentes Unidades Policiales

y a policías de ambos sexos para enriquecer las

investigaciones y determinar en una población

más numerosa aquellas situaciones estresantes

percibidas por policías y potenciar a través de

programas la utilización de las estrategias de

afrontamiento, incluso a descubrir nuevas estra-



tegias que sean utilizadas por los mismos fuera de

las propuestas y analizadas en esta investigación.

De esta manera, se puede evidenciar que esta in-

vestigación así como los resultados encontrados

es un aporte importante para la Policía Boliviana,

ya que a través de investigaciones de este tipo se

pueden proyectar programas, capacitaciones y

talleres en beneficio de los policías.

CONCLUSIONES

Respecto a los objetivos planteados, la investiga-

ción logró conocer los Niveles de Estrés Laboral

presente en Policías Femeninas de la F.E.L.C.V.,

siendo considerado como Nivel Alto, lo cual indi-

ca que las policías destinadas a la atención de ca-

sos e investigación de los mismos, no sólo presen-

tan niveles de Estrés por el constante contacto con

la sociedad como indica la REFERENCIAS revi-

sada, si no que a la vez presentan Estrés de tipo

Laboral.

También se pudo determinar aquellas situaciones

predominantes que generan Estrés Laboral en las

Policías Femeninas, siendo situaciones a nivel de

territorio y respaldo de grupo donde se concentra

el mayor porcentaje de Policías Femeninas con

Nivel Alto de Estrés Laboral. Lo cual da a enten-

der que situaciones como falta de ambiente pri-

vado y control de trabajo individual; así como

ausencia de apoyo de cualquier tipo, por parte del

Grupo de Servicio al que pertenecen incrementan

sus Niveles de Estrés Laboral.

Influencia del Líder y Territorio Organizacional

también incrementan el Nivel de Estrés Laboral, a

través de situaciones como ser la relación Supe-

rior- Subordinado, el apoyo y respeto por parte de

Superiores, así como el ambiente en cuanto a in-

fraestructura y lugar de trabajo de la F.E.L.C.V.,

podría tener también la responsabilidad de los

Niveles Altos de Estrés Laboral en la tercera parte

de las Policías Femeninas que atienden denuncias

de violencia en la Plataforma de Atención.

Si bien, se determinó las dimensiones que generan

Nivel Alto también se identificó aquellas dimen-

siones que ocasionan un Nivel Medio o Moderado

de Estrés Laboral que es considerado en la presen-

te investigación como Nivel de Riesgo por poder

incrementar a Nivel Alto, de esta manera se tiene

que la dimensión Falta de Cohesión, produce un

Nivel de Riesgo Moderado de Estrés Laboral en

las Policías Femeninas, entendiendo que la ausen-

cia apoyo por parte del Grupo de Servicio así co-

mo, el sentido de pertenencia al mismo, ocasiona

cierto nivel de Estrés Laboral.

De igual manera, la Estructura Organizacional e

influencia del Líder que contempla la organiza-

ción en cuanto flujo de atención y organización de

la F.E.L.C.V. como Unidad Especializada, así co-

mo el apoyo y la relación con los Superiores, oca-

sionaría en la mayoría de las Policías Femeninas

un Nivel Moderado o Medio de Estrés Laboral,

debido a los cambios estructurales por la imple-

mentación de la Ley Nº 348 que garantiza a la

mujer una vida libre de violencia además de la

resolución Administrativa Nº0109/13 de la Policía

Boliviana.

De igual manera, se puede concluir que la In-

fluencia del Líder, que contempla la relación con

Superiores es la Dimensión concerniente a Estre-

sores Individuales que ocasionaría Estrés Laboral

en casi la totalidad de las Policías Femeninas en

cuanto a Medio o Alto. A su vez la Falta de Cohe-

sión y Respaldo de Grupo que se relaciona con el

apoyo y la relación con el Grupo de Servicio, Di-

mensiones que pertenecen a Estresores Grupales

ocasionaría también en gran parte de ellas Niveles

de Estrés Laboral de Medio a Alto.

Por otra parte, la investigación logró identificar

aquellas Estrategias de Afrontamiento que no son



utilizadas por las Policías Femeninas, siendo la

Reestructuración Cognitiva encargada de ver el

aspecto positivo antes de una situación estresante,

la Estrategia que las Policías Femeninas no la uti-

lizan manteniéndola en un nivel Bajo; al igual

que, Evitación de Problemas y Retirada Social,

que expresan el escape ante el problema y aisla-

miento de interacción social son las menos utili-

zadas por la tercera parte de las Policías Femeni-

nas.

Si bien son estas las Estrategias de Afrontamiento

con Nivel Bajo también existen las que mantienen

un Nivel Medio o Moderado de uso como ser la

Autocrítica, Resolución de Problemas y Retirada

Social encargadas del autoanálisis, búsqueda de

soluciones y aislamiento, las estrategias que son

utilizadas de forma moderada.

De esta manera, si se toma en cuenta los Niveles

Bajo y Medio se concluye que las Estrategias Evi-

tación de Problemas y Retirada Social que corres-

ponde a la Dimensión Afrontamiento Conductual,

son las menos utilizadas al mantener una Nivel

hasta Moderado o Medio. A su vez, la Autocrítica

y Reestructuración Cognitiva, que pertenecen al

Afrontamiento Cognitivo y Apoyo Social que es

del tipo afrontamiento afectivo son de igual ma-

nera utilizadas moderadamente.

Las Hipótesis planteadas en la presente investiga-

ción fueron analizadas y validadas tanto de forma

cualitativa como cuantitativa. En lo que se refiere

a la primera se estableció a través de la docimasia

que las Policías Femeninas si mantienen un Nivel

de Moderado a Alto en cuanto a Estrés Laboral y

que la utilización de casi todas las Estrategias de

Afrontamiento son de Moderado a Bajo.

A su vez, en cuanto a la prueba de Correlación de

Pearson se concluye que si existe la relación entre

el nivel alto de Estrés Laboral y en Nivel Bajo de

utilización de Estrategias de Afrontamiento al

tener un resultado de R= -0,68, teniendo de esta

manera una Correlación Negativa de Media a

Considerable. Quedando así aprobada la Hipóte-

sis de Investigación que A mayor nivel de Estrés

Laboral, menor nivel en el manejo de Estrategias

de Afrontamiento; afectando de esta manera en su

desempeño laboral.

La investigación si bien se guió por el cumpli-

miento de los objetivos y verificación de hipótesis,

también encontró otros datos importantes que no

pueden ser dejados de lado, mismos que demues-

tran que aquellas policías que ya tienen confor-

mado un hogar con hijos son las que presentan

Nivel Alto de Estrés Laboral y a su vez son las

que utilizan Estrategias de Afrontamiento en un

Nivel Bajo.

También, aquellas Policías Femeninas que tienen

menor tiempo de permanencia siendo indiferente

su estado civil son la que presentan Niveles Altos

de Estrés Laboral y Nivel Bajo en uso de Estrate-

gias de Afrontamiento. Estos datos de ambos re-

sultados encontrados apoyan una vez más la Hi-

pótesis de Investigación.

Por otra parte, en cuanto a las narraciones reali-

zadas por las Policías Femeninas se puede con-

cluir que la falta de capacitación, así como temor

y falta de confianza hacia superiores y el incre-

mento de denuncias debido a poco personal, fue-

ron los factores percibidos como estresantes, en su

mayoría, debido a la implementación de la nueva

ley Nº 348; factores que se pueden relacionar con

Estructura Organizacional e Influencia del Líder

en cuanto a dimensiones de Estrés Laboral.

Concluyendo de esta manera, que las Policías

Femeninas que presentan Estrés Laboral no utili-

zan adecuadamente las Estrategias de Afronta-

miento, afectando su desempeño general en la

F.E.L.C.V., por lo que es pertinente la aplicación

de políticas de intervención para modificar la



estructura de la Unidad Policial brindando un

clima laboral estable a las Policías Femeninas de-

mostrando de esta manera la importancia, signifi-

cancia y viabilidad de esta investigación, siendo

importante que todos los resultados encontrados

no se los considere como un aspecto privado o

aislado, al contrario podría ser el impulsor de la

creación de una acción planificada desde el Alto

Mando Policial para la socialización de los pro-

blemas presentes en las diferentes Unidades, así

como la introducción de soluciones teniendo co-

mo resultado el bienestar general del personal

Policial Femenino en especial de la F.E.L.C.V. y su

buena interacción con la sociedad.

REFERENCIAS

Cano, F., Rodríguez, L., García, J.. 2007. “Adapta-

ción Española del Inventario de Estrate-

gias de Afrontamiento”. España

Hernández, S., Fernández, C., Baptista, L.. 2010.

“Metodología de la Investigación”. Méxi-

co: McGraw-Hill.

Lazarus, R., Folkman, S.. 1986. “Estrés y Procesos

Cognitivos”: España.

Ministerio de Justicia. 2013. “Ley Nº 348, Ley In-

tegral para Garantizar a las Mujeres una

Vida Libre de Violencia”: Bolivia.

Pérez, A.. 2009. “La Mujer en las Fuerzas Arma-

das y Policía: una Aproximación de Gé-

nero a las Operaciones de Paz”. Informes

Nacionales, el caso de Bolivia.

Salanova, M., Grau-Isabel, Ma., Martínez, M..

2005. ”Demandas Laborales y Conductas

de Afrontamiento: El Rol Modulador de

la Autoeficacia Profesional”: España.

(www.google.com)



NOTA TÉCNICA - BALÍSTICA

VELOCIDAD INICIAL DE PROYECTILES 9 mm DE CARTUCHOS

ENSAMBLADOS EN FÁBRICA vs. RECARGADOS

ARTESANALMENTE

Tcnl. DEAP. Rubén Gemio B.1; Sbtte. Igor Gutierrez1 & R. Luna-Barrón.2

1División Balística, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Dpto. Inv. Científica, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. [email protected]

RESUMEN

Se analizó la relación entre la velocidad inicial (VI) de proyectiles 9 mm de cartuchos ensamblados en

fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC), con sus respectivos pesos y dimensiones. Aunque la VI

de FAB es ligeramente mayor a REC, la comparación de promedios muestra paralelismo en el diseño y

en la VI de los proyectiles, no obstante los REC presentan mayor desviación típica que FAB para sus va-

riables. La correlación de la masa del cartucho, de la vaina, del proyectil, de la carga de pólvora, de la

longitud del cartucho y de la vaina, del diámetro de la vaina y del proyectil (calibre) con la VI inicial del

mismo, muestra que no existe dependencia lineal significativa. Se ha probado estadísticamente que exis-

ten diferencias significativas entre cartuchos FAB y REC. Se sugiere incluir variables de composición

química de carga, material del proyectil y elementos mecánicos del arma.

PALABRAS CLAVE: Velocidad inicial de proyectiles, carga de pólvora, cartuchos recargados.

ABSTRACT

The relationship between the initial speed of 9 mm bullets of cartridges assembled in factory (FAB) and

refilled by hand (REC), with their weights and dimensions was analyzed. Although FAB’s VI is slightly

higher than REC, the comparison of means suggest parallel design and similar bullet’s initial speed,

however REC present greater standard deviation tan FAB for its variables. The correlation of mass of the

cartridge, the sheath, the projectile and of the powder charge, the length of the cartridge and sheath, the

diameter of sheath and projectile (caliber) with the projectile initial speed, shows no significant linear

dependence. It has been proven significant statistically differences between FAB and REC cartridges. It is

suggested to include in future other variables like the chemical composition of load, construction materi-

al and mechanical weapon elements.

KEY WORDS: Initial projectile speed, gunpowder load, refilled firearm cartridges.



INTRODUCCIÓN

Balística es la ciencia que trata con el movimiento

de los proyectiles. Técnicamente se refiere al estu-

dio de la trayectoria de un proyectil disparado

por un arma de fuego, su vuelo por el aire y su

impacto en el blanco u objetivo. No obstante, des-

de Calvin Goddard en la década de 1920, el tér-

mino “balística” se emplea comúnmente para la

“identificación científica de armas de fuego”, me-

diante el cotejo con proyectiles recuperados du-

rante una investigación criminal (Stelle, 2008).

Autores modernos dividen a la balística en inte-

rior, exterior y de efectos, siendo su objeto de es-

tudio respectivo la propulsión, el vuelo atmosféri-

co y el impacto (McCoy, 2005). Varios factores

influyen en el vuelo atmosférico del proyectil, que

se inicia el momento en que abandona la boca de

cañón del arma con determinada velocidad inicial

(VI), misma que puede estar afectada por factores

como el coeficiente balístico, la forma y masa del

proyectil, la carga de pólvora, el calibre, la longi-

tud del cartucho y otros (Carlucci & Jacobson,

2007).

El presente ensayo comparó la VI de proyectiles 9

mm ensamblados en fábrica (FAB) y recargados

artesanalmente (REC), con la masa de su respeti-

vo cartucho, su vaina, su proyectil, su carga de

pólvora, longitud del cartucho y vaina, y con su

diámetro (calibre real) y el de la vaina (Tablas 1 y

2).


Empleando un arma de fuego marca NNNN, se

realizaron 28 disparos con cartuchos originales de

fábrica (FAB) de la marca mexicana “Águila Am-

munition” y 30 disparos con cartuchos recargados

artesanalmente (REC) por personal de tiro del

“Club Hípico Los Sargentos” de La Paz, todos

ellos de calibre nominal 9 mm.

Cada cartucho fue pesado en una balanza digital

“OHAUS Adventurer” y medido con una regla

vernier digital “TRUPPER” para determinar su

longitud y calibre reales. Durante el disparo se

midió la VI del proyectil con un cronógrafo

“PACT Professional XP” de dos parantes.

Cada proyectil disparado y su vaina respectiva

fueron recuperados, pesados y medidos. La masa

aproximada de la carga de pólvora fue deducida

de las masas del cartucho, la vaina y el proyectil.

Los datos se compilaron y analizaron con estadís-

ticos de correlación.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Las Tablas 1 y 2 resumen los datos obtenidos con

los cartuchos originales y recargados respectiva-

mente. Para elaborar las Gráficas 1 y 2, se ordena-

ron los datos de las Tablas 1 y 2 de forma ascen-

dente en relación a la Velocidad Inicial (VI) de los

proyectiles disparados.

La VI de los proyectiles de cartuchos recargados

artesanalmente (REC) mostró mayor variación

entre disparos que los cartuchos de fábrica (FAB).

El promedio de VI para FAB fue de 280,2 m/s,

apenas 2,75% por encima de REC (272,5 m/s). No

obstante, la desviación estándar de FAB de 12,4

m/s fue menor a los 27,2 m/s de REC, que es

219.4% la de FAB. La carga de pólvora promedio

para FAB fue de 460 mg y para REC de 411 mg

(diferencia del 10,6%), con desviaciones respecti-

vas de 45 y 93 mg (diferencia de 207,0%) respecti-

vamente, mostrando similar comportamiento al

de VI (Tablas 1 y 2).

Esto sugiere a primera vista una posible relación

directa entre la VI del proyectil y la carga de pól-

vora en su cartucho, no obstante los datos de co-

rrelación mostrarán más adelante que no es así

(Gráfica 5).



Tabla 1. Datos de 28 disparos con cartuchos 9 mm ensamblados en fábrica (FAB). Todas las variables se

determinaron experimentalmente excepto la carga de pólvora (*), que se dedujo matemáticamente a

partir de las masas del cartucho, antes, y de vaina y proyectil, después del disparo.

Cartucho (g) Vaina (g) Proyectil (g)Carga

(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyectil

O25 26,31 12,48 3,95 8,01 5,22 29,46 18,78 9,55 9,00

O27 26,34 12,57 4,02 8,01 5,40 29,44 18,89 9,25 8,93

O30 26,44 12,58 4,01 8,01 5,60 29,57 18,53 9,46 9,02

O28 26,46 12,55 4,01 8,03 5,05 29,88 18,99 9,57 8,98

O22 26,49 12,47 4,02 8,03 4,15 29,46 18,75 9,68 8,99

O21 26,75 12,48 4,02 8,03 4,27 29,37 18,90 9,77 8,91

O11 26,91 12,47 4,00 8,04 4,26 29,26 18,84 9,65 9,10

O24 26,96 12,48 4,04 8,03 4,06 29,47 18,80 9,80 9,03

O2 27,23 12,50 3,99 8,01 5,01 29,38 18,74 9,80 8,99

O26 27,53 12,46 4,01 8,02 4,26 29,47 18,54 9,54 9,03

O10 27,54 12,48 4,01 7,99 4,76 29,32 18,85 9,66 9,02

O9 27,74 12,50 4,02 8,01 4,70 29,32 18,83 9,68 8,90

O12 27,82 12,48 3,99 8,01 4,82 29,67 18,88 9,67 9,17

O13 27,83 12,46 4,02 8,07 3,71 29,11 18,90 9,80 9,01

O23 27,89 12,47 4,01 8,00 4,56 29,35 18,98 9,65 9,02

O5 28,13 12,48 3,97 8,03 4,82 29,33 18,75 9,78 9,01

O6 28,21 12,50 4,01 8,07 4,23 29,28 18,95 9,79 9,02

O29 28,27 12,56 4,02 8,02 5,15 29,49 18,86 9,23 9,01

O7 28,42 12,50 4,03 8,05 4,18 29,43 18,85 9,79 9,01

O3 28,82 12,51 4,02 8,05 4,44 29,28 18,92 9,77 9,03

O14 28,93 12,51 4,02 8,03 4,61 29,27 18,90 9,67 9,10

O19 29,10 12,47 3,97 8,03 4,66 29,30 18,84 9,66 8,91

O17 29,28 12,51 3,97 8,07 4,67 29,52 18,90 9,66 8,98

O4 29,34 12,55 4,01 8,07 4,73 29,34 18,78 9,73 9,05

O18 29,39 12,43 3,97 8,02 4,40 29,35 18,73 9,66 8,92

O16 29,75 12,50 4,02 8,10 3,83 29,33 18,90 9,66 8,90

O15 29,88 12,51 4,01 8,03 4,71 29,30 18,82 9,67 8,85

O1 30,92 12,46 3,98 8,04 4,40 29,46 18,83 9,78 8,93

Max 30,92 12,58 4,04 8,10 5,60 29,88 18,99 9,80 9,17

Promedio 28,02 12,50 4,00 8,03 4,60 29,40 18,83 9,66 8,99

Min 26,31 12,43 3,95 7,99 3,71 29,11 18,53 9,23 8,85

Desv (s) 1,24 0,04 0,02 0,03 0,45 0,15 0,11 0,15 0,07

Asimetría 0,39 0,74 -0,91 0,83 0,23 1,32 -1,34 -1,71 0,19

Diámetro (mm)Velocidad

(m/s x10)Código

Masa Longitud (mm)

*



Tabla 2. Datos de 30 disparos con cartuchos 9 mm recargados artesanalmente (REC). Todas las variables

se determinaron experimentalmente excepto la carga de pólvora (*), que se dedujo matemáticamente a

partir de las masas del cartucho, antes, y de vaina y proyectil, después del disparo.

Cartucho (g) Vaina (g) Proyectil (g)Carga

(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyectil

R2 21,93 12,138 3,83 7,89 4,11 28,88 18,76 9,69 8,92

R3 22,15 12,257 3,94 8,02 3,03 28,89 18,90 9,74 8,95

R13 25,18 12,507 4,12 8,06 3,23 28,60 18,80 9,76 9,02

R20 25,79 12,552 4,16 8,02 3,65 28,63 18,81 9,78 9,11

R14 25,88 12,601 4,16 8,08 3,65 28,76 18,88 9,64 9,10

R15 25,88 12,57 4,17 7,91 4,84 28,68 18,83 9,60 9,00

R19 26,01 12,533 4,19 8,02 3,22 28,73 18,90 9,71 8,98

R24 26,03 12,573 4,17 8,00 4,11 28,76 18,78 9,83 8,99

R22 26,11 12,57 4,14 7,95 4,80 28,69 18,88 9,80 9,15

R25 26,31 12,587 4,17 8,01 4,05 28,73 18,83 9,77 8,64

R27 26,34 12,57 4,16 8,06 3,48 28,64 18,82 9,75 8,87

R16 26,35 12,567 4,14 8,04 3,93 28,16 18,77 9,83 8,99

R21 26,36 12,561 4,14 7,99 4,30 28,68 18,84 9,62 9,03

R30 26,44 12,581 4,17 8,01 4,05 28,75 18,80 9,74 9,60

R28 26,46 12,545 4,17 7,99 3,81 28,65 18,80 9,65 9,30

R5 26,65 12,501 4,01 8,09 4,01 29,25 18,89 9,67 8,70

R17 27,06 12,587 4,17 7,97 4,43 28,63 18,81 9,62 8,95

R18 27,06 12,613 4,14 7,91 5,65 28,63 18,82 9,63 8,07

R26 27,53 12,579 4,16 7,96 4,56 28,66 18,80 9,81 8,24

R23 27,89 12,539 4,15 8,00 3,94 28,66 18,96 9,68 8,95

R4 27,96 12,396 3,96 8,05 3,88 29,71 18,82 9,65 8,88

R29 28,27 12,555 4,17 7,91 4,79 28,65 18,81 9,62 9,65

R7 28,78 12,502 4,02 8,07 4,12 29,30 18,85 9,72 9,11

R12 28,78 12,559 4,16 7,69 7,17 28,74 18,77 9,71 9,05

R6 28,92 12,241 3,94 8,04 2,70 28,87 18,90 9,73 8,98

R11 29,24 12,568 4,15 8,08 3,38 28,61 18,82 9,77 9,08

R8 29,37 12,09 3,73 7,81 5,48 28,77 18,80 9,71 8,95

R9 29,37 12,166 3,90 8,03 2,28 28,96 18,66 9,81 9,20

R10 29,37 12,474 4,02 8,03 4,22 29,32 18,82 9,73 9,12

R1 37,95 12,101 3,74 7,91 4,55 28,84 18,81 9,63 8,70

Max 37,95 12,61 4,19 8,09 7,17 29,71 18,96 9,83 9,65

Med 27,25 12,47 4,08 7,99 4,11 28,79 18,82 9,71 8,98

Min 21,93 12,09 3,73 7,69 2,28 28,16 18,66 9,60 8,07

Desvest (s) 2,72 0,16 0,13 0,09 0,93 0,28 0,06 0,07 0,31

Asimetría 1,77 -1,48 -1,42 -1,70 1,06 1,36 -0,18 0,04 -0,76

CódigoVelocidad

(m/s x10)

Masa Longitud (mm) Diámetro (mm)

*



Para FAB, las masas del cartucho, proyectil y vai-

na, al igual que la longitud y diámetro de la vaina

más el diámetro del proyectil (calibre), guardan

relativa uniformidad; mientras que la longitud del

cartucho y la masa de carga (pólvora) son varia-

bles (Gráfica 1).

Para REC solo las masas del cartucho, proyectil y

vaina, así como el diámetro y longitud de la vai-

na, guardan relativa uniformidad; mientras que la

masa de carga (pólvora), al igual que la longitud

del cartucho y el diámetro del proyectil, son va-

riables (Gráfica 2).

La Gráfica 3 de dispersión radial de “promedios”

para las nueve variables comparadas, mostró una

distribución similar entre FAB y REC. Esto sugie-

re uniformidad en el diseño y estructura de los

cartuchos, así como en el comportamiento del

proyectil.

En contraste, la Gráfica 4 de “desviaciones están-

dar” muestra que las variables de REC están más

dispersas en torno a su media, especialmente la VI

y la masa de carga. Esto es coincidente con el po-

sible efecto que la manera artesanal de ensambla-

do de los cartuchos recargados (REC) puede tener

en su equivalencia o paridad, lo cual ha sido dis-

minuido con la automatización de fábrica (FAB).

Sin embargo, aunque los promedios sugieren si-

militud de diseño y comportamiento, al analizar

la correlación entre las ocho variables estudiadas

con la VI respectiva para FAB y REC, la depen-

dencia lineal (calculada mediante el estadístico

Pearson, Gráfica 5), sugiere un comportamiento

diferencial entre ambos tipos de cartuchos. Más

aún, indica que la variable más influyente sobre la

Gráfica 3. Dispersión radial del PROMEDIO de las variables estudiadas para cartuchos

ensamblados en fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC). VI = Velocidad Inicial.



Gráfica 4. Dispersión radial de la DESVIACIÓN ESTÁNDAR de las variables estudiadas

para cartuchos ensamblados en fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC). VI = Velocidad Inicial.

Gráfica 5. Dispersión radial del índice de dependencia lineal PEARSON entre las variables

estudiadas y la VI de cartuchos de fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC).



VI para FAB es la “masa del proyectil” (0,47) y el

“diámetro de la vaina” (0,31), mientras que para

REC la “masa de la carga” (0,19) y “la longitud

del cartucho” (0,16).

No obstante, debe notarse que en ningún caso

Pearson superó el 50% (de hecho se obtuvieron

algunos valores negativos), lo que significa que no

existe dependencia lineal significativa entre las

variables estudiadas y la VI, y que las diferencias

se deben probablemente a la estocasticidad espe-

rada por los fabricantes (Carlucci & Jacobson,

2007).

El rango de VI medida (219 a 309 m/s) no permite

apreciar el efecto esperado de variables como la

“masa de carga” o la “masa del proyectil”. Por

otro lado, es totalmente lógico esperar que la VI

dependa también de la interacción entre el cartu-

cho y el proyectil, con los elementos mecánicos

del arma como el cañón, la estriación interna del

mismo, el material de fabricación, la química de la

carga u otras variables, que no fueron estudiadas

en el presente ensayo.

La Tabla 3 resume el promedio, desviación típica

y asimetría, calculadas para las nueve variables

entre FAB y REC, cuya dispersión puede verse en

la Gráfica 3.

El análisis comparativo entre FAB y REC em-

pleando t-student para determinar corresponden-

cia de origen muestral, con la “VI del proyectil”

como referencia (Tabla 3), muestra que sólo la

longitud de la vaina y el diámetro del proyectil

(calibre) son significativamente similares entre

ambas, lo que sugiere uniformidad en la fabrica-

ción y en la selección de la vaina y del proyectil.

Las demás variables sugieren un origen muestral

distinto para FAB y REC, excepto para la “masa

del cartucho” que tiene un valor inconcluyente t-

student de 0,45.

La prueba de correlación de varianzas de Fisher

entre FAB y REC para las nueve variables (Tabla

4) muestra que la variabilidad entre ambas no está

relacionada. El índice de dependencia lineal Pear-

son propone al diámetro del proyectil (0,1346)

como posible variable común entre FAB y REC, si

se considera a la “VI” como factor de correlación,

y a la masa del proyectil (-0,5704) y la carga de

pólvora (-0,2765) en relación inversa, que son por

tanto los factores más discordantes entre cartu-

chos FAB y REC.

La Gráfica 6 muestra la relación entre la VI del

Tabla 3. Comparación de “promedio”, “desviación estándar” y “asimetría” de las variables

estudiadas en cartuchos de fábrica (FAB) y recargados artesanalmente (REC).

Cartucho

(g)

Vaina

(g)

Proyecti l

(g)

Carga

(mg x100)Cartucho Vaina Vaina Proyecti l

Promedio 28,02 12,50 4,00 8,03 4,60 29,40 18,83 9,66 8,99

Desv (s ) 1,24 0,04 0,02 0,03 0,45 0,15 0,11 0,15 0,07

Asimetría 0,39 0,74 -0,91 0,83 0,23 1,32 -1,34 -1,71 0,19

Promedio 27,25 12,47 4,08 7,99 4,11 28,79 18,82 9,71 8,98

Desvest (s ) 2,72 0,16 0,13 0,09 0,93 0,28 0,06 0,07 0,31

Asimetría 1,77 -1,48 -1,42 -1,70 1,06 1,36 -0,18 0,04 -0,76

0,1649 0,4500 0,0075 0,0079 0,0154 0,0000 0,8282 0,0676 0,7639

8,89E-05 1,4E-11 4,6E-15 7,7E-09 0,00029 0,00089 0,00073 0,00015 1,5E-11

0,906643 -0,157 0,07815 -0,5704 -0,2765 -0,0927 0,07071 -0,3545 0,1346

t-s tudent

Fisher

Pearson

FAB

REC

VARIABLEVelocidad

(m/s x10)

Masa Longitud (mm) Diámetro (mm)



proyectil y su calibre real y su masa de pólvora.

La carga y calibre de los cartuchos FAB (azul y

verde) muestran mayor proximidad y uniformi-

dad en relación a su la VI, con leve tendencia a

estar por encima de los REC. Asimismo, el índice

de correlación r2 es levemente mayor para FAB,

aunque en ambos casos no es significativo en rela-

ción a la VI.

Es importante notar que la menor carga de pólvo-

ra corresponde a una de las más altas VI y que la

mayor carga no mostró la mayor VI, aunque el

proyectil más veloz corresponde a FAB y el más

lento a REC.

Mención especial merece el ordenamiento más

próximo a 9 mm de los proyectiles FAB en rela-

ción a la notable dispersión de REC (Gráfica 6,

derecha), aunque igualmente sus índices r2 no

guardan correlación significativa con la VI.

Es necesario un número muestral mayor y la con-

sideración de otras variables, especialmente el

material de construcción de los proyectiles, de las

vainas, la composición química de la carga, el

coeficiente balístico y los elementos mecánicos del

arma que puedan influir en la trayectoria interna

del proyectil (Hackborn, 2005).

AGRADECIMIENTOS

Al tercer curso B de Damas y Caballeros Cadetes

de ANAPOL 2014 de la materia “Metodología de

la Investigación Científica”, por el aporte de datos

al presente ensayo.

REFERENCIAS

Carlucci, D. & Jacobson, S..2007. ALLISTICS -

Theroy and Design of Guns and Ammu-

nition. USA: CRC Press, 502 p.

Hackborn, W.. 2005. The Science of Ballistics:

Mathematics Serving the Dark Side. 14 p.

McCoy, R.. 2012. Modern Exterior Ballistics.

USA: Schiffer Publishing, 326 p.

Steele, L.. 2008. Ballistics. En: YORK, E. Science

for Lawyers. USA: ABA Book Publishing,

400 p.

Gráfica 6. Distribución de Carga de Pólvora y Calibre Real vs. VI del proyectil,

para



NOTA TÉCNICA – SEGURIDAD VIAL

SATURACIÓN DE TRÁFICO EN LA AVENIDA

6 DE MARZO, EL ALTO, BOLIVIA

Pol. M. Villalobos H.1 & Luna, R.2

1Centro de Investigación y Capacitación en Seguridad Vial, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. 2 Dpto. Inv. Científica, IITCUP, Universidad Policial. La Paz, Bolivia. [email protected]

RESUMEN

En la ciudad de El Alto circulan más de 45.000 vehículos por día y “la ceja” de esta urbe se considera uno

de los puntos urbanos más inseguros del país, por el que transitan hasta 13.500 personas cada dos horas.

El congestionamiento vehicular en la Av. 6 de marzo esq. calles 11 a la 1 fue cuantificado en un ensayo de

7 días, observando el tiempo de congestión por carril y la densidad vehicular en el tramo. Los resultados

sugieren que factores como el comportamiento de los conductores, las normas de circulación o el diseño

de las vías, podrían ser más influyentes que la cantidad de vehículos en circulación o el horario y se re-

comienda investigarlos sistemáticamente.

PALABRAS CLAVE: Saturación de tráfico, Av. 6 de marzo, densidad vehicular.

ABSTRACT

In the city of El Alto circulate over 45,000 vehicles per day and the “eyebrow” site of this city is consid-

ered one of the most insecure urban parts of the country, through which pass up to 13,500 persons every

two hours. Traffic congestion on Av. 6 de marzo between streets 11 to 1 was quantified in a 7-day test,

observing the time of congestion and traffic lane density in this section. The results suggest that factors

such as driver behavior, traffic rules or road design could be more influential than the number of vehicles

in circulation, which should be systematically investigated.

KEY WORDS: Traffic saturation, Av. 6 de marzo, vehicular density.



INTRODUCCIÓN

Una de las más frecuentes y erróneas asunciones

de los conductores de vehículos es que a mayor

velocidad, menor tiempo de recorrido total. Esto

es real en condiciones ideales, cuando el flujo

vehicular es ininterrumpido y el contacto entre

vehículo, vía y peatón es mínimo. En entornos

urbanos, la circulación vehicular se ve afectada

por factores como intersecciones, señales de trá-

fico, peatones, escuelas o la congestión de los

vehículos predecesores y otros, que impiden

adoptar una velocidad constante (flujo vehicular

interrumpido).

Mediante el análisis de los elementos del flujo

vehicular se pueden entender las características

y el comportamiento del tránsito, requisitos bá-

sicos para el planeamiento, proyección y opera-

ción de carreteras, calles y sus obras complemen-

tarias dentro del sistema de transporte.

El objeto, al abordar el análisis del flujo vehicu-

lar es dar a conocer algunas de las metodologías

e investigaciones y sus aplicaciones más relevan-

tes, con particular énfasis en los aspectos que

relaciona con las variables del flujo vehicular la

descripción probabilística o casual del flujo de

tránsito, la distribución de los vehículos en una

vía y las distribuciones estadísticas empleadas

en proyectos y control de tránsito.

Un reporte de la “Transportation Research

Board” norteamericana demostró que la veloci-

dad de circulación es directamente dependiente

del diseño de la vía y factores geométricos de

correlación con el flujo vehicular (TRB, 1998). La

congestión vehicular tiene serias implicaciones

en la economía. Los retrasos consecuente y el

consumo innecesario de combustible, han llega-

do a representar hasta 78 millones de $us en paí-

ses desarrollados (Albalate y Bel, 2008).

Uno de los principales problemas por los que

atraviesa la mayoría de las ciudades de nuestro

Estado Plurinacional de Bolivia es esta “conges-

tión vehicular”, que tiene su origen en el incre-

mento desmesurado del parque automotor,

además del poco o escaso desarrollo de la infra-

estructura vial, lógicamente apoyado en alguna

mediada por la improvisación y la falta de plani-

Figura 1. Vista satelital de la Av. 6 de marzo de El

Alto, señalando uno de los sitios de observación.

Figura 2. Av. 6 de marzo, El Alto, Bolivia. La flecha

indica el sentido observado de tráfico.



ficación.

El diccionario de la Lengua Española (Real Aca-

demia Española, 2001) la define “congestión”

como “acción y efecto de congestionar o conges-

tionarse” y, “congestionar” como “obstruir o

entorpecer el paso, la circulación o el movimien-

to de algo”, en nuestro caso el tránsito vehicular:

muchos vehículos circulando lenta e irregular-

mente en una misma vía.

La Avenida 6 de marzo de la ciudad de El Alto,

Bolivia (Figura 1), es una de vía de cuatro carri-

les troncales que sirve de nexo entre las vías

principales hacia la ciudad de La Paz y las diver-

sas zonas de El Alto, y es asimismo uno de los

centros más importantes de embarque y desem-

barque de pasajeros. El presente ensayo observó

la densidad y duración de la congestión vehicu-

lar desde un punto fijo (Calle 11) de esta aveni-

da.

Tabla 1. Sumatoria (SUM), promedio (X),

desviación estándar (S) y asimetría (ASIM)

semanales de cantidad por tipo de vehículo.

SUM X S ASIM %

MINIBUS 34908 4986,9 114,57 -0,203 74,208

AUTOMÓVIL 2367 338,14 19,386 -0,73 5,032

VAGONETA 2308 329,71 33,822 1,3702 4,906

MICROBUS 2042 291,71 11,743 -1,264 4,341

4X4 1890 270 31,754 0,0854 4,018

CAMIONETA 1551 221,57 51,707 0,2703 3,297

BUS 1223 174,71 42,512 -0,825 2,600

CAMIÓN 356 50,857 15,313 -0,277 0,757

MOTO 174 24,857 4,7759 0,7404 0,370

AMBULANCIA 83 11,857 1,215 -0,414 0,176

FLOTA 82 11,714 2,8115 0,2185 0,174

POLICÍA 57 8,1429 2,2678 -0,845 0,121

MEDIA 7237,1 560,01 27,657 -0,156 ----

DESV 9802,2 1400,3 32,146 0,7432 ----

TOTAL 47041


Empleando un cronómetro y observación directa

(flotando sobre el flujo de tránsito), durante siete

días se midió el tiempo de congestión en minu-

tos y la densidad por tipo de vehículo en tres

horarios, para cada uno de los cuatro carriles de

la Av. 6 de marzo de la ciudad de El Alto, Boli-

via (Figuras 1 y 2), desde un punto fijo sobre la

Gráfica 1. Promedio de “minibuses” por día.

Gráfica 2. Cantidad semanal promedio de vehículos.

Gráfica 3. Cantidad promedio de circulación

vehicular según hora del día y tipo.



transversal calle 11 a la 1 (dirección de retorno a

La Paz).


Durante la semana de observación se identifica-

ron 12 tipos de vehículos, de los cuales el tipo

“minibús” representó más del 74% de los 47041

vehículos contados durante la semana de ensayo

(Tabla 1).

Este elevado número sugiere que la mayor parte

del congestionamiento se debería al tipo “mini-

bús”. La Gráfica 1 muestra que la cantidad pro-

medio de “minibuses”, a lo largo del día, es si-

milar durante toda la semana, incluso sábado y

domingo, lo cual es más evidente en la Gráfica 2,

que muestra la relación de los 12 tipos de

vehículos circulantes durante las observaciones.

La Gráfica 3 muestra comparativamente el pro-

medio de la cantidad vehicular en tres horarios

diferentes durante la semana. Solo para los tipos

“minibús”, “automóvil” y “vagoneta” (aunque

debe aclararse que el “minibús” se clasifica como

“vagoneta” y por conveniencia el presente em-

pleará la descripción previa), la correlación es

ascendente a lo largo del día (Pearson mínimo =

0,9706), lo cual indica que el horario nocturno es

el más saturado, aunque debe recordarse que

“automóvil” y “vagoneta” representan menos

del 10% del total de vehículos (Tabla 1).

La Gráfica 4 ordena los datos según cantidad por

día de semana y muestra que el martes es el más

saturado (en contraste al reporte municipal que

signa los jueves), seguido del viernes; lunes y

sábado son los menos saturados. Sin embargo,

Gráfica 4. Cantidad promedio de vehículos

según día de semana.

Gráfica 5. Duración del congestionamiento vehicular

por día de semana en tres horarios diferentes.

Gráfica 6. Duración promedio del congestionamiento

diario por hora del día y carril de circulación.

Gráfica 7. Correlación entre la cantidad promedio

de vehículos y la duración (minutos) del congestio-

namiento vehicular semanal en la Av. 6 de marzo.



como se verá más adelante, la cantidad no está

relacionada directamente con la duración del

congestionamiento vehicular.

Por otro lado la Gráfica 5 muestra, en orden des-

cendente, el tiempo promedio de congestión

observada por hora del día, que coincide con el

reporte municipal de los jueves con casi 29 mi-

nutos para recorrer 250 metros en puntos de

parada.

Y la Gráfica 6 complementa esta información

mostrando la duración del congestionamiento

por carril de la avenida, habida cuenta que el

carril 1 corresponde próximo a la jardinera y el 4

a la acera peatonal.

En síntesis el día con más saturación de tráfico es

el jueves, seguido del miércoles, el viernes, el

martes, sábado, lunes y finalmente domingo.

Esta distribución tal vez se deba a la presencia

de actividad comercial de alta densidad el día

jueves (Gráfica 7), aunque puesto que en domin-

go se realiza la misma actividad, es posible que

otro factor sea más influyente.

Al observar la correlación lineal la entre la dura-

ción promedio del congestionamiento y la canti-

dad promedio de vehículos (Gráfica 8), encon-

tramos un r2 de 0.3, muy por debajo de lo espe-

rado para vincular ambas variables, lo que su-

giere que la cantidad de vehículos NO es factor

predominante en la duración del congestiona-

miento.

Tal vez otros factores como la educación, la co-

modidad del pasajero, el excesivo comercio in-

formal que acapara aceras y calzadas (entre las

calles 1 y 3 hay más de 80 comerciantes en un

solo lado de acera), los elementos culturales, el

comportamiento de los conductores, las normas

de circulación, el diseño de las vías o la dejadez

de la autoridad para hacer cumplir las normas

Gráfica 8. Distribución radial de la duración de congestionamiento vehicular (minutos) en la Av. 6 de

marzo de El Alto, por día de semana, hora del día y carril de circulación.



de asentamiento urbano (comercio) y vialidad,

sean más influyentes que la cantidad de vehícu-

los o el horario. Se recomienda investigar cada

uno de estos factores sistemáticamente.

REFERENCIAS

Albalate, D. & Bel, G.. 2008. Shaping urban traf-

fic patterns through congestion charg-

ing: What factors drive success or fail-

ure?. Research Institute of Applied Econom-

ics, 1: 27p.

TRB Special Report 254. 1998. Managing Speed:

Review of Current Practice for Setting

and Enforcing Speed Limits. Transporta-

tion Research Board, USA.



REPORTE DE CASO

IDENTIFICACION DE RESTOS HUMANOS SEMI-CALCINADOS

MEDIANTE ADN NUCLEAR Y MITOCONDRIAL

K. Salazar Ch., E. Torres T., G. Poquechoque B., Pol. L. Macuchapi & R. Luna B.

Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, La Paz, Bolivia.

RESUMEN

Siete familias involucradas en un accidente vehicular con incendio de combustibles fueron convocadas

para identificar los restos del incidente. Se emplearon marcadores STR somáticos, Y-STRs y secuencias de

ADN mitocondrial para la caracterización genética de siete cuerpos semi-calcinados y fragmentos tisula-

res varios encontrados en el lugar y depositados en la morgue, para contrastarlos con siete familias de

parentesco alegado en primer grado (padre, madre, hijo o hermano). Los resultados combinados mostra-

ron que seis de los siete cuerpos pertenecían a las familias alegadas. La familia restante fue identificada

con algunos de los restos analizados pero no con el cuerpo alegado. El trabajo pericial demuestra la nece-

sidad de combinar sistemas moleculares en casos complejos como este, además de probar la eficacia de

las técnicas aplicadas para recuperar ADN viable en tejido semi-calcinado.

PALABRAS CLAVE: Restos semi-calcinados, parentesco genético, STR, Y-STR, ADNm.

ABSTRACT

Seven families involved in a vehicular accident with fired fuels were convened to identify the recovered

remains of the incident. Somatic STR and Y-STR matkers, and mitochondrial DNA sequences were used

for the genetic characterization of the remains deposited at the morgue, to contrast with the seven fami-

lies with first grade alleged kinship (parent, child or sibling). The combined results showed that six of the

seven bodies belonged to the alleged families. The non-belonging family was positive identified with

other non recognized remains. The work demonstrates the usefulnes of combine molecular systems in

complex cases such as this, in addition to effectiveness of the techniques used to recover DNA from semi-

charred tissues.

KEY WORDS: Semi-charred remains, genetic kinship, STR, Y-STR, mtDNA.


INTRODUCCION

En la actualidad se han desarrollado varias técni-

cas forenses que se aplican a la identificación de

restos humanos y su aplicación depende de las

circunstancias y condiciones de los restos a ser

examinados. Rutinariamente se emplean métodos

basados en la observación y comparación de ca-

racterísticas distintivas como por ejemplo, cicatri-

ces específicas, tatuajes, comparación de las hue-

llas digitales o dentales con patrones, sin embar-

go, la mayoría de ellas depende en gran medida

del estado de preservación estructural del resto,

así como de la disponibilidad de archivos o regis-

tros para su comparación (Alonso et al., 2001).

Así, escenas de incendios fatales proporcionan

alguno de los retos más difíciles para los investi-

gadores, pues las evaluaciones de causa de muer-

te son significativamente más difíciles si la escena

y la víctima son sometidos al fuego, destruyendo

características que permitan identificar a las víc-

timas a través de ciertos rasgos faciales o huellas

dactilares o bien destruir pruebas relacionadas

con la circunstancias de la muerte, considerando

que las modificaciones en la escena hacen que sea

difícil distinguir el cuerpo y escombros circun-

dantes. El consumo de los tejidos blandos por el

fuego puede obstaculizar significativamente el

análisis de otros especialistas (Symes et al., 2012).

Frente a estas limitaciones, el estudio de polimor-

fismos del ácido desoxirribonucleico (ADN) ha

sido ampliamente empleado en la identificación

de personas en casos de investigación forense, tal

como lo reportaron por primera vez Jeffreys et al.,

en 1985. El desarrollo de esta tecnología ha permi-

tido identificar cadáveres y restos humanos des-

pués de las guerras, disturbios sociopolíticos y

desastres masivos (Corach et al., 1997; Lorente et

al., 2001; Muñoz, 1999; Olaisen et al., 1997; Primo-

rac et al., 2000) a través del empleo de la reacción

en cadena de la polimerasa (PCR) para la amplifi-

cación de secuencias repetitivas cortas (STRs) del

ADN nuclear o el análisis de fragmentos de la

región hipervariable del ADN mitocondrial que

proporcionan información valiosa para la identifi-

cación de personas.

Sin embargo, como toda prueba también se en-

cuentra limitada por factores y circunstancias in-

terrelacionadas que pueden desafiar la identifica-

ción final de ADN, tales como, el número de víc-

timas, el mecanismo de destrucción y el grado de

fragmentación de los restos, la tasa de degrada-

ción del ADN, la accesibilidad de las muestras

colectadas y la disponibilidad de muestras de

referencia (Alonso et al., 2005). Schwark et al.

(2010), en una investigación realizada empleando

huesos de diferentes partes del cuerpo expuestos

a diferentes temperaturas demostraron que es

posible extraer ADN de huesos bien preservados

o parcialmente calcinados, logrando amplificar

entre 10 a 15 STRs. En los huesos con quemaduras

de color negro el ADN mostró una alta degrada-

ción y en algunos casos el análisis del ADN nu-

clear no fue posible, guiando al análisis del ADN

mitocondrial como una opción. Los huesos azul

grisáceos esporádicamente produjeron perfiles

parciales o esporádicos y en huesos quemados

azulados grisáceos blanquecinos raramente se

obtienen resultados confiables, concluyendo que

la identificación genética de restos humanos

quemados es posible si la quemadura no alcanzó

tejido blando o medular. Si el hueso presenta ca-

racterísticas de azul grisáceo blanquecino, es muy

probable que el ADN se encuentre degradado y la

identificación genética no sea posible.

ESTUDIO DE CASO

Aunque los accidentes masivos son de baja fre-

cuencia en nuestro medio, el acontecido el 21 de

Junio del 2013 en la localidad de Huancollo, carre-



tera La Paz - Desaguadero, fue notable, pues el

choque de un vehículo cisterna contra varias mo-

vilidades públicas y particulares, desató un voraz

incendio que produjo la muerte de al menos 10

personas.

Frente a este tipo de hechos, donde la identifica-

ción de personas es una de las tareas más arduas,

puesto que se carecen de huellas dactilares o ras-

gos particulares que identifiquen a la persona

como consecuencia de las quemaduras, llegando

en muchos casos solamente a contar con restos

óseos. Asimismo, debe considerarse que los efec-

tos que pueda causar el calor sobre los restos es-

queléticos dependen de la temperatura del calor

aplicado, de la duración, del suministro de oxí-

geno y del grado de carne o de otro material de

protección que se encuentre en contacto con los

restos óseos (Hurlbut, 2000; Duffy et al., 1991).

Estas características de los restos óseos y cuerpos

expuestos a altas temperaturas marcan un desafío

para la obtención de material genético analizable.

Indudablemente este hecho marcó un desafío pa-

ra la institución policial en la individualización e

identificación de personas fallecidas en incendios.

A continuación, se describe el trabajo técnico-

científico que permitió responder ante esta de-

manda de la sociedad.


Localización Geográfica

El voraz incendio del carro cisterna y otras movi-

lidades particulares se suscitó en la localidad de

Huancollo, carretera La Paz – Desaguadero, de

donde se remitieron a la morgue de la ciudad de

La Paz los cuerpos quemados para su autopsia y

posterior identificación.

Muestras analizadas

Se remitieron al laboratorio fragmentos óseos

quemados correspondientes al fémur, dientes y

vertebras, así como porciones quemadas de tejido

muscular e hisopos con sangre del miocardio y

arterias coronarias correspondiente a ocho cadá-

veres con quemaduras que impedían su identifi-

cación a través de huellas dactilares y otras carac-

terísticas morfológicas. Todas las muestras remi-

tidas fueron colectadas durante la autopsia de ley.

Por otra parte, se colectaron muestras sanguíneas

de 17 parientes, de 7 familias, como muestras de

referencia para la identificación de los cadáveres.

La tabla 1, muestra en detalle el tipo de resto re-

mitido para cada cadáver y la hipótesis planteada

para el análisis genético, así también, la figura 1

muestra las características de los restos óseos y

tejidos remitidos al laboratorio.

Extracción de ADN de las muestras de referencia (fa-

miliares)

Figura 1. Restos tisulares, óseos y

dentales recuperados y analizados.



Las muestras sanguíneas colectadas de los fami-

liares fueron sometidas a un procedimiento de

extracción automatiza de ADN en el instrumento

Maxwell®16 empleando el kit DNA IQTM Refe-

rence Sample (Promega).

Extracción de ADN de los restos de huesos, tejido e

hisopos con sangre (cadáveres no identificados)

Todas las superficies óseas fueron limpiadas de

los restos de tejidos blandos y carbonizados em-

pleando soluciones de hipoclorito de sodio e irra-

diación UV para su posterior pulverización con

nitrógeno líquido. El polvo de hueso fue sometido

a un procedimiento de descalcificación y lisis con

proteinasa K (20 mg/ml). Esta mezcla fue incuba-

da a 65ºC por 24 horas y el ADN fue aislado em-

pleando la extracción orgánica fe-

nol/cloroformo/alcohol isoamilico (24:24:1).

Los restos de tejido muscular e hisopos embebi-

dos con sangre fueron sometidos a un procedi-

miento de extracción química de ADN total me-

diante precipitación salina y deshidratación em-

pleando una modificación del kit Wizard Geno-

mic (Promega).

Todos los extractos de ADN fueron verificados

por electroforesis en agarosa y cuantificados por

espectrofotometría UV.

Amplificación y caracterización de microsatélites

(STRs) del ADN nuclear

Se realizó la caracterización de los marcadores

moleculares STRs del ADN nuclear empleando el

kit Identifiler Plus (Applied Byosistems) y de los

Y-STRs del cromosoma Y empleando el kit Y-Filer

(Applied Byosistems) a través de la amplificación

enzimática multiplex bajo estringencia controlada

por temperatura (PCR). Los productos resultan-

tes de este procedimiento fueron caracterizados

según su peso molecular mediante electroforesis

capilar y detección de fluoróforos por láser, em-

pleando el Analizador Genético ABI 3130 y el

software GeneMapper versión 3.2.

Amplificación de la región hipervariable HVI y HVII

del ADN mitocondrial

Se realizó la amplificación de un fragmento de

440pb (HVI) y 400pb (HVII) de la región hiperva-

riable del ADN mitocondrial, utilizando los ceba-

dores L15997 y H16391 para HVI (Costa et al.,

2008) y para la región HVII L48 y H 408 (Costa et

al., 2008). El producto de PCR se evaluó en elec-

troforesis en gel de agarosa al 1,8% a 100 voltios

durante 15 minutos.

El producto obtenido se purificó con solucio-

nes alcohólicas (etanol absoluto e isopropanol),

para luego realizar la electroforesis capilar en el

Tabla 1. Codificación y descripción de los restos analizados.

Código RESTOS REMITIDOS HIPÓTESIS PLANTEADA

Cadáver A E1 Hisopos con sangre de aorta baja

Los perfiles genéticos caracteriza-

dos de los restos analizados, guar-

dan correlación con alguno de los

perfiles genéticos de referencia de

los familiares de las víctimas.

E2 Tejido de aorta

Cadáver B E3 Restos dentales primer molar

E4 Cóndilo de fémur derecho con tejido

Cadáver D E5 Hisopo con sangre arterial venosa

Cadáver E E6 Hisopo con sangre arterial, ventrículo con sangre venosa

Cadáver F E7 Dos hisopos con sangre venosa miocardio

Cadáver G E8 Cabeza de fémur

Cadáver H E9 Fragmento de hueso iliaco derecho (tejido cortical y esponjoso)

Cadáver I E10 Músculo de región axilar izquierda



Analizador Genético ABI 3130 con el kit Big

Dye Terminator Cycle Sequencing v. 3.1 (Ap-

plied Byosistems), de acuerdo a las instruccio-

nes del fabricante, evaluando la calidad de la

secuencia obtenida con el software Sequencig

Analysis versión 5.2.

El alineamiento de secuencias se realizó en

relación con la secuencia revisada de Cam-

bridge (Anderson et al., 1981; Andrews et al.,

1999), que se encuentra disponible online en la

base de datos NIH Genetic Sequence Database

(GenBank http://www.ncbi.nlm.nih.gov).

RESULTADOS

Inspección de los restos

Cuando se queman los huesos, el calor del fuego

ocasiona una deshidratación del contenido de

agua del hueso destruyendo la estructura del co-

lágeno del mismo (Hanson, 2006). Los poros en

los huesos se agrandan y entre cada poro es existe

una pieza delgada y quebradiza de hueso que con

la menor presión puede causar que el hueso se

rompa.

El fuego puede en gran medida destruir o alterar

la forma de hueso (Jefferson, 2003; Murray & Ro-

se, 1993). Razón por la cual es necesario valorar el

estado de los mismos. En el presente trabajo se

consideró la clasificación de las quemaduras sobre

los restos óseos propuesta por Thorsten et al.

(2010): quemados bien preservados, semiquema-

dos, quemados negros, quemados azul grisáceos

y quemados azul grisáceos blanquecinos, la colo-

ración del hueso expuesto a temperaturas varía de

acuerdo a la temperatura y tiempo de exposición,

disponibilidad de oxígeno y contacto con otros

materiales del entorno (Tsuchimochi et al., 2002;

Walker & Miller, 2005). En este sentido, se obser-

vó que los restos óseos analizados presentaban

deformaciones y contracciones propias de la ex-

posición al fuego (Tabla 2).

De todas las muestras inspeccionadas se descartó

el análisis de la pieza dental (E3) del cuerpo B por

observarse una completa carbonización de la

misma (Figura 1).

Fig. 2. Electroforesis en agarosa de los produc-

tos de la extracción y purificación de ADN. Ca-

rril 1 y 2 hisopo con sangre y tejido del cadáver

A (E1 y E2); carril 3 fémur del cadáver B (E4);

carril 4 hisopo con sangre del cadáver D (E5);

carril 5 hisopo con sangre del cadáver E (E6);

carril 6 hisopo con sangre del cadáver F (E7);

carril 7 tejido muscular del cadáver I (E10); ca-

rril 8 cabeza de fémur de cadáver G (E8) y carril

9 hueso iliaco de cadáver H (E9).

Obtención de ADN

Se evaluó la presencia de ADN total en las mues-

tras remitidas al laboratorio, estimando en ng/ml la

cantidad recuperada entre 114 a 250 para los hiso-

pos embebidos con sangre (carril 1, 4, 5 y 6) y entre

200 a 550 para las muestras de huesos y tejidos

1 2 3 4 5 6 7 8

9

Tabla 2. Clasificación de los restos óseos según

Thorsten S. et al., 2010.

CÓD TIPO CLASE

Cadáver

B

E3 Restos dentales

primer molar

Quemado azul

grisáceo

E4

Cóndilo de fé-

mur derecho con

tejido

Quemado negro

Cadáver

G E8 Cabeza de fémur Bien preservado

Cadáver

H E9

Fragmento de

hueso iliaco

derecho (tejido

cortical y espon-

joso)

Bien preservado



(carril 2, 3, 7, 8 y 9), Figura 2. Por otro parte, la can-

tidad estimada de ADN total extraído de las mues-

tras de referencia se encuentra entre 250 a 360

ng/ml.

Obteniéndose en todas las muestras ADN total

para la amplificación de STRs y la secuenciación

de ADNmt, conforme a lo reportado para vícti-

mas que exhiben extrema carbonización por in-

cendios (Cattaneo, 1999; Brown & Donoghue.,

1995).

La pieza dental recuperada del cadáver B (E3) se

excluyó, ya que se encontraba completamente

carbonizada sin contar con pulpa dental para la

extracción (Figura 3), pues Tsuchimochi et al.

(2002) reportó que el logro de extracción y ampli-

ficación exitosa de ADN de huesos expuestos a

temperaturas superiores a 300ºC, se debe a la pre-

sencia de pulpa dental, siendo requisito para pro-

seguir con el análisis de ADN.

Fig. 3. Pieza dental carbonizada (E3) del cuerpo B.

Asimismo, Alves da Silva et al. (2012) verificó que

no es posible recuperar ADN genómico contenido

en la parte de la raíz de los dientes para la identi-

ficación humana cuando se someten a diferentes

condiciones de tiempo de calor y de exposición.

Amplificación y caracterización de microsatélites

(STRs) de ADN nuclear

Se han caracterizado diecisiete perfiles completos

de marcadores moleculares tipo STRs para las

muestras de referencia analizadas, identificando a

siete familias. La Tabla 3 muestra el perfil de STRs

de referencia, caracterizados para cada familia.

En las evidencias remitidas al laboratorio (E1 a

E10) se han caracterizado perfiles completos en

todos los casos, a excepción de E3 (piezas denta-

les calcinadas) en el cual no fue posible realizar la

extracción de material genético por su extrema

carbonización (Figura 3).

En E1 y E2 se ha encontrado el mismo perfil de un

individuo de sexo masculino, así también, en E5 y

E9 se ha encontrado el perfil de dos individuos

diferentes de sexo masculino, respectivamente. En

E4, E6, E8 y E10 se ha caracterizado el perfil gené-

tico de cuatro individuos diferentes de sexo fe-

menino.

La Tabla 4, resume el perfil de ADN obtenido de

los restos en estudio, empleando el sistema de

STRs, detallando la estructura de alelos en cada

una de las evidencias.

En los cadáveres caracterizados con el gen Ame-

logenina como individuos de sexo masculino

(XY), cadáver A (E1), D (E5) y H (E9), se logró

caracterizar 16 marcadores adicionales para el

cromosoma Y con el objetivo de realizar el análi-

sis patrilineal con las muestras de referencia de

parientes masculinos de familias que buscaban a

un individuo de sexo masculino, familias 1, 2 y 3.

En la Tabla 5, se observa que el perfil de cromo-

soma Y del cadáver A y el pariente masculino

(padre) de la familia 1 presentan el mismo haplo-

tipo, del mismo modo sucede entre el cadáver D y

la familia 3 y entre el cadáver H y la familia 2,

estableciéndose de esta forma una relación patri-

lineal entre ellos.



Amplificación de la región hipervariable HVI y HVII

del ADN mitocondrial

Por otra parte, se ha caracterizado según secuen-

ciación un fragmento de 700 pb del genoma mito-

condrial humano aislado de las muestras y evi-

dencias analizadas y se han identificado distintos

sitios polimórficos según la secuencia de referen-

cia Cambrige (1982), encontrándose correlación

entre el cadáver B y la familia 5, el cadáver E y la

familia 4, el cadáver G y la familia 2, el cadáver H

y la familia 2, el cadáver I y la familia 6. No se

observó correlación del cadáver F con ninguna de

las familias analizadas, asimismo, la familia 7 no

presentó correlación con ninguno de los cadáve-

res estudiados, tal como se muestra en la Tabla 6.

En todos los casos, se obtuvo perfiles completos

para los STRs autosómico y del cromosoma Y, así

como de las secuencias de la región HVI y HVII

del ADN mitocondrial, identificando con una

probabilidad mayor al 99,99% los cadáveres con

Tabla 3. Perfil de STRs de las muestras de referencia.

FAMILIA 1 FAMILIA 2 FAMILIA 3 FAMILIA 4

STRs PADRE MADRE HERMANO HIJA ESPOSO MADRE PADRE HIJO HERMANA

D8S1179 11 12 15 15 13 15 14 15 14 15 13 14 12 14 12 13 12 15

D21S11 30,2 31,2 28 31,2 30 31 30 33,2 31 33,2 31 32,2 30 32,2 31,2 32,2 31,2 32,2

D7S820 10 12 9 11 11 12 9 11 11 11 11 12 10 11 10 13 11 12

CSF1P0 12 12 11 11 12 12 10 12 10 11 10 11 10 10 11 12 11 12

D3S1358 15 16 15 15 16 16 15 17 15 17 15 16 15 16 15 16 15 17

THO1 7 7 7 7 6 9,3 6 6 6 7 7 7 9 9,3 7 7 6 7

D13S317 9 10 9 11 9 12 9 12 9 12 10 14 9 9 11 12 12 13

D16S539 10 12 10 12 9 13 11 13 9 11 10 11 9 9 10 12 9 10

D2S1338 22 23 17 23 20 23 19 23 17 19 17 19 19 20 17 23 19 23

D19S433 13,2 15 13,2 14 13 13 13,2 14 13 14 14 15 13 14 13,2 14 13,2 14

vWA 15 17 15 16 16 16 16 17 16 16 15 16 16 17 16 18 7 19

TPOX 8 10 8 8 8 11 8 8 8 8 8 12 8 8 11 12 8 11

D18S51 12 15 16 18 12 13 12 17 12 14 14 16 14 14 12 14 18 18

D5S818 7 11 11 11 11 11 11 12 7 11 7 11 11 11 9 11 11 11

FGA 19 25 23 26 19 24 23 24 24 25 19 26 22 26 19 24 24 25

AmelXY X Y X X X Y X X X Y X X X Y X Y X X

FAMILIA 5 FAMILIA 6 FAMILIA 7

STRS HIJA HIJO HIJO HERMANO HIJO HIJO HIJA HERMANO

D8S1179 14 14 14 16 14 16 12 13 12 13 14 14 14 14 14 14

D21S11 30 31 31,2 32,2 30 32,2 30 32,2 30 30 31,2 32,2 30 32,2 29 29

D7S820 11 12 10 11 11 11 12 12 12 12 10 11 10 11 10 10

CSF1P0 10 12 10 12 10 11 11 13 10 10 12 12 11 12 11 12

D3S1358 15 17 15 17 15 17 15 15 15 16 17 17 15 17 15 17

THO1 6 7 7 7 6 7 7 7 6 7 9,3 9,3 7 9,3 7 9,3

D13S317 9 10 9 10 9 10 11 14 9 12 11 12 11 12 11 12

D16S539 10 10 9 10 10 10 9 12 9 10 9 9 9 9 9 9

D2S1338 20 24 20 24 19 20 22 23 19 23 19 22 22 23 19 20

D19S433 12,2 14 12,2 13 14 15 13,2 15 15 17 14 15 13 13,2 14 14

vWA 16 19 16 19 16 17 16 17 17 17 17 18 7 18 16 18

TPOX 8 8 8 8 8 8 8 8 8 11 8 12 8 11 11 12

D18S51 12 14 12 16 12 14 14 15 14 17 12 14 12 13 12 15

D5S818 11 11 11 11 11 11 9 11 9 11 11 11 7 11 7 11

FGA 22 25 26 26 22 26 22 22 22 25 21 26 21 22 21 27

AmelXY X X X Y X Y X Y X Y X Y X X X Y



las familias que reportaron a una persona desapa-

recida (Tabla 7).

CONCLUSIONES

Este estudio muestra que la identificación a través

del ADN es confiable y reproducible cuando se

analizan huesos quemados bien preservados o

parcialmente calcinados, siendo necesaria una

pre-valoración de los mismos en relación a la ex-

posición del fuego, demostrando que los huesos

son más resistentes al calor por su estructura y la

protección del tejido que se encuentra a su alre-

dedor.

Los resultados muestran que es posible realizar la

tipificación de STR y ADN mitocondrial a partir

de restos humanos expuestos a incendios para su

comparación con muestras de referencia de pa-

rientes. No obstante, deben considerarse que

cuando un cuerpo es descubierto en un incendio,

los objetos extraños tales como plástico derretido

o textil se funden con el hueso interfiriendo en el

análisis e imposibilitando la identificación, este

fenómeno no se observó en los restos analizados.

RECOMENDACIONES

La identificación de personas a través del material

genético presente en cualquier muestra biológica

permite aplicar esta tecnología en la identificación

de personas desaparecidas donde generalmente

solo se cuenta con restos como huesos, dientes,

pelos, etc. En este sentido, se recomienda que las

autoridades, instituciones y sociedad en general

aprovechen el uso de esta tecnología en la identi-

ficación de personas desaparecidas o víctimas de

desastres.

Tabla 4. Perfil de STRs de los restos analizados.

STRs

CUERPO A CUERPO

B

CUERPO

D

CUERPO

E

CUERPO

F

CUERPO

G

CUERPO

H

CUERPO

I

E1 E2 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10

Hisopo

sangre

aorta

Tejido de

aorta

Cóndilo

de

fémur

Hisopo

con sangre

arterial

Hisopo

sangre

arterial

Hisopo

sangre

miocardio

Cabeza

de fémur

Hueso

iliaco

Músculo

axilar

D8S1179 11 15 11 15 14 16 13 14 12 15 13 15 13 15 15 15 12 13

D21S11 28 31,2 28 31,2 31 32,2 31 32,2 31,2 32,2 30 32,2 29 30 30 33,2 30 32,2

D7S820 9 12 9 12 11 12 10 12 10 11 10 11 9 12 11 12 12 12

CSF1P0 11 12 11 12 10 12 10 10 12 12 11 11 11 12 11 11 10 12

D3S1358 15 15 15 15 15 15 15 16 16 16 16 16 16 17 15 16 16 17

THO1 7 7 7 7 7 7 7 9,3 7 7 6 7 6 7 7 7 6 7

D13S317 9 11 9 11 9 12 9 10 9 12 9 14 9 12 12 12 12 14

D16S539 12 12 12 12 9 10 9 11 9 12 9 13 12 13 9 13 9 9

D2S1338 22 23 22 23 20 22 17 20 19 23 19 23 17 23 17 23 19 22

D19S433 13,2 14 13,2 14 12,2 15 14 15 13,2 13,2 13,2 14 13 14 13 13,2 13,2 17

vWA 16 17 16 17 17 19 16 16 16 17 16 17 16 17 16 17 17 17

TPOX 8 10 8 10 8 11 8 8 8 12 12 12 8 8 8 8 8 8

D18S51 15 18 15 18 14 16 14 14 14 14 12 17 17 17 14 17 14 15

D5S818 7 11 7 11 11 11 11 11 9 11 11 11 12 12 7 12 9 11

FGA 19 26 19 26 25 26 22 26 24 26 20 27 20 23 20 24 22 22

AmelXY X Y X Y X X X Y X X X X X X X Y X X



Tabla 7. Genealogía y probabilidad de correlación combinada establecida entre los familiares y

los cadáveres estudiados. ( Familiar de referencia, Víctima, X Familiar no disponible).

GENEALOGÍA

SISTEMAS DE

IDENTIFICACIÓN CORRESPONDENCIA

COMBINADA STRs Y-STRs ADNm

Familia 1 Vs. cadáver A

+ + - 99,999999%

Familia 2 Vs. cadáver G

Familia 2 Vs. cadáver H

+ + + 99,999999%

Familia 3 Vs. cadáver D

+ + - 99,999999%

Familia 4 Vs. cadáver E

+ - + 99,999999%

Familia 5 Vs. cadáver B

+ - + 99,999999%



Familia 6 Vs. cadáver I

+ - + 99,999999%

Familia 7 Vs. cadáver no

identificado

+ - + 99,999999%

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NOTA TÉCNICA - INFORMÁTICA

DISEÑO Y DESARROLLO DE UN SISTEMA TECNOLÓGICO PARA LA

CAPTURA DIGITAL DE IMPRESIONES DACTILARES

Patzi, V., Carlos Ángel & Alanoca, V., Jhonny Martín

Academia Nacional de Policías, Universidad Policial “Mcal. Antonio José de Sucre”. La Paz, Bolivia.

[email protected]

INTRODUCCIÓN

El desarrollo tecnológico puede definirse como la

Intensificación del empleo de la tecnología para

elevar el nivel de vida de una región o para pro-

porcionar medios concretos que mejoren el ren-

dimiento de una función o programa de produc-

ción.

En el año 1686 Marcelo Malpighi elabora la “capa

de Malpighi”, misma que señala las diferencias

entre las crestas, espirales y lazos en las huellas

dactilares. Sir Richard Edward Henry en el año

1896 empleó las huellas dactilares como método

de identificación de individuos. Sir Francis Galton

definió algunos de los puntos o características

desde las cuales las huellas dactilares podían ser

identificadas. Estos "puntos Galton" son la base

para la ciencia de identificación por huella dacti-

lar. Es de esta forma que, la identificación por

huella digital comienza su transición a la automa-

tización a finales de los años 60 junto con la apari-

ción de las tecnologías de computación.

Una huella dactilar es la impresión visible o mol-

deada que produce el contacto de las crestas papi-

lares de un dedo (generalmente se usan el dedo

pulgar o el dedo índice) sobre una superficie. Es

una característica individual que se utiliza como

medio de identificación de las personas.

La huella dactilar es considerada en la actualidad

como una señal auténtica e intransferible de la

identidad que permite no sólo la identificación de

las personas, sino también le validan para el uso

de equipos informáticos o para acceder a espacios

físicos en los cuales se utilizan protocolos de alta

seguridad. (Identificaciones, 2014).

En 1969, el Buró Federal de Investigaciones (FBI)

comenzó con el estudio del proceso de automati-

zación de la clasificación, búsqueda y concordan-

cia de las huellas dactilares y, conforme a la nece-

sidad de un sistema de identificación integrado en

la comunidad de la justicia criminal de los Esta-

dos Unidos se volvió rápidamente evidente, la

próxima fase en la automatización de huellas dac-

tilares, teniendo hoy en el campo tecnológico el

Sistema de Identificación Automatizada de Im-

presiones dactilares (Automated Fingerprint Iden-

tification System (AFIS)). (Wayman et al.,2005).

Si bien, actualmente se cuenta con tecnología de

este tipo, su costo resulta bastante elevado para

poder ser adquirido por todas las instituciones

que sirven al país, tal como es la Policía boliviana,

es de esta forma que se propone un sistema de

captura de impresiones dactilares tecnológico,

elaborado con materiales de bajo costo con la fina-

lidad de mejorar el desarrollo tecnológico y coad-

yuvar al inicio de la independencia tecnológica

del estado Plurinacional de Bolivia, pues se pro-

pone la fabricación de un equipo y sistema de

captura de impresiones dactilares. (Patzi, C. &

Alanoca, J., 2014).

http://es.wikipedia.org/wiki/Dedo_pulgar

http://es.wikipedia.org/wiki/Dedo_pulgar

http://es.wikipedia.org/wiki/Dedo_%C3%ADndice




Ensamblado del equipo

Se seleccionó una cámara web de resolución alta,

un led de alto brillo color azul, cuya finalidad es

brindar luminosidad, resistencia de 180 ohmios

para asegurar que el LED presente una intensidad

constante, sin perderla con el tiempo.

Se crea una cubierta con láminas de plástico para

proteger la cámara y el circuito electrónico, dicha

cubierta debe ser forrada con hojas plásticas ray-

ban color negro y, en la parte superior del equipo

se debe ubicar un vidrio transparente, cuyo obje-

tivo es proteger la cámara web, para ubicar el lu-

gar de la captura de la huella dactilar, este vidrio

debe ser forrado con una lámina anti ralladuras y

anti grasas para conservarla. (Figura 1, 2 y 3).

Sistema Software

Para almacenar y procesar cada imagen capturada

el equipo ensamblado se utilizó macros del pro-

grama informático PhotshopCS, que permiten

editar y modificar las imágenes con sólo apretar

un botón.

Para ello, se debe combinar una segmentación

basada en el color con una frecuencia de las cres-

tas papilares de la yema del dedo como un mapa

de estimación. La idea básica consiste en la selec-

ción de los píxeles de la imagen que pertenecen a

un modelo de color disponible en la literatura

asociada a los tipos de piel. Debido a las diferen-

cias en la iluminación de fondo de la yema del

dedo, las zonas segmentadas deben ser regulari-

zadas por la morfológica básica de la segmenta-

ción, el modelo se puede hacer más robusto com-

binando la información proveniente de la estima-

ción de la frecuencia de cresta papilar de la yema

del dedo. En este caso, el retorno de la inversión

contendrá sólo las regiones de imagen donde hay

energía en la frecuencia espacial asociada a las

crestas de la yema del dedo.

El registro son las operaciones necesarias para

escalar y rotar la imagen de la punta del dedo de

manera que la imagen de entrada se transforma

en una imagen estándar que tiene las siguientes

características:

1) El centro de la yema del dedo debe ser colo-

cada en el centro de la pantalla de vidrio.

Figura 1. Diagrama de flujo de la fabrica-

ción y ensamblado del equipo del sistema

de captura de huellas dactilares.

Figura 2. Ensamblado de la cámara oscura

para la cámara WEB.



Figura 3. Equipo y captura de imagen de

impresiones dactilares.

2) La orientación de la punta del dedo debe ser

horizontal, de tal forma que se obtenga la má-

xima resolución rectangular.

3) La punta del dedo debe emplearse para cal-

cular el área y tamaño real en píxeles.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

Se obtiene un equipo de bajo costo y eficiente para

la captura de impresiones dactilares.

Con ayuda PhotoshopCS se obtuvo una imagen

más clara de las crestas papilares (Figura 4). Estos

resultados en combinación de los datos generales

de una persona, son la base para la elaboración de

equipos y sistemas que coadyuvan a la identifica-

ción y almacenamiento de datos de un individuo.

Desafortunadamente, el uso de cámaras web y

cámaras de bajo costo como un sensor biométrico

produce variaciones significativas de escala, posi-

ción y rotación de la punta de los dedos entre las

diferentes adquisiciones en el tiempo, este paso

corresponde a la alineación horizontal de la yema

del dedo de la imagen resultante, siendo a su vez

el último pasó de la fase de registro.

También debemos mencionar que una institución

como la nuestra tiene una obligación jurídica que

es expresada en las diferentes leyes como ser: la

Constitución Política del Estado, La Ley Orgánica

de la Policía Nacional, Ley Orgánica del Ministe-

rio Público, en la cual da a conocer las funciones

que la institución debe cumplir, por ejemplo en

casos de delitos, somos responsables de la inves-

tigación y del esclarecimiento del hecho, siendo

necesario la actualización y adquisición de equi-

pos tecnológicos con la finalidad de

IDENTIFICAR a los presuntos autores u otro tipo

de personas relacionadas con el caso.

Pero debido a los altos precios que tienen estos

aparatos tecnológicos, este equipamiento no pue-

de llevarse a cabo, pues sistemas como el AFIS

cuestan alrededor de los 9.8 millones de dólares

(Rocha, 2014), cuando el equipo ensamblado tiene

un costo inferior a los 200 bolivianos.

CONCLUSIONES

Se logró diseñar y fabricar un equipo de captura

de impresiones dactilares, así como se creó ma-

cros en el software PhotoshoCS para la edición y

almacenamiento de las imágenes capturadas.

El presente trabajo representa el afán y el deseo de

los cadetes formados en la Policía boliviana para

Figura 4. Imagen capturada por el disposi-

tivo artesanal y procesada con

PhotoshopCS.



coadyuvar y dirigirnos a un camino de la inde-

pendencia tecnológica.

AGRADECIMIENTOS

Se agradece al personal del IITCUP por abrir las

puertas a los cadetes de la ANAPOL en su afán y

sed de conocimiento. Un agradecimiento profun-

do al Lic. Ruddy Luna Barrón por el apoyo y la

orientación brindada.

REFERENCIAS

Patzi, C. & Alanoca, J., 2014. Diseño y desarrollo

de un sistema tecnológico para la captura

digital de impresiones dactilares a ser uti-

lizada en el centro de investigación gené-

tica del IITCUP de la ciudad de La Paz.

Trabajo Dirigido. Academia Nacional de la

Policía.

Rocha,B.. 2014. Proyecto AFIS. (A. M. JHONNY,

Entrevistador)

Wayman, J., Jain, A., Maltoni, D., Maio, D.. 2005.

Biometric systems technology. Springer-

Verlag London Limited. London, springer.

356p.



SINOPSIS DE TESIS

CUADERNO DE CAMPO PARA REGISTRO

DEL LUGAR DEL HECHO

Sbtte. MSc. Andree Bernal C.

División Criminalística de Campo, Centro de Investigación Criminalística, IITCUP, UNIPOL, La Paz, Bolivia

RESUMEN

Se presenta información que podrá ser aplicada para la confección de “cuadernos de campo” durante el

registro del lugar del hecho, especialmente para los investigadores criminalistas del Instituto de Investi-

gaciones Técnico Científicas de la Universidad Policial Mcal. Antonio José de Sucre (IITCUP), de la Fuer-

za Especial de Lucha Contra el Crimen (FELCC), la Fuerza Especial de Lucha Contra la Violencia

(FELCV) u otras unidades policiales que realicen labor criminalista de campo según el actual ordena-

miento jurídico boliviano, a fin de reducir la perdida de datos e incrementar la calidad de la información

generada durante el procesamiento del sitio donde ocurrió un hecho delictivo.

Palabras clave: Criminalística de campo, registro del lugar del hecho, cuaderno de campo.

ABSTRACT

This overview presents information that can be applied for making the “field notebook” during the crime

scene registration, especially for criminal investigators of the Instituto de Investigaciones Técnico

Científicas de la Universidad Policial Mcal. Antonio José de Sucre (IITCUP), of the Fuerza Especial de

Lucha Contra el Crimen (FELCC), the Fuerza Especial de Lucha Contra la Violencia (FELCV) or other

police units engaged in criminal fieldwork under current Bolivian law, to reduce data loss and increase

the quality of information generated during processing of the sire where a crime occurred.

Key words: Field forensics, crime scene registration, field notebook.



DESARROLLO

La criminalística como disciplina Científica auxi-

liar del derecho penal se encarga del descubri-

miento y verificación científica del delito y del

delincuente, se divide en dos grandes áreas: la

Criminalística de Campo y la Criminalística de

laboratorio.

Dentro del trabajo de campo que realiza la crimi-

nalística se encuentra el Registro del lugar del

hecho, estipulado en el artículo 174 del Código de

Procedimiento Penal (CPP) Boliviano y tiene por

objeto material la protección, búsqueda, fijación y

colección de los indicios que puedan encontrarse

en la escena del crimen y que presumiblemente

guarden relación con el hecho que se investiga

con la finalidad de: reconstruir el mecanismo del

hecho, identificar a autores y víctimas, aportar

con material probatorio para el esclarecimiento

del hecho delictivo. Siendo de vital importancia,

ya que al ser el primer paso de toda investigación

criminalística, marcara el éxito o fracaso de la

misma, motivo por el cual se expone los conteni-

dos mínimos que deben recabarse de la escena del

crimen.

INFORMACIÓN SOBRE EL HECHO/DELITO.

Naturaleza del hecho/delito: Donde se anotará el

tipo de hecho que se investiga (ej. muerte de per-

sona) y si al momento del recibimiento de la noti-

tia criminis logramos encuadrar en algún tipo

penal de acuerdo al Código Penal (ej. suicidio,

homicidio, asesinato).

Lugar del hecho: Se anotará la ubicación del lugar

donde se cometió el hecho. Ciudad, zona, aveni-

da, calle, pasaje, edificio, número, piso.

Fecha del hecho: Se anotará la fecha en la que

sucedió el hecho. Día, mes, año.

Horas aprox.: Se anotará la hora aproximada en la

que suscito el hecho.

INFORMACIÓN DE FISCAL, INVESTIGADORES

Y PARTES EN LA INVESTIGACIÓN.

Denunciante/querellante: Se anotarán los nom-

bres de los denunciantes/querellantes y en su de-

fecto De oficio.

Denunciado/Imputado/Sindicado: Se anotarán

los nombres de los denuncia-

dos/imputados/sindicados o en su defecto “Con-

tra los autores”.

Fiscal: Se anotará el nombre del Fiscal de turno o

Fiscal asignado al caso según su asignación o

turno.

Investigador asignado al caso: Se anotará el

nombre del investigador a cargo del caso.

Investigador especial: Se anotará el nombre del

investigador a cargo de la investigación crimina-

lística.

Personal policial de acción directa: Se anotarán

en su existencia el grado, nombre y apellidos del

funcionario policial que realizo la primera inter-

vención y se hace el relevo del lugar del hecho,

unidad a la que pertenece, turno en el que se en-

cuentra o si se encuentra de descanso, número de

teléfono fijo o celular, fecha y hora de recibimien-

to de la noticia fehaciente o denuncia (hora de

comunicación), hora de llegada al lugar del hecho

y la forma de protección que se realizó del lugar

del hecho.

Personas presentes en la intervención: Se anota-

rán los nombres y apellidos, número de carnet de

identidad de las personas que presencien el regis-

tro del lugar del hecho y su calidad (Fiscal, Asig-

nado al caso, denunciante, sindicado, testigos,

curiosos), en el caso que no cuenten con cédula de



identidad se anotará el número de pasaporte,

DNI, libreta de servicio militar u otro documento

de identificación.

BREVE RESEÑA DE LA ACTUACIÓN

PREPARACIÓN, ORGANIZACIÓN Y REGISTRO.

Datos, fecha y hora de comunicación: Se anotará

la fecha y la hora en que se recibió la noticia del

hecho, tipo de comunicación (personal, llamado

telefónico, requerimiento fiscal); identificación del

comunicante, y los datos suministrados de situa-

ción exacta del lugar, descripción de lo visto, hora

de hallazgo, cantidad de víctimas y circunstancias

que califican el hecho. En caso de existencia de

requerimiento fiscal deberá anotarse el punto de

pericia. En casos especiales de riesgo N.R.B.Q.

(nuclear, radiológico, bacteriológico y químico)

tomar en cuenta sintomatología de víctimas, con-

diciones medioambientales del lugar del hecho.

Para valorar correctamente la actuación, los me-

dios empleados y necesidad de unidades especia-

lizadas.

Fecha y hora de llegada: Se anotará la fecha y

hora de llegada al lugar del hecho y finalización

del registro del lugar del hecho.

Personal encargado del registro del lugar del

hecho y sus funciones: Se anotarán el grado,

nombres, apellidos y las funciones asignadas al

personal que realizará el registro del lugar del

hecho (fotógrafo, planimetrista, personal de bús-

queda y colección, personal de registro y respon-

sable de la cadena de custodia, peritos especialis-

tas, etc.).

Material utilizado: Se anotará un listado adminis-

trativo del material que se utilizó para llevar a

cabo el registro del lugar del hecho.

Protección y preservación del lugar: Relevado el

lugar del hecho con el personal policial de acción

directa o haciéndose cargo del mismo, se deter-

minará ampliar o reducir el perímetro inicial. To-

mando en cuenta evitar posibles fuentes de riesgo

o peligro inminente que puedan destruir, conta-

minar, alterar o deteriorar los indicios en el lugar

del hecho (ej. Incendio, tránsito de vehículos o

personas, inundación, etc.)

Se anotará la forma de protección: Clausura (luga-

res cerrados) aislamiento (lugares abiertos, esta-

bleciendo un círculo de protección mínimo de

unos 25 a 50 metros desde el epicentro del lugar

del hecho), coordinación con personal policial

para resguardo (investigador asignado al caso y

unidades que concurren al lugar del hecho), utili-

zación de cintas perimétricas amarillas y rojas en

habilitación de perímetros internos y externos.

Establecimiento de pasillos de acceso al foco prin-

cipal.

Información preliminar: Se anotará la informa-

ción relativa al suceso desde el momento que se

tiene conocimiento del mismo, aportes de los tes-

tigos, víctimas e incluso autores y detenidos. Con

ello se pretende saber cómo han podido suceder

los hechos y de esta forma orientar la Inspección y

los medios humanos y técnicos a emplear.

Narrativa descriptiva: La narrativa es una des-

cripción general de la condición del lugar de los

hechos. Se debe presentar una descripción de lo

general a lo específico. Anotar los hallazgos que

llamen la atención (ventanas abiertas, desorden en

una cama, hendiduras en las puertas, manchas

rojizas en las paredes o piso, etc.) y aquellos que

probablemente tengan relación con el hecho que

se investiga.

INFORMACIÓN SOBRE EL LUGAR DEL HECHO

(al momento de la intervención).

Tipo de lugar: Abierto, cerrado, mixto.



Condiciones en las que se encontró: Preservado

o No preservado.

Condiciones de iluminación: Buena, regular,

mala.

Tipo de privacidad del lugar: Lugar privado (ca-

sa, departamento, habitación, etc.), público (ave-

nida/calle, pasaje/callejón, plaza/parque) o ex-

puesto al público (Bar/restaurante, local de ven-

tas, oficina, deposito).

PROCESAMIENTO DEL LUGAR DEL HECHO

Método de búsqueda aplicado: Se anotará cual

método de búsqueda de indicios será aplicado

dependiendo de la naturaleza del hecho, tipo del

lugar del hecho, extensión del lugar y cantidad de

personal; a fin de realizar la búsqueda metódica

en todo el lugar, incluyendo piso, paredes y obje-

tos que se encuentren en el lugar del hecho.

Indicios encontrados en el lugar del hecho: Se

realizará un listado de los indicios encontrados,

describiendo: la cantidad, naturaleza, estado, co-

lor, tamaño, particularidades, lugar de hallazgo y

en lo posible una interpretación de los mismos

(tomar en cuenta si se justifica el estado, la ubica-

ción y probable mecanismo de producción). Se

tomará en cuenta el uso de luces forenses y equi-

po especial para poder reconocer los indicios.

El encargado del registro y cadena de custodia

elaborará las actas de colección y cadena de cus-

todia de los indicios colectados en el lugar del

hecho, consignando en la parte inferior del mismo

las firmas, grado, nombres, apellidos y función de

los intervinientes en el lugar del hecho, así como

los nombres completos firmas y números de car-

net de los testigos presentes.

Listado fotográfico: Se anotarán las especificacio-

nes técnicas del equipo fotográfico utilizado

(Marca de cámara, modelo, digital o analógica,

tipos de objetivos, flash, memoria, rollo, trípode,

“close-ups”, filtros y accesorios varios), personal

encargado de la fotografía, tomando en cuenta

comenzar desde cero en la memoria de la cámara

la toma de fotografías y no borrar ninguna foto-

grafía tomada.

Se realizará un listado fotográfico que consigne:

número de toma, Vista, ángulo, descripción de la

toma, observaciones, utilización de accesorios,

testigos métricos, etc. Siendo la secuencia fotográ-

fica de lo general a lo específico.

Croquis planimétrico: Se anotarán los materiales

utilizados para levantar el croquis (dibujo a mano

alzada) planimétrico del lugar del hecho y la lista

del personal encargado de la planimetría.

Se anotará en un extremo del croquis el norte

magnético, utilizando para el dibujo como míni-

mo tres colores. Negro para: estructuras, paredes,

puertas, ventanas, objetos, etc. Rojo para: indicios

y símbolos. Azul para: medidas tomadas en cotas.

En la parte inferior del croquis se anotarán las

leyendas y símbolos utilizados.

LIBERACIÓN DEL LUGAR DEL HECHO

Disposición del lugar: Realizado un repaso críti-

co de todos los aspectos del registro y verificación

de la documentación así como de los indicios, se

anotará la hora, fecha y la función, grado nombres

y apellidos de la persona a quien se entrega el

lugar del hecho, finalizado su procesamiento para

su disposición final (Fiscal, investigador asignado

al caso o autoridad competente), tomando en

cuenta la posibilidad del precintado para futuras

pericias o trabajos técnicos que puedan o queden

pendientes realizarse en el lugar del hecho.

Fecha y hora de salida: Se anotará la fecha y hora

de llegada al lugar del hecho y finalización del

registro del lugar del hecho.



Entrega de los indicios/cadena de custodia: Se

anotará la fecha, hora y nombre de la persona

encargada de la Div. Custodia de indicios o evi-

dencias de la unidad criminalista, a quien se en-

tregan los indicios consignando las condiciones

de los indicios, tipo y condiciones de embalaje, así

como el número de registro de la entrega.

CONCLUSIONES

Se han consignado los elementos de información

útil que pueden recabarse del lugar de los hechos

incrementando la eficacia de la labor de los peri-

tos en criminalística de campo e investigadores de

escena del crimen de las unidades de la policía

Boliviana.

El presente cuaderno de campo se lo realizó en

base a la experiencia operativa en labores de cri-

minalística de campo de la Fuerza Especial de

Lucha Contra el Crimen y el Instituto de Investi-

gaciones Técnico Científicas de la Universidad

Policial fundamentado en los manuales de buenas

prácticas en la escena del crimen del Grupo Ibe-

roamericano de trabajo en la escena del crimen

(GITEC) parte de la Academia Iberoamericana de

Criminalística y Estudios Forenses (AICEF) del

cual el IITCUP de la Policía Boliviana forma parte,

así como de procedimientos de administración y

manejo del lugar de los hechos del Federal Bureau

of Investigation (FBI).

RECOMENDACIONES

El presente trabajo de investigación se pone en

conocimiento de las Unidades policiales que rea-

lizan labores criminalistas de campo en el lugar

de los hechos a nivel nacional, para que puedan

implementar cuadernos de campo y sea instru-

mento bibliográfico y formativo para personal

que trabaje en el lugar de los hechos o escena del

crimen.

REFERENCIAS

Academia Iberoamericana de Criminalística y

Estudios Forenses (AICEF). 2010. Manual

de buenas prácticas en la escena del cri-

men.

Bernal, A.. 2013. Aplicación de un informe de

registro del lugar del hecho para casos de

muerte de persona en la Fuerza Especial

de Lucha Contra el Crimen. Tesis de

maestría Universidad Policial Mcal. Anto-

nio José de Sucre, La Paz, Bolivia.

Federal Bureau of Investigation (FBI). 2012. Ad-

ministración y manejo del lugar de los

hechos. Recolección y preservación de la

evidencia.

Instituto Nacional de Ciencias Penales

(INACIPE). 2013. Protocolos de cadena de

custodia. Dos grandes etapas, preserva-

ción y procesamiento. Segunda edición.

México, D.F.



NOTA TÉCNICA - GENÉTICA

PROTOCOLO DE PURIFICACIÓN DE ADN DE HOJAS DE

Theobroma cacao L. PARA ESTUDIOS DE GENÉTICA

POBLACIONAL CON MICROSATÉLITES (STR)

Eva Chávez C.1, Daniela Arteaga V.2 & Marinés Giraldo C.

1 Unidad Académica Campesina Tiahuanaco (UAC-T), Universidad Católica “San Pablo”, La Paz, Bolivia.

2 Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, Policía Boliviana.

INTRODUCCIÓN

Las muestras obtenidas a partir de plantas están

entre las más complejas para lograr una adecuada

purificación de material genético de alta calidad,

el cual es necesario para los subsecuentes análisis

poblacionales o filogenéticos, como estudios de

microsatélites o de secuencias. Además, en la ma-

yoría de los casos, esto involucra el uso de nitró-

geno líquido en el tejido, para luego molerlo utili-

zando un mortero; nitrógeno líquido que es difícil

y riesgoso de manipular, incluso en laboratorio.

Por esta razón, a continuación se presenta un pro-

tocolo simple para la obtención de ADN a partir

de tejido foliar previamente desecado, en la con-

sideración de que el ADN debe ser purificado

previniendo su degradación y asegurando dife-

rentes usos.


Colecta de muestras

Se colectaron muestras de hojas frescas y sanas de

262 plantas adultas de T. cacao L. (cacao Nacional

Boliviano) a partir de 8 poblaciones de cacao cul-

tivadas y 12 comunidades de cacao silvestre loca-

lizadas en el Norte del Departamento de la Paz

(Bolivia): comunidades silvestres ubicadas en el

cauce del Río Beni, el cauce del Río Madidi y el

noroeste de La Paz, municipio de Guanay. Asi-

mismo, también se analizaron muestras previa-

mente desecadas y conservadas en sílica gel du-

rante un periodo de tres años proporcionadas por

Wildlife Conservation Society (WCS). Finalmente,

se incluyeron en la muestra hojas desecadas que

presentan contaminación por hongos.

Extracción de ADN

Las muestras de hojas previamente colectadas

fueron desecadas en sílica gel de la siguiente ma-

nera: una hoja de T. cacao L. colocada en papel

absorbente introducida en una bolsa de cierre

hermético (ziploc) con 10 g de sílica gel, en consi-

deración de que por la alta humedad del ambiente

de la zona de colecta, se realizaron al menos tres

reemplazos de la sílica gel presente en las bolsas

para asegurar el secado completo de las hojas.

Una vez que las hojas se encontraban completa-

mente desecadas, se procedió a pulverizarlas en

mortero con el fin de producir la lisis celular hasta

obtener al menos 100 mg de un fino polvo, al que

se añadieron 700 µl de buffer CTAB al 2% (20 g

de CTAB, 10 g de PVP, 100 ml de 1M Tris-Cl pH

8,0; 40 ml de 0,5 M EDTA pH 8,0, 280 ml de 5 M

NaCl para un volumen final de 1000 ml) precalen-

tado a 65 C, de acuerdo al método propuesto por

Borsch et al. (2003). Los tubos se incubaron a 65 C

durante 30 minutos realizando vórtex ocasional-

mente, centrifugando posteriormente a 10.000

rpm durante 10 minutos, prosiguiendo una se-



gunda y tercera extracción con buffer CTAB des-

pués de la que se realiza una centrifugación a

10.000 rpm durante 10 minutos recuperando el

sobrenadante, al que se le añaden 700 µl de la

mezcla cloroformo y alcohol isoamílico (24:1).

Después de mezclar vigorosamente, se incuba a

4C durante 20 minutos, centrifugando a 12.000

rpm durante 10 minutos, de esta manera se obtie-

ne tres fases: una superior acuosa, una intermedia

con flóculos y proteínas, y otra inferior de cloro-

formo. Trnasferir cuidadosamente la fase superior

a un tubo de 1,5 ml, añadiendo 1 volumen de clo-

roformo y alcohol isoamílico (24:1). Una vez reali-

zada la centrifugación, transferir cuidadosamente

la fase superior a un nuevo tubo de 1,5 ml, al que

se le añaden 0,08 volúmenes de acetato de amonio

7,5 M frío y dos volúmenes de etanol al 95%, in-

cubando después de una vigorosa mezcla a –20 C

durante 1 hora. Centrifugar a 12.000 rpm durante

20 minutos a 4C. Descartar cuidadosamente el

sobrenadante evitando la pérdida del precipitado.

Realizar un lavado con 500 µl de etanol al 70%,

centrifugando a 12.000 rpm durante 10 minutos,

descartando el sobrenadante y retirando el exceso

de etanol con un papel absorbente. Secar el preci-

pitado de ADN y re-suspender en 50 µl de agua

ultra pura. Añadir 25 µl de acetato de sodio 3M

pH 5,5 y precipitar lavando con dos volúmenes de

etanol absoluto. Mezclar vigorosamente e incubar

a – 20C durante 30 minutos (la incubación tam-

bién puede ser O.N.). Centrifugar a 12.000 rpm

durante 20 minutos a 4C, descartar cuidadosa-

mente el sobrenadante para no perder el precipi-

tado y dejar secar por 15 minutos a 65 C. Re-

suspender con 100 µl de agua ultra pura.

La calidad del ADN extraído se verificó en gel de

agarosa al 1% teñido con bromuro de etidio y se

cuantificó en espectrofotómetro UV/visible a 260,

280 y 320 nm, determinándose el grado de dilu-

ción adecuado para cada muestra hasta alcanzar

una concentración final de 0,8ng/µL para poste-

riormente realizar el análisis de los extractos con

tres marcadores microsatélites: CIR-33, CIR-37 y

CIR-12 de acuerdo al protocolo propuesto por

Lambert et al. (2008).


De las 262 muestras procesadas se obtuvo ADN

apto para PCR de 248 hojas (94,66%). Cabe men-

cionar que los extractos obtenidos varían signifi-

cativamente en cuanto a calidad y cantidad, en-

contrándose entre 17 y 260 ng/µl (Figura 1), ob-

servándose bandas relativamente intensas con

poca degradación, lo que indica que el protocolo

permite obtener ADN genómico intacto de mues-

tras de tejido foliar, incluyendo muestras conser-

vadas por un periodo de tres años. Por otro lado,

de 15 de las 17 muestras que presentaban mala

conservación, incluyendo la presencia de hongos,

no se obtuvo material genético analizable, visuali-

zándose óptimos resultados únicamente en dos

muestras cuyo grado de contaminación era signi-

ficativamente bajo.

Figura 1. Electroforesis en gel de a agarosa al 1%, mos-

trando productos de extracción de ADN de

Theobroma cacao L.

Así, de acuerdo a lo establecido en otros estudios,

en que las concentraciones de ADN de tejido ve-

getal varían entre 30 y 1802 ng/µl con un prome-

dio de 248 ng/µl, el protocolo propuesto recupera

concentraciones de ADN que se acercan al pro-

medio, aunque es claro que en muestras dañadas

esta concentración puede ser menor (Chia, 2009;



Rosero, 2013), pero suficiente para realizar análi-

sis de microsatélites (Figura 2). Por otro lado, el

protocolo propuesto no se ve afectado por la alta

tendencia a la fenolización del tejido foliar de ca-

cao.

Por otro lado, la evaluación de los extractos de

ADN obtenidos con los 3 marcadores microsatéli-

tes resultó en tres bandas de buena calidad y can-

tidad, separadas en función a su peso molecular

(Figura 2).

Figura 2. Electroforesis de los productos de amplificación de

PCR multiplex para tres marcadores microsatélites: CIR-33,

CIR-37 y CIR-12.

CONCLUSIÓN

El protocolo de extracción de ADN de tejido foliar

de Theobroma cacao L., “CTAB modificado” a par-

tir del protocolo propuesto por Borsch et al.

(2003), proporcionó un resultado favorable en

cuanto a cantidad y calidad de ADN, el cual fue

suficiente para llevar a cabo la amplificación de

marcadores microsatélites mediante la técnica de

la reacción en cadena de la polimerasa (PCR).

AGRADECIMIENTOS

A Wildlife Conservation Society (WCS) por el

trabajo desarrollado en la colecta de las muestras

de tejido foliar y a Helvetas Swiss Coorporation

por haber financiado la presente investigación.

REFERENCIAS

Borsch, T.; Hilv, K.; Quandt, D.; Wilde, V., Nein-

huis, C. & Barthlott, W. 2003. Non-coding

plastid trnT-trnF sequences reveal a well

supported phylogeny of basal angio-

sperms. Journal of Evolutionary Biology,

16: 558 – 576.

Chia, J. 2009. Caracterización molecular median-

te marcadores ISSR de una colección de

50 árboles clónales e híbridos de cacao

(Theobroma cacao L.) de la UNAS-Tingo

Maria. (Tesis de Maestria). UNAS, Tingo

Maria, PR.

Lambert, A.; Dapeng, Z.; Pathmanathan, U.;

Mischke, S.; Michel, B. & Stephen, P.. 2009.

Increasing Accuracy and Throughput in

Large-Scale Microsatellite Fingerprinting

of Cacao Field Germplasm Collections.

Tropical Plant Biology, 2: 23 – 37.



NOTA TÉCNICA - GENÉTICA

EXTRACCIÓN DE ADN EUCARIOTA A PARTIR DE HISOPADOS

ORALES DE AVES SILVESTRES EMPLEANDO PARTÍCULAS DE

SILICA (DIÓXIDO DE SILICIO)

Suarez G. Fabiola

Centro de Investigación Genética, IITCUP, Universidad Policial, Policía Boliviana.

Recibido Julio 2014 – Aceptado Octubre 2014

INTRODUCCIÓN

Una suficiente cantidad y pureza de ADN, obte-

nida mediante técnicas de bajo costo y sin mucho

trabajo, son las premisas más importantes para

cualquier investigador el momento de aplicar

protocolos de extracción de ADN (Osorio-

Cadavid et al., 2009). La extracción de ADN es un

proceso clave para el éxito de las posteriores téc-

nicas de PCR (Velasco, 2004) y la obtención de

ADN a partir de muestras orales es especialmente

crítico (Tsung-Hsing et al., 2010), debido a factores

como la presencia de bacterias, hongos o rema-

nentes alimenticios en la cavidad oral que pueden

contaminar la muestra e inhibir el proceso de PCR

(Sun & Reichenberg, 2014).

Los hisopados orales se han constituido en una

interesante alternativa no invasiva para la colecta

de material genético en humanos y animales. En

comparación con la obtención de ADN a partir de

muestras de sangre, la extracción de ácidos nu-

cleicos a partir de hisopos orales ha demostrado

ser menos costosa, no requiere de personal médi-

co capacitado para obtención de sangre periférica

y es una técnica mejor tolerada en niños (Nedel et

al., 2009). La practicidad de esta técnica la ha con-

vertido en una de las más utilizadas para la colec-

ta de material genético en especies de animales

pequeños como ratones, murciélagos y aves pe-

queñas (Meldgaard et al., 2004; Brookes et al.,

2005, Stone et al., 2005).

El ADN aislado de los hisopos orales puede ser

usado para aplicaciones forenses, pruebas de pa-

ternidad y detección de patógenos o enfermeda-

des hereditarias (McMichael et al., 2009).

En aves, principalmente en especies silvestres, el

ADN celular obtenido es un elemento muy im-

portante para ser empleado en varias pruebas

moleculares a fin de determinar el sexo en espe-

cies sin dimorfismo sexual (Moreno, et al., 2011),

estudiar la dinámica poblacional con fines citoge-

néticos (Ansón, 2011) o de conservación (Cam-

pagna, 2012), análisis filogenéticos (López-López,

2010) entre otros.

La colecta de muestras es una de las fases de la

investigación que demanda mayor costo y tiem-

po, así como el almacenamiento y transporte de

las muestras colectadas (Sun & Reichenberger,

2014). Existen ciertas circunstancias donde la co-

lecta de buenas cantidades de material biológico

de alta pureza es difícil de conseguir, como por

ejemplo en animales pequeños o neonatos. Por

esto, el propósito de este estudio fue contar con

una técnica de extracción rápida y sencilla a partir

de hisopos orales de aves silvestres, para obtener

cantidades suficientes de ADN eucariota que

permitan realizar pruebas de PCR.




Para este estudio se emplearon 6 hisopos orales

de aves psitacidas decomisadas al tráfico ilegal de

fauna silvestre en Bolivia y/o entregadas a Cen-

tros de Custodia de Fauna Silvestre entre los años

2010 y 2011. Las muestras fueron colectadas pre-

via inmovilización física de las aves, empleando

hisopos orales pediátricos de poliéster con mango

metálico; los manejadores de las aves contaban

con el respectivo equipo de bioseguridad (barbijo,

gafas protectoras, bata y guantes de nitrilo). La

colecta se realizó introduciendo el hisopo a la ca-

vidad oral del ave y raspando la mucosa oral en la

región de los carrillos, lengua y paladar superior.

Debido a la dificultad que representa la sujeción

física de las aves y el riesgo de estrés por manipu-

lación, el raspado de la mucosa oral con el hisopo

no tomaba más de 10 segundos y no se recomen-

dó el ayuno en las aves para no incrementar el

estrés, debido que estas habían sido recién deco-

misadas.

Una vez colectadas las muestras, estas fueron al-

macenadas en buffer de transporte a base de tio-

cianato de guanidina e introducidas inmediata-

mente en termos con nitrógeno líquido para su

traslado a laboratorio y almacenamiento final en

freezer de ultra baja temperatura (-80°C) hasta su

procesamiento.

Extracción de ADN y cuantificación

La extracción de ADN de todas las muestras se

realizó empleando el protocolo de Boom et al.

(1990). A la muestra (hisopo y buffer de lisis de

transporte) se añadió 900 µl de buffer L6 (descrito

en Boom et al., 1990) e inmediatamente vortexea-

do (5 segundos aproximadamente). La muestra

con este buffer fue incubada a 65ºC por 30 minu-

tos, vortexeando por 5 segundos cada 15 minutos.

Pasado el tiempo de incubación, se exprimió y

desechó el hisopo y centrifugó a 14000 r.p.m por

4 minutos. Se colectaron 500µl del sobrenadante a

un tubo nuevo y se añadió 40µl de silica (descrito

en Boom et al. 1990), después de un vórtex corto

se dejó reposar 10 minutos a temperatura ambien-

te. Pasado el tiempo, se centrifugó por un minuto

a 14000 r.p.m., empleando una micropipeta se

desechó todo el sobrenadante y se añadió 1 ml de

buffer L2 (descrito en Boom et al., 1990), poste-

riormente se realizó un vórtex por un minuto o

hasta que se disuelva el pellet. El tubo nuevamen-

te se centrifugó por un minuto a 14000 r.p.m y

empleando una micropipeta se desechó el sobre-

nadante. Se repitió el lavado con buffer L2. El la-

vado del pellet con etanol se realizó dos veces con

1 ml de etanol 70% a temperatura ambiente, vór-

tex por un minuto o hasta que se disuelva el pe-

llet, se centrifugó por 1 minuto a 14000 rpm y se

desechó el sobrenadante empleando una micropi-

peta. Finalmente, se añadió 1 ml de acetona, y

después de un vórtex por un minuto o hasta que

se disuelva el pellet, se centrifugó por 1 minuto a

14000 rpm y se eliminó el sobrenadante emplean-

do una micropipeta. El pellet fue secado a 65ºC en

estufa por 10 minutos con la tapa del tubo abierta

para permitir que se evapore toda la acetona. Se

añadieron 50µl de agua libre de DNAsas y RNasa

y se incubó por 15 minutos a 65ºC. Una vez con-

cluido el tiempo de incubación, se mezcló por

vórtex durante un minuto. Para la obtención de

los ácidos nucleicos, se centrifugó a 12000 rpm

por 2 minutos y empleando una micropipeta, se

colectó el sobrenadante a un tubo nuevo.

La cuantificación de DNA se realizó mediante

espectofotometría a UV260 nm empleando espec-

tofotómetro marca Perkin Elmer a una dilución de

1/35 de muestra para obtener un volumen final de

360µl.

A fin de verificar el éxito de la técnica de extrac-

ción, se realizó la prueba de PCR para amplificar



la región 18S presente en células eucariotas em-

pleando el protocolo de Messmer et al. (1997).


Los resultados muestran que el protocolo em-

pleando partículas de sílica permiten extraer y

purificar exitosamente ácidos nucleicos a partir de

muestras de hisopados orales de aves silvestres.

Una media de ADN obtenido con este método fue

de 21 µg/ml (Figura 1.).

A pesar que las muestras fueron colectadas em-

pleando pequeños hisopos pediátricos, la ausen-

cia de glándulas salivares en la cavidad oral de las

aves, el hecho de que muchas de ellas se hayan

alimentado antes de la toma de muestra y que el

proceso de colecta en sí duro menos de 10 segun-

dos, se obtuvo una buena cantidad de ADN en la

cuantificación por espectofotometría (21 µg/ml).

Un estudio comparativo realizado por Satia-

Abouta et al. (2002) con hisopados orales de mues-

tras humanas para identificar si factores como el

número de raspados de la mucosa, la hora de co-

lecta (en la mañana y en ayunas o a cualquier ho-

ra del día) y la forma de colecta (presionando con-

tra la mucosa o realizando un raspado con el hi-

sopo), podrían afectar la cantidad de ADN recu-

perado, no encontró ninguna diferencia estadísti-

ca entre las muestras colectadas una vez en la

mejilla derecha, una vez en la izquierda o dos

veces en la mejilla derecha. Asimismo, no hubo

diferencia entre las muestras colectadas en la ma-

ñana antes de comer y aquellas colectadas a cual-

quier hora del día. Tampoco se registraron dife-

rencias entre las muestras colectadas solo presio-

nando el hisopo contra la mucosa con aquellas

obtenidas raspando la mucosa. Vale la pena men-

cionar que en ese estudio el raspado de la mucosa

fue de 30 segundos, logrando obtener con este

procedimiento una media de 12,1µg/ml de ADN,

por el contrario el protocolo aquí presentado

cuantificó más ADN en las aves muestreadas

(21µg/ml), con raspados de la mucosa oral de me-

nos de 10 segundos de duración. Aunque la can-

tidad de ADN obtenido se encuentra en el rango

mínimo de los valores de ADN obtenidos a partir

de muestras de sangre- entre 22,6 y 119,2µg por

ml de sangre (Hansen et al., 2007), la obtención de

ADN a partir de hisopos orales de aves silvestres

empleando sílica constituye una buena alternativa

para ser aplicada en muestras con pocas posibili-

dades de aislar material genético como es la colec-

ta de hisopos orales en animales pequeños.

REFERENCIAS

Ansón, J.. 2011. Estudios genéticos para la identi-

ficación de la estructura genética de la

perdiz roja (Alctoris rufa I.) y su aplica-

ción en explotaciones y áreas cinegéticas.

Tesis Doctoral. Universidad de Zaragoza.

Departamento de Anatomía, Embriología

y Genética Animal.

Boom R., C.J.A Sol, M.M.M Salimans, C.L. Jansen,

P.M.E Wertheim-van Dillen & J Noordaa.

1990. Rapid and simple metrhod for puri-

fication of nucleic acids. Journal of Clini-

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Brookes S., J.N. Aegerter, G.C. Smith, D.M.

Healby, T.A. Jolliffe, S.M. Swift, I.J. Mack-

ie, J.S.Pritchard, P.A. Racey, N.P. Moore &

-20

0

20

40

60

80

Ave 1 Ave 2 Ave 3 Ave 4 Ave 5 Ave 6Can

tid

ad d

e A

DN

µg/

ml

Muestra

Figura 1. Cuantificación de ADN a partir de hisopos orales empleando método de

extracción a base de silicon dioxide



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NOTA TÉCNICA – GENÉTICA

GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE Helicobacter pylori

POR PCR ANIDADO Y MULTIPLEX

Poquechoque B., Georgia & Salazar Ch., Karina.

1 Centro de Investigación Genética, Instituto de Investigaciones Técnico Científicas de la Universidad Policial “Mcal. Antonio

José de Sucre”. Policía Boliviana. La Paz, Bolivia. [email protected]

RESUMEN

El empleo de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite genotipificar a Helicobacter pylori,

bacteria gram negativa de difícil cultivo in vitro, coloniza la parte superior del tracto gastrointestinal y

cuya detección es de suma importancia porque su presencia por largos periodos está asociado con gastri-

tis crónicas, úlceras pépticas y carcinomas gástricos. En el presente trabajo se estandarizó las condiciones

de la PCR anidada y multiplex con la cepa ATCC 43504, caracterizando un fragmento de 446 pb para la

detección de la región 16S de H. Pylori y de un fragmento de 567/642 y 259/286 pb para los genes VAG y

de 350 pb para el gen CAG, relacionados a su virulencia.

PALABRAS CLAVE: PCR-anidado, PCR-Mutipex, Helicobacter pylori.

ABSTRACT

The use of the Polymerase chain reaction (PCR) allows genotyping of Helicobacter pylori, a gram negative

bacterium of difficult crop in vitro which colonize the upper gastrointestinal tract and whose detection is

critical because their presence is associated of long periods of with chronic gastritis, peptic ulcers and

gastric carcinomas. In the present work conditions of a multiplex-nested-PCR with the ATCC43504 strain

were standardized, amplifying a fragment of 446 bp for the detection of the H. pylori 16S ribosomal re-

gion and other of 567/642 and 259/286 bp respectively from the VAG and 350 bp for the CAG genes, all of

them related to its virulence.

KEY WORDS: Nested-PCR, multiplex-PCR, Helicobacter pylori.



INTRODUCCIÓN

H. pylori ha sido identificada como la causa de

gastritis aguda y crónica activa, enfermedad ulce-

ro péptica y gastritis atrófica. Igualmente se corre-

laciona en la génesis del adenocarcinoma gástrico

y linfoma de MALT. En junio de 1994, la Agencia

Internacional para la Investigación sobre el Cán-

cer, perteneciente a la Organización Mundial de la

Salud, declara que la bacteria H. pylori es un car-

cinógeno de primera clase en los seres humanos,

lo que lo sitúa entre los agentes tumorigénicos

más peligrosos (Anselmi et al., 2007, Serrano et al.,

2009).

La respuesta inmune ante la infección por H. pylo-

ri es particularmente diversa, y está relacionada

con las variantes alélicas de los factores de viru-

lencia que presentan las cepas de Helicobacter pylo-

ri para desarrollar cáncer gástrico. Entre los prin-

cipales factores de virulencia los genes más estu-

diados son Cag A y Vac A. Existen evidencias de

que las citotoxinas y enzimas codificadas por es-

tos genes son responsables del daño directo a la

mucosa epitelial.

La detección de H. Pylori a través de métodos

convencionales como el test de ureasa, el examen

histopatológico y la prueba del aliento, suelen

presentar problemas en su detección debido a la

escasa cantidad de bacterias presentes en la mues-

tra, a la distribución discontinua de la bacteria

ocasionado por la administración de medicamen-

tos antisecretorios, antibióticos o sales de bismuto,

asimismo, el cultivo de estos microorganismos

resulta difícil y laborioso.

El empleo de técnicas moleculares, como la reac-

ción en cadena de la polimerasa (PCR) y sus va-

riantes han permitido el diagnóstico de microor-

ganismos de difícil cultivo, como es el caso de H.

pylori, por lo que ofrece un diagnóstico confiable,

más rápido y menos laborioso que los cultivos

normales de estos microorganismos (Premoli et

al., 2004)

Otra de las ventajas de la PCR radica en que la

secuencia específica de interés no necesita estar

aislada del resto de su genoma y la cantidad de

material genético que hace falta para el inicio de

la reacción es muy pequeña, siendo únicamente

necesaria la cantidad de ADN contenida en una

sola célula, esto le ofrece una alta sensibilidad a la

prueba, además de que aporta una ayuda consi-

derable no sólo en el campo del diagnóstico de la

infección como lo hacen los métodos convencio-

nales, sino también en la tipificación bacteriana,

en la detección de los factores genéticos responsa-

bles de la virulencia a partir de diversas muestras

como biopsias gástricas, placa dental, saliva, etc..

Por lo expuesto, la incorporación de técnicas mo-

leculares para el diagnóstico de H. pylori garanti-

zará la detección de este microorganismo a partir

de diversas muestras biológicas donde se sospe-

che su presencia mínima, empleando la técnica

PCR-anidado diseñada para aumentar la sensibi-

lidad de la reacción del ensayo que consta de dos

grupos de cebadores dirigidos contra la misma

diana. El primer grupo de cebadores amplifica

una región de interés mientras que el segundo

grupo de cebadores amplifica la región interna o

anidado con respecto al primer grupo (Koneman.,

2008). Este procedimiento amplifica la región de

interés del ADN dos veces con una gran especifi-

cidad.

Además, la aplicación de la PCR-Multiplex permi-

tirá caracterizar los diferentes genotipos de la bac-

teria permitiendo el estudio de cepas comensales

y virulentas relacionadas con problemas gástricos

y de cáncer gástrico a través de la amplificación

simultánea de secuencias específicas de los genes

Vac A y Cag A, relacionados con su virulencia.




Extracción de ADN

La extracción de ADN se realizó a partir de culti-

vos de la cepa ATCC 43504 utilizando el método

de extracción QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen),

basado en lisis y tratamiento de las muestras con

proteinasa K (10 mg/ml) y purificación con co-

lumnas en presencia de una alta concentración de

sales. Los extractos de ADN a partir de cultivos

control se obtuvieron empleando el método modi-

ficado de Wizard (Promega).

PCR Anidado

Se amplificó la región 16S del genoma bacteriano,

que corresponde a una secuencia conservada a lo

largo de la evolución bacteriana con poca frecuen-

cia de mutación, lo que permite el diseño de ce-

badores comunes para detectar cualquier bacteria,

esta región es específica de bacterias y no existen

en hongos, virus o ADN humano. Se empleó el

par de cebadores FD1

(5'AGAGTTTGATCCTGGCTCAG3') y RP2

(5'ACGGCTACCTTGTTACGACTT3') de la región

16S (Marchesi et al., 1998) obteniendo un fragmen-

to de 1500 pb. Luego se realizó una reacción PCR-

anidado sobre este fragmento con los cebadores

específicos 16S1

(5'CTGGAGAGACTAAGCCCTCC3') y 16S2

(5'AGGATGAAGGTTTAAGGATT3') descritos

por Mapstone et al., 1993 para caracterizar un

fragmento de 446 pb correspondiente a H. pylori.

PCR Múltiplex

Para realizar la genotipificación de los genes Vac

A y Cag A se utilizó 3 juegos de cebadores, VAI-F

(5'ATGGAAATACAACAAACACAC3') y VAI-R

(5'CTGCTTGAATGCGCCAAAC3'), VAG-F

(5'CAATCTGTCCAATCAAGCGAG3') y VAG-

R(5'GCGTCAAAATAATTCCAAGG3'), cag5c-

F(5'GTTGATAACGCTGTCGCTTC3') y cag3c-

R(5'GGGTTGTATGATATTTTCCATAA 3') descri-

tos por Paniagua et al., (2007) realizando modifi-

caciones al protocolo establecido por los mismos.

Corrida Electroforética

Los fragmentos esperados se visualizaron en geles

de agarosa al 1, 1.8 y 2% empleando un transilu-

minador UV.

RESULTADOS

La Figura 1, muestra la amplificación del frag-

mento universal 16S rRNA de 1500 pb del geno-

ma de distintos microorganismos a partir de una

PCR convencional.

Figura 2. Amplificación por PCR-anidado de la

región 16S rRNA de H. pylori. Carril 1, cepa ATCC

43504 (H. pylori); carril 2, Proteus spp.; carril 3, control

negativo (agua); carril 4 y 5, E. coli; carril 6, marcador

de peso molecular de 100 pb

446 pb

(16S

rRNA Hp.

pylori)

Figura 1. Amplificación por PCR de la región

16S rRNA universal. Carril 1, cepa ATCC 43504

(H. pylori); carril 2, Proteus spp.; carril 3, control

negativo (agua); carril 4, E. coli

1500 pb (16S rRNA universal)



La Figura 2, muestra la reacción de la PCR-

anidada realizada sobre el 16S rRNA del genoma

universal de los procariotas amplificando especí-

ficamente el fragmento 16S rRNA de 446 pb del

genoma de H. pylori a partir de la cepa ATCC

43504.

La Figura 3, muestra la genotipificación de la cepa

ATCC 43504 empleando la PCR-Multiplex lo-

grando caracterizar fragmentos de los genes Vac y

Cag.

CONCLUSIÓN

La aplicación de técnicas moleculares en la detec-

ción de H. pylori permitirá realizar un diagnóstico

específico y sensible de esta bacteria en nuestro

medio considerando que la prevalencia de pacien-

tes que tienen úlcera ocasionada por ésta, consti-

tuye un riesgo para la población a desarrollar en-

fermedades crónicas con etiologías relacionadas a

H. pylori. De esta manera es necesario aplicar estas

técnicas en diferentes muestras como biopsias,

heces fecales, saliva y placa dental por su alta sen-

sibilidad y especificidad.

REFERENCIAS

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Medina, Y., Marcano, M.. 2007. Helicobac-

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Texto y Atlas en color. 6a ed. Editorial

Médica Panamericana S.A. Buenos Aires,

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Serrano, A., Hernández, M., De La Garza, S., He-

rrera, L.. 2009. Helicobacter pylori y cán-

cer gástrico. Cancerología, 4:193-204.

Vag 567/642 pb

Cag 350 pb

Vai 259/286 pb

Figura 3. Amplificación por PCR-Multiplex de la

región 16S rRNA de H. pylori. Carril 1, marcador de

peso molecular de 100pb; carril 2, cepa ATCC43504

(H. pylori) mostrando los genotipos Vag y su variante

Vai y el genotipo Cag; carril 3, control negativo

(agua).



A LOS AUTORES

Desarrollar herramientas para generar políticas y estrate-

gias institucionales que permitan mejorar la seguridad ciu-

dadana y prever o apoyar la lucha contra el crimen, el nar-

cotráfico y el contrabando, requiere con urgencia de inves-

tigación científica básica, pura y/o aplicada de nuestra

realidad, para construir con solidez la base que permita la

toma de decisiones y la creación u optimización de tecnolo-

gía diseñada específicamente para alcanzar estos objetivos,

que son de eminente interés nacional.

La responsabilidad de la Institución Policial abarca y requiere de la participación de todas las áreas del

conocimiento humano, pues los retos y desafíos que enfrenta surgen de un amplio y denso espectro de

presión social, cultural, ética y humana que se alimenta de las aspiraciones, la historia y el tiempo vivi-

dos, inexorables e impertérritos en su avance y evolución. He aquí la razón de condensar en un solo títu-

lo el abanico de temas, líneas de investigación y ramas del conocimiento al que puede y debe llegar la

sociedad para superarse a sí misma.

IITCUP CIENCIA está dedicada a la publicación y divulgación de trabajos de investigación científica y

tecnológica principalmente proyectados, desarrollados o realizados en el territorio boliviano, con énfasis

en aquellos trabajos cuyo objetivo sea proporcionar conocimiento para el desarrollo de tecnología propia

adaptada a la realidad nacional, que persigan mejorar la calidad de vida de nuestra sociedad, que conci-

ban proyectar un futuro visionario y ambicioso de desarrollo técnico científico boliviano y provean solu-

ciones a los problemas y desafíos que enfrenta la institución policial y la sociedad en su conjunto.

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mente de interés o relevancia policial. El formato y contenido de los textos se describe a continuación

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SOPORTES Y TRATAMIENTOS 11

COMPARACIÓN DE LA TÉCNICA DEL “ÁRBOL DE NAVIDAD” ENTRE MUESTRAS FRESCAS Y

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LUCHA CONTRA LA VIOLENCIA CASO: POLICÍAS FEMENINAS 22

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GENOTIPIFICACIÓN MOLECULAR DE HELICOBACTER PYLORI POR PCR ANIDADO Y

MULTIPLEX 79

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