SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "ENDOTELIO VASCULAR E HIPERTENSIN Dra.Leticia Vittone,Dra. CeciIia Mundia-WeiIenmann Introduccin Elendoteliovascular,unrganoestructuralmentesimpleyfuncionalmentecomplejo,esunacapa unicelularquecubrelasuperficieinternadelosvasossanguneosyconformalapareddelos capilares.Lejosdeserslounabarreramecnicaentrelasangreylostejidos,esunrgano activamente comprometido en una gran variedad de procesos fisiolgicos y patolgicos. Debido a su ubicacinestratgicadetectacambiosenlasfuerzashemodinmicasqueactansobrelapared vascular,ascomosealesqumicastransportadasporlasangreyrespondeaellasliberando sustanciasvasoactivas,algunasdelacualestienenfuncionesantagnicascomovasodilatadoresy vasoconstrictores o hemostticos y antihemostticos (Ver tabla 1).TabIa 1. Principios activos deI endoteIio vascuIar Antihemostticos Hemostticos Trombomodulina Protena C Protena S Activador tisular de plasmingeno Prostaciclina (PG2) xido ntrico Heparansulfatos Factor de von Willebrand Factor V Factor (tisular) nhibidor del activador de plasmingeno Tromboxano A2 VasodiIatadores Vasoconstrictores xido ntricoProstaciclina (PG2) EDHF CNP Endotelina Angiotensina Tromboxano A2 Anin superxido Promotores de crecimiento Inhibidores deI crecimiento Endotelina Angiotensina VEGF(VascularEndothelialGrowthFactor) PDGF (Plateler Derived GF) bFGF (Fibroblast GF Basic) Anin superxido xido ntrico Heparansulfatos TGF- (Transforming GF-) InmunoIgicosE selectina. P selectina CAM-1 (ntercellular Adhesion Molecule-1) VCAM-1 (Vascular Adhesion Molecule-1) nterleuquinas 1, 6, 18 TNF- (Tumor Necrosis Factor-) MCP-1 (Monocyte Chemoattractan Protein-1) Lassustanciasliberadas,atravsdeefectosautocrinos(sobrelamismaclulaquelasprodujo)o paracrinos(sobrediversasclulasvecinas),determinanlaparticipacinactivadelendotelioenla homeostasis vascular. Fisiolgicamente, las diversas funciones que cumple el endotelio no son ms SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin #quelaexpresindelbalancedelasaccionesdelosdistintosprincipiosactivosqueproduce.El resultadonetodeesebalancemuestraqueelendoteliodisminuyeeltonovascular,debidoaque relajaelmsculolisodelapareddelvaso,yesinhibidordelaproliferacindeesetejido,inhibela adhesinyagregacinplaquetaria,deprimelaactivacindelsistemadecoagulacin,estimulala fibrinlisis,disminuyelapermeabilidadcapilareinhibelaadhesinymigracindeneutrfilosy macrfagos generadores de inflamacin (Figura 1). El trmino disfuncin endotelial indica que, ya sea encondicionesbasalesoluegode estimulacin,elendotelionocumple apropiadamenteestasfunciones.Una menorbiodisponibilidaddexidontrico (NO),unaalteracinenlaproduccinde prostanoides(incluyendoprostaciclina, tromboxano-A2y/oisoprostanos),un deteriorodelahiperpolarizacin dependientedeendotelio,ascomouna mayorliberacindeendotelina-1,pueden individualmente o asociados contribuir a la disfuncin endotelial. Sin embargo, lamenorbiodisponibilidaddeNO,causada por una disminucin en su sntesis o un aumento de la velocidad con que se degrada, constituye el fenmenomstempranoyla caractersticamsimportantede disfuncinendotelial.Portal motivo,estecaptulodescribir fundamentalmente,las alteracionesenlasntesisy/o degradacin del NO asociadas al desarrollodehipertensin arterial. xido ntrico (NO) FurchgottyZawadski(1) descubrieronen1980elpapel fundamentaldelendoteliocomo reguladorde lavasodilatacin,al describirelfenmenodela relajacin del msculo liso vascular dependiente de endotelio. Ellos demostraron que anillos arteriales previamentecontracturadossepodanrelajarenrespuestaalaacetilcolinaslosilasclulas endotelialesestabanintactas.Eliminandoelendotelioanulabanlavasorelajacinproducidapor acetilcolina,locualsugeraqueestabamediadaporalgunasustanciaderivadadeendotelioquese CIuIa endoteIiaIPlaquetasPlasmaLeucocitosC C lula muscular lisa lula muscular lisa Clula muscular lisaContractilidady proliferacinPermeabilidadvascularAdhesin yextravasacinCoagulaciny fibrinlisisAdhesiny agregacinFigura 1 Funciones del endotelio vascular 25-HT1DNK1H2B2V1M2 ETBP2yPAR1NONAAcHADHBradicininaHistaminaSustancia PEndotelinaSerotoninaATP-ADPTrombinaAgregacinplaquetariaGMPcCa2+MecanoRFigura 2CIuIa muscuIar IisaReIajacinCIuIa endoteIiaIFuerza de roceEstmulos y receptoresespecficos que promueven la sntesis y liberacin de xidontrico,lasntesisdelsegundomensajeroGMPcylarelajacindel msculo liso vascular. NA:noradrenalina, AcH: acetilcolina, ADH: vasopresina SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin $Esquema de Ia estructura de NOSe.N:extremoaminoterminal;C:extremocarboxiloterminal;Arg:L-arginina;Hemo:grupohemo;BH4:tetrahidrobiopterina;CaM: calmodulina; FMN: flavina adenina mononucletido; FAD: flavina adenina dinucletido.denomin EDRF (endothelium-derived relaxing factor). Posteriormente se demostr que el EDRF era el NO (2). El NO difunde al msculo liso vecino, activa la enzima guanilato-ciclasa soluble, por lo cual aumentanlosnivelescelularesdelsegundomensajeroGMPc,queasuvezrelajaalaclula muscularpordisminuirelcalciocitosliconecesarioparalainteraccindelasprotenascontrctiles (Figura2).Lamayoradelosestmulosvasodilatadores,comoelflujosanguneoynumerosos agonistas de receptores de membrana acoplados a protena G, relajan indirectamente al msculo liso vascular a travs de la liberacin endotelial de NO (Figura 2). Es importante destacar que muchos de estos agonistas actuando directamente sobre receptores de la clula muscular lisa, de las plaquetas, o sobre protenas sanguneas producen vasoconstriccin, agregacin plaquetaria y/o coagulacin. De maneraquelarespuestasimultneadeunendoteliosanoamortigualasconsecuenciasvasculares de cualquiera de estos efectos. Sntesis de NO ElNOesproducidoapartirdel aminocidobsicoL-argininaportres diferentesisoformasdelaNO-sintetasa [NOSoneuronal(NOSn),NOSo inducible(NOSi),NOSoendotelial (NOSe)]expresadasenprcticamente todoslostiposdeclulasvasculares, peroeslaisoformaendotelialla principalresponsabledelasntesisde NO en las clulas endoteliales. Mientras queNOSeyNOSnsonprotenas constitutivamenteexpresadas,la expresindeNOSirequierela interaccindelaclulaconestmulosquegenerensealesnuclearesapropiadas.Las tres isoformas de NOS compartenunciclo catalticosimilar,que consiste en la oxidacin de L-argininaparaformarNO yL-citrulinaenuna complejareaccinque utilizacomoco-sustratosO2y nicotinamida adeninadinucletido(NADPH)y requiere varios cofactores redox como tetrahidrobiopterina (BH4), flavina adenina dinucletido (FAD), flavina adenina mononucletido (FMN) y el grupo Hemo (Figura 3). El monmero de la NOS consiste enundominiooxigenasaN-terminal,asociadoalgrupoHemoyundominioreductasaC-terminal, Sntesis de NOL-ArgininaNHNH2H2N+H3N COONHNH2OH3N COOL-Citrulina!N=ONHN H2NH3N COOOHHO2O21 NADPH 0,5 NADPHnhibidores de la s ntesis de NO nhibidores de la s ntesis de NO CofactoresL-NMMA, L-NAME, ADMAFigura 3N -hidroxil-L-ArgininaGBH , FAD, FMN, Hemo4+ ++ - + - + - Sntesis de NO. L-NMMA: NG-monometil-L-arginina; L-NAME: NG-nitro-L-argininametilster;ADMA:NG-dimetilarginina asimtrica;BH4:tetrahidrobiopterina;FAD:flavinaadenina dinucletido; FMN: flavina adenina mononucletido. Figura 4Arg HemoBH4CaM FMNFADNADPH N CDominio oxigenasa Dominio reductasa SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin %asociadoalasflavinas,unidosporunareginregulatoriaquecontieneelmotivodeinteraccincon calmodulina (Figura 4). La dimerizacin de la NOS es esencial para su actividad, porque permite que ocurralatransferenciadeelectronesdesdeeldominioreductasadeunmonmeroaldominio oxigenasadelotro.Ladimerizacinocurreporinteraccindelosdominiosoxigenasaatravsdel cofactor BH4. Tanto L-arginina como BH4 promueven la formacin del dmero y lo estabilizan, por lo tantobajasconcentracionesdealgunodeellosdesacoplalaenzimayenesascondicionesse produceradicalsuperxido(O2-.)(3,4).LasntesisdeNOdependedelaunindelaNOSala protenacalmodulina.Paraunircalmodulinayenconsecuenciaactivarse,NOSeyNOSnrequieren aumentosdelCa+2intracelular.Encontraste,NOSi,quetieneunaafinidadaltaconcalmodulina, puedeunirseaestaprotenaaconcentracionesmuybajasdeCa+2.As,laactividaddeNOSey NOSnestcrticamentereguladaporloscambiostransitoriosdelCa+2intracelularenrespuestaa estmulosdiversos,mientrasquelaactividaddelasNOSiesindependientedeCa+2ypuede mantenerse tnicamente activa durante varios das (5) (Figura 5). Unodelosmecanismosfisiolgicosmsimportantesderegulacindelaproduccinyliberacin tnicadeNOeslafuerzaderocequeejerceelflujosanguneolaminaralcircularporlosvasos (shearstress).Conelejercicio,elaumentodelvolumenminutosetraduceenunincrementodela perfusin tisular regional debido a la mayor actividad de NOSe inducida por el aumento de la fuerza de roce. Se produce una respuesta inmediata de liberacin de NO mediada por el aumento del Ca+2 intracelular y la fosforilacin de la enzima (Ver ms adelante) (6). La fuerza de roce puede adems, sostener en el tiempo la mayor produccin de NO dado que genera cambios nucleares (regulacin del Ca2+NOSeNOFactores detranscripcinRespuestasostenidaARNm NOSeMecanorreceptorARNm NOSiRespuestarpidaGqCa2+CaMNcleoCa2+NOSeNOARNm NOSeARNm NOSiGqCa2+CaMNcleoFigura 5GlucocorticoidesCitoquinasDeformacinFuerza de roceMecanorreceptorBradicinina Regulacin de la actividad de NOSe y NOSi.: El aumento de Ca+2 intracelular aumenta la actividad de NOSe en forma rpida y transitoria; la activacin de factores de transcripcin nucleares aumenta la expresin de NOSe y sostiene en el tiempo la produccin de NO. La expresin de NOSi es regulada a nivel nuclear por citoquinas (la aumentan) y glucocorticoides (la inhiben).SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin &promotor)quesemanifiestanenelaumentodelnmerodecopiasdeARNmparalasNOSe(7)y adems aumenta la estabilidad el ARNm (8) (Figura 5). Inactivacin de NO El NO es rpidamente inactivado por sustancias reactivas del oxgeno (ROS) y protenas de la sangre como la hemoglobina y la albmina (Figura 6). Su unin al O2-. forma peroxinitrito (ONOO-) y convierte al NO en un poderoso antioxidante, por lo cual su sntesis en el endotelio es esencial para mantener la salud vascular. Sin embargo en circunstancias patolgicas el NO puede convertirse en una molcula prooxidante. En procesos inflamatorios de la pared vascular que cursan con altas concentraciones tanto de ROS como de NO (activacin de la NOSi en respuesta a citoquinas,Figura2),originadosnosloenlasclulasendotelialessinotambinenlosmacrfagos reclutados, aumenta la formacin del altamente reactivo radical peroxinitrito que modifica la estructura y funcin de distintas protenas y contribuye a la disfuncin vascular presente en patologas como la hipertensin y la ateroesclerosis.Los efectos biolgicos del NO estn mediados en gran parte por laS-nitrosilacin(unin a grupos sulfurootiolesderesiduosde cistena) depptidosyprotenasparaproducir gruposS-nitrosotioles bioactivos (SNO) (9). En la sangre, S-nitrosoalbmina (SNO-albmina) y S-nitrosohemoglobina (SNO-Hb)constituyenlostransportadoresmsimportantesdelNObioactivocirculante.Defectosenla sntesisy/ocatabolismodeestosproductospuedenafectarlapresinarterial.Porejemplo,altas concentracionesdeSNO-albminaydeSON-Hb(excesivosecuestrodeNO)sedetectaronen pacientes con preeclampsiay diabetes mellitus tipo 1, respectivamente (10, 11). nactivacin del NOEndotelioMsculo liso vascularNO3- +metaHbNO + Hb-O2NONONO + O2-ONOO -NOGCGMPc GTPEritrocitosNOSeFigura 6 ElNOseinactivamuyrpidamenteporsuuninalahemoglobina(Hb)paraforma nitratos (NO3-) y metahemoglobina (metaHb) y al radical superxido (O2-.) para formar peroxinitrito (ONOO-). GC: guanilato ciclasa soluble. SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin 'Disfuncin endoteIiaI en Ia hipertensin arteriaI Laalteracindelafuncinendotelial,quesemanifiestaporeldesordendelcontroldeltono vasomotor,estpresente,tantoengrandesarteriasyvenascomoenlamicrovasculatura,en diversasenfermedadescardiovascularescomohipertensinsistmica,hipertensinpulmonar, ateroesclerosis,insuficienciacardaca.Adems,muchosdelosfactoresderiesgoasociadoscon enfermedadcardiovascularcomotabaquismo,hipercolesterolemia,diabetesmellitus, hipoestrogenismo,hiperhomocisteinemiatambinestnasociadascondisfuncinendotelial(12-19). Estasasociacionessugierenquepodranexistirmecanismoscomunesatravsdeloscualesla funcin endotelial se perturba. El grado de deterioro de la funcin endotelial se considera un predictor de futuros accidentes cardiovasculares (20, 21). Esta observacin indica que la disfuncin endotelial nosloesunmarcadordeenfermedadvascularsinoqueademscontribuyealaprogresindela misma.Enestecontextosehademostradoqueintervencionesteraputicasquedisminuyenel nmero de accidentes cardiovasculares tambin mejoran la funcin vasomotora endotelial. Ms an, elgradodemejoradeltonovasomotorenrespuestaaintervencionesteraputicas,aparececomo una medida potencial de la eficiencia del tratamiento. En la hipertensin arterial el endotelio vascular est deteriorado y promueve cambios funcionales de la pared vascular. Los pacientes hipertensos tienen deprimida la relajacin dependiente de endotelio y este trastorno est asociado a una menor bioactividad del NO. Numerosos trabajos de Panza y col. (13,22-24)muestranqueelaumentodeflujosanguneoenelantebrazoenrespuestaadistintos agonistasqueestimulanlaproduccindeNO,comoacetilcolina,sustanciaPybradicinina,es significativamentemenorenpacienteshipertensosqueennormotensos(Figura7).Comotambin muestra la figura esta diferencia desaparece cuando ambos grupos son previamente tratados con NG-monometil-L-arginina(L-NMMA),uninhibidordelaNOSyadems,loshipertensospresentanuna respuesta vasodilatadora conservada al nitroprusiato de sodio, dador de NO que acta directamente sobreelmsculolisovascular.Estosresultadosconfirmanqueenlahipertensinladisfuncin endotelial efectivamente est asociada a una menor biodisponibilidad de NO. Ms an, Plavnik y col. obtuvieronresultadossimilaresenunapoblacinsana,sinfactoresderiesgo,conpresinsistlica normal-alta (25), y Taddei y col. lo detectaron en personas normotensas con antecedentes familiares de hipertensin (26). Estas observaciones indican que la disfuncin endotelial representa un cambio temprano en aquellos sujetos que desarrollarn hipertensin en el futuro y que por lo tanto puede ser eldisparadordeldesarrollodehipertensin,hallazgoquepermiteacentuarlaatencinenesta poblacin y prevenir complicaciones futuras. Si la disfuncin endotelial es promotora de hipertensin, estopodraexplicarlaasociacinentrehipertensinyotraspatologasquealteranlafuncin endotelialcomodiabetes,obesidad,hipercolesterolemia(27).Laausenciadelarespuestarelajante mediada por NO, se manifiesta tambin en un aumento de la contraccin del msculo liso vascular en respuestaadiversosvasoconstrictorescomo,endotelinaatravsdesusreceptoresETAyETB, serotoninaestimulandosureceptor5-HT2A ynoradrenalinainteractuandoconelreceptor1-adrenrgico(28).Msan,enpacienteshipertensosseencontraronaumentosdelosniveles circulantesdevasoconstrictorescomoendotelinaytromboxano-A2(29).Sibieneldeteriorodela relajacinvasculardependientedeendotelioesunmarcadordedisfuncin,lamenordisponibilidad SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin (de NO tambin genera un endotelio con efectos pro-inflamatorios, pro-trombticos y pro-coagulantes. Estohacequeladisminucindelavasodilatacinmediadaporflujooporacetilcolinaseencuentre asociada con el aumento de marcadores plasmticos de disfuncin endotelial, como el factor de von Willebrandymolculasendotelialesdeadhesincelular.Elincrementodeclulasendoteliales circulantes parece ser una manifestacin de severo dao endotelial (30-32). El deteriorodelarelajacindependientedeendotelioenpacienteshipertensos,comomencionamos previamente, puede estar causada por menor sntesis o mayor velocidad de degradacin de NO, a lo quepuedensumarsealteracionesenlaarquitecturavascular.Enrelacinaestetrastornoexiste evidenciaexperimentalqueasocialamenorbiodisponibilidaddeNOconaumentosderigidezdela pared vascular. Tantoensujetoshipertensoscomosanossedetectunarelacininversaentrefuncinendotelialy distintosindicadoresderigidezarterial,comolaasociacinentremenorrelajacindependientede endotelioenrespuestaaacetilcolinaymayorpresindelpulsoperifrica(33-35).LaNOSeesuna enzimaaltamentereguladayesmuyprobablequediminuyasuactividadenestadosavanzadosde enfermedadarterial.Dehecho,ladepresindelasntesisdeNOsehadescritoatodololargodel rbol vascular (19, 36). Por otra parte, Harrison y col. demostraron que la hipertensin est asociada aunaumentodelaproduccindeROSyqueanpersistiendolaproduccincontinuadeNOla relajacinvasculardependientedelendotelioestdeprimida,porlocualinfirieronqueenestas condicioneshayunamayorinactivacindeNO(37).Ensuconjuntolosresultadosexperimentales 036912p < 0.0010255075100p < 0.001Basal036912p = NS0255075100p = NS0.8 1.6 3.2AC0481216NormalcontrolPacientes hipertensosp= NS0255075100L-NMMA2Sustancia P(pmol/min)4 1BResistencia Vascular en Antebrazo(porcentaje de basal)Flujo Sanguneo del Antebrazo(ml/min/100ml de antebrazo)p= NSResistencia Vascular en Antebrazo(porcentaje de basal)Flujo Sanguneo del Antebrazo(ml/min/100ml de antebrazo)2Sustancia P(pmol/min)4 1NormalcontrolPacientes hipertensosNormalcontrolPacientes hipertensosResistencia Vascular en Antebrazo(porcentaje de basal)Flujo Sanguneo del Antebrazo(ml/min/100ml de antebrazo)BasalNitroprusiato de Sodio(ug/min) Figura 7VasodiIatacin endoteIio-dependiente en pacientes con hipertensin esenciaI. A. Medida del flujo sanguneo y la resistencia vascular en antebrazo en respuesta a concentraciones crecientes de sustancia P, un agonista endotelial liberador de NO, enpacientesnormotensosehipertensos.Elaumentodelflujoylacadadela resistencia es significativamente menor en hipertensos. B. La diferencia desaparece cuandolospacientessontratadospreviamenteconNG-monometil-L-arginina(L-NMMA), un inhibidor de la NOSe. C. El aumento del flujo y la cada de la resistencia nopresentandiferenciasentreambosgruposenrepuestaaconcentraciones crecientesdenitroprusiatodesodio,undadordeNOquerelajaalmsculoliso vascular por mecanismo endotelio-independiente. Modificado de Panza y col. J Am Coll Cardiol, 1994 (cita 22).SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin )indicanquelosmecanismosqueconducenaunamenorsntesisy/obiodisponibilidaddelNOson variados y posiblemente multifactoriales (37, 38): ) Disminucin de la sntesis de NO debido a alteraciones en:1)El metabolismo del sustrato de la NOSe 2)La expresin y/o estructura de la NOSe 3)Las vas de seales que regulan la actividad de la NOSe 4)La disponibilidad de cofactores requeridos por la NOSe ) Aumento de la inactivacin de NO I) Disminucin de Ia sntesis de NO Alteraciones del metabolismo del sustrato de la NOS. Como ya mencionamos el sustrato de la NOSe es el aminocido bsico L-arginina con una constante de afinidad (Km) de aproximadamente 5 M. La L-arginina es sintetizada como un producto dentro del ciclodelaureaysuconcentracinensangreesaproximadamente100M,alcanzando concentracionesvariasvecesmayoresenlasclulasendoteliales(39).Esteaminocidoes transportadoactivamentedesdelasangrehacialaclulaendotelialporuntransportadorde aminocidos catinicos (CAT-1), proceso que es estimulado por bradicinina, acetilcolina y citoquinas tales como la interleuquina-1 o TNF- (39). El endotelio tambin puede resintetizar L-arginina a partir delaminocidoL-citrulina(Figura8).DadalaaltaconcentracinendotelialdeL-argininanoparece probable que la administracin exgena del aminocido aumente la produccin de NO. Sin embargo, la evidencia clnica y experimental de los ltimos aos indica que la administracin oral o intravenosa deL-argininamejoralasntesisdeNOylavasodilatacindependientedeendotelioendiversas patologascomohipertensin,diabetes,hipercolesterolemia,apesardeladisponibilidadenexceso de L-arginina intracelular (39-42). As, la concentracin extracelular de L-arginina parece ser un factor limitantedelaproduccindeNO.Laexpresin"paradojadeargininahasidoacuadacomo referenciaaestasituacincontradictoria.LosmecanismosatravsdeloscualeslaL-arginina exgenaproduceestamejoranoseconocenanconprecisinyexistenvariasexplicaciones potenciales: 1)QueL-argininaexgenaacteatravsdemecanismosdistintosasersustratodeNOS,como liberacindeinsulina(quecomosedescribemsadelante,aumentalaactividaddelaNOSe)o vasodilatacindirecta.SinembargoluegodeadministrarL-argininalaconcentracindenitratoen plasma y la excrecin urinaria de GMPc aumentan indicando mayor produccin de NO (43). 2)QuelaconcentracintotaldeL-argininaenlaclulanoreflejelaqueseencuentraen microdominiostalescomolascaveolas,invaginacionesepecializadasdelamembranaplasmtica caracterizadasporlapresenciadelaprotenacaveolina-1,dondeseubicalaNOSe.Elaminocido puede permanecer en compartimientos celulares poco accesibles a la NOSe y, en estas condiciones, lavelocidaddetransportedeL-argininadesdeelextracelularporelCAT-1,queco-localizaconla NOSe en las caveolas (44), se transforma en un determinante mucho ms crtico de la actividad de la NOSe, que la concentracin celular total. Por lo tanto, alteraciones en la actividad del CAT-1 podran conducir a la disfuncin endotelial (Figura 8). De hecho, el deterioro de la actividad del transportador SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin *ha sido observado en hipertensin esencial y ms an en individuos normotensos con antecedentes familiaresdehipertensin(45).Estasobservacionessostienenlahiptesisdequedefectosenel transportedeL-argininapuedencontribuiralapatognesisdelahipertensinynoseruna consecuencia del aumento de presin per se. La disfuncin endotelial que resulta de las alteraciones en el transporte puede ser compensada con el suplemento exgeno de L-arginina..

3)QueL-argininaexgenacontrarrestelosefectosdeinhibidoresendgenosdelaNOSecomoel aminocidoNG-dimetilargininaasimtrica(ADMA),metabolitodelaL-argininacuyosnivelesen plasma se encontraron aumentados en pacientes con patologa cardiovascular (Figura 8) (46, 47). En las clulas endoteliales ADMA se forma a partir de la hidrlisis de protenas metiladas en L-arginina. La metilacin en L-arginina es un mecanismo de modificacin proteica post-traduccin que ocurre en casitodoslostiposcelularesporaccindelafamiliaenzimticadelasprotenametiltransferasas (PRMT),delascualeslaPRMT-1estpresenteenelendotelio(46).Laactividaddeestaenzima puede aumentar en respuesta a molculas como LDL y citoquinas (48, 49). ADMA es degradado por la enzima dimetilarginina dimetilaminohidrolasa, cuya isoforma 2 (DDAH-2) es la de mayor expresin en el endotelio (46). El aumento de estrs oxidativo que est asociado a mltiples factores de riesgo cardiovascularcomohipercolesterolemia,hiperglucemia,hiperhomocisteinemiaocitoquinaspro-inflamatorias,deprimelaactividaddeDDAH-2ygeneraunsignificativoaumentodelosniveles intracelularesdeADMA(50,51).LaconcentracinplasmticadeADMAesmuyinferioraladeL-arginina endgena lo que indicara que es poco probable que funcione como competidor de L-arginina porlaNOSeoeltransportadorcatinico.Sinembargo,existendatosexperimentalesyclnicosque sugierenquepequeasalteracionesenlasconcentracionesdeADMAprovocandisminuciones EspacioextraceIuIarCIuIa endoteIiaIAgonistaFuerza de roceAspartatoCa2+iL-citruIinaNOargininosuccinatoNOSeNO sntesisL-argininaL-argininaDisfuncinendoteIiaIExpresin reducidade CAT-1CreatinaUreaArginasaPoIiaminasL-ornitinaL-proIina L-gIutamatoPirroIina-5-carboxiIasa reductasaMscuIoIisoGTP GMPcVasodiIatacinVasodiIatacinreducidaCa2+GPCRADMAPRMTMetaboIitosDDAHFigura 8CAT-1L-arginina MetaboIismodeL-arginina.GPCR:receptordemembranaacopladoaprotenaG;CAT-1:transportadorde aminocidoscatinicos;ADMA:NG-dimetilargininaasimtrica;PRMT:protenametiltransferasa;DDAH: dimetilarginina dimetilaminohidrolasa. SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "+significativas en la produccin de NO (39, 46). La deteccin de concentraciones elevadas de ADMA, en un paciente dado, puede garantizar la administracin suplementaria de L-arginina, para mejorar la habilidaddelendoteliodecontrarrestarlosefectosvascularesdainosdevasoconstrictoresyROS. Enlosltimosaos,elconocimientodeADMAhaganadoimportanciaclnicaporquenumerosos estudios lo muestran como un factor de riesgo cardiovascular. Esta situacin convierte a ADMA en un nuevo blanco para la teraputica farmacolgica. 4)QueotrocaminometablicoreguladordelaconcentracindeL-argininaenlasclulas endoteliales, la enzima arginasa, est exacerbado y en consecuencia disminuya la disponibilidad del aminocidocomosustratodelaNOSe ylaproduccindeNO(Figura8).LaarginasatransformaL-argininaenL-ornitinayurea.Lasclulasendotelialescontienendosisoformasdearginasa:la, constitutivamente presente y la o inducible. La expresin de la aumenta con el estrs oxidativo y el estiramiento(52)ylasntesisdelaesinducidaportrombina,lipopolisacridosycitoquinas(52). Estoindicaquecambioshemodinmicosasociadosconlahipertensinascomoprocesos inflamatorios crnicos podran producir un aumento importante de los niveles de arginasa (53, 54). La arginasa puede inhibir la produccin de NO a travs de varios mecanismos potenciales que incluyen: competicinconlaNOSeporelsustrato;desacopledelaNOSeconproduccindeO2-.promovido por la menor disponibilidad de L-arginina; sensibilizacin de la NOSe a su inhibidor endgeno ADMA; inhibicin de la actividad de la NOSi a travs de la urea. Adems la arginasa dirige el metabolismo de laL-argininahacialaformacindeL-ornitinayapartirdeesteaminocidoalaformacinde poliaminasyL-prolinaesencialesparaelcrecimientodelaclulamuscularlisaylasntesisde colgeno. As el aumento de actividad de arginasa puede promover el remodelamiento vascular y la formacin de neontima (55). Se ha demostrado que la inhibicin de arginasa estimula la sntesis de NO(56)yquelasobre-expresindelaenzimadeprimelageneracindeNOyestasociadaa disminucindelcontenidointracelulardeL-arginina(55).Estudiosendiversosmodelos experimentalesdehipertensinhanpodidoasociaraumentosdelaactividaddearginasaconel desarrollo de disfuncin endotelial y alta presin arterial (57, 58). Todos estos resultados indican que laexpresinconstitutivadearginasaenlasclulasendotelialescontrarrestalavasodilatacin mediada por NO y sugieren una funcin tnica vasoconstrictora para la enzima, convirtindola en un prometedorblancoteraputicoeneltratamientodeladisfuncinendotelial.Esinteresantedestacar queunintermediarioformadodurantelacatlisisdeL-argininaporlaNOS,NG-hidroxi-L-arginina (Figura3),esunpotenteinhibidordelaarginasa,indicandoqueatravsdelasntesisdeNO,la actividad de la NOSe limita la actividad de arginasa en la clula endotelial (59). Alteraciones en la expresin y/o estructura de la NOSe. OtrofactorquepuedeafectarlaproduccinendotelialdeNOeselgradodeexpresindeNOSe. AunqueNOSe,comoyasemencion,estconstitutivamenteexpresada,numerososresultados experimentales indican que diversos estmulos pueden regular esta expresin (37, 60). As, la fuerza derocedelflujo,bajasconcentracionesdeLDL-oxidadayanlogosdeGMPc,aumentansu expresin. Es interesante destacar que la exposicin transitoria de las clulas endoteliales a perxido dehidrgeno(H2O2),ROSderivadadelradicalO2-.,tambinincrementalaexpresindelaenzima SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin ""(61). Por el contrario, la hipoxia, altas concentraciones de LDL-oxidada, citoquinas como el factor de necrosistumoralalfa(TNF),olipopolisacridosdisminuyensuexpresin.Lamenorexpresinde NOSe fue asociada con desestabilizacin del ARNm (37, 60). Tambin se ha encontrado que los efectos vasculares beneficiosos de las drogas que disminuyen los niveles circulantes de colesterol (estatinas o inhibidores de HMG-CoA reductasa) se deben en parte a suhabilidadparaaumentarlaexpresingnicadelaNOSe(62,63).Sinembargo,elnmerode estudiosclnicosquemuestranquelasestatinasmejoranlarelajacindependientedeendotelioes equivalenteaaquellosquemuestranquelasestatinasnomejoranlafuncinendotelial.Esta discrepancia pudo ser resuelta recurriendo a la medicin de los niveles plasmticos de ADMA: estas drogas no corrigen la funcin endotelial en pacientes con altos niveles de ADMA que bloquea an la NOSesobre-expresada;lasituacinpuederevertirsecuandolaadministracindeestatinasse combina con suplemento nutricional de L-arginina (64, 65).Nohayresultadosconsistentesqueindiquenquelahipertensinesconsecuenciadealteraciones gnicas (polimorfismo) de NOSe. Algunos estudios han encontrado mayor prevalencia de mutaciones gnicasespecficasdeNOSeenpacienteshipertensosrespectodenormotensos(66,67),mientras queotroslaboratoriosnopudieronasociarestosgenotiposconhipertensin(68,69).Estos polimorfismosprobablementeincidanpocoenlasntesisdeNO,sinembargo,puedencobrar importanciaenpresenciadeotrosfactoresderiesgo.Estudiosfuturosquerelacionenmedidas funcionales con el anlisis gentico podrn proveer mejor informacin en este aspecto. Alteraciones en las vas de seales que regulan la actividad de la NOSe. Unmecanismoaconsiderarcomoinductordedisfuncinendotelialeslaalteracindelosfactores celularesquemodulanlaactividaddeNOSe.Estaenzimaestsujetaavariostiposde modificacionesestructurales,muchasvecessobrepuestas,queocurrenluegoquelaprotenaseha sintetizado(post-traduccin).Estasmodificacionesofrecenmecanismosdinmicosdeactivacino inhibicindelaenzimaenrespuestaaestmulosfisiolgicosopatolgicos.Sibienelaumento transitoriodeCa+2proveeelmecanismomsrpidodeactivacindeNOSeatravsdesuunina calmodulina, la actividad de NOSe depende adems de su estado de fosforilacin en residuos serina (Ser),treonina(Thr)ytirosina(Tyr),desuacilacinynitrosilacin,desuinteraccinconotras protenas y de su localizacin subcelular (5, 37, 70).1) Receptores acoplados a protena G. Como se describi previamente, el Ca+2 aumenta en la clula endotelial en respuesta a agonistas cuyos receptores acoplan a protena G (Figura 2). El estudio del deteriorodeestavadesealizacincelularenladisfuncinendotelialhasidofocodeintersde numerosos investigadores. En particular, en la hipertensin se encontr disminuida la expresin de un tipodeprotenaG,laGiyencultivoscelularesseobservquelaLDL-oxidadadisminuyela expresin de esta protena. Este tipo de defecto podra explicar la falta de relajacin dependiente de endotelio en respuesta a ciertos agonistas como por ejemplo la acetilcolina (71, 72). 2)Fosforilacin.LafosforilacindeNOSeenresiduosdeSer,ThryTyr,constituyeunmecanismo fundamental en el control de su actividad en respuesta a numerosos estmulos humorales, mecnicos y farmacolgicos (70, 73-83). Se han descrito varios sitios de fosforilacin, localizados en los distintos SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "#dominios de la enzima: Ser1177, en el dominio reductasa; Ser633 y Ser 615 en la zona de unin al cofactorFMN;Thr495enlazonadeuninalcomplejoCa+2-calmodulinaySer114eneldominio oxigenasa. La fosforilacin de estos sitios puede provocar tanto la estimulacin como la inhibicin de laactividadenzimticadelaNOSe.AslafosforilacindelossitiosSer1177ySer633estimulaa NOSeporfavorecersuuninconcalmodulina,mientrasquelafosforilacindelsitioThr495es inhibitoria porque interfiere con dicha unin. La fosforilacin del residuo Ser1177 promueve adems la activacin de la enzima por provocar su dimerizacin. Los efectos de la fosforilacin de los residuos Ser615 y Ser114 as como la de los residuos de Tyr no se conocen an con exactitud. Se sugiere que podranregularlainteraccindeNOSeconotrasprotenas,comoporejemplosuasociacinala protena caveolina-1 en las caveolas de la membrana celular. LamayoradelosagentesconocidosqueestimulanalaNOSe:fuerzaderocedelflujosanguneo, bradicinina,factorendotelialdecrecimientovascular(VEGF),ATP,estatinaseinhibidoresde fosfodiesterasatipo,provocanlafosforilacindelosresiduosSer1177ySer633,mientrasquela elevada fosforilacin basal del residuo Thr495 disminuye en respuesta a agonistas como bradicinina y VEGF. Aumentos en la fosforilacin deThr495 se encontraron asociados a tabaquismo y a frmacos inmunosupresores como la rapamicina.Lafigura9esquematizalafosforilacindelaNOSeenlosdistintosresiduosantesydespusdela intervencin de diversos agonistas.3)Acilacin.LaNOSenocontienedominioshidrofbicosdetransmembranaysuasociacinala membranaplasmticaestmediadaporacilacindelaenzima.LaNOSeestdoblementeacilada porloscidosgrasossaturadosmirsticoypalmtico.Lamiristilacinesunpasoirreversibleyle permitealaenzimaanclarseenlascaveolasdelamembranaplasmtica.Lapalmitolacinesun procesoreversiblequeestabilizalaasociacindeNOSeconlamembrana.Laestimulacin prolongadadeagonistascomobradicininainducede-palmitolacindeNOSeysutranslocacinal citosol.Estopodrafuncionarcomounmecanismoderetroalimentacinnegativaquedesactivaala NOSe (70). Nitrosilacin.ElprocesodenitrosilacindelaNOSe,unindeNOaresiduosdecistena,es reversible y requiere que la enzima est anclada en la membrana. La nitrosilacin inhibe la actividad de NOSe porque promueve la disociacin de la estructura dimrica en monmeros inactivos (84). La nitrosilacin podrafuncionarentoncescomounmecanismoderetroalimentacinnegativoqueevita la formacin de NO en grandes cantidades.5) Interaccin con protenas. La primer interaccin alostrica protena-protena que se conoci para la NOSe fue con calmodulina. Como ya mencionamos la NOSe requiere calmodulina para la sntesis de NOyestauninesdependientedelaumentodelCa+2intracelular.LaasociacindeNOSeaotras protenastambinmodificasuactividad.Enlaclulaendotelialnoestimulada,NOSeestasociada enlascaveolasalaprotenacaveolina-1,interaccinqueinhibetnicamentealaenzima.La estimulacindelaclulaendotelialpordistintosagonistasylaconsecuenteunindelaenzimaal complejo Ca+2-calmodulina,promueveladisociacindel complejoNOSe-caveolina-1(Figura9).As, los cambios transitorios del Ca+2 intracelular que ocurren en la clula endotelial luego de su activacin SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "$seacompaandecambioscclicosenlainteraccindeNOSeconcaveolina-1versuscalmodulina, resultado de una regulacin protena-protena competitiva (5, 70). Niveles elevados de LDL-oxidada 4) promuevenlatranslocacindelcomplejoNOSe-caveolina-1alinteriordelaclulayporlotanto NOSepermanecetnicamenteinactiva(85).Estudiosrealizadosenratonesquenoexpresan caveolinasugierenqueestaprotenaestinvolucradaenlapatognesisdediversasenfermedades enelhombre,entreellasafeccionesdelsistemacardiovascular.Enloquerespectaalosvasos,la ausencia de caveolina promueve la proliferacin del msculo liso con hiperplasia de la intima (86).Otra protena reguladora de la actividad de NOSe es la chaperona hsp90. La unin de hsp90 a NOSe incrementa la sntesis de NO tanto a bajas como altas concentraciones de Ca+2, porque aumenta la afinidaddelaenzimaporcalmodulinaytambinsuactividadreductasa(87).LaasociacinNOSe-hsp90requierequehsp90estfosforiladaenresiduosTyryestafosforilacinesinducidapor numerososactivadores deNOSecomolafuerzade roce,bradicinina,histamina,VEGF(70).Hsp90 tambinaumentalaactividaddeNOSefacilitandosufosforilacin(88).Hsp90podraentonces funcionarcomoelfactorcelularqueaseguralasecuenciatemporaldeeventosquemantienen activada a NOSe: una fase inicial dependiente de Ca+2 y una posterior dependiente de fosforilacin. Fosforilaciones de NOSeFigura 9Hemo BH4FMNFADNADPH N CDominio oxigenasa Dominio reductasaCav-1Ser114P?AMPKPKC??PP2B-+Thr495PPKC+CaMSer615Ser633FosfatasasdesconocidasSer1177-PP2ANOSeinactivaBradicininaVEGFCa 2+nsulinaFuerza de roceEstatinasHemo BH4FMNFADNADPH N CHsp90Ser114P?AMPKPKC??PP2B-+Thr495CaMSer615Ser633Ser1177+NOSeactivaTyr83-SrcPP1PP2APP2B-P P PAMPKCaMKPKA Akt+++ +NOL-citrulinaNOL-arginina2 FosforiIacin de NOSe. Esquema de la fosforilacin de NOSe en estado inactivo y luego de su activacin por diversos agonistas. Protenas quinasas y fosfatasas que participan. nteracciones protena-protena. CaM:calmodulina;Cav-1:caveolina-1;PK:protenaquinasa;PP:protenafosfatasa;Akt: protena quinasa B, CaMK: protena quinasa dependiente de calcio y calmodulina; Src: tirosina quinasa; Ser: serina; Thr: treonina; Tyr: tirosina; cofactores igual que en figura 4.SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "%ExperimentosdeBrouetycol.(89)mostraronqueelVEGFprimeroproducelaunindeNOSea Ca+2-calmodulinayenconsecuencialadisociacindelcomplejoNOSe-caveolina-1ypromuevela interaccinNOSe-hsp90.EstaasociacinproteicareclutalaquinasaAktactivadaporelagonista, formando un complejo ternario, y Akt fosforila a NOSe (Figura 9). Finalmente el NO puede impedir la interaccin NOSe-hsp90 por nitrosilacin de esta ltima protena. Como mencionamos para NOSe, la nitrosilacin podrafuncionar comounaretroalimentacin negativaquelimitalasntesisexcesiva de NO (90). EstudiosdediferenteslaboratoriosindicanqueNOSetambinpuedeasociarseconprotenasdel citoesqueletoylaactinapareceserlaprotenadelcitoesqueletoparticularmenteinvolucrada.Esta asociacinpuedeofrecerunacoplemecano-qumiconecesarioparalaactivacindelaNOSeen respuesta a la fuerza de roce del flujo sanguneo (Figura 5) como tambin un medio de translocacin de NOSe desde la caveolas a compartimientos intracelulares (5, 70). Disponibilidad de cofactores requeridos por la NOSe Comoyasemencion,enausenciadeL-argininaoBH4,laNOSetransfiereelectronesalO2 molecular y produce O2-. en lugar de NO. Este proceso se conoce como desacople de NOSe. Existe evidenciaexperimentalqueindicaqueeldesacopledeNOSeocurreendiversascondiciones patolgicas y es la consecuencia de la oxidacin de BH4 por efecto del peroxinitrito (38, 91). En estas condiciones la produccin de O2-. disminuye por el tratamiento con L-NAME, un inhibidor de NOSe. La oxidacindeBH4puederepresentarunaalteracinimportanteenlahipertensincomolomuestran Landmesserycol.enratonesDOCA-salhipertensos(92).Elcidoascrbico(vitaminaC)recupera BH4 desde la forma oxidada, por lo tanto provee un mecanismo protector de la sntesis de NO (91). LasntesisdeBH4ocurreapartirdelaenzimaguanosinatrifosfatociclohidrolasa(GTPCH-). NivelesreducidosdeGTPCH-sedetectaronasociadosahipercolesterolemia,insulinoresistencia, prehipertensinyhbitotabquico,todassituacionesenlasquelaadministracinagudadeBH4 mejora la disfuncin endotelial (93-97). La hipertensin provocada por glucocorticoides tambin est asociada a niveles disminuidos de BH4 por depresin de su sntesis (98). Las estatinas aumentan la transcripcingnicadeGTPCH-yporlotantolosnivelesdeBH4enlaclulaendotelial(99).La fuerza de roce tambin aumenta la formacin de BH4 por aumentar la actividad de GTPCH- a travs de la fosforilacin de esta enzima (100). La mayor biodisponibilidad de NO provocada por el ejercicio resulta entonces, no slo de la mayor expresin de NOSe sino tambin del aumento de la sntesis de BH4 ambas generadas por el incremento de la fuerza de roce (97).Losresultadosemergentesdetodos estosestudiospreclnicosyclnicosensituacionesderiesgoy enfermedad cardiovascular avalan un papel primordial de la disponibilidad de BH4 en la patogenia de ladisfuncinendotelialyllevanaconsiderarlaadministracindeBH4comounaherramienta farmacolgica posible (97). II) Aumento de Ia destruccin de NO NO y O2-. sufren una reaccin radical-radical con una velocidad tres veces mayor que la velocidad de reaccin de las superxido dismutasas (SODs), enzimas que transforman el O2-. en H2O2 (37). En un SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "&compartimiento en el que estn presentes tanto NO como SODs, la reaccin preferencial del O2-. es con el NO para formar peroxinitrito (Figura 6). Dada esta rpida velocidad de reaccin, siempre hay O2-. inactivando NO tanto en las clulas como en el espacio extracelular. En condiciones fisiolgicas las defensas antioxidantes minimizan esta interaccin y mantienen un adecuado balance NO-O2-.. Sin embargo, toda situacin que provoque aumento de la concentracin de O2-., an con sntesis normal de NO, provocar disminucin de la biodisponibilidad de NO. La degradacin aumentada de NO por ROSsevinculaadistintaspatologasenmodelosanimales:hipertensin,hipercolesterolemia, diabetes,tabaquismo,insuficienciacardaca.Lasmismasconclusionesseextendieronalhombre (38).O2-.noesprobablementeelnicoradicalquepuedereaccionarconNO,radicalesderivadosde lpidostambinpuedenhacerlo.Alrespecto,sehasugeridoqueradicalesalcoxiehidroperoxidel cido linoleico generados por LDL-oxidada inactivan al NO (38). Origen de especies reactivas deI oxgeno (ROS) en Ias cIuIas vascuIares Unodelosmayoreslogrosdelabiologavasculardelosltimos15aoshasidocomprenderla importanciadelosmecanismosoxidativoscomomediadoresderespuestasfisiolgicasy especialmentefisiopatolgicasenlosvasossanguneos.LasROSsonimportantesmolculasde sealizacin intracelular en los vasos. Sin embargo, cuando existe un desbalance entre su formacin ylosmecanismosantioxidantesdedefensa,estasmolculaspromuevendesrdenesquepueden conduciralahipertensin.Elestrsoxidativovascularhasidopropuestocomoelmecanismo intracelularinvolucradoenlapatogeniadeladisfuncinendotelial,quedisparaysostienevariasde las alteraciones endoteliales descritas ms arriba, que culminan en menor biodisponibilidad de NO y conducen a la hipertensin (27).LaevidenciaacumuladaenlaltimadcadaindicaquelaformacindeROSenlosvasosresulta principalmentedelaactivacindelaenzimaNADPH-oxidasa.Enlasclulasendotelialesel estiramientomecnicoactivalaNADPH-oxidasa(101,102),porlotantoesposiblequeel estiramiento causado por la hipertensin incremente la formacin de O2-.. La angiotensina (Ang ) podra ser la seal qumica de enlace entre el estiramiento vascular y la produccin de O2-.. En apoyo a esta hiptesis, se ha demostrado que el estiramiento vascular aumenta la produccin local de Ang (103) y que la Ang es un potente activador de NADPH-oxidasa endotelial (104, 105). De hecho, el aumentodeactividaddeNADPH-oxidasasehadetectadoenlosvasosderatasespontneamente hipertensas (SHR) y en la hipertensin inducida por infusin de Ang (38).La produccin de O2-. dependiente de NADPH-oxidasa puede a su vez provocar la oxidacin de BH4 y el desacople de la NOSe a travs de la formacin de peroxinitrito, como se describi ms arriba (38, 91)yadems,activarlaenzimaxantina-oxidasa(106,107),aumentarlaexpresindeNADPH-oxidasa (108) y deprimir la actividad de las SODs (109), incrementando an ms los niveles de O2-., la sntesisdeperoxinitritoyeldaotisular.Estacadenadereaccionesproduceysostieneunciclode regeneracinomecanismoderetroalimentacinpositivadeROSenelendoteliodelhipertenso (Figura 10). Este proceso puede potenciarse por los efectos del H2O2 que se forma a partir de a partir de O2-.. Boulden y col. (110) demostraron en clulas endoteliales de aorta bovina que la exposicin a SECCIN HIPERTENSIN ARTERIAL. Endotelio vascular e hipertensin "'MECANISMOS DE REGENERACIN DEL ESTRS OXIDATIVOInfiItracin de fagocitos ymacrfagos Ang IISaI EC-SODexpresin TP-R expresin en membrana ONOO- H O2 2 IC-SODactividad NADPHexpresinPA EstiramientovascuIarBH /BH4 2NOSO2-+++++++++O2-Figura 10 Mecanismos de regeneracin de estrs oxidativo. El radical superxido (O2-.) promueve su propio incremento por varios mecanismos: 1) oxidacin de tetrahidrobiopterina (BH4) y desacople de NOSe, 2) aumento de la expresin de NADPH-oxidasa (NADPH); 3) menor actividad de superxido dismutasas (SOD), 4) aumento de receptores de tromboxano A2 en la membrana celular (TP-R). Ang : angiotensina ; H2O2: perxido de hidrgeno; ONOO-: peroxinitrito; PA: presin arterial. H2O2causainicialmenteunaumentoenlaproduccindeNOperoconeltiempo,laexposicin sostenidaorepetidaaH2O2disminuyelosnivelesdeNO.Estadisminucinpuedeprevenirsecon inhibidores de la NADPH-oxidasa, atrapadores de ROS y administracin de BH4, lo cual sugiere que ladisfuncinendotelialresultadelaoxidacindeBH4porperoxinitritocuandoelH2O2activa simultneamenteaNOSeyNADPH-oxidasa.ElaumentodelosnivelescelularesdeO2-.noslo disminuyelasntesisyaceleraladegradacindelNO,sinoqueademsdeprimelaactividaddela enzima guanilato-ciclasa soluble disminuyendo as la biodisponibilidad de GMPc, segundo mensajero del NO (105). El endotelio vascular surge entonces como un atractivo blanco teraputico en la hipertensin arterial y reducirlaconcentracindeROSse convierteenunmecanismo potencialde enfrentarladisfuncin endotelial. BibIiografa 1.FurchgottRF,ZawadzkiJV.Theobligatoryroleofendothelialcellsintherelaxationofarterialsmoothmuscleby acetylcholine. Nature 288:373-376, 1980. 2. Moncada S. 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