guia practica 2012[1]

USMP – FILIAL NORTE - MEDICINA HUMANACURSO: EMBRIOLOGÍA Y GENÉTICA

UNIVERSIDAD DE SAN MARTÍN DE PORRES

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BÁSICAS

ASIGNATURA: EMBRIOLOGÍA Y GENÉTICA HUMANA

GUIA DE PRÁCTICAS

Coordinadora de la Asignatura

Dra. Karina Elizabeth Torres Villalba.

Responsable: Dr. Cesar Ibaceta Tello.

SEGUNDO AÑO

I - SEMESTRE

2012

CHICLAYO - PERU

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PROLOGO

La Facultad de Medicina Humana de la Universidad de San Martín de Porres, presenta a ustedes, estimados Alumnos y Profesores, la Guía de Prácticas de Embriología y Genética.

La presente Guía ha ido mejorando en forma progresiva, hemos ido actualizando su contenido y hemos incluido los últimos avances a nivel científico de la Embriología y Genética. Cierto es que las Ciencias Básicas están ocupando el lugar trascendente que le corresponde dentro de la formación de nuevos Médicos.

La ontogenia y la filogenia se enriquecen cuando aparecen nuevos estudios experimentales que aportan nuevos conocimientos y conceptos, los cuales debemos incorporar en cada Semestre.

En esta especialidad se cifra la esperanza de la terapia génica, la que podría terminar con un sinfín de enfermedades con representación cromosómica. El futuro es muy prometedor.

Creemos a no dudarlo, que esta nuestra versión de la Guía de Practicas de Embriología y Genética irá mejorando semestre a semestre porque hay una razón para ello, los conocimientos van apareciendo día a día y debemos estar permanentemente actualizados.

Profesor Responsable de la AsignaturaEmbriología y Genética USMP

CHICLAYO

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INTRODUCCION

Una de las Ciencias Básicas que más notablemente ha avanzado es la Embriología y la Genética.

De otro lado, la información bibliográfica es de tal proporción, que faltarían horas para mantenerse actualizado permanentemente. A la fecha hay más de 200 textos de Embriología y de Genética, cada uno de ellos más completo y complejo.

La Cátedra de Embriología y Genética, comprendiendo que es importante aprovechar bien el tiempo, ha elaborado esta Guía para evitar las Clases teóricas, a veces largas y tediosas.

Les presentamos en forma resumida, las Prácticas de Embriología y Genética, que tienen las características de ser semielaboradas, de uso personal y con un cuestionario al final de cada Práctica, con la finalidad de poder asegurar los conceptos básicos vertidos durante la práctica y la teoría. Se adjunta una pequeña bibliografía, no obstante en nuestra biblioteca tiene otros textos.

No debemos dejar de nombrar a los artífices de esta Guía de Prácticas, quienes con entusiasmo se han motivado a publicar esta ayuda al interesante proceso de Enseñanza - aprendizaje. Son Docentes jóvenes, ávidos de transmitirles parte de su conocimiento y experiencia. Todos son especialistas en distintas ramas de la medicina, Pediatría, Cirugía, Gíneco-obstetricia y biólogos. Ellos se han fusionado y el producto es esta Guía de Prácticas renovada y actualizada.

Chiclayo, Marzo 2012.

Los Autores

AUTORES

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PRACTICA N° 01

APARATO GENITALGAMETOGENESIS: OVOGENESIS/ ESPERMATOGENESIS

COMPETENCIAS1. Refuerza los conocimientos teóricos en el origen, evolución y morfología de las

estructuras secuenciales en el desarrollo de la gametogénesis.2. Integra los eventos morfológicos del ciclo ovárico con su regulación hormonal.3. Reconoce microscópicamente los distintos tipos de folículos del ovario adulto,

relacionándolos con la capacidad de secreción de hormonas.4. Reconoce microscópicamente las diferentes células de la serie espermática y del

espacio intersticial y su capacidad de secreción de hormonas.5. Identifica y esquematiza las diferentes estructuras en el desarrollo de la

espermatogénesis.

MATERIALES1. Guía de práctica2. Microscopio óptico3. Lámina de preparado histológico de ovario (HE).4. Lámina de preparado histológico de testículo (HE).

PROCEDIMIENTOMediante la observación microscópica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconocer la secuencia evolutiva celular gametogenética.

OVARIO Epitelio ovárico: Células cúbicas simples. Corteza ovárica: Folículos en diferentes estadios de maduración. Médula ovárica: Zona Central. Folículo primordial: Ovocito primario (46 cromosomas), 1 capa de células

epiteliales planas. Folículo primario: 1 capa de células epiteliales cúbicas.

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Folículo en crecimiento: Más de 1 capa de células cúbicas (células foliculares o de la granulosa). Zona pelúcida, lagunas foliculares, teca interna estrógeno), teca externa.

Folículo de De Graff: Folículo maduro preovulatorio (23 cromosomas). Antro folicular (licor folicular), cúmulos oophorus. Tecas.

Cuerpo amarillo: progesterona. Cuerpo albicans: cuerpo amarillo degenerado. Folículos atrésicos: Folículos en crecimiento degenerados.

PREGUNTAS – 11. Realice un esquema nominativo del folículo primordial, primario y en

crecimiento.2. Realice un esquema nominativo del folículo de De Graff.3. ¿Dónde se producen los estrógenos y la progesterona?4. ¿De qué hormonas depende el ciclo ovárico?5. ¿Cuándo se completa la primera división meiótica y cuándo la segunda

división meiótica?

TESTICULO Albugínea Zona cortical Zona medular: Tubos seminíferos y espacios intersticiales Tubos seminíferos: Secuencia evolutiva de la espermatogénesis.

o Membrana propia del tubo seminífero (pared del tubo seminífero)o Espermatogonio: 46 cromosomas. Adosados a la pared.o Espermatocito I: 46 cromosomas. Más voluminosas. Núcleo fibrilar o

granular. División celular.o Espermatocito II (2): 23 cromosomas. Fugases.o Espermatide (4). 23 cromosomas. Redondeadas o alargadas.

Espermiogénesis.o Espermatozoides (4): 23 cromosomas. Luz del tubo seminífero.o Células de Sertoli: Células sustentaculares. Citoplasma triangular con

basas hacia la pared. Espacio intersticial:

o Células de Leydig: Testosterona.o Fibroblastos.o Vasos sanguíneos (capilares, vénulas).

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PREGUNTAS – 21. Realice un esquema nominativo del ciclo evolutivo de la espermiogénesis.2. ¿Qué es la espermiogénesis?3. ¿Cuál es la importancia de las células de Leydig?4. Colocar el número de cromosomas:

Espermatogonio ( ) Espermatocito I ( ) Espermatocito II ( ) Espermatide ( ) Espermatozoide ( )

5. ¿Cuántos espermatozoides derivan de un espermatogonio?.

BIBLIOGRAFIA1. LANGMAN, Jan. Embriología Médica. Ed. Interamericana, 8va edición. 2000.2. MOORE, Persaud. Embriología Clínica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta.

Edición. 1999.3. DI FIORI. Atlas de Histología.

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PRACTICA N° 02

CICLO UTERINO - ENDOMETRIO

COMPETENCIAS1. Recuerda los conocimientos teóricos relacionados al ciclo uterino.2. Relaciona el ciclo ovárico con el ciclo uterino y su regulación hormonal.3. Conoce las fases por las que atraviesa el endometrio durante el ciclo uterino de

una mujer adulta.4. Observa las características de la mucosa uterina en distintos periodos del ciclo

endometrial y relaciona con su regulación hormonal.5. Juzga la importancia de la regulación hormonal en el ciclo uterino.

MATERIALES1. Guía de práctica.2. Microscopio óptico.3. Láminas de preparados histológicos de endometrio en fase proliferativa y

secretora (HE).

PROCEDIMIENTOMediante la observación microscópica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconoce las características del endometrio en fase proliferativa y secretora.

Fase proliferativa: Capas del útero: Endometrio, miometrio y parametrio. Epitelio endometrial: Células cilíndricas.

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Capa funcional: Glándulas en corte tansversal, oblicuo y longitudinal, lumen regular, aspecto tubular, escasa secreción en su interior. Corion (estroma endometrial): Espacios interglandulares.

Capa basal. Miometrio.

Fase secretora: Glándulas tortuosas, lumen irregular en “diente de serrucho”. Secreción en el

lumen. Corion o estroma endometrial, con infiltrado polimorfonuclear.

PREGUNTAS1. ¿Cuáles son las fases del ciclo uterino?2. ¿De qué hormonas depende cada una de estas fases?3. ¿Cuáles son las características del endometrio en fase proliferativa?4. ¿Cuáles son las características del endometrio en fase secretora?5. ¿Qué pasa con el endometrio cuando se produce una gestación?

BIBLIOGRAFIA

1. LANGMAN, Jan. Embriología Médica. Ed. Interamericana, 8va edición. 2000.2. MOORE, Persaud. Embriología Clínica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta.

Edición. 1999.3. DI FIORI. Atlas de Histología.

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PRACTICA N° 03FETOMETRIA: DETERMINACION DE LA EDAD GESTACIONAL

COMPETENCIAS1. Conoce la duración del embarazo en semanas, días, meses lunares y meses

solares.2. Analiza y aplica los métodos para determinar la edad gestacional.3. Distingue las características más relevantes del feo humano desde los 2

meses hasta el término de la gestación.4. Valora la importancia de la determinación de la edad gestacional en el control

del embarazo.5. Juzga la importancia del reconocimiento de los rasgos morfológicos externos

del embrión y feto y los relaciona con la edad gestacional.

MATERIALES1. Guía de practica2. Maqueta con modelos de embriones y fetos humanos en diferentes etapas de

gestación.3. Fetos humanos en distintas edades.

PROCEDIMIENTOEdad gestacional extra útero

1. Por longitud del embrión y feto (LCN/LCT)2. Por características morfológicas externas.

PREGUNTAS

1. Escriba las principales características externas de un feto de:a. 12 semanasb. 20 semanasc. 28 semanasd. 32 semanase. 40 semanas

BIBLIOGRAFIA1. LANGMAN, Jan. Embriología Médica. 2001.2. MOORE Persaud. Embriología Clínica. 1999.3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000.4. MONGRUT. Tratado de Obstetricia. 1998.

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EDAD GESTACIONAL

AUMENTO DE LONGITUD Y PESO DURANTE EL PERIODO FETAL

EXTRAUTERO

3° SEMANA: CICLO MESTRUAL REGULAR (28 DIAS) FERTILIZACION (INICIO 3° SEMANA) IMPLANTACION (7 DIAS DESPUES) “SANGRADO POR NIDACION”

4° SEMANA

FINAL 4° SEMANA: EMBRION VISIBLE (SIMPLE VISTA) VELLOSIDADES CORIALES (FUTURA PLACENTA) CONTACTO CON

SANGRE MATERNA. INICIA PRODUCCION DE HGC.

5° SEMANA 10 mm. SACO AMNIOTICO IDENTIFICABLE (POCOS ml. DE LIQUIDO AMNIOTICO) SN PRIMITIVO (CEREBRO/MEDULA ESPINAL) CORAZON PRIMITIVO)

6° SEMANA 13 mm. SINTOMAS/ HCG + / ECO + /EX. GINECOLOGICO INICIA FORMACIN DE ORGANOS OJOS, PABELLONES AURICULARES, FOSAS NASALES: ESBOZOS BROTES DE BRAZOS Y PIERNAS CORAZON PRIMITIVO INICIA LATIDOS

7° SEMANA CABEZA MÁS HUMANA. INCLINACION ADELANTE OJOS YA FORMADOS ESBOZO DE NARIZ. VENTANILLAS NASALES MANDIBULA Y BOCA EMPIEZA APARICION

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EDAD LCN LCT PESOSemanas Meses Lunares cm cm g

09 –12 3 5 – 8 10 10 – 4513 – 16 4 9 – 14 16 60 – 20017 – 20 5 15 – 19 25 250 – 45021 – 24 6 20 – 23 30 500 – 82025 – 28 7 24 – 27 35 900 – 130029 – 32 8 28 – 30 41 1400 – 210033 – 36 9 31 – 34 45 2200 – 290037 – 40 10 35 – 36 50 3000 – 3400


BRAZOS Y PIERNAS BIEN IDENTIFICABLES.

8° SEMANA CASI TODOS LOS ORGANOS PRINCIPALES ESTAN FORMADOS. CABEZA MUY GRANDE (CEREBRO CRECE RAPIDO) PRIMEROS MOVIMIENTOS (ECO). EX. GINECOLOGICO: +

9° A 12° SEMANAS: (FETO) 10 cm. FINAL 10 s.: PABELLON A. INICIA CRECIMIENTO (FIN 12 s.: ADULTO) CABEZA GRANDE (1/2 LONGITUD CORONO-NALGA). PARPADOS UNIDOS. BRAZOS Y PIERNAS VISIBLES. DEDOS UNIDOS. ABDOMEN ABULTADO. GENITALES EXTERNOS DIFERENCIADOS. LF (DOPPLER).

13° A 16° SEMANAS 15 cm / 120 gr. CABEZA HA ENDEREZADO. CUERPO COMIENZA A ERGUIRSE. CEJAS Y PESTAÑAS. OREJAS DESPEGADAS DE LA CABEZA. CUERPO ROSADO PALIDO. APARECE LANUGO (VELLO FINO EN TODO EL CUERPO). DEDOS DE MANOS Y PIES SEPARADOS. UÑAS INICIAN DESARROLLO.

17° A 20° SEMANAS 25 cm. / 300 gr. LF (PNARD). MOVIMIENTOS FETALES (MULTIPARA: 17-18 s.). CABELLO COMIENZA A CRECER. CABEZA 1/3 LONGITUD CORONO - TALON. LANUGO EN TODO EL CUERPO. UÑAS BIEN DEFINIDAS.

21° A 24° SEMANAS 30 cm. / 600 gr. PIEL ARRUGADA (POCA GRASA SUBCUTANEA) CEJAS PESTAÑAS CRECEN. PARPADOS SEPARADOS (CERRADOS). VERNIX CASEOSO (SUST. GRASOSA DE GLANDULAS DE PIEL).

25° A 28° SEMANAS 35 cm. / 1000 gr. PIEL MENOS ARRUGADA (MAS GRASA SUBCUTANEA). VERNIX CASEOSO CUBRE TODO EL CUERPO. OJOS ABIERTOS. CABELLO ABUNDANTE. SI NACE: 80 % SUPERVIVENCIA.

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29° A 32° SEMANAS 41 cm. / 1700 gr. PIEL ESTIRADA (ACUMULO DE GRASA. UÑAS LLEGAN A YEMAS DE DEDOS. TESTICULOS EN ESCROTO. MAYOR POSIBILIDAD DE SUPERVIVENCIA.

33° A 36° SEMANAS 45 cm. / 2500 gr. DESAPARECEN ARRUGAS DE PIEL (DEPOSITO DE GRASA +++). LANUGO COMIENZA A CRECER. CABEZA ¼ LONGITUD CORONO – TALON. HUESOS DE CRANEO AUN BLANDOS. UÑAS HASTA PUNTA DE DEDOS. 95% SUPERVIVENCIA.

37° A 40° SEMANAS 50 cm. / 3200 A 3500 gr. CRECIMIENTO Y DESARROLLO COMPLETO. LANUGO SOLO EN ESPALDA Y HOMBROS. VERNIX CASEOSO DISMINUYE. CIRCUNFERENCIA CEFALICA: 34 cm. UÑAS SOBREPASAN YEMAS DE DEDOS. TESTICULOS EN ESCROTO (XY). LABIOS MAYORES CUBREN LABIOS MENORES (XX).

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PRACTICA N° 04

PLACENTA MACROSCÓPICA Y CORDON UMBILICAL

COMPETENCIAS1. Aplicar los conocimientos teóricos relacionados con el origen, los

componentes materno y fetal, las funciones e importancia de la placenta.2. Diferencia la cara fetal, donde se inserta el cordón umbilical, de la cara

materna, donde se encuentran los cotiledones.3. Describe la forma, peso y dimensiones de la placenta.4. Observa, compara y describe las características anatómicas de la placenta,

tanto en la cara fetal como en la cara materna.5. Clasifica y describe la inserción del cordón umbilical.6. Clasifica y describe anomalías placentarias.7. Valora la importancia del examen placentario con aplicación para la salud

materna fetal: calcificaciones, cotiledones.8. Observa, compara y describe las características ecográficas de la placenta, a

través de videos ilustrativos del estado intrauterino de l placenta.

MATERIALES1. Guía de práctica.2. Placentas macroscópicas frescas.3. Placentas fijadas en formol.4. video de ecografías de la ubicación de la placenta5. Guantes, tijeras, pinzas (equipo de disección)6. Balanza y cinta métrica.

PROCEDIMIENTOObservación macroscópica

Previa colocación de guantes, procede a examinar la placenta diferenciando las caras materna y fetal.

Describe la forma de la placenta. Pesa y mide la placenta. Describe a inserción del cordón umbilical y características de la cara fetal. Describe las características de la cara materna: surcos, cotiledones.

PREGUNTAS1. ¿Cuáles son los componentes de la placenta?2. ¿Cuáles son las funciones de la placenta?3. ¿Qué cantidad de sangre circula por la placenta a término?4. ¿Qué es la placenta acreta?5. Diferencia entre placenta increta y percreta.

BIBLIOGRAFIALANGMAN, Jan. Embriología Médica. Ed. Interamericana, 8va edición. 2000.MOORE, Persaud. Embriología Clínica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edición. 1999.WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 1996

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PLACENTA MICROSCOPICA

COMPETENCIAS1. Aplica los conocimientos teóricos relacionados con el origen, los

componentes materno y fetal, la circulación y la membrana placentaria.2. Describe las características de la lámina corial.3. Describe las características de la cara materna o desidua basal.4. Observa, compara y describe las características de los troncos de las

vellosidades coriales: primero, segundo y de tercer orden.5. Reconoce los componentes de las vellosidades coriales.6. Identifica y describe el espacio intervelloso, así como el contenido.7. Describe los componentes de la Membrana Placentaria.

MATERIALES1. Guía de practicas2. Microscopio óptico3. Láminas de preparados histológicos de placentas fijadas y coloreadas con

Hematoxilina-Eosina, que comprendan desde la cara materna a la cara fetal de la placenta.

PROCEDIMIENTOObservación microscópica

Mediante la observación microscópica con diferentes lentes objetivo (x5, x10 y x40) reconoce las características microscópicas de la placenta.

CARA FETAL Reconocer la membrana amniótica o amnios que recubre la Lámina o Placa

corial, en la que se encuentran los vasos coriales. Identificar y diferenciar los troncos de las vellosidades coriales.

Características, componentes. Reconocer las vellosidades coriales libres, componentes y membrana

placentaria. Espacio intervelloso y sangre materna.

CARA MATERNA Reconocer la desidua basal y las células que las componen. Diferenciar los componentes y estructuras con respecto a la cara fetal. Identificar vellosidades de anclaje.

PREGUNTAS1. ¿Qué es la decidua?. Tipos.

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2. ¿Qué hormonas produce la placenta?3. ¿Qué características tiene la placa corial?4. ¿Cómo están formadas las vellosidades coriales?5. ¿Cómo está formada la membrana placentaria? ¿Qué importancia tiene?

BIBLIOGRAFIA


Edición. 1999.3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 1996.

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PRACTICA N° 05

OBSERVACION DE EMBRIONES: SISTEMA NERVIOSO CENTRALY MASCARILLA FETAL 1.

INTRODUCCION:Se denomina embrión al producto de la concepción entre la cuarta y octava semana de desarrollo y es aquí donde se aprecia cambios en la formación definitiva del futuro ser. Observaremos la cabeza y el sistema nervioso comprendido dentro de ella.

COMPETENCIAS:1. El alumno observará en el embrión los órganos que se encuentran en el tórax,

cabeza y sistema nervioso.2. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodérmico de las

estructuras observadas3. Elabora una lista de los cambios más importantes de los órganos y su destino

final4. Confecciona un esquema en su cuaderno de prácticas de un corte longitudinal y

trasversal del embrión.5. Compara los órganos del embrión, feto y adulto.

MATERIAL Y METODOSSe observará al microscopio cortes histológicos de embriones en la parte que corresponde a la cabeza y sistema nervioso central. Se observará videos con contenido de ecografías de estructuras normales del sistema nervioso central.

PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introducción sobre el desarrollo de la práctica. Se dibuja en el pizarrón un esquema de lo que se va ha observar como

también se observa los cortes histológicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio.

Seguidamente los alumnos observan los cortes histológicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras más importantes, determinando su origen, su función, a que órgano dará lugar y cuando termina su maduración.

Por ultimo reconocerá estructuras a nivel ecográfico y compara con lo visto anteriormente.

CABEZA Y SISTEMA NERVIOSO Estomodeo: es la boca primitiva que se aprecia un poco más arriba del tórax

identificando la lengua y al final de ella el repliegue de la epiglotis y por detrás el inicio del esófago. En la parte central de la cabeza se identifica los canales semicirculares que corresponden al oído interno.

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Cabeza: en la parte mas superior se aprecia las cavidades que corresponden a los ventrículos cerebrales en cuyo interior se aprecian formaciones arbóreas que corresponde a los plexos coroideos.

El sistema nervioso primitivo se encuentra de adelante hacia atrás el prosencéfalo, mesencéfalo y rombencéfalo con el IV ventrículo.

Ojo: tiene la forma de un cáliz donde se aprecia la retina con su parte nerviosa y pigmentaria. En el centro una esfera fuertemente coloreada que es el cristalino

CUESTIONARIO1. Qué estructuras origina el prosencéfalo, mesencéfalo, rombencéfalo.2. ¿De donde se origina el cristalino?

BIBLIOGRAFÍA

1. LANGMAN JAN “Embriología Médica”. 8ava Edición. Editorial Interamericana 2000

MOORE PERSAUD “Embriología Clínica”. Sexta Edición. McGraw Hill Interamericana 1999

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OBSERVACION DE EMBRIONES: SISTEMA NERVIOSO CENTRALY MASCARILLA FETAL 2.

INTRODUCCION:Se culminará esta sección observando los órganos de los sentidos como ojo y oído, así como un breve repaso del sistema nervioso comprendido dentro de ella.

COMPETENCIAS:6. El alumno observará en el embrión los órganos que se encuentran en el tórax,

cabeza y sistema nervioso.7. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodérmico de las

estructuras observadas8. Elabora una lista de los cambios más importantes de los órganos y su destino

final9. Confecciona un esquema en su cuaderno de prácticas de un corte longitudinal y

trasversal del embrión.10.Compara los órganos del embrión, feto y adulto.

MATERIAL Y METODOSSe observará al microscopio cortes histológicos de embriones en la parte que corresponde a la cabeza y sistema nervioso central. Se observará videos con contenido de ecografías de estructuras normales del sistema nervioso central.




Por ultimo reconocerá estructuras a nivel ecográfico y compara con lo visto anteriormente.

BIBLIOGRAFÍA

LANGMAN JAN “Embriología Médica”. 8ava Edición. Editorial Interamericana 2000 MOORE PERSAUD “Embriología Clínica”. Sexta Edición. McGraw Hill Interamericana 1999

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PRACTICA N° 07

OBSERVACIÓN DE EMBRIONES: ABDOMEN Y MÉDULA

COMPETENCIAS1. Explica y ubica el origen de los órganos derivados del tubo intestinal, observados

en el embrión2. Conoce las relaciones existentes de las asas intestinales entre sí en el embrión3. Reconoce y describe las glándulas anexas al aparato digestivo: origen,

características y relaciones con otras partes del tubo digestivo.

MATERIALES1. Guía de prácticas.2. Microscopio óptico3. Laminas de preparados histológicos de embriones de cerdo coloreados con

hematoxilina-eosina, que comprendan desde la cavidad oral hasta el proctodeum. Se realiza el estudio en cortes longitudinales y transversales.

4. imágenes ecográficas de estructuras ubicadas en cavidad abdominal.

PROCEDIMIENTO Observación microscópica Mediante la observación microscópica con diferentes lentes y objetivos (x5,

x10 y x40) reconoce mediante las características microscópicas del preparado embriológico

Observan el septum transversum y su relación con el hígado Identificar el estomago y las asas intestinales. Observar sus relaciones y

recordar su origen embriológico. Observar y describir la medula espinal: Meninges, capa de la medula,

epéndimo, ganglios y nervios raquídeos. Observe y compare las estructuras mostradas en imágenes ecograficas.

PREGUNTAS1. ¿De que capa embrionaria proviene el hígado?. Estructuras formadas a partir de

cada una de ellas.2. ¿Dónde se forma la placa basal y placa alar de la médula espinal? Importancia.3. ¿Cómo se forma el páncreas anular?4. ¿Qué malformaciones pueden presentarse en el desarrollo del tubo intestinal?

BIBLIOGRAFÍA


Edición. 1999.3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000.4. S.W.GRAY & J.E. SKANDALAKIUS. Embriogenesis, diagnostico y tratamiento.

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PRÁCTICA N° 08OBSERVACION DE EMBRIONES: MESONEFROS, METANEFROS, RIÑON ADULTO.

COMPETENCIAS

1. Reconoce y diferencia diferentes estados de desarrollo aparato urinario, así como su importancia.2. Diferencia las gónadas y las glándulas suprarrenales3. Identifica y relaciona los conductos genitales (mesonefrico y paramesonefrico)

del embrión y su diferenciación.

MATERIALES1. Guía de prácticas.2. Microscopio óptico3. Laminas de preparados histológicos de embriones de cerdo coloreados con

hematoxilina-eosina, que comprendan desde la cavidad oral hasta el proctodeum. Se realiza el estudio en cortes longitudinales y transversales.

Imágenes ecográficas de estructuras ubicadas en cavidad abdominal

PROCEDIMIENTO Observación microscópica Mediante la observación microscópica con diferentes lentes y objetivos (x5,

x10 y x40) reconoce mediante las características microscópicas del preparado embriológico

Observar las diferencias entre mesonefros y metanefros, así como la de sus conductos y recordar las estructuras a que dan origen.

Observe y compare las estructuras mostradas en imágenes ecográficas.

PREGUNTAS

1.¿Qué importancia tiene el metanefros?. ¿Como se diferencian los conductos de Wolf y de Muller?

2. Describa las estructuras observadas en las imágenes ecográficas.

BIBLIOGRAFÍA


Edición. 1999.7. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000.8. S.W.GRAY & J.E. SKANDALAKIUS. Embriogenesis, diagnostico y tratamiento.

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PRÁCTICA N° 09, 10 Y 11

OBSERVACION DE EMBRIONES: TORAX. CORAZON, VASOS SANGUINEOS, ARBOL BRONQUEAL Y PULMONES

INTRODUCCION:Se denomina embrión al producto de la concepción entre la cuarta y octava semana de desarrollo y es aquí donde se aprecia cambios en la formación definitiva del futuro ser. Observaremos la cavidad torácica, y lo comprendido dentro de ella.

COMPETENCIAS:11.El alumno observará en el embrión los órganos que se encuentran en el tórax,

cabeza y sistema nervioso.12.Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodérmico de las

estructuras observadas13.Elabora una lista de los cambios más importantes de los órganos y su destino

final14.Confecciona un esquema en su cuaderno de prácticas de un corte longitudinal y

trasversal del embrión.15.Compara los órganos del embrión, feto y adulto.

MATERIAL Y METODOSSe observará al microscopio cortes histológicos de embriones en la parte que corresponde al tórax, cabeza y sistema nervioso central.




TORAX: Se observa:

Corte longitudinal: Corazón: Aurículas de paredes delgadas,ventrículos paredes gruesas

musculosas y los músculos pectineos, pericardio Pulmón: Bronquios, pleura. Septum trasverso que forma el diafragma.

Corte trasversal: De atrás hacia adelante médula espinal y cuerpo vertebral, luego orificio de la

traquea con su cartílago hialino, esófago, grandes vasos aorta, pulmonar, carótidas. Más adelante el corazón con sus cavidades ya mencionadas.

En las paredes laterales se aprecia el cartílago hialino de las costillas y el esternón.

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PRÁCTICA N° 12

EL ARBOL GENEALÓGICO FAMILIAR, HEREDOGRAMA O PEDIGRÍ

El árbol genealógico, heredograma o pedigrí es un diagrama que representa la línea de antecesores y que incluye una compilación cuidadosa de los registros fenotípicos de una familia en varias generaciones.

COMPETENCIAS

1. Introduce a la forma cómo se investiga la herencia de los caracteres genéticos, enfermedades genéticas (¿cómo se heredan?, ¿Son dominantes?, ¿Son recesivos?, ¿Son mendelianos?, etc.)

2. Usa la simbología característica en la elaboración del árbol genealógico.3. Construye un árbol genealógico real utilizando como material de investigación a

su grupo familiar.

MATERIALES1. Hoja cuadriculada tamaño A4.2. Lápiz y borrador.3. Simbología para la elaboración del árbol genealógico familiar (hoja adjunta).

PROCEDIMIENTOEl estudio se inicia con la persona o propósitus (la persona que acude al médico como paciente), revisando sus antecedentes familiares.La tarea en clase es construir su árbol genealógico. Los pasos a seguir son los siguientes:

1. Escribe los datos personales del propósitusa.- Nombre, sexo, edad, dirección y teléfono.b.- Antecedentes perinatales y postnatales.c.- Antecedentes familiares y otros datos importantes.

2. La elaboración del árbol genealógico se inicia con el propósitus.a.- Los hombres son representados por símbolos cuadrados y las mujeres con

símbolos circulares.b.- Una línea trazada entre el cuadrado y el círculo representa un casamiento

entre el hombre y la mujer.c.- Dos líneas trazadas entre el cuadrado y el círculo indica un casamiento

consanguíneo. (ver otras situaciones en la tabla de símbolos Apéndice I)d.- Cuando es posible el cuadrado deberá ser colocado a la izquierda y el círculo

a la derecha de la línea de casamiento.e.- Las generaciones están conectadas por una línea vertical que se extiende

hacia abajo desde la línea de casamiento hasta la próxima generación.f.- Los hijos de un casamiento están conectados por una línea horizontal unidos

por líneas verticales cortas. El primer hijo es colocado a la izquierda del segundo, el segundo a la izquierda del tercero y así sucesivamente. Utilice la

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simbología correspondiente para casos de abortos, gestación, etc., ubicándoseles en el orden en que corresponden.

g.- Solo el hijo(a) del matrimonio que esta en relación directa con el propósitus (es decir los padres del propósitus) podrán ser colocados juntos pero señalando entre paréntesis el lugar que ocupan dentro de su familia.

h.- Los individuos normales se representan por símbolos abiertos, cuadrados o círculos dependiendo del género, y los afectados por símbolos cerrados (sombreados).

i.- Cada generación es enumerada a la izquierda de las líneas filiales con números romanos.

j.- Todos los individuos de cada generación (los filiales) son enumerados desde la izquierda con números arábigos.

k.- Terminado de elaborar su árbol genealógico se dispondrá a identificar los rasgos genéticos que usted considere característico de su familia (mínimo dos rasgos).

l.- Del mismo modo identificara los individuos afectados (enfermos) con símbolos cerrados.

m.- En la leyenda deberán indicarse el rasgo genético y la afectación de los individuos de cuales se ha referido. En la leyenda también pueden indicarse otros datos que usted considere pertinentes.

Ejemplo (ver figura): Con un solo carácter genético: Forma de pelo

En este ejemplo se señala a un individuo varón con pelo ondulado (el propósitus) primogénito de un matrimonio cuyo padre fue el segundo de 4 hermanos, siendo el primero afecto de un mal sanguíneo y que tiene pelo lacio. La madre fue la primera de 4 hermanos, también con pelo lacio. En la actualidad los padres del propósitus esperan un siguiente hijo. Se pueden ver otros detalles de esta familia. Por ejemplo, el individuo II 9, que tiene pelo lacio ha tenido dos relaciones, uno con un

24


consanguíneo de pelo lacio con quien tuvo un aborto afectado y otra relación convivencial con quien tuvo un hijo normal de pelo lacio. PREGUNTAS1. ¿Qué entiende por individuos afectados e individuos portadores?2. ¿Qué son caracteres genéticos?3. ¿Qué son alelos?4. Explicar y graficar con árboles genealógicos ejemplos de:

Herencia autosómica dominante Herencia autosómica recesiva Herencia dominante ligada al cromosoma X Herencia recesiva ligada al cromosoma X Herencia ligada al cromosoma Y

5. En el ejemplo de arriba, explique porque el propósitus tiene el pelo ondulado si sus padres tienen el pelo lacio. ¿Cuál es la probabilidad de que el hermano o hermana que va ha nacer tenga también el pelo ondulado?

BIBLIOGRAFIA Strachan, T. & A.P. Read. Genética Molecular Humana. Ediciones Omega. 1999. Stansfield, W. Teoría y problemas de Genética. McGraw-Hill. 1995. El árbol genealógico de su salud. En:

http://www.vhl.org/es/espcopy/arboldesalud.pdf La historia genética familiar en su práctica profesional. En:

http://www.nchpeg.org/newsletter/NotJustforGeneticists.pdf Genelogía y cromosoma Y. En:

http://www.hispagen.org/ponencias/cromosomaY.pdf Actitud ante el recién nacido con malformaciones congénitas. En:

http://aeped.es/protocolos/genetica/2-rnmalformacion.pdfAPENDICE

SIMBOLOS MAS USADOS EN LA ELABORACION DEL ARBOL GENEALOGICOECAA

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Característica Símbolo Característica Símbolo01. Propósitus o probando 02. Individuo de sexo masculino

03. Individuo de sexo femenino 04. Individuo de sexo indefinido o desconocido

05. Aborto espontáneo de sexo masculino

06. Aborto espontáneo de sexo femenino

07. Aborto espontáneo de sexo indefinido

08. Aborto inducidoX

09. Aborto gemelar dicigótico 10. Aborto gemelar monocigoto de sexo masculino

11. Aborto gemelar monocigoto de sexo femenino

12. Aborto gemelar de cigocidad desconocida

13. Natimuerto de sexo masculino 14. Natimuerto de sexo femenino15. Mujer portadora de un carácter ligado a "X"

16. Individuo fallecido de sexo masculino

17. Individuo fallecido de sexo femenino

18. Representación de varios caracteres en un mismo individuo, de sexo masculino

19. Representación de varios caracteres en un mismo individuo, de sexo femenino

20. Gestación actual (sexo no conocido)

21. Gestación actual (sexo masculino)

22. Gestación actual (sexo femenino)

23. Hijo adoptivo (interno o familiar) 24. Hija adoptiva (interno o familiar)

25. Hijo adoptivo (externo o no familiar)

26. Hija adoptiva (externo o no familiar)

27. Número de hermanos sin identificar sexo

28. Número de hermanos de caracteres normales, de sexo masculino

29. Número de hermanos de caracteres normales, de sexo femenino

30. Individuos afectados, masculino

31. Individuos afectados, femenino 32. Individuo afectado fallecido de sexo masculino

33. Individuo afectado fallecido de sexo femenino

34. Individuo heterocigoto de sexo masculino o

35. Individuo heterocigoto de sexo femenino o

36. Gemelos dicigóticos o fraternos

37. Gemelos monocigóticos o idénticos, de sexo masculino

38. Gemelos monocigóticos o idénticos, de sexo femenino

39. Gemelo de cigocidad desconocida

40. Cruzamiento legítimo o casados

41. Cruzamiento ilegítimo o convivientes

42. Separación

43. Divorcio 44. Unión entre consanguíneos

45. Matrimonio sin descendencia 46. Azoospermia (infertilidad)

47. Persona de sexo masculino de quien se ignora si tiene o no el rasgo

48. Persona de sexo femenino de quien se ignora si tiene o no el rasgo

49. Progenitor único y su descendencia (pareja normal sin importancia para el análisis)

50. Descendencia por orden de nacimiento. Números romanos indican generaciones. Números arábigos indican orden de nacimiento dentro de cada generación

I

II

1 2 3

http://aeped.es/protocolos/genetica/2-rnmalformacion.pdf

http://www.hispagen.org/ponencias/cromosomaY.pdf

http://www.nchpeg.org/newsletter/NotJustforGeneticists.pdf

http://www.vhl.org/es/espcopy/arboldesalud.pdf


PRÁCTICA Nº 13

CROMOSOMAS HUMANOS. MACROSCOPÍA: CARIOTIPO

COMPETENCIAS:1. Observará como se presentan los cromosomas coloreados mediante método

convencional y bandeo GTG en cada una de las fotografías y/o fotocopias y contará el número total de cromosomas.

2. Identificará la morfología de cada uno de los cromosomas según el tamaño y la posición del centrómero (metacéntrico, submetacéntrico y acrocéntrico)

3. Clasificará y analizará cada uno de los cromosomas por grupos según Convención de Denver.

4. Confeccionará el cariograma de cada fotografía.5. Aplicará los conocimientos teóricos y Evaluará el tipo de alteración cromosómica

que se presente en cada fotografía.6. Juzga y relaciona el cariotipo con las alteraciones fenotípicas del síndrome.

MATERIALES:Guía de PrácticasFotografías y/o fotocopias de cariogramas.Vinifan o mica, tamaño A-4 (transparente).Lápiz de cera “Markin” (para pintar vidrio) y/o plumón indelebleTijeras.Cinta adhesiva o clipsCuatro hojas de papel bond blanco A-4.

PROCEDIMIENTO:Con las fotografías y/o fotocopias confeccionar los cariogramas correspondientes de cada una de ellas.

Según las siguientes pautas:1. Realizar el recuento de los cromosomas de cada una de las metafases

señaladas.2. Colocar una hoja de plástico transparente sobre una fotografía y calcar o copiar

con lápiz “MARKIN” cada uno de los cromosomas: reconociendo sus elementos.3. Transportar la copia sobre una hoja de papel bond blanco, en la que se anotarán

los nombres de los cromosomas con letras.4. RECONOCER E IDENTIFICAR los elementos: brazos “p” o brazo corto, brazo “q”

o brazo largo, centrómero o constricción primaria, satélite, tallo o talo.5. RECORTAR los cromosomas de cada una de las fotocopias.6. FORMAR los pares homólogos y colocarlos en orden decreciente de tamaño.7. DISTRIBUIR los cromosomas en grupos: A, B, C, D, E, F, G, y cromosomas

sexuales “X” o “Y”, según la clasificación de DENVER.8. Hacer el RECUENTO e IDENTIFICACION de los cromosomas autosómicos y

sexuales.9. ORDENAR LOS PARES DE CROMOSOMAS y colocarlos en una hoja de

cartulina o papel bond de 80 gramos.10.DIAGNOSTICAR el complemento cromosómico y síndrome correspondiente.

26


Repetir la tarea con cada una de las fotografías.

PREGUNTAS:1.- Defina brevemente y en forma gráfica, lo siguiente:

Quinetochoro o Kinetochoro - Cromátide Cromosoma - Cromómera Satélite - Tallo o Talo Cariograma - Cariotipo Haploidia - Constricción Secundaria Complemento cromosómico - Genoma Cromosoma acrocéntrico - Cromosoma

Telocéntrico Mitosis - Tetraploidia Monosomía - Meiosis Aneuploidia - Mosaico

II. Según el modelo de CARIOTIPO NORMALa) Arme los cariogramas correspondientes a cada una de las fotocopias de

las metafases señaladas.b) Diagnosticar el complemento o Fórmula cromosómica en cada caso.c) Mencionar los síndromes correspondientes a cada uno de ellos.

III Explique el fundamento y para qué se usan los métodos de marca como: Bandas C, G, R, Q, NOR, FISH

BIBLIOGRAFIA: Armendares Salvador. CITOGENETICA HUMANA. De Robertis Emery Alan. GENETICA MÉDICA. Edición en español: Marbán Libros, S.L.

capitulo 3 pp. 29-34 Gonzáles Santander Egozcue J, y colaboradores. GENETICA MÉDICA. Grouchy J, y colaboradores. ATLAS DE ENFERMEDADES CROMOSOMICAS. Solari A. GENETICA HUMANA. Fundamentos y aplicaciones en Medicina. Thompson & Thompson. GENETICA EN MEDICINA. Lisker, Armendares, INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA.

ANEXO 1

CARACTERÍSTICAS MORFOLOGÍCAS DE LOS CROMOSOMAS:

CROMOSOMAS AUTOSOMICOS:

Grupo “A”: Pares 1, 2 y 3.Cromosomas grandes, metacéntricos. El segundo par ligeramente

submetacéntrico.

Grupo “B”: Pares 4 y 5Cromosomas grandes submetacéntricos.

Grupo “C”: Pares 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12

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Los pares 6, 7, 8 y 11 son medianos metacéntricos Los pares 9, 10 y 12 son medianos submetacéntricos.Los cromosomas sexuales “X” se encuentran en este grupo.

Grupo “D”: Pares 13, 14 y 15Cromosomas grandes acrocéntricos y presentan satélites.

Grupo “E”: Pares 16, 17 y 18El par 16 es pequeño metacéntricoEl par 17 es pequeño submetacéntrico.El par 18 es pequeño submetacéntrico mediano.

Grupo “F”: Pares 19 y 20Cromosomas metacéntricos, los más pequeños.

Grupo “G”: Pares 21 y 22Cromosomas pequeños, acrocéntricosPresentan satélites.El cromosoma sexual “Y” se encuentra en este grupo.

CROMOSOMAS SEXUALES:

CROMOSOMA SEXUAL “X”: Es metacéntrico mediano. Con respecto a su tamaño, es más grande que el cromosoma Nº 6, y ligeramente

más pequeño que el tercer par del grupo “A”. Sus brazos “p” y “q” son rectos y paralelos entre sí.

CROMOSOMA SEXUAL “Y”: El cromosoma es pequeño acrocéntrico Es más grande que los cromosomas de su grupo (Grupo “G”) Sus brazos “p” son compactos y gruesos, se visualizan fácilmente. Sus brazos “q” son rectos y paralelos entre sí. No presentan satélites.

ANEXO 2

28


Ideograma del patrón de Bandas GTG.

29


ANEXO 3

ANEXO 4

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PRACTICA Nº 14

A - DETERMINACION DEL CORPUSCULO “X” Ó CROMATINA SEXUAL

I. COMPETENCIAS: Observa en los núcleos de las células epiteliales en Interfase los elementos

determinantes del sexo, identificando la presencia del cromosoma “X” en forma de corpúsculo de Barr.

Diferencia los núcleos positivos y negativos que le permitan diagnosticar el sexo cromatínico en la muestra estudiada.

II. GENERALIDADESLa masa cromatínica que se encuentra en las células de los mamíferos hembras incluyendo a la especie humana, con excepción de la zarigüeya, constituye la CROMATINA SEXUAL, CUERPO DE BARR, O CORPÚSCULO “X” Puede encontrarse en diferentes tipos de células, pero debido a la sencillez del procedimiento y a la rapidez de la técnica empleada se le estudia en células epiteliales de la mucosa oral.

- En las células epiteliales se encuentra ADHERIDA A LA MEMBRANA INTERNA DEL NUCLEO COMO DESCANSANDO EN ELLA. Su tamaño normal varía de 0.7 a 1.2 micras (µ). Su forma puede ser triangular, semiesférica, alargada o circular. Su número por núcleo varía de 0-4 corpúsculos.

- En las células nerviosas se encuentra ubicada al centro del núcleo.- En los neutrófilos segmentados se encuentra a manera de palillo de tambor

Su utilidad se evidencia porque ayuda en el diagnóstico de los estados intersexuales, en el hermafroditismo especialmente en los Síndromes de Turner y Klinefelter, en estudios cromosómicos para determinar el número de cromosomas “X” presentes.

La regla para determinar el número de cromosomas “X” puede indicarse en la siguiente fórmula

“El número de cromatina sexual es igual al número de cromosomas X menos uno”

Esto se puede observar en el siguiente cuadro

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NCS = NCX - 1


Si el corpúsculo de Barr es pequeño, es decir menor de 0.7 o es grande, es decir mayor de 1.2, dará lugar a anomalías estructurales del cromosoma “X” como se observa en el siguiente cuadro:

Para el diagnóstico debe examinarse por lo menos 100 núcleos por lámina y se obtendrá el promedio expresado en porcentaje.Para la técnica del Carbol-fucsina, de 0-5% es negativo y más de 5% es positivo.

III – MATERIALES: Láminas o porta-objetos, Laminillas o cubre-objetos Lápiz Markin o marcador de láminas, Espátulas de madera o baja lenguas. Alcohol éter al 50%, Batería completa de coloración, Bálsamo del Canadá, Aceite de inmersión, Microscopio con lentes de inmersión.

IV. PROCEDIMIENTO

1. OBTENCION DE LA MUESTRA:- Limpiar las láminas y marcarlas con lápiz de vidrio.- Realizar el raspado de las células epiteliales de la mucosa oral (carrillos derecho

e izquierdo).

32


- Hacer el extendido de las muestras en las láminas.- Fijarlas en alcohol-éter al 50% durante 5 a 10 minutos.

2. COLORACION: METODO DE CARBOL-FUCSINA- Hidrolizar las láminas con solución de ácido clorhídrico al 50% durante 10

minutos.- Lavar con agua destilada o agua corriente.- Colorear con carbol-fucsina durante 5 a 10 minutos.- Diferenciar en alcohol absoluto de 95% (aproximadamente 10 minutos).- Cambiar a alcohol absoluto por 1 minuto.- Clarificar con Xilol (2 cambios)- Montar en Bálsamo de Canadá

3. LECTURA Y DIAGNOSTICO:3.1OBSERVAR A 10X:

- Ubicar la muestra en la lámina y observar estructuras puntiformes de color fucsia o lila.

3.2 OBSERVAR A 40X:- Diferenciar los núcleos buenos de los inadecuados e identificar el corpúsculo “X” si es posible.

- 3.3 OBSERVAR A 100X- Diferenciar los núcleos que presentan corpúsculo de Barr (positivos) y los

núcleos sin corpúsculo (negativos).- Observar la morfología y el tamaño de los corpúsculos.- Realizar el conteo de por lo menos 100 núcleos buenos, indicando los

porcentajes analizados, luego obtener el promedio total.- Diagnosticar el sexo cromatínico, según los criterios establecidos.- Esquematizar sus observaciones en el microscopio

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Núcleo negativo

Núcleo positivo

V. CUESTIONARIO:

1. Defina: Cromatina Eucromatina Heterocromatina Cromatina positiva Cromatina negativa Clava o palillo de tambor Heteropicnosis Isopicnosis

2. Explique la hipótesis de Mary Lyon: Concepto, fundamento, propuesta resumen y conclusiones

3. ¿Cuáles son los factores que alteran la cantidad y el tamaño normal del corpúsculo de Barr?

4. ¿En que día de formación y desarrollo embrionario se puede observar la cromatina sexual?

VI. BIBLIOGRAFIA1. CUMMINGS,“HERENCIA HUMANA”.1. EGOZCUE,“GENETICA MEDICA”.2. JORDE-CAREY -WHITE. “GENETICA MEDICA”3. SOLARI, “GENETICA HUMANA: FUNDAMENTOS Y APLICACIONES EN

MEDICINA”.8. LISKER - ARMENDARES. “INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA.

B - CROMOSOMAS HUMANOS: MICROSCOPIA:

I. COMPETENCIAS:

- Reconoce bajo el microscopio los elementos responsables de la herencia: LOS CROMOSOMAS EN LOS CULTIVOS CELULARES “IN VITRO” (CULTIVO DE LINFOCITOS) cuando las células están en Interfase y en división (metafase).

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- Comprueba el número de cromosomas en la especie humana diferenciándolos por grupos (A, B, C, D, E, F, G Y SEXUALES) mediante el METODO CONVENCIONAL que podrían corresponder a anomalías numéricas.

- Observa los cromosomas mediante el METODO DE BANDAS “GTG” (bandeo G, Tripsina Giemsa) para identificar los cromosomas y poder averiguar anomalías estructurales.

II. GENERALIDADES

La célula en división está formados por elementos en forma de varillas llamados “cromosomas”, que viene de Chroma = color y Soma = cuerpo. Es decir que se tiñen intensamente con los colorantes básicos como la fucsina, oseína, hematoxilina,…etc.Cada especie animal o vegetal posee un complemento cromosómico propio y característico en cuanto al número y formas de los cromosomas. El ser humano tiene 46 cromosomas.

III. PROCEDIMIENTOLámina Nº 1Método Convencional (Coloración Giemsa).Láminas preparadas con cultivo de linfocitos en sangre periférica.

OBSERVAR A 10X:- Corpúsculos pequeños de forma esférica, intensamente teñidos de color fucsia o

lila (linfocitos en Interfase)

Linfocito en Interfase

Linfocito en división

- Elementos puntiformes y/o alargados e intensamente coloreados formando grupos (linfocitos en división o metafases).- Esquematizar sus observaciones.

OBSERVAR A 40X:- Realizar el recuento de los cromosomas en cada metafase.- Identificar los cromosomas reconociendo la morfología de cada uno de ellos- Esquematizar sus observaciones.

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OBSERVAR A 100X:- Cromosomas en metafase identificando sus cromátide y la posición de sus

centrómeros.- Identificar los cromosomas por grupos (A, B, C, D, F, G y sexuales).- Esquematizar sus observaciones.

Lámina Nº 2

Método de Marca: Bandas GTG- Seguir el mismo procedimiento realizado en la lámina Nº1 observando

detenidamente a 10X y a 40X.

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Brazo p

Centrómero Cromátide

Brazo q


OBSERVAR A 100X:- Cromosomas de los grupos antes mencionados.- Diferenciar las bandas en cada uno de los cromosomas buscando sus pares

homólogos.- Comparar cada uno de los cromosomas y tratar de identificarlos con la ayuda del

patrón de bandas que se presentan en la hoja adjunta.- Esquematizar los cromosomas 1, 2, 7, 19, 21 y los sexuales X e Y.

IV. PREGUNTAS:

1. Defina los siguientes conceptos:- Sitios frágiles - Polimorfismo de los satélites- Heteromorfismo cromosómico - Polimorfismo del cromosoma Y- Heterocromatina constitutiva2. Mencione la importancia del uso de los siguientes reactivos en los cultivos celulares para obtener cromosomas in vitro.

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Cromo. 2

Cromo. 1

Cromo. Y

Cromo. 19

Cromo.7

Cromo. X

Cromosoma Metacéntrico

Cromosoma Sumetacéntrico

Cromosoma Acrocétrico

UPSMP – MEDICINA HUMANACURSO: EMBRIOLOGÍA Y GENÉTICA

- Fitohemaglutinina - Tripsina- Solución hipotónica - Quinacrina- Colchicina - Fijador Carnoy- Glutamina - Solución Hans

3. Explique cuál es el fundamento y para qué se usan los métodos de marca como:

- Bandas G - Bandas Q - Bandas NOR - FISH- Bandas C - Bandas R - Bandas G11 - ICH

BIBLIOGRAFIA

1. CUMMINGS, MICHAEL. “HERENCIA HUMANA”.2. DE ROBERTIS, E. “BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR”.3. GROUCHY-TURLEAU. “ATLAS DE ENFERMEDADES CROMOSOMICAS”4. LISKER-ARMENDARES. “INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA”.5. MULLER-YOUNG. “GENETICA MEDICA “ EMERY’S6. SANCHEZ CASCOS Y COL “ GENETICA AL DIA “ Editorial Labor. 7. THOMPSON, THOMPSON. “ GENETICA MÉDICA”.

2007-I GUÍA DE PRÁCTICAS

38


PRACTICA N° 15

USO DE MARCADORES MOLECULARES DE ADN PARA LA DETERMINACIÓN DE VARIANTES I / D EN EL GEN ACE, ASOCIADO CON ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES

FUNDAMENTO

El sistema RAS (Renin Angiotensin System) cumple una función muy importante en la homeostasis cardiovascular. La enzima ACE (Angiotensin Converting Enzyme) cataliza la reacción del paso de Angiotensina I a Angiotensina II. La Ang II es una potente vasoconstrictora que ejerce su influencia sobre el corazón y los vasos sanguíneos a través de sus efectos hemodinámicos y celulares directos. Se ha reportado que la inhibición farmacológica de ACE conduce al mejoramiento en algunos pacientes con desórdenes cardiovasculares (por ejemplo, hipertensión, enfermedades coronarias e hipertrofia ventricular izquierda), razón por lo cual el análisis genético del polimorfismo de ACE y de otros genes asociados, es de suma importancia ya que conllevaría a dilucidar los alelos implicados en dichas enfermedades. En algunos estudios previos en diferentes poblaciones, los individuos con genotipo DD tienen una propensión superior en 3 a 4 veces para sufrir algunas enfermedades cardiovasculares, sin embargo esto no sucede en todas las poblaciones, por ello estamos caracterizando la distribución de los alelos ACE en pacientes y controles de la población peruana.

OBJETIVOSIdentificar los genotipos I/I, I/D, y D/D en las muestras sanguíneas

MATERIALES Muestras sanguíneas (1 ml) Guantes Agarosa Buffer de carga (azul de bromofenol,xilenecyanol, sucrosa) Buffer 1XTBE Solución de EtBr Micropipetas Gradillas Equipo de electroforesis, fuente de poder, termociclador Transiluminador UV

PROCEDIMIENTO

1. Extracción de ADN de sangre periférica (lavados de células con Tris-EDTA, lisado con N-Laurylsarcosine, digestión proteica con Proteinasa K, precipitación con etanol y sales).

2. Amplificación de un sector del intron 16 del gen ACE (locus 17q23). La técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction) se basa en la aplicación de la Taq ADN polimerasa, que sintetiza las cadenas complementarias de ADN, iniciando desde dos oligodesoxinucleótidos (primers F y R) en todo el área específico del genoma previsto para la amplificación. El material básico de construcción es la mezcla de


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los cuatro desoxinucleósidotrifosfatos (dNTPs), es decir, A (adenina), G (guanina), T (timina) y C (citosina). Para que los oligodesoxinucleótidos hibridizen con la doble espiral de ADN, es necesario antes denaturar y separar las dos cadenas de ADN a una temperatura adecuada con la finalidad de que cada cadena sirva de matriz ó molde para la síntesis respectiva. En principio, se cumplen tres etapas de reacciones:

a) Denaturación del ADN ( 94°C )b) Hibridación ( 58°C )c) Elongación con la Taq ADN polimerasa ( 72°C )3. Gel electroforesis en 1,4 % de agarosa, voltaje ~ 100v 4. Tinción en solución de bromuro de etidio5. Visualización del ADN amplificado en luz UV

Fig. 1. Electroforesis de los productos PCR de un sector del intrón 16 del gen ACE

Fig.2 Esquema del gen ACE y de la región polimórfica (deleción ó inserción)


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II IDDD M

El polimorfismo consta de dos fragmentos alélicos: uno de 490 bp denominado inserción (I) y el otro de 190 bp denominado deleción (D). II = Homocigota para la inserciónID = Heterocigota inserción/deleciónDD = Homocigota para la deleciónM = Marcador de tamaño 100 bp1-18 = Individuos diferentes

490 bp

190 bp

300

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18


Fig.3 Localización del gen ACE en el cromosoma 17


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guia practica 2012[1]

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