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PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotor
Unidad de Cirugía
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Translational Research on PR-therapies Vitoria Group
BTI Biotechnology Institute Unidad de Cirugía Artroscópica
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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Platelet Rich Plasma
Having a Platelet rich plasma fully characterized is only the
first part of the puzzle.
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Platelet Rich Plasma
It is just as important as to understand how to use it,
where, when and how long...
Having a Platelet rich plasma fully characterized is only the
first part of the puzzle.
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Platelet Rich Plasma
Infiltration site
Dosage
Duration of the treatment
Volume
Injection numbers...
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¿Podemos mejorar los mecanismos de reparación utilizando estrategias biológicas
como los factores de crecimiento?
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History
The clinical relevance of PRPs
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HISTORIA
STANLEY COHEN RITA LEVI-MONTALCINI
Descubre el NGF en 1948
Descubre el EGF en 1952
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Plaquetas + trombina
Fibrinógeno + trombina
COMO TRATAMIENTO (1984)
Úlceras
COMO COADYUVANTE QUIRÚRGICO (1972)
Anastomosis nerviosas
PLASMA AÚTOLOGO
- MATRAS 1972 fibirna adhesiva - FERRARI 1987 cirugia cardiaca - ANDREWS 1996 reparaciones de menisco - ISHIMURA 1997 reparaciones de menisco - AKIZUKI 1997 artroplastias de rodilla - WHITMAN 1997 maxilo-facial - MARX 1998 maxilo-facial
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ANITUA 1999 PRGF
PRP totalmente autologo Volumenes pequeños de sangre
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Anitua E. PPAD 2001;13:487-493
Anitua E. Implantologie Orale 2001;3:38-43 Anitua E. Maxillaris 2001:39:38-43
Anitua E. Spanish Perio Soc 1997
Anitua E. Int J Oral Maxillofac Implants 1999;14:529-535 Anitua E. Amer Acad Osseoint 1998
The clinical relevance of PRPs
PRGF: First reported 100% autologous PRP prepared from small blood volumes
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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Regulated by multiple growth factors
Angiogenesis
Chemotaxis
Proliferation & Differentiation
Synthesis of ECM...
Mechanisms:
Understanding Tissue Regeneration
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Growth factors & proteins
VEGF, TGF-B, PDGF, IGF, FGF, EGF, TF, Angiopoietins...
Matrix or scaffold
Fibronectin, integrins, vitronectin...
Controlling cell fate
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Fibrin matrix: an excellent scaffold
fibronectin, vitronectin, fibrin...
Platelets: endogenous source of GFs VEGF, TGF-B, PDGF, IGF, FGF, EGF...
Potential of Endogenous Regenerative Medicine
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The fibrin scaffold provides for adhesion sites for cells
![Page 27: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/27.jpg)
Discher DE et al. Science 2009;324:1673-1677.
Motility
Contraction
actin-miosin stress fibers
Controlling cell fate
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PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
PROLIFERACIÓN CELULAR
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1000 cells/cm2
6 days
PPP, (non-activated platelet Poor plasma)
PPCR, Releasate of platelet poor plasma
PRGF, Releasate of platelet-rich plasma
Anitua E, Andía I, Sánchez M, et al.. J Orthopaedic Res 2005; 23: 281-286
LABORATORY EVIDENCE
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PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
ANGPT1, VEGF-A, VEGF-B, HGF, AGGF1, CRIM1
ANGIOGÉNESIS PARACRINE MECHANISM
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PRGF
IGF-I type I Insulin-like GF TGF-b1 Transforming GF PDGF Platelet Derived GF HGF Hepatocyte GF VEGF Vascular Endothelial GF EGF Epithelial GF CTGF Connective tissue GF bFGF basic Fibroblastic GF
30.000x
30.000x
Síntesis de matriz extracelular
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Matriz extracelular Tenoblasto sintetizando colágeno
núcleo
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PRGF-Endoret Control
Cultivo de sinoviocitos
MIGRACIÓN CELULAR
16:00 h 16:00 h
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PRGF-Endoret Control
Cultivo de sinoviocitos
MIGRACIÓN CELULAR
16:00 h 16:00 h
![Page 35: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/35.jpg)
EFECTO ANTIINFLAMATORIO - ANTAGONIZES THE EFFECT OF: IL-1, TNF, NITRIC OXIDE.
- INHIBITS ADHESION OF NEUTROPHILS TO ENDOTHELIAL CELLS.
- INHIBITS DEGRADATION ENZYMES MMP, ADAMTS.
- INDUCES TIMP. - ESTIMULATES RESTORATIVE ANGIOGENESIS (VGH + HGF).
Bendinelli P et al. J Cell Physiol 2010 Jun 21. [Epub ahead of print]
Molecular basis of anti-inflammatory action of platelet rich plasma on human chondrocytes: Mechanisms of NF-kB inhibition via HGF.
![Page 36: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/36.jpg)
POTENCIAL BACTERIOSTÁTICO
% Inhibition
t4 t8
F1 F3 F3Leu
100
50
0
Leukocytes DO NOT increase the bacteriostatic potential
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Experimentación animal
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Infiltración con suero fisiológico No se observan cambios macroscópicos
![Page 39: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/39.jpg)
Infiltración con PRGF Aumento vascularización
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1801 ± 454*#cells/mm2
1546 ± 421*#(cells/mm2)
463 ± 181 cells/mm2
vaisseaux
vaisseaux
366 ± 116 cells/mm2
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Estrategias biológicas de tratamiento
El PRGF estimulará la repoblación celular y la neovascularización del injerto, mejorando la remodelación del tejido y sus propiedades
mecánicas
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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![Page 44: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/44.jpg)
![Page 45: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/45.jpg)
Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ??
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Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ?? Los PRPs no son un producto unico
![Page 47: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/47.jpg)
Utilización clínica de las proteinas autólogas Platelet-Rich plasma, PRPs ?, Concentrado de plaquetas?, gel de plaquetas?, PCCs, AGF, PG, PRF, PRGF.... Hablamos de lo mismo ?? Los PRPs no son un producto unico
![Page 48: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/48.jpg)
PRGF
Dosis (volumen) Tiempos Método aplicación
Diferencias en la composición de los PRPs y la administración
![Page 49: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/49.jpg)
- Moderada concentración de plaquetas
- Ausencia de leucocitos
- Uso de cloruro cálcico en lugar de trombina exógena
Estandarización y definición del PRGF
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¿Por qué sin leucocitos? Degradan la matriz !!!
Fuente principal de metaloproteasas (MMPs)
Red blood cells Platelets Macrophages Neutrophils Lymphocytes
MMP-8 y -9 son conocidas como colagenasas derivadas de neutrófilos. Degradan colágeno tipo I. Liberan radicales libres
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¿Por qué usar factores de crecimiento?
¿Qué sistema emplear?
¿Cómo usarlos?
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PRGF en fase líquida activada La coagulación se produce in vivo
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Forma coagulada
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Membrana de fibrina
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Pruebas de bioseguridad en modelo animal
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No fibrosis. No sinovitis
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Patología ligamentosa
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Injerto tendinoso
Aplicación PRGF en LCA
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Túnel femoral
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Túnel femoral
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Taco óseo tibial
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Zona donante
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6-24 meses post-op
PRGF n= 22 CONTROL, n= 15
Convencional PRGF assisted
Hipótesis: el PRGF añade una ventaja biológica para una mejor y más predecible ligamentización del injerto
ST/RI autólogo brocado transtibial de túnel femoral localización de túnel: 10 o 12 horas taco óseo en tunel tibial
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6-24 meses tras reconstrucción
Evaluación de injerto en artroscopia de revisión
Evaluación artroscópica Histología
Grosor y tensión Cobertura sinovial
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20 meses post-implantación
PRGF Grupo control
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Otros hallazgos...
PRGF No PRGF
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Patología musculotendinosa
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Aplicación en Cartílago
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1 2
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Aplicación en hueso
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RCTs using PRPs A Brief Discussion
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RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
![Page 91: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/91.jpg)
There is still a big confussion with the PRP terminology
![Page 92: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/92.jpg)
There is still a big confussion with the PRP terminology
![Page 93: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/93.jpg)
RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
![Page 94: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/94.jpg)
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRGF-Endoret
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RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRP is not a magic bullet
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PRP is not a magic bullet
![Page 97: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/97.jpg)
PRP is not a magic bullet
![Page 98: PRGF: su utilización en la patología del aparato locomotorweb0.aeartroscopia.com/sites/default/files/documentos/Webcast_AEA/...Anastomosis nerviosas ... - AKIZUKI 1997 artroplastias](https://reader036.vdocumento.com/reader036/viewer/2022062317/5acfc1a47f8b9ac1478d3223/html5/thumbnails/98.jpg)
PRP is not a magic bullet
¿Podemos tratar una enfermedad degenerativa crónica con sólo una
inyección de PRP?
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RCTs using PRPs A Brief Discussion
There is still a big confussion with the PRP terminology
The existing PRPs are different (quality & quantity)
PRP is not a magic bullet: lost in translation
Lost in translation: dosing, timing, adm. protocols...
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Lost in translation: dosing, timing, adm. protocols...
before after
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Muchas gracias