Anti HCV Mtodo Inmunocromatogrfico en suero o plasma

T-002 Ultima Revisin : Enero 2011

Fabricado por ABON ( ) para Inmunodiagnostico Ltda.

Resumen El test rpido HCV en un paso, es una prueba rpida

cualitativa in vitro de inmunoensayo diseada para la

deteccin de anticuerpos contra el Virus de la Hepatitis C

(HCV) en suero o plasma humano.

El virus HCV es el agente causante de la gran mayora de

hepatitis no A no B. Los anticuerpos contra los antgenos de

la hepatitis C se encuentran presentes en el suero de los

individuos infectados por el virus HCV. La deteccin de los

anticuerpos indica que ha habido exposicin al virus de la

Hepatitis C.

Principio El test anti-HCV de un paso, es un test rpido para la

deteccin visual de anticuerpos contra el virus de la

Hepatitis C (virus de 1 sola cadena de RNA, pequeo,

envuelto, positivamente sensible) en suero, que sirve de

ayuda para el diagnstico de Hepatitis C y que se basa en el

principio de un inmunoanlisis de sndwich de doble

antgeno. La clonacin del genoma viral ha hecho posible

desarrollar anlisis serolgicos que utilizan antgenos de

recombinacin purificados para identificar especficamente

anticuerpos anti-HCV con una alta sensibilidad. El anlisis

toma 10 minutos y la lectura es visual, sin ningn

instrumento.

Composicin del Kit - 20 bolsas metalizadas y selladas con un cassette en su

interior.

- 20 gotarios plsticos desechables

- 1 frasco con buffer de desarrollo (3 ml)

Estabilidad del reactivo El test es estable a temperaturas desde 4 - 30C almacenado

dentro de su estuche, evitando la luz directa del sol,

humedad y calor. Se puede refrigerar pero NO CONGELAR.

MuestraSuero o

Estabilidad:Se debe llevar a temperatura ambiente antes de realizar el

test.

Procedimiento

Precauciones

cromatogrfico en suero o plasma

N Catalogo IN/707020

Muestra Suero o plasma no hemolizado.

Estabilidad: Almacenar a 2-8 C (hasta 3 das) congelado. Se debe llevar a temperatura ambiente antes de realizar el

test.

Procedimiento Llevar las muestras a temperatura ambiente.

Remueva el cassette de su envoltorio metalizado

tirando del empalme. Marcar el cassette con una

etiqueta

Dispensar 1 gota (5 L) de la muestra (suero o plasma) +

2 gota de buffer en el pocillo de muestra S.

Dejar que se absorba en el filtro.

Leer los resultados desde 10 minutos de comenzada la

reaccin. No ms all de 15 minutos.

Precauciones No pipetear el material con la boca. No fumar, comer o

beber en reas donde se manejen las muestras o

material del kit.

Usar guantes de goma durante la recoleccin y

realizacin de las muestras.

Usar puntas de pipetas desechables e individuales para

cada muestra.

Tratar todo el material como si fuese infeccioso, auto

clavando 1 hora a 121 C o quemndolo.

Evitar el contacto entre las manos y ojos o nariz durante

la recoleccin y realizacin de las muestras.

No usar muestras turbias. Centrifugar y trabajar con el

sobrenadante

Interpretacin de los resultados

Positivo:la ventana de lectura, una marca en la C y otra en la

T.

Nota: La intensidad

dependiendo de la concentracin de anticuerpos contra

HCV presentes en la muestra. Por lo tanto, cualquier tono

de rojo en esta regin, se debe considerar positiva.

Negativo:la reg

una correcta ejecucin de la tcnica.

Error:slo una banda en la zona T, el test debe

considerarse nulo; ya sea por error o por deterioro

del mismo. En este caso

Presentacin 20 det.

Interpretacin de los resultados

Positivo: se observan dos banda de color rojas en la ventana de lectura, una marca en la C y otra en la

Nota: La intensidad del color rojo en T puede variar,

dependiendo de la concentracin de anticuerpos contra

HCV presentes en la muestra. Por lo tanto, cualquier tono

de rojo en esta regin, se debe considerar positiva.

Negativo: aparece una slo banda de color rojo en la regin C de la ventanilla. Adems, esto significa

una correcta ejecucin de la tcnica.

Error: Si no aparece ninguna banda de color o bien slo una banda en la zona T, el test debe

considerarse nulo; ya sea por error o por deterioro

del mismo. En este caso el ensayo debe repetirse.

Control de Calidad El procedimiento de control de calidad est incluido en la prueba. La lnea coloreada que

aparece en la lnea de control C es considerada como un procedimiento de control interno.

Este confirma el uso de volumen suficiente de muestra, una adecuada reaccin de

membrana y la correcta ejecucin de la tcnica.

Estndares de control no estn incluidos en este kit, sin embargo se recomiendo el uso de

controles positivos y negativos como parte de las buenas prcticas del laboratorio.

Limitaciones del mtodo El test rpido de HCV es slo para uso diagnstico in-vitro. Este test se usa para la deteccin

de anticuerpos para el HCV en suero o plasma.

El test rpido de HCV slo indicar la presencia de anticuerpos para HCV en la muestra y no

debera usarse como nico criterio para el diagnstico de infeccin viral por hepatitis C.

Como todas las pruebas diagnsticas, los resultados de este test deben ser interpretados

junto con otros antecedentes clnicos disponibles.

Si el resultado es negativo, pero los sntomas en el paciente persisten, se recomienda

efectuar seguimientos adicionales usando otros mtodos clnicos. Un resultado negativo en

un momento dado, no excluye la posibilidad de infeccin viral por Hepatitis C.

Valores esperados Se ha comparado con kits ELISA anti-HCV comerciales y otros tests rpidos bien reconocidos.

Todas las muestras analizadas como positivas por ELISA, fueron detectadas como positivas

por el presente test. (98% de las veces)

DESEMPEO DEL METODO Sensibilidad El test rpido HCV en un paso (suero/plasma) ha pasado un panel de seroconversin y ha

sido comparado con kits de HCV por EIA usando muestras de pacientes.

Especificidad

El antgeno recombnate usado en el test rpido HCV en un paso (suero/plasma) esta

codificado por genes ya sea para protenas estructurales y no estructurales. El test rpido

HCV en un paso (suero/plasma)es altamente especfico para anticuerpos contra el virus de

la Hepatitis C comparado con otros kits comerciales por EIA para HCV.

Mtodo EIA Resultado total

HCV

Test rpido

Resultados Positivo Negativo

Positivo 92 20 112

Negativo 3 1888 1891

Resultado Total 95 1908 2003

Sensibilidad Relativa : 96.8%

Especificidad Relativa: 99.0%

Exactitud Relativa: 98.9%

Precisin Intraensayo La precisin intraensayo (repetibilidad) fue determinada usando 15 replicas para 3

especmenes, uno negativo, uno levemente positivo y uno altamente positivo, obteniendo

valores consistentes y correctamente identificados sobre el 98% de las veces.

Interensayo La precisin interensayo (reproducibilidad) fue determinada efectuando 15 ensayos

independientes para los mismos 3 especmenes, uno negativo, uno levemente positivo, y

uno altamente positivo. Se usaron tres lotes diferentes del test rpido de HCV, examinando

las muestras en un periodo de ms de tres meses, obteniendo valores consistentes y

correctamente identificados sobre el 99% de las veces.

Bibliografia 1. Van der Poel,C.L. et al. Confirmation of hepatitis C virus infection by new four antigen recombinant

inmunoblot assay Lancet 1991: 337-317.

2. Choo, Q.L. et al Isolation of cDNA clone derived from blood borne non-A non-B viral hepatitis

genome. Science 1989; 244: 359.

3. Kuo,G. et al.An assay for circulating antibodies to a major etiologic virus of human non-A non-B hepatitis Science 1989; 244: 362

4. Wilber, J.C. Development and use of laboratory test for hepatitis C infection, a review J. Clin. Immunoassay 1993; 16:204.

www.inmunodiagnostico.cl