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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- INMUNOLOGÍA VETERINARIA Práctica N°2 Manipulación de animales de laboratorio, vías de inoculación y métodos de sangría I. INTRODUCCIÓN Sin los animales de laboratorio, el conocimiento de las ciencias biológicas no estaría al nivel que se encuentra hoy en día. Los animales de experimentación han proporcionado modelos para la realización de diferentes investigaciones en diferentes áreas de las ciencias de la vida. Los animales deben tratarse con seriedad y cuidado y si el sacrificio es parte de la experimentación ésta debe de realizarse bajo un protocolo de eutanasia apropiado. La inoculación de sustancias es una práctica generalizada en la práctica veterinaria en general, en el área de la inmunología las vacunaciones representan la práctica más extendida, pero también existen pruebas diagnósticas como la de reacción de tuberculina o los test alérgicos que demandan cierto conocimiento de las diferentes vías de inoculación. Asimismo, la toma de muestras sanguíneas es un procedimiento de rutina en la mayor parte de los laboratorios de inmunología y en la práctica veterinaria en general, ya que a través de este procedimiento se obtienen células, fluidos y moléculas tanto para la investigación como para el diagnóstico. II. OBJETIVOS General: Conocer las diferentes vías de inoculación y métodos de sangría en animales de laboratorio en congruencia con una apropiada manipulación. Específicos: Al finalizar la práctica el alumno será capaz de:

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Page 1: INMUNOLOGÍA VETERINARIA Práctica N°2 I. …€¦ · Sam R, Manchego A. Guía de Prácticas del curso Inmunología veterinaria. Laboratorio de Microbiología y Parasitología Veterinaria

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

INMUNOLOGÍA VETERINARIA

Práctica N°2

Manipulación de animales de laboratorio, vías de inoculación y métodos de sangría

I. INTRODUCCIÓN

Sin los animales de laboratorio, el conocimiento de las ciencias biológicas no estaría al

nivel que se encuentra hoy en día. Los animales de experimentación han proporcionado

modelos para la realización de diferentes investigaciones en diferentes áreas de las ciencias

de la vida. Los animales deben tratarse con seriedad y cuidado y si el sacrificio es parte de la

experimentación ésta debe de realizarse bajo un protocolo de eutanasia apropiado.

La inoculación de sustancias es una práctica generalizada en la práctica veterinaria en

general, en el área de la inmunología las vacunaciones representan la práctica más

extendida, pero también existen pruebas diagnósticas como la de reacción de tuberculina o

los test alérgicos que demandan cierto conocimiento de las diferentes vías de inoculación.

Asimismo, la toma de muestras sanguíneas es un procedimiento de rutina en la mayor parte

de los laboratorios de inmunología y en la práctica veterinaria en general, ya que a través de

este procedimiento se obtienen células, fluidos y moléculas tanto para la investigación como

para el diagnóstico.

II. OBJETIVOS

General: Conocer las diferentes vías de inoculación y métodos de sangría en animales de laboratorio

en congruencia con una apropiada manipulación.

Específicos: Al finalizar la práctica el alumno será capaz de:

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-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Sujetar y manipular correctamente los animales de laboratorio

Reconocer las diferentes vías de inoculación en animales de laboratorio.

Identificar los métodos de sangría más frecuentes en la práctica inmunológica

veterinaria.

III. MATERIALES

Animales experimentales: Un conejos, un ratón y un pollo por mesa.

Equipamiento:

Jeringas de diferentes medidas

Agujas de diferentes calibres

Contenedor para material punzocortante.

Gasa y algodón

Reactivos:

Suero fisiológico

Alcohol

IV. PROCEDIMIENTO

4.1 Sujeción de los animales

Cómo sujetar a un ratón

Cuando maneje un ratón, todos sus movimientos deben ser lentos y suaves. Ellos son

seres vivientes y podrían morder si son molestados, asustados o manipulados con

torpeza. El ratón es el único animal de laboratorio que puede sujetarse por la cola sin

lastimarlo.

Con una mano.- Colocar al ratón sobre una superficie áspera. Sujetar al ratón detrás

de los hombros con los dedos índice y pulgar e inmediatamente la cola con los dos

últimos dedos de la mano que sujeta al ratón.

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Con dos manos.- Colocar al ratón sobre una superficie áspera. Sujetar la cola

firmemente con una mano y casi al mismo tiempo sujetar la parte trasera de los

hombros con la otra mano y luego levantar al ratón.

Cómo sujetar a un conejo

Con la mano derecha sujetar tranquilamente al conejo de la parte trasera del cuello,

firme pero con suavidad, luego colocar la mano izquierda debajo de las ancas del conejo

para soportar su peso. También se puede sujetar la piel de los hombros con la mano

izquierda y con la derecha sujetar al conejo de la piel del lomo. Nunca levantar al

animal de las orejas, ni cargarlo sólo de los hombros, esto es muy doloroso para el

animal.

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4.2 Vías de inoculación

Intramuscular.- El área a utilizar será la de los músculos de los miembros posteriores en

mamíferos o los músculos pectorales en aves, siempre previa desinfección. Se deberá

verificar que la inoculación se realice en el músculo retirando el émbolo de la

hipodérmica, en caso la aguja se encuentre en algún vaso sanguíneo mover la aguja para

ubicarla en músculo. Se efectuará en pollos, alternativamente en conejos.

Intradérmica.- Se pueden realizar en distintas áreas de la superficie del cuerpo del

animal. Rasurar con una hoja de afeitar, desinfectar y luego introducir la aguja en la piel

orientando la hipodérmica en forma paralela a la superficie. Al inocular el líquido se

formará una pápula. Se efectuará en conejos.

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Subcutánea.- Se efectúa en una zona de piel laxa. Desinfectar la zona, sujetar un pliegue

de piel entre el dedo pulgar y el índice un pliegue de piel y con la otra mano introducir

la aguja perpendicularmente, luego realizar un suave masaje en el lugar de inoculación

para facilitar la absorción. Se efectuará en conejos.

Intraperitoneal.- Esta vía de inoculación requiere de una adecuada posición del animal.

Desinfectar la zona de inoculación, sujetar correctamente al animal inclinándolo con la

cabeza hacia abajo para desplazar los intestinos. Penetrar por la línea alba, debajo del

ombligo o en el cuadrante lateral izquierdo del abdomen penetrando músculos

abdominales y peritoneo. Se efectuará en ratones, alternativamente en conejos.

Nota: La vía intravenosa será considerada dentro de los métodos de sangría.

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-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 4.3 Métodos de sangría

Punción venosa.- Será realizada en un caballo. Ubicar la vena yugular realizando la

anastomosis, desinfectar el área de punción y luego punzar. La sangre obtenida servirá

para diferenciar el suero del plasma. Adicionalmente se realizará la punción venosa en

aves, para lo cual se sujetará firmemente al pollo, se ubicará la vena braquial que corre a

lo largo de la articulación humerocubitorradial. Retirar algunas plumas de ser necesario.

Puncionar la vena suavemente y extraer el volumen de sangre necesario.

Oreja marginal.- Se realiza en conejos. Sujetar al animal con ayuda de una toalla,

rasurar la piel sobre la vena marginal de ambas orejas, desinfectar la zona con alcohol.

Utilizando ua jeringa de tuberculina o insulina introducir suavemente la aguja en la

delgada vena, luego jalar el émbolo para que la sangre empiece a fluir.

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-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Punción cardiaca.- Una persona sujetará al conejo decúbito lateral derecho sobre la

mesa y procurando exponer la zona ventral del animal frente al operador. Ubicar al

corazón percibiendo los latidos a la palpitación, como referencia se puede llevar el codo

del animal hacia el lado lateral de la caja torácica. Desinfectar la zona, realizar la punción

en el espacio intercostal y avanzar lentamente hasta sentir la pulsación del músculo

cardiaco. Jalar lentamente el émbolo para que fluya la sangre, en caso no penetrar el

corazón en un primer intento, retirar suavemente la aguja, pero sin sacarla del tórax

para evitar la pérdida de vacío y repetir tranquilamente el proceso.

Ojo (plexo venoso retroorbital).- Posicione al ratón en decúbito ventral sobre una

franela o toalla en la mesa de trabajo. Colocar los dedos índice y pulgar izquierdos en la

parte dorsal del cuello y ejercer ligera presión contra la mesa. Suavemente con un tubo

capilar penetrar en el ángulo externo de la comisura ocular (cantus lateral del globo

ocular) del animal, y realizando un movimiento circular esperar a que la sangre

comience a fluir libremente por capilaridad.

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V. FUENTES DE INFORMACIÓN

1. Arce AY, Rosas AG, Rodríguez LE. Prácticas de inmunología general aplicada y

veterinaria. Manual Moderno; México, 2007.

2. Gómez-Lucía E, Blanco M, Doménech A. Manual de Inmunología Veterinaria. Pearson

Prentice Hall; Madrid, 2007.

3. Sam R, Manchego A. Guía de Prácticas del curso Inmunología veterinaria. Laboratorio

de Microbiología y Parasitología Veterinaria. UNMSM, Lima – Perú, 2010.

4. Tizard I. Inmunología veterinaria. 6ta edición. Editorial Interamericana Mac Graw-Hill;

España, 2004.

VI. ANEXOS

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