Download - Siembra microbiologica
SIEMBRA MICROBIANA
RESPONSABLE: PERCY WILLIAMS AGUILAR BURGOSGRUPO: 1GDOCENTE: DR. GINO POZZI R.FECHA: 15-ABR-2014
¿QUÉ ES LA SIEMBRA MICROBIANA?
¿QUÉ REGLAS NESECITO?
EFECTÚAR ASÉPTICAMENTE
LOS MEDIOS DE CULTIVO Y EL INSTRUMENTAL A UTILIZAR ESTÉN ESTERILIZADOS
MANIPULEO ADECUADO QUE SE TRABAJE FUERA
DE TODA CORRIENTE DE AIRE. DE SER POSIBLE UTILIZANDO UN MECHERO O BIEN FLUJO LAMINAR.
MATERIAL NESESARIOPIPETAS DE 1 ML Y 10 MLERLENMEYER DE 250 MLESPÁTULAAGAR PLATE COUNT AGAR VRBLAGAR BAIRD-PARKERCALDO MC CONKEYESPÁTULAS DE DRIGALSKYCAJAS DE PETRIESTUFA DE CULTIVOBAÑO TERMOSTÁTICORECIPIENTES PARA BAÑO MARÍAANSA DE PLATINOAGUA DESTILADAMUESTRA A ANALIZARTUBOS DE ENSAYO DE 10 Y 20 MLCAMPANAS DE DURHAMALGODÓN Y GASA
TECNICAS DE SIEMBRA MEDIOS LIQUIDOS
CALDOS NUTRITIVOS MEDIOS SOLIDOS (agar, gelatina o sílica gel.)
INMERSION O VERTIDO => anaeróbicosEN DOBLE CAPA=> anaeróbicos y aerofilosSUPERFICIE O EXTENSION => aeróbicos ESTRIAS => colonias aisladas
PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO
1. SE SIGUEN LAS INSTRUCCIONES DEL MEDIO DE ACUERDO A LA CANTIDAD A PREPARAR.
2. SE TRANSFIERE A UN ERLENMEYER 3. SE AGREGA LA CANTIDAD DE AGUA DESTILADA
ESTABLECIDA. 4. SE DISUELVEN LOS GRUMOS QUE PUEDAN
FORMARSE5. SE LLEVA LA SUSPENSIÓN A BAÑO MARÍA HASTA QUE
SE TORNE TRANSPARENTE, 6. SE CUBRE EL ERLENMEYER CON UN TAPÓN DE
ALGODÓN (TORUNDA) ENVUELTO EN GASA. 7. SE CUBRE LA TORUNDA CON MATERIAL
IMPERMEABLE 8. SE ESTERILIZA EN AUTOCLAVE A 121ºC DURANTE 15
MINUTOS.9. SI SE UTILIZA DE INMEDIATO, DEJAR ENFRIAR A
TEMPERATURA ALREDEDOR DE 45ºC.10. EN CASO DE QUE EL MEDIO SOLIDIFIQUE, FUNDIRLO
NUEVAMENTE A BAÑO MARÍA ANTES DE SU USO.
EN CALDO1. SE SIGUEN LAS INSTRUCCIONES DEL
ROTULO2. SE DISTRIBUYE EL CALDO COLOCANDO 10
ML EN TUBOS DE ENSAYO DE 20 Y 10 ML EN TUBOS DE ENSAYO DE 50.
3. SE COLOCA PREVIAMENTE EN LOS TUBOS UNA CAMPANA DE DURHAM INVERTIDA.
4. SE TAPAN LOS TUBOS Y SE ESTERILIZAN EN AUTOCLAVE DURANTE 15 MINUTOS A 121ºC.
ESTRIAS
TECNICA 2: POR CUADRANTES
POR EXTENSION
INMERSION O VERTIDO
Dilución Tipo de microorganismo
10-1 a 10-3 Hongos
10-4 a 10-6 Levaduras
10-7 a 10-10 Bacterias
PARA EL AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS SE PUEDE APLICAR LA TÉCNICA DE AISLAMIENTO POR ESTRÍA O POR EXTENSIÓN EN SUPERFICIE (SE TRASFIERE DE 0.1 A 0.5 ML.)
SIEMBRA DE MUESTRA1. TOMAR UNA COLONIA DE LA PLACA UNA VEZ INCUBADA 2. SEMBRAR UNA SEGUNDA EN LA QUE TODAS LAS COLONIAS
QUE CREZCAN DEBEN SER IDÉNTICAS.3. A PARTIR DE LA SEGUNDA PLACA SE PUEDE RESUSPENDER
UNA DE LAS COLONIAS EN MEDIO LÍQUIDO, CONSIGUIÉNDO UN CULTIVO PURO.
4. PARA LA CONSERVACIÓN EXISTEN DIVERSOS MÉTODOS, EL MÁS SIMPLE ES LA RESIEMBRA EN TUBOS INCLINADOS SE MANTIENEN REFRIGERADOS DURANTE 3-6 MESES.
5. LA INOCULACIÓN PRIMARIA PUEDE HACERSE CON UN ASA SOBRE LA SUPERFICIE DEL MEDIO EN LA PLACA DE PETRI O SOBRE CALDOS DE CULTIVOS
FACTORES QUE AFECTAN TEMPERATURA => 25ºC – 37ºC OXIGENACION PH AGUA CONSERVANTES
MUCHAS GRACIAS…..