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PRUEBAS CONFIRMATORIASPOR :
LIC. RICARDO SALDAÑA
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PRUEBAS DE ELISA: Primera Generación: Los
antígenos utilizados provienen del lisado viral de un cultivo
Segunda Generación: Los antígenos corresponden a proteínas recombinantes o Péptidos sintéticos.
Tercera Generación: Péptidos recombinantes sintéticos de VIH-1, 2, 0.
Cuarta Generación: Se adicionó el p24.
Por: Lic. Ricardo Saldaña 2
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CONTINUACIÓN…
Pruebas de confirmación: Tienen alta especificidad Western Blot Inmunofluorescencia Indirecta. Radioinmunoprecipitación
PUEDEN SER UTILIZADAS PARA DISMINUIR LA POSIBILIDAD DE OBTENER RESULTADOS FALSO POSITIVO.
3Por: Lic. Ricardo Saldaña
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WESTERN BLOT• Prueba de confirmación• Principio: Ensayo
inmunoenzimático• Detecta anticuerpos
contra proteínas específicas del VIH 1
• Interpretación: visual• Muestras: suero y
plasma• Volumen: 20 µl• Tiempo: 3.5 hrs • Sensibilidad: 100%• Especificidad: 100%
Por: Lic. Ricardo Saldaña 4
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Po
r: Lic. R
icard
o S
ald
añ
a
5
Gen Proteína Denominación CDC OMS env Precursora de la
envoltura gp160 gp160
Glucoproteína externa gp120 gp120 Glucoproteíina
transmembrana gp41
Al menos 2 bandas
gag Precursora del core p55 Precursora del core p40 Proteína principal p24 p24 Proteína de la matriz p17 pol Transcriptasa inversa p66 Transcriptasa inversa p51 Endonucleasa p32
Nomenclatura de las bandas en Western Blot
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DIAGNOSTICO DE CASOS DE VIH POSITIVOS
2 pruebas de tamizaje: diferente principio inmunológico con resultados iguales.Prueba Rápida + ELISAELISA + Prueba RápidaELISA + ELISAPrueba Rápida + Prueba Rápida
Recomendación en: Protocolo Nacional para el Tratamiento Antirretroviral del VIH-SIDA.
Recomendación: OMS6
Po
r: Lic. R
icard
o S
ald
añ
a
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ELISA 1: R ELISA 1: NRELISA 2: R ELISA 2: NR
ELISA 1: R ELISA 1: R ELISA 1: NR ELISA 1: NRELISA 2: R ELISA 2: NR ELISA 2: R ELISA 2: NR
REPETICIÓN DE LOS TESTS EN DUPLICATA
DESCARTAR LA BOLSA
LLAMAR AL DONANTE
LIBERAR LABOLSA
ELISA 1: R ELISA 2: NRELISA 2: NR ELISA 1: R
TAMIZAJE SEROLÓGICO POR ANTI-HIVELISA 1 + ELISA 2
TAMIZAJE SEROLÓGICO PARA HIV UTILIZANDO DOS TESTS
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WB
POSITIVO IND NEGATIVO
Anti-HIV
REACTIVO
REACTIVO
NEGATIVO
NEGATIVOIND
IND
Repetir en duplicata
COLECTARNUEVAMUESTRA1ª
2ª PCR
ALGORITMO PARA DIAGNÓSTICO DE INFECCIÓN POR HIV
1ª MUESTRA2ª MUESTRA
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HIV – VENTANA INMUNOLÓGICA
11 16 22 Dias
HIV RNA plasma
Ag p24
Anti-HIV
0
INFECCIÓNTEÓRICA
VENTANA INMUNOLÓGICA
Anti-HIV: 22 dias
HIV p24: 16 dias
HIV RNA: 11 dias
11 16 22 Dias
HIV RNA plasma
Ag p24
Anti-HIV
0
INFECCIÓNTEÓRICA
VENTANA INMUNOLÓGICA
Anti-HIV: 22 dias
HIV p24: 16 dias
HIV RNA: 11 dias
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MUCHAS GRACIAS