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PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA
Dr. Gustavo A. Penacino
Fundacion INGENwww.ingen.org.ar
Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos
www.adn.ac
Sociedad Latinoamericana de Genética Forensewww.slagf.org
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Qué parte del ADN estudia la Genética Forense?
• Sólo NO CODIFICANTE (junk dna) porque:
• 1) Hay mas regiones variables.• 2) Cuestiones éticas.
• Existen alrededor de 3.000.000 de sitios variables en nuestro genoma.
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Ejemplo de sitio variable «NN»
Alelo 1
Alelo 2
Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)
Unidad de Repetición (ej.: ACTG)
Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)
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ESCENA DEL CRIMEN
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MUESTRAS
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OTRAS MUESTRAS
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PCR: Reaccion en cadena de la polimerasa
SE copia muchas veces un fragmento de ADN
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ADN
Se desnaturalizan las cadenas
Reasociación de Primers
Síntesis de la nueva cadena
Se repite 30veces elCiclado
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Secuenciador de adn
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Ejemplo de sitio variable «NN»
Alelo 1
Alelo 2
Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)
Unidad de Repetición (ej.: ACTG)
Sitio de adhesión (constante en todos los humanos)
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Kits con 21 o mas marcadores
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Marcadores de cromosoma masculino
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Kits con 23 o mas marcadores
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Analizando un caso criminal.
Material Indubitado de la Víctima.
Material SubunguealTomado de la Víctima
Tejido Dactilar de la Víctima.
Sangre del Sospechoso1.
Sangre del Sospechoso 2
Coincidencia total
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CALCULOS ESTADISTICOS
* indice y probabilidad de paternidad.
* indice y probabilidad de coincidencia
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Marcadores de cromosoma X
Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers
Dye Markers
6-FAM Amelogenin DXS10103 DXS8378 DXS7132 DXS10134
BTG DXS10074 DXS10101 DXS10135
BTY DXS7423 DXS10146 DXS10079
BTR HPRTB DXS10148
Investigator Argus X-12 Kit dyes and corresponding markers
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Marcadores de cromosoma X
•
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Rastreo de Línea de Herencia Materna:
El ADN Mitocondrial (ADNmt)
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Mitocondria
•*Central de energía celular.
•*100 a 1000 mitocondrias por célula.
•*Información Genética Propia.
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Genoma Mitocondrial
•*Circular, covalentemente cerrado.
•*16.569 pares de bases.
•*D-Loop o Región de Control no codificante (variable).
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Secuenciación del ADNmt
Herencia Materna Alto Número de Copias Regiones Variables ubicadas en el D-loop
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COMO LLEGAMOS HASTA AQUÍ?
Los primeros intentos: metodo de southern blot(1985-1991)
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GRAN AVANCE: PCR (1991)
LOS METODOS MANUALES
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Los secuenciadores menos o mas «automaticos» (1996- Actualidad)
ABI 377 ABI 310
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1992Atentado a la Embajada de
Israel
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![Page 37: PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A. Penacino Fundacion INGEN Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062404/5528bde8497959977d8fda78/html5/thumbnails/37.jpg)
Toma de muestras del atentado
•
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Métodos en uso en 1992
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Métodos innovadores (basados en PCR)
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1994Atentado a la
mutual israelita AMIA
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Atentado a la AMIAVista general
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Atentado a la AMIA.Muestras
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Atentado a la AMIA.Resultados
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Atentado a la AMIA.Resultados
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Atentado a la AMIA.Resultados
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www.ingen.org.ar
1) La realización de estudios de paternidad gratuitos o a bajo costo para personas de escasos recursos, y los análisis de evidencias forenses a bajo costo (50% del arancel normal) a través de convenios con los Poderes Judiciales provinciales.
- Particulares: laboratorios propios en Monte Grande.
- Poderes Judiciales: laboratorio del Colegio de Farm. y Bioquímicos, gestionado por la Fundación.
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www.ingen.org.ar
2) La capacitación de profesionales que se dedican a los análisis de ADN mediante cursos y jornadas, con especial referencia a la solución de errores y dificultades que se presentan en el laboratorio.
Organización y/o patrocinio de Congresos –como COLTIC y TIAFT-, Jornadas y cursos de perfeccionamiento para profesionales.
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www.ingen.org.ar
3) Puesta en marcha de laboratorios oficiales mediante la modalidad “llave en mano”, los cuales prestan servicios al Poder Judicial local.
- Estrategia: alta calidad de resultados al menor costo posible.- En San Luis (finalizado), Misiones (en ejecución) y Santiago del Estero (en ejecución).- Una decena de provincias en etapa de consulta.
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www.ingen.org.ar
4) Estudio de metodologías de análisis de ADN orientadas al reemplazo de los costosos reactivos importados; y desarrollo de nuevas tecnologías.
-Asesoramiento sobre la optimización de recursos y uso de reactivos accesibles en el mercado local.-Investigación de nuevas tecnologías: fenotipado forense (proyecto).
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2015?2017?2020?
![Page 51: PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A. Penacino Fundacion INGEN Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062404/5528bde8497959977d8fda78/html5/thumbnails/51.jpg)
Nuevos desarrollos: otros conceptos-INDELS-
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Otra tecnología: Microarreglos de ADN
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Microarreglos de ADN
![Page 54: PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A. Penacino Fundacion INGEN Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062404/5528bde8497959977d8fda78/html5/thumbnails/54.jpg)
Microarreglos de ADN
![Page 55: PRUEBAS GENETICAS EN LA JUSTICIA Dr. Gustavo A. Penacino Fundacion INGEN Unidad de Análisis de ADN Colegio Oficial de Farm. y Bioquímicos](https://reader035.vdocumento.com/reader035/viewer/2022062404/5528bde8497959977d8fda78/html5/thumbnails/55.jpg)
Fully Integrated Portable DNA Analyzer
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Fully Integrated Portable DNA Analyzer
• (1) Recolección de la muestra • (2) Extracción del ADN • (3) PCR • (4) Electroforesis• (5) Análisis de STRs. • TODO EL PROCESO EN 25 MINUTOS!.
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HACIA EL IDENTI-KIT GENETICO
Analysed tooth of General Władysław Sikorski (World War II).
Władysław Sikorski indeed had blue eyes and blond hair
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• OJOS AZULES , PIEL y CABELLOS CLAROS - mutación de los Genes OCA1 y OCA2- (oculocutaneous albinism)
↓ melanina : Hum Genetics
• CABELLOS ROJOS y PIEL CLARA - mutación del Gen MC1R ↑feomelanina : Science
Polimorfismo Gen MC1R (Melanocortin 1- receptor) - 30 variantes alélicas de la eumelanina a través de las
enzimas TYRP1, TYRP2, SILV y la proteína P
• COLOR DE OJOS , PIEL y PELOS - variantes alélicas de los genes SLC24A4 y IRF4
• COLOR DE PELO - variante cercana al gen KITLG
• COLOR DE OJOS y PECAS - dos variantes del gen TYR
• PECAS - una variante asociada a 6p25.3
• PELO OSCURO, PIEL COLOR OLIVA y COLOR DE OJOS - polimorfismos en el gen MATP (Membrane associated transporter protein)
FENOTIPADO FORENSE: últimos hallazgos publicados
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FINMás información sobre análisis de ADN:
• Sociedad Latinoamericana de Genética Forense: www.slagf.org
• Laboratorio: www.adn.ac
• Fundación INGEN: www.ingen.org.ar