i cuaderno de embriología clínica

I. Recomendaciones sobre Recursos Humanos y Físicospara el Laboratorio de Reproducción.

CUADERNOSDE EMBRIOLOGÍA CLÍNICA

EDITA:

JUNTA DIRECTIVA

Mark Grossmann

Mª Victoria Hurtado de Mendoza

Nieves Cremades

Manuel Ardoy

Mª José de los Santos

Begoña Arán

Jorge Cuadros

Fernando Marina

Jorge Ten

Montserrat Boada

María Bonada

Antonio Urries

con la colaboración de:

Imagen de portada: Prezigoto Humano.

“Si los cuidamos bien, ellos nos darán muchas alegrías”.

RECOMENDACIONES SOBRE RECURSOS

HUMANOS Y FÍSICOS PARA EL LABORATORIO

DE REPRODUCCIÓN

Grupo de trabajo ASEBIR

Edita:

Asociación para el Estudio de la Biología de la Reproducción (ASEBIR).

C/ Cronos 20, Edificio 4, 1º, 6ª - 28037 Madrid - Tfno: 91 367 89 94

www.asebir.com · [email protected]

Diseño, maquetación e impresión:

GÓBALO Gráfica · Web · Multimedia · Consultoría

C/ Nogal 1, 1º 31 - 28250 · Torrelodones · Madrid · Tfno - Fax.: 91 859 57 22

www.gobalo.es · [email protected]

Depósito legal: M-30,301-2008

ISSN: 1888-8011

Soporte Válido: 78-R-CM

2008

2ª Edición Julio 2008

Coordinadora

Maria Bonada

Ponentes

José Antonio Castilla

Antonio González Utor

Fernando Marina

Marta Moragas

María José de los Santos

Antonio Urries

1ª Edición Septiembre 2005

Coordinador

José Antonio Castilla

Ponentes

Antonio Alcaide

Maria Bonada

Antonia Expósito

Clara Luna

Rocío Núñez

Maria José de los Santos

af.Interior 148 x 210 centrado.qxp:Cuaderno embriologia 12/12/08 13:59 Página 1

NOTAS

af.Interior 148 x 210 centrado:Cuaderno embriologia 28/11/2008 12:44 PÆgina 2

ÍNDICEINTRODUCCIÓN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5

I.- ORGANIZACIÓN GENERAL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7

1. Sistema de gestión de calidad . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7

2. Ética e investigación . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8

3. Seguridad y Riesgos Laborales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8

II.- RECURSOS HUMANOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9

1. Embriólogo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9

2. Coordinador . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10

3. Director del laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .11

4. Otro personal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .12

III.- RECURSOS FÍSICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13

1. Normas generales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13

2. Área de oficina y consulta . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .13

3. Laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .14

3.1 Laboratorio de Andrología . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16

3.2 Laboratorio de FIV/ICSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .17

3.3 Laboratorio de Crioconservación de material biológico reproductivo . . . . . . . .19

3.4 Manejo de medios . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20

3.5 Área del personal del laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .20

TABLA I. RECURSOS HUMANOS EN EL LABORATORIO DE REPRODUCCIÓN.FUNCIONES Y NÚMERO DE PROFESIONALES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21

TABLA II. RECURSOS HUMANOS EN EL LABORATORIO DE REPRODUCCIÓN.FORMACIÓN Y EXPERIENCIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22

TABLA III. CANTIDAD RECOMENDADA DE EQUIPOS EN EL LABORATORIO DEFIV/ICSI SEGÚN ACTIVIDAD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .22

ANEXO I. PROCESADO DE MUESTRAS DE PACIENTES CON ENFERMEDADESINFECCIOSAS TRANSMISIBLES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23

ANEXO II. PLAN DE FORMACIÓN PARA LOS NUEVOS MIEMBROS DEL PERSONALDEL LABORATORIO DE FIV/ICSI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24

BIBLIOGRAFÍA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25


NOTAS


Dentro de los objetivos primordiales de ASEBIR se encuentra el establecerprotocolos para la estandarización de técnicas del laboratorio de reproduccióny determinar criterios que permitan la acreditación de estos laboratorios.Actualmente la herramienta más utilizada con este fin por las SociedadesCientíficas es la edición de recomendaciones. Éstas deben basarse en laevidencia científica, en el consenso de expertos y tienen que contemplar elmarco legal vigente. Este último aspecto es clave en la práctica de lareproducción asistida en nuestro entorno, ya que no sólo repercuten en elcampo de la reproducción asistida leyes especificas (Ley de ReproducciónAsistida y Real Decreto de Banco de Tejidos y Células) sino también generalescomo las relativas a protección de datos o la atención sanitaria.

El laboratorio de reproducción no es ajeno a la filosofía de la mejora continuade la calidad, por lo que gran parte de estas recomendaciones se basan en lagestión de la calidad y la implantación de sistemas de calidad adecuados. Estasrecomendaciones no pretenden ser definitivas sino que dado las rápidasinnovaciones en el campo de la reproducción asistida deben, por definición,ser revisadas periódicamente para adaptarse a los avances tecnológicos y a loscambios legales.

Con la publicación de estas recomendaciones, ASEBIR se sitúa en la vanguardiade las Sociedades Científicas de nuestro país y de las Sociedades europeas delcampo de la reproducción humana. El principal objetivo de estas guías es sentarun modelo que deseamos sirva para la implantación de protocolosestandarizados en muchos laboratorios de reproducción.

INTRODUCCIÓN 5


NOTAS


Recomendaciones sobre recursos humanos y físicos para el laboratorio de Reproducción. 7

I. ORGANIZACIÓN GENERAL Los requisitos generales para la organización de un laboratorio de reproducciónse estructuran en:

1. Sistema de gestión de calidad

2. Ética e investigación

3. Seguridad y Riesgos Laborales

1. Sistema de gestión de calidad

Los objetivos del laboratorio, así como la política y los procedimientos paraconseguir tales objetivos, deben estar descritos en el Manual de Calidad, quecontendrá información sobre:

1.1 Organización, responsabilidad y acreditación del personal de la plantilla.

1.2 Autorización de organismos locales y estatales. Se tendrá presente lalegislación estatal y autonómica sobre Reproducción Asistida, Protección deDatos, Seguridad y Riesgos Laborales, Investigación Biomédica.

1.3 Normas sobre la gestión de datos:

1.3.1 Se garantizará la confidencialidad de los datos según la legislación vigente.

1.3.2 Se velará por la trazabilidad de los datos. Debe establecerse una cadenade custodia donde se registre quién, cuándo y para qué accede a dichos datos.

1.3.3 Se garantizará una adecuada validación de los datos y una correctaidentificación de los pacientes y material biológico reproductivo. En el caso dedonantes, esta identificación deberá realizarse según el sistema de codificaciónúnico que establecerá la comisión de Trasplantes y Medicina Regenerativa delConsejo Interterritorial del Sistema Nacional de Salud, y que será compatiblecon los sistemas de otros estados miembros de la Unión Europea.

1.3.4 Los datos referentes a los medios de cultivo, parámetros fisicoquímicosdel laboratorio (CO2, Tª, pH), mantenimiento de equipos y control de calidadserán almacenados un mínimo de dos años.

1.3.5 Los datos referentes a donantes serán almacenados un mínimo detreinta años.


Recomendaciones sobre recursos humanos y físicos para el laboratorio de Reproducción.8

1.3.6 Se recomienda participar en registros de resultados nacionales einternacionales de Sociedades Científicas.

1.4 El manual de procedimientos debe describir por escrito, firmado y fechadocada actividad a desarrollar, incluyendo la información a suministrar al pacientey la verificación de la existencia de consentimientos informados. Debe serrevisado como mínimo anualmente.

1.5 Se utilizarán indicadores de calidad que reflejen la satisfacción del pacientey el cumplimiento del manual de procedimiento.

1.6 Deben registrarse los resultados clínicos y de laboratorio medianteindicadores y estándares validados y actualizarse periódicamente. Éstosdeben quedar a disposición del director del laboratorio para permitir unaevaluación periódica de los resultados, incluidos los de cada trabajadorindividual.

1.7 Establecimiento de acciones preventivas y correctoras que garanticen unamejora continua de la calidad. Debe especificarse fecha de implantación yrevisión.

2. Ética e investigación

2.1 Se seguirán los códigos deontológicos de las sociedades científicas y colegiosprofesionales.

2.2 Se seguirán las recomendaciones establecidas por los comités de ensayosclínicos, ética e investigación autonómicos y locales cumpliendo la normativalegal vigente.

3. Seguridad y riesgos laborales

3.1 Instauración de un plan de Seguridad y prevención de Riesgos Laborales.

3.2 Todos los procesos se realizarán en condiciones asépticas, que garanticen laseguridad de los pacientes y el personal que manipula las muestras.

3.3 El personal de laboratorio seguirá normas de seguridad establecidas, talescomo:

3.3.1 Utilizar ropa específica (gorro, patuco y/o zuecos y pijama) para sutrabajo en el interior de éste. Al salir del laboratorio se deberá utilizar batacerrada.



3.3.2 Lavado de manos al entrar y salir del laboratorio.

3.3.3 Empleo de mascarilla y guantes no tóxicos sin talco desechablescuando esté indicado.

3.3.4 No se recomienda el uso de cosméticos ni perfumes de olores fuertes.

3.3.5 No comer, beber, fumar o masticar chicle en el laboratorio, así comoalmacenar comida, bebida, tabaco o medicamentos.

3.4 Todo material biológico será tratado como potencialmente infeccioso. Serecomienda que el personal sea vacunado contra la Hepatitis B.

3.5 Hay que verificar que todo paciente que vaya a realizar un tratamiento deReproducción Asistida tenga realizado tests serológicos de enfermedadesinfecciosas transmisibles (HIV, Hepatitis B, Hepatitis C).

3.6 Todo el material debe estar esterilizado antes de su uso. Será desechado odepositado en contenedores específicos inmediatamente después de su utilización.

3.7 No se manejará más de una muestra (pertenecientes a distintos pacientes) enla misma área de trabajo.

3.8 Se recomienda implantar medidas encaminadas a la protecciónmedioambiental acorde con la norma ISO 14000 de gestión ambiental(clasificación de residuos, etc).

II. RECURSOS HUMANOSEl personal del laboratorio de reproducción debe dimensionarse según laactividad del mismo. Existen al menos tres figuras que son embriólogo,coordinador y director del laboratorio. La existencia de las tres dependerá delvolumen de la actividad que realice el centro (Tablas I y II).

1. Embriólogo

Funciones:

1.1 Tomar decisiones clínicas de acuerdo con los protocolos establecidos.

1.2 Realizar la mayor parte de la labor asistencial del laboratorio de andrologíay embriología.



1.3 Realizar trabajos de investigación de aplicación clínica o básica.

El número de embriólogos será directamente proporcional al volumen detrabajo. Recomendamos un mínimo de dos embriólogos por centro con laintención de garantizar que durante los periodos de vacaciones, descansos yenfermedad de alguno, las sustituciones sean realizadas por personalcualificado. Se debe contar con un embriólogo cada 150 ciclos de FIV/ICSI alaño. En el laboratorio de andrología deberá existir un embriólogo por cada 800muestras de semen al año.

Formación:

Deberá haber obtenido el grado de licenciado en ciencias biomédicas, poseerconocimientos de fisiología humana, endocrinología reproductiva, genética,técnicas de laboratorio de andrología y embriología, y conocimientos decultivo celular (según Plan de Formación de Embriólogos Clínicos deASEBIR, revisión de 2008). Tendrá una experiencia de al menos 2 años,acreditando haber realizado 100 ciclos de FIV con ICSI y 200 preparacionesde semen para inseminación artificial supervisados por el coordinador dellaboratorio del centro en cuestión, o por otro embriólogo ya formado.

2. Coordinador del laboratorio

La presencia de esta figura, quedará supeditada al volumen de trabajo quetenga el laboratorio en cuestión, siendo recomendable una vez se alcanzan los300 ciclos de FIV/ICSI al año o 1600 muestras de semen al año. En caso demenos ciclos esta figura se puede fusionar con la de director de laboratorio.

Será importante en el caso de laboratorios externos, como por ejemplo encentros hospitalarios con distintos servicios.

Funciones:

2.1 Responsable en primera instancia de todo lo que sucede en el laboratoriode FIV y andrología en el día a día.

2.2 Coordinar las diferentes áreas del centro.

2.3 Supervisar que todos los equipos y material tengan un correctofuncionamiento y estén en correcto estado, así como todo el proceso derecogida de muestras.

2.4 Deberá tener una actividad asistencial mínima anual de más de 100 ciclosde FIV/ICSI por año o 100 muestras de semen año.



2.5 Deberá mantener una fluida comunicación con el director de laboratorio.

Formación:

Deberá acreditar, además de la formación y experiencia requerida para elembriólogo, cursos de especialización en materias de biología de lareproducción, y haber trabajado como embriólogo en un laboratorio dereproducción asistida. Durante su vida profesional deberá haber realizado unmínimo de 300 ciclos de FIV con ICSI ó 600 preparaciones de semen parainseminación artificial.

3. Director del laboratorio

Funciones:

Será el responsable de todo lo que suceda en el laboratorio ante elresponsable legal del centro de reproducción asistida. Entre suscompetencias estarán:

3.1 Implantación de medidas encaminadas al cumplimiento de requisitoslegales para la apertura y funcionamiento del laboratorio dereproducción.

3.2 Elaboración y revisión periódica de todos los protocolos de laboratorio,elección y verificación del material y aparataje.

3.3 Coordinar la actividad del laboratorio con la actividad clínica.

3.4 Análisis de los indicadores de calidad y de los resultados de los programasde control de calidad interno y externo.

3.5 Evaluará la preparación y conocimientos de todo el personal dellaboratorio y deberá facilitar su formación continuada en todas las materiasde interés con la reproducción asistida, y concretamente con el laboratorio deandrología y embriología clínica.

3.6 Definir todo el organigrama funcional del laboratorio y la delegación de lasdiferentes funciones. Participar en la toma de decisiones sobre laconfiguración de la plantilla del laboratorio.

3.7 Validar todos los documentos oficiales con su firma y asegurará laconfidencialidad de los datos.

3.8 Realizar una actividad asistencial mínima anual que le permita tener uncontacto directo con la práctica diaria del laboratorio.



3.9 Deberá poner los medios necesarios para facilitar su localización duranteel horario habitual de trabajo del laboratorio.

3.10 Se recomienda que sea el responsable de informar y asesorar a los pacientessobre aspectos biológicos y de laboratorio referentes a su caso.

3.11 Dirigir estudios de investigación clínica y básica relacionados con elcampo de la embriología clínica.

Formación:

Deberá acreditar, además de la formación requerida para el embriólogo,sobrada experiencia como responsable del laboratorio de reproducciónasistida. Además, deberá tener conocimientos en todas las materias implicadasen el campo de la reproducción (bioquímica, biología celular, fisiologíareproductiva, genética, estadística), así como, resolución de problemasderivados de la práctica habitual de la reproducción asistida y en el diseño deexperimentos para dicho campo. De igual modo, deberá tener experiencia encultivo celular y andrología, así como conocimientos en materia de control decalidad interno y externo del laboratorio. Esta experiencia, debe ser al menosde 3 años.

El director del laboratorio deberá tener experiencia mínima asistencial,acreditar al menos 500 ciclos de FIV con ICSI o haber coordinado durante almenos 2 años un laboratorio de FIV. En caso de laboratorio andrología sedeberá acreditar haber sido coordinador durante al menos 2 años para accedera este puesto.

4. Otro personal

Otro personal adscrito al laboratorio de reproducción será los DiplomadosUniversitarios en Enfermería, Técnicos de Laboratorio, AuxiliaresAdministrativos. Estos ayudarán al embriólogo a desarrollar su tarea diaria ydeberá contarse con ellos cuando el desempeño de las tareas administrativasy/o auxiliares quite tiempo al embriólogo para el desempeño de las funcionespropias de su cargo.

Para poder minimizar el riesgo de error en el laboratorio de FIV, se recomiendala utilización de la figura del testigo. Dicha figura se encargará de atestiguar todala actividad realizada en el laboratorio de FIV. No será necesario la contrataciónde otra persona física para realizar esta actividad, sino que ésta puede serdesempeñada por un embriólogo que esté en ese momento de apoyo en ellaboratorio, o bien, por el supervisor del mismo u otro personal del laboratorio.



III.RECURSOS FÍSICOS1. Normas generales

Los requisitos para un laboratorio en el que se llevan cabo técnicas dereproducción son:

1. Una adecuada distribución y diseño de las distintas áreas de trabajo, ya quecada una tiene unas necesidades específicas según la labor que en ellos se realice.

2. Dos zonas claramente diferenciadas y separadas entre sí, una administrativay otra de obtención y manipulación de material y muestras (laboratorio), ya queel laboratorio debe ser de acceso restringido y mantener unas condiciones deesterilidad adecuadas.

3. Para asegurar el correcto funcionamiento de ambas, la comunicación entreellas tiene que ser fluida.

4. Todo debe estar diseñado para facilitar la comodidad y privacidad de lospacientes y el correcto funcionamiento de todas las áreas y del personal.

2. Área de oficina y consulta

- Debe estar separada de la zona de extracción y manipulación del materialbiológico, así como de la zona de preparación de los medios.

- El que esté alejada de los laboratorios asegura la privacidad de los pacientes yevita el filtro de información a personal no autorizado.

- Debe existir una adecuada organización de todos los documentos necesarios,tanto para los pacientes como para el personal.

- Se necesita una zona de acceso restringido, en la que la seguridad es mayor,para el almacenamiento de los informes e historiales médicos.

- Se recomienda una sala de administración para la plantilla de embriólogosque permita la realización de las labores burocráticas.

- El director del laboratorio deberá disponer de despacho para la correctarealización de sus ocupaciones diarias.

- Se recomienda un área de trabajo con intimidad suficiente para que losembriólogos puedan dar información a los pacientes sobre aspectos biológicosy de laboratorio que afecten a su caso.



3. Laboratorio

Se pueden distinguir distintos tipos de laboratorios y áreas necesarias a la horade llevar a cabo las TRA. Entre ellos hay claras diferencias con respecto a losprocedimientos que realizan, sin embargo hay una serie de requisitos comunesa todos ellos:

- Debe estar claramente separado de la zona de oficina y consulta.

- Sólo debe permitirse el acceso a personal autorizado.

- Es necesario que existan condiciones de esterilidad, para ello paredes,techo y suelo han de ser de material no poroso y de fácil acceso (serecomienda evitar las uniones en ángulo recto entre pared y suelo) parafacilitar la limpieza y desinfección.

- La calidad de aire respecto a partículas y colonias microbiológicas deberá serequivalente a la especificada como grado A en el anexo I de la guía europea deNormas de Correcta Fabricación (se alcanza en cabinas de flujo laminar si lasala en la que se sitúa es de grado C o B). El entorno se recomienda que seaequivalente al grado C (se alcanza con un número de renovaciones de aireproporcional al tamaño de la sala, al equipo así como del equipamiento y elpersonal presentes en la sala). El sistema de aireación debe estar equipado confiltros apropiados, como los filtros HEPA para los grados A, B y C.

- Se deben realizar controles microbiológicos ambientales y de superficiecomo mínimo una vez al año en diferentes áreas del laboratorio deandrología y embriología.

- También deben realizarse controles de COV (compuestos orgánicosvolátiles) con una periodicidad establecida según los valores encontrados.

- La amplitud de la habitación tiene que ser la adecuada para poder albergartodo el equipo necesario y permitir la movilidad del personal.

- Tener una adecuadas condiciones de luz, temperatura y humedad. Serecomienda el uso de luz de fuentes regulables incandescentes, mejor luzamarilla que blanca, y una temperatura entre 22-25oC.

- Se recomienda usar productos de limpieza diluidos en agua destilada para ellaboratorio y en agua normal para el suelo (p. ej. al 1% el detergente 7xPFCleaning Solution for Laboratory Use (ICN Biomedical)).

- Se recomienda utilizar pinturas tipo “epoxy”, ecológicas o similares con 0%



de contenido en disolventes orgánicos que carezcan de compuestosamoniacales y metales pesados. El suelo se recomienda continuo de linoleumo similar, excepto el suelo del criolaboratorio ya que este tipo de suelo secuartea al contacto con el nitrógeno líquido. Las superficies de trabajo dellaboratorio se recomienda que sean de acero inoxidable, acrilopoliuretano osimilar, deben ser materiales poco porosos y fáciles de limpiar.

- Deben ser seguros y diseñados para minimizar el tráfico en las áreas de trabajo.

- Se recomienda que todo el equipo sea específico para el tipo de laboratorioal que está destinado, además de ser de fácil limpieza y desinfección. Serecomienda limpiar y esterilizar frecuentemente los incubadores, y lostanques de nitrógeno al menos una vez al año.

- Se recomienda el uso de materiales y medios comerciales, con marcado CEcon los controles de calidad adecuados (por ejemplo con embriones de ratóno mediante test de supervivencia espermática).

- En el caso de usarse medios no comerciales se deben cumplir los requisitosnecesarios para este tipo de actividades. Se utilizará agua ultrapura o TipoI, con osmolaridad adecuada (280 ± 10 mosmol/L), libre de endotoxinas, ycon fuentes de proteína no animales. Se deben realizar controles ybioensayos adecuados para garantizar su calidad.

- El equipo y los medios deben usarse siguiendo las normas del fabricante ycumpliendo los protocolos establecidos para ello.

- Todo el equipo tiene que ser revisado y calibrado y/o verificado al menosuna vez al año por personal técnico cualificado, esto debe cumplimentarsecon la documentación adecuada.

- Cualquier manipulación del equipo o los medios debe hacerse siguiendolas normas establecidas para los laboratorios de estas características y estarcorrectamente informado y registrado.

- Es necesario tener una fuente de energía de emergencia independiente conautonomía suficiente, que asegure el funcionamiento de incubadoras,congeladores y demás equipos críticos en el caso de fallo en el suministrogeneral.

- En caso de tener que transportar material biológico o medios de cultivo serecomienda un sistema seguro de transporte que garantice la estabilidad delos componentes.



- Todos los procedimientos de laboratorio, incluidos los referentes a tareasde limpieza y mantenimiento, y cualquier incidencia que pueda darse ha deser informado y registrado. El registro incluirá identificación del profesionalque ha realizado cada procedimiento, así como la fecha y hora del mismo.

- Los protocolos de funcionamiento de cada laboratorio deben estar en un lugarque permita su disponibilidad al personal en cualquier momento, al igual quelas instrucciones de manejo del equipo y preparación de los medios.

- Debe controlarse y registrarse diariamente la temperatura, CO2/pH deincubadoras, estufas y frigoríficos con instrumentos externos a los delaparato. Y tener un sistema de alarma que detecte cualquier anomalía en sufuncionamiento.

- Deben instaurarse programas de control de calidad interno y externo,encaminados a aumentar la precisión y exactitud de los resultados y adisminuir la variabilidad inherente a cualquier técnica de laboratorio.

- Debe utilizarse material desechable en aquellos procedimientos queimpliquen una exposición a tejidos y fluidos corporales. Así mismo, serecomienda disponer de un área que permita la esterilización del materialreutilizable (gradillas, chupetes).

- En caso de realizarse diagnóstico genético preimplantacional serecomienda que exista un área fuera del laboratorio de embriologíadestinado a la fijación del material biopsiado, así como, el aparatajeespecífico correspondiente. Ésta área se recomienda que posea un sistemade ventilación y/o extracción de gases independiente.

3.1 Laboratorio de Andrología

- Debe existir un registro de cualquier incidencia acontecida durante laobtención de la muestra.

- La recogida y análisis de semen debe hacerse siguiendo las recomendacionesde la OMS (1999) o de la ESHRE (2003).

- El laboratorio de andrología se situará lo más cerca posible del lugar en que seva a utilizar la muestra preparada y de la habitación de recogida de la muestra.

- El equipamiento necesario es:

1. Incubadora de CO2 en caso de usar medios tamponados con bicarbonato. Encaso de utilizar medios con otros tampones (HEPES) bastaría con estufa de 37oC.



2. Cabina de flujo laminar.

3. Frigorífico y congelador –20oC.

4. Placas calefactadas.

5. Microscopio con platina calefactada, y con contraste de fases (40x),y objetivo de inmersión (100x).

6. Contador manual multicanal.

7. Botes estériles para la recogida de muestras.

8. Contenedores para desechos y material punzante.

9. Medios para la preparación de la muestra y su tinción.

10. Cámara de recuento celular.

11. Pipetas de desplazamiento positivo.

12. Centrífuga con tapas de seguridad.

3.2 Laboratorio de FIV/ICSI

- Preferiblemente ha de estar cerca o comunicado con el quirófano en el que seva a llevar a cabo la extracción del líquido folicular o transferencia embrionaria,así como del laboratorio de andrología en el que se va a recoger y preparar lamuestra para su posterior utilización en éste.

- Debe tener una superficie mínima de 12 metros cuadrados.

- Se debe garantizar que los oocitos y embriones mantengan una temperaturade 37oC durante todo el proceso de FIV (desde la punción folicular hasta latransferencia de embriones).

- La manipulación del embalaje debe realizarse fuera del laboratorio de embriología.

- Se debe airear todo material fungible destinado al cultivo embrionario antes desu uso para evitar contaminantes producidos durante su fabricación, como porejemplo el estireno.

- El equipamiento necesario es (Tabla III):

1. Se recomiendan como mínimo dos incubadoras con CO2, con un máximo de3 pacientes por incubadora, aunque podría variar en función de su capacidad.



Se recomienda una incubadora más cada 300 ciclos si se realizan transferenciasen d+2 o cada 150 ciclos si se realizan transferencias en d+3. Se recomiendadestinar una incubadora a incubaciones cortas (minutos) y otra a incubacionesprolongadas (horas-días).

2. Cabina de flujo laminar con superficies termocalefactadas o en su defectousar placas calefactadas. Se recomienda al menos dos puestos de trabajo, y unpuesto más cada 300 ciclos.

3. Microscopios invertidos con contraste de fases, óptica de Hoffman o similary pletina calefactada.

4. Sistema de micromanipulación adaptado al microscopio. Se recomienda unequipo cada 300 ciclos al año.

5. Mesa en la que se sitúe el sistema de micromanipulación. Se recomienda queesté provista de un sistema de antivibración.

6. Para la correcta identificación de las muestras y cultivos se utilizaránrotuladores de baja toxicidad, o preferiblemente marcadores de vidrio o etiquetas.En caso de utilizar rotuladores conviene airear antes de introducir en incubadores.

7. No es recomendable pipetear con la boca, mejor usar pipeteadores automáticoscon capilares o pipetas Pasteur. En caso de estirar pipetas Pasteur o capilaresmediante calor se recomienda realizarlo fuera del laboratorio de embriología.

8. Se recomienda utilizar micropipetas automáticas autoclavables.

9. Medios para la manipulación de los cúmulos y oocitos y el cultivo deoocitos/embriones.

10. Estereomicroscopios preferiblemente con placa calefactada.

11. Frigorífico entre +2 y +8oC y congelador -20oC.

12. Contenedores para los desechos y material punzante.

13. Bombonas de CO2 con filtros adecuados y un sistema de aporte continuo deCO2. Se recomienda que estén situadas fuera del laboratorio. También debehaber una bombona de repuesto. Las bombonas de CO2 deberán sustituirsecuando su presión descienda por debajo de 500 psi (35 Kg/cm2).

14. Asientos con altura regulable.

15. Se recomienda ordenador, a ser posible con programa para capturar videos,y monitor adaptables al microscopio.



16. Se recomienda un sistema de filtrado de aire con prefiltro y filtro HEPA. Esaconsejable disponer de un sistema de presión positiva que renueve el aire dellaboratorio al menos 15 veces/hora. La presión positiva del laboratorio respectoa estancias exteriores se recomienda que sea de 5-20 pascales. El techo espreferible que sea liso (para una adecuada limpieza) y sin fugas para manteneruna adecuada presión positiva. También se recomienda la utilización en elsistema central de filtros (carbono activo, permanganato potásico, zeolitas….)para eliminar COV y contaminantes químicos del aire.

Un elevado número de renovaciones de aire tiene la desventaja de dificultar elmantenimiento de las superficies calefactadas. Por ello, una alternativa paraeliminar microorganismos, COV y compuestos inorgánicos sería mantener unatasa de renovaciones de aire más baja (3-4/hora) e introducir en el sistemacentral unidades fotocatalíticas, que convertirían los COV en CO2 y H2O,además de inactivar microorganismos.

3.3 Laboratorio de crioconservación de material biológico reproductivo

- Las condiciones de seguridad deben detectar cualquier escape de nitrógenolíquido o gases. Debe de disponerse de un oxímetro ambiental con sistemade alarma, así como, de un adecuado sistema de ventilación.

- Son necesarios contenedores para el almacenaje de nitrógeno líquido. Debeexistir un registro diario del control de temperatura en las bombonas dealmacenamiento o de los niveles de nitrógeno líquido en estas. Así como, de lareposición del nitrógeno líquido.

- Debe existir un registro de todas las entradas y salidas de materialcrioconservado. Al igual que un registro de cualquier incidencia o fallo en elmétodo y/o proceso de congelación.

- Medios crioprotectores y de descongelación.

- Es necesario garantizar que el material biológico congelado no entre encontacto directo con el nitrógeno líquido, para lo cual se recomienda el uso depajuelas de seguridad biológica o sistemas que eliminen el riesgo decontaminación cruzada.

- Equipo para atemperar las muestras antes de la inmersión en el nitrógeno líquido.

- Debe existir contenedores independientes para el almacenamiento deembriones/ovocitos y para el semen, que deberían estar fuera del laboratorio.

- El equipamiento necesario es:



1. Material para el manejo seguro del nitrógeno líquido (pinzas, tenazas, gafasy guantes) y evitar el contacto con él.

2. Rotuladores y etiquetas (manchones, visotubos) para la identificación delas pajuelas o criotubos, que resistan las temperaturas muy bajas y los largosperiodos de almacenamiento.

3. Criocongeladores que permitan una adecuada programación. Se recomiendaun mínimo de dos congeladores, o en su defecto uno si el laboratorio tieneconocimientos y experiencia en técnicas alternativas de criopreservación que norequieran de un aparataje especial como por ejemplo la vitrificación. Serecomienda un criocongelador cada 1000 congelaciones al año.

3.4 Manejo de medios

- Se recomienda que se realice en un área que se encuentre próximo a la zonaen que se van a utilizar.

- Todos lo medios tienen que estar en perfectas condiciones, totalmenteprecintados y con los certificados de análisis y control de calidad del fabricante.

- Cualquier entrega de medios tiene que ser verificada, y tener la seguridad deque no se ha roto la cadena de frío.

- El lugar de almacenaje y preparación de los medios debe tener las condicionesnecesarias para asegurar la conservación y manipulación correcta de los mismos.

- Hay que llevar un registro de la entrada y salida de los lotes, así como de cualquierincidencia ocurrida durante su transporte, almacenamiento o procesado posterior.

- Los medios deben prepararse bajo condiciones de esterilidad.

3.5 Área del personal de laboratorio

Es el área a través de la cual se accede a la zona de los laboratorios. Losrequerimientos son:

- Es recomendable que esté cerca de los laboratorios.

- Debe contener vestuarios con taquillas y aseos.

- El personal dejará sus pertenencias en las taquillas y cambiará suvestimenta por pijama, zuecos y gorro desechable para evitar cualquier tipode contaminación procedente del exterior en el laboratorio.



- Los pijamas se depositan a la salida en unos contenedores dispuestos paraellos, al igual que los gorros.

- Toda persona que acceda al laboratorio debe estar autorizada y seguir lasnormas de higiene, que estarán a la vista.

- Toda entrada y salida de personal no autorizado tiene que estar registrada.

TABLA I.- Recursos humanos en el laboratorio de reproducción. Funciones ynúmero de profesionales



TABLA II.- Recursos humanos en el laboratorio de reproducción. Formacióny experiencia

TABLA III.- Cantidad recomendada de equipos en el laboratorio de FIV/ICSIsegún actividad



ANEXO I. PROCESADO DE MUESTRAS DE PACIENTES CONENFERMEDADES INFECCIOSAS TRANSMISIBLES

Al contrario que en otros laboratorios clínicos (microbiología, análisis,inmunología), donde las muestras biológicas tras su uso son desechadas, granparte del material biológico que se maneja en el laboratorio de reproducción espara uso clínico. Esto obliga a tomar medidas de seguridad específicas a la horade manejar muestras de pacientes con enfermedades infecciosas transmisibles.Estas medidas tienen por objeto no sólo la protección de los trabajadores, sinola eliminación (en la medida de lo posible) de la contaminación cruzada entrepacientes, la transmisión vertical y el contagio entre ambos miembros de lapareja. Entre los aspectos a tener en cuenta en la atención a los deseosreproductivos de estos pacientes se encuentran:

1. Debe realizarse por equipos multidisciplinares de profesionales que englobenentre otros microbiólogos, y clínicos especialistas en enfermedades infecciosas.

2. El riesgo de transmisión de la enfermedad se minimiza mediante las técnicasde reproducción asistida pero no se anula.

3. Debe existir una separación temporal entre el material biológico de estospacientes y el resto de pacientes.

4. Todos los equipos pueden ser compartidos por estos pacientes en tiemposdiferentes, excepto las bombonas de almacenamiento de nitrógeno líquido, quedeben ser de uso exclusivo para estos pacientes. En el caso de los incubadores serecomienda que sean de uso exclusivo, pero si no existe otra opción se puedendestinar las últimas bandejas de las mismas para el uso de estos pacientes.

5. Las punciones de estos pacientes deben realizarse en último lugar de la listade trabajo diaria.

6. La limpieza de los aparatos que se compartan con otros pacientes (Campanade flujo laminar vertical, microscopios) debe ser especialmente cuidadosa paragarantizar la eliminación de los virus. Se recomienda el uso de desinfectantesoxidativos que no contengan alcohol (cloro activo a muy baja concentración,dióxido de cloro, ozono, peróxido de hidrógeno).

7. Para la protección del personal se recomiendas equipos de protecciónbiológica individual (utilizar gafas, mascarillas, dobles guantes).

8. Se deben evitar los pipeteos con la boca y los instrumentos cortantes.

9. En el caso de varones seropositivos se recomienda una técnica de lavado desemen validada que garantice la no detección del virus.



10. En el caso de mujeres seropositivas se recomiendan lavados de los oocitosmás exhaustivos.

11. En el caso de congelar embriones en este tipo de pacientes se recomienda el usode pajuelas de seguridad biológica. También podría ser eficaz el uso de tanques denitrógeno secos o la utilización de contenedores de nitrógeno independientes.

ANEXO II. PLAN DE FORMACIÓN PARA LOS NUEVOS MIEMBROSDEL PERSONAL DEL LABORATORIO DE FIV

Se indica el número de casos necesarios para pasar de un nivel de formación a otro superior. Estos númerosdeben ser adaptados por cada centro según su actividad.

Adaptado de:Keck, Staff management in the in Vitro fertilization laboratory. Fert Steril 2005. De los Santos, MJ (comunicación personal)



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Las leyes y reales decretos sobre las que se basan algunos aspectos de estasrecomendaciones pueden encontrarse en el área de legislación de la página web deASEBIR (www.asebir.com).


NOTAS


Imagen de portada: Prezigoto Humano.

“Si los cuidamos bien, ellos nos darán muchas alegrías”.

I. Recomendaciones sobre Recursos Humanos y Físicospara el Laboratorio de Reproducción.

CUADERNOSDE EMBRIOLOGÍA CLÍNICA

EDITA:

JUNTA DIRECTIVA

Mark Grossmann

Mª Victoria Hurtado de Mendoza

Nieves Cremades

Manuel Ardoy

Mª José de los Santos

Begoña Arán

Jorge Cuadros

Fernando Marina

Jorge Ten

Montserrat Boada

María Bonada

Antonio Urries

con la colaboración de:

i cuaderno de embriología clínica

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