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Ensayo Biorremediación Universidad de Chile Caracterización de los Recursos Naturales Bióticos – Semestre Otoño 2008 

Carla Morales / Maximiliano Rioseco Grupo Biorremediación 

Descripción El objetivo de este ensayo es ver la acción del hongo Botrytis cynerea sobre el herbicida Linurex 50 SC, cuyo componente activo es Linuron. 

Para ello se dispuso de bandejas a las que se les aplicó herbicida y/u hongo (como se describe mas adelante) y en las que se sembraron semillas de avena. 

La hipótesis es que en aquellas bandejas donde se aplicó el herbicida y el hongo se produzca la degradación del herbicida. 

Procedimiento y Montaje Para la realización se contó con semillas de avena. Se sembraron 20 semillas por bandeja, habiendo en total 36 bandejas, sembradas a 0, 5 y 10 días. 

Las preparaciones se describen en la siguiente tabla (2 bandejas por preparación): 

Cero Días  Cinco Días  Diez Días 

T0  2 suelo nativo + 

2 suelo estéril 

2 suelo nativo + 

2 suelo estéril 

2 suelo nativo + 

2 suelo estéril T1  2 suelo nativo  2 suelo nativo  2 suelo nativo 

T2  2 suelo nativo  2 suelo nativo  2 suelo nativo 

T3  2 suelo nativo + 

2 suelo estéril 

2 suelo nativo + 

2 suelo estéril 

2 suelo nativo + 

2 suelo estéril 

T0 è Suelo + semilla T1 è Suelo + semilla + inóculo con Botrytis T2 è Suelo + semilla + Linurex 50 SC T3 è Suelo + semilla + inóculo de Botrytis + Linurex 50 SC 

El inóculo se preparo sobre bayas de vid y se aplicó al sustrato tamizado de las bandejas (T1 y T3). 

Se hicieron dos repeticiones adicionales en T0 y T3 con suelo estéril (suelo bromurado) con el objeto de observar alguna diferencia con respecto a los suelos nativos, debido a los microorganismos presentes en el. 

Se aplicó el herbicida en una dosis de 1,7 L/Ha en los tratamientos T2 y T3 el mismo día de la siembra a 0 días.

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Desarrollo 

Fecha: 16/05/2008 Extracción de hifas y conidias del hongo desde un cultivo 

Fecha: 16/05/2008 Preparación de una suspensión de hifas y conidias del hongo para inocular en bayas de uva. 

Fecha: 16/05/2008 Inoculación de las bayas con 5µL del inóculo. Se prepararon cerca de 2Kg de bayas, las que se dejaron una semana a T° ambiente para el establecimiento del hongo en ellas.

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Fecha: 22/05/2008 El hongo ha poblado una cantidad suficiente de bayas. Se procede al macerado de las bayas para preparar el inóculo. 

Fecha: 23/05/2008 El inóculo está listo 

Fecha: 23/05/2008 El inóculo se aplica en el sustrato y se deja durante una semana para que se establezca en éste. .

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Fecha: 30/05/2008 El hongo se establece en el sustrato. 

Fecha: 30/05/2008 El hongo establecido en el sustrato. 

Fecha: 30/05/2008 Aplicación del herbicida y siembra a 0 días.

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Fecha: 09/06/2008 Comienza la germinación de las semillas de los 0 días. 

Fecha: 15/06/2008 Comienza la germinación de las semillas de los 5 días. 

Fecha: 20/06/2008 Comienza la germinación de las semillas de los 10 días.

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Control 20/06/2008 

Día de siembra Tratamiento  0 días  5 días  10 días nativo 

T0 estéril 

T1  nativo 

T2  nativo 

nativo 

T3 estéril

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T3: Semillas de avena germinadas en sustrato estéril inoculado con Botrytis.