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DESARROLLO DE UN MATERIAL NANO SINTÉTICO CON PROPIEDADES DECAPTACIÓN, RETENCIÓN Y LIBERACIÓN DE AGUA COMO LO HACE EL
MUSGO SPHAGNUM.
REALIZADO POR:
PABLO ACOSTA SALDARRIAGAMATEO MORALES RODAS
JARED MORENO MOSQUERAVALERIA HERRERA BERNAL
INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA Y LAINNOVACIÓN
MEDELLÍN, ANTIOQUIA
2013
DESARROLLO DE UN MATERIAL NANO SINTÉTICO CON PROPIEDADES DECAPTACIÓN, RETENCIÓN Y LIBERACIÓN DE AGUA COMO LO HACE EL
MUSGO SPHAGNUM.
PABLO ACOSTA SALDARRIAGAMATEO MORALES RODAS
JARED MORENO MOSQUERAVALERIA HERRERA BERNAL
Proyecto de investigación.
Asesor institucional: Robinson Salazar DiazAsesora sena: Ruth Zorayda Osorio Gutierrez
INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA Y LAINNOVACIÓN.
MEDELLÍN2013
Resumen
El proyecto está centrado en buscar una alternativa, que se basa en diseñar un material nanosintético con propiedades de captación, retención y liberación de agua como lo hace el musgo sphagnum, por medio del cual, se pretende solucionar la actual problemática que se evidencia en todos los ecosistemas colombianos; la cual se desata, por la extracción irracional del musgo que ha generado el hombre, por medio de la intervención en los ecosistemas.
Estudiando y analizando así todas las variables que nos permitan desarrollar el material nanosintético, el cual ayudara con la restauración de ecosistemas y la revegetalización de zonas áridas.
Abstract
Project is focused on the search for an alternative, which is based on designing amaterial nanosintetico properties of recruitment, retention and release of water asthe sphagnum Moss, through which is intended to solve the current problems whichare currently evident in all Colombian ecosystems; which is unleashed, by irrationalextraction of MOSS that has generated the man, through intervention inecosystems.
Studying and analyzing all the variables that allow us to develop the nanosinteticomaterial, which will help with the restoration of ecosystems and the revegetation ofarid areas as well.
Pregunta de investigación
¿Cómo diseñar una estructura semejante a la que utiliza el musgo sphagnum, para la captación, retención y liberación de agua, por medio de la nanotecnología?
Justificación
Debido a que las briofitas, especialmente el musgo es una planta con capacidad de captar, retener y liberar agua, además de tener una alta tolerancia al estrés osmótico y a la salinidad, según lo dicho en el articulo “CULTIVO IN VITRO Y ANALISIS FENOTIPICO DE Ceratodon stenocarpus, UN MUSGO MEXICANO CON ALTA TOLERANCIA A ESTRÉS OSMÓTICO”.Se decidió utilizar esta clase de briofita para hacer una caracterización de las mismas y desarrollar un material sintético con capacidades similares, según el resultado de la caracterización de estas mismas.
Objetivo General
Desarrollar un material nanosintético con capacidades de captación, retención y liberación de agua similares a las del musgo sphagnum.
Objetivos Específicos
Realizar experimentaciones con musgo, por medio del cultivo in vitro para reconocer las variables que afectan a estè.
Caracterizar la composición física y morfológica del musgo sphagnum por medio de un microscopio de fluorescencia.
Analizar el comportamiento del musgo a diferentes situaciones de estrés. Identificar materiales que puedan similar las propiedades del musgo
sphagnum, para la realización del material nanosintético.
Descripción del problema.
La falta de recursos naturales, es algo que ha comenzado a afectar a todos, recursos naturales como los árboles y nuestros ecosistemas están siendo destruidos por el hombre, ya sea por la tala de estos o la extracción del musgo para otros usos, todo esto afecta nuestros ecosistemas, dejando así un grave impacto en nuestra tierra; los ecosistemas poseen como principal base de ellos mismo el musgo.
El manejo irracional del musgo por parte de los humanos, ha generado gran inestabilidad en los ambientes naturales, ya que este es parte importante del ecosistema, este tiene la capacidad de captar y liberar agua en la tierra y ayuda a la formación de ríos, cascadas y otras fuentes de agua totalmente naturales; además también ayuda a prevenir la erosión del suelo y al mismo tiempo proporciona a la tierra algunos minerales del agua lluvia. Se sabe que el agua es la principal fuente de vida de un ecosistema,es el elemento más abundante de la Tierra el cual cubre el 73% de la superficie terrestre,el musgo es un gran colaborador a este, en resumidas cuentas, por lo cual si hay escasez de agua igualmente hay escasez de fauna y flora por lo tanto, sin musgo que absorba la mayor parte del agua de los ecosistemas todo aquello que conocemos poco a poco se extinguirá.
Antecedentes del problema
Lifeng Li, director del programa internacional freshwater del fondo mundial para la naturaleza(4), dice que es preocupante la mala gestión de recursos hídricos para los pobladores en países de América latina, Asia meridional y África subsahariana, donde pagan más por el agua que en Europa. Agrega que tanto como el sector privado como el gobierno son los responsables.
De acuerdo con los escenarios de cambio climático que ha construido la Ideam, se considera que hacia el 2050 el 60% de los páramos en Colombia habrán desaparecido.(5)
En el caso de Colombia los ecosistemas más propensos a desaparecer por efectos del cambio climático son los de alta montaña, los páramos y los glaciares.
De hecho, las principales fuentes de agua están ubicadas en los andes colombianos, específicamente en las cordilleras oriental y occidental, desde donde se origina la mayor oferta hídrica que consumen los colombianos, según César Ruiz, coordinador socioeconómico de conservación internacional. (5)
Los factores por los cuales las fuentes se están secando y son más contaminadas tienen múltiples orígenes. “Por un lado, existe un antecedente histórico: la deforestación de los bosques andinos que se encuentran por encima de los 2.000 metros sobre el nivel del mar. La transformación de los páramos, que han debido ceder grandes porciones de tierra para ampliar la frontera agrícola del cultivo de diferentes productos, especialmente la papa, y el desplazamiento de comunidades en las partes altas de la montaña”, asegura Ruiz.(5)
La especialista Yelitza León, habla sobre la importancia de musgos y otras especies. Ella asegura que el problema radica en la cantidad de personas que quieren seguir la tradición del pesebre con musgo. Imposible comparar la gente en la región andina que lo hacía a principios de los años 1900, a las que hoy quieren hacerlo en todo el país. En el caso por la pérdida de musgo en el páramo, dice: “Al ser altamente impactada por la extracción, el páramo pierde diversidad, agua, se deterioran los suelos y se afecta la belleza del paisaje”. (3)
Los musgos cumplen un papel fundamental en el ecosistema donde habitan. Sus funciones como regulador del agua, protector de suelo y hogar de pequeños animales (entre muchas otras) son clave para el equilibrio ecológico. Pero la exagerada demanda de musgos y otras especies en la temporada decembrina,
llevó en el 2005 al entonces Ministerio del Ambiente a emitir la Resolución 122 (GORBV 38.314) que prohíbe su explotación y comercialización.
Las briofitas (hablamos de miles de especies y no de una sola), son organismos que a diferencia de otras plantas absorben el agua y otras partículas que le sirven de alimento a través del todo el cuerpo de la planta, eso hace que sean grandes captadores y almacenadores de agua que van liberando al ambiente poco a poco. Son verdaderas esponjas en bosques y páramos.
Además, protegen el suelo contra la erosión, son hogar de muchas especies de invertebrados que son también muy útiles para la formación del suelo y además actúan como germinadores de semillas de otras plantas de los ambientes donde habitan.(3)
Metodología
Primero se buscará información sobre algunas ubicaciones geográficas aquí en la ciudad de medellín, donde encontremos una buena variedad de briofitas.
Luego la realización de este proyecto se hará por medio de un cronograma que separará por etapas lo que se realizará:
La Primera Etapa
Por lo primero se realizarán caracterizaciones de tipo físico evaluando el comportamiento físico de la briofita, al estimularse con diferentes medios: luz, agua, oscuridad, pruebas osmóticas, de cinética de reacciones, permeabilidad, capilaridad, entre otras, para esto se hará un cultivo in vitro del musgo con un control necesario para la manutención de la muestra.
Luego al haber pasado una cantidad específica de tiempo que permitirá la evaluación de las capacidades y debilidades del musgo, se hará un análisis de todo el proceso del musgo en los invernaderos con su respectivo diagnóstico.
Cultivo In Vitro:
Para el cultivo in vitro se observan distintas variables como lo son la humedad, la temperatura, la reproducción; además también de mirar qué minerales son buenos para el medio de cultivo que permita la propagación del musgo
La caracterización morfológica, identificando sus diferentes partes y sus funciones.
Luego la caracterización óptica, para identificar a microescala sus características morfológicas.
Y luego someterla en la segunda fase a condiciones de estrés para analizar su comportamiento
La segunda etapa hará referencia a la selección del musgo que se utilizará; También se hará una caracterización de materiales orgánicos que nos permitirá encontrar uno con características morfológicas compatibles con las del musgo.
Cuando se encuentre será la hora de pasar a la tercera y última etapa del proyecto que será el desarrollo del material como tal y las pruebas de su eficacia con respecto a las expectativas que se tenían al comenzar con el proyecto; cuando su eficacia sea comprobada pasaremos a producir en masa este material para la comercialización del mismo.
Selección de Muestra
MARCO TEÓRICO
BriofitasEn el ambiente terrestre, son cerca de 20,000 especies, las briofitas son el segundo grupo más importante de plantas verdes. Generalmente son pequeñas y habitan en ambientes muy variados, desde cerca del nivel del mar hasta las elevaciones más altas, en las selvas o en los desiertos, pero su vida siempre está íntimamente ligada al agua en estado líquido. Su ciclo de vida incluye dos fases: el gametofito y el esporofito. Cada una de ellas tiene atributos morfológicos y biológicos que señalan a las briofitas como un grupo excepcional y muy importante en la evolución del reino vegetal. Tradicionalmente se les divide en tres categorías, a saber, Antocerotes, Hepáticas y Musgos.
Estas plantas se caracterizan porque no tienen vasos conductores, ni frutos ni flores.
El Ciclo de Vida de las briofitas
Las briofitas tienen un ciclo de vida heteromórfico. El gametofito o fase haploidees la dominante en las briofitas; es la más conspicua y la que tiene mayorduración. En comparación, el esporofito o fase diploide es pequeño y deduración corta. En la fase del gametofito, las plantas verdes pueden tener formastaloides o foliosas que derivan de la división de una sola célula apical. Durante laetapa reproductiva, el gametofito produce órganos sexuales masculinos(anteridios) o femeninos (arquegonios); las células sexuales masculinas oanterozoides son biflagelados y, por lo tanto, necesitan un ambiente acuosopara desplazarse. Los anterozoides y la oosfera (célula sexual femenina) seproduce por mitosis pues se forman en gametofitos haploides. Al ocurrir lafecundación, la célula diploide o cigoto, derivada de la unión de las dos célulassexuales, por divisiones sucesivas se transforma en un embrión multicelular. Mástarde, una vez diferenciado el pie que lo sujeta al gametofito y la seta o pediceloque sostiene a una cápsula, el embrión se transforma en un esporofito en el quela división meiótica del tejido esporógeno de la cápsula permite la formación deesporas unicelulares haploides. Las esporas maduras son liberadas y aldispersarse, germinan y forman filamentos o masas celulares que se conocencomo `protonema'. A partir del protonema forman nuevos gametofitos.
gametofito: las plantas con ciclo de vida haplodiplonte (es decir, con generaciones alternadas de individuos haploides y diploides), se llama gametofito al individuo de la generación haploide. El gametofito es descendiente de un individuo adulto fértil de la generación diploide (llamado esporofito), y a su vez tendrá descendientes directos que también serán diploides (esporofitos).
El gametofito es en un principio una única célula haploide derivada de la meiosis producida en el esporofito (el individuo adulto diploide multicelular), pero a diferencia de lo que pasa con los animales por ejemplo, esta célula haploide posteriormente se desarrolla por mitosis, dando un individuo adulto multicelular. Es este adulto multicelular el que dará las gametas fértiles que se unirán durante la fecundación, dando un nuevo individuo diploide.
El gametofito produce los gametos masculinos o femeninos (o ambos). No hay cambio de número de cromosomas en el gameto, que tiene la misma cantidad haploide de cromosomas que el gametofito y por lo tanto en este caso los gametos son producidos por mitosis (esto es una diferencia con lo que pasa en el ciclo de vida diplonte que poseen los animales, por ejemplo). La fusión de los gametos masculinos y femeninos produce el cigoto diploide.
el gametofito es una fase visible del ciclo de vida. En los briofitos se dice que el gametofito es "la fase dominante" del ciclo de vida, porque es fotosintético y el que debe resistir la presión de selección del ambiente.
esporofito: se llama esporofito a la fase diploide multicelular, la cual produce por meiosis esporas haploides (meiosporas), de cuyo desarrollo deriva individuos haploides, llamados gametofitos.
Un esporofito se desarrolla por proliferación celular (mitosis) a partir de un cigoto, formado por fecundación, es decir, la fusión de dos gametos o células sexuales haploides, originados en órganos especializados llamados gametangios que se desarrollan sobre los gametofitos.
El gametofito es la estructura haploide multicelular de las plantas haplodiplontes (con alternancia de generaciones gametofítica y esporofítica).
Un esporofito se desarrolla por proliferación celular (mitosis) a partir de un cigoto, formado por fecundación, es decir, la fusión de dos gametos o células sexuales haploides, originados en órganos especializados llamados gametangios que se desarrollan sobre los gametofitos
Los Musgos:
Los musgos son plantas briofitas que crecen en gran variedad de condiciones, desde el agua a las rocas. Eso sí, generalmente los encontramos en suelos húmedos: troncos, cortezas de árboles. Con cerca de 13.000 especies en todo el planeta, los musgos son el grupo más numeroso y diverso de las briofitas.
Los musgos son plantas simples: sin vasos conductores, ni flores, ni frutos, el musgo inhibe la erosión del suelo y promueve la retención de la humedad del mismo. Así, Se encontramos al musgo entre los primeros organismos que colonizan las rocas. Y es que al crecer éstos sobre las rocas modifican su superficie y forman un sustrato en el que pueden agarrar otras plantas.
El tallo puede ser erecto o postrado, de unos milímetros o centímetros de tamaño; su estructura interna, aunque simple, puede incluir un eje o cordón central en muchos musgos, y un sistema de conducción primitivo en algunos grupos. Además de los rizoides, los tallos de los musgos pueden tener estructuras fotosintéticas o de protección como pelos axilares, parafilios y pseudo parafílicos. Las hojas están arregladas en forma espiral sobre el tallo, pero con frecuencia tienen otros arreglos; son uni o pluriestratificadas y sus células varían en tamaño, forma y ornamentación. Las hojas de muchos musgos tienen una costa, un nervio de longitud variable que puede prolongarse más allá de la lámina foliar en un mucrón o pelo foliar hialino. La costa puede se doble en algunos musgos tropicales y en algunos musgos, está cubierta por filamentos o lamelas. La anatomía de la costa también es compleja; consiste de varios tipos de células, incluyendo algunas de pared gruesa y otras de pared delgada que participan en la conducción de agua.
Las Hepáticas:Estamos ante plantas briofitas que se encuentra en emplazamientos húmedos. Presentan un tallo provisto de rizoides. Este talo les sirve para fijarse y absorber alimento. No presentan vasos conductores, aunque sí poseen células muy especializadas. Poseen unos pequeños tallos con arquegonios (gametofitos femeninos) y anteridios (gametofitos masculinos). Hay plantas hepáticas talosas y foliosas.
Los Antoceros:Los antoceros parecen un grupo de plantas esencial y clave en la evolución de las plantas. El gametofito es de estructura simple y presenta rasgos primitivos. Se conocen algo más de 100 especies de antoceros en el planeta. Su gametofito es un talo multiestratificado en el que cada célula contiene de 1 a 12 cloroplastos lenticulares.
Capilaridad:La capilaridad es una propiedad física del agua por la que ella puede avanzar a través de un canal minúsculo (desde unos milímetros hasta micras de tamaño) siempre y cuando el agua se encuentre en contacto con ambas paredes de este canal y estas paredes se encuentren suficientemente juntas.Esta propiedad la conocemos todos pues es perfectamente visible cuando ponemos en contacto un terrón de azúcar con el café. El agua del café "invade" en pocos segundos los pequeños espacios de aire que quedan entre los minúsculos cristales de sacarosa del azucarillo.
Pues bien, esta misma propiedad es la que distribuye el agua por el microespacio de aire que queda entre las partículas del suelo o sustrato. Allí queda el agua retenida hasta que finalmente es encontrada por las raíces de las plantas siendo absorbida por unos pelillos que tienen las mismas, que son los encargados de cumplir con esta misión de absorción. La capilaridad, es pues, el principio natural por el que el agua circula a través el suelo de nuestros campos y bosques y nutre a todas las plantas de la tierra.
TURGENCIA: Es el estado de RIGIDEZ de una célula Vegetal, es decir, es el fenómeno por el cual las células al ABSORBER H2O, se HINCHAN, ejerciendo PRESIÓN contra las membranas celulares, las cuales se ponen tensas. De esto depende que una planta esté marchita o firme. Este fenómeno esta relacionado con la ÓSMOSIS.
La PRESIÓN ejercida por la absorción de H2O hace que las células se DILATEN cuanto lo permite la elasticidad de las membranas, y por ende la resistencia de las células vecinas, es por eso que los órganos, como por ejemplo el pecíolo, el tallo, las hojas y frutos maduros se encuentren en ese estado de firmeza.
Las PLANTAS dependen de la PRESIÓN de TURGENCIA para la elongación de sus células y para su crecimiento y usan este fenómeno para regular la transpiración a través de la apertura y cierre de las células estomáticas.
PLASMÓLISIS: Es contrario a la Turgencia. En este fenómeno las células al PERDER H2O se CONTRAEN, separándose el Protoplasto de la Pared Celular. Cuando por ejemplo se amputa un órgano de la planta este se marchita en un determinado tiempo. También si la planta se encuentra un tiempo extendido a los rayos solares se produce un exceso de TRANSPIRACIÓN, provocando de esta manera la eliminación de vapor de agua al medio.
osmosis: Se define ósmosis como una difusión pasiva, caracterizada por el
paso del agua, disolvente, a través de la membrana semipermeable, desde la solución más diluida a la más concentrada.
La ósmosis a pesar de que su nombre suene tan raro, no es más un proceso normal de toda célula, según el cual un líquido pasa de una región de alta concentración acuosa a través de una membrana semipermeable a una región de baja concentración con el objetivo de igualar las concentraciones de ambos solutos.
presión osmótica : entendemos por presión osmótica, a aquella que sería necesaria para detener el flujo de agua a través de la membrana semipermeable. Al considerar como semipermeable a la membrana plasmática, las células de los organismos pluricelulares deben permanecer en equilibrio osmótico con los líquidos tisulares que los bañan.
características que distinguen a las plantas de otros organismos :
1. las plantas son eucariotas pluricelulares, en la clasificación moderna; las plantas se encuentran entre eucariotas, organismos cuyas células poseen un núcleo, membrana que contiene el ADN celular.
2. casi todas las plantas son capaces de realizar fotosíntesis. como las plantas pueden fabricar su alimento mediante la misma, se les conoce como autótrofas.
3. las plantas poseen paredes celulares compuestas principalmente por celulosa. la celulosa es una cadena de moléculas de glucosa. las paredes celulares ricas en celulosa ayudan a distinguir las plantas de otros eucariotas.
4. las plantas presentan dos formas o fases que se alternan para producirse mutuamente. una de ella fábrica esporas, células reproductoras que puede convertirse en adultos sin fusionarse con otra célula reproductora. la otra forma adulta fabrica espermatozoides u ovocélulas. el espermatozoide fecunda la ovocélula para crear un embrión que da lugar al organismo adulto.
5. el embrión pluricelular de las plantas se encuentra protegido dentro de la planta madre. los embriones protegidos evolucionaron como una forma de adaptación a la vida terrestre.
cada una de estas características no es inherente por sí misma a las plantas, pero en conjunto todas son útiles para distinguir las plantas de otros organismos.
La progenie vegetal puede concebirse mediante reproducción sexual o reproduccion asexual, en la que un unico progenitor puede tener hijos identicos a èl.asíi mismo, el crecimiento vegetal es bastante diferente a el animal. los vegetales pueden crecer durante toda su vida y, debido a que este crecimiento es ilimitado, se conoce como crecimiento indeterminado.
Microscopio de fluorescencia
Microscopía de fluorescencia: Descubierto en 1908 por Köhler y Siedentopf, y se basa en que una sustancia natural en las células o un colorante fluorescente aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida
da como rayas luminosos.
Siendo escasas las moléculas auto fluorescentes, su aplicación más difundida es para revelar una fluorescencia agregada, como en la detección de antígenos o anticuerpos. También se puede inyectar moléculas fluorescentes específicas en
un animal o directamente en células y usarlas como marcadores.
Fluorocromos: Pueden usarse directamente, aprovechando la propiedad de unirse a determinadas moléculas u orgánulos. Pero lo más habitual es que estos colorantes se emplean conjugados a otras moléculas, como anticuerpos, que son capaces de unirse de modo específico a estructuras concretas de la célula. Algunos colorantes denominados fluorocromos tienen la propiedad de ser excitados (pasar a un nivel superior de energía) cuando absorben luz ultravioleta (luz de longitud de onda corta).
Problema: La utilización de fluorocromos pierde grandes intensidades de luz empleadas, entonces no pueden observadas durante largos periodos de tiempo debido a la desaparición de la fluorescencia.
Fluorescencia: A medida que las moléculas excitadas regresan a su estado normal liberan el exceso de energía en forma de luz visible de mayor longitud de onda que la radiación excitante. Los objetos fluorescentes aparecen brillantemente iluminados contra un fondo oscuro, según el color del colorante usado.
Epifluorescencia: Hoy día se utiliza mucho un microscopio de fluorescencia en el cual la luz es emitida desde arriba del preparado. Por lo tanto, el objetivo del microscopio actúa como lente iluminadora y de imagen.
Microscopio de fuerza atómica (AFM)
El Microscopio de Fuerza Atómica (AFM) es un instrumento mecanoóptico capaz de detectar fuerzas del orden de los nanos newtons. Al analizar una muestra, es capaz de registrar continuamente la altura sobre la superficie de una sonda o punta cristalina de forma piramidal. La sonda va acoplada a un listón microscópico, muy sensible al efecto de las fuerzas, de sólo unos 200 µm de longitud (cantiléver, ver figura).
La fuerza atómica se puede detectar cuando la punta está muy próxima a la superficie de la muestra. Es posible entonces registrar la pequeña flexión del listón mediante un haz láser reflejado en su parte posterior. Un sistema auxiliar piezoeléctrico desplaza la muestra tridimensionalmente, mientras que la punta recorre ordenadamente la superficie. Todos los movimientos son controlados por una computadora.
La resolución del instrumento es de menos de 1 nm, y la pantalla de visualización permite distinguir detalles en la superficie de la muestra con una amplificación de
varios millones de veces.
Algunas imágenes obtenidas con el Microscopio de Fuerza Atómica son las siguientes: a) cabello, b) bacilo "anclado" sobre una base de vidrio, c) plano de clivaje de la mica. Note las diferentes escalas y que en (c) se resuelven detalles bastante menores de 1 nm.
Marco Referencial
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Y WEBGRÁFIAS
1. Fuente “Florpedia.com”, “Plantas no vasculares”, publicado en el año2008, recopilado el 30 de mayo del 2013 de:http://plantas.florpedia.com/plantasnovascularesbriofitas.html
2. Fuente “euroresidentes.com”, “Tecnología de riego avanzado ELPRINCIPIO DE LA CAPILARIDAD”, recopilado el 30 de mayo del 2013de:http://www.euroresidentes.com/jardineria/sistemas_de_riego/riego/riego_en_casa/capilaridad.htm
3. Fuente: “Colegio Tecnólogos Médicos de Chile A.G”, “Microscopio deFluorescencia”, publicado el 27 de julio del 2012, recopilado el 30 de mayodel 2013 de la pagina:http://morfoudec.blogspot.com/2008/07/microscopadefluorescencia.html
4. Fuente “Universidad Nacional(UNal)”, “escasez de recursos en colombia”,recuperado el 04 de junio del 2013 de:http://www.idea.unal.edu.co/public/docs/abund_escasez.pdf
5. Luis Aparicio Hernández, “Los musgos “son verdaderas esponjas enbosques y páramos” publicado el 23 de diciembre del 2007, recopilado el04 de junio de 2013 de la pagina:http://www.condesan.org/ppa/node/3393
6. Marcela Osorio Granados, “La escasez de agua puede ser inevitable:WWF” publicado el 22 de marzo del 2013, recopilado el 04 de junio del2013 de la pagina:http://www.elespectador.com/noticias/medioambiente/articulo411901escasezdeaguapuedeserinevitablewwf
7. Sandra del Castillo, “El país se está quedando sin agua”, publicado el 21de marzo del 2011, recuperado el 04 de junio del 2013 de lapágina:http://www.elespectador.com/noticias/cultura/vivir/articulo258295elpaisseestaquedandosinagua
8. Fuente: “fisica.uh.cu”, “Microscopio de Fuerza Atómica” recopilado el 30de mayo del 2013 de la pagina:http://www.fisica.uh.cu/bibvirtual/vida%20y%20tierra/microscopiofuerza%20atomica/
9. Morray W. Nabore, Pearson y Addison Wesley, “Introducción A LaBotánica El Mundo De Las Plantas” Publicación “no conocida”, recopiladoel 29 de mayo del 2013, (capitulo del 1 al 20).
