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Facultad de Medicina Escuela de Enfermería
Sede Temuco
Histoembriología
ENFB2006 2012
Introducción a la Histología Técnicas Histológicas
Dra. Paola A. Araneda Reynolds [email protected] Histoembriología 08-08-2012 Temuco, Chile
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ESTE POWERPOINT ES
UNA GUÍA PARA EL
ESTUDIO.
EL ESTUDIANTE DEBE
COMPLEMENTAR CON
LECTURA DE BIBLIOGRAFÍA
RECOMENDADA
Comprender e identificar las técnicas de
procesamiento de los tejidos.
Establecer concepto de tejido señalando sus
características y propiedades.
RESULTADOS DE APRENDIZAJES
ESPERADOS
A. CONCEPTUALES
Examinar, identificar e interpretar una
preparación histológica a través del
microscopio óptico común.
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TEMARIO
Definición de Histología
Historia
Técnicas histológicas
Interpretación
Microscopía
HISTOLOGÍA
Estudio en profundidad de la estructura y
función de componentes celulares.
Rama de la anatomía que estudia los
tejidos de animales y plantas haciendo una
descripción de estructura celular, tejidos y
órganos asociada a su función.
Definición
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Padre de la Histología: Marie F. X. Bichat
SXVIII
Publicación de libro 20 tejidos diferentes
Histología acuñado S. XIX (1806)
Historia
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
1. Conocimiento de la estructura y función
normal a nivel microscópico de
organización.
2. Comprensión del proceso patológico por
respuesta celular y tisular a las lesiones
relacionadas con procesos patológicos.
3. Entender a los seres vivos en estado de
salud y enfermedad.
Importancia
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Unidades de Medida
Angström (Aº) 1Aº = 10.000.000 mm
Micrómetro (µm) 1 µm = 0.001 mm 1x 10-6 m
Nanómetro (nm) 1 nm = 0.001 µm 1 x 10-9 m
Grupo de células similares, idénticas o
diferentes y sus productos extracelulares que
realizan una función específica o un conjunto
de funciones relacionadas.
HISTÓLOGOS :
4 tipos de tejidos básicos
TEJIDO DEFINICIÓN
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T. Básicos o simples : T. Epitelial
T. Conectivo - T.Adiposo*
T. Muscular
T. Nervioso
Clasificación y características de los Tejidos
Origen de los Tejidos
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Organización de los Tejidos
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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
OBJETIVO
Preparar los tejidos para estudiarlos
asemejando su estado natural y analizarlos por
medio de microscopio óptico.
Procesamiento de Tejidos en Histología
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ubicación del tejido – identificación de muestra
rápida y con destreza
instrumentación adecuada
colocar en fijador
10 hrs
1. Obtención de la Muestra
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Detener la autólisis postmortem
Conservación
Endurecimiento de tejidos
Intensificar la tinción
Reducir la presencia de agua en tejidos
Estabilizar componentes celulares
Propiedades antisépticas
2. Fijación
OBJETIVO
1. FIJADORES COAGULANTES
Generan cambios estructurales profundos
ej : metanol, etanol
2. FIJADORES ADITIVOS
•Formalina 10%
•Fijador de Bouin
Tipos de Fijadores
Tiempo necesario para fijación ápróx. 24 hrs
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OBJETIVO
Eliminación total del agua desde el tejido.
Baño gradual en alcohol
Diferentes grados de manera ascendente
Hasta llegar al 100%.
ej: alcohol etílico, acetona
Tiempo 8 hrs
3. Deshidratación
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OBJETIVO
Eliminar el alcohol de los tejidos porque no
es compatible con parafina.
Baño gradual en xilol
ej: xilol, benzol, cloroformo, tolueno
1:1, 1:2, 2:2
Tiempo 4 hrs
4. Aclaración
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OBJETIVO
Impregnar los tejidos con parafina sustituyendo
al xilol para luego proceder a la inclusión.
Parafina purificada a 51–53ºC en moldes
56–58ºC
Tiempo 6 hrs
Autotécnico : máquina automática de 12 envases
Reloj - brazo
5. Impregnación
Autotécnico
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OBJETIVO
Colocar el tejido en moldes de parafina.
ej: Parafina purificada, paraplast
56–58ºC
• corte en forma pirámide truncada
6. Inclusión
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OBJETIVO
Obtener fragmentos delgados de tejidos
Se realiza con bloque en frío
corte en forma pirámide truncada
Micrótomo : cintas finas 5 – 7 µm
Baño de agua 45º C
7. Corte
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Criostato
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OBJETIVO
Diferenciar componentes celulares resaltando
sus cualidades.
OJO : Los colorantes son sales solubles en agua.
Pasos:
Agentes desparafinantes (xilol I y Xilol II)
Hidratación (100% - 70%)
Agua
Tiempo 40 min
8. Tinción
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OBJETIVO
Adhesión del tejido en el portaobjeto.
ej:
• bálsamo de Canadá
• albúmina de Mayer + timol
• Entellán®
• Estufa secado 20 minutos
9. Montaje
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http://www.youtube.com/watch?v=OavP
Z6hx5oA&feature=related
http://youtu.be/KyO3TT2NaKk
http://youtu.be/EMXpQzwOc_Q
TINCIONES
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1. COLORANTES BÁSICOS
Componente celular ácidos básicos
BASOFILOS
2. COLORANTES ÁCIDOS
Componente celular básicos ácidos
ACIDÓFILOS
“ Neutralización”
Tipos de Colorantes
Ejemplo
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
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a) TINCIÓN DE HEMATOXILINA-EOSINA
USO : diferenciar elementos celulares
H : color azul o púrpura a componentes
ácidos de células
ej: cromatina, secreciones
E : color rosa pálido a rojo a componentes
básicos de células
ej : citoplasma.
Tinciones de uso frecuente
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b) TINCIÓN DE WRIGHT-GIEMSA; MG; G
USO : diferenciar células sanguíneas
rosa : eritrocitos, gránulos de eosinófilos
púrpura : núcleos de leucocitos, gránulos
basófilos.
azul : citoplasma de monocitos y linfocitos.
Wittwer, F. UACH.
Wittwer, F. UACH.
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c) TINCIÓN DE ORCEÍNA
USO : diferenciar fibras elásticas
marrón rojizo : fibras elásticas
Sobotta, J. 1999. Histología.
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Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
d) TINCIÓN TRICRÓMICA DE MALLORY
USO : diferenciar elementos del tejido conectivo
azul oscuro : fibras de colágeno
rojo : fibras musculares, glias
naranja : fibras de elastina
www.iqb.es
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e) TINCIÓN DE VAN GIESON
USO : diferenciar fibras de colágeno
rojo : fibras de colágeno
Sobotta, J. 1999. Histología.
Artefactos
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
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Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
Bacha, W., L. Bacha. 2001. Atlas de histología veterinaria.
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Técnicas Avanzadas
1. HISTOQUÍMICA
2. INMUNOCITOQUÍMICA
3. AUTORRADIOGRAFÍA
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Importancia
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GRACIAS POR SU ATENCIÓN!!
CONSULTAS?
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Facultad de Medicina Escuela de Enfermería
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