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COMISIÓN DE ENERGÍA ATÓMICA DE CUBA
TITULO
CONTROL FÍSICO QUÍMICO DE CALIDAD DEL HIPURAN-131I
AUTORES
J. Morín Zorrilla
E. Olivé Alvarez
M. Isaac Tejera
J. Cruz Arencibia
Clasificación temática del INIS
B 13.30
Preparation of radioisotopes and radioactivity labelled compounds.
DESCRIPTORES
Quality Control Hippuran Radiopharmaceuticals Diagnostic Techniques
Aprobado por el Consejo Científico Ramal de
la Esfera Nuclear el día 25 de marzo de
1988.
CONTROL FÍSICO QUÍMICO DE CALIDAD DEL HIPURAN-"1!
J. Morin Zorrilla
E. Olivé Alvares
M. Isaac Tejera »
J. Cruz Arencibia
RESUMEN
Se camparan v a r i o s métodos para e l c o n t r o l a n a l í t i c o d e l
H. ipurán~ l M I y se recomiendan l o s mas c o n v e n i e n t e s para
a p l i c a r en l o s h o s p i t a l e s y en l a b o r a t o r i o s de c o n t r o l
e s p e c i a l i z á r t e l a . Se eva lúa también l a c a l i d a d d e l H ipa rán - 1 ' 1 1
p r o d u c i d o por l a f i r m a ÍSO'IOP (URSS). Se comprueba que e l
p r o d u c t o reúne l o s r e q u i s i t o s que e s t a b l e c e la Farmacopea
I n t e r n a c i o n a l .
ABSTRACT
Borne physico-chemical methods Tor analytical control., of
Hippuran-1'1! are compared. The most convenient to applicate
in hospital1» and in more specialised quality control
laboratories a.rB recommended. The quality of Hippuran-1'1!
produced by ':.v.-OTOP (USSR) is also evaluated. The protluc t met
the requirements of the International Pharmacopeia.
G.QNIEQL FISICO-QUIMICQ DE CALIDAD DEL, HiEUBAN1*1!
lfílB:QP.uccij3ii
El hiparán es la sal sódica del ácido o-yorto hipurico. Se
excreta casi totalmente y con rapidez por via renal con una
-fracción despreciable en el ciclo enterohepático, por lo que
se utiliza ampliamente para la determinación del. flujo
plasmático renal y, en menor medida, psura. la obtención de
imágenes, renales [1].
En nuestro pais se emplea actualmente en 1.1. instituciones
hospitalarias, habiéndose incrementado el valor de las
importaciones en el quinquenio 81-85 desde 22,656 a 79,000
pesos por aho» Es probable que estas cifras se incrementen
¿si'tn mAs.
El producto se importa de la firma ISÜTÜP (URSS) sin
someterlo a un estricto control de calidad, tomando como
válidas las especificaciones del fabricante.
El objeto del presente trabajo es establecer los métodos
fundamentáis-, de control físico químico de calidad del
hipurán-lSiI, especialmente aquellos que son aplicables en
hospitales con un mínimo de recursos, y evaluar las
caracteristicas del producto de esa firma con el fin de
determinar si reúne desde el punto de vista fisico-quimico,
1
los r e q u i s i t o s de c a l i d a d es tab lec idos por l a farmacopea.
BEEINICMN £ tUTOTANClQ DE LOS cpMTRPLgg fe REftUSftft
PUREZA RADIOQUÍMICA
Es e l parámetro mas importante a c o n t r o l a r en e l hipurán [ 2 -
4 ] . Be d e f i n e como l a f r a c c i ó n de l a a c t i v i d a d qué está
presente en forma de o-yodo h i p u r a t o . Las impurezas
radioquímicas pueden aparecer en e l hipurán por las
s i g u i e n t e s causas C5]s
—Producto de l a reacción de marcación. Debido a esto pueden
e s t a r presentes e l yoduro como residuo de l'a solución
u t i l i z a d a para marcar y en menor medida, e l 2 , 4 , 6 - t r i y o d o
h i p u r a t o de sodio que se forma producto de ' reacciones
c o l a t e r a l e s . '.
—Por descomposición o v a r i a c i ó n de l a molécula marcada debido
a l a temperatura , l a exposición a l a luz y l a descomposición
r a d i o l i t i e a (en dependencia de l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a de la
s o l u c i ó n ) . Una a c t i v i d a d e s p e c i f i c a mayor a O . i mCi/mg
provocar ía un aumento de l , i I e n t r e 4-6% en 2 semanas de
almacenamiento [ 4 3 . Debido a esto pueden e s t a r presentes e l
yoduro y e l o-yodo benzoato de sodio .
'L.a cantidad de impurezas presentes en e l hipurán e s , por
"tanto, una función del t iempo. La impureza más-importante es
e l yoduro l i b r e . "
2
El control de las impurezas radioquímicas es importante para
lograr un diagnóstico certero. Se ha demostrado [¿O que la
presencia de un 57. de yoduro en el hipurán provoca un •
decremento del 497. de los valores de aclaramiento, lo que no
permite diferenciar los casos normales de los patológicos.
PUREZA RADIuNUCLlDICA
Es el valor, expresado en porciento, de la radiactividad del
l*lI en relación con la actividad total presente C73. La
actividad del m«*Xe (isótopo hijo del l3lI) no debe
sobrepasar el 1"/. y la debida a otros radionuclides no debe
ser mayor a 0 .Oí'/. [8].
De acuerdo con l a s d i f e r e n t e s farmacopeas c o n s u l t a d a s [8 - lC r i
se acos tumbra s ó l o a comparar e l e s p e c t r o d e l h i p u r á n - m I
con e l de una s o l u c i ó n ©standard de m . í , o b t e n i d o en i g u a l e s
c o n d i c i o n e s .
A n i v e l de l a b o r a t o r i o de c o n t r o l , s i n embargo, es n e c e s a r i o
d e t e r m i n a r e s t e parámet ro pues l a p r e s e n c i a de o t r o s
r a d i o n u c l i d e s , además d e l 1 3 1 I , puede aumentar l a carga
r a d i a . c i o n a l que se s u m i n i s t r a a l p a c i e n t e , d i s m i n u i r l á
e x a c t i t u d y a l t e r a r e l r e s u l t a d o d e l d i a g n ó s t i c o .
PUREZA QUÍMICA
Se d e f i n e como e l v a l o r , expresado en p o r c i e n t o , de . la masa
d e l m a t e r i a l p resen te en forma de o-yodo h i p u r a t o de s o d i o ,
3
con respecto a la masa total de la muestra [7}. Este
parámetro, por tanto, depende de la presencia de sustancias
químicas ajenas al preparado. Se controlan de modo especial
los metales tóKicos, como Be, Cr, Mn, Fe, Pb, Hg, etc. Las
impurezas químicas producen no sólo cambios en la
farmacocinética del radiofármaco sino también pueden provocar
reacciones colaterales indeseables en órganos aislados o en
sistemas de órganos. Los preservativos que se alladen a los
radiofármacos no se consideran impurezas quimicas. El
hipurán-1'1! puede contener alcohol bencilico como
preservativo C123.
Tampoco se considera impureza quimica el ácido o-yodo
hipúrico inactivo que se aftade a la solución de hipurán--mI
para lograr una determinada actividad especifica, ni el NaCl
que se aftade para lograr la isotonicíclad requerida.
En la bibliografia hay divergencia.de criterios en relación
al control de este parámetro. En la farmacopea de Estados
Unidos CÍO] y en lá británica [9] no se establece su control,
en tanto que en la farmacopea soviética [8D y en el
Compendium Medicamentorum del CAME C13] se plantea controlar"
la concentración total de o-yodo hipurato de sodio, cbn el
fin de poder calcular la actividad especifica del- preparado.
El control de la isotonicidad y de los metales pesados no se
realiza a nivel de hospital sino sólo a ni'el de . laboratorio
4
de c o n t r o l [ 3 3 .
OTROS CONTROLES
D e b i d o a que e l h i p u r á n - " l I se a p l i c a p o r v i a e n d o v e n o s a e s
n e c e s a r i o c o n t r o l a r ©1 pH [ 8 ~ 1 0 , . l 3 ] . O t r o s p a r á m e t r o s que
d e b e n c o n t r o l a r s e s o n l a c o n c e n t r a c i ó n r a d i a c t i v a y l a
a c t i v i d a d e s p e c i f i c a t 33«
PH
Se d e t e r m i n a p o t e n c i o m é t r a c á m e n t e . Su v a l o r l i m i t e v a r i a en
l a s d i f e r e n t e s f a r m a c o p e a s . La s o v i é t i c a [ 8 3 i n d i c a que debe
s e r 5 . 6 - 9 . 0 ; l a de E s t a d o s U n i d o s [ Í O ] 7 . 0 - 8 . 5 ; l a b r i t á n i c a
[ 9 ] 6 . 0 - 8 . 5 y l a d e l CAME [ 1 3 ] 6 . 5 - 3 . 5 .
CONCENTRACIÓN RADIACTIVA
Se d e f i n e como c o n c e n t r a c i ó n r a d i a c t i v a a l a r e l a c i ó n e n t r e
l a r a d i a c t i v i d a d d e l p r e p a r a d o y e l v o l u m e n de s o l u c i ó n en e l
c u a l e s t a d i s u e l t o [ 3 3 . A p a r t i r de e s t e p a r a r n e t r p , y l a
c o n c e n t r a c i ó n de o - y o d o ' h i p u r a t c el© s o d i o (p t i res-a q u í m i c a ) s e
c a l c u l a l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a d e l p r e p a r a d o .
S i l a a c t i v i d a d e s p e c i f i c a es menor de 0 . 1 mCi /mg e s p o c o
p r o b a b l e que o c u r r a n r e a c c i o n e s de r a d i ó l i s i s p o r l o q u e e l
p r o d u c t o s e m a n t e n d r á e s t a b l e d u r a n t e su v i d a ü t i l C4 ] . : En
c a s o c o n t r a r i o o c u r r i r á n r e a c c i o n e s de r a d i ó l i s i s q u e
d i s m i n u y e n l a p u r e z a r a d i o q u í m i c a d e l c o m p u e s t o c o n l o s
i n c o n v e n i e n t e s que se han s e ñ a l a d o a l r e s p e c t o . En a l g u n a s
farmacopeas C9,133 se se f ta la como l i m i t e s u p e r i o r 0 . 2 mCi/mg,
en t a n t o que en l a U 8 P. ÉlOJ no se hace, n ingún sé r ta lamien to
a l r e s p e c t o . Las ámpülás de h i p ü r á n - l i í i qué se impor tan en
n u e s t r o p a i s t i e n e n una a c t i v i d a d e s p e c i f i c a menor a 0 . 1
mCi/mg. En g e n e r a l , se observa una t e n d e n c i a en l a s f i r m a s
p r o d u c t o r a s de no f a b r i c a r p r o d u c t o s con a l t a s a c t i v i d a d e s
e s p e c i f i c a s .
HftTERIALES Y. MÉTODOS
En e l t r a n s c u r s o d e l t r a b a j o se a n a l i z a r o n 8 ámpulas de
h ipuran- 1 5 »I de l a f i r m a ISDTOP (URSS).
3e t r a b a j ó ademas con á c i d o o-yodo h i p u r i c o de • la f i r m a
CHEMAPOL (R.S.Ch) y á c i d o o-yodo h i p u r i c o s i n t e t i z a d o en
nuestros laboratorios, cuya pureza fue comparada con muestras
del producto -.'de las firmas CHÉtiAPOL y MERCK.
Las ámpülas de hipurán se sometieron a los siguientes
controles s
-pureza radioquímica.
-pureza quimica.
-pH
-concent rac ión r a d i a c t i v a .
- a c t i v i d a d e s p e c i f i c a .
Nq se c o n t r o l ó l a pureza r a d i o n u c l i d i c a n i l a i so to r i i c i dad
por no.d isponer del equipamiento adecuado.
PUREZA RADIOQUÍMICA
Para la determinación de la pureza radioquímica se ..coplearon
los métodos cromatográficos (cromatografia de papel y de capa
delgada) y la electroforesis de papel, que son los métodos
más utilizados. Se partió de los sistemas más empleados en la
bibliografia (tabla I), haciendo hincapié en los sistemas
butanol:ácido a %tico:agua (2:2si) y bencenoracido
acéticosagua (2:2:i) que permiten la separación del i6n
yoduro, el ion o-yodo hipurato (oyh) y el ion o-yodo benzoato
(oyb).
En todos los casos, antes de aplicar las muestras se aplicó
0.05 mi de una solución 0.2"/. en yoduro de potasio, 1.0% en
bicarbonato de sodio y 1.0"/. en tiosulfato de sodio [LOT-y ' se
dejó secar al aire,
P&rf\ el desarrollo de los cromatoyr&mas se aplicaron como
sustancias patrones yoduro de potasio, ácido o-yodo hipurico
y ácido o-yodo benzoico los que se corrieron conjuntamente ,
con el hipurán-15lI.
Las pruebas preliminares para establecer las condiciones,'
óptimas* para el desarrollo del cromatograma se desarrollaron-,
siempre con sustancias estables. '' 'Vr
Para la cromatografía sobre papel se utilizaron tiras "de "
papel de 28 >; 10 cm. El tiempo de desarrollo de \/lqs-
cromatogramas fue de 2 horas. En la tabla II se muestran''la'si
T A B L A I
Sistesas de solventes tas usados en la crotatograüa del hipuran •¡
¡Referencia SOPORTE SOLVENTE Rf
aoyh
0.9
0.8
! Papel H-l I .
I Papel H-3
¡Papel H-l
n-butanol¡acido acético (4:1)
n-butanol¡acido aceticosagua (12:3:5)
I
0.3
0.3
aoyb
[14]
19]
n-butanol¡acido aceticosagua (4:1:1)
bencenos acido acetico:agua (2:2:1) 0-0.05 0.5
" ¡ [15] i -.z,-.-.,,-.-.-.„-.-.^-.-.-.z-.-.\ 0.B5-0.951 [3,16] ¡
Celulosa F 254
Silicagel 8
bencenoiacido acetico:agua (2:2:1)
acido clorhídrico IN
0 0.2-0.4
0.98-1 0.25
i [9]
[17]
I ¿yoduro aoyh=atido orto-yodo'hipOrico aoyb=ácido orto yodo benzoico
S6'0=qto? S0'0-0=1 £fr'0=4Aoe m
19 ejia U03 ajJ03 as A jopadns asej t\ nqi as
uti 0£ ?1!^ as ?sase¿ sop UBUJOJ as a^uaAjos aiss iiojj (jijsz) eitfierosnase oppetouasuaq ¡
•api ¡(jij'Offrj en6e¡t>3i}a3e oppeijouei.nq-u ¡
————————————————————————————————— (
ajuaAios iap a?uaj^ ja uo3 uajjos sepuB}sns st\\ (i!i:>) enoesosnase opi3e:{ou6)nq-u ¡ i-m • i
• .. .1
tmmmmmmtmmmmmmmmmmmmmmmmmmtmmtmmmmmmmm ! !
ajuaAjos tap a^a-T. . I • i i i
{a uo3 ajjos o}saj |a A optut {a ua spanb as opoA ia¡ (fi'OM) 03naae oppesauasuaq ¡ £-NJ * i i
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ttmtmmfmtmmmmtmtmmmmjtmmmtmmmmmmtmtmmmttmmmmu • i
3)uaA;os jap a}uaj¿¡ ¡
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¡a uo3 8JJ03 o;saj \s 'oniui \a ua epanb as QjnpoA [a¡ (S'Q'T) 03?}a3e oppe:oua3uaq ¡ ! I I 1
9}uaAit)5 tap a;uaj( \a uo3 uajJ03 sepue^sns se{¡ (JÍJÍJ) en5e:o3H33B oppe¡ioue}nq-u ¡ J-NJ • i i i
mttmmmmmmmmmmmtmmmmmmmummutmmmmmmtmttmmmtt i i
a)U3Aios tap ajuaj¿¡ ¡ • i i i
\a U03 a;jo3 o^saj \a A optui {a ua epanb as ojnpoA \a> (S'0!I) Q3i)33e oppetouasuaq ¡
.... ...... —— .... — — . .......... . ... i
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map; !(T<£'0'fr) enüeiosnase oppe¡ioue}nq-u ¡
•ajuaAios jap ¡ i
3}uaj} ja uo3 uajjoi ojnpoA p souai sepuqsns s?i sspoj¡ (lU't) 5n6e¡03n»e npps:ioue}nq-u ¡ I-JJJ
soatfiins3a ; 3XH3AIQS : smodos .—— _——.——— .....i.———————..._..——„———'-.......
u?jndiq iap pdsd ajqos E|}SJ6O;?HIOJ3 t\ ua sepeziUT1 sa[tAqii A sepeuope^sa sasej
II « 1 8 tf 1
T A B L A I I (continuación)
Fases estacionarias y «oviles utilizadas en la croaatografia sobre papel del hipurán
¡SOPORTE SOLVENTE OBSERVACIONES ¡ 1 1 . ¡ I FN-1A i n-butanoltacido acet.ico:agua (4¡0.3!i)ilas sustancias aenos el yoduro corren con el frente del
1 ¡solvente
n-butanol¡acido acetico:agua ¡2:2:1) isolo se identifica la «ancha del yoduro
benceno¡acido acético (1:0.5) i el yoduro se queda en el inicio, el resto corre con el i
¡frente del solvente
fases estacionarias y móviles que fueron ensayadas en el
•"cranscursa del trabajo.
Para la cromatografía sobre capa delgada se utilizaron placas
de silieaqel , placas de silufol, y placas de zeolita.
Las placas dB silicagel se prepararon a partir de
silicagel-~G(¿»0) MERCK. Para cada placa se tomaron 2 g de
silicagel y se agitaron con 15 mi de agua, durante 20
minutos. La suspensión resultante se vertió sobre una placa
de 9 x 12 cm. Se dejó secar la placa al aire durante 15-16
horas.
Al igual que en la cromatografía de papel se realizó un
estudio previo de los sistemas de solventes más adecuados
para las distintas fases estacionarias. En la tabla III se
resumen los resultados del mismo.
Los trabajos de electroforesis en papel se .realiz-aron con
papel FN-2. Se emp.leó solución buffer de fosfato 0.1 li (pH =
7.1).
Para la determinación de los Rf se realizó la detección de
las manchas en los cronutogramas y electroforetogramas por
medio de -:
-revelado en cámara de yodo.
-luz ultravioleta.
-radioBKpíórádor (BÉRTHOLD serie LB 2723(RFA))
8
T A B L A I I I
Fases estacionarias y lóviles utilizadas en la cromatografía sobre capa delgada 'del hipuran-I-131
•I-I SOPORTE SOLVENTE RESULTADOS
•I-Silicagel G(60)MERCK
dorofonosacetato de etilo:acido acético (1:2:0.5)1 Rf aoyh=0.6B Rf aoyb=0.92 Rf I =0
dorofono:acetato de etilo¡acido acético (1:2:0.3)! Rf aoyh=0.65 Rf aoyb-0.90 Rf 1 =0.09
c)oroforao:acetato de etilo:acido acético (1:2:0.2)! Rf aoyh=0.54 Rf aoyb=0.82 Rf 1 =0.04
! buena reproducibilidad i i
! tieapo de corrida 15 nin i i
immtmmtmmmtmtmtmmtmttmmmtmmtmmtmmmtmtumtmmmmmit Silufol n-butanol¡acido acetico:agua (4:1:1) í solo se observa la lancha del yoduro en
i i
! el punto de aplicación !
dorofonosacetato de etilo (1:2) ! Rf aoyh=0.45 Rf aoyb=0.8¿> Rf I =0 !
titmtttmtmtmttmtmmmmttmmmtmmtmmtmttttmmtmmmttmmmmtmt: Zeolita (
dorofonosacetato de etilo (1:2) I no hay corriaiento
dorofonosacetato de etilo:acido acético (1:2:0.2)! Rf aoyh=0.56 Rf aoyb=0.95 Rf I =0.05! i i
-autorradiografia.
-corte de tiras y medición de estas en un
radiómetro.
Para la autorradiografia se utilizaron placas ORWG HS-lí de i
24 « 30 cm (RDA) Los tiempos de exposición fueron entre lé> y
24 horas. Como revelador se utilizó una solución con la
siguiente composición: 59 g de carbonato de sodio, 90 a. de
sulfito de sodio, 5 g de bromuro de potasio, 2 g de metol y 8
g de hidroquinona en 1 litro de agua.
Como fijador se empleó la solución siguiente: 250 g de
hiposulfito de sodio, 55 g de sulfito de sodio y de 3 .a 4
gotas de ácido sulfúrico en 1 litro de agua.
El proceso de revelado y fijación se realizó a 20°C. Las
placas se midieron posteriormente en un microdensitómetro
modelo MD-100 (RDA).
El corte en tiras con medición posterior en un radiómetro se
utilizó para las determinaciones cuantitativas. Se empleó un
radiómetro monocanal RM-3 (CUBA) previamente calibrado para
la energía de 364 Kev del " lI. Los resultados de estos
experimentos se elaboraron con el programa "PÚftÉZA"
confeccionado en lenguaje BASIC para la minicomputadora M-60.
PUREZA QUÍMICA
Los análisis de pureza quimica se realizaron con el producto
estable sintetizado en nuestros laboratorios y con - el
9
compuesto marcado. Se utilizaron los siguientes métodos para
determinar la concentración de ácido o-yodo hipúrico en las
muestrass
-valoración potenciométrica.
-determinación polarográfica. '
-determinación espectrofotométrica.
La valoración potenciométrica se realizó con solución de NaOH
0.001 M en régimen diferencial utilizando un electrodo de
vidrio indicador y uno de calomel como referencia.
Se empleó un titulador automático Radiometer modelo RTS/822
con graficador incorporado.
La determinación polarográfica se realizó por reducción del
potencial de -i.3 voltios, en solución 0.2 Ñ de NaOH o KOH en
presencia de gelatina [13].
La determinación espectrofotométrica se realizó a 23S nm
según recomienda la farmacopea soviética [83.
pH
El pH se determinó potenciométricamente.^n-, un medidor de •«i -
acidez de la firma METHROM (Suiza) empleando electrodo de
vidrio combinado. -
CONCENTRACIÓN RADIACTIVA
La concentración radiactiva se determinó en un curimetro
ALOKA (JAPÓN) con calibración interna para el l3lI'. «
10
ACTIVIDAD ESPECIFICA
Se calculó a partir de las mediciones de la concentración
radiactiva y la concentración de o-yodo hipurato de sodio
presente-
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
-Pureza radioquímica.
Después de ensayados todos los sistemas que se muestran en la
tabla II se escogió para los controles rutinarios por
cromatograf ia sobre papel el papel FN-4 como fase
estacionaria y como fase móvil el benceno:ácido acéticosagua
(2s2íl) por ser esta la combinación más efectiva. Este
resultado coincide con los reportados en [3] donde se expresa
qtif? este sistema es el mejor para la cromatcgrafia del
hipurÁri-1'1.!. Los valores que se obtienen d& los R, coinciden
con los de [33 para el mismo sistema. • • •
Se detectó que el solvente debe prepararse momentos antes dé
utilizarlo y emplearlo sólo para el desarrollo de un
cromatagrama, de lo contrario no se obtienen valores
reproducibles.
Se observó que el revelado con luz ultravioleta, y con.-'.¡el
radioexplorador no son efectivos para la cromatografía
cuantitativa pues su sensibilidad es baja. El corté ' del
cromatograma en tiras y la autorradiografia, en cambio,
11
result •'•'•.ron ser métodos sensibles. Por su rapidez y comodidad
•se empleó el corte en tiras con posterior medición en el
radiómetro.
En la tabla IV se muestra, a modo de ejemplo, el control
periódico realizado a un ampul a durante 20 dias, con el fin
de conocer si la fecha de vencimiento que indica el
fabricante es o no adecuada.
Las figuras 1,2 y 3 correspondientes a los experimentos .1,6 y
11 respectivamente, muestran gráficamente los resultados.
Como se ve, a medida que transcurre el tiempo disminuye el
por ciento de hipurán en la muestra aumentando el por ciento
de yoduro. El por ciento de ácido a-yodo benzoico se mantiene
prácticamente constante. Los datos del pasaporte de esta
árnpula se dieron para-el 28-3-86 con fecha de vencimiento 10-
4-86. Como se aprecia el por ciento de yodura para la fecha
de vencimiento es inferior al 2 "/. que sefiala la farmacopea, e
incluso casi un mes después de la fecha del pasaporte se
mantiene por debajo de este limite.
Estudios realizados por otros autores [4] demuestran que la
cantidad de yoduro que se produce en las muestras de
hipurán-15lI depende de la actividad específica de estás. Se
señala en dicho trabajo que actividades especificas del orden
de 0.1 mCi/mq o menores no influyen prácticamente en la
estabilidad de las soluciones. La actividad especifica de las v . ' »
12
T A B L A I V
Control periódico de la pureza radioquiíica de un áipula de hipuran-I-131
Expediento No.
1
2
3
4
5
6
7
8
9 •
10
v i l • ' ' ' . •
fecha
3-4-86
4-4-86
7-4-86
10-4-86
11-4-86
14-4-86
16-4-86
17-4-86
18-4-86
22-4-86
23-4-86
X yoduro-1-131
0.7
0.7
0.5
0.4
0.8
0.9
0.8
1.2
1.0
1.0
1.1
X hipurán-I-131
98.7
96.0
98.5
98.1
97.8
97.8
?7.2
97.2
97.7
97.4
97.2;
% ac. o-yodo ben2óico-I-131
0.2
0.2
0.2
0.4 •
0.3
0.4
0.3
0.4
0,3
0.2
0.3
eo
60
40
« < * Actividad
90
80
O 8
cm
— JOMdtd
14
días dopnparax
60
40
so
so
10
a dt .«ctivkSjd
0 2
17 diae do praperado
t . . .
a cm' AettvMft*
10 14
40
90
20
«da Actividad
.
•
A
A i — _ j _ _
O 8
cm — Acflvldftl
\4
20 dW do preparado
: *"_. F i g . 1 , 2 , 3 .
Variación de "la pureza radioquímica de un ámpula de Hipuráñ—131I durante el periodo de vida útil
ámpulas ensayadas no sobrepasó este Unvote. El ámpula que se
tomó para el experimento que se muestra en la tabla IV tenia
una actividad especifica de 0.06 mCi/mg, lo que explica el
bajo aontenido de yoduro.
Otro factor importante en la estabilidad del hipurán-mI es
la presencia de alcohol bencílico, el cuál tiene úh efecto
protector contra la radiólisis. Cifka J. [16] muestra que el
por ciento de yoduro inorgánico en la solución de hipurán-
titl depende de la concentración de alcohol bencílico. Cuando
la concentración de alcohol bencílico alcanaa el 1 7., la
concentración de yoduro se mantiene por debajo del 2 "/.. En
las ámpulas estudiadas la concentración de alcohol bencílico
osciló entre 0.94 y 0.97 "/..
Por tanto, la acción conjunta de ambos factores (actividad
especifica menor de 0.1 mCi/mg y concentración de* alcohol
bencílico de aproximadamente 1 7.) protegen al hipurán de los
efectos radioliticos, manteniéndose la concentración de
yoduro por debajo del 2 7. aún después de la fecha de
vencimiento del producto.
El control de pureza radioquímica" por cromatografía sobre
capa delgada puede efectuarse indistintamente con soportes de
silicagel, seolita y silufol. En los dos primeros casos él
solvente que brindó mejores resultados fue cloroformosacetato
13 •
de etilorácido acético (l:2s0.2) y en el caso de las placas
de silufol los mejores resultados se obtuvieron con el
sistema cloroformo:acetato de etilo (1:2).
La detección de las manchas se realizó por radioexplorador y
por autoradiografia.
La figura 4a es la imagen de una placa de silicagel obtenida
en el radioexplorador y la figura 4b nos muestra la
autorradiografia realizada a la misma placa. Como se observa*,
en la figura 4a sólo se detecta la mancha correspondiente al
hipurán en tanto que la autorradiografia detecta las tres
manchas, correspondientes al yoduro, el hipurán y él ácido o-
yodo benzoico, lo que demuestra la alta sensibilidad del
método autorradiografico en comparación con el
rad.i. oe;-: plorado*..
La figura 5 es la representación gráfica de una placa
revelada por autorradiografía y medida con el
microdensitómetro.
Los resultados de la electroforesis se corresponden con los
reportados en la farmacopea soviética [S3. La figura 6 es la
representación gráfica de un electoforetograma cortado en
tiras y medido posteriormente en el radiómetro. Como se
observa, se definen sólo los picos del hipurán-l3tI y del
yoduro-131. El método no permite determinar la presencia del
o-yodo benzoato, pero sirve como análsis de rutina para
14
Fig. 4 Imágenes de un cromatogr«ma sobre cap? delgada
empleando como soporte sUicage] y como solventé. „',
Cloroformo:Acetato de EtilosAcido Acético (1:2:0.2)/*^
a.- Revelada con el radioexploi^ador , .* /:
b.- Revelada con autorradiocjraf la /?*->.
300
260
200
180
Figura 5
DtftMsJ (IJHdata mlttwa]
100
«0
_u 0 20 40 SO 60 100 120
mm
— Orafcítd
Oetanrtnaoién de pureza raaoquúitfoe por denestcmatrie
Figura 8
60
40
30
ft da Actividad
80
«
• i • i .
o 2 4 e e io ti H
cm
«dtAOtMCM
DetsffrtnauontO* purea radoqufaoa por ataulfofuaats os papal
lograr una rápida información sobre la impureza principal.
Como método de rutina, a nivel de hospital,recomendamos la
cromatografía de papel utilizando papel FN-4 como fase
estacionaria y como fase móvil el sistema benceno:ácido
acético:agua (2s2:l)i Después de desarrollado el cromatograma
se corta en tiras y se mide en un radiómetro. Como segunda
opción recomendamos la electroforesis en papel.
La cromatografía sobre capa delgada con medición
densitométrica posterior la recomendamos para el nivel de
laboratorio de control por su alta sensibilidad.
-Pureza química
Los ensayos de pureza química se orientaron a la
determinación de la concentración de o-yodo hipúrato dé sodio
en las muestras.
Los ensayos de valoración potenciométrica y de polarografla
arrojaron los valores seftalados en los pasaporta de las
ámpulas. Los análisis realizados con el .producto estable
mostraron que el ácido o-yodo hipurico tiene comportamiento
de estandard primario.
Las mediciones espectrofotómétrlcas se realizaron a 235 ' nm
partiendo del método establecido en lá farmacopea soviética
,[SD. La curva de calibración se obtuvo partiendo de una
solución de o-yodo hipúrato de sodio dé ly -ng-.-'r-rV̂ realizando
15
1 (•-'•i d i ! i <<: t ones necesarias para lograr valores adecuados de 3 a
densidad óptica. La ecuación de calibración utilizada es:
D. optic, -','.0425 [caneen tr,¡ci6n3-0.008
:'?' ín'..i.ii': ..!. • 1 .i. ¿ai la l6r...i.i.la de calculo que se? * f-.-rmnienda
en le farmacopea soviética [8], ñero no se obtuvieron
r e B u 1t a a a s r e p r o d u c i b 1 e r,.
fcii todas las Ampielas analizadas la concentración de o-yorío
h.ipurato quo se determine coincidió con los datos consignadas
e:-n el pasaporte.
N n fue p r i s i b 1 e r e a 1 i •/. a i d e term i. n a c i o n es da metales pesad o s a'.!
producto radiac"' i «...• por no disponer de su.ficientp'-
ranticlades, Mo obstante?, a nivel de hospital esta prueba nc
se realiza ya que rse acostumbra a hacerla s61o a nivel de
laboratorio de¡ corilrol, y especialmente por los productorro'--.
en el ácido o—yodt ú.púrico de partida.
CONCLUSIONES
1. Se pusieron a punto los métodos fundamentales de control
tisiro quimir .-• del hipuran-mI q " establecen las diferentes
farm* opeas, •, que permite recómridar los métodos adecuados
para el futt .o registro nacional d<-.- radiofármacos.
2. Se comprobó que el hipe ran-1311 ,.e la firma IS0T0V lUP-SS)
tiene una alta calidad y que los datos . que ronsiqnan sus
pasaportes son confiables.
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18 •
Agradecimiento
Agradecemos al Departamento de Medicina Nuclear del Instituto
de Nefrologia la donación de las émpulas de Hipurán-l,lI que
se emplearon en el presente trabajo.
Impreso en el Centro de Información de la
Energía Nuclear.-
La Habana, Cuba, diciembre 1989.