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KITS P/A DE AGUAS
USO EN ALIMENTOS
El método P/A (Presencia/Ausencia) fué inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los
soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando
numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo
gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están
reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones.
En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 ml de muestra el
contenido de 1 vial de medio en polvo estéril adecuado para el microorgansimo que se busca; se incuba; y al dia
siguiente, si no ha cambiado de color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al
color indicado, se demuestra su presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método.
Extendemos desde 2016 su uso para alimentos, líquidos opacos o coloreados y otras muestras donde se desee
comprobar la ausencia de patógenos en 1 gramo, de la forma más fácil, cómoda y fiable:
1-Tratar la muestra en solución madre como de costumbre. Por ejemplo, si es un alimento con conservantes,
diluir 1 g en 90-100 ml de Buffered Peptone Neutralizing Water (MICROKIT RPL112), si es un cosmético diluir 1 g en
90-100 ml de LPT Neutralizing Broth (MICROKIT RPL054), etc. Dejar actuar 25 minutos para neutralizar la acción de
los conservantes que no dejarían detectar el microorganismo diana. Puede emplearse el medio deshidratado (MICROKIT
DMT011, DMT217) y un frasco esterilizado, un bote estéril (MICROKIT VML155) o una bolsa StandUp (B2787B).
2-Añadir el contenido del vial P/A elegido para el microorganismo buscado. O bien las cucharadas necesarias de
la nueva presentación económica de medios P/A en polvo estéril en botes de 100 g.
3-Agitar, incubar y ver al día siguiente si hay cambio de color (positivo presunto)
o no (negativo confirmado). En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas. En
caso negativo declarar la muestra como ausente del patógeno en 1 g de producto.
GAMA (3 años de caducidad desde fabricación):
E. coli (fluorescencia MUG) y Resto de
coliformes (X-Gal vira a azul) Viales pre-pesados FPA900 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI900-
Estreptococos fecales (incl. Enterococos,
vira a negro opaco) Viales pre-pesados FPA901 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI901-
Clostridios (Clostridium perfringens si se
incuba a 44ºC, Clostridios sulfito-
reductores si se incuba a 35ºC, vira a negro)
Viales pre-pesados FPA902 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI902-
Pseudomonas aeruginosa (vira a rosa y da
fluorescencia bajo luz UVA 366 nm -
linterna MICROKIT-)
Viales pre-pesados FPA908 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI908-
Burkholderia cepacia (vira a rojo) Viales pre-pesados FPA904 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI904-
Levaduras y Mohos (enturbia o flocula) Viales pre-pesados FPA905 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI905-
Vibrio cholerae (vira a crema opaco) Viales pre-pesados FPA906 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI906-
Staphylococcus aureus (vira a naranja) Viales pre-pesados FPA907 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI907-
Salmonella (vira a negro) y Shigella Tubos concentrados RPL331 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI331-
Campylobacter (enturbia) Tubos concentrados RPL332 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI332-
E.coli O157 (enturbia) Tubos concentrados RPL333 Bote polvo estéril con cucharilla DMTI333-
Podemos diseñar kits P/A para otros parámetros, sólo solicítenoslo!
Laboratorios MICROKIT tiene el honor de ser desde 1994 el diseñador y fabricante exclusivo de esta gama de
kits P/A, un “producto con estrella” para el laboratorio y el trabajo de campo. Numerosos países lo aplican ya no sólo en
aguas sino además en alimentos y otros productos. Folleto actualizado el 28/09/2016.
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: [email protected]
Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/
Blog: http://www. medioscultivo.com
Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM
DRY PLATES®
PLAQUIS® KITPRO-PLUSDESINFECTEST®
M-IDENT® NEOGRAM
CCCNTMBS
SEILAGUA® ENVIROCOUNT
SALMOQUICK
MUGPLUS
CROMOKIT®AIRESANO
KIT P/A COLICULT MCC
BOTE 100 g ESTÉRIL
El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para
evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido
desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo
el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están
reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios
intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de
membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!
En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de
agua el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de
color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su
presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los
microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.
La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium
perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en
aguas envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y
Pseudomonas aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las
muestras que Ud. analiza, están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de
dinero en “contar ceros”. Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no
existen células decimales, por lo que en microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga
alguna presencia, repita el análisis por MF e informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening
negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus
análisis, ya que el método P/A detecta numerosas presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los
peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 21% de las
aguas que contienen coliformes-E.coli, no son detectadas como positivas mediante el método MF!
Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio
líquido para agregar dentro 100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión
económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un vial a 100 ml de muestra de agua (no
incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios, extendemos
desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes
de 100 g de polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).
En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en
cabina o junto a un Bunsen, extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el
volumen indicado de medio, y cerrar el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que
esto suceda, ya que ninguno de los microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo,
para no contaminar el resto del polvo interior de eventuales células todavía viables de coliformes-E.coli que pudiera
portar en sus manos.
1-Añada una cucharadita (1 gramo) de P/A Colicult MCC para buscar E.coli y demás coliformes en 100 ml de
agua (dos cucharaditas para buscarlos en 250 ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de
medio añadido, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el
agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.
2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay cambio de color paja a azul-verdoso (presunto positivo de
coliforme) o no (negativo confirmado de coliforme). Y si hay fluorescencia azul celeste (presunto positivo de E.coli) o
no (negativo confirmado de E.coli) al mirar en la oscuridad bajo luz UVA de 366 nm (linterna MICROKIT VMT050).
3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (oxidasa para coliformes, indol para E.coli). En
caso negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.
Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para E.coli y demás Coliformes, Ref: DMTI900- para 50-100 muestras, con ¡3
años de caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado el 24-11-2016
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: [email protected]
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KIT P/A ENTEROCULT
BOTE 100 g ESTÉRIL
El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para
evitar que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido
desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo
el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están
reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios
intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de
membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!
En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de
agua el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de
color, se demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su
presencia. Así de sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los
microorganismos como sucede con la MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.
La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos
fecales y Clostridium perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que
no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas envasadas, el recuento de E.coli (y demás
coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas aeruginosa para
demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que
Ud. analiza, están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de
tiempo y de dinero en “contar ceros”. Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe
informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en microbiología, ausencia es
exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e
informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar
ingentes cantidades de tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis,
ya que el método P/A detecta numerosas presencias que el método MF encuentra como “cero”,
que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía internacional que cerca del 6 %
de las aguas que contienen Enterococos fecales, no son detectadas como positivas mediante el método MF!
Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar
dentro 100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril
para añadir un vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros
mayores usuarios, extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente
económica: Botes de 100 g de polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).
En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un
Bunsen, extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de
medio, y cerrar el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que
ninguno de los microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar
el resto del polvo interior de eventuales células de Enterococos fecales que pudiera portar en sus manos.
1-Añada una cucharadita (1 gramo) de P/A ENTEROCULT para buscar Enterococos fecales en 100 ml de agua
(dos cucharaditas para buscarlos en 250 ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de medio
añadido, ya que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el agua es
clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.
2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay cambio de color ámbar a negro-opaco (presunto positivo de
Enterococo fecal) o no (negativo confirmado de Enterococo fecal).
3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (cocos en cadenas, catalasa negativos). En caso
negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.
Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Enterococos fecales, Ref: DMTI901- para 50-100 muestras, con ¡3 años de
caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Actualizado: 24-11-2016
Apartado de Correos / P.O. Box 44
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KIT P/A CLOSTRICULT
BOTE 100 g ESTÉRIL
El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar que los soldados
murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido desarrollando numerosos Kits P/A
cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan
en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que además están reconocidos como el método más fiable, de
acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de
campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se
puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!
En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de agua
el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de color, se
demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de
sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la
MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.
La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium
perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas
envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas
aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que Ud. analiza,
están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de dinero en “contar ceros”.
Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en
microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e
informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de
tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis, ya que el método P/A detecta numerosas
presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía
internacional que, al ser anaerobios estrictos, cerca del 49 % de las aguas que contienen Clostridios, no son detectadas como
positivas mediante el método MF!
Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar dentro
100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un
vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios,
extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes de 100 g de
polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).
En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un Bunsen,
extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de medio, y cerrar
el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que ninguno de los
microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar el resto del polvo
interior de eventuales esporas de Clostridium que pudiera portar en sus manos.
1-Añada tres cucharaditas (3 gramos) de P/A CLOSTRICULT para
buscar Clostridium en 100 ml de agua (seis cucharaditas para buscarlos en 250 ml
de agua). El mismo medio sirve para C.perfringens si se incuba a 44-46ºC y para
Clostridios Sulfito-Reductores si se incuba a 37ºC. No hace falta enrasar ni ser
muy estricto en el volumen de medio añadido, ya que el medio funciona
perfectamente incluso a la mitad y al doble de la concentración indicada. Si el
agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.
2-Agitar, incubar y ver al día siguiente si hay turbidez y/o cambio de color crema a negro-opaco, sea en el fondo o sea
en la totalidad del agua (presunto positivo de Clostridium) o no (negativo confirmado de Clostridium). Si no hay cambios, dejar
incubando otras 18-24 h y volver a verificar el ennegrecimiento parcial o total del agua. Recuerde que de la temperatura de
incubación depende que sean C.perfringens o C.Sulfito-Reductores.
3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (resiembra en TSC-MUP Agar o en SPS). En caso
negativo declarar la muestra como ausente de estos patógenos/indicadores en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.
Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Clostridios, Ref: DMTI902- para 16-32 muestras, con ¡3 años de caducidad! Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado el 24-11-2016
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: [email protected]
Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/
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KIT P/A PSEUDOMONAS
BOTE 100 g ESTÉRIL
El método P/A (Presencia/Ausencia) fue inventado durante la segunda guerra mundial para evitar
que los soldados murieran por beber aguas contaminadas. Desde la década de los 1990, MICROKIT ha ido
desarrollando numerosos Kits P/A cromogénicos para control de patógenos en aguas. Estos kits no sólo
triunfan en todo el mundo gracias a las ONG que trabajan en la mejora del agua de bebida de los países tropicales, sino que
además están reconocidos como el método más fiable, de acuerdo con sus numerosas validaciones y participaciones en
servicios intercomparativos. Se pueden emplear en trabajo de campo y en el laboratorio y ahorran tanto el trabajo de filtración
de membrana (MF) o de NMP, como su coste. Con ellos se puede decir ¡de la muestra a la estufa en 10 segundos!
En el caso de las aguas y muestras líquidas incoloras, simplemente se agrega a los 100 (ó 250 ml) de muestra de agua
el medio estéril adecuado para el microorganismo que se busca; se incuba; y al día siguiente, si no ha cambiado de color, se
demuestra la ausencia del patógeno (sin falsos negativos) y si ha cambiado al color indicado, se demuestra su presencia. Así de
sencillo. Y más efectivo que ningún otro método. Porque el método P/A no estresa los microorganismos como sucede con la
MF, que obtiene recuperaciones muy deficientes.
La legislación europea exige el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales y Clostridium
perfringens y sus esporas en aguas de consumo humano para demostrar que no hay ni una sola célula en 100 mL; y en aguas
envasadas, el recuento de E.coli (y demás coliformes), Enterococos fecales, Clostridium sulfito reductores y Pseudomonas
aeruginosa para demostrar que no hay ni una sola célula en 250 mL. Dado que más del 99,99% de las muestras que Ud. analiza,
están exentas de estos microorganismos, está gastando enormes cantidades de tiempo y de dinero en “contar ceros”.
Cambie al método P/A y todas las ausencias las debe informar como “cero”, ya que no existen células decimales, por lo que en
microbiología, ausencia es exactamente lo mismo que cero. Y cuando tenga alguna presencia, repita el análisis por MF e
informe del recuento que obtenga. De este modo tan sencillo de “screening negativo”, va a ahorrar ingentes cantidades de
tiempo y de dinero, pero además, va a aumentar la fiabilidad de sus análisis, ya que el método P/A detecta numerosas
presencias que el método MF encuentra como “cero”, que son los peligrosos falsos negativos. ¡Se acepta en la bibliografía
internacional que cerca del 33 % de las aguas que contienen Pseudomonas aeruginosa, no son detectadas como positivas
mediante el método MF!
Hasta ahora la presentación del método P/A MICROKIT era en frascos estériles con medio líquido para agregar dentro
100 ml de muestra de agua (referencias RPL3..). O bien la versión económica en viales de medio en polvo estéril para añadir un
vial a 100 ml de muestra de agua (no incluido el bote estéril, referencias FPA9..). Por petición de nuestros mayores usuarios,
extendemos desde finales de 2016 su uso en una nueva presentación extraordinariamente económica: Botes de 100 g de
polvo estéril con cucharilla esterilizable (referencias DMTI9..-).
En esta nueva presentación, que le llega estéril, debe abrir el bote cada vez que lo use, en cabina o junto a un Bunsen,
extraer con la cucharilla esterilizada (o sumergida en alcohol y tras dejar que se seque) el volumen indicado de medio, y cerrar
el bote inmediatamente para evitar que se contamine. A pesar de que es difícil que esto suceda, ya que ninguno de los
microorganismos implicados habitan en el aire. Use guantes estériles al manipularlo, para no contaminar el resto del polvo
interior de eventuales células todavía viables de Pseudomonas aeruginosa que pudiera portar en sus manos.
1-Añada dos cucharaditas (2 gramos) de P/A PSEUDOMONAS para buscar
Pseudomonas aeruginosa en 100 ml de agua (cuatro cucharaditas para buscarla en 250
ml de agua). No hace falta enrasar ni ser muy estricto en el volumen de medio añadido, ya
que el medio funciona perfectamente incluso a la mitad y al doble de esta concentración. Si
el agua es clorada, añadir el tiosulfato sódico correspondiente para neutralizarlo.
2-Agitar, incubar a 37ºC y ver al día siguiente si hay viraje del agua de color paja
a rosa y si da fluorescencia verde-amarillenta en la oscuridad bajo luz UVA de 366 nm
(linterna MICROKIT VMT050). Si no hay cambios, dejar incubando otro día y volver a
verificar si hay viraje a rosa del agua. Por si las Ps.aeruginosa estuviesen muy estresadas, es prudente dejar los negativos
incubando hasta 3 días y verificar después si sigue sin haber viraje a rosa y fluorescencia.
3-En caso positivo hacer pruebas de confirmación adecuadas (resiembra en Cetrimide Agar y uso de M-Ident-PS). En
caso negativo declarar la muestra como ausente de este patógeno en 100 (ó 250 mL) de muestra de agua.
Bote de polvo estéril 100g y cucharilla para Pseudomonas aeruginosa, Ref: DMTI908- para 25-50 muestras, con ¡3 años de
caducidad!
Medio diseñado, validado y fabricado por MICROKIT desde 1994. Presentación 100 g desde Octubre de 2016. Revisado: 24/11/2016.
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: [email protected]
Web: www.microkit.es http://www.laboratoriosmicrokit.blogspot.com/
Blog: http://www. medioscultivo.com
Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM
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1
MICROKIT® P/A Burkholderia cepacia
Detección Presencia / Ausencia (P/A) en 100 ml de agua
INTRODUCCIÓN:
Medio estéril Cromogénico diseñado por MICROKIT en base al BCA (BCPT), para
detección P/A (o recuento NMP empleando cubetas NMP Ref:1001020 ó Quantitry de
Idexx) de Burkholderia cepacia (viraje del agua a rojo burdeos en sólo 18-24h e indol - con
reactivo de Kovacs SBH056), que puede elegir en tres formatos diferentes:
a) RPL323 Frascos tomamuestras con caldo estéril hidratado y tapón a rosca
para añadir en ellos 100 mL de la muestra de agua. Cajas 10u ó 9x10u
b) FPA904 Viales prepesados de polvo estéril con tapón a rosca para añadir a
100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155 o
bolsa standup 100 mL B2787B estériles). Cajas 40u ó 10x40u.
c) DMTI904- Botes 100 g de polvo estéril y cucharilla dosificadora para
añadir a 100 mL de la muestra de agua (no incluido bote 100 mL VML155
o bolsa standup 100 mL B2787B estériles), Bote para 50 test.
De gran utilidad como screening negativo de muestras rutinarias, al ser un
método más fácil de emplear que la filtración de membrana y más fiable (escasez de falsos
positivos y de falsos negativos, que en filtración de membrana es de nada menos que el 33%
de las muestras analizadas en el mundo, por el estrés provocado durante la filtración).
También muy útil para que las potabilizadoras no dejen de analizar en festivos y
fines de semana, ya que este método puede ser empleado por personal no especialista en
microbiología, el mismo guarda de la depuradora puede hacerlo. La única precaución es que
el operario no toque ni el agua ni el polvo con sus manos, para evitar contaminaciones
artificiales.
MODO DE EMPLEO:
Es necesario tratar previamente el agua clorada, mediante Tiosulfato Sódico, para
que las células dañadas subletalmente se recuperen, excepto en los frascos tomamuestras
RPL302, que ya incluyen el tiosulfato.
Añadir los 100 mL de agua de muestra en el frasco o en el recipiente estéril que se va
a utilizar; en el caso de los viales, añadir todo el contenido sobre el agua; en el caso de los
botes de 100g, ponerse guantes estériles para no contaminar el medio y usarlo en cabina de
flujo laminar; añadir 3 cucharaditas rasas sobre el agua y cerrar el bote con la cucharilla
dentro para los posteriores usos. Agitar para homogeneizar. El color resultante es naranja,
transparente. Incubar 18-48 horas (la rapidez del viraje depende del estado metabólico/estrés
de la cepa, aun que casi siempre vira en 18h) a 35-37° C. La muestra inoculada sirve
también de medio de transporte, por lo que no es necesario incubar inmediatamente después
de la toma de la muestra, pudiendo transcurrir hasta horas entre toma e incubación.
Monitorice todos los puntos necesarios para el análisis preventivo de tendencias.
Apartado de Correos / P.O. Box 44
28210-Valdemorillo (Madrid, Spain)
(34) 91 897 46 16 Fax: (34) 91 897 46 41
E-mail: [email protected]
Web: http://www.microkit.es
Blog: www.medioscultivo.com
Empresa Certificada bajo Norma ISO 9001 desde 1997
MCC P/A COSMETIKIT®CRIOTECA® CHROMOSALM
DRY PLATES®
PLAQUIS® KITPRO-PLUSDESINFECTEST®
M-IDENT® NEOGRAM
CCCNTMBS
SEILAGUA® ENVIROCOUNT
SALMOQUICK
MUGPLUS
CROMOKIT®AIRESANO
2
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS: El viraje del agua
a color rojo burdeos (vino tinto) y opaco demuestra la
Presencia de B.cepacia en la muestra de agua. La ausencia de
fluorescencia azul que se observa en la oscuridad bajo U.V.A.
de 366 nm (linterna VMT050) confirma que no se trata de
P.aeruginosa. Además, con 0,5 ml de KOVACS-SBH056, no
hay anillo rojo de Indol en superficie, lo que descarta falsos
positivos de coliformes. Ya que hay otros microorganismos
capaces de virar a rojo, pero son más lentos, fluorescentes o
indol +. Puede conseguir que el kit sea muy selectivo
añadiendo a cada frasco 0,14 ml del suplemento MICROKIT
SMT301 (Ticarcilina + Polimixina). Preferimos ofrecer el kit
sin suplemento porque algunas cepas de B.cepacia subletales
podrían no crecer (por ejemplo la DSMZ 50181 no crece bien
con los antibióticos).
Es necesaria la ausencia (no viraje), que equivale a
0 ufc/100 mL. Sólo en caso positivo debería repetirse la muestra por método cuantitativo si
se requiere un recuento concreto, aunque la legislación exige 0 y por tanto no importa si hay
2 ó 950, en ambos casos el agua no es aceptable para fabricación de medicamentos y
cosméticos.
Como siempre en microbiología, resiembre los positivos en estría en agar selectivo
BCA (BCPT) e identifique las colonias con galerías bioquímicas (MICROKIT 245000) o
con nuestro servicio de identificación molecular (SFI004).
Material necesario no incluído: Tiosulfato Sódico para eliminar el cloro (SMT976)
excepto en los frascos tomamuestras RPL323, que ya lo incluyen. Bote estéril 100ml
(VML155), o bolsa estéril autosellable Stand-Up (B2787B). Estufa o incubador 35-37ºC
(SIL12AR ó SIL24AR).
PARA USO EXCLUSIVO EN LABORATORIO O INCLUSO PARA ANÁLISIS
DE CAMPO. MANTENER FUERA DEL ALCANCE Y DE LA VISTA DE LOS NIÑOS
Y ANIMALES.
Los viales FPA904 y botes DMTI904- son extremadamente higroscópicos:
manténgalos bien cerrados en lugar seco, fresco y oscuro (no en nevera). Agite el bote antes
de usar. En zonas de elevada humedad ambiental, guardar bien cerrados en un tupper
hermético con silicagel. Los frascos RPL323 tampoco precisan nevera, sólo oscuridad.
CONTROL DE CALIDAD: Realizado en nuestro laboratorio; es prudente repetirlo en su laboratorio
siempre que varíen las condiciones (más de 3 meses sin usar, tras desinfectar laboratorio, tras largos fletes, tras
conservar a alta Tª, cuando adquiere aspectos extraños aunque no haya llegado la fecha de caducidad teórica de
la etiqueta,...) DESHIDRATADO: Polvo, rosado, sólo existe versión agarizada y versión irradiada.
PREPARADO: Estéril, crema-anaranjado a menudo con precipitados negros de hierro
CONTROL DE CRECIMIENTO 18 h a 35°C aproximadamente:
Burkholderia cepacia MKTA 25416, Viraje a rojo burdeos, opaco
Burkholderia cepacia MKTN 10743, Viraje a rojo burdeos, opaco
Burkholderia cepacia MKTD 50181, Viraje a rojo burdeos, opaco
Pseudomonas aeruginosa MKTA 9027 (WDCM00026), Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
Escherichia coli MKTA 25922, Inhibido, Viraje ocasional a rojizo tras 24h
Staphylococcus aureus MKTA 6538, Inhibido
El usuario es el único responsable de la eliminación de los microorganismos según la legislación
medioambiental vigente. Autoclavar antes de desechar a la basura.
Diseñado, Validado y Fabricado por MICROKIT desde 1994. Texto revisado en 6-2018
Izda: positivo. Dcha: negativo