hematoxilina de harris

Hematoxilina Hematoxilina de Harrisde Harris

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HemateinaHemateina

HEMATOXILINA DE HARRISHEMATOXILINA DE HARRIS

Es la Hematoxilina mas utilizada en la coloración rutinaria de los núcleos celulares, debido a:

a) Su estabilidad (se conserva entre 6 y 12 meses) b) Su facilidad de manejo.


Es una “Coloración RegresivaColoración Regresiva”: Primero se sobrecolorea.. .

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Luego se retira el exceso de colorante por “Diferenciación”

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PROCEDIMIENTO TECNICO

Hematoxilina ( cristalizada ) 1 grEtanol absoluto 10 mL

Disolver calentando suavemente

Alumbre Potasico o Amonico 20 grAgua destilada 200 mL

Disolver en caliente. Añadir la solución de Hematoxilina y llevar a ebullición. Cuando comienza a hervir se añade:

Oxido Rojo de Mercurio 0,5 gr

OXIDACIÓN DE LA HEMATOXILINA DE OXIDACIÓN DE LA HEMATOXILINA DE HARRISHARRIS

Hay que tener en cuenta el tipo de “Disolvente” en que se encuentra la solución de Hematina. Las soluciones de Hematina acuosas y de carácter Básico se sobreoxidan y aceleran la oxidación.

Las soluciones de Hematina alcohólicas y de carácter Ácido poseen mayor duración y retardan la oxidación.

HemateinaHemateina

HemateinaHemateina HemateinaHemateina HemateinaHemateina

HemateinaHemateina HemateinaHemateina

HH22OO HH22OO HH22OO

OHOH OHOHOHOH

AG

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ALC

OH

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ALC

OH

OL


Tras la oxidación de la Hematoxilina se debe incrementar su capacidad tintorial agregándole determinados Grupos AuxocromosGrupos Auxocromos que, además le confieren un carácter fuertemente Básico y son los responsables de su especificidad por los núcleos celulares. El más utilizado: Alumbre de Potasio

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HematoxilinaHematoxilina HemateinaHemateina

-OH-OH ==OO

+ + OO22


Este proceso oxidativa que puede ocurrir naturalmente en contacto con el Oxígeno Atmosférico a lo largo de 4 a 6 semanas, o ser inducido de forma artificial a través del empleo de agentes químicos de carácter oxidante. El más utilizado: Oxido Rojo de Mercurio



Dejar disolver el oxido removiendo lentamente hasta que la solución adquiera color púrpura. Sumergir inmediatamente en agua fría. Cuando la solución se haya enfriado, filtrar y añadir.

Ácido Acético Glacial 10 mL

Observaciones

Filtrar de nuevo antes de usarla. Almacenar en frasco opaco bien cerrado. Tiempo medio de tinción entre 1 y 2 minutos.


Hay que tener en cuenta el tipo de “Disolvente” en que se encuentra la solución de Hematina. Las soluciones de Hematina acuosas y de carácter Básico se sobreoxidan y aceleran la oxidación.

Las soluciones de Hematina alcohólicas y de carácter Ácido poseen mayor duración y retardan la oxidación.

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