workshop calidad de la producción y granos con valor
agregado
¿Existe un diagnóstico sobre micotoxinas en soja en Argentina?
28 de junio 2006Rosario – Santa fe
Ana Pacin
Fundación de Investigaciones Científicas Teresa Benedicta de la Cruz
Comisión de Investigaciones Científicas de la Provincia de Buenos Aires
Centro de Investigación en Micotoxinas Universidad Nacional de Luján
MICOTOXINAS
+
-
HONGOS
+
-
MATRIZ ALIMENTICIA
MEDIO AMBIENTE
MICOTOXINAS
Frecuencias relativas de aislamiento de mohos en soja en la Provincia de Buenos Aires en 1999
Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. SOJA Y MICOTOXINAS FLORA FÚNGICA-VARIEDADES-PRÁCTICAS AGRONÓMICAS
Frecuencia y Densidad Relativa
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50
Fusarium semitectumFusarium culmorum
Fusarium acuminatumAspergillus niger
Penicillium funiculosumFusarium heterosporum
Aspergillus flavusFusarium graminearum
Fusarium croockwellensePenicillium citrinum
Altermaria AlternataFr % DR %
Mohos asociados con variedades de soja en un ensayo a campo en Argentina en 1999Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. SOJA Y MICOTOXINAS FLORA FÚNGICA-
VARIEDADES-PRÁCTICAS AGRONÓMICAS
EspeciesFr %
DR % Posibles toxinas que pueden sintetizar las especies halladas en 1999
Alternaria Alternata 48,08 5,97
Ácido tenuazónico, alternariol, monometil ester, alter toxinas
Penicillium citrinum 32,69 4,73 Citrinina
Fusarium graminearum 11,54 1,41
Deoxinivalenol, nivalenol, zearalenona, butenólido, fusarina
C, 3 y 15 acetil DON, di acetil DON
Fusarium croockwellense 11,54 0,79 Zearalenona, tricotecenos tipo B, fusarina C
Aspergillus flavus 9,62 0,84 Aflatoxina B1, ácido ciclopiazónico
Penicillium funiculosum 3,85 0,23 Patulina
Fusarium heterosporum 3,85 0,23 Toxina T-2, HT-2, T-2 tetraol
Fusarium semitectum 1,92 0,06 Zearalenona, bauvericina
Fusarium culmorum 1,92 2,31 Zearalenona, tricotecenos tipo B, fusarina C, butenólido
Fusarium acuminatum 1,92 0,17 Butenólido, tricotecenos tipo A
Aspergillus niger 1,92 0,06 Malforminas, ocratoxina A
Ocurrencia a campo
• 2004, 39 muestras, 3 contaminadas por DON (promedio de las positivas 43.3 µg/kg)
• 2005, 95 muestras, 2 contaminadas por DON debajo del límite de cuantificación (7 µg/kg)
• 2006, 4 muestra
Ocurrencia silo bolsa • 2003, 23 muestras
– 8.70% DON; – 8.70% ZEA, – 17.39% OCRA, – 13.04% Fumonisinas B1 B2
• 2006, 7 pellets; 3 harinas (2, FB1)
2003, 23 muestras
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
µg/kg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
muestras soja
ZEA y DON en silo bolsa 2003
DON ZEA
2003, 23 muestras
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
µg/kg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
muestras soja
OCRA en silo bolsa 2003
2003, 23 muestras
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
µg/kg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23
muestras soja
Fumonisinas B1 B2 en silo bolsa 2003
2003, 23 muestras
DON ZEA OCRA FB1 FB2
0 0 0 93 90
0 0 0 13 0
100 812 0,8 0 0
150 902 0,7 0 0
0 0 0 44 12
0 0 0,05 0 0
0 0 0,3 0 0
DON
ZEA
OCRA
Fumonisinas
1-Deoxinivalenol (DON) - Zearalenona (ZEA) TLC Romer Method # MY8402s, Version 94.2 Límite de detección: Deoxinivalenol TLC 25 µg/kg; Zearalenona TLC 25 µg/kg2-Deoxinivalenol (DON) - Toxina T2 GC 2001 Version 94.2 + Croteau y col., 1994.Límite de detección DON 7 µg/kg; Toxina T-2 6 µg/kg3-Ocratoxina A Ochraprep IFU 19.03.01Límite de detección 0.01 µg/kg4-Zearalenona AOAC Official Method 985.18, 1988. Límite de detección 4.7 µg/kg5-Fumonisinas. AOAC Official Method 995.15, 1995. Límite de detección FB1 10 µg/kg; FB2 18 µg/kg
Aflatoxinas Totales µg/kg
Año 2000 Totales Negativas 1 a 20 µg/kg 21 a 50 > de 50
Pellet de Soja 110 90,90% 7,40% 1,70%
Poroto de Soja 125 94,40% 3,68% 1,92%
Año 2001 Totales Negativas 1 a 20 21 a 50 > de 50
Pellet de Soja 218 90,90% 4,50% 0,50% 0,10%
Poroto de Soja 86 87,30% 9,80% 2,64% 0,26%
Año 2002 Totales Negativas 1 a 20 21 a 50 > de 50
Pellet de Soja 323 90,90% 7,90% 1,20%
Expeller de Soja 57 97,10% 2,50% 0,40%
Soja desactivada 250 89,20% 6,00% 3,20% 1,60%
Soja extrusada 79 81,00% 19,00%
Año 2003 Totales Negativas 1 a 20 21 a 50 > de 50
Pellet de Soja 963 94,70% 4,50% 0,80%
Expeller de Soja 245 93,20% 4,50% 2,30%
Soja desactivada 808 88,00% 9,70% 2,30%
Soja extrusada 234 91,75% 6,70% 1,55%
Año 2004 Totales Negativas 1 a 20 21 a 50 > de 50
Pellet de Soja 1162 95,00% 5,00%
Expeller de Soja 256 96,00% 2,70% 1,30%
Soja desactivada 894 97,10% 1,50% 0,50% 0,90%
Soja extrusada 295 94,00% 4,70% 1,30%
Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005
Toxina T-2 µg/kg
Año 2000 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 110 85,50% 5,56% 7,50% 1,45%
Poroto de Soja 125 68,80% 11,52% 13,60% 6,08%
Año 2001 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 218 86,20% 9,80% 3,10% 0,90%
Poroto de Soja 86 65,10% 14,65% 15,93% 4,32%
Año 2002 Totales Negativas 1 a 50 51 a 200 201 a 500
Pellet de Soja 323 51,00% 16,50% 26,80% 5,70%
Expeller de Soja 57 73,30% 10,30% 13,80% 2,60%
Soja desactivada 250 80,50% 7,70% 11,80%
Soja extrusada 79 50,70% 21,50% 27,80%
Año 2003 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 963 73,40% 2,00% 2,10% 4,50%
Expeller de Soja 245 73,70% 6,80% 17,50% 2,00%
Soja desactivada 808 85,60% 3,50% 8,30% 2,60%
Soja extrusada 234 87,10% 10,50% 2,40%
Año 2004 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 1162 83,40% 11,00% 3,80% 1,80%
Expeller de Soja 256 85,60% 10,90% 3,30% 0,20%
Soja desactivada 894 86,00% 7,50% 4,10% 2,40%
Soja extrusada 295 79,30% 10,70% 5,60% 4,40%
Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005
Zearalenona µg/kg
Año 2000 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 110 78,00% 9,30% 11,30% 1,40%
Poroto de Soja 125 74,40% 20,16% 2,72% 2,72%
Año 2001 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 218 55,00% 13,30% 26,60% 5,10%
Poroto de Soja 86 67,40% 21,63% 6,05% 4,92%
Año 2002 Totales Negativas 1 a 50 51 a 200 201 a 500
Pellet de Soja 323 71,30% 4,00% 17,90% 6,80%
Expeller de Soja 57 91,20% 2,90% 5,60% 0,30%
Soja desactivada 250 83,80% 3,70% 11,00% 1,50%
Soja extrusada 79 91,05% 3,85% 5,10%
Año 2003 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 963 69,55% 1,85% 22,80% 5,80%
Expeller de Soja 245 98,95% 0,00% 1,05% 0,00%
Soja desactivada 808 82,70% 15,20% 2,10%
Soja extrusada 234 85,00% 10,30% 4,70%
Año 2004 Totales Negativas 1 a 100 101 a 250 251 a 500
Pellet de Soja 1162 91,40% 4,20% 1,60% 2,80%
Expeller de Soja 256 92,60% 4,70% 2,70%
Soja desactivada 894 95,60% 1,30% 1,40% 1,70%
Soja extrusada 295 83,90% 5,90% 10,20%
Jorge Venturino, Claudia Posanzini, Biofarma SA, 2005
ELISA- 6105 muestras (2000-2004)
3334
211
1952
529
Pellet de Soja
Poroto de Soja
Soja desactivada
Soja extrusada
Distribución de la contaminación según matriz
Porcentaje de contaminación por Aflatoxinas Totales
7,13%
8,57% 9,15%
6,41%
Pellet de SojaPoroto de SojaSoja desactivadaSoja extrusada
Distribución de la contaminación según matriz
Porcentaje de contaminación por Toxina T-2
26,30%
37,01%
17,88%
18,81%
Pellet de Soja
Poroto de Soja
Soja desactivada
Soja extrusada
Distribución de la contaminación según matriz
Porcentaje de contaminación por Zearalenona
15,04%
62,65%
10,00%
12,31%
Pellet de Soja
Poroto de Soja
Soja desactivada
Soja extrusada
AOAC – ELISA 40 muestras de soja del sur Santa Fe
Simultaneous determination of aflatoxins, Zearalenone, deoxynivalenol and T-2 Toxin in Argentinian soybean C.E. López, L.C. Bulacio, S.L. Amigot, M.S. Biasoll, A.G. Luque, S.S. Ramadán, L.L. Ramos, M. Sortino, M.E. Tosello, C.L. FulgueiraMycoglobe, Carlos Paz, Córdoba, Marzo 2006
µ/kg
Toxina Rango Media % positivas
Toxina T-2 76,3 a 284,7 175,2 90,0
Zearalenona 42,5 a 166,3 99,7 77,5
Deoxinivalenol 2,60 a 1190 513,7 60,0
Aflatoxinas 3,3 a 7,4 4,4 17,5
Simultaneous determination of aflatoxins, Zearalenone, deoxynivalenol and T-2 Toxin in Argentinian soybean C.E. López, L.C. Bulacio, S.L. Amigot, M.S. Biasoll, A.G. Luque, S.S. Ramadán, L.L. Ramos, M. Sortino, M.E. Tosello, C.L. FulgueiraMycoglobe, Carlos Paz, Córdoba, Marzo 2006
Porcentaje de contaminación - ELISA
90,0
77,5
60,0
17,5
Toxina T-2
Zearalenona
Deoxinivalenol
Aflatoxinas
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA
CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIASAgradezco especialmente al licenciado Manuel Zelaya
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA
CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Aislamiento e identificación de la frecuencia y la densidad de la flora fúngica campaña 2003-2004
Variedades de soja
Diferentes localidades
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE
ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
348 nuestras
32 cultivares (6 criaderos)
12 localidades (9 provincias)
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CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Provincia Localidad Contaminación %Formosa Reconquista 81,3Santa Fe Rafaela 76,8Córdoba Tres Pozos 65Córdoba Manfredi 58,8Chaco Las Breñas 39,2Entre Ríos Concepción del Uruguay 35,6Buenos Aires Belloq 33,4La Pampa General Pico 28,6Tucumán Banda Río Sali 27,8Misiones Cerro Azul 24,1Buenos Aires Barrow 21,5Buenos Aires Balcarce 14,2
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TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Ocho cultivares
0102030405060708090
100
Balcarce Barrow Bellocq C delUruguay
Gral. Pico Manfredi Rafaela TresPozos
Tucumán
A3901A4303A5409AW2886AW4500DM3100DM4600DM4800
Hay cultivares y localidades
con mayor porcentaje de contaminación
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TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Grado madurez III IV y V
0102030405060708090
100
Balcarce Barrow Bellocq C. delUruguay
Gral. Pico Manfredi Rafaela Tres Pozos Tucumán
IIIIIIIIIIVIVIVIVV
Grados IV y V, y localidades
mayor porcentaje de contaminación
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS
TECNOLOGIAS
Porcentaje de contaminación Manfredi
0
20
40
60
80
100
A5409 A6411 A3901 A8000
1-2 diciembre30-diciembre
Fecha de siembra, en la misma localidad
y para los mismos cultivares
Cultivares con diferentes fechas de siembra
La información sobre la contaminación por flora fúngica se expresa según González HHL y col. 1995
Frecuencia
Fr = número de muestras con una especie X 100número total de muestras
Densidad relativa
Dr = número de aislamientos de una especie X 100número total de aislamientos
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A
TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Frecuencia flora toxicogénica
174,12%
88,79%
83,90%21,55%
11,20%
4,02%
FusariumAlternaria AspergillusPenicilliumTrichoderma Otros géneros*
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A
TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Densidad relativa flora toxicogénica
49,85%
23,40%
18,03%
7,09%
1,02%
0,61%
Otros géneros*FusariumAlternaria AspergillusPenicilliumTrichoderma
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A
TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Fr % DR % Fr % DR %
Fusarium 88,79 23,65 Alternaria alternata 83,91 18,21
F. acuminatum 0,29 0,02 Aspergillus 21,55 7,16
F. avenaceum 0,86 0,05 A. flavus 10,92 4,66
F. equiseti 43,68 11,14 A. niger 4,6 0,21
F. graminearum 3,74 0,27 A. ochraceus 0,57 0,07
F. heterosporum 1,44 0,1 A. parasiticus 3,45 2,01
F. oxysporum 1,44 0,57 A. wentii 0,29 0,03
F. poae 0,86 0,17 A. tamarii 0,29 0,01
F. proliferatum 0,29 0,01 A. versicolor 0,29 0,02
F. sambucinum 0,86 0,65 Penicillium 11,21 1,04
F. semitectum 33,62 10,48 P. Chrysogenum 0,57 0,02
F. subglutinans 0,29 0,01 P. citrinum 2,87 0,29
F. verticillioides 0,57 0,02 P. Funiculosum 2,01 0,41
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A
TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Frecuencia Fusarium
43,68
33,62
3,74
F. equiseti F.semitectum F. graminearum F.oxysporum F.sambucinumF.heterosporum F. acuminatum F. avenaceum F.proliferatum F.verticillioidesF.poae F.subglutinans
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A
TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
Densidad relativa Fusarium
11,14
10,48
0,27
F. equiseti F. semitectum F. graminearum F.oxysporumF. sambucinum F. heterosporum F. acuminatum F. avenaceumF. proliferatum F. verticillioides F. poae F. subglutinans
ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949,CARACTERIZACION DEL GERMOPLASMA ARGENTINO DE SOJA DE ALTA CALIDAD NUTRICIONAL A TRAVES DE NUEVAS TECNOLOGIAS
TRICOTECENOS son 12, 13 epoxi-tricote 9 eno. Grupo A (sin carbonilo en el C8): Toxina T-2, HT-2, mono-acetoxiscirpenol, diacetoxiscirpenol, tricodermin, scirpentriolGrupo B (con carbonilo en C8): nivalenol, fusarenona X, deoxinivalenol, monoacetatoDON, tricotecin
Especies Micotoxinas
F. graminearumdeoxinivalenol, nivalenol, zearalenona, acetil DON, di acetil DON, fusarin C, fusarenona X, di acetil nivalenol
F. avenaceum moniliformina, fusarin C
F. culmorum deoxinivalenol, zearalenona, nivalenol, fusarin C, moniliformina
F. poaenivalenol, diacetoxiscirpenol, fusarin C, fusarenona X, T-2; HT-2, neosolaniol, fusarin C
F. equiseti diacetoxiscirpenol, zearalenona, nivalenol, di acetil nivalenol, fusarenona X
F. sporotrichioidestoxina T-2, HT-2, neosolaniol, diacetoxiscirpenol, moniliformina, butenolido, fusarin C
F. acuminatum toxina-T2, HT-2, diacetoxiscirpenol, moniliformina, neosolaniol, butenolido
F. subglutinans zearalenona
F. verticillioides fumonisinas, fusarin C, moniliformina
F. oxysporum moniliformina
F. heterosporum Toxina T-2, HT-2, T2 tetraol
F. semitectum bauvericina, diacetoxiscirpenol
Flora fúngica toxicogénica aislada en semilla de soja1999 (Rosa T. Boca; Ana M. Pacin; Héctor H. L. González; Silvia L. Resnik; César G. López. Soja y Micotoxinas Flora
Fúngica-Variedades-Prácticas Agronómicas ) 2002 (Leticia Elvira Broggi, Héctor Horacio Lucas González, Silvia Liliana Resnik y Ana Pacin Alternaria Alternata prevalence in cereals grains and soybean seeds from Entre Rios
Argentina ) y 2003-2004 (Manuel J Zelaya , Hector HL Gonzalez , Silvia L Resnik , Maria J Martinez Contaminnant mycoflora of soybean RR harvested in different production areas in Argentina ANPCYT INTA PICTO 2002 Nº 08-12949 )
Flora fúngica en soja
0 20 40 60 80 100
Altermaria Alternata
Fusarium semitectum
Aspergillus flavus
Aspergillus niger
Fusarium graminearum
Penicillium citrinum
Penicillium funiculosum
Fusarium heterosporum
Fusarium acuminatum
Fr % 2003/04Fr % 2002Fr % 1999
MICOTOXINAS
MICOTOXINAS
Fecha de siembra
Región
Grado madurez
Condiciones ambientales
Cultivares
¿?
Para analizar micotoxinasen soja
1. Origen de la muestra2. Muestra representativa3. Método validado4. Datos del método
a. Recuperaciónb. Límite de detecciónc. Límite de cuantificación
Para mejorar la identificacióny cuantificación de
micotoxinas en soja
Estudios colaborativos en matrices alimenticias
Para diagnosticar y prevenir micotoxinas en soja
1. Identificar flora fúngica2. Evaluar capacidad toxicogénica3. Estudiar la distribución de la
contaminación por micotoxinas4. Identificación de variedades
resistentes
Para diagnosticar y prevenir micotoxinas en soja
1. Evaluar los sistemas de almacenamiento
2. Estimar la persistencia de micotoxinas o sus metabolitos en las matrices alimenticias elaboradas
…y en Argentina
Intervenir, no solo ser depositarios de la legislación
elaborada
Estimar la exposición de la población
Nvdibt!hsb
djbt