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INVESTIGADORES:Juan Edson Villanueva Tiburcio.Luis Alberto Condezo Hoyos.Eduardo Ramirez AsquieriCENTRO DE INVESTIGACIN:Universidad Nacional Agraria De La Selva (UNAS) Tingo Mara- Per EXPOSITORES:Pablo Serrano, Elizabeth Katherin Sucasaca Quispe, DianethVilcayauri Delgado, Ana

ANTOCIANINAS, CIDO ASCRBICO, POLIFENOLES TOTALES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE, EN LA CSCARA DE Myrciaria dubiaFACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y BIOQUIMICARESUMENEste trabajo fue realizado en la UNAS, Tingo Mara, Per. Evaluaron el contenido de antocianinas, cido ascrbico, y polifenoles totales, en la cscara fresca y seca de camu-camu en diferentes estados de madurez; usando diferentes tipos de radicales y correlacionaron el valor de cido ascrbico y polifenoles totales con la actividad antioxidante. La extraccin fue realizada en medio acuoso. El extracto de la cscara madura fresca mostr las concentraciones ms elevadas de cido ascrbico y antocianinas, mientras que el extracto de la cscara seca del pintn mostr el mayor valor de cido ascrbico y polifenoles totales. La mayor actividad antioxidante, fue el extracto de la cscara seca de muestra pintn, frente a los radicales utilizados.

OBJETIVOS ESPECFICOSEvaluar el contenido de cido ascrbico, antocianinas y polifenoles totales, en la cscara fresca y seca de camu-camu (Myrciaria dubia) en diferentes tiempos de maduracin.Evaluar la actividad antioxidante usando diferentes tipos de radicales en la cscara seca y correlacionar el contenido de cido ascrbico y polifenoles totales con la actividad antioxidante.

OBJETIVOS GENERAL Cuantificar el contenido de polifenoles totales y la actividad antioxidantes.3INTRODUCCIN El camu-camu (Myrciaria dubia) es una fruta nativa que se encuentra en la Amazonia Peruana; esta se caracteriza principalmente por su alto contenido en cido ascrbico, que supera significativamente a otros ctricos. Los antioxidantes naturales son apreciados porque pueden ser usados en el diseo de alimentos benficos para la salud, debido a su capacidad de neutralizar radicales libres, que contienen uno o ms electrones desapareados porque al colisionar con el Radical Libre (RL) le cede un electrn, oxidndose a su vez y transformndose en un RL dbil no txico.

Reino:PlantaeDivisin:MagnoliophytaClase:MagnoliopsidaSubclase:RosidaeOrden:MyrtalesFamilia:MyrtaceaeSubfamilia:MyrtoideaeTribu:MyrteaeGnero:MyrciariaEspecie:M. dubia

TAXONOMIA DE LA ESPECIE VEGETAL

Figura 1. Myrciaria dubiaDIFERENCIAS DE METABOLITOS

Figura n2: muestras de metabolitos primarios Figura n3: muestras de metabolitos secundarios.Figura n4: RUTAS BIOGENTICAS DE METABOLITOS SECUNDARIOS

Figura n5: RUTA DEL CIDO SHIKMICOPOLIFENOLES TOTALES Conjunto heterogneo de molculas que comparten la caracterstica de poseer en su estructura varios grupos bencnicos sustituidos por funciones hidroxilicas.

Figura n6: 1- fenolbencenoEsquema n1: Clasificacin de los polifenoles

Figura n8 :Estructura qumica y ejemplos de pelargonidina (geranios),cianidina (ciruelas negras) y delfinidinaen especies como las violetasFigura n7: Estructura y sustituyentes de las antocianinas COMPUESTOS FENOLICOS DEL TIPO FLAVONOIDESANTOCIANINASLas antocianinas son los responsables de la gama de colores desde rojo-azul, pertenecientes a la familia de los flavonoides, compuestos por dos anillos aromticos A y B unidos por una cadena de 3 C.EFECTO DEL pH

Figura n9: Estructura y estabilidad de las antocianinas a diferentes valores de pH. La acidez tiene un efecto protector sobre la molcula. En soluciones acuosas a valores de pH inferiores a dos, s encuentra en su forma ms estable de catin flavilio de color rojo intenso. Tanto la pseudobase como la chalcona, son formas incoloras y bastante inestables.

ANTOCIANINAS

DELFIDINA-3-GLUCOSIDOFrmula estructural: 2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)chromenylium-3,5,7-triol

Figura n 10: Estructura de la delfidina-3-glucosidoANTOCIANINAScianidina-3-glucosidoFrmula estructural: 3,5,7,3',4'-Pentahidroxyflavilium, 2-(3,4-Dihidroxifenil)-3,5,7-trihidroxi-1-Benzopirilium

Figura n11: Estructura de la cianidina-3-glucosidoANTIOXIDANTESSon compuestos que inhiben o retrasan la oxidacin de otras molculas mediante la inhibicin de la propagacin de la reaccin de oxidacin.

Figura n12: reaccin qumica de la molcula antioxidante

ACIDO ASCRBICO

Figura n13:Oxidacin del acido ascrbicoEl cido ascrbico (AA) es muy sensible a la oxidacin, el calor y la luz aceleran el proceso. En tanto que factores como el pH, la concentracin de oxgeno y la actividad del agua, influyen poderosamente en la actividad de la reaccin.

MTODO pH DiferencialPermite la estimacin del contenido de antocianinas mediante el empleo de un agente blanqueador (sulfito de sodio, perxido de hidrgeno), y la medicin por espectroscopia de UV-VIS.

MTODO REPORTADO POR HUNG Y YEN

Determinacin del cido ascrbico por titulacin con el reactivo 2,6-diclorofenolindofenol, la que se reduce por medio del cido ascrbico.Figura n13 : reaccin del 2,6-diclofenolindofenol frente al cido ascrbico.MTODO DE AZUL DE PRUSIAEste mtodo se basa en la reduccin de los iones Fe3+ a Fe2+, por los polifenoles mostrando una coloracin azul conocido como azul de prusia formando el complejo ferrocianuro ferroso. Tiene como ventaja la rapidez de la prueba debido a la formacin del color azul, lo que ofrece versatilidad para la determinacin espectrofotomtrica.

MTODO PARA CUANTIFICAR ANTIOXIDANTES1.- DDPHEl mtodo se basa en la capacidad del radical libre estable 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo para reaccionar con donadores de H.Presenta un mximo de absorbancia a 515 nm y genera un producto incoloro cuando captura un antioxidante.

Figura n 14: Reaccin del DPPH2.- ABTS+ Mide el tiempo que tarda el radical ABTS en ser oxidado hasta el radical libre estable ABTS+ en presencia de compuestos antioxidantes comolos polifenoles, queretardendicha oxidacin o bien disminuyen la absorbancia de la disolucin por captura del radical. La absorbancia se mide a 734 nm, longitud de onda en la que el radical coloreado presentaunmximo de absorcinEs el ms indicado para ensayos de compuestos coloreados, ( antocianinas del camu camu).

3. PEROXILO

Con este mtodo se cuantifico la actividad antioxidante mediante el radical libre pirxilo Un radical libre es un molcula que tiene uno o ms electrones no apareados girando en sus rbitas externas. Es por esto que el perxido acta oxidando molculas en la muestra para as adquirir un equilibrio qumico.

METODOLOGADISEO EXPERIMENTAL1.-TOMA DE MUESTRAS2.-CUANTIFICACIN DE ANTOCIANINAS3.- CUANTIFICACIN DE CIDO ASCRBICO4.-CUANTIFICACIN DE POLIFENOLES5.- CUANTIFICACIN ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE:Mtodo de DDPH Mtodo de ABTS+Mtodo de perxilo

Estados de MaduracinColor de laCscaraConsistencia del frutoFotografa01(Verde)0-25 % de pigmentacin rojizaRgida y dura02(Pintn)26-50 % de pigmentacin rojizaRgida03(maduro)75-100 % de pigmentacin rojizaRgida

Tabla 1 .-Atributos fsicos de las muestras biolgicas de los frutos de camu camu empledosMUESTRAS BIOLGICAS CUANTIFICACIN DE ANTOCIANINAS

CUANTIFICACION DE CIDO ASCRBICOCUANTIFICACIN DE POLIFENOLES TOTALES

RADICAL 2.2-DIPHENYL-1-PICRILHYDRAYL (DPPH)Absorbancia a 515nm

EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE EN LA CASCARA DE CAMU-CAMU(3-etilenbenzotiazolino-6cido sulfnico) (ABTS+)

Por tiempo de 10 minutos.Absorbancia a 374 nmRADICAL PEROXILO

TRAP ( Poder Total de Actividad Reductora)RESULTADOS

Se observa que en estado fresco la cascara maduro de camu-camu, presenta mayor contenido de antocianinasANTOCIANINAS

CIDO ASCRBICOFigura N1:Contenido de cido ascrbico de la cascara de camu-camu en estado fresco y seco.POLIFENOLES TOTALES

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTESDPPH

ABTS+Tabla 3. Coeficiente de inhibicin de la cascara del camu camu frente al cation ABST

RADICAL PEROXILO

CONCLUSIONES La mayor actividad antioxidante lo present el extracto acuoso de la cscara seca del fruto pintnLa cscara de camu-camu en estado fresco que present el mayor contenido en antocianinas y cido ascrbico fue la madura La mayor actividad antioxidante, fue el extractos de la cscara seca de muestra pintn, frente a los radicales DPPH, ABTS+y Peroxilo.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICASGLORIA ASTRID GARZN, LAS ANTOCIANINAS COMO COLORANTES NATURALES Y COMPUESTOS BIOACTIVOS, ENCONTRADO EN:http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0120-548X2008000300002&script=sci_arttext LILIANA ANDREA SANTACRUZ CIFUENTES, ANLISIS QUMICO DE ANTOCIANINAS EN FRUTOS SILVESTRES COLOMBIANOS, ENCONTRADO EN : http://www.bdigital.unal.edu.co/5351/1/197518.2011.pdfGREGORIO MARTINEZ SANCHEZ,ESPECIES REACTIVAS DEL OXGENO Y BALANCE REDOX, PARTE I: ASPECTOS BSICOS Y PRINCIPALES ESPECIES REACTIVAS DEL OXGENO,ENCONTRADO EN : http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0034-75152005000300009&script=sci_arttextENA VILMA VELAZCO CASTRO, RODNEY VEGA VIZCARRA, ESTABILIDAD DEL CIDO ASCRBICO EN PRODUCTOS ELABORADOS DE CAMU CAMU Myrciaria dubia, ENCONTARDO EN : http://www.iiap.org.pe/promamazonia/sbiocomercio/Upload%5CLineas%5CDocumentos/254.pdf